專利名稱：人類泌尿生殖道支原體感染檢測(cè)方法及其診斷試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及對(duì)由支原體引起的感染、特別是人類泌尿生殖道感染的 檢測(cè)。本發(fā)明提供了用于診斷由大范圍的支原體菌株造成的泌尿生殖道 感染的試劑盒。
背景技術(shù)：
支原體是常常在人和動(dòng)植物中造成隱性感染的獨(dú)特細(xì)菌群。在動(dòng)物 中，它們作為發(fā)病和死亡的病原體而臭名昭著。在人類中，許多紊亂與 支原體感染相關(guān)， 一個(gè)實(shí)例是其準(zhǔn)確診斷仍然很難的支原體肺炎或常見性傳播感染[見例如，Merck Manual,第17版，(1999) 1326頁(yè)]。在文獻(xiàn)中積累了越來越多與支原體發(fā)病機(jī)理有關(guān)的證據(jù)，但還沒有一般性可用 的能顯著促進(jìn)泌尿生殖道支原體疾病的分析的完善測(cè)試。WO 07/033171 描述了基于與RNA探針的雜交的對(duì)樣品中支原體存在的可能檢測(cè)。WO 94/03810描述了基于來自患者樣品的抗支原體抗體對(duì)標(biāo)準(zhǔn)支原體培養(yǎng)物 的效果來診斷受試對(duì)象中此前支原體感染的方法。EP 278340描述了肺炎 支原體(il々cop/o^wa p"om7om'ae)膜抗原在診斷支原體感染中的應(yīng)用?？?靠快速的診斷測(cè)試的缺乏使得很難鑒定作為病因的泌尿生殖道支原體， 從而造成低估其在疾病中的作用和因此缺乏診斷和適當(dāng)?shù)闹委?。特別是，己顯示泌尿生殖道支原體參與許多疾病和病理狀態(tài)，包括 妊娠并發(fā)癥(早產(chǎn)、習(xí)慣性流產(chǎn))、早產(chǎn)兒的發(fā)病和死亡、不孕(主要是男 性因素)、尿道炎和前列腺炎、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎以及近來的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。 泌尿生殖道支原體在人類疾病的發(fā)展中的作用僅在過去十年才出現(xiàn)，并 且由于標(biāo)準(zhǔn)化抗原的缺乏而使得很難確定支原體血清特征，而市場(chǎng)上沒 有可利用的實(shí)用測(cè)試使其更加復(fù)雜。本發(fā)明人也已展示了測(cè)定抗支原體 抗體在診斷感染和預(yù)測(cè)數(shù)種人類病理的風(fēng)險(xiǎn)中的重要性和重大意義[見例4如，Horowitz S.等:J. Rheumatol, 27 (2000) 2747-2753]。盡管各國(guó)引入了各種"自制"技術(shù)，但目前尚未獲得有效且可靠的 用于檢測(cè)臨床樣品中人類泌尿生殖道支原體的通用診斷測(cè)試。如本領(lǐng)域 技術(shù)人員所知，可利用的技術(shù)受到各種缺陷的影響，包括例如有限的靈 敏度和有限的特異性(出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果)。因此，本發(fā)明的一個(gè)目 的是提供用于檢測(cè)由支原體造成的泌尿生殖道感染的可一般性適用的試齊lj l^l. o本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供用于通過合適的抗原來檢測(cè)由特定支原 體造成的泌尿生殖道感染的方法。本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供具有更少量的假陽(yáng)性和/或假陰性結(jié)果 的用于診斷支原體泌尿生殖道感染的方法和試劑盒。本發(fā)明的又一個(gè)目的是提供能區(qū)分僅由支原體建群但未發(fā)展疾病的 人與發(fā)展了感染/傳染病/感染后病理的人的方法和試劑盒。本發(fā)明的其它目的和優(yōu)點(diǎn)將隨著說明的展開而出現(xiàn)。