專利名稱：一種促黃體生成激素快速檢測試劑條的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型屬于免疫檢測技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種試劑條，尤其涉及一種促黃體生成激素快速檢測試劑條。
背景技術(shù)：
目前，國內(nèi)外關(guān)于LH的測定方法很多，主要有基礎(chǔ)體溫(BBT)、宮頸黏液評分、血LH測定、B超監(jiān)測、子宮內(nèi)膜活檢等。 BBT監(jiān)測排卵的原理是根據(jù)孕酮的致熱作用，排卵后孕酮分泌增加引起B(yǎng)BT升高。其最大的優(yōu)點(diǎn)是簡便、無創(chuàng)傷，也不費(fèi)時。缺點(diǎn)是雙相型BBT與排卵的相關(guān)性較差，在BBT最低點(diǎn)前后Id內(nèi)排卵的只占54. 5 %，除此還受到睡眠、服藥、飲食、疾病等因素的干擾。而且BBT是通過回顧性的分析來判斷排卵，所以預(yù)測排卵、指導(dǎo)受孕意義不大，可見此種方法僅能作為臨床的參考指標(biāo)。在排卵周期中，宮頸黏液受到雌孕激素的作用，其物理和化學(xué)特性呈周期性變化，其為卵泡產(chǎn)生E2的窗口，排卵期增大，宮頸黏液評分增高。有報道宮頸黏液評分與排卵的準(zhǔn)確率僅為53. 3%，并受藥物、炎癥等因素影響，且需每次來醫(yī)院由專業(yè)醫(yī)生操作。近年有學(xué)者用唾液羊齒狀結(jié)晶取代繁瑣的宮頸黏液評分，兩者檢查的符合率為100%，但因?qū)m頸黏液與排卵的準(zhǔn)確率較低，此種方法也僅供臨床參考。血LH測定是預(yù)測排卵的金標(biāo)準(zhǔn)。在有排卵周期中，卵泡早期血LH水平較低，約2 30IU/L，卵泡晚期達(dá)20 40IU/L，排卵前達(dá)高峰40 200IU/L，稱LH峰值。排卵發(fā)生在血LH峰值后24 48h，最大可信度為90 %以上，但由于需要多次采血、昂貴且不能及時得到結(jié)果指導(dǎo)應(yīng)用，使其在臨床應(yīng)用上受到限制。子宮內(nèi)膜活檢是判斷排卵的另一種方法，應(yīng)在月經(jīng)來潮的6h取活檢。其原理是排卵后孕酮分泌增加，使增生期子宮內(nèi)膜轉(zhuǎn)化為分泌期子宮內(nèi)膜。然而，子宮內(nèi)膜活檢畢竟是一種創(chuàng)傷性手術(shù)操作，有一定痛苦，并且費(fèi)用高，臨床作用僅略優(yōu)于BBT、血清孕酮測定、血LH測定，因此進(jìn)行子宮內(nèi)膜活檢應(yīng)該有一定的指征。對于長期慢性無排卵婦女，子宮內(nèi)膜活檢有助于確診子宮內(nèi)膜增生過長和子宮內(nèi)膜腫瘤，并可指導(dǎo)治療。陰道超聲動態(tài)監(jiān)測是最新和最實(shí)用的監(jiān)測排卵的方法，也是唯一從體外直接觀察卵泡的形態(tài)變化來診斷排卵的方法。但是需由專門技術(shù)人員操作，檢查費(fèi)用較貴。而且因個體之間成熟卵泡的大小波動較大(17. 35 28. 59 mm)，且每個人都有自己的卵泡發(fā)育類型，出現(xiàn)成熟卵泡后排卵發(fā)生于0. 64 4. 28d內(nèi)，故單以卵泡直徑來預(yù)測排卵確切時間不夠準(zhǔn)確，聯(lián)合其他方法能更準(zhǔn)確地確定排卵。促黃體生成激素快速檢測試劑具有攜帶方便，不需要設(shè)備，操作人員無需技術(shù)培訓(xùn)，可現(xiàn)場操作，3 5分鐘即可給出結(jié)果等優(yōu)點(diǎn)，非常適合對大批量樣本進(jìn)行現(xiàn)場篩查的工作。促黃體生成激素(human luteinizing hormone,hLH)由垂體前葉分泌的促性腺激素之一，是一種糖蛋白激素，具有很強(qiáng)的免疫活性。