專利名稱：：Lhrh拮抗劑類物質(zhì)的注射用緩釋制劑及其制備的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及LHRH拮抗劑類物質(zhì)的注射用緩釋制劑及其制備方法，尤其涉及LXT101的注射用緩釋制劑及其制備方法。
背景技術：
：黃體生成素釋放激素(LHRH)是下丘腦分泌的一種十肽神經(jīng)類激素，其主要作用是促進垂體合成并釋放黃體生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)，激發(fā)青春期發(fā)育和調(diào)節(jié)生育及性激素相關過程。對LHRH的分子結構進行化學修飾和改造，取代或刪去某些氨基酸殘基，可能產(chǎn)生新的活性類似物。按功能劃分，這些類似物可以分為LHRH激動劑和LHRH拮抗劑等兩大類。LHRH類似物不僅可以用于調(diào)節(jié)內(nèi)分泌，也可以用于治療激素依賴的惡性腫瘤，如前列腺癌、乳腺癌等。LXT101屬于LHRH拮抗劑，其具有如式(I)的化學結構LXT101具有顯效快、作用強、用藥早期不出現(xiàn)血清雄激素上沖等優(yōu)5點，是新一代前列腺癌治療藥物。由于其半衰期較短，故其普通制劑在血液中的生物利用度很低且毒副作用增加；另外常規(guī)溶液劑需要每天給藥，療程較長，給患者帶來痛苦與用藥不便。為了減少給藥頻率、提高患者的順應性，研制LXT緩釋制劑尤為重要。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供注射用緩釋制劑，所述緩釋制劑包含活性成分LXT101或其藥物可接受的鹽或前藥，以及油性溶劑。本發(fā)明的另一目的是提供上述LXT101的注射用緩釋制劑的制備方法，所述方法包括將LXT101藥物粉末加入至油性溶劑中，攪拌使所得混合物分散均勻，分裝。具體實施方式通常，將疏水性藥物以油性溶劑為溶媒制成混懸液或溶液會具有緩釋效果。然而當具有較高水溶性的藥物如生物藥物混懸或部分溶解在油相中時，由于其較高的水/油分配系數(shù)，藥物到達油/水界面后易進入水相中。因此對于具有較高水溶性或強極性的生物藥物來說，采用單純油性混懸劑很難達到理想的緩釋效果。LHRH類似物從分子結構上均為多肽類化合物，且一般帶有多個親水性基團，親水性較高，因此采用油性溶劑制成混懸劑或溶液很難實現(xiàn)緩釋效果。然而本發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)，將LXT101以油性溶劑為溶媒制備的非水溶液劑及混懸劑具有很好的緩釋作用。因此，本發(fā)明的一方面涉及LXT101的注射用緩釋制劑，所述緩釋制劑包含治療有效量的活性成分LXT101或其藥物可接受的鹽或前藥，以及油性溶劑。可通過粉碎或研磨的方法或者由其水溶液冷凍干燥獲得所述活性成分LXT101的粉末。將該藥物粉末分散或溶解在油性溶劑中。所述藥物粉末在混懸劑中的顆粒大小不超過15(im。在本發(fā)明的某些實施方案中，所述活性成分可以是其藥物可接受的鹽或其它書f生物。所述活性成分的藥物可接受的鹽為本領域所屬技術人員所熟知的那些酸加成鹽。示例性的酸包括無機酸例如鹽酸、碌u酸、磷酸、氫溴酸、硼酸、磷酸等；有機酸例如乙酸、馬來酸、酒石酸、水楊酸、枸櫞酸、苯曱酸、雙羥萘酸、磺酸等。所述活性成分的藥物可接受的其它衍生物為本領域所屬技術人員所熟知的那些，包括但不限于其前藥。"前藥"是指可在生理條件下或通過溶劑分解轉(zhuǎn)化成藥物活性成分的化合物。因此，術語"前藥"是指本發(fā)明的緩釋制劑中所述活性成分的藥物可接受代謝前體。前藥的實例包括但不限于本發(fā)明的緩釋制劑中所述活性成分的醇官能團的乙酸酯、曱酸酯、苯曱酸酯、磷酸酯、磺酸酯衍生物等；胺官能團的酰胺衍生物等。本發(fā)明組合物中含有活性成分的量以達到治療有效量為基準。"