專利名稱：一種四環(huán)素類藥物選擇性電極及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及電分析化學(xué)、化學(xué)傳感器技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種以分子印跡聚合物 微粒為敏感材料的四環(huán)素類藥物選擇性電極的制備方法。
背景技術(shù)：
四環(huán)素類藥物(tetracyclines，TCs)抗生素是由鏈霉菌發(fā)酵產(chǎn)生的一類廣譜抗 菌素，在化學(xué)結(jié)構(gòu)上屬氫化并四苯環(huán)衍生物。由于個別取代基或取代基位置的不同，分為四 環(huán)素(Tc)、土霉素(OTC)、金霉素(CTC)、強(qiáng)力霉素(DC)等。在畜禽、水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)中，TCs 被廣泛作為藥物添加劑，用于防治腸道感染和促生長。但因TCs 口服吸收良好，分布廣泛， 容易誘導(dǎo)耐藥菌株和導(dǎo)致動物源性食品的藥物殘留，對人體健康造成危害。許多國家和地 區(qū)對動物源性食品中TCs殘留實(shí)施例行監(jiān)控，并對其中TCs的最大殘留限量均有明確規(guī)定， 如歐盟為0. 3mg/kg，日本為0. 02mg/kg，我國為0. ImgAg0目前檢測食品中TCs殘留的方法主要有①微生物抑制法TCs抑制蠟樣芽孢桿菌 生長，在樣品溶液周圍產(chǎn)生抑菌圈，抑菌圈的大小與溶液中TCs濃度成正比。該方法不足之 處在于特異性不強(qiáng)、精密度不佳、靈敏度較低(檢出限>:3mg/kg)、檢測時間長。②酶聯(lián)免 疫法(ELISA)多采用間接競爭ELISA方法，在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原，樣本中的TCs將 和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競爭TCs抗體，加入酶標(biāo)記物后用底物顯色，樣本吸光值與 其TCs含量成負(fù)相關(guān)，通過與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較可得知TCs含量。該法在快速篩查中應(yīng)用最為 廣泛，靈敏度較高(約0. 001 0. 005mg/kg)，主要不足之處在于對樣品本身要求較高，不 適用于有顏色、混濁液和粘稠液，易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。③色譜法樣品經(jīng)色譜柱分離后各組 分依次進(jìn)入檢測器，TCs的結(jié)構(gòu)使其產(chǎn)生紫外、熒光等信號，信號強(qiáng)弱與TCs濃度成正比。其 中的高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜法(GC)，是目前國際公認(rèn)的定量檢測TCs的方法，該 方法的主要不足是樣品前處理復(fù)雜、需要專業(yè)的操作人員、儀器價(jià)格昂貴、分析成本高昂、 分析速度慢、不適宜于現(xiàn)場檢測等?；陔x子選擇性電極的電位分析法簡便快速，因電極對待測離子有一定選擇性， 可避免麻煩的分離干擾離子的步驟；對有顏色、混濁液和粘稠液，也可直接測量；電極響應(yīng) 快，多數(shù)情況下在幾到幾十分鐘內(nèi)得到結(jié)果；所需試樣量少，為mL甚至μ L級；儀器設(shè)備簡 單，電位差計(jì)即可，僅需二千元左右。其主要缺點(diǎn)在于檢測限偏高，為10_6 10_5mol/L，這 就造成該方法不能用于極低濃度樣品的分析，應(yīng)用范圍大大受限。采用離子選擇性電極測 定四環(huán)素類藥物，已有前人報(bào)道(Microchem. J.，1987，36(1) 107 ；海峽醫(yī)學(xué)，1994，4(3) 23.)，但靈敏度較低，檢測限約相當(dāng)于0. 9 2. ang/kg，難以達(dá)到分析要求。分子印跡技術(shù)是在模擬自然界中酶-底物及受體-抗體作用的基礎(chǔ)之上 發(fā)展起來的一項(xiàng)合成具有預(yù)選擇性固定相的技術(shù)。該技術(shù)制備的分子印跡聚合物 (Molecularlmprinting Polymers, MIP)，具有親和性與選擇性好、抗惡劣環(huán)境能力強(qiáng)、穩(wěn) 定性好、使用壽命長和應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)，已廣泛用于化學(xué)催化、固相萃取、色譜分離、緩 控釋給藥系統(tǒng)和化學(xué)傳感器等領(lǐng)域。之前已有制備四環(huán)素類藥物分子印跡聚合物的報(bào)道，但大多是用作固相萃取材料(Anal. Chim. Acta 2005,552 81 J. Membrane Sci. 2005， 254 :13 ;J. Chromatogr. B，2004，811 :191 ;S印· Puri. Technol. 2004,35 :215.；中國專 利，申請?zhí)?200810052541. 3 ；中國專利，申請?zhí)?200710070753. X ；中國專利，申請?zhí)?200810202645. 8)。有一項(xiàng)中國專利申請(申請?zhí)?200810012433. 3)，在電極基體表面覆蓋 經(jīng)過洗脫模板分子的四環(huán)素分子印跡聚合物膜，通過電阻的變化檢測水中四環(huán)素的濃度， 檢測限達(dá)0. 08mg/L，但檢測范圍僅0. 6 20mg/L。目前還沒有采用分子印跡聚合物微粒作 為敏感材料制備四環(huán)素類藥物選擇性電極的相關(guān)報(bào)道。針對上述幾種方法各自的不足，本發(fā)明提出了一種以分子印跡聚合物微粒為敏感 材料的四環(huán)素類藥物選擇性電極的制備方法，基于該選擇性電極，采用電位分析法，可以高 靈敏度地檢測樣品中的四環(huán)素類藥物。傳統(tǒng)的四環(huán)素類藥物選擇性電極的敏感材料通常 為四環(huán)素類藥物-四苯硼鈉締合物或四環(huán)素類藥物-磷鎢酸鈉締合物，當(dāng)樣品濃度極低時 (一般< 10_6mOl/L)，出現(xiàn)四環(huán)素類藥物從敏感膜向待測樣品溶液中擴(kuò)散的離子通量，導(dǎo)致 敏感膜表面的待測離子濃度高于本體濃度而無法進(jìn)一步降低檢測限。本發(fā)明提出的四環(huán) 素類藥物選擇性電極，采用分子印跡聚合物微粒為敏感材料，利用其對模板分子的特異識 別性，充當(dāng)“類離子載體”，實(shí)現(xiàn)對待測模板分子的選擇性檢測。因敏感膜中無待測模板分 子四環(huán)素類藥物，不存在上述的離子通量問題，故可有效降低電極檢測限至IX 10_8mOl/L， 約相當(dāng)于0. 005mg/L(mg/kg)，靈敏度較高；由于分子印跡聚合物微粒對模板分子的特異性 識別，故選擇性較高，常見干擾離子的選擇性系數(shù)均小于10_6 ；線性范圍較寬，為1 X ΙΟ"8 lX10-3mol/L ；可直接檢測有顏色溶液；檢測速度較快，低濃度樣品可于半小時內(nèi)完成；精 密度和準(zhǔn)確度較高；所使用儀器簡單，分析成本低廉；適合現(xiàn)場檢測。上述以分子印跡聚合 物微粒為敏感材料的四環(huán)素類藥物選擇性電極的制備方法在其他文獻(xiàn)或?qū)＠芯匆姷健?br>
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的首要技術(shù)問題是克服上述現(xiàn)有檢測樣品中四環(huán)素類藥物含量 的幾種方法之不足，包括靈敏度較低(檢出限> :3mg/kg)，特異性不強(qiáng)，精密度不佳，檢測 時間長，對樣品本身要求較高，不適用于有顏色、混濁液和粘稠液，易出現(xiàn)假陽性結(jié)果，樣品 前處理復(fù)雜，需要專業(yè)的操作人員，儀器價(jià)格昂貴，分析成本高昂，分析速度慢，不適宜于現(xiàn) 場檢測等，提供一種以分子印跡聚合物微粒為敏感材料的四環(huán)素類藥物選擇性電極，其靈 敏度高、選擇性高，可直接檢測有顏色溶液，檢測速度較快；精密度和準(zhǔn)確度較高；所使用 儀器簡單，分析成本低廉；本發(fā)明所要解決的另一個技術(shù)問題是提供相關(guān)的制備方法。為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明解決首要技術(shù)問題而所提出的技術(shù)方案是一種四環(huán)素類藥物選擇性電極，其特征在于該電極包括均勻分散有分子印跡聚合 物微粒的敏感膜、內(nèi)充體系、內(nèi)參比電極、電極桿、環(huán)氧樹脂；將均勻分散有分子印跡聚合物 微粒的敏感膜粘在電極桿下端部，電極桿內(nèi)加入有內(nèi)充體系，內(nèi)參比電極插入到電極桿內(nèi)， 并浸沒于內(nèi)充體系中，用環(huán)氧樹脂將電極桿上端部封口 ；新制備的電極置于10_6 10_8mol/ L鹽酸四環(huán)素類藥物溶液中活化。所述的四環(huán)素類藥物包括四環(huán)素(TC)、土霉素(OTC)、金霉素(CTC)或者強(qiáng)力霉素 (DC)。
