專(zhuān)利名稱(chēng)：雙三元二維柱高效色譜法測(cè)定牙膏中三七皂苷R₁和人參皂苷含量的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及牙膏中三七皂苷R1、人參皂苷Rbp Re、Rg1含量的測(cè)定方法，屬于高效液相色譜法測(cè)定物質(zhì)含量技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
隨著食品安全事件引起社會(huì)廣泛關(guān)注，部分學(xué)者和社會(huì)輿論將視角延伸到“入口形”日化用品領(lǐng)域中，而牙膏作為口腔清潔用品是這一類(lèi)產(chǎn)品的典型代表，關(guān)系到人身安全。功能單一的牙膏已不能滿足人們的需求，根據(jù)傳統(tǒng)中草藥所具有性溫、刺激小、安全無(wú)毒等特點(diǎn)，添加多種藥物制成中藥牙膏，以預(yù)防多種口腔疾病越來(lái)越多的受到人們的歡迎。目前，中藥牙膏已占口腔清潔市場(chǎng)40 60%的比例。我國(guó)在中草藥功效方面的研究有著輝煌悠久的歷史，中草藥功效型牙膏從面市至今已有幾十年的歷史，已經(jīng)成為國(guó)內(nèi)牙膏市場(chǎng)中的主類(lèi)產(chǎn)品，一些國(guó)際日化用品企業(yè)為了加入中國(guó)市場(chǎng)也紛紛對(duì)中草藥功效型牙膏進(jìn)行開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)。三七又名田七，為五加科植物三七Panaxnotoginseng (Burk.) F.H.Chen的干燥根和根莖。具有散血止瘀、消腫定痛等功效，并有著“金不換”的美譽(yù)。三七的主要有效成分為三七總皂苷類(lèi)化合物，現(xiàn)已從三七中分離的皂苷成分已有75余種，其中人參皂苷!^1^(35%)、人參皂苷Rg1 (40%)是三七總皂苷中含量最高的兩種成分，而三七皂苷R1 (15%)則是三七總皂苷的特征化合物。三七中人參皂苷Rg1和人參皂苷Re同屬于20 (S)-原人參三醇類(lèi)，結(jié)構(gòu)性質(zhì)相近，極性相近，在液相色譜中的保留時(shí)間相近。目前，口腔清潔用品市場(chǎng)中草藥功能性牙膏的品類(lèi)繁多，有些牙膏不僅僅添加一種或兩種的中藥有效成分，有些牙膏品種直接添加功能性的成熟的中藥配方精華，如云南白藥、雙黃連等。牙膏基質(zhì)為復(fù)雜的混合物，通常由摩擦劑、保濕劑、表面活性劑、增稠劑、甜味劑、色素、香精和活性添加物等組成。某些添加成分的化合物碳鏈比較長(zhǎng)，在前處理中難以去除，同時(shí)，也對(duì)色譜柱的柱效有影響。用傳統(tǒng)的高效液相色譜方法去分離、檢測(cè)，其中的雜質(zhì)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品氯化兩面針堿的測(cè)定有干擾。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種雙三元二維柱高效液相色譜法測(cè)定牙膏中三七皂苷R1和人參皂苷含量的方法，方法簡(jiǎn)單，縮短了分析時(shí)間，實(shí)現(xiàn)了快速、方便、準(zhǔn)確的檢測(cè)牙膏中三七皂苷和人參皂苷等活性成分。為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是:一種雙三元二維柱高效液相色譜法測(cè)定牙膏中三七皂苷R1和人參皂苷含量的方法，包括以下步驟:(I)繪制三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re和人參皂苷Rb1的標(biāo)準(zhǔn)曲線 (2)稱(chēng)取待測(cè)牙膏放置于具塞離心管中，加入乙醇振蕩、搖勻，用乙醇定容，密塞，稱(chēng)定
重量；(3)將步驟(I)稱(chēng)定重量后的具塞離心管超聲處理，處理完成后冷卻至室溫，再稱(chēng)定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，離心處理，取上清液用0.22 μ m的有機(jī)相濾膜過(guò)濾得待測(cè)溶液；
(4)利用雙三元高效液相色譜法二維色譜柱分離，通過(guò)多波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器測(cè)定待測(cè)溶液中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re和人參皂苷Rb1，根據(jù)步驟
(I)的標(biāo)準(zhǔn)曲線得出牙膏待測(cè)溶液中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re和人參皂苷Rbi的含量。對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行洗脫；第一維色譜柱為富集柱C18柱(2.1mmX 100mm, 5 μ m),第二維色譜柱為分析柱C18柱(4.6mmX 250mm, 5 μ m)。采用C18 二維色譜柱的優(yōu)選測(cè)定的條件為:采用C18 二維色譜柱，以乙腈和水為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm，進(jìn)樣量為10 μ L,色譜柱柱溫為30°C，對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行洗脫。將上述步驟(4)中的流動(dòng)相進(jìn)行洗脫的優(yōu)選程序如表1:
權(quán)利要求
1.一種雙三元二維柱高效液相色譜法測(cè)定牙膏中三七皂苷R1和人參皂苷含量的方法，其特征在于:包括以下步驟:(I)繪制三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re和人參皂苷Rb1的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖； (2)稱(chēng)取待測(cè)牙膏放置于具塞離心管中，加入乙醇振蕩、搖勻，用乙醇定容，密塞，稱(chēng)定重量； (3)將步驟(I)稱(chēng)定重量后的具塞離心管超聲處理，處理完成后冷卻至室溫，再稱(chēng)定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，離心處理，取上清液用0.22 μ m的有機(jī)相濾膜過(guò)濾得待測(cè)溶液； (4)利用雙三元高效液相色譜法，進(jìn)行二維色譜柱分離，通過(guò)多波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器測(cè)定待測(cè)溶液中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re和人參皂苷Rb1，根據(jù)步驟(I)的標(biāo)準(zhǔn)曲線得出牙膏待測(cè)溶液中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re和人參皂苷Rb1的含量； 采用C18 二維色譜柱測(cè)定； 第一維色譜柱為富集柱C18柱(2.1mmX IOOmm, 5 μ m),第二維色譜柱為分析柱C18柱(4.6mmX 250mm, 5 μ m)。
2.如權(quán)利要求1所述的雙三元二維柱高效液相色譜法測(cè)定牙膏中三七皂苷R1和人參皂苷含量的方法，其特征在于:采用C18 二維色譜柱測(cè)定的條件為，以乙腈和水為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm，進(jìn)樣量為10 μ L，色譜柱柱溫為30°C，對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行洗脫。
3.如權(quán)利要求2所述的雙三元二維柱高效液相色譜法測(cè)定牙膏中三七皂苷R1和人參皂苷含量的方法，其特征在于:步驟(4)中的流動(dòng)相進(jìn)行洗脫的程序如下:
4.如權(quán)利要求1所述的雙三元二維柱高效液相色譜法測(cè)定牙膏中三七皂苷R1和人參皂苷含量的方法，其特征在于:步驟(2)和步驟(3)所用的乙醇為體積分?jǐn)?shù)為75%的乙醇。
5.如權(quán)利要求1所述的雙三元二維柱高效液相色譜法測(cè)定牙膏中三七皂苷R1和人參皂苷含量的方法，其特征在于:步驟(2)中每克待測(cè)牙膏定容到10mL。
6.如權(quán)利要求1所述的雙三元二維柱高效液相色譜法測(cè)定牙膏中三七皂苷R1和人參皂苷含量的方法，其特征在于:步驟(3)中30°C超聲處理45分鐘。
7.如權(quán)利要求1所述的雙三元二維柱高效液相色譜法測(cè)定牙膏中三七皂苷R1和人參皂苷含量的方法 ，其特征在于:步驟(3)中IOOOOrpm離心2分鐘。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種雙三元二維柱高效液相色譜法測(cè)定牙膏中三七皂苷R1和人參皂苷含量的方法，屬于高效液相色譜法測(cè)定物質(zhì)含量技術(shù)領(lǐng)域。包括以下步驟(1)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；(2)將待測(cè)牙膏用乙醇溶解定容，稱(chēng)定重量；(3)制備待測(cè)溶液；(4)利用雙三元高效液相色譜法二維色譜柱分離，通過(guò)多波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器測(cè)定待測(cè)溶液中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re和人參皂苷Rb1，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得出三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re和人參皂苷Rb1的含量。本發(fā)明方法簡(jiǎn)單，縮短了分析時(shí)間，實(shí)現(xiàn)了快速、方便、準(zhǔn)確的檢測(cè)牙膏中三七皂苷和人參皂苷等活性成分。
文檔編號(hào)G01N30/02GK103235055SQ20131013759
公開(kāi)日2013年8月7日 申請(qǐng)日期2013年4月19日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月19日
發(fā)明者張巖, 叢斌, 張敬軒, 滕文華, 李揮, 劉敬澤, 呂品, 龐坤, 李強(qiáng), 夏靜 申請(qǐng)人:河北省食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院