治療有效量"是指本發(fā)明緩釋制劑中活性成分的量，當其被給予哺乳動物，優(yōu)選為人時，足以在所述哺乳動物，優(yōu)選為人中實現(xiàn)待治療/預防的疾病或疾病狀態(tài)的治療/預防。構成"治療有效量"的本發(fā)明緩釋制劑中活性成分的量，根據(jù)待治療的疾病狀態(tài)及其嚴重性以及給藥對象的條件如年齡、體重等而改變，但可常規(guī)地由本領域一般技術人員根據(jù)其自有知識及本申請/>開內(nèi)容而決定。所述注射用緩釋制劑中含有活性成分LXT101的量通常為基于所述緩釋制劑總重量的0.001%至30%(w/w)，在某些實施方案中，本發(fā)明注射用緩釋制劑中含有活性成分的量為基于所述緩釋制劑總量的0.01%至20%(w/w)。在某些實施方案中，本發(fā)明注射用緩釋制劑中含有活性成分的量為基于所述緩釋制劑總量的0.1%至10%(w/w)。本發(fā)明的注射用緩釋制劑中的油性溶劑為制藥領域中常用的那些。示例性的油性溶劑包括但不限于天然植物油如大豆油、茶油、芝麻油、大蒜油、核桃油、橄欖油、玉米油、花生油、椰子油、棉沖予油、蓖麻油等；精制植物油；長鏈或中鏈脂肪酸甘油酯；肉豆蔻異丙酯；油酸乙酯；聚氧乙烯油酸甘油三酯；白油；以及苯曱酸千酯等。在某些實施方案中，所述油性溶劑可以是上述一種或多種的組合。在某些優(yōu)選實施方案中，所述油性溶劑使用大豆油、長鏈或中鏈脂肪7酸甘油酉旨。油性溶劑的量要求并不嚴格，本領域所屬技術人員可根據(jù)需要選擇適當?shù)牧?。通常可為基于所述緩釋制劑總重量?0。/。至99.9。/。(w/w)。在某些實施方案中，所述油性溶劑的加入量為基于所述緩釋制劑總量的50%至99%(w/w)。在某些實施方案中，所述油性溶劑的加入量為基于所述緩釋制劑總量的60%至99%(w/w)。在某些實施方案中，本發(fā)明的緩釋制劑中還可包含增稠劑。可用于本發(fā)明的增稠劑包括硬脂酸鹽類如硬脂酸鋁、硬脂酸鋅、硬脂酸鎂、硬脂酸釣；以及高分子聚合物如PCL、PLGA、PLA等。所述增稠劑的加入量為基于所述緩釋制劑總量的0.05%至10%(w/w)，優(yōu)選0.5%至3.0%(w/w)。硬脂酸鹽的加入一方面使油性溶劑凝膠化，增加介質(zhì)的粘度，從而導致藥物分子具有較低的擴散系數(shù)，釋放變慢；另一方面，由于藥物顆粒表面包裹了疏水性硬脂酸鹽，因此不易被水性組織液到達，從而使藥物釋放顯著延緩。在某些實施方案中，本發(fā)明的緩釋制劑中還可包含分散劑。分散劑的加入是為了使藥物粉末能夠均勻分散，并使藥物粉末在分散體系中保持穩(wěn)定?？捎糜诒景l(fā)明的分散劑可選自油溶性表面活性劑如磷脂、膽固醇、失水山梨醇脂肪酸酯類、硬脂酸酯類、聚醚或其混合物等。在某些實施方案中，所述磷脂選自天然磷脂如大豆卵磷脂(SPC)或蛋黃卵磷脂(EPC)，合成磷脂如二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE)、氫化大豆卵磷脂(HSPC)或磷脂酰絲氨酸(PS)等。在某些實施方案中，所述失水山梨醇脂肪酸酯類選自司盤20、司盤40、司盤60或司盤80等。在某些實施方案中，所述硬脂酸酯類選自二硬脂酸乙二酯或單硬脂酸甘油酯等。在某些實施方案中，所述聚醚為PluronicL31。所述分散劑的加入量為基于所述緩釋制劑總量的0.05%至30.0%(w/w),優(yōu)選0.1。/o至20.0o/o(w/w)。在某些實施方案中，本發(fā)明的緩釋制劑中還可包含抗氧化劑，以保證注射用油的穩(wěn)定性?？捎糜诒景l(fā)明的抗氧化劑可選自VE(維生素E)，BHT(二叔丁基甲基苯酚)，BHA(叔丁基羥基茴香醚)或其混合物等。所述抗氧劑的加入量為基于所述緩釋制劑總量的0.01%至2.0%(w/w)，優(yōu)選0.05%至1.0%(w/w)。