專利名稱：活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)方法、作為該評(píng)價(jià)方法的評(píng)價(jià)試樣的經(jīng)處理抗原 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)方法。更詳細(xì)的內(nèi)容是本發(fā)明涉及通過(guò)作為使哺乳類(lèi)動(dòng)物產(chǎn)生變應(yīng)反應(yīng)的物質(zhì)的抗原性物質(zhì)和活化氣體反應(yīng)，使抗原性物質(zhì)失活由此評(píng)價(jià)活化氣體的性能的方法。
此外本發(fā)明還涉及經(jīng)活化氣體處理的抗原性物質(zhì)的生成裝置。更詳細(xì)的內(nèi)容是本發(fā)明涉及作為使抗原性物質(zhì)失活的活化氣體性能評(píng)價(jià)試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的生成裝置，其中該裝置具備容器。
背景技術(shù)：
近年來(lái)，隨著居住環(huán)境的變化，迫切需要除去造成包括人在內(nèi)的哺乳動(dòng)物的花粉癥，哮喘、皮膚先天性過(guò)敏癥、結(jié)膜炎等變應(yīng)性疾病原因的花粉、壁虱、壁虱糞便以及室塵等空氣中的有害懸浮物質(zhì)，營(yíng)造健康、舒適的生活。
為了滿足這一需求，開(kāi)發(fā)了能有效除去形成上述變應(yīng)性疾病原因的抗原性物質(zhì)(過(guò)敏源)，并且使用各種過(guò)濾器和吸塵方式的空氣凈化器(例如參照特開(kāi)平8-173843號(hào)公報(bào))。
但是，在這樣的空氣調(diào)節(jié)裝置中，由于是吸入氣氛中的空氣，通過(guò)過(guò)濾器吸附或者過(guò)濾有害的懸浮物質(zhì)的方法，所以由于長(zhǎng)期使用，必需要進(jìn)行更換過(guò)濾器等的維護(hù)保養(yǎng)，并且由于過(guò)濾器的特性不完善，所以有時(shí)候得不到令人滿意的性能。
并且在這樣的空氣調(diào)節(jié)裝置中，例如，當(dāng)以捕集花粉為目的時(shí)，花粉是在形成花粉癥原因的抗原性蛋白質(zhì)存在狀態(tài)下，以物理方法而被捕集到捕集過(guò)濾器中而殘留下來(lái)的。這種經(jīng)物理方法而被捕集的花粉，很容易從捕集過(guò)濾器脫落，所以在開(kāi)始運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)、停止運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)或者是更換過(guò)濾器時(shí)，存在著有可能引起被捕集的花粉再次飛散的問(wèn)題。另外，即使能夠把花粉自身捕集到捕集過(guò)濾器中，而粒子直徑比花粉更小的抗原性蛋白質(zhì)有可能通過(guò)捕集過(guò)濾器，因此也會(huì)導(dǎo)致不能從根本上除去抗原性物質(zhì)的問(wèn)題。
同時(shí)在各種過(guò)濾器的基礎(chǔ)上，又開(kāi)發(fā)了通過(guò)加熱處理使抗原性物質(zhì)變性的花粉處理裝置(例如參照特開(kāi)平7-807號(hào)公報(bào))。
但是在這種空氣調(diào)節(jié)裝置中，加熱處理需要消耗大量能源，存在著會(huì)增加家庭電費(fèi)支出，同時(shí)會(huì)給地球環(huán)境帶來(lái)不良影響的問(wèn)題。而且當(dāng)在夏天或在高溫地區(qū)使用這種空氣調(diào)節(jié)裝置時(shí)，室內(nèi)溫度會(huì)明顯上升，存在著使人感覺(jué)不舒服的問(wèn)題。因此也存在著不能將其與冷氣裝置一起使用的問(wèn)題。
在各種過(guò)濾器的基礎(chǔ)上，又開(kāi)發(fā)了通過(guò)進(jìn)行紫外線照射，使杉樹(shù)花粉癥抗原失活的裝置(例如參照特開(kāi)平6-154298號(hào)公報(bào))。
但是在這種空氣調(diào)節(jié)裝置中，進(jìn)行紫外線照射需要消耗大量能源，存在著會(huì)增加家庭電費(fèi)支出，同時(shí)會(huì)給地球環(huán)境帶來(lái)不良影響的問(wèn)題。而且根據(jù)上述文獻(xiàn)中所述，由杉樹(shù)花粉而引起的試樣的抗體價(jià)時(shí)，必需進(jìn)行最低強(qiáng)度也在1.3mW/cm2或其以上、50秒或其以上的紫外線照射。使杉樹(shù)花粉癥抗原失活的能力低，因此很難說(shuō)它是一種具有實(shí)用意義的技術(shù)。
在各種過(guò)濾器的基礎(chǔ)上，又開(kāi)發(fā)了通過(guò)進(jìn)行紫外線照射，產(chǎn)生臭氧的空氣凈化器(例如參照特開(kāi)2000-111106號(hào)公報(bào))。
但是在這種空氣調(diào)節(jié)裝置中，進(jìn)行紫外線照射需要消耗大量能源，存在著會(huì)增加家庭電費(fèi)支出，同時(shí)會(huì)給地球環(huán)境帶來(lái)不良影響的問(wèn)題。而且臭氧會(huì)釋放到周?chē)鷼夥罩校谀承l件下，會(huì)對(duì)包括人在內(nèi)的哺乳動(dòng)物活體造成不良影響。
在所有這些空氣調(diào)節(jié)裝置中，沒(méi)有能夠根據(jù)因不同人而具有個(gè)體差異的變應(yīng)反應(yīng)的抗原性物質(zhì)種類(lèi)，而對(duì)抗原性物質(zhì)進(jìn)行不同處理的問(wèn)題，也都沒(méi)有完全解決。于是對(duì)應(yīng)于不同種類(lèi)的抗原性物質(zhì)，各種除去方法或使其失活方法的效果不同這一問(wèn)題也沒(méi)有得以解決。
根據(jù)上述現(xiàn)狀，本發(fā)明的課題在于提供對(duì)各種活化氣體使各種抗原性物質(zhì)失活的性能進(jìn)行評(píng)價(jià)的方法，該方法對(duì)于實(shí)現(xiàn)一種空氣調(diào)節(jié)裝置是必要的，所述空氣調(diào)節(jié)裝置通過(guò)活化氣體可以有效除去抗原性物質(zhì)和/或使其失活，所述活化氣體的種類(lèi)和/或用量與因個(gè)體不同而具有差異的抗原性物質(zhì)的種類(lèi)和/或用量相對(duì)應(yīng)。
本發(fā)明的另一個(gè)課題是提供經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的生成裝置，該裝置在上述評(píng)價(jià)方法中，可以均勻而簡(jiǎn)便地生成作為評(píng)價(jià)試樣的、通過(guò)活化氣體進(jìn)行處理的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述課題，本發(fā)明人努力研究摸索為確立使抗原性物質(zhì)失活的活化氣體性能的評(píng)價(jià)方法。
結(jié)果本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，通過(guò)在容器中散布抗原性物質(zhì)，使含有所散布抗原性物質(zhì)的溶液懸浮在容器中的狀態(tài)下，使抗原性物質(zhì)與活化氣體發(fā)生反應(yīng)，通過(guò)該反應(yīng)，可以簡(jiǎn)便獲得均勻的、經(jīng)活化氣體處理的抗原性物質(zhì)。
