專利名稱：灌流顯微鏡的制作方法
技術領域：
本實用新型涉及低溫生物醫(yī)學領域，特別涉及ー種灌流顯微鏡。
背景技術：
在低溫生物醫(yī)學領域，生命材料低溫保存過程中的微生物材料損傷是其低溫損傷的重要來源。微生物材料可以是細胞、細菌、病毒等一切微生物材料。在下述實施例中重點以細胞為例加以說明。典型的低溫保存過程主要包括(I)低溫保存前，低溫保護劑的添加；⑵冷凍過程中，降溫速率的程序化控制；(3)復溫后、臨床使用前，低溫保護劑的去除。要減少低溫損傷，進行低溫保存過程的這三個重要步驟的優(yōu)化設計，需要測定細胞的重 要生物物理學參數例如細胞等滲體積、細胞非滲透性體積、細胞膜對低溫保護劑和水的滲透性參數及其活化能等。通常采用灌流顯微鏡來觀測細胞在不同溫度下，當低溫保護劑溶液組分或濃度發(fā)生變化時的體積響應，借助非線性擬合技術擬合出細胞膜對于低溫保護劑和水的滲透性參數及其活化能，以及細胞的等滲體積和非滲透性體積等關鍵參數。在下述實施例中，如無特殊說明所涉及的溶液可為ニ元、三元或者多元溶液。通常地，灌流顯微鏡主要包括載物臺上的微灌流腔，用于控制微灌流腔內溶液處于低溫狀態(tài)的低溫循環(huán)浴。一個為微灌流腔注入溶液的注入注射器和ー個從微灌流腔內抽取溶液的抽取注射器。通過注入注射器與抽取注射器的配合使用，能夠保持微灌流腔內溶液的動態(tài)平衡，從而保證微灌流腔內溶液壓カ的平衡。同吋，灌流顯微鏡還包括ー套用于觀察微灌流腔內細胞變化的裝置，通常地，該裝置主要包括聚光鏡、透光孔和物鏡，光線在聚光鏡的匯聚作用下得到加強，經透光孔射入微灌流腔，微灌流腔內細胞的變化情況經物鏡放大后被觀察到，即可進行數據記錄。然而，這種結構的灌流顯微鏡存在的問題是由于只有ー個注入注射器和一個抽取注射器，便只能實現溶液從ー種濃度到另外一種濃度的切換，也即只能測得細胞在這兩種不同濃度溶液下的體積響應。想要測量細胞在另外ー種溶液濃度下的體積響應，就需要更換一次注入注射器內溶液的濃度，為連續(xù)試驗帶來了很大的不便。

實用新型內容本實用新型提供了一種灌流顯微鏡，技術方案如下包括觀察裝置、溫度控制系統和設置有入口和出口的微灌流腔；以及至少兩個注入速度分別控制的注入注射器，至少ー個抽取注射器，注入注射器并聯后，與微灌流腔的入ロ連接，抽取注射器與微灌流腔的出ロ連接。優(yōu)選地，注入注射器的注入速度和抽取注射器的抽取速度分別由不同的注射泵進行控制。[0011]進ー步地，還包括連接在注入注射器和微灌流腔的入口之間的微混合腔。優(yōu)選地，溫度控制系統包括冷卻模塊、加熱模塊和溫度傳感器；通過溫度傳感器對微灌流腔的溫度進行檢測反饋，控制冷卻模塊和/或加熱模塊工作，進行溫度控制。優(yōu)選地，溫度傳感器置于微灌流腔的部分腔壁中，加熱模塊置于溫度傳感器的相對側的微灌流腔之上，冷卻模塊置于加熱模塊之上，微灌流腔、加熱模塊及冷卻模塊由保溫材料包裹。優(yōu)選地，放置溫度傳感器的腔壁部分的材料為硅玻璃或聚ニ甲基硅氧烷或聚酰亞胺或聚甲基丙烯酸甲脂或聚對ニ甲苯或聚四氟こ烯，其他腔壁部分的材料為聚ニ甲基硅氧烷或硅玻璃或聚酰亞胺或聚甲基丙烯酸甲脂或聚對ニ甲苯或聚四氟こ烯。進ー步地，還包括在微灌流腔的內壁上間隔設置的第一檔板和第二檔板；第一擋板和第二檔板將微灌流腔分隔為相互連通的第一緩沖腔、微生物材料腔和第二緩沖腔，微生物材料腔位于第一緩沖腔和第二緩沖腔之間，第一擋板和第二擋板阻擋微生物材料在微 生物材料腔與第一緩沖腔和第二緩沖腔之間流動；入口位于第一緩沖腔上，出ロ位于第二緩沖腔上；微生物材料腔上設置有加載入口和卸載出ロ。優(yōu)選地，觀察裝置包括攝像頭，微型計算機，以及位于微灌流腔ー側的聚光鏡，透光孔，位于微灌流腔另ー側與聚光鏡相對設置的物鏡。