本發(fā)明的制劑除了具有使LXT101緩慢釋放的作用，而且在整個釋放過程中活性成分一直在油性介質(zhì)內(nèi)部，該制劑注射后，能保證活性LXT101在注射部位更加穩(wěn)定，可以平穩(wěn)釋放。該緩釋注射劑能夠在一周至一個月內(nèi)維持釋放有效活性多肽。本發(fā)明的另一方面涉及LXT101的注射用緩釋制劑的制備方法。該方法包括將LXT101藥物粉末加入至油性溶劑中，攪拌使得到的混合物分散均勻，分裝。下面以具體實施例對本發(fā)明進行進一步說明。應當理解，這些實施例并不構成對本發(fā)明范圍的任何限制。實施例材料與試劑活性成分LXT101:由發(fā)明人的實驗室按照中國專利ZL90108955.9的方法合成；油性溶劑注射用中鏈油、注射用大豆油，均購自中國鐵嶺北亞藥用油有限公司；其它試劑司盤80:購自成盛化學品有限公司；VE:購自浙江新和成股份有限公司；BHT:購自廣州文俊化工原料有限公司；蛋黃卵磷脂(EPC)、膽固醇均購自中國上海東尚實業(yè)有限公司；硬脂酸鋁購自中國上海邦成化工有限公司。實施例l:制劑的制備按照下列一般方法制備本發(fā)明的制劑將LXT101研磨或粉碎后過100目篩，加入到其它成分的混合物中，攪拌或研磨，使用高壓均質(zhì)機分散，使LXT101混懸劑中的顆粒大小不超過15nm,分裝得到制劑。制備了如表1所示的不同制劑。表l.本發(fā)明所制備的不同制劑<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>實施例2:體外累積釋放的測定取活性成分對照品加水配制成濃度分別為10jLtg/mL、20/ig/mL、30/xg/mL、50/ig/mL、100/xg/mL、200]Lig/mL的標準活性成分溶液，采用福林酚法測定吸光度A，以吸光度A對濃度進行回歸，建立標準曲線回歸方程。取制備的LXT101緩釋制劑適量置于50mL具塞錐形瓶中，并向其中加入10mLpH7.2的PBS緩沖溶液。將錐形瓶置于37士1。C恒溫搖床中振蕩，振蕩頻率為70r/m。分別于不同時間點定量取液200jLiL，同時補入pH7.2的PBS緩沖溶液200pL。在12,000r/m條件下離心IO分鐘，取上清液，作為樣品溶液。同法測定樣品溶液的吸光度，代入回歸方程計算即得樣品溶液中活性成分的濃度。將計算的累積藥物量與加入藥物總量相比計算藥物累積釋放百分數(shù)。本發(fā)明所制備的某些制劑的體外釋放性能如表2所示，其中每一數(shù)據(jù)點為兩次試驗的平均值。表2.本發(fā)明制劑的體外累積釋放制劑不同時間(天)藥物累積釋放％13791113237,856.175.481.9———327.736,845.161,290.6——425.135.443.162.089.9——59.7614.619.536.648.868.382.9表2的數(shù)據(jù)表明，所測試的制劑在體外可在7至13天的時間內(nèi)緩慢釋放。實施例3:大鼠體內(nèi)藥效學研究結果按照下表3給予大鼠肌肉注射(i.m)實施例1中制備的不同LXT-101制劑(包括不同劑量)，給藥后不同時間(天)測定血清中的睪酮含量(ng/ml),以間接測定LXT101油性緩釋制劑在體內(nèi)的釋放效果。整個測定過程由BECKMANCOULTERAccessImmunoassaySystem化學發(fā)光儀按預定程序自動完成。結果見下表3。通過測定大鼠血清中睪酮水平評價LXT-101制劑的緩釋效果，從表3結果可知，制劑1當劑量為3.5mg/kg時可顯著抑制血清中睪酮水平的時間為5至7天；制劑2當劑量為3.5mg/kg時可顯著抑制血清中睪酮水平的時間為9至10天；制劑3當劑量為3.5mg/kg時可顯著抑制血清中睪酮水平的時間為7至9天；制劑6當劑量為1mg/kg可顯著抑制血清中睪酮水平的時間為9至IO天；制劑5當劑量為1mg/kg可顯著抑制血清中睪酮水平的時間為5至7天，當劑量為3.5mg/kg可顯著抑制血清中睪酮水平的時間為21至28天。