所述的內(nèi)參比電極為Pt電極或Ag/AgCl電極。所述的電極桿為內(nèi)徑為0. 5cm Icm的PVC空心管。所述的內(nèi)充體系是通過以下方法獲得①將3 5g鈉型苯乙烯系陽離子交換樹脂加入50 IOOmL l(^mol/L 10、ol/ LNaCl和10_3mol/L 10_5mol/L鹽酸四環(huán)素類藥物混合溶液中，平衡12 Μι，取出后，置 于45 60°C烘箱中烘干；②將上述烘干的離子交換樹脂，加入10_3mol/L 10_5mol/L NaCl溶液中，構(gòu)成內(nèi) 充體系(2)，當(dāng)離子交換樹脂的質(zhì)量為200mg時，氯化鈉溶液的體積為4 8mL。所述的均勻分散有分子印跡聚合物微粒的敏感膜是通過以下方法獲得①將分子印跡聚合物微粒、PVC、四氫呋喃和增塑劑加入到容器中，密封后，混勻 成均勻混合物，其中，分子印跡聚合物微粒、PVC、四氫呋喃和增塑劑的質(zhì)量比為0. 5 3 1 2 10 20 1 3，增塑劑為以下增塑劑之一種鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)JP 苯二甲酸二辛酯(DOP)、鄰苯二甲酸二壬酯(DNP)、癸二酸二異辛酯(DOS)、鄰硝基苯基辛基 醚(o-NPOE)；②將上述均勻混合物倒入陪氏皿或表面皿中，待四氫呋喃揮發(fā)后，則形成厚度約 為0. 2 1mm、均勻分散有分子印跡聚合物微粒的敏感膜；所述的敏感材料分子印跡聚合物微粒的合成方法步驟依次如下①將模板分子四環(huán)素類藥物、金屬離子和功能單體甲基丙烯酸溶解在甲醇和水 的混合溶液中，超聲溶解后，加入交聯(lián)劑乙二醇二甲基丙烯酸酯和引發(fā)劑偶氮二異丁腈， 其中，模板分子四環(huán)素類藥物、金屬離子、功能單體、交聯(lián)劑的摩爾比為1 1 4 2 10 20 50;所使用的金屬離子為La3+；甲醇和水的混合溶液中，甲醇與水的體積比為 10 1 4，當(dāng)模板分子為0. Immol時，該混合溶液體積為3 SmL ；引發(fā)劑用量為功能單 體質(zhì)量的8 20% ；②將上述混合物置于安瓿瓶中，充入氮?dú)? lOmin，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下將反應(yīng)容器封 口，45 60°C下恒溫反應(yīng)12 24h得到聚合物；③將上述制得的分子印跡聚合物攪散，索式提取除去模板分子，45 60°C干燥分 子印跡聚合物12 36h，即得分子印跡聚合物微粒；其中索式提取所用萃取劑為乙腈和醋 酸的混合液，乙腈與醋酸的體積比為94 6 4 1。本發(fā)明所要解決的另一個技術(shù)問題是提供一種四環(huán)素類藥物選擇性電極的制備 方法，其特征在于將均勻分散有分子印跡聚合物微粒的敏感膜粘在電極桿上，在電極桿內(nèi) 加入內(nèi)充體系，將內(nèi)參比電極插入電極桿，浸沒于內(nèi)充體系中，用環(huán)氧樹脂封口，最后將新 制備的電極置于10_6 10_8mol/L鹽酸四環(huán)素類藥物溶液中活化0. 5 Mh，從而獲得以分 子印跡聚合物微粒為敏感材料的四環(huán)素類藥物選擇性電極；所使用的均勻分散有分子印跡聚合物微粒的敏感膜的制備方法，步驟依次如下①將分子印跡聚合物微粒、PVC、四氫呋喃和增塑劑加入到容器中，密封后，混勻 成均勻混合物，其中，分子印跡聚合物微粒、PVC、四氫呋喃和增塑劑的質(zhì)量比為0.5 3 1 2 10 20 1 3，增塑劑為以下增塑劑之一種鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)JP 苯二甲酸二辛酯(DOP)、鄰苯二甲酸二壬酯(DNP)、癸二酸二異辛酯(DOS)、鄰硝基苯基辛基 醚(o-NPOE)；
②將上述均勻混合物倒入陪氏皿或表面皿中，待四氫呋喃揮發(fā)后，則形成厚度約 為0. 2 1mm、均勻分散有分子印跡聚合物微粒的敏感膜(1)；所述的敏感材料分子印跡聚合物微粒的合成方法步驟依次如下①將模板分子四環(huán)素類藥物、金屬離子和功能單體甲基丙烯酸溶解在甲醇和水 的混合溶液中，超聲溶解后，加入交聯(lián)劑乙二醇二甲基丙烯酸酯和引發(fā)劑偶氮二異丁腈， 其中，模板分子四環(huán)素類藥物、金屬離子、功能單體、交聯(lián)劑的摩爾比為1 1 4 2 10 20 50;所使用的金屬離子為La3+；甲醇和水的混合溶液中，甲醇與水的體積比為 10 1 4，當(dāng)模板分子為0. Immol時，該混合溶液體積為3 SmL ；引發(fā)劑用量為功能單 體質(zhì)量的8 20% ；②將上述混合物置于安瓿瓶中，充入氮?dú)? lOmin，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下將反應(yīng)容器封 口，45 60°C下恒溫反應(yīng)12 24h得到聚合物；③將上述制得的分子印跡聚合物攪散，索式提取除去模板分子，45 60°C干燥分 子印跡聚合物12 36h，即得分子印跡聚合物微粒；其中索式提取所用萃取劑為乙腈和醋 酸的混合液，乙腈與醋酸的體積比為94 6 4 1;所述的內(nèi)充體系的配制方法為①將3 5g鈉型苯乙烯系陽離子交換樹脂加入50 IOOmL l(^mol/L 10、ol/ LNaCl和10_3mol/L 10_5mol/L鹽酸四環(huán)素類藥物混合溶液中，平衡12 Μι，取出后，置 于45 60°C烘箱中烘干；②將上述烘干的離子交換樹脂，加入10_3mOl/L 10_5mOl/L NaCl溶液中，構(gòu)成內(nèi) 充體系(2)，當(dāng)離子交換樹脂的質(zhì)量為200mg時，氯化鈉溶液的體積為4 8mL。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有下列技術(shù)效果(1)本發(fā)明中提出的四環(huán)素類藥物選擇性電極，采用分子印跡聚合物微粒為敏感 材料，利用其對模板分子的特異識別性，充當(dāng)“類離子載體”，實(shí)現(xiàn)對待測模板分子四環(huán)素 類藥物的選擇性檢測。因敏感膜中無待測模板分子四環(huán)素類藥物，不存在從敏感膜向待 測樣品溶液中擴(kuò)散的離子通量問題，故可有效降低電極檢測限至lX10_8mOl/L，約相當(dāng)于 0. 005mg/L (mg/kg)，靈敏度較高。(2)因分子印跡聚合物微粒對模板分子具有特異性識別作用，故選擇性較高，常見 干擾離子的選擇性系數(shù)均小于10_6。(3)以本發(fā)明中提出的四環(huán)素類藥物選擇性電極為指示電極，采用電位分析方法， 可以高靈敏度、高選擇性地檢測四環(huán)素類藥物，檢測速度快，能直接檢測有顏色溶液，低濃 度樣品也可于半小時內(nèi)完成，可實(shí)現(xiàn)四環(huán)素類藥物的現(xiàn)場檢測。(4)以本發(fā)明中提出的四環(huán)素類藥物選擇性電極為指示電極的電位分析方法，使 用儀器為電位差計(jì)，分析成本低廉，操作簡單，使用“傻瓜化”。


圖1為以分子印跡聚合物微粒為敏感材料的四環(huán)素類藥物選擇性電極示意圖；圖加-o為一系列不同制備方法獲得的四環(huán)素類藥物選擇性電極的工作曲線圖。
具體實(shí)施例方式下面對本發(fā)明的實(shí)施例作詳細(xì)說明本實(shí)施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進(jìn)行 實(shí)施，給出了詳細(xì)的實(shí)施方案和具體的操作過程，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不僅限于下述實(shí)施例。實(shí)施例1第一步四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的制備。將四環(huán)素0. lmmol、硝酸鑭0. Immol, 甲基丙烯酸0.8mmol溶解在5mL甲醇和水(9 1)的混合溶液中，超聲溶解后，加入乙二醇 二甲基丙烯酸酯5mmol和偶氮二異丁腈8mg，溶解后，加入到安瓿瓶中，通氮5 lOmin，在 氮?dú)夥毡Ｗo(hù)下封口，45°C水浴Mh，得到四環(huán)素分子印跡聚合物。將其攪散，索式提取除去四 環(huán)素，60°C干燥Mh，即得四環(huán)素分子印跡聚合物微粒。第二步均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜的制備。將125mg上述 四環(huán)素分子印跡聚合物微粒與IOOmg PVC、1. 15g四氫呋喃和225mg DBP混合均勻，再將此 混合物均勻鋪在直徑為4cm的陪氏皿中，待四氫呋喃揮發(fā)完后，即形成厚約0. 5mm、均勻分 散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜。第三步四環(huán)素選擇性電極的制備。①切下適當(dāng)大小、均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜，用5% PVC四 氫呋喃溶液粘在PVC電極桿上。②內(nèi)充體系的配制將5g鈉型苯乙烯系陽離子交換樹脂置于IOOmL 10_3mol/ LNaCl和10_4mol/L鹽酸四環(huán)素混合溶液中攪拌Mh，將離子交換樹脂取出60°C烘干。取 200mg上述離子交換樹脂加入電極桿中，然后滴入5mL lO^mol/L NaCl溶液。⑧將Pt電極插入電極桿中，浸入內(nèi)充體系液面以下，用環(huán)氧樹脂固定之并封口， 即制得四環(huán)素選擇性電極，如圖1。④將上述制得的電極置入10_8mol/L的鹽酸四環(huán)素溶液中活化12h。第四步工作曲線的繪制。①總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(TISAB)的配制將^mL冰醋酸、29. Og NaCl,6. Og檸檬酸 鈉依次加入燒杯中，適量水溶解后，去離子水定容至500mL容量瓶，用鹽酸調(diào)pH為2. 8。②精確稱取鹽酸四環(huán)素0. 1205g于燒杯中，適量水溶解后，加入50. OOmLTISAB，去 離子水定容至250mL棕色容量瓶，得10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液。取上述25. OOmL 10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn) 溶液于另一 250mL棕色容量瓶中，加入45. OOmL TISAB，用去離子水定容得10_4mol/L標(biāo)準(zhǔn) 溶液。以此方法得到濃度為 10、ol/L、10-6mol/L、l(Tmol/L、10-8mol/L、10-9mol/L 的一系列 標(biāo)準(zhǔn)溶液。③以上述制得的四環(huán)素選擇性電極為指示電極，Pt電極為參比電極，按照濃度從 低到高的順序，用SDC-III數(shù)字電位差綜合測定儀依次測量兩支電極形成的原電池電動勢 E。每次測試前，以0. OOlmol/L的鹽酸溶液、去離子水依次清洗電極各5分鐘。以四環(huán)素濃度 的對數(shù)值(Igc)為橫坐標(biāo)，以電動勢E為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線，線性范圍為10_3 10_8mol/ L，如圖2-a。第五步電極選擇性系數(shù)的測定。采用固定干擾離子混合溶液法測定電極對不同 離子和物質(zhì)的選擇性系數(shù)。其中 K+、Na+、NH4+、Ca2+、Mn2+、Zn2+、Ba2+、Mg2+、Sr2+、Fe2+、Fe3+、托 普霉素、甘氨酸、丙胺酸、賴氨酸、葡萄糖、麥芽糖、乳糖等常見干擾物質(zhì)的選擇性系數(shù)均小 于10Λ