而且本發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)，通過(guò)使用這種經(jīng)處理抗原性物質(zhì)，可以準(zhǔn)確而簡(jiǎn)便地評(píng)價(jià)活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能。
也就是本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的評(píng)價(jià)方法包括使抗原性物質(zhì)和活化氣體發(fā)生反應(yīng)，得到經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟；和使針對(duì)該抗原性物質(zhì)的抗體與該經(jīng)處理抗原性物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，測(cè)定這種經(jīng)處理抗原性物質(zhì)相對(duì)于該抗體結(jié)合活性的步驟。
本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)方法，是如下所述的方法，其包括使抗原性物質(zhì)和活化氣體發(fā)生反應(yīng)，得到經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟；使針對(duì)該抗原性物質(zhì)的抗體與這種經(jīng)處理抗原性物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，測(cè)定這種經(jīng)處理抗原性物質(zhì)相對(duì)于該抗體的結(jié)合活性的步驟；和將這種經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的結(jié)合活性與該抗原性物質(zhì)相對(duì)于該抗體的結(jié)合活性進(jìn)行比較的步驟。
其中，獲得這種經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟優(yōu)選包括使懸浮在空中的該抗原性物質(zhì)和該活化氣體進(jìn)行反應(yīng)的步驟。
同時(shí)，在進(jìn)行該反應(yīng)的步驟中，優(yōu)選包括在容器中散布含有該抗原性物質(zhì)溶液的步驟、使所散布的含有該抗原性物質(zhì)的溶液懸浮在該容器中的步驟、和向該容器中導(dǎo)入該活化氣體的步驟。
在獲得這種經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟中，優(yōu)選通過(guò)對(duì)該抗原性物質(zhì)施加振動(dòng)和/或沖擊使該抗原性物質(zhì)懸浮在空中的步驟。
在該懸浮步驟中，優(yōu)選包括將該抗原性物質(zhì)設(shè)置在具有撓曲性的試樣臺(tái)上的步驟和對(duì)該試樣臺(tái)施加振動(dòng)和/或沖擊的步驟。
這里的懸浮步驟是把前述抗原性物質(zhì)設(shè)置在選自被褥、毛毯、坐墊、枕頭、墊子、海綿、布、紙、苯乙烯泡沫的一種或以上具有撓曲性的試樣臺(tái)上的步驟以及通過(guò)對(duì)前述試樣臺(tái)進(jìn)行敲打和/或振動(dòng)，對(duì)前述試樣臺(tái)施加振動(dòng)和/或沖擊的步驟。
該獲得經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟，優(yōu)選包括使該抗原性物質(zhì)和含有選自含正離子的氣體、含負(fù)離子的氣體、含自由基的氣體、臭氧氣體、硝酸氣體的一種或一種以上氣體反應(yīng)的步驟。
該獲得經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟，優(yōu)選包括使選自杉樹(shù)花粉和/或壁虱粉塵中所含的抗原性物質(zhì)、杉樹(shù)花粉、壁虱粉塵的1種或其以上的物質(zhì)與活化氣體反應(yīng)，得到經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟。
該測(cè)定步驟優(yōu)選包括通過(guò)ELISA法和/或ELISA抑制法，使針對(duì)該抗原性物質(zhì)的抗體和該經(jīng)處理抗原性物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，測(cè)定該經(jīng)處理抗原性物質(zhì)對(duì)于該抗體結(jié)合活性的步驟。
另外該測(cè)定步驟，還優(yōu)選包括向除人以外的保有產(chǎn)生針對(duì)該抗原性物質(zhì)的抗體的細(xì)胞的動(dòng)物進(jìn)行皮內(nèi)反應(yīng)試驗(yàn)和/或結(jié)膜反應(yīng)試驗(yàn)，使該抗體和該經(jīng)處理抗原性物質(zhì)反應(yīng)，測(cè)定該經(jīng)處理抗原性物質(zhì)對(duì)于該抗體結(jié)合活性的步驟。
作為本發(fā)明活化氣體的抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)試樣所使用的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的生成裝置，具備有容器、向該容器中散布抗原性物質(zhì)的裝置和在該容器內(nèi)發(fā)生或?qū)朐摶罨瘹怏w的裝置。
本發(fā)明還提供作為評(píng)價(jià)活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的生成裝置，該裝置具備容器、向該容器中封入抗原性物質(zhì)的裝置和在該容器內(nèi)發(fā)生或?qū)朐摶罨瘹怏w的裝置。
上述任意一種本發(fā)明的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的生成裝置中，優(yōu)選容器含有部分透明材質(zhì)或者全部是透明材質(zhì)。
附圖的簡(jiǎn)單說(shuō)明

圖1是表示本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)方法的流程略圖。
圖2是列舉一例說(shuō)明作為評(píng)價(jià)本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)生成裝置的略圖。
圖3是列舉另一例說(shuō)明作為評(píng)價(jià)本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)生成裝置的略圖。
圖4是列舉又一例說(shuō)明作為評(píng)價(jià)本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)生成裝置的略圖。
圖5是列舉又一例說(shuō)明作為評(píng)價(jià)本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)生成裝置的略圖。