本領域技術人員可以理解，本文中所用的"例如，，、"諸如，，均表示"包括但不限于"。雖然本發(fā)明已通過上述具體實施方式和具體說明予以描述，但并不以此作為限制。本領域所屬技術人員可以根據(jù)本申請的公開，在不違背本發(fā)明精神的情況下對上述實施方式中的技術特征進行改進和變換，這些改進和變換都應屬于本發(fā)明的范圍。ii<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>權利要求1.注射用緩釋制劑，其包含治療有效量的如式(1)結構的活性成分或其藥物可接受的鹽或前藥，以及油性溶劑2.如權利要求l所述的緩釋制劑，其中所述活性成分以粉末形式分散于所述油性溶劑中，所述粉末的顆粒大小不超過15pm。3.如權利要求1或2所述的緩釋制劑，其中所述活性成分的量為基于所述緩釋制劑總重量的0.001%至30%(w/w)，優(yōu)選0.05%至5.0%(w/w)。4.如前述任一權利要求所述的緩釋制劑，其中所述油性溶劑選自可注射用天然植物油、不同碳鏈的不飽和脂肪酸、精制植物油、長鏈或中鏈脂肪酸甘油酯、苯曱酸千酯、或者其多種的混合物，并且優(yōu)選選自可注射用大豆油、長鏈或中鏈脂肪酸甘油酯。5.如前述任一權利要求所述的緩釋制劑，其中所述緩釋制劑還包含增稠劑，所述增稠劑選自硬脂酸鹽類如硬脂酸鋁、硬脂酸鋅、硬脂酸鎂、硬脂酸4丐；或高分子聚合物如PCL、PLGA、PLA。6.如權利要求5所述的緩釋制劑，其中所述增稠劑的加入量為基于所述緩釋制劑總量的0.05%至10%(w/w),優(yōu)選0.5%至3.0%(w/w)。7.如前述任一權利要求所述的緩釋制劑，其中所述緩釋制劑還包含分散劑，所述分散劑為油溶性表面活性劑，所述油溶性表面活性劑選自磷脂例如天然磷脂如大豆卵磷脂(SPC)或蛋黃卵磷脂(EPC)，合成磷脂如二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE)、氫化大豆卵磷脂(HSPC)或磷脂酰絲氨酸(PS);膽固醇；失水山梨醇脂肪酸酯類例如司盤20、司盤40、司盤60或司盤80;硬脂酸酯類例如二硬脂酸乙二酯或單硬脂酸甘油酯；聚醚例如PluronicL31;或上述物質(zhì)的混合物。8.如權利要求7所述的緩釋制劑，其中所述分散劑的加入量為基于所述緩釋制劑總量的0.05%至30.0%(w/w),優(yōu)選0.1%至20.0%(w/w)。9.如前述任一權利要求所述的緩釋制劑，其中所述緩釋制劑還包含抗氧化劑，所述抗氧化劑選自維生素E、二叔丁基曱基苯酚、叔丁基羥基茴香醚或其混合物。10.如權利要求9所述的緩釋制劑，其中所述抗氧化劑的加入量為基于所述緩釋制劑總量的0.01%至2.0%(w/w),優(yōu)選0.05%至1.0%(w/w)。11.注射用緩釋制劑的制備方法，所述方法包括將治療有效量的如式(l)結構的活性成分或其藥物可接受的鹽或前藥加入至油性溶劑中，攪拌使所得的混合物分散均勻，分裝<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>全文摘要本發(fā)明涉及LHRH拮抗類物質(zhì)的注射用緩釋制劑及其制備方法，所述緩釋制劑包含治療有效量的如式(I)結構的活性成分或其藥物可接受的鹽或前藥，以及油性溶劑。文檔編號A61K9/00GK101647772SQ20081013464公開日2010年2月17日申請日期2008年8月12日優(yōu)先權日2008年8月12日發(fā)明者全東琴,劉克良,寧周,周文霞,張永祥,梁遠軍,程軍平,遲嘵麗,郄建坤申請人:中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院毒物藥物研究所