梔子厚樸湯顆粒hplc指紋圖譜的建立方法及其標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種梔子厚樸湯顆粒HPLC指紋圖譜的建立方法，所述方法包括以下步驟：(1)制備對(duì)照品溶液：分別配制厚樸酚、和厚樸酚、梔子苷、橙皮苷、辛弗林及蕓香柚皮苷對(duì)照品溶液；(2)制備供試品溶液：稱取梔子厚樸湯顆粒，進(jìn)行提取，提取液用微孔濾膜過濾，即得供試品溶液；(3)采用高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定得到指紋圖譜，其中色譜條件為：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料；采用梯度洗脫；檢測(cè)波長230nm；(4)評(píng)價(jià)相似度：供試品指紋圖譜采用《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)2004A版》進(jìn)行評(píng)價(jià)。所述方法簡便、穩(wěn)定、精密度高、重現(xiàn)性好；可將其作為梔子厚樸湯顆粒劑的質(zhì)量控制和鑒別產(chǎn)品的真?zhèn)蝺?yōu)劣的指標(biāo)之一。
【專利說明】梔子厚樸湯顆粒HPLC指紋圖譜的建立方法及其標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種桅子厚樸湯的質(zhì)量控制方法，具體涉及桅子厚樸湯顆粒HPLC指紋圖譜的建立方法及其標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。
【背景技術(shù)】
[0002]桅子厚樸湯源自《傷寒論》，其組方為桅子、厚樸、枳實(shí)三味藥，除煩泄?jié)M的代表方齊U，主要用于熱擾胸膈、心煩腹?jié)M證；現(xiàn)在已越來越多地將該方用于治療神經(jīng)官能癥、焦慮癥、失眠癥等。
[0003]滇虹藥業(yè)集團(tuán)有限公司研發(fā)了我國第一個(gè)桅子厚樸湯顆粒制劑。已被列為云南省科技廳重大專項(xiàng)。有關(guān)桅子厚樸湯的臨床應(yīng)用以及桅子厚樸湯中各單味藥材的研究雖有報(bào)道，但是僅有朱蘭等(朱蘭，馮芳，任楊帆等，多種色譜-波譜聯(lián)用技術(shù)分析桅子厚樸湯中特征成分及其配伍前后的溶出變化.中國藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，40 (5) =426-430)采用多種色譜-波譜聯(lián)用技術(shù)，鑒別并歸屬桅子厚樸湯中的特征成分，莊波陽等(莊波陽，馮芳，周娟.高效液相柱前衍生化法和高效液相熒光法測(cè)定桅子厚樸湯4種生物堿的比較.海峽藥學(xué)，2010，22 (7) =98-101)對(duì)其中的四個(gè)堿進(jìn)行了測(cè)定，但至今還沒有文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)桅子厚樸湯顆粒指紋圖譜的研究。而中藥指紋圖譜技術(shù)是一種表征中藥所含成分與其質(zhì)量關(guān)系的有效手段，已成為國內(nèi)外廣泛認(rèn)可的重要質(zhì)量評(píng)價(jià)模式。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明為桅子厚樸湯顆粒的質(zhì)量控制和真?zhèn)舞b別提供一種新的方法，即建立桅子厚樸湯顆粒HPLC指紋圖譜的方法，并由此方法得到桅子厚樸湯顆粒的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。
[0005]本發(fā)明建立的HPLC指紋圖譜有良好的精密度、重復(fù)性和穩(wěn)定性，能夠用于桅子厚樸湯顆粒劑的質(zhì)量控制和鑒別真?zhèn)巍?br> [0006]因此本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供一種桅子厚樸湯顆粒HPLC指紋圖譜的建立方法，所述方法包括以下步驟:
[0007](I)制備對(duì)照品溶液:分別配制厚樸酚、和厚樸酚、桅子苷、橙皮苷、辛弗林及蕓香柚皮苷對(duì)照品溶液，優(yōu)選濃度均為20?500 μ g/mL ；
[0008](2)制備供試品溶液:稱取桅子厚樸湯顆粒，優(yōu)選0.1?10g，進(jìn)行提取，提取液用微孔濾膜過濾，即得供試品溶液；