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了通過測(cè)定取自待診斷患者的生物樣品中特定抗支原體 抗體的水平來檢測(cè)泌尿生殖道支原體感染的方法，所述方法包括i)提供 來自多種病理狀態(tài)的患有支原體泌尿生殖道感染的患者的多種生物標(biāo) 本；ii)從獲自患者的所述數(shù)個(gè)支原體菌株制備全細(xì)胞制備物；iii)提供(來 自各個(gè)種的)多種支原體抗原決定簇以用作患者樣品中的特定抗體的檢測(cè) 材料；iv)使所述混合抗原結(jié)合至免疫測(cè)試表面上；v)使患者生物樣品與 步驟iv所述表面結(jié)合，從而使最終存在于所述樣品中的抗支原體抗體結(jié) 合至所述表面上；和vi)使所述表面與用于檢測(cè)人類抗體的試劑接觸。因 而，通過測(cè)定相同種的廣譜(多種)特定抗體來進(jìn)行感染的確定。所述免疫 測(cè)試表面是指用于本領(lǐng)域中的蛋白結(jié)合表面，該表面通常包含具有對(duì)蛋 白的強(qiáng)親和力且即使在洗滌步驟期間也不將其釋放的聚合物；所述聚合 物可以包含經(jīng)修飾的天然材料或合成材料。所述多個(gè)人株優(yōu)選包含各自 感染有一種或多種選自由解脲脲原體(t/ ap/oswa w "/^/cww)、微小脲原"[本(t/rea/ /asma / arvww)、 人型支原體(Afycop/aswa /zom/w&)、 發(fā)酵支原體 (A^co/ /oy腿/erwe虛—禾口生殖支原體(聊c。/ /a膽a )^纖 (3//畫)組成的組 中的支原體物種的至少6位患者。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，將 通過離心從(各個(gè)菌株的)支原體培養(yǎng)物獲得的所述支原體細(xì)胞濃縮團(tuán)塊 超聲處理并將來自數(shù)個(gè)菌株的全細(xì)胞超聲制備物(以等蛋白量)混合以形 成"混合抗原"制備物。至關(guān)重要的是每個(gè)包含蛋白抗原的混合物獲自 從患有已知病理(即，尿道炎、妊娠并發(fā)癥、不孕、關(guān)節(jié)炎等)的患者分離 出的菌株且蛋白抗原獲自多種病理，從而提供了疾病中表達(dá)的抗原群的 最佳可能表現(xiàn)形式。所述免疫測(cè)試表面可以包括選自孔板和聚合物片的 物品或免疫測(cè)試設(shè)計(jì)領(lǐng)域內(nèi)已知的其它手段。所述試劑可包含與產(chǎn)生顏 色或熒光反應(yīng)的酶偶聯(lián)的抗人抗體和酶底物或能使抗體可視化的其它手 段。
本發(fā)明涉及從患有急性支原體泌尿生殖道感染的多人獲得的混合支 原體蛋白質(zhì)類抗原。術(shù)語蛋白質(zhì)類涉及根據(jù)本發(fā)明獲得的包含源自支原 體細(xì)胞的蛋白成分且通常參與引發(fā)人體內(nèi)抗支原體感染的免疫響應(yīng)的抗 原組合物；所述組合物可以包含可能源自支原體細(xì)胞且通常作為脂蛋白 出現(xiàn)的其它成分(即脂質(zhì))。
本發(fā)明涉及源自從患有支原體感染的多位患者分離的多個(gè)支原體菌 株的混合抗原在檢測(cè)泌尿生殖道感染中的應(yīng)用，該應(yīng)用覆蓋了大范圍的 支原體種和菌株。
本發(fā)明提供了一種方法，該方法不僅用于診斷人類患者中與支原體 感染相關(guān)的泌尿生殖道疾病，而且對(duì)所述抗體水平進(jìn)行定量并比較患者 樣品中與未患急性支原體疾病的參照者的標(biāo)準(zhǔn)樣品中所述抗體的水平。
本發(fā)明涉及一般性用于檢測(cè)由支原體造成的人類泌尿生殖道感染并 最終覆蓋大范圍的菌株和種的新型試劑盒，所述試劑盒包含i)結(jié)合于基
質(zhì)上的混合抗原，所述混合抗原源自從患有急性支原體感染的多人分離
的支原體；ii)使人類抗體的存在被可視化的試劑；禾tHii)使用說明。所述
基質(zhì)可以是包含如硝酸纖維素或合適的聚合物等蛋白結(jié)合聚合物的條 帶，所述條帶可能包含用于檢測(cè)人類抗支原體抗體的存在的片或孔。所
6述試劑盒可以包含例如各自表征一個(gè)樣品的多個(gè)條帶，或用于并行表征 多個(gè)樣品的裝置。樣品可以包含如血清等體液或其它。所述試劑是免疫 測(cè)試領(lǐng)域內(nèi)己知的，并且可以包含抗人抗體與酶和酶底物等的偶聯(lián)物。
