專利名稱：己烯雌酚elisa檢測(cè)試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及動(dòng)物源性食品中藥物殘留量的檢測(cè)試劑盒，特別 是檢測(cè)動(dòng)物源性食品中己烯雌酚殘留量的試劑盒。 背景技術(shù)：
己烯雌酚是一種人工合成的非甾體雌激素，因其能促進(jìn)蛋白質(zhì)合 成代謝，使動(dòng)物日益增重，并能提高飼料功效，被大量非法應(yīng)用。但由于己烯雌酚存在明顯 的致癌性，可導(dǎo)致女性及其后代的生殖器官畸形和癌變，歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家已相繼禁止或嚴(yán) 格禁止使用。我國(guó)農(nóng)業(yè)部第235號(hào)文件中規(guī)定，動(dòng)物源性食品中己烯雌酚的殘留限量為不 得檢出。 目前，己烯雌酚的測(cè)定方法主要有生物測(cè)定法和氣相色譜法等。微生物測(cè)定法雖 然經(jīng)濟(jì)，操作簡(jiǎn)便，但在樣本中有其他微生物抑制劑存在時(shí)，其靈敏度和特異性受到限制； 氣相色譜分析法的樣本前處理及其測(cè)定操作繁瑣，費(fèi)用高，不宜于大量樣本篩查，推廣使用 受到限制。本發(fā)明試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)的新一代藥物殘留檢測(cè)產(chǎn)品，操作時(shí)間少， 能最大限度地減少操作誤差和工作強(qiáng)度。(三)實(shí)用新型內(nèi)容本實(shí)用新型所要解決的問(wèn)題是提供一種小巧輕便的己烯雌 酚殘留檢測(cè)試劑盒，其操作簡(jiǎn)便，檢測(cè)快速、準(zhǔn)確、靈敏度高，成本低，穩(wěn)定性好，需要的技術(shù) 含量不高，可進(jìn)行一次連續(xù)多個(gè)樣品中己烯雌酚含量的測(cè)定，減少了檢測(cè)樣本所需要的時(shí) 間。 本實(shí)用新型的技術(shù)方案是檢測(cè)動(dòng)物源性食品中己烯雌酚殘留量的酶聯(lián)免疫試劑 盒，包括盒體和盒內(nèi)的一塊96孔的酶標(biāo)板、一張蓋板膜、14瓶試劑和放試劑的下凹瓶位、一 個(gè)自封袋、一份說(shuō)明書和一份質(zhì)檢報(bào)告。采用96孔聚苯乙烯酶標(biāo)板作為固相載體，酶標(biāo)板 由外框支撐架及放置其上的可拆的12條酶標(biāo)反應(yīng)微孔條組成，每個(gè)可拆裝酶標(biāo)反應(yīng)微孔 條有8個(gè)反應(yīng)孔，在試劑盒酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被己烯雌酚偶聯(lián)抗原制成檢測(cè)板，放入真 空鋁箔袋中，盒體為硬紙盒，以塑料硬膜為蓋板膜，將6瓶0. 5ml梯度濃度的標(biāo)準(zhǔn)品濃縮液、 lml高濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液、12ml酶標(biāo)二抗、0. 8ml己烯雌酚抗體濃縮液、7ml顯色液A液、7ml 顯色液B液、7ml終止液、40ml濃縮洗滌液、50ml濃縮復(fù)溶液，試劑用不同大小、不同顏色的 塑料瓶和玻璃瓶盛裝并固定在泡沫塑料模具中與酶標(biāo)板、蓋板膜、自封袋、說(shuō)明書、質(zhì)檢報(bào) 告一同封裝在硬紙盒內(nèi)，以便于攜帶和運(yùn)輸。每一個(gè)試劑盒中的試劑足夠進(jìn)行96次測(cè)定 (包括標(biāo)準(zhǔn)分析孔)，既可進(jìn)行一次連續(xù)多個(gè)樣品的檢測(cè)，也可以將板孔拆開多次檢測(cè)。將 剩下的放回鋁箔袋中用自封袋密封，這樣可以保證試劑盒檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。檢測(cè)時(shí)，樣本 中的殘留的己烯雌酚藥物將和酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)己烯雌酚抗原競(jìng)爭(zhēng)抗己烯雌 酚抗體，加入酶標(biāo)二抗后，用TMB底物顯色，樣本吸光值與樣本中己烯雌酚的殘留量成負(fù)相 關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)，即可得出樣品中己烯雌酚藥物的殘留量，其 操作簡(jiǎn)便易行。 經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明本試劑盒具有很高的靈敏度雞肉/肝、豬肉/肝、蝦、魚樣品的最低 檢測(cè)限為0. 6 ii g/kg、飼料樣品最低檢測(cè)限為48 ii g/kg、尿液樣品最低檢測(cè)限為0. 