本實用新型提供的技術方案帶來的有益效果是在本實用新型的實施例中，在微灌流腔的入口端并聯接入了兩個注入注射器，其注入速度分別控制，這樣，通過分別控制這兩個注入注射器的注入速度，可以精確控制微灌流腔內溶液濃度的變化，實現溶液濃度由一種濃度到多種濃度的變化，從而可以測量細胞在周圍溶液濃度變化過程中和變化后的體積響應。進ー步地，通過連接在注入注射器和微灌流腔入ロ之間的微混合腔，可以預先對溶液進行混合，使得進入微灌流腔的溶液濃度均勻一致，從而保證灌流過程中細胞周圍溶液濃度均勻一致。進ー步地，采用具有冷卻模塊和加熱模塊的溫度控制系統，能夠精確控制溶液溫度的程序化降低或升高及與之同步的濃度變化，可以模擬細胞在冷凍或者復溫過程中周圍溶液的熱力學狀態(tài)的變化，從而將其用于研究細胞在非平衡冷凍或者復溫融解過程中的體積響應，測定低溫下細胞膜的生物物理學參數。進ー步地，通過微灌流腔內壁上間隔設置的第一擋板和第二檔板將微灌流腔分隔為相互連通的第一緩沖腔、微生物材料腔和第二緩沖腔。一方面，可以使溶液在第一緩沖腔內再次混合，使得進入微生物材料腔的溶液濃度更加均勻；另一方面，分隔出專門的微生物材料腔，可以保證微生物材料始終處于觀察區(qū)域；第三方面，通過在微生物材料腔上設置加載入口和卸載出口，可以方便地進行微生物材料的更換，有利于進行連續(xù)多組試驗。

為了更清楚地說明本實用新型實施例中的技術方案，下面將對實施例描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本實用新型的ー些實施例，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖所示實施例得到其他的實施例及其附圖。[0023]圖I是本實用新型實施例提供的灌流顯微鏡的結構示意圖；圖2是本實用新型實施例提供的灌流顯微鏡的冷卻模塊的結構示意圖；圖3是本實用新型實施例提供的灌流顯微鏡的冷卻模塊的結構示意圖；圖4是本實用新型實施例提供的灌流顯微鏡的微灌流腔的結構示意圖。
具體實施方式
為使本實用新型的目的、技術方案和優(yōu)點更加清楚，下面將結合附圖對本實用新型的具體實施方式
作進ー步地詳細描述。顯然，所描述的實施例僅是本實用新型的一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本實用新型中的實施例，本領域普通技術人員在沒有付出創(chuàng)造性勞動的前提下所得到的所有實施例都屬于本實用新型的保護范圍。為了能夠連續(xù)測量細胞在多種濃度溶液下的體積響應，本實用新型提出了ー種灌流顯微鏡，包括觀察裝置34、溫度控制系統35和設置有入口 24和出ロ 25的微灌流腔9 ；·以及至少兩個速度分別控制的注入注射器26和27 ;至少ー個抽取注射器28 ;注入注射器26和27并聯后，與微灌流腔9的入ロ 24連接；抽取注射器28與微灌流腔9的出口 25連接。其中，觀察裝置34主要用于觀察微灌流腔9內的細胞體積響應情況；溫度控制系統35根據需要提供合適的試驗溫度，以保持細胞的存活狀態(tài)，同時可進行溫度調節(jié)，實現微灌流腔9內溶液溫度按照特定的速率進行動態(tài)變化；微灌流腔9用于細胞灌流；入口 24既可用于溶液注入，又可用于細胞加載；出口 25既可用于溶液抽取，又可用于細胞卸載；通過注入注射器26、27和抽取注射器28的配合使用，可以保證微灌流腔9內溶液流量的動態(tài)平衡。通過在注入注射器26和27中添加不同濃度的溶液，井分別設定注入速度，可以在微灌流腔9內得到一定濃度的溶液，改變注入速度可以得到不同濃度的溶液，通過分別控制注入注射器26和27的注入速度可以得到多種不同濃度的溶液。