[0009](3)采用高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定得到指紋圖譜，其中色譜條件為:色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料；采用梯度洗脫；檢測(cè)波長230nm ；
[0010](4)評(píng)價(jià)相似度:供試品指紋圖譜采用《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)2004A版》進(jìn)行評(píng)價(jià)。
[0011]本發(fā)明所使用的術(shù)語“HPLC程序檢測(cè)”是指利用二極管陣列檢測(cè)器(DAD)特有的程序HPLC功能，根據(jù)各組分的出峰順序，在不同時(shí)間段分別采用各組分的最佳吸收波長進(jìn)行檢測(cè)的方法。
[0012]本發(fā)明所使用的術(shù)語“評(píng)價(jià)相似度”是指對(duì)現(xiàn)有的桅子厚樸湯顆粒供試品的指紋圖譜按照國家藥典委員會(huì)出版的《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)2004A版》軟件進(jìn)行相似度的評(píng)價(jià)。
[0013]以下具體描述以上各步驟。
[0014](I)對(duì)照品溶液的制備:
[0015]A.厚樸酚對(duì)照品溶液的制備:精密稱取厚樸酚對(duì)照品適量，用甲醇配制成每Iml含厚樸酚20?500 μ g的溶液；
[0016]B.和厚樸酚對(duì)照品溶液的制備:精密稱取和厚樸酚對(duì)照品適量，用甲醇配制成每Iml含和厚樸酚20?500 μ g的溶液；
[0017]C.桅子苷對(duì)照品溶液的制備:精密稱取桅子苷對(duì)照品適量，用甲醇配制成每Iml含桅子苷20?500 μ g的溶液；
[0018]D.橙皮苷對(duì)照品溶液的制備:精密稱取橙皮苷對(duì)照品適量，用50%甲醇配制成每Iml含橙皮苷20?500 μ g的溶液；
[0019]E.辛弗林對(duì)照品溶液的制備:精密稱取辛弗林對(duì)照品適量，用50%甲醇配制成每Iml含辛弗林20?500 μ g的溶液；
[0020]F.蕓香柚皮苷對(duì)照品溶液的制備:精密稱取蕓香柚皮苷對(duì)照品適量，用50%甲醇配制成每Iml含蕓香柚皮苷20?500 μ g的溶液；
[0021](2)供試品溶液的制備:精密稱取桅子厚樸湯顆粒0.1?10g，0%?50% (體積百分比)甲醇提取，再超聲提取，提取時(shí)間為10?80min，提取時(shí)間為優(yōu)選為30min，提取液用微孔濾膜(孔徑為0.2 μ m?0.8 μ m，優(yōu)選0.45 μ m)過濾，即得供試品溶液；
[0022](3)高效液相色譜儀自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣0.5?20 μ I，照高效液相色譜法測(cè)定，得到指紋圖譜，其中色譜條件為:色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料；采用梯度洗脫，梯度洗脫的流動(dòng)相A為0.01?3% (體積百分比)三氟乙酸水溶液，流動(dòng)相B為乙腈；梯度洗脫時(shí)間為20?180min,流速0.3?1.5ml/min ;柱溫20?45°C ;檢測(cè)波長230nm,程序HPLC檢測(cè)；
[0023](4)相似度評(píng)價(jià):供試品指紋圖譜在程序HPLC檢測(cè)下的相似度均大于0.90。
[0024]根據(jù)本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式，在步驟(3)中，所述的梯度洗脫，梯度洗脫程序以如以下濃度配制進(jìn)行:0min — 36min — 80min — 95min — 130min — 140min,乙臆 2 %—10%— 20%— 30%— 75%— 90% (體積百分比)。
[0025]根據(jù)本發(fā)明另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式，在步驟(3)中，所述的HPLC檢測(cè)程序?yàn)?檢測(cè)波長為230nm。