本發(fā)明通過提供包括可靠地檢測(cè)對(duì)泌尿生殖道支原體的免疫響應(yīng)的 存在然后對(duì)所述患者施用已知有效的抗生素的方法，使得能夠在需要用 于支原體泌尿生殖道感染的治療的患者中跟蹤這種治療的成功。所述抗 生素可包括但不限于阿奇霉素、四環(huán)素、紅霉素和克拉霉素。


通過下列實(shí)施例并參考附圖，本發(fā)明的上述及其它特征和優(yōu)點(diǎn)將變 得更加顯而易見，其中-
圖1是顯示由兩種抗原在血清中確定的抗體水平的圖； 圖2是顯示用兩種抗原獲得的結(jié)果之間的匹配百分比的圖；和 圖3是展示兩種抗原類型的性能差異的圖，該圖強(qiáng)調(diào)了 "新"(發(fā)明) 相對(duì)于此前由本發(fā)明人進(jìn)行的自制測(cè)試的優(yōu)越性。
具體實(shí)施例方式
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，采用獲自處在疾病狀態(tài)的患者的支原體抗原、特別是如 果采用來自多位患者的樣品的混合物的支原體抗原，可產(chǎn)生優(yōu)異的泌尿 生殖道支原體感染檢測(cè)用免疫測(cè)試。本發(fā)明提供了具有驚人可靠性和更 少量的假陽(yáng)性結(jié)果的診斷方法。
在第一階段，開發(fā)了用于檢測(cè)血清和包括例如羊水、滑液、腦液、 精液和氣管灌洗液等的其它體液中特定抗支原體抗體的水平的ELISA型 免疫測(cè)試。所述測(cè)試設(shè)計(jì)包括涂布有支原體抗原的微量滴定板，所述支 原體抗原在本實(shí)驗(yàn)室中從獲自國(guó)際收藏庫(kù)(ATCC)的泌尿生殖道支原體參 比種進(jìn)行制備。然后，將血清或任何所述體液與涂布抗原溫育，接著用 以酶(例如，商購(gòu)過氧化物酶)標(biāo)記的抗人IgG檢測(cè)形成的抗原-抗體復(fù)合 物。向復(fù)合物中添加底物得到有色的產(chǎn)物，并通過光譜確定其強(qiáng)度。在 第二階段，用源自從處于其疾病階段的患者分離的支原體菌株的特定支原體成分涂布包括板或其它基質(zhì)(例如，惰性顆粒或試紙條等)在內(nèi)的所述 基本裝置。因而，用于涂布的材料代表在疾病中表達(dá)且對(duì)發(fā)病機(jī)理負(fù)責(zé) 的那些支原體成分。將患者的血清或其它體液與經(jīng)涂布的基質(zhì)溫育并使 標(biāo)本中的支原體成分的抗體結(jié)合并對(duì)其含量(例如，滴度)進(jìn)行定量。在本
實(shí)驗(yàn)室(Soroka University MedicaCentre, Beer-Sheva， Israel)中有大量人類
參比標(biāo)本可以利用。將測(cè)試的發(fā)展與參與患者有關(guān)的臨床細(xì)節(jié)即病理參 數(shù)相關(guān)，同時(shí)包括來自各種疾病和疾病階段的標(biāo)本。該方法使得可以評(píng) 估測(cè)試的可靠性、靈敏度、重現(xiàn)性和特異性。此外，對(duì)新測(cè)試與如培養(yǎng) 和PCR等其它分析技術(shù)的比較使本發(fā)明人確信在使用源自處在急性支原 體感染階段的多位患者的混合抗原制劑時(shí)，出現(xiàn)了提供更可靠的結(jié)果并 具有更少的假陽(yáng)性值的優(yōu)異測(cè)試。不希望受任何特定理論的限制，本發(fā) 明人相信源自多個(gè)菌株且來自多位急性感染的患者的抗原混合物能更好 地區(qū)分無癥狀背景支原體群體與強(qiáng)致病菌株、減少假陽(yáng)性結(jié)果并增加檢 測(cè)嚴(yán)重感染的靈敏度。新測(cè)試可以并入本領(lǐng)域已知的其它可利用的免疫 測(cè)試裝置，如在ELISA、凝集測(cè)試、吸附或沉淀測(cè)試中使用的過程元件 等。在開發(fā)所述測(cè)試時(shí)，將患者血液或滑液中抗體的存在與支原體感染 相關(guān)，并使得能夠預(yù)測(cè)進(jìn)一步的病理發(fā)展(例如，妊娠并發(fā)癥、反應(yīng)性關(guān) 節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和尿道炎等)。