6ug/L ; 組織樣品的回收率為80 % ± 10 % 、飼料樣品的回收率為90 % ± 10 % 、尿液樣品的回收率 為70% ±15% ;本試劑盒同炔雌醇、雌酚酮、苯甲酸己烯雌酚、雌三醇的交叉反應(yīng)率均小于0. 1%。相對(duì)于其他己烯雌酚殘留檢測(cè)方法，本試劑盒所需儀器較少，只需要酶標(biāo)儀、勻質(zhì) 器、振蕩器、微量移液器和氮?dú)獯蹈蓛x等實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器，同類實(shí)驗(yàn)室一般均有配備，所需 成本較低。 本實(shí)用新型的有益效果是能快速、簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確地用于己烯雌酚藥物殘留的 檢測(cè)。


圖1為本實(shí)用新型酶聯(lián)板的側(cè)面縱剖面圖(長(zhǎng)為8. 55cm); 圖2為本實(shí)用新型酶聯(lián)板的側(cè)面橫剖面圖(長(zhǎng)為12. 8cm); 圖3為本實(shí)用新型酶聯(lián)板的俯視圖； 圖4為本實(shí)用新型蓋板膜平面圖； 圖5為本實(shí)用新型試劑瓶縱剖面平面圖； 圖6為本實(shí)用新型固定泡沫模具的俯視圖； 圖7為本實(shí)用新型盒體與固定泡沫模具的側(cè)視圖。 參見(jiàn)附圖酶標(biāo)反應(yīng)微孔條(2)預(yù)包被己烯雌酚偶聯(lián)抗原(3)固定于酶標(biāo)板的外 框支撐架(1)上，酶標(biāo)反應(yīng)微孔條(2)可隨要求拆卸；蓋板膜(4)用于酶標(biāo)板恒溫箱內(nèi)反應(yīng) 時(shí)封蓋酶標(biāo)反應(yīng)微孔條(2)，蓋板膜大小與酶標(biāo)板橫切面大小一致；透明帽的半透明塑料 試劑瓶(5)用于封裝40ml濃縮洗滌液；藍(lán)色帽的半透明塑料試劑瓶(5)用于封裝50ml濃 縮復(fù)溶液；白色帽(6)的白色塑料試劑瓶(7)用于封裝7ml顯色液A液，紅色帽(6)的黑色 塑料試劑瓶(7)用于封裝7ml顯色液B液，黃色帽(6)的白色塑料試劑瓶(7)用于封裝7ml 終止液，綠色帽的白色塑料試劑瓶(8)用于封裝O. 8ml己烯雌酚抗體濃縮液，紅色帽的白色 塑料試劑瓶(8)用于封裝12ml酶標(biāo)二抗，白色帽的棕色玻璃試劑瓶(9)用于封裝0. 5ml/ 瓶的標(biāo)準(zhǔn)品溶液及l(fā)ml高濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液；泡沫塑料模具(10)有15個(gè)瓶位，放置位置依次 為40ml濃縮洗滌液瓶位(18) ， 50ml濃縮復(fù)溶液(11) ， 7ml顯色液A液瓶位(14) ， 7ml顯色 液B液瓶位(13) ， 7ml終止液瓶位(12) 、0. 8ml己烯雌酚抗體濃縮液瓶位(16) ， 12ml酶標(biāo)二 抗瓶位(15)，6種0. 5ml/瓶各種濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液及l(fā)瓶lml高濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液瓶位(17)， 盒體(19)是硬紙盒。
具體實(shí)施方式
: —、樣本的前處理 1.配液 配液1 :lmol/L氫氧化鈉溶液(飼料專用) 稱取4. 0g氫氧化鈉加去離子水溶解定容至100ml 配液2 :2mol/L氫氧化鈉溶液(組織專用) 稱取8. 0g氫氧化鈉加去離子水溶解定容至100ml 配液3 :乙月青-丙酮溶液(組織專用) 量取80ml無(wú)水乙腈到20ml丙酮中混勻 配液4 :6mol/L磷酸溶液[0026] 量取100ml濃磷酸到150ml去離子水中混勻 配液5:復(fù)溶工作液 用去離子水將10X濃縮復(fù)溶液按1 : 9體積比進(jìn)行稀釋(1份10X濃縮復(fù)溶液 +9份去離子水)用于抗體濃縮液的稀釋及提取樣本的復(fù)溶。 配液6 :洗滌工作液 用去離子水將20X濃縮洗滌液按1 : 19體積比進(jìn)行稀釋(1份20X濃縮洗滌液 +19份去離子水)用于酶標(biāo)板的洗滌，洗滌工作液在4t:環(huán)境可保存一個(gè)月。 配液7:標(biāo)準(zhǔn)品工作液 用復(fù)溶工作液將每瓶標(biāo)準(zhǔn)品濃縮液根據(jù)所需量按1 : 9體積比進(jìn)行稀釋(1份標(biāo)