實(shí)施例2第一步土霉素分子印跡聚合物微粒的制備。將土霉素0. lmmol、硝酸鑭0. Immol, 甲基丙烯酸0.8mmol溶解在5mL甲醇和水(9 1)的混合溶液中，超聲溶解后，加入乙二醇 二甲基丙烯酸酯5mmol和偶氮二異丁腈8mg，溶解后，加入到安瓿瓶中，通氮5 lOmin，在 氮?dú)夥毡Ｗo(hù)下封口，45°C水浴Mh，得到土霉素分子印跡聚合物。將其攪散，索式提取除去土 霉素，60°C干燥Mh，即得土霉素分子印跡聚合物微粒。第二步均勻分散有土霉素分子印跡聚合物微粒的敏感膜的制備。將125mg上述 土霉素分子印跡聚合物微粒與IOOmg PVC、1. 15g四氫呋喃和225mg DBP混合均勻，再將此 混合物均勻鋪在直徑為4cm的陪氏皿中，待四氫呋喃揮發(fā)完后，即形成厚約0. 5mm、均勻分 散有土霉素分子印跡聚合物微粒的敏感膜。第三步土霉素選擇性電極的制備。①切下適當(dāng)大小、均勻分散有土霉素分子印跡聚合物微粒的敏感膜，用5% PVC四 氫呋喃溶液粘在PVC電極桿上。②內(nèi)充體系的配制將5g鈉型苯乙烯系陽離子交換樹脂置于IOOmL 10_3mol/ LNaCl和10_4mol/L鹽酸土霉素混合溶液中攪拌Mh，將離子交換樹脂取出60°C烘干。取 200mg上述離子交換樹脂加入電極桿中，然后滴入5mL lO^mol/LNaCl溶液。③將Pt電極插入電極桿中，浸入內(nèi)充體系液面以下，用環(huán)氧樹脂固定之并封口， 即制得土霉素選擇性電極，如圖1。④將上述制得的電極置入10_8mOl/L的鹽酸土霉素溶液中活化12h。第四步工作曲線的繪制。①總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(TISAB)的配制將^mL冰醋酸、29. Og NaCl,6. Og檸檬酸 鈉依次加入燒杯中，適量水溶解后，去離子水定容至500mL容量瓶，用鹽酸調(diào)pH為2. 8。②精確稱取鹽酸土霉素0. 1242g于燒杯中，適量水溶解后，加入50. OOmLTISAB，去 離子水定容至250mL棕色容量瓶，得10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液。取上述25. OOmL 10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn) 溶液于另一 250mL棕色容量瓶中，加入45. OOmLTISAB，用去離子水定容得10_4mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶 液。以此方法得到濃度為 10、ol/L、10-6mol/L、l(Tmol/L、10-8mol/L、10-9mol/L 的一系列標(biāo) 準(zhǔn)溶液。③以上述制得的土霉素選擇性電極為指示電極，Pt電極為參比電極，按照濃度從 低到高的順序，用SDC-III數(shù)字電位差綜合測定儀依次測量兩支電極形成的原電池電動勢 E。每次測試前，以0. OOlmol/L的鹽酸溶液、去離子水依次清洗電極各5分鐘。以土霉素濃度 的對數(shù)值(Igc)為橫坐標(biāo)，以電動勢E為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線，線性范圍為10_3 10_8mol/ L，如圖2-b。第五步電極選擇性系數(shù)的測定。采用固定干擾離子混合溶液法測定電極對不同 離子和物質(zhì)的選擇性系數(shù)。其中 K+、Na+、NH4+、Ca2+、Mn2+、Zn2+、Ba2+、Mg2+、Sr2+、Fe2+、Fe3+、托 普霉素、甘氨酸、丙胺酸、賴氨酸、葡萄糖、麥芽糖、乳糖等常見干擾物質(zhì)的選擇性系數(shù)均小 于 10_6。實(shí)施例3第一步金霉素分子印跡聚合物微粒的制備。將金霉素0. lmmol、硝酸鑭0. lmmol、 甲基丙烯酸0.8mmol溶解在5mL甲醇和水(9 1)的混合溶液中，超聲溶解后，加入乙二醇二甲基丙烯酸酯5mmol和偶氮二異丁腈8mg，溶解后，加入到安瓿瓶中，通氮5 lOmin，在 氮?dú)夥毡Ｗo(hù)下封口，45°C水浴Mh，得到金霉素分子印跡聚合物。將其攪散，索式提取除去金 霉素，60°C干燥Mh，即得金霉素分子印跡聚合物微粒。第二步均勻分散有金霉素分子印跡聚合物微粒的敏感膜的制備。將125mg上述 金霉素分子印跡聚合物微粒與IOOmg PVC、1. 15g四氫呋喃和225mg DBP混合均勻，再將此 混合物均勻鋪在直徑為4cm的陪氏皿中，待四氫呋喃揮發(fā)完后，即形成厚約0. 5mm、均勻分 散有金霉素分子印跡聚合物微粒的敏感膜。第三步金霉素選擇性電極的制備。①切下適當(dāng)大小、均勻分散有金霉素分子印跡聚合物微粒的敏感膜，用5% PVC四 氫呋喃溶液粘在PVC電極桿上。②內(nèi)充體系的配制將5g鈉型苯乙烯系陽離子交換樹脂置于IOOmL IO^mol/ LNaCl和10_4mol/L鹽酸金霉素混合溶液中攪拌Mh，將離子交換樹脂取出60°C烘干。取 200mg上述離子交換樹脂加入電極桿中，然后滴入5mL lO^mol/LNaCl溶液。③將Pt電極插入電極桿中，浸入內(nèi)充體系液面以下，用環(huán)氧樹脂固定之并封口， 即制得金霉素選擇性電極，如圖1。④將上述制得的電極置入10_8mol/L的鹽酸金霉素溶液中活化12h。第四步工作曲線的繪制。①總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(TISAB)的配制將^mL冰醋酸、29. Og NaCl,6. Og檸檬酸 鈉依次加入燒杯中，適量水溶解后，去離子水定容至500mL容量瓶，用鹽酸調(diào)pH為2. 8。②精確稱取鹽酸金霉素0. 1288g于燒杯中，適量水溶解后，加入50. OOmLTISAB，去 離子水定容至250mL棕色容量瓶，得l(T3mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液。取上述25. OOmL 10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn) 溶液于另一 250mL棕色容量瓶中，加入45. OOmLTISAB，用去離子水定容得10_4mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶 液。以此方法得到濃度為 10、ol/L、10-6mol/L、l(Tmol/L、10-8mol/L、10-9mol/L 的一系列標(biāo) 準(zhǔn)溶液。③以上述制得的金霉素選擇性電極為指示電極，Pt電極為參比電極，按照濃度從 低到高的順序，用SDC-III數(shù)字電位差綜合測定儀依次測量兩支電極形成的原電池電動勢 E。每次測試前，以0. OOlmol/L的鹽酸溶液、去離子水依次清洗電極各5分鐘。以金霉素濃度 的對數(shù)值(Igc)為橫坐標(biāo)，以電動勢E為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線，線性范圍為10_3 10_8mol/ L，如圖2-c。第五步電極選擇性系數(shù)的測定。采用固定干擾離子混合溶液法測定電極對不同 離子和物質(zhì)的選擇性系數(shù)。其中 K+、Na+、NH4+、Ca2+、Mn2+、Zn2+、Ba2+、Mg2+、Sr2+、Fe2+、Fe3+、托 普霉素、甘氨酸、丙胺酸、賴氨酸、葡萄糖、麥芽糖、乳糖等常見干擾物質(zhì)的選擇性系數(shù)均小 于 10_6。實(shí)施例4第一步強(qiáng)力霉素分子印跡聚合物微粒的制備。將強(qiáng)力霉素0. lmmol、硝酸鑭 0. lmmol、甲基丙烯酸0.8mmol溶解在5mL甲醇和水(9 1)的混合溶液中，超聲溶解后，加 入乙二醇二甲基丙烯酸酯5mmol和偶氮二異丁腈8mg，溶解后，加入到安瓿瓶中，通氮5 IOmin,在氮?dú)夥毡Ｗo(hù)下封口，45°C水浴Mh，得到強(qiáng)力霉素分子印跡聚合物。將其攪散，索式 提取除去強(qiáng)力霉素，60°C干燥Mh，即得強(qiáng)力霉素分子印跡聚合物微粒。
第二步均勻分散有強(qiáng)力霉素分子印跡聚合物微粒的敏感膜的制備。將125mg上 述強(qiáng)力霉素分子印跡聚合物微粒與IOOmg PVC、1. 15g四氫呋喃和225mg DBP混合均勻，再 將此混合物均勻鋪在直徑為4cm的陪氏皿中，待四氫呋喃揮發(fā)完后，即形成厚約0. 5mm、均 勻分散有強(qiáng)力霉素分子印跡聚合物微粒的敏感膜。第三步強(qiáng)力霉素選擇性電極的制備。①切下適當(dāng)大小、均勻分散有強(qiáng)力霉素分子印跡聚合物微粒的敏感，用5% PVC四 氫呋喃溶液粘在PVC電極桿上。②內(nèi)充體系的配制將5g鈉型苯乙烯系陽離子交換樹脂置于IOOmL 10_3mol/ LNaCl和10_4mol/L鹽酸強(qiáng)力霉素混合溶液中攪拌Mh，將離子交換樹脂取出60°C烘干。取 200mg上述離子交換樹脂加入電極桿中，然后滴入5mL lO^mol/L NaCl溶液。③將Pt電極插入電極桿中，浸入內(nèi)充體系液面以下，用環(huán)氧樹脂固定之并封口， 即制得強(qiáng)力霉素選擇性電極，如圖1。④將上述制得的電極置入10_8mol/L的鹽酸強(qiáng)力霉素溶液中活化12h。第四步工作曲線的繪制。①總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(TISAB)的配制將^mL冰醋酸、29. Og NaCl,6. Og檸檬酸 鈉依次加入燒杯中，適量水溶解后，去離子水定容至500mL容量瓶，用鹽酸調(diào)pH為2. 8。②精確稱取鹽酸強(qiáng)力霉素0. 1202g于燒杯中，適量水溶解后，加入50. OOmLTISAB, 去離子水定容至250mL棕色容量瓶，得10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液。取上述25. OOmL 10_3mol/L標(biāo) 準(zhǔn)溶液于另一 250mL棕色容量瓶中，加入45. OOmLTISAB，用去離子水定容得10_4mol/L標(biāo)準(zhǔn) 溶液。以此方法得到濃度為 10、ol/L、10-6mol/L、l(Tmol/L、10-8mol/L、10-9mol/L 的一系列 標(biāo)準(zhǔn)溶液。③以上述制得的強(qiáng)力霉素選擇性電極為指示電極，Pt電極為參比電極，按照濃度 從低到高的順序，用SDC-III數(shù)字電位差綜合測定儀依次測量兩支電極形成的原電池電動 勢E。每次測試前，以O(shè).OOlmol/L的鹽酸溶液、去離子水依次清洗電極各5分鐘。以強(qiáng)力霉 素濃度的對數(shù)值(Igc)為橫坐標(biāo)，以電動勢E為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線，線性范圍為10_3 10_8mol/L，如圖 2-d。第五步電極選擇性系數(shù)的測定。采用固定干擾離子混合溶液法測定電極對不同 離子和物質(zhì)的選擇性系數(shù)。其中 K+、Na+、NH4\ Ca2+、Mn2+、Zn2\ Ba2+、Mg2+、Sr2+、Fe2\ 狗3+、托 普霉素、甘氨酸、丙胺酸、賴氨酸、葡萄糖、麥芽糖、乳糖等常見干擾物質(zhì)的選擇性系數(shù)均小 于 10_6。實(shí)施例5第一步四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的制備。