圖6是列舉又一例說(shuō)明作為評(píng)價(jià)本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)生成裝置的略圖。
圖7是舉例說(shuō)明本發(fā)明中所用離子發(fā)生元件結(jié)構(gòu)的略8A和8B是表示由離子發(fā)生元件生成的正離子和負(fù)離子的質(zhì)譜。
圖9A和9B是表示關(guān)于通過(guò)含有正負(fù)兩種離子的氣體對(duì)杉樹(shù)抗原性物質(zhì)進(jìn)行處理時(shí)和未進(jìn)行處理時(shí)，抗原性物質(zhì)與花粉癥患者19～40的血清IgE抗體變應(yīng)反應(yīng)關(guān)系的圖表。
圖10A和10B是表示關(guān)于通過(guò)含有正負(fù)兩種離子的氣體對(duì)杉樹(shù)抗原性物質(zhì)進(jìn)行處理時(shí)和未進(jìn)行處理時(shí)，抗原性物質(zhì)與花粉癥患者41～60的血清IgE抗體變應(yīng)反應(yīng)關(guān)系的圖表。
圖11是表示關(guān)于通過(guò)含有正負(fù)兩種離子的氣體對(duì)杉樹(shù)抗原性物質(zhì)進(jìn)行處理時(shí)和未進(jìn)行處理時(shí)，Cry j 1和Cry j 2與其單克隆抗體反應(yīng)性關(guān)系的圖表。
圖12是表示通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附抑制法，對(duì)用含正負(fù)兩種離子的氣體對(duì)杉樹(shù)抗原性物質(zhì)進(jìn)行處理和未進(jìn)行處理時(shí)，抗原性物質(zhì)和花粉癥患者血清IgE抗體變應(yīng)反應(yīng)性關(guān)系的圖表。
圖13是表示活化氣體中正負(fù)兩種離子的各種濃度與來(lái)源于杉樹(shù)花粉的抗原性物質(zhì)的反應(yīng)失活率關(guān)系的圖表。
圖14是舉一例說(shuō)明用于實(shí)施使抗原性物質(zhì)失活方法的裝置的略圖，是具有使臭氧濃度降低的設(shè)施的裝置。
圖15是表示對(duì)抗原性物質(zhì)(壁虱抗原性物質(zhì))進(jìn)行離子處理時(shí)以及未進(jìn)行處理時(shí)，與壁虱過(guò)敏患者a～r的血清IgE抗體變應(yīng)反應(yīng)關(guān)系的圖表。
圖16是表示實(shí)施使抗原性物質(zhì)失活方法的裝置的略圖，其是具備鼓風(fēng)機(jī)和回收過(guò)濾器的裝置。
圖17是表示實(shí)施使抗原性物質(zhì)失活方法的裝置的略圖，其是具備鼓風(fēng)機(jī)和回收容器的的裝置。
圖18是表示在正負(fù)兩種離子的空間平均濃度(3000個(gè)/cm3)下，通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附抑制法，對(duì)壁虱粉塵進(jìn)行離子處理時(shí)和未進(jìn)行處理時(shí)，抗原性物質(zhì)和壁虱過(guò)敏患者的血清IgE抗體變應(yīng)反應(yīng)性關(guān)系的圖表。
圖19是表示在正負(fù)兩種離子的空間平均濃度(10000個(gè)/cm3)下，通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附抑制法，對(duì)壁虱粉塵進(jìn)行離子處理時(shí)和未進(jìn)行離子處理時(shí)，抗原性物質(zhì)和壁虱過(guò)敏患者的血清IgE抗體變應(yīng)反應(yīng)性關(guān)系的圖表。
實(shí)施本發(fā)明的最佳方案以下以實(shí)施方案更詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明的情況。
<抗原性物質(zhì)>
本說(shuō)明書(shū)中，所謂抗原性物質(zhì)是杉樹(shù)、絲柏樹(shù)、豬菜等的花粉類(lèi)和壁虱等生物，壁虱等生物的糞便或室塵等的室內(nèi)懸浮物等中所包含的物質(zhì)，通過(guò)作用于包括人在內(nèi)的哺乳動(dòng)物活體，產(chǎn)生抗原抗體反應(yīng)之一的變應(yīng)反應(yīng)而誘發(fā)變應(yīng)性疾病的物質(zhì)。
該抗原性物質(zhì)通常是由蛋白質(zhì)或糖蛋白質(zhì)構(gòu)成的物質(zhì)，但是在本說(shuō)明書(shū)中，對(duì)其形狀或大小，并沒(méi)有特別的限定，通?？梢哉J(rèn)為是包括這些蛋白質(zhì)和糖蛋白質(zhì)自身為分子形狀的物質(zhì)，或者是它們聚集形成粒子形狀的物質(zhì)，或抗體反應(yīng)部位為其分子狀物質(zhì)一部分的物質(zhì)(也可以稱之為抗原決定簇或表位)等等。
上述抗原性物質(zhì)，可以是杉樹(shù)花粉自身或杉樹(shù)花粉中所包含的抗原性物質(zhì)(杉樹(shù)抗原性物質(zhì))。上述抗原性物質(zhì)，還可以是壁虱粉塵自身或壁虱粉塵中所含的抗原性物質(zhì)(壁虱抗原性物質(zhì))。
以形成杉樹(shù)花粉癥病因的抗原性物質(zhì)為例，在抗原性物質(zhì)中，除了作為杉樹(shù)花粉癥的病因物質(zhì)而眾所周知的Cry j 1蛋白質(zhì)以及Cry j 2蛋白質(zhì)以外，還包括Cry j 1蛋白質(zhì)以及Cry j 2蛋白質(zhì)的表位，還包括含有大量Cry j 1蛋白質(zhì)以及Cry j 2蛋白質(zhì)的杉樹(shù)花粉中的粒狀物(又被稱為烏氏體和orbicle)，還包括杉樹(shù)花粉自身。
壁虱抗原性物質(zhì)是壁虱自身體內(nèi)所包含的物質(zhì)，但在一般生活環(huán)境中，與壁虱自身相比，更多情況下是由壁虱粉塵中所含的物質(zhì)而產(chǎn)生問(wèn)題。這里所說(shuō)的壁虱粉塵，是指含有壁虱自身和壁虱尸體以及壁虱身體的一部分、壁虱的食物和排泄物以及脫蛻外皮和卵等的微粒狀物質(zhì)。本發(fā)明中的抗原性物質(zhì)，也包括這樣的壁虱粉塵。
<抗體反應(yīng)部位>
本說(shuō)明書(shū)中，所謂抗體反應(yīng)部位，是指抗原性物質(zhì)中所含的特定部位，表示與抗體結(jié)合的部位。通常該抗體反應(yīng)部位發(fā)生變性或受到破壞(分解)時(shí)，抗原性物質(zhì)就不能與抗體結(jié)合，因此可以抑制變應(yīng)反應(yīng)。
<活化氣體>
本說(shuō)明書(shū)中，所謂活化氣體，是指能夠?qū)乖晕镔|(zhì)產(chǎn)生某種化學(xué)反應(yīng)和/或物理作用的氣體。就活化氣體的具體例子而言，沒(méi)有特別限定，可以列舉含有正離子的氣體、含有負(fù)離子的氣體、同時(shí)含有正負(fù)離子的氣體、含有臭氧的氣體、含有硝酸氣的氣體、含有自由基的氣體等等。除此之外，在針對(duì)抗原性物質(zhì)的活化氣體中，估計(jì)還有各種組成的氣體。但是對(duì)于這些活化氣體，可以采用后述的本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的評(píng)價(jià)方法去發(fā)現(xiàn)。