在女性體內(nèi)LH協(xié)同F(xiàn)SH共同作用維持卵巢的月經(jīng)周期，導(dǎo)致排卵與黃體形成。臨床通過檢測LH峰值，確定LH起始峰和達(dá)到峰頂?shù)臅r間，可達(dá)到預(yù)測排卵的目的，有效地把握受孕和避孕的最佳時機(jī)，對不孕癥、計劃生育、優(yōu)生優(yōu)育和安全期避孕的婦女起到良好的指導(dǎo)作用，還可以協(xié)助判斷月經(jīng)病病因。促性腺激素FSH、LH都是糖蛋白激素，都由a、^兩個亞基組成。二者的a亞基相同，都是由89個氨基酸組成，但3亞基有別，能特異地和靶細(xì)胞不同受體結(jié)合，通過誘發(fā)第二信使形成，促使卵泡發(fā)育、排卵及黃體形成。在卵泡發(fā)育早期，下丘腦弓狀核脈沖式地分泌促性腺激素釋放激素(GnRH)，該激素經(jīng)門脈毛細(xì)血管系統(tǒng)流到垂體前葉，以調(diào)節(jié)垂體促性腺激素的分泌。此時促卵泡激素(FSH)水平升高，促黃體生成激素(LH)處于低水平，F(xiàn)SH/LH> I。此時LH在一個恒定的分泌基礎(chǔ)上呈脈沖方式分泌，脈沖周期廣2小時，卵泡期LH沖動在5 10IU/L，黃體期較卵泡期低。FSH刺激卵巢內(nèi)卵泡生長發(fā)育，當(dāng)卵泡直徑達(dá)到8-10mm時有雌激素分泌，并且隨著卵泡的發(fā)育雌二醇(E2)值緩慢升高，呈負(fù)反饋至丘腦下部及垂體前葉，抑制FSH進(jìn)一步分泌，至晚卵泡期優(yōu)勢卵泡進(jìn)一步生長成熟，E2分泌加快達(dá)其峰值后，則呈正反饋至下丘腦使 其脈沖式分泌及釋放GnRH，致LH分泌呈峰值增加，同時FSH也相應(yīng)地升高，但FSH/LH< I。在LH分泌開始升高，較基值增加一倍時叫起始峰；LH分泌從起始峰升高到峰頂約16小時，尿中LH峰值可達(dá)70IU/L左右，最高值可維持24小時，峰值過后約10小時排卵。在LH峰值時血漿中孕酮(P)上升而E2則急驟下降。排卵后黃體形成，E2也輕度升高形成周期中第二峰值，而血漿中FSH及LH則開始下降。此后黃體逐漸萎縮，黃體壽命大約14天，雌、孕激素分泌下降導(dǎo)致月經(jīng)來潮，而使卵泡又開始生長并進(jìn)入下一個卵泡周期。臨床上可通過檢測尿中LH峰值判斷其排卵的有無及排卵的時間。
發(fā)明內(nèi)容本實(shí)用新型的目的是提供一種促黃體生成激素快速檢測試劑條，操作簡單、反應(yīng)快速、敏感性高、特異性強(qiáng)和適合現(xiàn)場檢測，而且還具有生產(chǎn)周期短、產(chǎn)量高、成本低等優(yōu)點(diǎn)。為了解決上述技術(shù)問題，本實(shí)用新型通過下述技術(shù)方案得以解決一種促黃體生成激素快速檢測試劑條，包括支持物、樣品墊、膠體金紙片和吸水墊，支持物上從加樣端開始依次粘貼有樣品墊、膠體金紙片和吸水墊，還包括硝酸纖維素膜，硝酸纖維素膜設(shè)于膠體金紙片和吸水墊之間，硝酸纖維素膜的兩端分別與膠體金紙片和吸水墊相互交疊連接，硝酸纖維素膜上有檢測區(qū)和對照區(qū)，檢測區(qū)包被抗a -LH單克隆抗體和抗P -LH單克隆抗體，對照區(qū)包被羊抗鼠多克隆抗體。本實(shí)用新型的一種促黃體生成激素快速檢測試劑條，操作簡單、反應(yīng)快速、敏感性高、特異性強(qiáng)和適合現(xiàn)場檢測，而且還具有生產(chǎn)周期短、產(chǎn)量高、成本低等優(yōu)點(diǎn)。在免疫檢測技術(shù)領(lǐng)域具有良好的應(yīng)用前景。

圖I為本實(shí)用新型所述一種促黃體生成激素快速檢測試劑條的結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實(shí)施方式