通過觀察裝置34可以觀察到細胞在多種不同濃度溶液下的體積響應。更優(yōu)選地，在注入注射器26、27和微灌流腔9的入ロ 24之間連接ー個微混合腔3。通過微混合腔3對溶液的預先混合作用，使得進入微灌流腔9內的溶液濃度均勻一致，從而保證灌流過程中細胞周圍溶液濃度均勻一致。為了使溶液能夠更加充分地混合，也可以在注入注射器26、27和微灌流腔9之間串聯多個微混合腔3。更優(yōu)選地，對微灌流腔9內溶液溫度進行控制的溫度控制系統35包括冷卻模塊6、加熱模塊7和溫度傳感器31。溫度傳感器31用于檢測微灌流腔9內溶液的溫度，并將檢測到的溫度信息進行反饋，以控制冷卻模塊6和/或加熱模塊7工作，使溶液溫度根據需要升高或降低，實現溶液溫度按照特定的速率進行動態(tài)變化，以滿足試驗中不同的溫度需要，從而可以準確測定冷凍過程細胞的滲透性參數。其中，溫度控制系統35不限于冷卻模塊6、加熱模塊7和溫度傳感器31，也可以由其他能夠實現溫度控制、調節(jié)功能的裝置替代，具體可以根據微灌流腔9及觀察裝置34的結構來配合設置溫度控制系統35。更優(yōu)選地，在微灌流腔9的內壁上間隔設置的第一檔板20和第二檔板22將微灌流腔9分隔為相互連通的第一緩沖腔19、微生物材料腔21和第二緩沖腔23，微生物材料腔21位于第一緩沖腔19和第二緩沖腔23之間，第一擋板20和第二擋板22阻擋微生物材料在微生物材料腔21與第一緩沖腔19和第二緩沖腔23之間流動；入口 24位于第一緩沖腔19上，出口 25位于第二緩沖腔23上；微生物材料腔21上設置有加載入口 29和卸載出ロ30。微灌流腔9的這種結構設計，一方面，可以使溶液在第一緩沖腔19內再次混合，使得進入微生物材料腔21的溶液濃度更加均勻；另一方面，分隔出專門的微生物材料腔21，可以保證微生物材料始終處于觀察區(qū)域；第三方面，通過在微生物材料腔21上設置加載入ロ 29和卸載出口 30，與溶液入口 24和溶液出口 25加以區(qū)分，可以方便地進行微生物材料的更換，有利于進行連續(xù)多組試驗。為了更好地理解本實用新型的技術方案以及有益效果，下面通過實施例對本實用新型進行更加詳細的介紹，實施例只是本實用新型的優(yōu)選實施例，本實用新型并不限于此。圖I是本實用新型實施例提供的灌流顯微鏡的結構示意圖。如圖I所示，本實用·新型實施例公開了ー種灌流顯微鏡，包括觀察裝置34、溫度控制系統35和設置有入ロ 24和出口 25的微灌流腔9 ；以及兩個速度分別控制的注入注射器26和27 ; —個抽取注射器28 ；注入注射器26和27并聯后，與微灌流腔9的入ロ 24連接；抽取注射器28與微灌流腔9的出口 25連接；在注入注射器26、27和微灌流腔9的入口 24之間連接微混合腔3。在本實施例中，兩個注入注射器和一個抽取注射器分別由不同的注射泵進行注入速度或抽取速度的控制。具體而言，注射泵I控制注入注射器26的注入速度，注射泵2控制注入注射器27的注入速度，注射泵8控制抽取注射器28的抽取速度，灌流過程中，通?？傋⑷胨俣群涂偝槿∷俣仁冀K保持一致。其中，注射泵對注射器的速度控制可以通過軟件編程實現。通過軟件編程控制，一方面，可以精確控制注入注射器26和27各自的注入速度，實現溶液濃度的不同配比；另一方面，精確控制總注入速度和總抽取速度始終保持一致，以保持微灌流腔9內的流量處于動態(tài)平衡狀態(tài)，從而確保微灌流腔9內的壓カ平衡。其中，在入口 24處設置入口導管，在出口 25處設置出口導管。