此外如后述的，同時(shí)含有正負(fù)離子的氣體作為活化氣體作用于抗原性物質(zhì)，具有使該抗原性物質(zhì)失活的功能，這并不是眾所周知的現(xiàn)象，而是本發(fā)明人采用本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的評(píng)價(jià)方法，是首次發(fā)現(xiàn)的現(xiàn)象。
<抗原性物質(zhì)失活>
本說(shuō)明書(shū)中，所謂抗原性物質(zhì)失活的意義是指消除或降低抗原性物質(zhì)的作為抗原性物質(zhì)活性。也就是消除或降低抗原性物質(zhì)與抗體反應(yīng)的能力。
其中，本發(fā)明人認(rèn)為由活化氣體引起的抗原性物質(zhì)失活的機(jī)理是通過(guò)該活化氣體攻擊構(gòu)成抗原性物質(zhì)的蛋白質(zhì)，特別是其抗體反應(yīng)部位，使該蛋白質(zhì)變性或破壞而使抗原性物質(zhì)失活。
如后述的，由本發(fā)明人采用本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的評(píng)價(jià)方法而首次發(fā)現(xiàn)的現(xiàn)象，使同時(shí)含有正負(fù)離子的氣體作為活化氣體作用于抗原性物質(zhì)，具有使該抗原性物質(zhì)失活的功能。這種失活功能，是通過(guò)使正離子和負(fù)離子作用于抗原性物質(zhì)而實(shí)現(xiàn)的。
雖然是以往不曾知曉的，但是如果按照本發(fā)明人的觀點(diǎn)，通過(guò)使用同時(shí)含有正離子和負(fù)離子的氣體，與分別單獨(dú)使用含有正離子的氣體或含有負(fù)離子的氣體相比，可以對(duì)于抗原性物質(zhì)發(fā)揮特別的失活效果?？梢哉J(rèn)為如果按照本發(fā)明人的觀點(diǎn)，使用這些同時(shí)存在正負(fù)離子的氣體，通過(guò)后述的化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生活性物質(zhì)，該活性物質(zhì)對(duì)于構(gòu)成抗原性物質(zhì)的蛋白質(zhì)，特別是其抗體反應(yīng)部位進(jìn)行攻擊，使該蛋白質(zhì)變性或破壞(分解)，而使抗原性物質(zhì)失活。
也就是在本說(shuō)明書(shū)中，所謂使抗原性物質(zhì)失活，可以更詳細(xì)地定義為通過(guò)上述使抗原性物質(zhì)變性或破壞(分解)不僅可以消除抗原性物質(zhì)，還包括減少氣氛氣體中單位體積的該抗原性物質(zhì)的量，或者是降低該抗原性物質(zhì)的抗體反應(yīng)部位與抗體反應(yīng)性。
其中測(cè)定抗原性物質(zhì)反應(yīng)失活率(或者是殘存活性)的方法(或者是定義方法)，有很多種，可以根據(jù)抗原性物質(zhì)種類(lèi)以及活化氣體的種類(lèi)，選擇適當(dāng)方法。就這類(lèi)測(cè)定方法而言，并沒(méi)有特別的限定，如可以使用酶聯(lián)免疫吸附抑制法。按照這種方法，測(cè)定經(jīng)活化氣體處理過(guò)的抗原性物質(zhì)顯示50％抑制的濃度時(shí)，與未經(jīng)活化氣體處理的抗原性物質(zhì)50％抑制的濃度相比，其50％的抑制濃度如果在5倍或其以上時(shí)，則殘存活性為20％(也就是反應(yīng)失活率為80％)。
同時(shí)判斷反應(yīng)失活率究竟達(dá)到何種程度，活化氣體中才具有相對(duì)于抗原性物質(zhì)的失活能力時(shí)，要視活化氣體種類(lèi)和抗原性物質(zhì)的種類(lèi)不同而異，可以根據(jù)適當(dāng)閾值進(jìn)行判斷。例如，雖然沒(méi)有特別限定，但是使用含有正負(fù)離子的氣體作為活化氣體時(shí)，可以使用來(lái)源于杉樹(shù)花粉的抗原性物質(zhì)作為抗原性物質(zhì)。
<活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的評(píng)價(jià)方法>
圖1是表示本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)方法的流程略圖。
本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的評(píng)價(jià)方法是基本具備如下步驟的評(píng)價(jià)方法使抗原性物質(zhì)和活化氣體反應(yīng)，得到經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟(S101)；使針對(duì)該抗原性物質(zhì)的抗體與該經(jīng)處理抗原性物質(zhì)進(jìn)行反應(yīng)，測(cè)定該經(jīng)處理抗原性物質(zhì)對(duì)于該抗體結(jié)合活性的步驟(S103)。在本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的評(píng)價(jià)方法中，如圖1的流程圖所示，在繼獲得上述經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟(S101)和測(cè)定經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的結(jié)合活性的步驟(S103)之后，還優(yōu)選具有把該經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的結(jié)合活性與該抗原性物質(zhì)對(duì)于所述抗體結(jié)合活性進(jìn)行比較的步驟(S105)。
通過(guò)采用這種與對(duì)比試樣進(jìn)行對(duì)比的評(píng)價(jià)方法，具有能夠準(zhǔn)確而簡(jiǎn)便、并且可以對(duì)該活化氣體對(duì)該抗原性物質(zhì)的失活能力進(jìn)行定量評(píng)價(jià)的優(yōu)點(diǎn)。其中在對(duì)該抗原性物質(zhì)(通常多數(shù)情況下，可以認(rèn)為是使用未經(jīng)活化氣體處理的抗原性物質(zhì))對(duì)于該抗體的結(jié)合活性進(jìn)行比較時(shí)，該抗原性物質(zhì)對(duì)于該抗體的結(jié)合活性，可以采用預(yù)先測(cè)定的測(cè)定值，或者也可以采用每次實(shí)施本發(fā)明評(píng)價(jià)方法進(jìn)行測(cè)定的測(cè)定值。從評(píng)價(jià)結(jié)果的準(zhǔn)確性方面考慮，優(yōu)選采用每次實(shí)施本發(fā)明評(píng)價(jià)方法時(shí)的測(cè)定值，但是為了簡(jiǎn)便而迅速得到評(píng)價(jià)結(jié)果，優(yōu)先使用預(yù)先測(cè)定的測(cè)定值。
其中，獲得該經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟，優(yōu)選包括使懸浮于空中的抗原性物質(zhì)與該活化氣體進(jìn)行反應(yīng)的步驟。