[0026]根據(jù)本發(fā)明一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方式，本發(fā)明檢測(cè)方法中的步驟(2)至(3)可以通過下述步驟實(shí)施:(2)供試品溶液的制備:取桅子厚樸湯顆粒研細(xì)(過60目篩)，精密稱取0.28g，置具塞錐形瓶中，精密加入雙蒸水25ml，密塞，稱定重量，超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用提取溶劑補(bǔ)足減失的重量，離心15min，上清液用0.45 μ m微孔濾膜過濾，續(xù)濾液即為供試品溶液。(3)色譜條件:色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料；采用梯度洗脫，流動(dòng)相A為0.05%三氟乙酸水溶液，流動(dòng)相B為乙腈，洗脫時(shí)間為140min，流速1.0ml/min ;柱溫35 °C ;紫外檢測(cè)波長:程序HPLC檢測(cè)。[0027]本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供按照本發(fā)明HPLC指紋圖譜的建立方法所得到的梔子厚樸湯顆粒的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，其中有32個(gè)共有峰，2.322min、2.742min、3.485min、
5.211min、6.203min、6.878min、15.512min、18.842min、20.762min、2L 168min、23.231min、24.321min、25.033min、28.337min、35.916min、36.752min、37.654min、42.899min、45.937min、49.824min、51.586min、56.636min、57.794min、70.556min、74.25min、80.67min、85.033min、88.313min、91.643min、95.27min、120.169min、123.57min，峰號(hào)依次記為1-32號(hào)，以25號(hào)峰(蕓香柚皮苷)作為參比峰，峰號(hào)(相對(duì)保留時(shí)間)分別為:I (0.031) ,2(0.037) ,3(0.047) ,4(0.070) ,5(0.084) ,6(0.093) ,7(0.209)、8 (0.254)、9 (0.280) ,10 (0.285)、11 (0.313)、12 (0.328) ,13 (0.337) ,14(0.382) ,15 (0.484)、16 (0.495)、17 (0.507) ,18(0.578) ,19(0.619)、20 (0.671)、21 (0.695)、22 (0.763)、23(0.778) ,24(0.950) ,25(1) ,26(1.086) ,27(1.145) ,28(1.189) ,29(1.234) ,30(1.283)、31 (1.618)、32 (1.664)。其中6號(hào)峰為辛弗林，18號(hào)共有峰即桅子苷，25號(hào)峰為蕓香柚皮苷
(S)，26號(hào)峰為橙皮苷，31號(hào)峰為和厚樸酚，32號(hào)峰為厚樸峰。這些共有特征峰構(gòu)成了桅子厚樸湯顆粒的HPLC指紋圖譜，可作為桅子厚樸湯顆粒的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。
[0028]根據(jù)本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式，按照本發(fā)明所提供HPLC指紋圖譜的建立方法所得到的桅子厚樸湯顆粒的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜中的32個(gè)共有峰中，其中單峰面積占總峰面積大于5%，而小于10%的共有峰為峰6、峰22、峰26 ;單峰面積占總峰面積大于10%的共有峰為峰18、峰25 ;其余色譜峰峰面積均小于5%。
[0029]本發(fā)明方法具有如下顯著的優(yōu)點(diǎn)和用途:
[0030](a)本發(fā)明首次公開程序HPLC檢測(cè)用于桅子厚樸湯顆粒指紋圖譜的建立；
[0031](b)供試品制作簡便，色譜條件容易實(shí)現(xiàn)；
[0032](c)方法穩(wěn)定性和重現(xiàn)性均較好；
[0033](d)有效表征了桅子厚樸湯顆粒的質(zhì)量，有利于產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)控；具有方法簡便、穩(wěn)定、精密度高、重現(xiàn)性好；可準(zhǔn)確地鑒別產(chǎn)品的真?zhèn)蝺?yōu)劣。