采用毛細管實現注入注射器26與27之間，以及注入注射器26、27與微混合腔3之間的連接，連接微混合腔3的毛細管通過入口導管與微灌流腔9的入口 24相連，連接抽取注射器28的毛細管通過出ロ導管與微灌流腔9的出ロ 25相連。由于用于連接的毛細管內徑很小，優(yōu)選為O. 2 1mm，其內部流體流動為層流，為了增強溶液的混合效果，必須進行強化混合。 在本實施例中，冷卻模塊6為冷循環(huán)模塊，加熱模塊7為電熱薄膜，溫度傳感器31為熱電偶；微灌流腔9為由上壁、下壁和側壁圍成的空間，熱電偶置于微灌流腔9的下壁中，電熱薄膜置于微灌流腔9之上，冷循環(huán)模塊置于電熱薄膜之上。在試驗過程中為了保證微灌流腔9與外界隔離，防止與外界進行熱交換，實現保溫作用，將微灌流腔9、電熱薄膜及冷循環(huán)模塊用保溫材料32進行封裝。為了保證光線能夠透過保溫材料32、冷循環(huán)模塊和電熱薄膜到達微灌流腔9，需要在其上設置透光孔5，以便光線射入。在本實施例中，微灌流腔9是由兩種材料構成的封閉殼體，具體地，上壁和側壁由PDMS (聚ニ甲基娃氧燒，polydimethylsiloxane) 18制成,下壁由娃玻璃33制成。作為等效變換方式，也可以僅將下壁的一部分用硅玻璃33制成，將熱電偶設置于硅玻璃33中，而將微灌流腔9的其余部分腔壁都用PDMS 18制成。[0043]由于硅玻璃33與溶液直接接觸，且硅玻璃33具有良好的導熱性能，將熱電偶設置于其中，可以間接檢測溶液的溫度。PDMS 18是ー種透光性良好的材料，光線可以通過PDMS18照射進微灌流腔9 ;其中，PDMS 18用于構成微灌流腔9的微流體通道的尺寸優(yōu)選為長10 150毫米,寬I 10毫米,深5 100微米。在其他的實施例中，微灌流腔9的下壁或下壁上用于放置熱電偶的腔壁部分的材料為具有足夠硬度、良好的生物相容性和導熱性能的透光材料，例如可以是聚ニ甲基硅氧烷、聚酰亞胺、聚甲基丙烯酸甲脂、聚對ニ甲苯或聚四氟こ烯等；微灌流腔9的上壁和側壁部分的材料為具有足夠硬度、良好的生物相容性和任意透光的適合于加工微流控芯片的材料，例如可以是硅玻璃、聚酰亞胺、聚甲基丙烯酸甲脂、聚對ニ甲苯或聚四氟こ烯等。圖2和圖3是本實用新型實施例提供的灌流顯微鏡的冷卻模塊6的結構示意圖。如圖2和圖3所示，冷卻模塊6包括兩個冷循環(huán)單元。其中，第一冷循環(huán)單元上設置ー個冷卻液入口 14和ー個冷卻液出口 15，第二冷循環(huán)單元上設置ー個冷卻液入口 16和ー個冷卻液出ロ 17。冷卻液入口和出ロ分別與外部的低溫循環(huán)浴槽連接，以實現對微灌流腔9內溶 液的冷卻降溫作用。圖4是本實用新型實施例提供的灌流顯微鏡的微灌流腔的結構示意圖。如圖4所示，還包括在微灌流腔9的內壁上間隔設置的第一檔板20和第二檔板22 ;第ー擋板20和第二檔板22將微灌流腔9分隔為相互連通的第一緩沖腔19、微生物材料腔21和第二緩沖腔23，微生物材料腔21位于第一緩沖腔19和第二緩沖腔23之間，第一擋板20和第二擋板22阻擋微生物材料在微生物材料腔21與第一緩沖腔19和第二緩沖腔23之間流動；入ロ 24位于第一緩沖腔19上，出口 25位于第二緩沖腔23上；微生物材料腔21上設置有加載入口 29和卸載出口 30。在本實施例中，微灌流腔9內壁上的第一檔板20和第二擋板22平行、間隔設置，第一檔板20和第二檔板22的上端與微灌流腔9的上壁連接，第一檔板20和第二檔板22的下端與微灌流腔9的下壁之間留有空隙，形成可以供溶液流過而細胞不能通過的流通部。流通部的尺寸可以根據細胞的體積大小進行設置，在本實施例中，流通部的高度尺寸優(yōu)選為1-10微米。當然，在其他的實施例中，第一擋板20和第二擋板22也可以采用傾斜、間隔設置。