本發(fā)明因而涉及用于實(shí)際檢測(cè)支原體感染及僅僅建群的可一般性適 用的免疫測(cè)試。在本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了用于檢測(cè)患有支原體泌尿 生殖道感染的那些患者的方法，所述患者處于發(fā)展有機(jī)會(huì)性支原體建群 的更嚴(yán)重疾病的風(fēng)險(xiǎn)中。在本發(fā)明的一個(gè)重要方面，使得能夠治療數(shù)種 嚴(yán)重的支原體紊亂，包括檢測(cè)支原體病原體的存在然后施用抗生素。
在一個(gè)非常重要的方面，本發(fā)明使得能開發(fā)和設(shè)計(jì)用于泌尿生殖道 支原體感染的免疫測(cè)試，從而準(zhǔn)確地適應(yīng)某些環(huán)境、某些患者群和某些 實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的需要。當(dāng)面向某些待診斷患者群體時(shí)，從屬于同一群體的 人收集用于制備混合抗原的標(biāo)本。合適的混合抗原可以用于適于可利用 設(shè)備的任何免疫測(cè)試中。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，混合抗原與基質(zhì)偶聯(lián)并起著與受測(cè)人
8體樣品中存在的抗支原體抗體結(jié)合并使其可視化的作用。本領(lǐng)域內(nèi)已知 技術(shù)使得能例如通過測(cè)定顏色強(qiáng)度來定量和比較抗體水平。在本發(fā)明的 免疫測(cè)試的一個(gè)優(yōu)選應(yīng)用中，臨床實(shí)驗(yàn)室收集物建立了帶有任何相關(guān)的 診斷和病歷組合的來自患者的一批樣品。利用該收集物制備了適合的混 合抗原以用于最佳免疫測(cè)試中、用于開發(fā)和校正所述測(cè)試、用于與其它 可利用信息和由獨(dú)立方法提供的實(shí)驗(yàn)室測(cè)試比較和用于驗(yàn)證所得免疫測(cè) 試。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，使選定混合抗原與一片蛋白結(jié)合 基質(zhì)結(jié)合并進(jìn)一步對(duì)其提供顏色檢測(cè)手段，從而快速揭示表征急性和/或 慢性泌尿生殖道感染的抗支原體抗體的存在。該片基質(zhì)可能具有檢測(cè)條
的形狀，且所述檢測(cè)手段可以包含如抗人IgG-酶偶聯(lián)物和酶底物等人類 抗體可視化試劑，同時(shí)可以將所述試劑以安瓿或其它方式封裝，并制劑 以簡(jiǎn)單導(dǎo)入可視化過程中。伴有顏色標(biāo)尺和/或使用手冊(cè)的該片基質(zhì)與試 劑提供了用于檢測(cè)泌尿生殖道支原體感染的試劑盒。
因而，在市場(chǎng)上沒有可利用的一般血清學(xué)試劑盒的情況下，本發(fā)明 提供了優(yōu)異的用于檢測(cè)由支原體造成的急性或慢性泌尿生殖道感染的實(shí) 驗(yàn)室測(cè)試和商用試劑盒。新測(cè)試顯著促進(jìn)了支原體疾病的分析。除了一 般應(yīng)用外，還提供了用于檢測(cè)多種泌尿生殖道支原體的試劑盒以用于區(qū) 分任何期望的菌株和種的組合；基于相同的方法學(xué)，可以包括屬于例如 解脲脲原體、微小脲原體、人型支原體、發(fā)酵支原體和生殖支原體的菌 株。
市場(chǎng)將得到可靠、簡(jiǎn)單、快速、容易、廉價(jià)且具有很低的假陰性結(jié) 果和很低的假陽(yáng)性結(jié)果的試劑盒，所述試劑盒符合產(chǎn)科學(xué)和婦科學(xué)(高危 妊娠、遺傳學(xué)羊水穿刺、體外受精、不育)、新生兒科學(xué)(重癥監(jiān)護(hù)等)、 泌尿?qū)W(男性和女性尿路感染)、風(fēng)濕病學(xué)(反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié) 炎等)、內(nèi)科學(xué)和高危人群STD(性傳播疾病)診治的需要。