這樣通過(guò)使活化氣體與懸浮在空中的抗原性物質(zhì)反應(yīng)，可以使抗原性物質(zhì)和活化氣體在均勻狀態(tài)下進(jìn)行反應(yīng)，具有通過(guò)調(diào)節(jié)抗原性物質(zhì)的懸浮時(shí)間，就會(huì)有能很容易調(diào)節(jié)抗原性物質(zhì)和活化氣體反應(yīng)時(shí)間的優(yōu)點(diǎn)。而且為了使抗原性物質(zhì)懸浮在空中，可以對(duì)含有活化氣體的氣氛氣體進(jìn)行攪拌或使其流動(dòng)，就能使抗原性物質(zhì)飛起來(lái)，而懸浮在空中；或者是簡(jiǎn)單使抗原性物質(zhì)以一定距離落下而使其懸浮在空中。
進(jìn)行該反應(yīng)的步驟，優(yōu)選包括在容器中散布該抗原性物質(zhì)的步驟，使含有該散布抗原性物質(zhì)的溶液在該容器中懸浮的步驟以及向該容器中導(dǎo)入該活化氣體的步驟。
這樣，通過(guò)向容器中散布含有抗原性物質(zhì)的溶液，可以防止抗原性物質(zhì)毫無(wú)意義的擴(kuò)散，具有容易將容器內(nèi)抗原性物質(zhì)濃度保持在一定范圍內(nèi)的優(yōu)點(diǎn)。其中，容器可以優(yōu)選密閉系容器，但也可以是具有部分開(kāi)放口的半密閉系容器。
通過(guò)這樣使散布的含有該抗原性物質(zhì)的溶液懸浮在容器中，即使在通過(guò)攪拌含有活化氣體的氣氛氣體或使其流動(dòng)促使抗原性物質(zhì)飛起來(lái)的時(shí)候，可以防止抗原性物質(zhì)毫無(wú)意義的擴(kuò)散，具有容易將容器內(nèi)抗原性物質(zhì)濃度保持在一定范圍內(nèi)的優(yōu)點(diǎn)。
并且通過(guò)這樣向容器內(nèi)導(dǎo)入活性氣體的方法，由于可以防止活化氣體毫無(wú)意義的擴(kuò)散，因此具有可以在抗原性物質(zhì)濃度保持一定范圍內(nèi)的容器中，使?jié)舛确秶欢ǖ幕罨瘹怏w與抗原性物質(zhì)均勻進(jìn)行反應(yīng)的優(yōu)點(diǎn)。
其中，由于抗原性物質(zhì)被包含在溶液之中，所以當(dāng)向容器中散布含有抗原性物質(zhì)的溶液時(shí)，優(yōu)選使用噴霧器進(jìn)行噴霧。這是由于它可以噴出粒徑微小而均勻的溶液，能使抗原性物質(zhì)與活化氣體的反應(yīng)更加均勻地進(jìn)行。
另外本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)方法中的獲得前述經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟，優(yōu)選包括對(duì)前述抗原性物質(zhì)施加振動(dòng)和/或沖擊，使前述抗原性物質(zhì)懸浮在空中的步驟。該懸浮步驟優(yōu)選包括將前述抗原性物質(zhì)設(shè)置在具有撓曲性的試樣臺(tái)上的步驟、和對(duì)試樣臺(tái)施加振動(dòng)和/或沖擊的步驟。其中前述具有撓曲性的試樣臺(tái)是選自被褥、毛毯、坐墊、枕頭、墊子、海綿、布、紙、苯乙烯泡沫的一種或以上。此外對(duì)前述試樣臺(tái)施加振動(dòng)和/或沖擊的步驟，優(yōu)選敲打和/或振動(dòng)上述試樣臺(tái)而對(duì)試樣臺(tái)施加振動(dòng)和/或沖擊的方法。
在獲得該經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟中，優(yōu)選包括使該抗原性物質(zhì)和選自含有正離子的氣體、含有負(fù)離子的氣體、含有自由基的氣體、臭氧氣體、硝酸氣體的一種或以上氣體反應(yīng)的步驟。其中，特別優(yōu)選獲得該經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟是使抗原性物質(zhì)與含有正負(fù)兩種離子的氣體進(jìn)行反應(yīng)的步驟。
關(guān)于該含有正負(fù)兩種離子的氣體，如后述，由本發(fā)明人首次明確了它具有使來(lái)源于杉樹(shù)花粉的抗原性物質(zhì)失活的功能，并且期待它具有使其它抗原性物質(zhì)失活的功能。此外，對(duì)于臭氧氣體、硝酸氣體、含有自由基的氣體，由于它們也是氣態(tài)物質(zhì)，所以可以通過(guò)使用本說(shuō)明書(shū)中的評(píng)價(jià)方法，評(píng)價(jià)其對(duì)抗原性物質(zhì)的失活能力。
該測(cè)定步驟，優(yōu)選包括通過(guò)ELISA法和/或ELISA抑制法使針對(duì)該抗原性物質(zhì)的抗體和該經(jīng)處理抗原性物質(zhì)進(jìn)行反應(yīng)，測(cè)定該經(jīng)處理抗原性物質(zhì)對(duì)于該抗體結(jié)合活性的步驟。
這樣，通過(guò)ELISA法和/或ELISA抑制法，可以準(zhǔn)確而簡(jiǎn)便地測(cè)定經(jīng)處理抗原性物質(zhì)對(duì)于抗體的結(jié)合活性。
例如如上所述通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附抑制法，測(cè)定經(jīng)活化氣體處理的抗原性物質(zhì)顯示50％抑制的濃度時(shí)，可以把該50％抑制濃度與未經(jīng)活化氣體處理的抗原性物質(zhì)的50％抑制濃度進(jìn)行對(duì)比。這時(shí)，如果所述50％抑制濃度達(dá)到5倍時(shí)，把其殘存活性定為20％，(即反應(yīng)失活率為80％)。
該測(cè)定步驟，優(yōu)選包括通過(guò)對(duì)除人以外的，具有針對(duì)該抗原性物質(zhì)的抗體產(chǎn)生細(xì)胞的動(dòng)物進(jìn)行皮內(nèi)反應(yīng)試驗(yàn)和/或結(jié)膜反應(yīng)試驗(yàn)，使該抗體和該經(jīng)處理抗原性物質(zhì)進(jìn)行反應(yīng)，測(cè)定該經(jīng)處理抗原性物質(zhì)相對(duì)于該抗體結(jié)合活性的步驟。
這樣通過(guò)對(duì)除人以外的，具有針對(duì)該抗原性物質(zhì)的抗體產(chǎn)生細(xì)胞的動(dòng)物進(jìn)行皮內(nèi)反應(yīng)試驗(yàn)和/或結(jié)膜反應(yīng)試驗(yàn)，還具有可以在更接近人的活體內(nèi)狀態(tài)條件下，測(cè)定經(jīng)處理抗原性物質(zhì)相對(duì)于抗體結(jié)合活性的優(yōu)點(diǎn)。其中如后序?qū)嵤├兴觯m然對(duì)人進(jìn)行皮內(nèi)反應(yīng)試驗(yàn)以及結(jié)膜反應(yīng)試驗(yàn)，但是如果使用小鼠、大鼠和兔子等除人以外的哺乳動(dòng)物進(jìn)行能在人體內(nèi)進(jìn)行的活體試驗(yàn)時(shí)，遠(yuǎn)比用人實(shí)施試驗(yàn)容易得多。這一點(diǎn)，在醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、農(nóng)學(xué)、生物學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等領(lǐng)域中是一個(gè)技術(shù)性的常識(shí)。
<經(jīng)處理的抗原性物質(zhì)的生成裝置>