在本實施例中，觀察裝置34包括攝像頭13，微型計算機11，以及位于微灌流腔9ー側的聚光鏡4，透光孔5，位于微灌流腔9另ー側與聚光鏡4相對設置的物鏡12。微灌流腔9放置于載物臺10上，在正對微灌流腔9上方的位置設置聚光鏡4，光線經過聚光鏡4的匯聚、加強作用，通過透光孔5到達微灌流腔9，經物鏡12的放大作用，再由攝像頭13采集到微生物材料的體積變化信息，傳遞給微型計算機11進行數據記錄。攝像頭13優(yōu)選采用CCD (Charge-coupled Device,電荷稱合元件)攝像頭,也可以采用其他任何圖像采集速度大于10FPS (Frames Per Second,姆秒傳輸巾貞數)的攝像頭。為了更好地理解本實用新型，下面以采用本實用新型的灌流顯微鏡模擬添加、去除低溫保護劑過程，井根據細胞體積響應，測定不同溫度下細胞膜的滲透性參數為例加以詳細說明。其中，低溫保護劑通常是含低溫保護劑(CPA)的生理鹽水或含低溫保護劑(CPA)的磷酸鹽緩沖液。模擬添加低溫保護劑過程，根據細胞的體積響應，測定不同溫度下細胞膜的滲透性參數的具體實施過程如下打開加載入口 29，將細胞注入微生物材料腔21，然后封閉加載入口 29。在注入注射器26中裝入含低溫保護劑的溶液，在注入注射器27中裝入不含低溫保護劑的溶液。在某ー時刻，同步啟動注入注射器27和抽取注射器28，且控制兩者的流速相等，將整個管路和微灌流腔9內充滿不含低溫保護劑的溶液。通過冷卻模塊6和加熱模塊7的協同工作，并通過溫度傳感器31的溫度檢測反饋，精確控制微灌流腔9內的溶液溫度。待灌流達到穩(wěn)定狀態(tài)后，停止注入注射器27，并同時啟動注入注射器26，繼續(xù)以等流速注入，則微灌流腔9內完成了從不含低溫保護劑到含低溫保護劑溶液的切換，從而實現對細胞模擬添加低溫保護劑的過程。通過CCD攝像頭13采集細胞的體積變化，并通過微型計算機11記錄相關數據，即可得到在某一溫度下，添加特定濃度、特定類型低溫保護劑過程中細胞的體積響應，進而通過非線性擬合技術，獲得細胞的等滲體積、細胞的非滲透性體積和細胞膜對低溫保護劑和水的滲透性參數等。通過冷卻模塊6和加熱模塊7改變溫度，重復上述測試過程，得到至少三個不同溫 度下，細胞膜對低溫保護劑和水的滲透性參數，然后通過數學模型，得到其相關的活化能。模擬去除低溫保護劑過程，根據細胞的體積響應，測定不同溫度下細胞膜的滲透性參數的具體實施過程，與模擬添加低溫保護劑過程的區(qū)別是對調注入注射器26和27的開啟順序即可。進ー步地，為了更好地理解本實用新型，下面以采用本實用新型的灌流顯微鏡模擬非平衡冷凍過程和復溫融解過程，根據細胞的體積響應，測定細胞在非平衡冷凍過程和復溫融解過程中的滲透性參數及其活化能為例進行詳細說明。其中，低溫保護劑溶液均為水-食鹽-低溫保護劑三元溶液，溶液的組分由非平衡冷凍過程多元溶液的相圖加以確定。模擬非平衡冷凍過程，根據細胞的體積響應，進而測定細胞在非平衡冷凍過程的滲透性參數及其活化能的實施過程如下在注入注射器26內裝入高濃度的低溫保護劑溶液，而在注入注射器27內裝入低濃度的低溫保護劑溶液。打開加載入口 29，將細胞注入微生物材料腔21，然后封閉加載入ロ 29。在某ー時刻，同步啟動注入注射器27和抽取注射器28，且控制兩者的流速相等，將整個管路和微灌流腔9內充滿低濃度的低溫保護劑溶液。通過冷卻模塊6和加熱模塊7協同工作，并通過溫度傳感器31的溫度檢測反饋，可以精確控制微灌流腔9內溶液的溫度。待灌流達到穩(wěn)定狀態(tài)后，通過注射泵I和2內的軟件編程控制注入注射器26和27的注入速度，實現溶液濃度的變化，從而實現微灌流腔9內溶液濃度嚴格按照冷凍過程的變化而變化，同時同步控制微灌流腔9內溶液的溫度按照實際冷凍過程的降溫速率而降低。