[0017]
以下結(jié)合附圖I與實(shí)施例對本實(shí)用新型作進(jìn)一步詳細(xì)描述。
實(shí)施例一種促黃體生成激素快速檢測試劑條，如圖I所示，包括支持物5、樣品墊I、膠體金紙片2和吸水墊4，支持物上從加樣端開始依次粘貼有樣品墊I、膠體金紙片2和吸水墊4，還包括硝酸纖維素膜3，硝酸纖維素膜3設(shè)于膠體金紙片2和吸水墊4之間，硝酸纖維素膜3的兩端分別與膠體金紙片2和吸水墊4相互交疊連接，硝酸纖維素膜3上有檢測區(qū)和對照區(qū)，檢測區(qū)包被抗a-LH單克隆抗體和抗P-LH單克隆抗體，對照區(qū)包被羊抗鼠多克隆抗體。利用膠體金免疫層析的原理，在硝酸纖維素膜3上的檢測區(qū)包被抗P—LH單克隆抗體，對照區(qū)包被羊抗鼠多克隆抗體。當(dāng)待測物中有被測的抗原物質(zhì)(即促黃體生成激素)時，待測物中的抗原物質(zhì)就會與標(biāo)記膠體金的抗a -LH單克隆抗體抗體形成Ag-Ab-Au復(fù)合物，該復(fù)合物中抗體的活性位點(diǎn)將被樣品溶液中的藥物占據(jù)時，同時又和T線上的藥物抗體結(jié)合；所以當(dāng)樣品中的促黃體生成激素含量達(dá)40mIU/mL以上時，檢測試劑條上的T線 顯色，可以判定為陽性。反之，當(dāng)樣品中促黃體生成激素含量在40mIU/mL以下或無殘留時，檢測試劑條上的T線不顯色，判定為陰性。操作簡單、反應(yīng)快速、敏感性高、特異性強(qiáng)和適合現(xiàn)場檢測，而且還具有生產(chǎn)周期短、產(chǎn)量高、成本低等優(yōu)點(diǎn)。在免疫檢測技術(shù)領(lǐng)域具有良好的應(yīng)用前景?？傊陨纤鰞H為本實(shí)用新型的較佳實(shí)施例，凡依本實(shí)用新型申請專利范圍所作的均等變化與修飾，皆應(yīng)屬本實(shí)用新型專利的涵蓋范圍。
權(quán)利要求1.ー種促黃體生成激素快速檢測試劑條，包括支持物(5)、樣品墊(I)、膠體金紙片(2)和吸水墊(4)，支持物上從加樣端開始依次粘貼有樣品墊(I)、膠體金紙片(2)和吸水墊(4)，其特征在于還包括硝酸纖維素膜(3)，硝酸纖維素膜(3)設(shè)于膠體金紙片(2)和吸水墊(4)之間，硝酸纖維素膜(3)的兩端分別與膠體金紙片(2)和吸水墊(4)相互交疊連接，硝酸纖維素膜(3)上有檢測區(qū)和對照區(qū)，檢測區(qū)包被抗α-LH單克隆抗體和抗β-LH單克隆抗體，對照區(qū)包被羊抗鼠多克隆抗體。
專利摘要本實(shí)用新型屬于免疫檢測技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種試劑條，尤其涉及一種促黃體生成激素快速檢測試劑條，包括支持物、樣品墊、膠體金紙片、硝酸纖維素膜、吸水墊，支持物上從加樣端開始依次粘貼有樣品墊、膠體金紙片、硝酸纖維素膜、吸水墊，硝酸纖維素膜的兩端分別與膠體金紙片和吸水墊相互交疊連接，硝酸纖維素膜上有檢測區(qū)和對照區(qū)，檢測區(qū)包被抗α-LH單克隆抗體和抗β-LH單克隆抗體，對照區(qū)包被羊抗鼠多克隆抗體，操作簡單、反應(yīng)快速、敏感性高、特異性強(qiáng)和適合現(xiàn)場檢測，而且還具有生產(chǎn)周期短、產(chǎn)量高、成本低等優(yōu)點(diǎn)。在免疫檢測技術(shù)領(lǐng)域具有良好的應(yīng)用前景。
文檔編號G01N33/577GK202471719SQ20122009273
公開日2012年10月3日 申請日期2012年3月13日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月13日
發(fā)明者周文良, 應(yīng)旭霞, 陳國琴 申請人:杭州隆基生物技術(shù)有限公司