專利名稱：中成藥和保健食品中摻雜褪黑素的快速測定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及褪黑素成分的檢測方法，具體是檢測中成藥和保健食品中，尤其是用于檢測鎮(zhèn)靜安眠類中成藥和保健食品中是否添加褪黑素的方法。
背景技術(shù)：
目前市場上存在許多種解決失眠問題的中成藥和保健食品，宣傳其成分主要為純植物或者純中藥，不含有助眠功效的西藥成分或者激素類成分等。褪黑素又稱松果體素，化學(xué)名稱為N-乙?；?5-甲氧基色胺，是人體大腦內(nèi)松果體分泌的一種吲哚胺類激素。其分泌隨著光照的增加而減少，故又被稱為黑暗荷爾蒙。褪黑素主要用于調(diào)節(jié)人體的清醒和睡眠周期，誘導(dǎo)生理睡眠，以及抗衰老等。褪黑素是一種內(nèi)源性激素，有研究表明，大量使用褪黑素可能會引發(fā)呼吸問題，產(chǎn)生宿醉效應(yīng)，同時褪黑素會影響某些鎮(zhèn)靜安眠藥物如氯硝西泮的作用。在歐洲，褪黑素的服用周期、適用人群以及劑量均有嚴(yán)格限制。在美國，褪黑素以膳食補充劑的形式銷售，其說明書上需明確標(biāo)示含量及使用劑量。在我國，褪黑素作為保健食品使用，有明確的法律規(guī)定日服用劑量為1 :3mg，不得添加除維生素B6以外的其他成分，注意事項中應(yīng)注明從事駕駛、機械作業(yè)或危險操作者，不要在操作前或操作中食用和自身免疫癥(類風(fēng)濕等)及甲亢患者慎用。故服用褪黑素最好遵循醫(yī)囑，明確使用劑量，兒童使用更需要謹(jǐn)慎。但是，一些不法分子利用褪黑素的鎮(zhèn)靜、催眠的良好作用和中成藥和保健食品成分復(fù)雜的特點，在鎮(zhèn)靜催眠類中成藥和保健食品中擅自添加褪黑素，夸大宣傳功效，抬高價格；而使得食用者無法明確意識到自己的服用劑量，從而引發(fā)不良后果，給人民群眾的身體健康造成了嚴(yán)重危害。特別在廣大的農(nóng)村和經(jīng)濟欠發(fā)達的中小城市，由于這些地區(qū)缺乏必要的檢驗儀器，加上技術(shù)監(jiān)管能力薄弱，給了不法分子更多的造假和添加之機，導(dǎo)致大量假藥劣藥出現(xiàn)，造成了中藥制劑和保健食品市場的混亂。檢驗鎮(zhèn)靜安神類中成藥和保健食品中是否添加褪黑素的現(xiàn)有方法主要有以下四種1、薄層色譜法樣品中的待測成分經(jīng)過甲醇提取，所得的供試品溶液與對照品溶液點在硅膠薄層板上，用展開劑展開，取出，晾干，置紫外燈254nm下檢視。在展開劑的作用下，由于不同物質(zhì)的遷移速度不同，不同物質(zhì)在薄層色譜板的不同位置以斑點的形式出現(xiàn)，根據(jù)待測樣品是否在與對照品相應(yīng)的位置上出現(xiàn)斑點這一實驗所得的現(xiàn)象來判斷待測樣品是否含有目標(biāo)成分。如果供試品溶液薄層色譜圖與褪黑素對照品相應(yīng)的位置上出現(xiàn)斑點，則提示樣品中可能含有褪黑素成分。薄層色譜法的優(yōu)點是不需要昂貴的分析儀器。該法缺點是(1)色譜分辨率較低， 中藥制劑成分復(fù)雜，干擾因素多，易將某些共存成分誤判為褪黑素成分，某些共存成分如果量較大且色譜遷移值與待測成分接近，則會干擾目標(biāo)成分的檢出。( 色譜展開和晾干的時間長，不足以滿足快速測定的要求。(3)薄層色譜板需要烘干并干燥存放，環(huán)境溫度和濕度對分離效果的影響較大。(4)需要有固定的場所，不適合作流動性大的現(xiàn)場檢測。(5)要求實驗人員有較好的經(jīng)驗。2、高效液相色譜法高效液相色譜法是常用的現(xiàn)代分析方法，在相同的色譜條件下，不同的物質(zhì)有不同的色譜保留時間。在相同的色譜條件下褪黑素對照品溶液與樣品提取所得供試品溶液分別進樣，根據(jù)色譜峰保留時間可判斷待測樣品是否含有褪黑素成分。高效液相色譜法的優(yōu)點是色譜分離效率高、靈敏度高。缺點是(1)儀器價格昂貴，樣品前處理時間長，色譜柱易受污染，分析成本高；( 當(dāng)共存的色譜峰保留時間與褪黑素色譜峰保留時間接近時容易做出錯誤的判斷；(3)儀器對使用環(huán)境的要求高，需要固定放置，不適合流動性大的現(xiàn)場檢測。3、高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法以高效液相色譜儀作為分離器、質(zhì)譜儀作為分析器的高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法適合于成分復(fù)雜、背景干擾嚴(yán)重的樣品分析，這種分析方法可提高檢測結(jié)果的可靠性。