通過攝像頭13采集細胞的體積變化，并通過微型計算機11記錄相關數據，即可得到冷凍過程細胞體積隨溫度的變化，進而使用相關數學模型，通過非線性擬合，可獲得在該降溫速率下，冷凍過程細胞膜的滲透性參數及其活化能。模擬復溫融解過程，根據細胞的體積響應，進而測定細胞在復溫融解過程的滲透性參數及其活化能的實施過程，與模擬非平衡冷凍過程的區(qū)別是對調注入注射器26和27的開啟順序即可。以上所述僅為本實用新型的較佳實施例，并不用以限制本實用新型，凡在本實用新型的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本實用新型的保護范 圍之內。
權利要求1.一種灌流顯微鏡，其特征在干 包括觀察裝置、溫度控制系統和設置有入口和出口的微灌流腔；以及 至少兩個注入速度分別控制的注入注射器，至少ー個抽取注射器，所述注入注射器并聯后，與微灌流腔的入口連接，所述抽取注射器與微灌流腔的出口連接。
2.根據權利要求I所述的灌流顯微鏡，其特征在于 所述注入注射器的注入速度和抽取注射器的抽取速度分別由不同的注射泵進行控制。
3.根據權利要求I所述的灌流顯微鏡，其特征在于 還包括連接在所述注入注射器和微灌流腔入口之間的微混合腔。
4.根據權利要求I所述的灌流顯微鏡，其特征在于 所述溫度控制系統包括冷卻模塊、加熱模塊和溫度傳感器； 通過所述溫度傳感器對微灌流腔的溫度進行檢測反饋，控制冷卻模塊和/或加熱模塊工作，進行溫度控制。
5.根據權利要求4所述的灌流顯微鏡，其特征在干 所述溫度傳感器置于所述微灌流腔的部分腔壁中，所述加熱模塊置于所述溫度傳感器的相對側的微灌流腔之上，所述冷卻模塊置于所述加熱模塊之上，所述微灌流腔、加熱模塊及冷卻模塊由保溫材料包裹。
6.根據權利要求5所述的灌流顯微鏡，其特征在干 放置所述溫度傳感器的腔壁部分的材料為硅玻璃或聚ニ甲基硅氧烷或聚酰亞胺或聚甲基丙烯酸甲脂或聚對ニ甲苯或聚四氟こ烯，其他腔壁部分的材料為聚ニ甲基硅氧烷或硅玻璃或聚酰亞胺或聚甲基丙烯酸甲脂或聚對ニ甲苯或聚四氟こ烯。
7.根據權利要求I所述的灌流顯微鏡，其特征在于 還包括在微灌流腔的內壁上間隔設置的第一檔板和第二檔板； 所述第一擋板和第二檔板將所述微灌流腔分隔為相互連通的第一緩沖腔、微生物材料腔和第二緩沖腔，微生物材料腔位于第一緩沖腔和第二緩沖腔之間，所述第一擋板和第二擋板阻擋微生物材料在微生物材料腔與所述第一緩沖腔和第二緩沖腔之間流動； 所述入口位于所述第一緩沖腔上，所述出ロ位于所述第二緩沖腔上； 所述微生物材料腔上設置有加載入口和卸載出ロ。
8.根據權利要求1-7任一項所述的灌流顯微鏡，其特征在于 所述觀察裝置包括攝像頭，微型計算機，以及 位于微灌流腔ー側的聚光鏡，透光孔，位于微灌流腔另ー側與聚光鏡相對設置的物鏡。
專利摘要本實用新型公開了一種灌流顯微鏡，包括觀察裝置、溫度控制系統和設置有入口和出口的微灌流腔；以及至少兩個注入速度分別控制的注入注射器，至少一個抽取注射器，所述注入注射器并聯后，與微灌流腔的入口連接，所述抽取注射器與微灌流腔的出口連接?？梢跃_控制微灌流腔內溶液濃度的變化，實現溶液濃度由一種濃度到多種濃度的變化，從而可以測量細胞在周圍溶液濃度變化過程中和變化后的體積響應，還可以同步控制微灌流腔內溶液濃度和溫度的變化，實現對溶液非平衡冷凍過程或復溫融解過程的模擬。
文檔編號G01N15/08GK202631531SQ20122027940
公開日2012年12月26日 申請日期2012年6月14日 優(yōu)先權日2012年6月14日
發(fā)明者趙剛 申請人:中國科學技術大學