作為本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的評(píng)價(jià)試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的生成裝置，包括有容器、向該容器內(nèi)散布抗原性物質(zhì)的裝置和在該容器內(nèi)發(fā)生或?qū)朐摶罨瘹怏w裝置。此外本發(fā)明的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的生成裝置，也可以具備容器、向該容器內(nèi)封入抗原性物質(zhì)的裝置和在該容器內(nèi)發(fā)生或?qū)朐摶罨瘹怏w的裝置。
通過(guò)使用這樣的裝置，可以很容易在均勻狀態(tài)下，使活化氣體與抗原性物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，生成高品質(zhì)的、非常適合用作活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)。進(jìn)一步優(yōu)選本發(fā)明的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的生成裝置，具備使抗原性物質(zhì)在該容器內(nèi)懸浮的裝置。通過(guò)容器的存在可以防止活化氣體和抗原性物質(zhì)的擴(kuò)散，所以即使通過(guò)對(duì)含有活化氣體的氣氛氣體進(jìn)行攪拌或使其流動(dòng)，使抗原性物質(zhì)飛起來(lái)懸浮在容器內(nèi)，抗原性物質(zhì)和活化氣體的濃度也能保持在一定范圍之內(nèi)。
其中，優(yōu)選該容器具有部分透明材質(zhì)或者全部是透明材質(zhì)。
這樣，由于是一部分或全部是透明材質(zhì)的容器，能夠通過(guò)目視觀察容器內(nèi)部抗原性物質(zhì)的懸浮狀態(tài)，所以具有容易調(diào)節(jié)抗原性物質(zhì)和活化氣體反應(yīng)條件的優(yōu)點(diǎn)。
圖2是表示另一例生成作為評(píng)價(jià)本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的試樣的、經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的裝置略圖。
圖2所示的裝置，具備有作為容器的半密閉型的圓筒型容器1027。還具有作為散布抗原性物質(zhì)裝置的噴霧器1024和注入口1028。具有作為使抗原性物質(zhì)在容器內(nèi)懸浮裝置的半密閉型圓筒型容器1027，由于其具有一定高度，所以在其內(nèi)部必然會(huì)形成抗原性物質(zhì)懸浮的狀態(tài)。而且具備有離子發(fā)生元件1021，作為向該容器中導(dǎo)入同時(shí)含有正離子1022、負(fù)離子1023的氣體作為活化氣體的裝置。
圖2所示裝置中，除此之外還示出了通過(guò)活化氣體處理的抗原性物質(zhì)的回收容器1025和含有活化氣體的氣氛氣體排氣口1026。
圖3是表示又一例生成作為評(píng)價(jià)本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的裝置略圖。
圖3所示的裝置，具備有作為容器的半密閉型圓筒型容器1037。還具備有作為散布抗原性物質(zhì)的裝置的注入口1038。還具有作為使抗原性物質(zhì)在容器內(nèi)懸浮裝置的半密閉型容器1037，由于其具有一定高度，所以在其內(nèi)部必然會(huì)形成抗原性物質(zhì)懸浮的狀態(tài)。而且具備有離子發(fā)生元件1031，作為向該容器內(nèi)導(dǎo)入含有正負(fù)兩種離子的氣體作為活化氣體的裝置。
圖4是表示又一例生成作為本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的評(píng)價(jià)試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的裝置略圖。
圖4所示的裝置，具備有作為容器的密閉型圓筒型容器1047。還具備有作為對(duì)抗原性物質(zhì)進(jìn)行散布的裝置的開(kāi)閉式蓋1048。還具有作為使抗原性物質(zhì)在容器內(nèi)懸浮的裝置的密閉型圓筒容器1047，由于其具有一定高度，所以通過(guò)沿長(zhǎng)度方向使其豎立，或沿長(zhǎng)度方向使其反復(fù)翻轉(zhuǎn)，在其內(nèi)部必然會(huì)形成抗原性物質(zhì)懸浮的狀態(tài)。而且具備有離子發(fā)生元件1041，作為向該容器內(nèi)導(dǎo)入含有正負(fù)兩種離子的氣體作為活化氣體的裝置。
圖4所示的裝置中，除此之外還示出有抗原性物質(zhì)1049、施加電壓的電極1042、電介質(zhì)1043、接地電極1044。
圖5是表示又一例生成作為評(píng)價(jià)本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的裝置略圖。
圖5所示的裝置，具備有作為容器的密閉型圓筒型容器1057。還具備有作為對(duì)抗原性物質(zhì)1053進(jìn)行散布的裝置的開(kāi)閉式蓋1058。還具有使抗原性物質(zhì)1053懸浮于容器內(nèi)裝置的風(fēng)扇1059。并且具備有離子發(fā)生元件1051，作為向該容器內(nèi)導(dǎo)入含有正負(fù)兩種離子1052的氣體作為活化氣體的裝置。
圖6是表示又一例生成作為本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的評(píng)價(jià)試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的裝置略圖。
圖6所示的裝置，具備有作為容器的密閉型圓筒型容器1067。還具備有作為對(duì)抗原性物質(zhì)1063進(jìn)行散布的裝置的開(kāi)閉式蓋1068。還具有作為使抗原性物質(zhì)1063在容器內(nèi)懸浮裝置的風(fēng)扇1069，以及只能透過(guò)活化氣體而不能透過(guò)抗原性物質(zhì)的過(guò)濾器1065。并且具備有離子發(fā)生元件1061，作為向該容器內(nèi)導(dǎo)入含有正負(fù)兩種離子1062的氣體作為活化氣體的裝置。
<離子發(fā)生元件>
作為評(píng)價(jià)本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的生成裝置中所使用的離子發(fā)生元件，是能夠發(fā)生正離子和負(fù)離子的元件，優(yōu)選能夠通過(guò)如后述的電沖擊而直接使抗原性物質(zhì)的變應(yīng)反應(yīng)失活的元件。
對(duì)于這種離子發(fā)生元件的安裝部位沒(méi)有特別限定，但通常優(yōu)選安裝在使抗原性物質(zhì)失活的裝置的通風(fēng)道上。這是因?yàn)橛呻x子發(fā)生元件所發(fā)生的正負(fù)兩種離子會(huì)在短時(shí)間內(nèi)消失，所以設(shè)計(jì)時(shí)要保證能使這些正負(fù)兩種離子有效地?cái)U(kuò)散到空氣中。離子發(fā)生元件的設(shè)置個(gè)數(shù)，可以是一個(gè)，也可以是兩個(gè)或兩個(gè)以上。