準(zhǔn)品濃縮液+9份復(fù)溶工作液)標(biāo)準(zhǔn)品工作液在4t:環(huán)境可保存半天。 2.樣本前處理 組織(雞肉/肝、豬肉/肝、蝦、魚等)樣本 用均質(zhì)器均質(zhì)組織樣本；稱取2. 0±0. 05g均質(zhì)物至50ml聚苯乙烯離心管中，加入 6ml乙腈-丙酮溶液，用振蕩器振蕩10min，4000rpm/min， 15"C離心5min ;取出3ml上清液 至10ml干凈的玻璃試管中，于50 6(TC氮?dú)饬飨麓蹈?；加入O. 5ml三氯甲烷溶解干燥的殘 留物，用渦旋儀渦動(dòng)20s，加入2mol/L氫氧化鈉溶液2ml，用渦旋儀渦動(dòng)30s， 4000rpm/min， 15t:離心5min ;取lml上清液至10ml干凈的玻璃試管中，加入6mol/L磷酸溶液200 yl，用 渦旋儀渦動(dòng)5s ;加入3ml乙腈，用振蕩器振蕩10min，4000rpm/min，室溫離心5min，取上層 有機(jī)相l(xiāng)ml至10ml干凈的玻璃試管中，于50 6(TC氮?dú)饬飨麓蹈?；用lml復(fù)溶工作液溶 解干燥的殘留物；取50iU用于檢測(cè)。 尿液樣本 取2ml尿液至10ml玻璃離心管中，4000rpm/min，室溫離心10min，直至清亮；移取 lml清亮尿液至50ml干凈的聚苯乙烯離心管中，加入lmol/L氫氧化鈉溶液lml，用振蕩器 振蕩5min ;加入6mol/L磷酸溶液100iil，用渦旋儀渦動(dòng)30s ;再加入8ml三氯甲烷進(jìn)行萃 取，用振蕩器振蕩10min，4000rpm/min， 15。C離心5min ;去掉上層的水相，取下層有機(jī)相4ml 至10ml干凈的玻璃試管中，于50 6(TC氮?dú)饬飨麓蹈?；?ml復(fù)溶工作液溶解干燥的殘 留物；取50iU用于分析。 飼料樣本 稱取2.0士0.05g粉粹后的飼料樣本至50ml聚苯乙烯離心管中，加入8ml乙腈， 用振蕩器振蕩10min，4000rpm/min， 15"離心5min ;移取2ml上清液至10ml干凈的玻璃試 管中，于50 6(TC氮?dú)饬飨麓蹈?；加?. 5ml三氯甲烷溶解干燥的殘留物，用渦旋儀渦動(dòng) 20s，加入lmol/L氫氧化鈉溶液2ml，用渦旋儀渦動(dòng)30s，4000rpm/min， 15。C離心5min ;取 lml上清液至2ml干凈的聚苯乙烯離心管中，加入6mol/L磷酸溶液100iU，用渦旋儀渦動(dòng) 30s ;取25 iil至5ml干凈的聚苯乙烯離心管中，加入2975 y 1復(fù)溶工作液，用渦旋儀渦動(dòng)混 勻，取50iU用于分析。
注如添加的濃度除以稀釋倍數(shù)得到的值還大于8. 1時(shí)請(qǐng)擴(kuò)大稀釋倍數(shù)(如將
樣本稀釋到960倍)，避免檢測(cè)的結(jié)果超出曲線范圍導(dǎo)致結(jié)果偏大，使用軟件處理數(shù)據(jù)時(shí)一
定要使用樣本實(shí)際稀釋倍數(shù)。 二、使用試劑盒的操作步驟[0042] 1、從4t:冷藏環(huán)境中取出所需試劑，置室溫(20_25°C )平衡30min以上，注意每種 液體試劑使用前均須搖勻。 2、取出框架及需要數(shù)量的微孔，將不用的微孔放入自封袋，保存于2-8t:。 3、洗滌工作液在使用前也需回溫。 4、編號(hào)將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記 錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。 5、抗體工作液的稀釋將抗體濃縮液用復(fù)溶工作液按照1 : IO體積比進(jìn)行稀釋 (1份抗體濃縮液加入10份復(fù)溶工作液)。 6、加標(biāo)準(zhǔn)品工作液/樣本溶液加標(biāo)準(zhǔn)品工作液/樣本溶液50 ii 1/孔到各自的微 孔中，然后加抗體工作液50 iU/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37t:避光環(huán)境中反 應(yīng)30min。 7、洗板小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌工作液250 iU/孔，充分洗滌 4-5次，每次間隔IO秒，用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳 破)。 8、加酶標(biāo)二抗加入酶標(biāo)二抗100iil/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37t: 避光環(huán)境中反應(yīng)30min。取出重復(fù)洗板步驟7。 9、顯色加入底物液A液50iil/孔，再加B液50ia/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜 蓋板后置37t:避光環(huán)境中避光反應(yīng)15min。 10、測(cè)定加入終止液50 ii 1/孔，輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處(建議用 雙波長(zhǎng)450/630nm檢測(cè)，在5min內(nèi)讀完數(shù)據(jù))，測(cè)定每孔OD值。 