[0034]下面通過實(shí)施例及其附圖詳細(xì)闡述本發(fā)明的技術(shù)方案，所例舉的實(shí)施例及附圖對(duì)本發(fā)明沒有限制。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0035]圖1:實(shí)施例2的10批次桅子厚樸湯顆粒劑疊加圖，其中SI?SlO分別為桅子厚樸湯顆粒I?10號(hào)，R為生成的對(duì)照譜。
[0036]圖2:桅子厚樸湯顆粒HPLC對(duì)照?qǐng)D譜及共有色譜峰的標(biāo)定，其由中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)2004A版生成，記為ZZHPT-CP-R。
[0037]圖3:實(shí)施例1桅子厚樸湯顆粒HPLC指紋圖譜的檢測(cè)結(jié)果。
[0038]圖4:實(shí)施例3桅子厚樸湯顆粒中間體HPLC指紋圖譜。
[0039]圖5:實(shí)施例4中ZZHPT-CP-1與HP-1比較圖，其中由上到下分別代表桅子厚樸湯成品的色譜圖和厚樸I的色譜圖。
[0040]圖6:實(shí)施例4中ZZHPT-CP-1與ZZ-1的比較圖，其中由上到下分別代表桅子厚樸湯成品的色譜圖和桅子I的色譜圖。
[0041]圖7:實(shí)施例4中ZZHPT-CP-1、ZZHPT-CP-4、ZS-1和ZS-2的比較圖，其中由上到下分別代表 ZZHPT-CP-4、ZS-2、ZZHPT-CP-U ZS-1 的色譜圖。
[0042]圖 8:實(shí)施例 4 中 HP-110801, ZS-110802、ZZ-110801、ZZHPT-111107 和空白比較圖，其中由上到下分別代表空白、ZZHPT-111107、ZZ-110801、ZS-110802和HP-110801的色譜圖，圖中用相同顏色標(biāo)明了 ZZHPT-111107的主要成分來源于何種藥材。注意:提交文檔都是黑白的，不能用顏色來區(qū)分
[0043]圖9:實(shí)施例5中ZZHPT-111107供試品溶液DAD圖譜。
[0044]圖10:實(shí)施例5中ZZHPT-111107供試品溶液不同波長下色譜圖比較，其中由下至上分別為:275nm、240nm、440nm、230nm、315nm、202nm、210nm。
【具體實(shí)施方式】
[0045]實(shí)施例1:桅子厚樸湯顆粒HPLC指紋圖譜的檢測(cè)
[0046]I儀器與試藥
[0047]1.1儀器:Agilent 1260液相色譜儀(Agilent 1260四元泵、MWD檢測(cè)器、DAD檢測(cè)器、Agilent 1260自動(dòng)進(jìn)樣器)，Agilent Chemstation色譜工作站；
[0048]1.2 試劑:
[0049]厚樸酚、和厚樸酚、桅子苷、橙皮苷、辛弗林標(biāo)準(zhǔn)品(中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)分別為:0729-9805、0730-9204、110749-200714、110721-200613、110727-200306)，蕓香柚皮苷(批號(hào)MUST-11101011，上海雅吉生物科技有限公司)；乙腈、甲醇為色譜純，水為雙蒸水，其他試劑均為分析純。
[0050]2.高效液相色譜
[0051]2.1色譜條件:色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料(SHISEIDOCAPCELL PAKC18MGII色譜柱，4.6_^250111111，511111);采用梯度洗脫，流動(dòng)相A為0.05%三氟乙酸酸水溶液，流動(dòng)相B為乙腈，分析時(shí)間為140min，流速1.0ml/min ;柱溫35°C ；
[0052]梯度洗脫程序:Omin— 36min — 80min — 95min — 130min — 140min,乙臆 2 %—10% — 20% — 30% — 75% — 90%。檢測(cè)波長為 230nm。
[0053]2.2對(duì)照品溶液的制備:取厚樸酚、和厚樸酚，精密稱定，加甲醇分別制成每Iml含40 μ g、24 μ g的溶液，0.45 μ m微孔濾膜過濾即得。取桅子苷、橙皮苷、辛弗林及蕓香柚皮苷適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml分別含30 μ g、500 μ g，30 μ g、320 μ g的溶液，經(jīng)0.45 μ m微孔濾膜濾過即得。
[0054]2.3供試品溶液的制備:
[0055]桅子厚樸湯顆粒供試品溶液的制備:取桅子厚樸湯顆粒研細(xì)(過60目篩)，精密稱取0.28g，置具塞錐形瓶中，精密加入雙蒸水25ml，密塞，稱定重量，超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用提取溶劑補(bǔ)足減失的重量，離心(3000r/min) 15min，上清液用0.45 μ m微孔濾膜過濾，續(xù)濾液即為供試品溶液。
