專利名稱：一種沙丁胺醇檢測(cè)試劑條的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型屬于免疫檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種檢測(cè)試劑條，尤其涉及一種沙丁胺醇檢測(cè)試劑條。
背景技術(shù)：
目前對(duì)沙丁胺醇?xì)埩魴z測(cè)方法主要有高效液相色譜法(HPLC)、氣-質(zhì)聯(lián)用法(GC/MS )、放射免疫分析法(RIA )、氣相色譜法(GC )、高效薄層色譜法(HPTLC )、液-質(zhì)聯(lián)用分析法(LC/MS)、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)等。由于各種檢測(cè)方法的不同(包括方法學(xué)原理，使用的生物制劑的質(zhì)量，操作人員的素質(zhì)及使用設(shè)備的好壞等)，所得結(jié)果并不能說明某種檢測(cè)方法的優(yōu)劣。這些方法準(zhǔn)確，靈敏度較高，出現(xiàn)假陽性、假陰性的機(jī)率較低，其中RIA、ELISA、TLC等方法可以大批量檢測(cè)，樣品不需要經(jīng)過處理，但需要特定的設(shè)備，操作人員需要技術(shù)培訓(xùn)；GC/MS、HPLC等方法的設(shè)備更加昂貴，操作人員技術(shù)要求更高，且檢測(cè)量少。上述檢測(cè)方法都要求在實(shí)驗(yàn)室中通過儀器完成，幾個(gè)小時(shí)之后才能給出鑒定結(jié)果，不適合現(xiàn)場(chǎng)初篩。沙丁胺醇快速檢測(cè)試劑具有攜帶方便，不需要設(shè)備，操作人員無需技術(shù)培訓(xùn)，可現(xiàn)場(chǎng)操作，3 5分鐘即可給出結(jié)果等優(yōu)點(diǎn)，非常適合對(duì)大批量樣本進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)篩查的工作。沙丁胺醇為選擇性3 2受體激動(dòng)劑，能有效地抑制組胺等致過敏性物質(zhì)的釋放，防止支氣管痙攣。適用于支氣管哮喘、喘息性支氣管炎、支氣管痙攣、肺氣腫等癥。在現(xiàn)代豬肉養(yǎng)殖中被用作瘦肉精，來提高生豬的瘦肉產(chǎn)量。瘦肉精屬于腎上腺類神經(jīng)興奮劑。如果把瘦肉精添加到飼料中，的確可以增加動(dòng)物的瘦肉量。但國(guó)內(nèi)外的相關(guān)科學(xué)研究表明，食用含有瘦肉精的肉對(duì)人體會(huì)產(chǎn)生危害，常有惡心、頭暈、四肢乏力、手顫等中毒癥狀，特別是對(duì)冠心病、高血壓患者危害更大。長(zhǎng)期食用可能導(dǎo)致染色體畸變，會(huì)導(dǎo)致惡性腫瘤。因此，沙丁胺醇快速檢測(cè)試劑的開發(fā)對(duì)動(dòng)物性食品檢測(cè)以及人類健康具有重要意義。
發(fā)明內(nèi)容本實(shí)用新型的目的是提供一種沙丁胺醇檢測(cè)試劑條，操作簡(jiǎn)單、反應(yīng)快速、敏感性高、特異性強(qiáng)和適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，而且還具有生產(chǎn)周期短、產(chǎn)量高、成本低等優(yōu)點(diǎn)。為了解決上述技術(shù)問題，本實(shí)用新型通過下述技術(shù)方案得以解決一種沙丁胺醇檢測(cè)試劑條，包括支持物、樣品墊、膠體金紙片、硝酸纖維素膜和吸水墊，支持物上從加樣端開始依次粘貼有樣品墊、膠體金紙片、硝酸纖維素膜和吸水墊，硝酸纖維素膜上有檢測(cè)區(qū)和對(duì)照區(qū)，檢測(cè)區(qū)包被沙丁胺醇人工免疫抗原，對(duì)照區(qū)包被羊抗鼠多克隆抗體。作為優(yōu)選，沙丁胺醇人工免疫抗原為沙丁胺醇-牛血清白蛋白偶聯(lián)物(SAL-BSA)。是按以下方法自制得到根據(jù)沙丁胺醇SAL三個(gè)羥基的活潑性不同，在無水條件下，沙丁胺醇SAL酚羥基鄰位的羥甲基可與丁二酸酐發(fā)生醇解反應(yīng)，生成SAL的琥珀酸衍生物。在三乙胺為催化劑，低溫?zé)o水條件下，該SAL琥珀酸衍生物可與氯甲酸異丁酯發(fā)生取代反應(yīng)，所的的產(chǎn)物與載體蛋白BSA上氨基偶聯(lián)，生成SAL與載體蛋白偶聯(lián)物SAL-BSA。將合成產(chǎn)物置入pH 7. 4 IOmM磷酸鹽緩沖液4°C攪拌透析2天，每天換液2次，以去除未結(jié)合的沙丁胺醇或其它小分子物質(zhì)，透析后-20°C密閉保存。本實(shí)用新型的一種沙丁胺醇檢測(cè)試劑條，操作簡(jiǎn)單、反應(yīng)快速、敏感性高、特異性強(qiáng)和適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，而且還具有生產(chǎn)周期短、產(chǎn)量高、成本低等優(yōu)點(diǎn)。在免疫檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域具有良好的應(yīng)用前景。