高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法是一種分析成本比高效液相色譜更高、操作更加復(fù)雜的分析方法。儀器對使用環(huán)境的要求更高，需要固定放置，不適合做流動性大的現(xiàn)場檢測。 這些檢驗只能在少數(shù)實驗室中進行，不易推廣使用。目前中成藥和保健食品行業(yè)尚無利用理化反應(yīng)快速篩查褪黑素的方法發(fā)布，對于藥店和基層藥檢單位，開發(fā)中成藥和保健食品中擅自添加褪黑素的快速篩查方法，在監(jiān)管現(xiàn)場對樣品進行快速分析，為中成藥和保健食品監(jiān)管及時提供證據(jù)，打擊不法分子的造假行為和保障人民群眾的用藥安全是非常必要的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種克服現(xiàn)有檢測技術(shù)的缺陷，分析成本低、不需要使用貴重分析儀器、專屬性強、靈敏度高、適用于現(xiàn)場檢驗中成藥和保健食品中是否添加褪黑素的快速檢驗方法。本發(fā)明的另一目的在于提供上述方法在制備褪黑素快速檢驗試劑盒的應(yīng)用。本發(fā)明的再一目的在于提供上述方法在檢驗中成藥和保健食品中是否添加褪黑素的篩查檢驗中的應(yīng)用。本發(fā)明中成藥和保健食品中摻雜褪黑素的快速測定方法，依次由以下步驟組成(1)用乙酸乙酯提取中成藥和保健食品中的褪黑素；(2)加入顯色劑對二甲基氨基肉桂醛。褪黑素化學(xué)名稱為N-乙?；?5-甲氧基色胺，屬于吲哚胺類激素，經(jīng)過試驗發(fā)現(xiàn)， 向褪黑素溶液中加入對二甲基氨基肉桂醛鹽酸乙醇溶液后，溶液變成藍綠色。
具體的技術(shù)方案如下1、取固態(tài)的中成藥或保健食品，研細，加入1 :3ml乙酸乙酯，振搖lmin，過濾，作為供試液；或量取液態(tài)的中成藥或保健食品，加入1 3ml乙酸乙酯，振搖lmin，靜置后取乙酸乙酯層，過濾，作為供試液。針對目前市場上的大多數(shù)中成藥和保健食品，推薦取樣量如下
權(quán)利要求
1.一種中成藥和保健食品中摻雜褪黑素的快速測定方法，依次由以下步驟組成(1)用乙酸乙酯提取中成藥或保健食品中的褪黑素；(2)向提取液中加入對二甲基氨基肉桂醛，觀察顏色。
2.如權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述對二甲基氨基肉桂醛用鹽酸乙醇溶液溶解。
3.如權(quán)利要求2所述的測定方法，其特征在于，所述鹽酸乙醇溶液的濃度為40% 70%。
4.如權(quán)利要求2或3所述的測定方法，其特征在于，所述對二甲基氨基肉桂醛鹽酸乙醇溶液的濃度為1 10mg/ml。
5.如權(quán)利要求1所述的測定方法，依次由以下步驟組成(1)取中成藥或保健食品，研細，加入乙酸乙酯，振蕩，過濾，濾液作為供試液；(2)取對二甲基氨基肉桂醛0.01 0. lg，加入40 % 70 %鹽酸乙醇溶液IOml，使之溶解，作為顯色試劑；(3)向所述供試液中加入對二甲基氨基肉桂醛鹽酸乙醇溶液顯色試劑，觀察顏色。
6.權(quán)利要求1所述的測定方法在制備褪黑素快速檢驗試劑盒中的應(yīng)用。
7.權(quán)利要求1所述的測定方法在中成藥和保健食品是否摻入褪黑素的篩查檢驗中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及褪黑素成分的檢測方法，具體公開了一種中成藥和保健食品中摻雜褪黑素的快速測定方法，由以下步驟組成(1)用乙酸乙酯提取中成藥或保健食品中的褪黑素；(2)向提取液中加入對二甲基氨基肉桂醛，觀察顏色。本發(fā)明檢驗方法快速、簡便，專屬性強、準(zhǔn)確率高，反應(yīng)靈敏，適用范圍廣，適用于現(xiàn)場檢驗中成藥和保健食品是否摻入了褪黑素。根據(jù)本發(fā)明制成褪黑素快速檢驗試劑盒，將能夠?qū)崿F(xiàn)現(xiàn)場快速篩查，以滿足廣大農(nóng)村地區(qū)和檢驗技術(shù)條件落后的中小城市開展中成藥和保健食品監(jiān)督檢驗的需要。
文檔編號G01N21/76GK102393391SQ201110316788
公開日2012年3月28日 申請日期2011年10月18日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月18日
發(fā)明者關(guān)瀟瀅, 殷果, 王玨, 王鐵杰, 肖麗和, 閆研, 韓東岐, 黎雪清 申請人:深圳市藥品檢驗所