[0056]2.4測(cè)定:高效液相色譜儀自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣20μ 1，照高效液相色譜法測(cè)定，得到指紋圖譜(如圖3)與圖2相似。
[0057]實(shí)施例2:檢測(cè)10批次桅子厚樸湯顆粒的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜
[0058]取桅子厚樸湯顆粒10 批次，編號(hào)為=ZZHPT-KL-111IOU ZZHPT-KL-111102,ZZHPT-KL-111103、ZZHPT-KL-11120 1、ZZHPT-KL-11 1202, ZZHPT-KL-1 1 1203 ,ZZHPT-KL-111204、ZZHPT-KL-111205, ZZHPT-KL-111206 和ZZHPT-KL-111207,分別記為ZZHPT-CP-1~10，均由滇虹藥業(yè)集團(tuán)有限公司提供，規(guī)格:6g/袋，含浸膏粉4.2g。)，按實(shí)施例I條件進(jìn)行檢測(cè)，得10批次樣品的HPLC圖譜，如圖1所示，通過10批HPLC圖譜的比較，進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)，確定其特征共有峰:
[0059]指紋圖譜中有32個(gè)特征共有峰，現(xiàn)將圖譜的保留時(shí)間、峰面積相對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)峰面積、占總峰面積百分比匯總，具體表1所示:
[0060]表1:32個(gè)共有峰相對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)峰面積及占總峰面積百分比
【權(quán)利要求】
1.桅子厚樸湯顆粒HPLC指紋圖譜的建立方法，所述方法包括以下步驟: (1)制備對(duì)照品溶液:分別配制厚樸酚、和厚樸酚、桅子苷、橙皮苷、辛弗林及蕓香柚皮昔對(duì)照品溶液； (2)制備供試品溶液:稱取桅子厚樸湯顆粒，進(jìn)行提取，提取液用微孔濾膜過濾，即得供試品溶液； (3)采用高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定得到指紋圖譜，其中色譜條件為:色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料；采用梯度洗脫；檢測(cè)波長230nm ； (4)評(píng)價(jià)相似度:供試品指紋圖譜采用《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)2004A版》進(jìn)行評(píng)價(jià)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桅子厚樸湯顆粒HPLC指紋圖譜的建立方法，其特征在于:步驟⑴中所述對(duì)照品溶液的濃度均為20~500μ g/mL。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桅子厚樸湯顆粒HPLC指紋圖譜的建立方法，其特征在于:步驟(2)中所述桅子厚樸湯顆粒的稱重量為0.1~10g。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桅子厚樸湯顆粒HPLC指紋圖譜的建立方法，其特征在于:步驟(2)中所述提取步驟為采用蒸餾水提取或采用超聲提取，提取時(shí)間為10~80min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桅子厚樸湯顆粒HPLC指紋圖譜的建立方法，其特征在于:步驟⑵中所述微孔濾膜孔徑為0.2 μ m~0.8 μ m。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桅子厚樸湯顆粒HPLC指紋圖譜的建立方法，其特征在于:步驟(3)中所述梯度洗脫的流動(dòng)相A為0.01~3%三氟乙酸水溶液，B為乙腈；梯度洗脫時(shí)間為20~180min，流速0.3~1.5ml/min ;柱溫20~45°C ;以程序HPLC檢測(cè)。