三、結(jié)果判定 結(jié)果判定有兩種方法，粗略判定可用第l種方法，定量判定用第2種方法。注意樣 本吸光值與其所含己烯雌酚成負(fù)相關(guān)。 1、用樣本的平均吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)值比較即可得出其濃度范圍(yg/L)。假設(shè)樣 本1的吸光度值為0. 112，樣本2的吸光度值為0. 820，標(biāo)準(zhǔn)液吸光度值分別是Oii g/L為 1. 752 ;0. 1 y g/L為1. 320 ;0. 3 ii g/L為0. 897 ;0. 9 ii g/L為0. 462 ;2. 7 ii g/L為0. 189 ; 8. 1 y g/L為0. 058。則樣本1的濃度范圍是2. 7 y g/L_8. 1 y g/L再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù) 即可得出樣本中己烯雌酚殘留的濃度范圍；樣本2的濃度范圍是0. 3 ii g/L-O. 9 y g/L再乘 以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即可得出樣本中己烯雌酚殘留的濃度范圍。 2、定量分析 (1)百分吸光率的計(jì)算，標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸
光率等于標(biāo)準(zhǔn)品或樣品的百分吸光度值的平均值(雙孔)除以第一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)(O標(biāo)準(zhǔn))的吸
光度值，再乘以100%，艮卩 百分吸光度值(％ ) = B/B。X 100% B-標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值 B。-0 ii g/L標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值 (2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算 以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo)，以己烯雌酚標(biāo)準(zhǔn)品濃度(P g/L)的半對(duì)數(shù)為橫坐 標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的濃度，乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中己烯雌酚的實(shí)際殘留量。 若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算，更便于大量樣品的準(zhǔn)確、快速分析。 四、測(cè)定前的注意事項(xiàng) 1、室溫低于2(TC或試劑及樣本沒(méi)有回到室溫(20_25°C )會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的0D值 偏低。 2、在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性
不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。 3、每加一種試劑前需要將其搖勻。 4、反應(yīng)終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。 5、不要使用過(guò)了有效日期的試劑盒；也不要使用過(guò)了有效期的試劑盒中的任何試 劑，摻雜使用過(guò)了有效期的試劑盒會(huì)引起靈敏度的降低；不要交換使用不同批號(hào)試劑盒中 的試劑。 6、儲(chǔ)存條件 保存試劑盒于2-8 °C ，不要冷凍，將不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 和無(wú)色的發(fā)色劑對(duì)光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。 7、試劑變質(zhì)的跡象 發(fā)色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度(450/630nm)值 小于0. 5(A450nm < 0. 5)時(shí)，表示試劑可能變質(zhì)。 8、在加入底物液A液和底物液B液后，一般顯色時(shí)間為15min即可。若顏色較淺，
可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間到20min(或更長(zhǎng))，但不得超過(guò)30min。反之，則減短反應(yīng)時(shí)間。 9、該試劑盒最佳反應(yīng)溫度為37t:，溫度過(guò)高或過(guò)低將導(dǎo)致檢測(cè)吸光度值和靈敏度