將四環(huán)素0. lmmol、硝酸鑭0. Immol, 甲基丙烯酸0.8mmol溶解在5mL甲醇和水(9 1)的混合溶液中，超聲溶解后，加入乙二醇 二甲基丙烯酸酯2mmol和偶氮二異丁腈10mg，溶解后，加入到安瓿瓶中，通氮5 lOmin，在 氮?dú)夥毡Ｗo(hù)下封口，60°C水浴Mh，得到四環(huán)素分子印跡聚合物。將其攪散，索式提取除去四 環(huán)素，60°C干燥Mh，即得四環(huán)素分子印跡聚合物微粒。第二步均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜的制備。將125mg上述 四環(huán)素分子印跡聚合物微粒與IOOmg PVC、1. 15g四氫呋喃和225mg DBP混合均勻，再將此 混合物均勻鋪在直徑為4cm的陪氏皿中，待四氫呋喃揮發(fā)完后，即形成厚約0. 5mm、均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜。第三步四環(huán)素選擇性電極的制備。①切下適當(dāng)大小、均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜，用5% PVC四 氫呋喃溶液粘在PVC電極桿上。②內(nèi)充體系的配制將5g鈉型苯乙烯系陽離子交換樹脂置于IOOmL IO^mol/ LNaCl和10_4mol/L鹽酸四環(huán)素混合溶液中攪拌Mh，將離子交換樹脂取出60°C烘干。取 200mg上述離子交換樹脂加入電極桿中，然后滴入5mL lO^mol/LNaCl溶液。⑧將Pt電極插入電極桿中，浸入內(nèi)充體系液面以下，用環(huán)氧樹脂固定之并封口， 即制得四環(huán)素選擇性電極，如圖1。④將上述制得的電極置入10_8mol/L的鹽酸四環(huán)素溶液中活化12h。第四步工作曲線的繪制。①總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(TISAB)的配制將^mL冰醋酸、29. Og NaCl,6. Og檸檬酸 鈉依次加入燒杯中，適量水溶解后，去離子水定容至500mL容量瓶，用鹽酸調(diào)pH為2. 8。②精確稱取鹽酸四環(huán)素0. 1205g于燒杯中，適量水溶解后，加入50. OOmLTISAB，去 離子水定容至250mL棕色容量瓶，得10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液。取上述25. OOmL 10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn) 溶液于另一 250mL棕色容量瓶中，加入45. OOmLTISAB，用去離子水定容得10_4mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶 液。以此方法得到濃度為 10、ol/L、10-6mol/L、l(Tmol/L、10-8mol/L、10-9mol/L 的一系列標(biāo) 準(zhǔn)溶液。⑧以上述制得的四環(huán)素選擇性電極為指示電極，Pt電極為參比電極，按照濃度從 低到高的順序，用SDC-III數(shù)字電位差綜合測定儀依次測量兩支電極形成的原電池電動 勢E。每次測試前，以O(shè).OOlmol/L的鹽酸溶液、去離子水依次清洗電極各5分鐘。以四環(huán) 素濃度的對數(shù)值(Igc)為橫坐標(biāo)，以電動勢E為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線，線性范圍為10_3 1(T7· lmol/L，如圖 2-e。第五步電極選擇性系數(shù)的測定。采用固定干擾離子混合溶液法測定電極對不同 離子和物質(zhì)的選擇性系數(shù)。其中 K+、Na+、NH4\ Ca2+、Mn2+、Zn2\ Ba2+、Mg2+、Sr2+、Fe2\ 狗3+、托 普霉素、甘氨酸、丙胺酸、賴氨酸、葡萄糖、麥芽糖、乳糖等常見干擾物質(zhì)的選擇性系數(shù)均小 于 8Χ10Λ實(shí)施例6第一步四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的制備。將四環(huán)素0. lmmol、硝酸鑭0. Immol, 甲基丙烯酸0.4mmol溶解在5mL甲醇和水(9 1)的混合溶液中，超聲溶解后，加入乙二醇 二甲基丙烯酸酯2mmol和偶氮二異丁腈6mg，溶解后，加入到安瓿瓶中，通氮5 lOmin，在 氮?dú)夥毡Ｗo(hù)下封口，45°C水浴Mh，得到四環(huán)素分子印跡聚合物。將其攪散，索式提取除去四 環(huán)素，60°C干燥Mh，即得四環(huán)素分子印跡聚合物微粒。第二步均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜的制備。將125mg上述 四環(huán)素分子印跡聚合物微粒與IOOmg PVC、1. 15g四氫呋喃和225mg DBP混合均勻，再將此 混合物均勻鋪在直徑為4cm的陪氏皿中，待四氫呋喃揮發(fā)完后，即形成厚約0. 5mm、均勻分 散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜。第三步四環(huán)素選擇性電極的制備。①切下適當(dāng)大小、均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜，用5% PVC四氫呋喃溶液粘在PVC電極桿上。②內(nèi)充體系的配制將5g鈉型苯乙烯系陽離子交換樹脂置于IOOmL IO^mol/ LNaCl和10_4mol/L鹽酸四環(huán)素混合溶液中攪拌Mh，將離子交換樹脂取出60°C烘干。取 200mg上述離子交換樹脂加入電極桿中，然后滴入5mL lO^mol/LNaCl溶液。③將Pt電極插入電極桿中，浸入內(nèi)充體系液面以下，用環(huán)氧樹脂固定之并封口， 即制得四環(huán)素選擇性電極，如圖1。④將上述制得的電極置入10_8mOl/L的鹽酸四環(huán)素溶液中活化12h。第四步工作曲線的繪制。①總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(TISAB)的配制將^mL冰醋酸、29. Og NaCl,6. Og檸檬酸 鈉依次加入燒杯中，適量水溶解后，去離子水定容至500mL容量瓶，用鹽酸調(diào)pH為2. 8。②精確稱取鹽酸四環(huán)素0. 1205g于燒杯中，適量水溶解后，加入50.00mLTISAB，去 離子水定容至250mL棕色容量瓶，得10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液。取上述25. OOmL 10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn) 溶液于另一 250mL棕色容量瓶中，加入45. OOmL TISAB，用去離子水定容得10_4mol/L標(biāo)準(zhǔn) 溶液。以此方法得到濃度為 10、ol/L、10-6mol/L、l(Tmol/L、10-8mol/L、10-9mol/L 的一系列 標(biāo)準(zhǔn)溶液。③以上述制得的四環(huán)素選擇性電極為指示電極，Pt電極為參比電極，按照濃度從 低到高的順序，用SDC-III數(shù)字電位差綜合測定儀依次測量兩支電極形成的原電池電動 勢E。每次測試前，以O(shè).OOlmol/L的鹽酸溶液、去離子水依次清洗電極各5分鐘。以四環(huán) 素濃度的對數(shù)值(Igc)為橫坐標(biāo)，以電動勢E為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線，線性范圍為10_3 l(T7 8mol/L，如圖 2-f。第五步電極選擇性系數(shù)的測定。采用固定干擾離子混合溶液法測定電極對不同 離子和物質(zhì)的選擇性系數(shù)。其中 K+、Na+、NH4\ Ca2+、Mn2+、Zn2\ Ba2+、Mg2+、Sr2+、Fe2\ 狗3+、托 普霉素、甘氨酸、丙胺酸、賴氨酸、葡萄糖、麥芽糖、乳糖等常見干擾物質(zhì)的選擇性系數(shù)均小 于 3Χ10Λ實(shí)施例7第一步四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的制備。將四環(huán)素0. lmmol、硝酸鑭0. Immol, 甲基丙烯酸0.8mmol溶解在6mL甲醇和水(5 1)的混合溶液中，超聲溶解后，加入乙二醇 二甲基丙烯酸酯2mmol和偶氮二異丁腈10mg，溶解后，加入到安瓿瓶中，通氮5 lOmin，在 氮?dú)夥毡Ｗo(hù)下封口，60°C水浴Mh，得到四環(huán)素分子印跡聚合物。將其攪散，索式提取除去四 環(huán)素，60°C干燥Mh，即得四環(huán)素分子印跡聚合物微粒。第二步均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜的制備。將125mg上述 四環(huán)素分子印跡聚合物微粒與IOOmg PVC、1. 15g四氫呋喃和225mg DBP混合均勻，再將此 混合物均勻鋪在直徑為4cm的陪氏皿中，待四氫呋喃揮發(fā)完后，即形成厚約0. 5mm、均勻分 散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜。第三步四環(huán)素選擇性電極的制備。①切下適當(dāng)大小、均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜，用5% PVC四 氫呋喃溶液粘在PVC電極桿上。②內(nèi)充體系的配制將5g鈉型苯乙烯系陽離子交換樹脂置于IOOmL IO^mol/ LNaCl和10_4mol/L鹽酸四環(huán)素混合溶液中攪拌Mh，將離子交換樹脂取出60°C烘干。取200mg上述離子交換樹脂加入電極桿中，然后滴入5mL lO^mol/LNaCl溶液。③將Pt電極插入電極桿中，浸入內(nèi)充體系液面以下，用環(huán)氧樹脂固定之并封口， 即制得四環(huán)素選擇性電極，如圖1。④將上述制得的電極置入10_8mOl/L的鹽酸四環(huán)素溶液中活化12h。第四步工作曲線的繪制。①總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(TISAB)的配制將^mL冰醋酸、29. Og NaCl,6. Og檸檬酸 鈉依次加入燒杯中，適量水溶解后，去離子水定容至500mL容量瓶，用鹽酸調(diào)pH為2. 8。②精確稱取鹽酸四環(huán)素0. 1205g于燒杯中，適量水溶解后，加入50.00mLTISAB，去 離子水定容至250mL棕色容量瓶，得10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液。取上述25. OOmL 10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn) 溶液于另一 250mL棕色容量瓶中，加入45. OOmL TISAB，用去離子水定容得10_4mol/L標(biāo)準(zhǔn) 溶液。