圖I為本實(shí)用新型所述一種沙丁胺醇檢測(cè)試劑條的結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實(shí)施方式

以下結(jié)合附圖I與實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型作進(jìn)一步詳細(xì)描述。
實(shí)施例一種沙丁胺醇檢測(cè)試劑條，如圖I所示,包括支持物2、樣品墊5、膠體金紙片4、硝酸纖維素膜3和吸水墊1，支持物上從加樣端6開始依次粘貼有樣品墊5、膠體金紙片4、硝酸纖維素膜3和吸水墊I。硝酸纖維素膜3上有檢測(cè)區(qū)和對(duì)照區(qū)，檢測(cè)區(qū)包被沙丁胺醇人工免疫抗原，對(duì)照區(qū)包被羊抗鼠多克隆抗體。沙丁胺醇人工免疫抗原為沙丁胺醇-牛血清白蛋白偶聯(lián)物(SAL-BSA)。利用膠體金免疫層析的原理，在硝酸纖維素膜3上的檢測(cè)區(qū)包被SAL-BSA，對(duì)照區(qū)包被羊抗鼠多克隆抗體。當(dāng)待測(cè)物中有被測(cè)的抗原物質(zhì)(即沙丁胺醇)時(shí)，待測(cè)物中的抗原物質(zhì)就會(huì)與標(biāo)記膠體金的抗沙丁胺醇抗體形成Ag-Ab-Au復(fù)合物，該復(fù)合物中抗體的活性位點(diǎn)將因被樣品溶液中的藥物占據(jù)而無法與T線上藥物抗原結(jié)合；所以當(dāng)樣品中的沙丁胺醇含量達(dá)5 yg/L以上時(shí)，檢測(cè)試劑條上的T線不顯色，可以判定為陽性。反之，當(dāng)樣品中沙丁胺醇含量在5 yg/L以下或無殘留時(shí)，檢測(cè)試劑條上的T線顯色，判定為陰性。操作簡(jiǎn)單、反應(yīng)快速、敏感性高、特異性強(qiáng)和適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，而且還具有生產(chǎn)周期短、產(chǎn)量高、成本低等優(yōu)點(diǎn)。在免疫檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域具有良好的應(yīng)用前景?？傊陨纤鰞H為本實(shí)用新型的較佳實(shí)施例，凡依本實(shí)用新型申請(qǐng)專利范圍所作的均等變化與修飾，皆應(yīng)屬本實(shí)用新型專利的涵蓋范圍。
權(quán)利要求1.ー種沙丁胺醇檢測(cè)試劑條，包括支持物(2)、樣品墊(5)、膠體金紙片(4)、硝酸纖維素膜(3)和吸水墊(1)，支持物上從加樣端(6)開始依次粘貼有樣品墊(5)、膠體金紙片(4)、硝酸纖維素膜(3)和吸水墊(1)，其特征在于硝酸纖維素膜(3)上有檢測(cè)區(qū)和對(duì)照區(qū)，檢測(cè)區(qū)包被沙丁胺醇人工免疫抗原，對(duì)照區(qū)包被羊抗鼠多克隆抗體。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種沙丁胺醇檢測(cè)試劑條，其特征在于沙丁胺醇人工免疫抗原為沙丁胺醇-牛血清白蛋白偶聯(lián)物。
專利摘要本實(shí)用新型屬于免疫檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種檢測(cè)試劑條，尤其涉及一種沙丁胺醇檢測(cè)試劑條，包括支持物、樣品墊、膠體金紙片、硝酸纖維素膜和吸水墊，支持物上從加樣端開始依次粘貼有樣品墊、膠體金紙片、硝酸纖維素膜和吸水墊，硝酸纖維素膜上有檢測(cè)區(qū)和對(duì)照區(qū)，檢測(cè)區(qū)包被沙丁胺醇人工免疫抗原，對(duì)照區(qū)包被羊抗鼠多克隆抗體。沙丁胺醇人工免疫抗原為沙丁胺醇-牛血清白蛋白偶聯(lián)物(SAL-BSA)，操作簡(jiǎn)單、反應(yīng)快速、敏感性高、特異性強(qiáng)和適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，而且還具有生產(chǎn)周期短、產(chǎn)量高、成本低等優(yōu)點(diǎn)。在免疫檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域具有良好的應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)G01N33/531GK202471714SQ201220092739
公開日2012年10月3日 申請(qǐng)日期2012年3月13日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月13日
發(fā)明者周文良, 應(yīng)旭霞, 陳國(guó)琴 申請(qǐng)人:杭州隆基生物技術(shù)有限公司