在以下實(shí)施例中將對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述和說明。
實(shí)施例實(shí)施例1
從多位患有急性或慢性泌尿生殖道感染的患者取得多個(gè)樣品。從各
個(gè)樣品培養(yǎng)支原體菌株，通過PCR驗(yàn)證支原體的存在。在含有7.5。/。FCS (胎牛血清)的10B液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)6個(gè)樣品，在所述樣品中己通過PCR 證實(shí)支原體屬于解脲脲原體或微小脲原體。將細(xì)胞在27，000xg離心40 分鐘并用磷酸鹽緩沖鹽水洗滌2次。將洗滌后的細(xì)胞團(tuán)塊在1 mM苯甲 磺酰氟(蛋白酶抑制劑)的存在下超聲處理，并將含有所有細(xì)胞成分(即未 分級(jí)的蛋白、脂蛋白和核酸的混合物)的超聲處理物用作支原體抗原。 實(shí)施例2
制備來自6個(gè)不同脲原體種菌株(3個(gè)微小脲原體(Up)和3個(gè)解脲脲 原體(Uu))的脲原體抗原混合物。如實(shí)施例1所述將菌株從患者中分離， 并指定為"新"。通過PCR驗(yàn)證所述種的身份。用采用"新"混合抗原 的ELISA測(cè)試了此前已在本實(shí)驗(yàn)室中分析過的來自患有不同疾病的113 位患者的血清樣品。平行地，采用從以前命名為解脲脲原體血清型3 (Up) 的微小脲原體ATCC # 27815和以前命名為解脲脲原體血清型4 (Uu)的解 脲脲原體ATCC # 27816制備的抗原進(jìn)行ELISA。將它們各自單獨(dú)使用， 并在此均指定為"舊"。將這些抗原用于測(cè)試所述113個(gè)血清樣品。于是， 比較了基于三個(gè)不同抗原系統(tǒng)的ELISA測(cè)試。
使用了數(shù)種血清類型，在本實(shí)驗(yàn)室中記錄為a)Up陽(yáng)性，Uu陽(yáng)性，
b) Up陽(yáng)性，Uu陰性，c)Up陰性，Uu陽(yáng)性，d)Up陰性，Uu陰性。在 所有這些血清中，在測(cè)試中包括的某些血清為a)高度陽(yáng)性，b)陽(yáng)性，
c) 陰性，d)中間陽(yáng)性，和e)邊界。
如圖1中可見，所有"舊"測(cè)試為陰性的血清也被"新"測(cè)試發(fā)現(xiàn) 為陰性，反之亦然。相似地，所有"舊"測(cè)試為高度陽(yáng)性的血清也被"新" 測(cè)試發(fā)現(xiàn)為陽(yáng)性。因而，在87.5%的血清中，兩種測(cè)試之間完全一致("舊" 測(cè)試與"新"測(cè)試)。如圖2所示。僅1.8% (113位患者中的2位)無法確 定測(cè)試的終點(diǎn)。而且，10.6% (113位患者中的12位)從陽(yáng)性("舊"測(cè)試 中)轉(zhuǎn)變?yōu)殛幮?"新"測(cè)試中)，表明它們此前被記錄為假陽(yáng)性，且"新" 制劑可能更加可靠。在分析此前用"舊"材料給出不一致的結(jié)果和/或顯示出報(bào)道為"中 間"結(jié)果的邊界抗體水平時(shí)，觀察到"新"材料的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)。如圖3
中可見，通過使用"新"制劑解決了 "有問題"的血清(n二18)， 83.3%被 證實(shí)為陽(yáng)性(18位患者中的15位)而16.7%變?yōu)殛幮?3/18)。
經(jīng)證實(shí)，用脲原體種(微小脲原體和解脲脲原體)參比菌株進(jìn)行測(cè)試 時(shí)，本發(fā)明的測(cè)試比此前所用測(cè)試好得多且更加明確可靠。在上述實(shí)驗(yàn) 中，用"舊"測(cè)試和"新"測(cè)試分析血清數(shù)次(2 4)，而"新"材料的結(jié) 果除2個(gè)未定以外均可重復(fù)(圖2)。采用混合支原體抗原的新免疫測(cè)試方 法可至少與此前的方法同樣有效地檢測(cè)出特定的抗支原體抗體，且假結(jié) 果更少。