以此方法得到濃度為 10、ol/L、10-6mol/L、l(Tmol/L、10-8mol/L、10-9mol/L 的一系列 標(biāo)準(zhǔn)溶液。③以上述制得的四環(huán)素選擇性電極為指示電極，Pt電極為參比電極，按照濃度從 低到高的順序，用SDC-III數(shù)字電位差綜合測定儀依次測量兩支電極形成的原電池電動 勢E。每次測試前，以O(shè).OOlmol/L的鹽酸溶液、去離子水依次清洗電極各5分鐘。以四環(huán) 素濃度的對數(shù)值(Igc)為橫坐標(biāo)，以電動勢E為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線，線性范圍為10_3 10_7. iW 1/L，如圖 2-g。第五步電極選擇性系數(shù)的測定。采用固定干擾離子混合溶液法測定電極對不同 離子和物質(zhì)的選擇性系數(shù)。其中 K+、Na+、NH4\ Ca2+、Mn2+、Zn2\ Ba2+、Mg2+、Sr2+、Fe2\ 狗3+、托 普霉素、甘氨酸、丙胺酸、賴氨酸、葡萄糖、麥芽糖、乳糖等常見干擾物質(zhì)的選擇性系數(shù)均小 于 4Χ10Λ實(shí)施例8第一步四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的制備。將四環(huán)素0. lmmol、硝酸鑭0. Immol, 甲基丙烯酸0.8mmol溶解在5mL甲醇和水(9 1)的混合溶液中，超聲溶解后，加入乙二醇 二甲基丙烯酸酯5mmol和偶氮二異丁腈8mg，溶解后，加入到安瓿瓶中，通氮5 lOmin，在 氮?dú)夥毡Ｗo(hù)下封口，45°C水浴Mh，得到四環(huán)素分子印跡聚合物。將其攪散，索式提取除去四 環(huán)素，60°C干燥Mh，即得四環(huán)素分子印跡聚合物微粒。第二步均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜的制備。將50mg上述四 環(huán)素分子印跡聚合物微粒與IOOmg PVC、1. 15g四氫呋喃和225mg DBP混合均勻，再將此混 合物均勻鋪在直徑為4cm的陪氏皿中，待四氫呋喃揮發(fā)完后，即形成厚約0. 2mm、均勻分散 有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜。第三步四環(huán)素選擇性電極的制備。①切下適當(dāng)大小、均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜，用5% PVC四 氫呋喃溶液粘在PVC電極桿。②內(nèi)充體系的配制將5g鈉型苯乙烯系陽離子交換樹脂置于IOOmL IO^mol/ LNaCl和10_4mol/L鹽酸四環(huán)素混合溶液中攪拌Mh，將離子交換樹脂取出60°C烘干。取 200mg上述離子交換樹脂加入電極桿中，然后滴入5mL lO^mol/LNaCl溶液。③將Pt電極插入電極桿中，浸入內(nèi)充體系液面以下，用環(huán)氧樹脂固定之并封口， 即制得四環(huán)素選擇性電極，如圖1。
④將上述制得的電極置入10_8mOl/L的鹽酸四環(huán)素溶液中活化12h。第四步工作曲線的繪制。①總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(TISAB)的配制將^mL冰醋酸、29. Og NaCl,6. Og檸檬酸 鈉依次加入燒杯中，適量水溶解后，去離子水定容至500mL容量瓶，用鹽酸調(diào)pH為2. 8。②精確稱取鹽酸四環(huán)素0. 1205g于燒杯中，適量水溶解后，加入50. OOmLTISAB，去 離子水定容至250mL棕色容量瓶，得10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液。取上述25. OOmL 10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn) 溶液于另一 250mL棕色容量瓶中，加入45. OOmLTISAB，用去離子水定容得10_4mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶 液。以此方法得到濃度為 10、ol/L、10-6mol/L、l(Tmol/L、10-8mol/L、10-9mol/L 的一系列標(biāo) 準(zhǔn)溶液。③以上述制得的四環(huán)素選擇性電極為指示電極，Pt電極為參比電極，按照濃度從 低到高的順序，用SDC-III數(shù)字電位差綜合測定儀依次測量兩支電極形成的原電池電動勢 E。每次測試前，以0. OOlmol/L的鹽酸溶液、去離子水依次清洗電極各5分鐘。以四環(huán)素濃度 的對數(shù)值(Igc)為橫坐標(biāo)，以電動勢E為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線，線性范圍為10_3 10_8mol/ L，如圖2-h。第五步電極選擇性系數(shù)的測定。采用固定干擾離子混合溶液法測定電極對不同 離子和物質(zhì)的選擇性系數(shù)。其中 K+、Na+、NH4+、Ca2+、Mn2+、Zn2+、Ba2+、Mg2+、Sr2+、Fe2+、Fe3+、托 普霉素、甘氨酸、丙胺酸、賴氨酸、葡萄糖、麥芽糖、乳糖等常見干擾物質(zhì)的選擇性系數(shù)均小 于 2Χ10Λ實(shí)施例9第一步四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的制備。將四環(huán)素0. lmmol、硝酸鑭0. Immol, 甲基丙烯酸0.8mmol溶解在5mL甲醇和水(9 1)的混合溶液中，超聲溶解后，加入乙二醇 二甲基丙烯酸酯5mmol和偶氮二異丁腈8mg，溶解后，加入到安瓿瓶中，通氮5 lOmin，在 氮?dú)夥毡Ｗo(hù)下封口，45°C水浴Mh，得到四環(huán)素分子印跡聚合物。將其攪散，索式提取除去四 環(huán)素，60°C干燥Mh，即得四環(huán)素分子印跡聚合物微粒。第二步均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜的制備。將300mg上述 四環(huán)素分子印跡聚合物微粒與IOOmg PVC、1. 15g四氫呋喃和225mg DBP混合均勻，再將此 混合物均勻鋪在直徑為4cm的陪氏皿中，待四氫呋喃揮發(fā)完后，即形成厚約1. 0mm、均勻分 散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜。第三步四環(huán)素選擇性電極的制備。①切下適當(dāng)大小、均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜，用5% PVC四 氫呋喃溶液粘在PVC電極桿。②內(nèi)充體系的配制將5g鈉型苯乙烯系陽離子交換樹脂置于IOOmL 10_3mol/ LNaCl和10_4mol/L鹽酸四環(huán)素混合溶液中攪拌Mh，將離子交換樹脂取出60°C烘干。取 200mg上述離子交換樹脂加入電極桿中，然后滴入5mL lO^mol/LNaCl溶液。③將Pt電極插入電極桿中，浸入內(nèi)充體系液面以下，用環(huán)氧樹脂固定之并封口， 即制得四環(huán)素選擇性電極，如圖1。④將上述制得的電極置入10_8mol/L的鹽酸四環(huán)素溶液中活化Mh。第四步工作曲線的繪制。①總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(TISAB)的配制將^mL冰醋酸、29. Og NaCl,6. Og檸檬酸鈉依次加入燒杯中，適量水溶解后，去離子水定容至500mL容量瓶，用鹽酸調(diào)pH為2. 8。②精確稱取鹽酸四環(huán)素0. 1205g于燒杯中，適量水溶解后，加入50. OOmLTISAB，去 離子水定容至250mL棕色容量瓶，得10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液。取上述25. OOmL 10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn) 溶液于另一 250mL棕色容量瓶中，加入45. OOmLTISAB，用去離子水定容得10_4mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶 液。以此方法得到濃度為 10、ol/L、10-6mol/L、l(Tmol/L、10-8mol/L、10-9mol/L 的一系列標(biāo) 準(zhǔn)溶液。③以上述制得的四環(huán)素選擇性電極為指示電極，Pt電極為參比電極，按照濃度從 低到高的順序，用SDC-III數(shù)字電位差綜合測定儀依次測量兩支電極形成的原電池電動 勢E。每次測試前，以O(shè).OOlmol/L的鹽酸溶液、去離子水依次清洗電極各5分鐘。以四環(huán) 素濃度的對數(shù)值(Igc)為橫坐標(biāo)，以電動勢E為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線，線性范圍為10_3 10_7· 1IiioVL,如圖 2-i。第五步電極選擇性系數(shù)的測定。采用固定干擾離子混合溶液法測定電極對不同 離子和物質(zhì)的選擇性系數(shù)。其中 K+、Na+、NH4\ Ca2+、Mn2+、Zn2\ Ba2+、Mg2+、Sr2+、Fe2\ 狗3+、托 普霉素、甘氨酸、丙胺酸、賴氨酸、葡萄糖、麥芽糖、乳糖等常見干擾物質(zhì)的選擇性系數(shù)均小 于 5Χ10Λ實(shí)施例10第一步四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的制備。將四環(huán)素0. lmmol、硝酸鑭0. Immol, 甲基丙烯酸0.8mmol溶解在5mL甲醇和水(9 1)的混合溶液中，超聲溶解后，加入乙二醇 二甲基丙烯酸酯5mmol和偶氮二異丁腈8mg，溶解后，加入到安瓿瓶中，通氮5 lOmin，在 氮?dú)夥毡Ｗo(hù)下封口，45°C水浴Mh，得到四環(huán)素分子印跡聚合物。將其攪散，索式提取除去四 環(huán)素，60°C干燥Mh，即得四環(huán)素分子印跡聚合物微粒。第二步均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜的制備。將125mg上述 四環(huán)素分子印跡聚合物微粒與200mg PVC、1. 5g四氫呋喃和225mg DBP混合均勻，再將此混 合物均勻鋪在直徑為4cm的陪氏皿中，待四氫呋喃揮發(fā)完后，即形成厚約0. 6mm、均勻分散 有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜。第三步四環(huán)素選擇性電極的制備。①切下適當(dāng)大小、均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜，用5% PVC四 氫呋喃溶液粘在PVC電極桿上。②內(nèi)充體系的配制將5g鈉型苯乙烯系陽離子交換樹脂置于IOOmL IO^mol/ LNaCl和10_4mol/L鹽酸四環(huán)素混合溶液中攪拌Mh，將離子交換樹脂取出60°C烘干。取 200mg上述離子交換樹脂加入電極桿中，然后滴入5mL lO^mol/LNaCl溶液。③將Pt電極插入電極桿中，浸入內(nèi)充體系液面以下，用環(huán)氧樹脂固定之并封口， 即制得四環(huán)素選擇性電極，如圖1。④將上述制得的電極置入10_8mol/L的鹽酸四環(huán)素溶液中活化Mh。第四步工作曲線的繪制。①總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(TISAB)的配制將^mL冰醋酸、29. Og NaCl,6. Og檸檬酸 鈉依次加入燒杯中，適量水溶解后，去離子水定容至500mL容量瓶，用鹽酸調(diào)pH為2. 8。②精確稱取鹽酸四環(huán)素0. 1205g于燒杯中，適量水溶解后，加入50. OOmLTISAB，去 離子水定容至250mL棕色容量瓶，得10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液。取上述25. OOmL 10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液于另一 250mL棕色容量瓶中，加入45. OOmL TISAB，用去離子水定容得10_4mol/L標(biāo)準(zhǔn) 溶液。以此方法得到濃度為 10、ol/L、10-6mol/L、l(Tmol/L、10-8mol/L、10-9mol/L 的一系列 標(biāo)準(zhǔn)溶液。③以上述制得的四環(huán)素選擇性電極為指示電極，Pt電極為參比電極，按照濃度從 低到高的順序，用SDC-III數(shù)字電位差綜合測定儀依次測量兩支電極形成的原電池電動 勢E。每次測試前，以O(shè).OOlmol/L的鹽酸溶液、去離子水依次清洗電極各5分鐘。以四環(huán) 素濃度的對數(shù)值(Igc)為橫坐標(biāo)，以電動勢E為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線，線性范圍為10_3 KT.W/L，如圖 2-j0第五步電極選擇性系數(shù)的測定。采用固定干擾離子混合溶液法測定電極對不同 離子和物質(zhì)的選擇性系數(shù)。其中 K+、Na+、NH4\ Ca2+、Mn2+、Zn2\ Ba2+、Mg2+、Sr2+、Fe2\ 狗3+、托 普霉素、甘氨酸、丙胺酸、賴氨酸、葡萄糖、麥芽糖、乳糖等常見干擾物質(zhì)的選擇性系數(shù)均小 于 6Χ10Λ實(shí)施例11第一步四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的制備。將四環(huán)素0. lmmol、硝酸鑭0. Immol, 甲基丙烯酸0.8mmol溶解在5mL甲醇和水(9 1)的混合溶液中，超聲溶解后，加入乙二醇 二甲基丙烯酸酯5mmol和偶氮二異丁腈8mg，溶解后，加入到安瓿瓶中，通氮5 lOmin，在 氮?dú)夥毡Ｗo(hù)下封口，45°C水浴Mh，得到四環(huán)素分子印跡聚合物。將其攪散，索式提取除去四 環(huán)素，60°C干燥Mh，即得四環(huán)素分子印跡聚合物微粒。第二步均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜的制備。將125mg上述 四環(huán)素分子印跡聚合物微粒與IOOmg PVC、1. 15g四氫呋喃和200mg DOS混合均勻，再將此 混合物均勻鋪在直徑為4cm的陪氏皿中，待四氫呋喃揮發(fā)完后，即形成厚約0. 5mm、均勻分 散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜。第三步四環(huán)素選擇性電極的制備。①切下適當(dāng)大小、均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜，用5% PVC四 氫呋喃溶液粘在PVC電極桿上。②內(nèi)充體系的配制將5g鈉型苯乙烯系陽離子交換樹脂置于IOOmL IO^mol/ LNaCl和10_4mol/L鹽酸四環(huán)素混合溶液中攪拌Mh，將離子交換樹脂取出60°C烘干。取 200mg上述離子交換樹脂加入電極桿中，然后滴入5mL lO^mol/L NaCl溶液。③將Pt電極插入電極桿中，浸入內(nèi)充體系液面以下，用環(huán)氧樹脂固定之并封口， 即制得四環(huán)素選擇性電極，如圖1。④將上述制得的電極置入10_8mol/L的鹽酸四環(huán)素溶液中活化12h。第四步工作曲線的繪制。①總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(TISAB)的配制將^mL冰醋酸、29. Og NaCl,6. Og檸檬酸 鈉依次加入燒杯中，適量水溶解后，去離子水定容至500mL容量瓶，用鹽酸調(diào)pH為2. 8。②精確稱取鹽酸四環(huán)素0. 1205g于燒杯中，適量水溶解后，加入50. OOmLTISAB，去 離子水定容至250mL棕色容量瓶，得10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液。取上述25. OOmL 10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn) 溶液于另一 250mL棕色容量瓶中，加入45. OOmL TISAB，用去離子水定容得10_4mol/L標(biāo)準(zhǔn) 溶液。以此方法得到濃度為 10、ol/L、10-6mol/L、l(Tmol/L、10-8mol/L、10-9mol/L 的一系列 標(biāo)準(zhǔn)溶液。
③以上述制得的四環(huán)素選擇性電極為指示電極，Pt電極為參比電極，按照濃度從 低到高的順序，用SDC-III數(shù)字電位差綜合測定儀依次測量兩支電極形成的原電池電動勢 E。每次測試前，以0. OOlmol/L的鹽酸溶液、去離子水依次清洗電極各5分鐘。以四環(huán)素濃度 的對數(shù)值(Igc)為橫坐標(biāo)，以電動勢E為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線，線性范圍為10_3 10_8mol/ L，如圖2-k。第五步電極選擇性系數(shù)的測定。采用固定干擾離子混合溶液法測定電極對不同 離子和物質(zhì)的選擇性系數(shù)。其中 K+、Na+、NH4+、Ca2+、Mn2+、Zn2+、Ba2+、Mg2+、Sr2+、Fe2+、Fe3+、托 普霉素、甘氨酸、丙胺酸、賴氨酸、葡萄糖、麥芽糖、乳糖等常見干擾物質(zhì)的選擇性系數(shù)均小 于 10_6。實(shí)施例12第一步四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的制備。將四環(huán)素0. lmmol、硝酸鑭0. Immol, 甲基丙烯酸0.8mmol溶解在5mL甲醇和水(9 1)的混合溶液中，超聲溶解后，加入乙二醇 二甲基丙烯酸酯5mmol和偶氮二異丁腈8mg，溶解后，加入到安瓿瓶中，通氮5 lOmin，在 氮?dú)夥毡Ｗo(hù)下封口，45°C水浴Mh，得到四環(huán)素分子印跡聚合物。將其攪散，索式提取除去四 環(huán)素，60°C干燥Mh，即得四環(huán)素分子印跡聚合物微粒。第二步均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜的制備。將125mg上述 四環(huán)素分子印跡聚合物微粒與IOOmg PVC、1. 15g四氫呋喃和250mg o-NPOE混合均勻，再將 此混合物均勻鋪在直徑為4cm的陪氏皿中，待四氫呋喃揮發(fā)完后，即形成厚約0. 5mm、均勻 分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜。第三步四環(huán)素選擇性電極的制備。①切下適當(dāng)大小、均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜，用5% PVC四 氫呋喃溶液粘在PVC電極桿上。②內(nèi)充體系的配制將5g鈉型苯乙烯系陽離子交換樹脂置于IOOmL IO^mol/ LNaCl和10_4mol/L鹽酸四環(huán)素混合溶液中攪拌Mh，將離子交換樹脂取出60°C烘干。取 200mg上述離子交換樹脂加入電極桿中，然后滴入5mL lO^mol/LNaCl溶液。③將Pt電極插入電極桿中，浸入內(nèi)充體系液面以下，用環(huán)氧樹脂固定之并封口， 即制得四環(huán)素選擇性電極，如圖1。④將上述制得的電極置入10_8mOl/L的鹽酸四環(huán)素溶液中活化12h。第四步工作曲線的繪制。①總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(TISAB)的配制將^mL冰醋酸、29. Og NaCl,6. Og檸檬酸 鈉依次加入燒杯中，適量水溶解后，去離子水定容至500mL容量瓶，用鹽酸調(diào)pH為2. 8。②精確稱取鹽酸四環(huán)素0. 1205g于燒杯中，適量水溶解后，加入50. OOmLTISAB，去 離子水定容至250mL棕色容量瓶，得10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液。取上述25. OOmL 10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn) 溶液于另一 250mL棕色容量瓶中，加入45. OOmLTISAB，用去離子水定容得10_4mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶 液。以此方法得到濃度為 10、ol/L、10-6mol/L、l(Tmol/L、10-8mol/L、10-9mol/L 的一系列標(biāo) 準(zhǔn)溶液。③以上述制得的四環(huán)素選擇性電極為指示電極，Pt電極為參比電極，按照濃度從 低到高的順序，用SDC-III數(shù)字電位差綜合測定儀依次測量兩支電極形成的原電池電動 勢E。每次測試前，以O(shè).OOlmol/L的鹽酸溶液、去離子水依次清洗電極各5分鐘。以四環(huán)素濃度的對數(shù)值(Igc)為橫坐標(biāo)，以電動勢E為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線，線性范圍為10_3 l(T7 8mol/L，如圖 2-1。