7.如權(quán)利要求6所述的桅子厚樸湯顆粒HPLC指紋圖譜的建立方法，其特征在于:步驟(3)中所述梯度洗脫的洗脫程序以如以下濃度配制進(jìn)行:0min —36min —80min —95min—I30min — 140min,乙腈 10%— 20%— 30%— 75%— 90%。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的桅子厚樸湯顆粒HPLC指紋圖譜的建立方法，其特征在于:步驟(3)中所述程序HPLC檢測(cè)的檢測(cè)程序?yàn)?檢測(cè)波長為230nm。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桅子厚樸湯顆粒HPLC指紋圖譜的建立方法，其特征在于:步驟(3)所述測(cè)定中，高效液相色譜儀自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣0.5~20μ 1，照高效液相色譜法測(cè)定，得到指紋圖譜。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桅子厚樸湯顆粒HPLC指紋圖譜的建立方法，其特征在于:步驟(4)所述評(píng)價(jià)相似度中，供試品指紋圖譜在程序HPLC檢測(cè)下的相似度均大于0.90。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-10任一項(xiàng)所述的桅子厚樸湯顆粒HPLC指紋圖譜的建立方法所測(cè)得的桅子厚樸湯顆粒標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，其特征在于:指紋圖譜中有32個(gè)共有峰，保留時(shí)間分別為:2.322min、2.742min、3.485min、5.211min、6.203min、6.878min、15.512min、.18.842min、20.762min、21.168min、23.231min、24.321min、25.033min、28.337min、.35.916min>36.752min>37.654min>42.899min>45.937min>49.824min>51.586min、.56.636min> 57.794min> 70.556min> 74.25min>80.67min>85.033min> 88.313min>.91.643min、95.27min、120.169min、123.57min,峰號(hào)依次記為 1-32 號(hào)，以 25 號(hào)峰(蕓香柚皮苷)作為參比峰，峰號(hào)(相對(duì)保留時(shí)間)分別為:1(0.031)、2 (0.037)、3 (0.047)、.4 (0.070) ,5(0.084) ,6(0.093) ,7(0.209) ,8(0.254) ,9(0.280)、10 (0.285) ,11 (0.313)、12 (0.328) , 13 (0.337) , 14(0.382)、15 (0.484)、16 (0.495)、17 (0.507)、18 (0.578)、19 (0.619)、20 (0.671) ,21 (0.695)、22 (0.763)、23 (0.778)、24 (0.950)、25 (I)、26 (1.086)、27(1.145) ,28(1.189)、29 (1.234)、30 (1.283)、31 (1.618)、32 (1.664);其中 6 號(hào)峰為辛弗林，18號(hào)共有峰即桅子苷，25號(hào)峰為蕓香柚皮苷，26號(hào)峰為橙皮苷，31號(hào)峰為和厚樸酚，32號(hào)峰為厚樸峰。
12.根據(jù)權(quán)利要求10所述的桅子厚樸湯顆粒標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，其特征在于:所述32個(gè)共有峰中，其中單峰面積占總峰面積大于5%，而小于10%的共有峰為峰6、峰22、峰26 ;單峰面積占總峰面積大于10%的共有峰為峰18、峰25 ;其余色譜峰峰面積均小于5%。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK103698413SQ201210370253
【公開日】2014年4月2日 申請(qǐng)日期:2012年9月27日 優(yōu)先權(quán)日:2012年9月27日
【發(fā)明者】楊義芳, 黃春躍, 唐博雅, 羅澤淵, 李存勇, 朱緒民, 蒲琴, 趙建國, 郭振宇 申請(qǐng)人:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院, 滇虹藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司