盡管根據(jù)一些具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了描述，但仍可進(jìn)行許多修 改和變化。因此可以理解，在所附權(quán)利要求的范圍內(nèi)，本發(fā)明可以以除 具體描述以外的其它方式來實(shí)現(xiàn)。
權(quán)利要求
1.一種檢測(cè)取自待診斷患者的生物樣品中的泌尿生殖道支原體感染的方法，所述方法包括i)提供來自多種病理狀態(tài)的患有支原體泌尿生殖道感染的患者的多種生物標(biāo)本；ii)從獲自患者的所述數(shù)個(gè)支原體菌株制備全細(xì)胞制備物；iii)提供(來自各個(gè)種的)多種支原體抗原決定簇以用作患者樣品中的特定抗體的檢測(cè)材料；iv)使所述混合抗原結(jié)合至免疫測(cè)試表面上；v)使患者生物樣品與步驟iv所述表面結(jié)合，從而使最終存在于所述樣品中的抗支原體抗體結(jié)合至所述表面上；和vi)使所述表面與用于檢測(cè)人類抗體的試劑接觸；由此檢測(cè)由來自廣譜菌株和種的支原體劑造成的感染。
2. 如權(quán)利要求l所述的方法，其中，從來自6位患者的至少6個(gè)分離物制備所述多種抗原。
3. 如權(quán)利要求l所述的方法，其中，所述多個(gè)人株優(yōu)選包括各自感染有一種或多種選自由解脲脲原體(t/ a/ /a^7a w a/_y"cww)、微小脲原體(L/rea/ /osmo / arvwm)、 人型支原j本(Afyco/ /oyma /zom/"/51)、 發(fā)酵支原1本(綺cop/os附a y^7wg"tam)禾口生殖支原"f本(A^co/ /osw(3 ge"/to/Zww)組成的組中的支原體物種的至少6位患者。
4. 如權(quán)利要求l所述的方法，其中，所述蛋白質(zhì)類組合物的制備包括通過采用濃縮支原體細(xì)胞的培養(yǎng)、洗滌和破裂步驟制備細(xì)菌超聲處理物。
5. 如權(quán)利要求l所述的方法，其中，所述免疫測(cè)試表面包括選自孔板、聚合物片和試紙條的物品。
6. 如權(quán)利要求l所述的方法，其中，所述試劑包含與酶和酶底物偶聯(lián)的抗人抗體。
7. —種混合支原體抗原，所述混合支原體抗原如權(quán)利要求1所述獲得。
8. —種用于診斷人類患者中與支原體感染相關(guān)的泌尿生殖疾病的方法，所述方法包括i) 提供權(quán)利要求7所述的混合抗原；ii) 檢驗(yàn)來自所述患者的生物樣品中抗所述混合抗原的抗體的存在并對(duì)所述抗體的水平進(jìn)行定量；和iii) 比較所述患者樣品與未患急性支原體疾病的人的標(biāo)準(zhǔn)樣品中所述抗體的水平。
9. 一種用于檢測(cè)由支原體造成的人類泌尿生殖道感染的試劑盒，所述試劑盒包含i) 結(jié)合于基質(zhì)上的權(quán)利要求7所述的混合抗原；ii) 使人類抗體的存在被可視化的試劑；和iii) 使用說明。
10. 如權(quán)利要求7所述的試劑盒，其中，所述基質(zhì)是包含蛋白結(jié)合聚合物的條帶。
11. 如權(quán)利要求7所述的試劑盒，其中，所述基質(zhì)包含用于檢測(cè)多個(gè)樣品中人類抗支原體抗體的存在的片或孔。
12. 如權(quán)利要求7所述的試劑盒，其中，所述試劑是抗人抗體或酶底物的偶聯(lián)物。
13. 如權(quán)利要求7所述的抗原，所述抗原用于檢測(cè)由大范圍的支原體抗原造成的泌尿生殖道感染。
14. 一種用于在需要支原體泌尿生殖道感染治療的患者中跟蹤所述治療的成功的方法，所述方法包括檢測(cè)所述患者的泌尿生殖道支原體抗體水平的變化。
全文摘要
本發(fā)明提供了用于檢測(cè)由支原體引起的感染、特別是人類泌尿生殖道感染的方法和試劑盒。通過與固定的各種病理狀態(tài)相關(guān)的各種抗原決定簇的混合物進(jìn)行反應(yīng)來檢測(cè)受診斷對(duì)象的生物樣品中特定抗支原體抗體的存在。
文檔編號(hào)G01N33/569GK101675340SQ200880014661
公開日2010年3月17日 申請(qǐng)日期2008年5月1日 優(yōu)先權(quán)日2007年5月3日
發(fā)明者舒拉米斯·霍羅威茨 申請(qǐng)人:莫爾研究應(yīng)用有限公司