發(fā)生變化。
權(quán)利要求一種檢測(cè)動(dòng)物源性食品中的己烯雌酚的ELISA檢測(cè)試劑盒，包括盒體和盒內(nèi)的一塊96孔的酶標(biāo)板、一張蓋板膜、14瓶試劑和放試劑的下凹瓶位、一個(gè)自封袋、一份說(shuō)明書和一份質(zhì)檢報(bào)告，其特征在于酶標(biāo)板是采用96孔試劑板作為固相載體，在試劑盒微孔條上預(yù)包被己烯雌酚偶聯(lián)抗原制成的檢測(cè)板，14瓶試劑分別為6瓶標(biāo)準(zhǔn)品濃縮液、1瓶高濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液、酶標(biāo)二抗、己烯雌酚抗體濃縮液、顯色液A液、顯色液B液、終止液、濃縮洗滌液、濃縮復(fù)溶液，下凹瓶位共15個(gè)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于盒體是硬紙盒；96孔的聚苯乙烯酶標(biāo) 板，放于真空鋁箔袋內(nèi)；蓋板膜是塑料硬膜；標(biāo)準(zhǔn)品濃縮液和高濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液均用白色 帽的棕色玻璃瓶，酶標(biāo)二抗用紅色帽的白色PE塑料瓶，己烯雌酚抗體濃縮液用綠色帽的白 色PE塑料瓶，顯色液A液用白色帽的白色PE塑料瓶，顯色液B液用紅色帽的黑色PE塑料 瓶，終止液用黃色帽的白色PE塑料瓶，濃縮洗滌液用透明帽的半透明PE塑料瓶，濃縮復(fù)溶 液用藍(lán)色帽的半透明PE塑料瓶；下凹瓶位由塑料泡沫制成。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述試劑盒，其特征在于酶標(biāo)板是由外框支撐架及放置其上的可 拆的12條酶標(biāo)反應(yīng)微孔條組成，每個(gè)可拆裝酶標(biāo)反應(yīng)微孔條有8個(gè)反應(yīng)孔，每個(gè)反應(yīng)孔預(yù) 包被己烯雌酚偶聯(lián)抗原；蓋板膜大小與酶標(biāo)板橫切面大小一致；標(biāo)準(zhǔn)品濃縮液6瓶，O. 5ml/ 瓶，濃度分別為0ii g/L，lii g/L，3ii g/L，9ii g/L，27ii g/L，81ii g/L ;高濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液1 瓶，lml ;酶標(biāo)二抗1瓶，12ml ;己烯雌酚抗體濃縮液1瓶，0. 8ml ;顯色液A液1瓶，7ml ;顯色 液B液1瓶，7ml ;終止液1瓶，7ml ;濃縮洗滌液1瓶，40ml ;濃縮復(fù)溶液1瓶，50ml。
專利摘要本實(shí)用新型涉及一種檢測(cè)動(dòng)物源性食品中己烯雌酚殘留的ELISA檢測(cè)試劑盒。該試劑盒組成包括96孔酶標(biāo)板、酶標(biāo)二抗、己烯雌酚抗體濃縮液、己烯雌酚6個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品濃縮液、底物顯色液、終止液、濃縮洗滌液、濃縮復(fù)溶液、高濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液、蓋板膜、自封袋、說(shuō)明書和質(zhì)檢報(bào)告。采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法，在酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原，樣本中殘留的己烯雌酚將和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗己烯雌酚抗體，加入酶標(biāo)二抗后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含己烯雌酚的含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)，即可得出樣品中己烯雌酚的殘留量。與儀器分析技術(shù)相比具有操作簡(jiǎn)便、費(fèi)用低廉、靈敏度高等特點(diǎn)。
文檔編號(hào)G01N33/545GK201535775SQ200920173200
公開日2010年7月28日 申請(qǐng)日期2009年8月28日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月28日
發(fā)明者萬(wàn)宇平, 何方洋, 余厚美, 馮才偉, 馮才茂, 劉玉梅, 李勇, 汪善良, 羅曉琴, 蒲曉容, 趙正苗 申請(qǐng)人:北京望爾康泰生物技術(shù)有限公司;北京望爾生物技術(shù)有限公司