作為這種離子發(fā)生元件，可以使用已知的通過(guò)放電機(jī)理而發(fā)生正負(fù)兩種離子的離子發(fā)生元件。特別是選擇的離子發(fā)生元件在向空氣中輸送正負(fù)離子時(shí)，要使得在使正離子和負(fù)離子作用于抗原性物質(zhì)的氣氛氣體中，正負(fù)兩種離子的濃度分別達(dá)到10萬(wàn)個(gè)/cm3或其以上。而且在本說(shuō)明書(shū)中，所謂離子濃度的意義是指小離子濃度，作為該小離子濃度的測(cè)定方法，可以采用使臨界遷移率達(dá)到1cm3/V·秒，通過(guò)空氣離子計(jì)數(shù)器(ダン科學(xué)制空氣離子計(jì)數(shù)器(商品號(hào)為83-1001B))進(jìn)行測(cè)定的值。
其中所說(shuō)的放電機(jī)理，是具有用電極夾持絕緣體的結(jié)構(gòu)，在一側(cè)施加交流的高電壓，同時(shí)使另一側(cè)電極接地，通過(guò)施加高壓電，在接地電極附近的空氣層中形成等離子區(qū)放電，對(duì)空氣中的水分子和氧分子進(jìn)行電離或離解而生成正負(fù)兩種離子的機(jī)理。在這種放電機(jī)理中，使施加電壓側(cè)的電極形狀為板狀或網(wǎng)狀，使接地側(cè)電極為網(wǎng)狀時(shí)，如果施加高電壓，則電場(chǎng)在接地側(cè)電極的網(wǎng)端面部位集中，引起表面放電，形成等離子體區(qū)域。如果空氣流入該等離子體區(qū)域，就可以生成正負(fù)兩種離子。
作為具有這種放電機(jī)理的元件，可以列舉如表面放電元件、電暈放電元件、等離子區(qū)放電元件等等、但是也并不局限于這幾種元件。另外在放電元件的電極形狀和材質(zhì)方面，也不受上述形狀和材質(zhì)的限定，可以從所有形狀、材質(zhì)的元件中進(jìn)行選擇。
圖7是表示本發(fā)明中所用的離子發(fā)生元件的一個(gè)結(jié)構(gòu)例略圖。
作為這種離子發(fā)生元件，更具體的是優(yōu)選如圖7所示，用施加電壓的板狀電極7002和接地的網(wǎng)狀電極7004夾持電介質(zhì)7003，通過(guò)高壓電源7001交替對(duì)板狀電極施加正極和負(fù)極電壓，使電場(chǎng)在網(wǎng)狀電極的網(wǎng)端面集中，引起等離子區(qū)放電，形成等離子體區(qū)域7005，生成正負(fù)兩種離子結(jié)構(gòu)的元件。
為了發(fā)生并輸送這些正負(fù)兩種離子所需要的外加電壓，隨離子發(fā)生元件的結(jié)構(gòu)不同而異，但是作為電極間的峰間值(peak to peak)電壓范圍可以是2～10kV，優(yōu)選3～7kV。
<通過(guò)含有正負(fù)兩種離子的氣體使抗原性物質(zhì)失活>
本發(fā)明人使用作為評(píng)價(jià)本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的生成裝置，通過(guò)本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的評(píng)價(jià)方法，如后面的實(shí)施例中所述，發(fā)現(xiàn)了含有正負(fù)兩種離子的氣體具有使抗原性物質(zhì)失活的功能。
但是本發(fā)明并不局限于正負(fù)離子，還可以以各種氣體或氣體濃度作為對(duì)象而使用。
可以認(rèn)為通過(guò)使用含有正負(fù)兩種離子的氣體而使抗原性物質(zhì)失活的機(jī)理，不僅是如上所述的基于化學(xué)反應(yīng)的機(jī)理，而且還包括通過(guò)離子發(fā)生元件中的電沖擊對(duì)抗原性物質(zhì)的抗體反應(yīng)部位進(jìn)行變性或破壞而導(dǎo)致失活的機(jī)理。
也就是可以認(rèn)為抗原性物質(zhì)的抗體反應(yīng)部位，在產(chǎn)生正負(fù)兩種離子時(shí)由于施加電壓而引起的等離子區(qū)放電自身的作用，也會(huì)產(chǎn)生變性或受到破壞，在這種電沖擊下，抗原性物質(zhì)和抗體的結(jié)合能力也會(huì)喪失，從而使抗原性物質(zhì)失活。
這樣，通過(guò)本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的評(píng)價(jià)方法，是可以通過(guò)電沖擊和/或化學(xué)反應(yīng)對(duì)抗原性物質(zhì)的抗體反應(yīng)部位進(jìn)行變性或破壞，從而使抗原性物質(zhì)失活的方法，特別是通過(guò)電沖擊和化學(xué)反應(yīng)二者的協(xié)同作用，可以得到使抗原性物質(zhì)有效失活的結(jié)果。
<含有正負(fù)兩種離子的氣體的輸出方法>
本發(fā)明人通過(guò)本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的評(píng)價(jià)方法，如后述的，發(fā)現(xiàn)了在使用含有正負(fù)兩種離子的氣體作為活化氣體時(shí)，究竟應(yīng)優(yōu)選使用怎樣的方法作為輸出含正負(fù)兩種離子氣體的方法。
也就是本發(fā)明中所使用的正負(fù)兩種離子，主要是通過(guò)離子發(fā)生元件的放電現(xiàn)象而發(fā)生的，通常，通過(guò)交替施加正負(fù)電壓，幾乎可以同時(shí)發(fā)生正負(fù)兩種離子，并將其輸送到空氣中。但是本發(fā)明的輸送正負(fù)兩種離子的方法，并不局限于此，還可以首先在一定時(shí)間內(nèi)只施加正負(fù)電壓中的任意一種電壓，只輸出正負(fù)離子中的任意一種離子，然后再施加一定時(shí)間的相反電壓，輸出具有與已輸出離子相反電荷的離子。
其中，發(fā)生并輸出該正負(fù)兩種離子所必需的外加電壓，隨電極結(jié)構(gòu)不同而異，但是作為電極間的峰間值電壓范圍可以是2～10kV，優(yōu)選3～7kV。
另外，本發(fā)明中所用的正離子和負(fù)離子，優(yōu)選在相對(duì)濕度為20～90％，更優(yōu)選相對(duì)濕度在40～70％的條件下發(fā)生。如后述的正負(fù)兩種離子的發(fā)生，與空氣中的水分子存在相關(guān)。也就是當(dāng)相對(duì)濕度低于20％時(shí)，不能適當(dāng)進(jìn)行由以離子為中心的水分子而引起的凝聚作用，離子之間容易引起再結(jié)合，所以所發(fā)生的離子壽命變短。而當(dāng)相對(duì)濕度超過(guò)90％時(shí)，由于水分在離子發(fā)生元件表面結(jié)露，離子的發(fā)生效率明顯降低，而且所發(fā)生的離子也因凝聚作用的過(guò)度進(jìn)行，而被許多水分子包圍，故而使離子的重量增加得太多，有可能在沒(méi)有向遠(yuǎn)處輸送的狀態(tài)下，就產(chǎn)生沉降。因此，如上所述在濕度極低或濕度極高的狀態(tài)下發(fā)生離子都是不理想的。
作為本發(fā)明正負(fù)兩種離子的輸出方法，不僅有前面敘述的采用放電現(xiàn)象的方法，還可以采用能夠發(fā)出紫外線和電子射線裝置等的方法。
<正負(fù)兩種離子的鑒定>