第五步電極選擇性系數(shù)的測定。采用固定干擾離子混合溶液法測定電極對不同 離子和物質(zhì)的選擇性系數(shù)。其中 K+、Na+、NH4\ Ca2+、Mn2+、Zn2\ Ba2+、Mg2+、Sr2+、Fe2\ 狗3+、托 普霉素、甘氨酸、丙胺酸、賴氨酸、葡萄糖、麥芽糖、乳糖等常見干擾物質(zhì)的選擇性系數(shù)均小 于 3Χ10Λ實(shí)施例13第一步四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的制備。將四環(huán)素0. lmmol、硝酸鑭0. Immol, 甲基丙烯酸0.8mmol溶解在5mL甲醇和水(9 1)的混合溶液中，超聲溶解后，加入乙二醇 二甲基丙烯酸酯5mmol和偶氮二異丁腈8mg，溶解后，加入到安瓿瓶中，通氮5 lOmin，在 氮?dú)夥毡Ｗo(hù)下封口，45°C水浴Mh，得到四環(huán)素分子印跡聚合物。將其攪散，索式提取除去四 環(huán)素，60°C干燥Mh，即得四環(huán)素分子印跡聚合物微粒。第二步均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜的制備。將125mg上述 四環(huán)素分子印跡聚合物微粒與IOOmg PVC、1. 15g四氫呋喃和225mg DBP混合均勻，再將此 混合物均勻鋪在直徑為4cm的陪氏皿中，待四氫呋喃揮發(fā)完后，即形成厚約0. 5mm、均勻分 散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜。第三步四環(huán)素選擇性電極的制備。①切下適當(dāng)大小、均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜，用5% PVC四 氫呋喃溶液粘在PVC電極桿上。②內(nèi)充體系的配制將3g鈉型苯乙烯系陽離子交換樹脂置于IOOmL 10_5mol/ LNaCl和10_5mol/L鹽酸四環(huán)素混合溶液中攪拌Mh，將離子交換樹脂取出60°C烘干。取 200mg上述離子交換樹脂加入電極桿中，然后滴入5mL 10_4mol/L NaCl溶液。③將Pt電極插入電極桿中，浸入內(nèi)充體系液面以下，用環(huán)氧樹脂固定之并封口， 即制得四環(huán)素選擇性電極。④將上述制得的電極置入10_8mol/L的鹽酸四環(huán)素溶液中活化12h。第四步工作曲線的繪制。①總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(TISAB)的配制將^mL冰醋酸、29. Og NaCl,6. Og檸檬酸 鈉依次加入燒杯中，適量水溶解后，去離子水定容至500mL容量瓶，用鹽酸調(diào)pH為2. 8。②精確稱取鹽酸四環(huán)素0. 1205g于燒杯中，適量水溶解后，加入50. OOmLTISAB，去 離子水定容至250mL棕色容量瓶，得10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液。取上述25. OOmL 10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn) 溶液于另一 250mL棕色容量瓶中，加入45. OOmL TISAB，用去離子水定容得10_4mol/L標(biāo)準(zhǔn) 溶液。以此方法得到濃度為 10、ol/L、10-6mol/L、l(Tmol/L、10-8mol/L、10-9mol/L 的一系列 標(biāo)準(zhǔn)溶液。③以上述制得的四環(huán)素選擇性電極為指示電極，Pt電極為參比電極，按照濃度從 低到高的順序，用SDC-III數(shù)字電位差綜合測定儀依次測量兩支電極形成的原電池電動 勢E。每次測試前，以O(shè).OOlmol/L的鹽酸溶液、去離子水依次清洗電極各5分鐘。以四環(huán) 素濃度的對數(shù)值(Igc)為橫坐標(biāo)，以電動勢E為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線，線性范圍為10_3 10-7」mol/L，如圖 2-m。第五步電極選擇性系數(shù)的測定。采用固定干擾離子混合溶液法測定電極對不同離子和物質(zhì)的選擇性系數(shù)。其中 K+、Na+、NH4+、Ca2+、Mn2+、Zn2+、Ba2+、Mg2+、Sr2+、Fe2+、Fe3+、托 普霉素、甘氨酸、丙胺酸、賴氨酸、葡萄糖、麥芽糖、乳糖等常見干擾物質(zhì)的選擇性系數(shù)均小 于 2Χ1(Γ5。實(shí)施例14第一步四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的制備。將四環(huán)素0. lmmol、硝酸鑭0. Immol, 甲基丙烯酸0.8mmol溶解在5mL甲醇和水(9 1)的混合溶液中，超聲溶解后，加入乙二醇 二甲基丙烯酸酯5mmol和偶氮二異丁腈8mg，溶解后，加入到安瓿瓶中，通氮5 lOmin，在 氮?dú)夥毡Ｗo(hù)下封口，45°C水浴Mh，得到四環(huán)素分子印跡聚合物。將其攪散，索式提取除去四 環(huán)素，60°C干燥Mh，即得四環(huán)素分子印跡聚合物微粒。第二步均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜的制備。將125mg上述 四環(huán)素分子印跡聚合物微粒與IOOmg PVC、1. 15g四氫呋喃和225mg DBP混合均勻，再將此 混合物均勻鋪在直徑為4cm的陪氏皿中，待四氫呋喃揮發(fā)完后，即形成厚約0. 5mm、均勻分 散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜。第三步四環(huán)素選擇性電極的制備。①切下適當(dāng)大小、均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜，用5% PVC四 氫呋喃溶液粘在PVC電極桿。②內(nèi)充體系的配制將5g鈉型苯乙烯系陽離子交換樹脂置于IOOmL IO^mol/ LNaCl和10_4mol/L鹽酸四環(huán)素混合溶液中攪拌Mh，將離子交換樹脂取出60°C烘干。取 IOOmg上述離子交換樹脂加入電極桿中，然后滴入4mL lO^mol/LNaCl溶液。③將Pt電極插入電極桿中，浸入內(nèi)充體系液面以下，用環(huán)氧樹脂固定之并封口， 即制得四環(huán)素選擇性電極，如圖1。④將上述制得的電極置入10_8mol/L的鹽酸四環(huán)素溶液中活化Mh。第四步工作曲線的繪制。①總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(TISAB)的配制將^mL冰醋酸、29. Og NaCl,6. Og檸檬酸 鈉依次加入燒杯中，適量水溶解后，去離子水定容至500mL容量瓶，用鹽酸調(diào)pH為2. 8。②精確稱取鹽酸四環(huán)素0. 1205g于燒杯中，適量水溶解后，加入50. OOmLTISAB，去 離子水定容至250mL棕色容量瓶，得10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液。取上述25. OOmL 10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn) 溶液于另一 250mL棕色容量瓶中，加入45. OOmLTISAB，用去離子水定容得10_4mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶 液。以此方法得到濃度為 10、ol/L、10-6mol/L、l(Tmol/L、10-8mol/L、10-9mol/L 的一系列標(biāo) 準(zhǔn)溶液。③以上述制得的四環(huán)素選擇性電極為指示電極，Pt電極為參比電極，按照濃度從 低到高的順序，用SDC-III數(shù)字電位差綜合測定儀依次測量兩支電極形成的原電池電動勢 E。每次測試前，以0. OOlmol/L的鹽酸溶液、去離子水依次清洗電極各5分鐘。以四環(huán)素濃度 的對數(shù)值(Igc)為橫坐標(biāo)，以電動勢E為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線，線性范圍為10_3 10_8mol/ L，如圖2-n。第五步電極選擇性系數(shù)的測定。采用固定干擾離子混合溶液法測定電極對不同 離子和物質(zhì)的選擇性系數(shù)。其中 K+、Na+、NH4+、Ca2+、Mn2+、Zn2+、Ba2+、Mg2+、Sr2+、Fe2+、Fe3+、托 普霉素、甘氨酸、丙胺酸、賴氨酸、葡萄糖、麥芽糖、乳糖等常見干擾物質(zhì)的選擇性系數(shù)均小 于10Λ
實(shí)施例15第一步四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的制備。將四環(huán)素0. lmmol、硝酸鑭0. Immol, 甲基丙烯酸0.8mmol溶解在5mL甲醇和水(9 1)的混合溶液中，超聲溶解后，加入乙二醇 二甲基丙烯酸酯5mmol和偶氮二異丁腈8mg，溶解后，加入到安瓿瓶中，通氮5 lOmin，在 氮?dú)夥毡Ｗo(hù)下封口，45°C水浴Mh，得到四環(huán)素分子印跡聚合物。將其攪散，索式提取除去四 環(huán)素，60°C干燥Mh，即得四環(huán)素分子印跡聚合物微粒。第二步均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜的制備。將125mg上述 四環(huán)素分子印跡聚合物微粒與IOOmg PVC、1. 15g四氫呋喃和225mg DBP混合均勻，再將此 混合物均勻鋪在直徑為4cm的陪氏皿中，待四氫呋喃揮發(fā)完后，即形成厚約0. 5mm、均勻分 散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜。第三步四環(huán)素選擇性電極的制備。①切下適當(dāng)大小、均勻分散有四環(huán)素分子印跡聚合物微粒的敏感膜，用5% PVC四 氫呋喃溶液粘在PVC電極桿上。②內(nèi)充體系的配制將5g鈉型苯乙烯系陽離子交換樹脂置于IOOmL IO^mol/ LNaCl和10_4mol/L鹽酸四環(huán)素混合溶液中攪拌Mh，將離子交換樹脂取出60°C烘干。取 200mg上述離子交換樹脂加入電極桿中，然后滴入5mL lO^mol/L NaCl溶液。③將Pt電極插入電極桿中，浸入內(nèi)充體系液面以下，用環(huán)氧樹脂固定之并封口， 即制得四環(huán)素選擇性電極，如圖1。④將上述制得的電極置入10_6mOl/L的鹽酸四環(huán)素溶液中活化12h。第四步工作曲線的繪制。①總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑(TISAB)的配制將^mL冰醋酸、29. Og NaCl,6. Og檸檬酸 鈉依次加入燒杯中，適量水溶解后，去離子水定容至500mL容量瓶，用鹽酸調(diào)pH為2. 8。②精確稱取鹽酸四環(huán)素0. 1205g于燒杯中，適量水溶解后，加入50. OOmLTISAB，去 離子水定容至250mL棕色容量瓶，得10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液。取上述25. OOmL 10_3mol/L標(biāo)準(zhǔn) 溶液于另一 250mL棕色容量瓶中，加入45. OOmLTISAB，用去離子水定容得10_4mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶 液。以此方法得到濃度為 10、ol/L、10-6mol/L、l(Tmol/L、10-8mol/L、10-9mol/L 的一系列標(biāo) 準(zhǔn)溶液。③以上述制得的四環(huán)素選擇性電極為指示電極，Pt電極為參比電極，按照濃度從 低到高的順序，用SDC-III數(shù)字電位差綜合測定儀依次測量兩支電極形成的原電池電動 勢E。每次測試前，以O(shè).OOlmol/L的鹽酸溶液、去離子水依次清洗電極各5分鐘。以四環(huán) 素濃度的對數(shù)值(Igc)為橫坐標(biāo)，以電動勢E為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線，線性范圍為10_3 l(T7 8mol/L，如圖 2-0。第五步電極選擇性系數(shù)的測定。采用固定干擾離子混合溶液法測定電極對不同 離子和物質(zhì)的選擇性系數(shù)。其中 K+、Na+、NH4\ Ca2+、Mn2+、Zn2\ Ba2+、Mg2+、Sr2+、Fe2\ 狗3+、托 普霉素、甘氨酸、丙胺酸、賴氨酸、葡萄糖、麥芽糖、乳糖等常見干擾物質(zhì)的選擇性系數(shù)均小 于 7Χ10Λ
權(quán)利要求
1.一種四環(huán)素類藥物選擇性電極，其特征在于該電極包括均勻分散有分子印跡聚合 物微粒的敏感膜(1)、內(nèi)充體系O)、內(nèi)參比電極(3)、電極桿G)、環(huán)氧樹脂(5)；將均勻分 散有分子印跡聚合物微粒的敏感膜⑴粘在電極桿⑷下端部，電極桿⑷內(nèi)加入有內(nèi)充 體系0)，內(nèi)參比電極⑶插入到電極桿⑷內(nèi)，并浸沒于內(nèi)充體系⑵中，用環(huán)氧樹脂(5) 將電極桿上端部封口 ；新制備的電極置于10_6 10_8mol/L的鹽酸四環(huán)素類藥物溶液中活 化。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的四環(huán)素類藥物選擇性電極，其特征在于所述的四環(huán)素類藥 物包括四環(huán)素(TC)、土霉素(OTC)、金霉素(CTC)或者強(qiáng)力霉素(DC)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以分子印跡聚合物微粒為敏感材料的四環(huán)素類藥物選擇性 電極，其特征在于所述的內(nèi)參比電極⑶為Pt電極或Ag/AgCl電極。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的四環(huán)素類藥物選擇性電極，其特征在于所述的電極桿(4) 為內(nèi)徑為0. 5cm Icm的PVC空心管。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的四環(huán)素類藥物選擇性電極，其特征在于所述的內(nèi)充體系(2) 是通過以下方法獲得①將3 5g鈉型苯乙烯系陽離子交換樹脂加入50 IOOmL10、ol/L 10_5mol/ LNaCl和10_3mol/L 10_5mol/L鹽酸四環(huán)素類藥物混合溶液中，平衡12 Μι，取出后，置 于45 60°C烘箱中烘干；②將上述烘干的離子交換樹脂，加入10_3mol/L 10_5mol/LNaCl溶液中，構(gòu)成內(nèi)充體 系(2)，當(dāng)離子交換樹脂的質(zhì)量為200mg時，氯化鈉溶液的體積為4 8mL。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的四環(huán)素類藥物選擇性電極，其特征在于所述的均勻分散有 分子印跡聚合物微粒的敏感膜(1)是通過以下方法獲得①將分子印跡聚合物微粒、PVC、四氫呋喃和增塑劑加入到容器中，密封后，混勻成均 勻混合物，其中，分子印跡聚合物微粒、PVC、四氫呋喃和增塑劑的質(zhì)量比為0.5 3 1 2 10 20 1 3，增塑劑為以下增塑劑之一種鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)、鄰苯二 甲酸二辛酯(DOP)、鄰苯二甲酸二壬酯(DNP)、癸二酸二異辛酯(DOS)、鄰硝基苯基辛基醚 (o-NPOE)；②將上述均勻混合物倒入陪氏皿或表面皿中，待四氫呋喃揮發(fā)后，則形成厚度約為 0. 2 1mm、均勻分散有分子印跡聚合物微粒的敏感膜(1)；所述的敏感材料分子印跡聚合物微粒的合成方法步驟依次如下①將模板分子四環(huán)素類藥物、金屬離子和功能單體甲基丙烯酸溶解在甲醇和水的混合 溶液中，超聲溶解后，加入交聯(lián)劑乙二醇二甲基丙烯酸酯和引發(fā)劑偶氮二異丁腈，其中，模 板分子四環(huán)素類藥物、金屬離子、功能單體、交聯(lián)劑的摩爾比為1 1 4 2 10 20 50;所使用的金屬離子為La3+；甲醇和水的混合溶液中，甲醇與水的體積比為10 1 4， 當(dāng)模板分子為0. Immol時，該混合溶液體積為3 SmL ；引發(fā)劑用量為功能單體質(zhì)量的8 20% ；②將上述混合物置于安瓿瓶中，充入氮?dú)? lOmin，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下將反應(yīng)容器封口， 45 60°C下恒溫反應(yīng)12 24h得到聚合物；③將上述制得的分子印跡聚合物攪散，索式提取除去模板分子，45 60°C干燥分子印 跡聚合物12 36h，即得分子印跡聚合物微粒；其中索式提取所用萃取劑為乙腈和醋酸的混合液，乙腈與醋酸的體積比為94 6 4 1。
7.—種四環(huán)素類藥物選擇性電極的制備方法，其特征在于將均勻分散有分子印跡聚 合物微粒的敏感膜⑴粘在電極桿⑷上，在電極桿⑷內(nèi)加入內(nèi)充體系O)，將內(nèi)參比電 極(3)插入電極桿G)，浸沒于內(nèi)充體系( 中，用環(huán)氧樹脂( 封口，最后將新制備的電極 置于10_6 10_8mol/L鹽酸四環(huán)素類藥物溶液中活化0. 5 Mh，從而獲得以分子印跡聚合 物微粒為敏感材料的四環(huán)素類藥物選擇性電極。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的四環(huán)素類藥物選擇性電極的制備方法，其特征在于所使用的均勻分散有分子印跡聚合物微粒的敏感膜(1)的制備方法，步驟依次如下①將分子印跡聚合物微粒、PVC、四氫呋喃和增塑劑加入到容器中，密封后，混勻成均 勻混合物，其中，分子印跡聚合物微粒、PVC、四氫呋喃和增塑劑的質(zhì)量比為0.5 3 1 2 10 20 1 3，增塑劑為以下增塑劑之一種鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)、鄰苯二 甲酸二辛酯(DOP)、鄰苯二甲酸二壬酯(DNP)、癸二酸二異辛酯(DOS)、鄰硝基苯基辛基醚 (o-NPOE)；②將上述均勻混合物倒入陪氏皿或表面皿中，待四氫呋喃揮發(fā)后，則形成厚度約為 0. 2 1mm、均勻分散有分子印跡聚合物微粒的敏感膜(1)。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的四環(huán)素類藥物選擇性電極的制備方法，其特征在于所述的 敏感材料分子印跡聚合物微粒的合成方法步驟依次如下①將模板分子四環(huán)素類藥物、金屬離子和功能單體甲基丙烯酸溶解在甲醇和水的混合 溶液中，超聲溶解后，加入交聯(lián)劑乙二醇二甲基丙烯酸酯和引發(fā)劑偶氮二異丁腈，其中，模 板分子四環(huán)素類藥物、金屬離子、功能單體、交聯(lián)劑的摩爾比為1 1 4 2 10 20 50;所使用的金屬離子為La3+；甲醇和水的混合溶液中，甲醇與水的體積比為10 1 4， 當(dāng)模板分子為0. Immol時，該混合溶液體積為3 SmL ；引發(fā)劑用量為功能單體質(zhì)量的8 20% ；②將上述混合物置于安瓿瓶中，充入氮?dú)? lOmin，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下將反應(yīng)容器封口， 45 60°C下恒溫反應(yīng)12 24h得到聚合物；③將上述制得的分子印跡聚合物攪散，索式提取除去模板分子，45 60°C干燥分子印 跡聚合物12 36h，即得分子印跡聚合物微粒；其中索式提取所用萃取劑為乙腈和醋酸的 混合液，乙腈與醋酸的體積比為94 6 4 1。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的四環(huán)素類藥物選擇性電極的制備方法，其特征在于所述的 內(nèi)充體系O)的配制方法為①將3 5g鈉型苯乙烯系陽離子交換樹脂加入50 IOOmL10、ol/L 10_5mol/ LNaCl和10_3mol/L 10_5mol/L鹽酸四環(huán)素類藥物混合溶液中，平衡12 Μι，取出后，置 于45 60°C烘箱中烘干；②將上述烘干的離子交換樹脂，加入10_3mol/L 10_5mol/LNaCl溶液中，構(gòu)成內(nèi)充體 系(2)，當(dāng)離子交換樹脂的質(zhì)量為200mg時，氯化鈉溶液的體積為4 8mL。
全文摘要
本發(fā)明提出一種四環(huán)素類藥物選擇性電極及其制備方法，該電極由均勻分散有分子印跡聚合物微粒的敏感膜、內(nèi)充體系、內(nèi)參比電極、電極桿、環(huán)氧樹脂組合構(gòu)成。該電極以分子印跡聚合物微粒為敏感材料，利用其“類離子載體”的特點(diǎn)和對四環(huán)素類藥物的特異識別性，實(shí)現(xiàn)對四環(huán)素類藥物的選擇性檢測。靈敏度較高，檢測限達(dá)1×10-8mol/L；選擇性較高，選擇性系數(shù)均小于10-6；檢測速度較快，使用儀器簡單，分析成本低廉；可實(shí)現(xiàn)極低濃度四環(huán)素類藥物的現(xiàn)場檢測。
文檔編號G01N27/333GK102116759SQ200910156698
公開日2011年7月6日 申請日期2009年12月30日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月30日
發(fā)明者張會娜, 段靜, 王邃, 蓋盼盼, 郭智勇, 魏丹毅 申請人:寧波大學(xué)