本發(fā)明中，當(dāng)使用含有正負(fù)兩種離子的氣體作為活化氣體時(shí)，正離子和負(fù)離子能以存在于放電元件表面的氧分子和/或水分子為原料而發(fā)生。如果按照這種發(fā)生方法，由于不需要特別的原料，而在成本方面有利。不僅如此，原料自身沒(méi)有有害性，不會(huì)產(chǎn)生其它有害離子和物質(zhì)，所以是優(yōu)選的。
其中，通過(guò)上述離子發(fā)生元件的放電現(xiàn)象而發(fā)生的正負(fù)兩種離子的組成，作為正離子，主要是通過(guò)等離子區(qū)放電，使空氣中的水分子電離，生成氫離子H+，該氫離子H+在溶劑化能的作用下，與空氣中的水分子進(jìn)行凝聚，形成H3O+(H2O)n(n為0或自然數(shù))。其中如果換一種表示方法，作為正離子表述的H3O+(H2O)n(n為0或自然數(shù))則可以表述為H+(H2O)n(n為自然數(shù))，也表示相同的離子。
圖8A和8B是表示由離子發(fā)生元件生成的正離子和負(fù)離子的質(zhì)譜。
從圖8A中，可以觀察到的最小峰位于分子量19的位置，后面的峰出現(xiàn)在相對(duì)于該分子量19順次加上相當(dāng)于水分子量18的位置，由此表明水分子進(jìn)行了凝聚。也就是該結(jié)果表明在分子量為1的氫離子H+上，分子量為18的水分子與其形成一個(gè)整體，進(jìn)行水合。另一方面作為負(fù)離子，通過(guò)等離子區(qū)放電，空氣中的氧分子或水分子進(jìn)行電離，生成氧離子O2-，該氧離子O2-在溶劑化能的作用下，與空氣中的水分子凝聚形成O2-(H2O)m(m為0或自然數(shù))。從圖2(b)中，可以觀察到的最小峰位于分子量32的位置，后面的峰出現(xiàn)在相對(duì)于該分子量32順次加上相當(dāng)于水分子量18的位置，由此表明水分子進(jìn)行了凝聚。也就是該結(jié)果表明在分子量為32的氧離子O2-上，分子量為18的水分子與其形成一個(gè)整體，進(jìn)行水合。
并且輸送到空間的這些正負(fù)兩種離子包圍了懸浮在空氣中的抗原性物質(zhì)，可以推斷在抗原性物質(zhì)表面，正負(fù)兩種離子通過(guò)下面的化學(xué)反應(yīng)(1)～(2)生成活性種類(lèi)的過(guò)氧化氫H2O2、二氧化氫(hydrogendioxide)HO2或羥基自由基·OH。
...(1)...(2)可以這樣理解，象這樣正負(fù)兩種離子作用生成的過(guò)氧化氫H2O2、二氧化氫HO2或羥基自由基·OH，對(duì)抗原性物質(zhì)的抗體部位進(jìn)行變性或破壞(分解)，使得抗原性物質(zhì)和抗體的結(jié)合能力喪失，可以有效地使空氣中的抗原性物質(zhì)失活。
在上述說(shuō)明中，分別以作為正離子的H3O+(H2O)n(n為0或自然數(shù))，作為負(fù)離子的O2-(H2O)m(m為0或自然數(shù))為中心進(jìn)行了敘述，但是本發(fā)明中的正負(fù)離子并不受它們的限定。以上述兩種正負(fù)離子為主，作為正離子，還可以列舉N2+、O2+等；作為負(fù)離子可以列舉NO2-、CO2-等。即使含有這些離子也可以期待獲得相同的效果。
實(shí)施例下面通過(guò)實(shí)施例更詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明的情況，但是本發(fā)明不受這些
<杉樹(shù)花粉>
從在廣島縣豐町生長(zhǎng)的日本杉樹(shù)(Cryptomeria japonica)的樹(shù)枝上采集杉樹(shù)花粉。采集過(guò)程中采用裝有網(wǎng)布的吸塵器，然后進(jìn)行過(guò)篩收集花粉。收集后采用-30℃的冰箱進(jìn)行保存。
<杉樹(shù)抗原性物質(zhì)>
把杉樹(shù)花粉80g在20mM PBS(pH7.4)3.2L中，于4℃下，攪拌4小時(shí)后，以6000rpm的轉(zhuǎn)速進(jìn)行30分鐘的離心分離。離心分離后，在上清中加入硫酸銨，并使其最終濃度達(dá)到80％飽和，以6000rpm的轉(zhuǎn)速，進(jìn)行30分鐘的離心分離。離心分離后，反復(fù)進(jìn)行6次6小時(shí)的透析處理，再以10000rpm的轉(zhuǎn)速，進(jìn)行30分鐘的離心分離。離心分離后，對(duì)所得上清進(jìn)行冷凍干燥，作為杉樹(shù)抗原性物質(zhì)。本說(shuō)明書(shū)中，把杉樹(shù)抗原性物質(zhì)記作CJP。
<用Folin-Lowry法進(jìn)行的蛋白量測(cè)定> A液 以1N的苯酚試劑作為酸溶液B液 2％，Na2CO30.1N NaOHC液 0.5％， CuSO4·5H2O1％ 檸檬酸鈉D液 B∶C＝50∶1(v/v)的混合液[測(cè)定方法]將樣品0.2ml和D液1ml混合，放置10分鐘。接著加入A液0.1ml放置30分鐘后，測(cè)定其在750nm處的吸光率。還用BSA制成標(biāo)準(zhǔn)系列，并用相同順序制備校正曲線，將樣品的蛋白量作為BSA換算量進(jìn)行定量。
<杉樹(shù)抗原性物質(zhì)的散布、回收>
把從杉樹(shù)花粉提取的杉樹(shù)抗原性物質(zhì)(蛋白濃度200ng/ml)在正負(fù)離子的照射下，用噴霧器進(jìn)行散布。在散布容器的底部設(shè)置回收皿，可以只回收不與容器壁面接觸而經(jīng)離子處理的抗原。用1.5小時(shí)散布8ml溶液(含杉樹(shù)抗原性物質(zhì))。
<實(shí)施例1>
本實(shí)施例是采用杉樹(shù)花粉的抗原性物質(zhì)，確認(rèn)經(jīng)正負(fù)兩種離子作用引起抗原性物質(zhì)的變應(yīng)反應(yīng)降低的情況。
其中圖2是列舉一例說(shuō)明作為評(píng)價(jià)本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)生成裝置的略圖。圖8A、8B是表示由圖2所示裝置中設(shè)置的離子發(fā)生元件生成的正離子和負(fù)離子的質(zhì)譜。
首先在圖2所示的裝置中，作為離子發(fā)生元件1021，使用的是長(zhǎng)37mm，寬15mm的平板狀表面放電元件。并且通過(guò)在電極間交替施加正和負(fù)的電壓，使得在表面電極部分引起表面放電，由在大氣壓下的放電等離子區(qū)，同時(shí)生成并輸出正離子1022和負(fù)離子1023。所加電壓的電極間的峰間值電壓范圍是3.3kV～3.7kV。在該電壓范圍，不會(huì)產(chǎn)生對(duì)人體有害水平的臭氧。在內(nèi)徑為150mm、長(zhǎng)度為370mm的丙烯酸酯制的半密閉型的圓筒容器1027中，安裝固定4個(gè)這樣的離子發(fā)生元件，在該容器的一側(cè)設(shè)置散布抗原物質(zhì)溶液的注入口1028，在該容器的另一側(cè)設(shè)置抗原性物質(zhì)液體的回收容器1025。
當(dāng)使用從杉樹(shù)花粉中提取的抗原物質(zhì)作為抗原物質(zhì)時(shí)，杉樹(shù)花粉是從在廣島縣豐町生長(zhǎng)的日本杉樹(shù)(Cryptomeria japonica)的樹(shù)枝上采集的。采集過(guò)程中采用裝有網(wǎng)布的吸塵器，然后進(jìn)行過(guò)篩收集花粉。收集后采用-30℃的冰箱進(jìn)行保存。從杉樹(shù)花粉中提取抗原物質(zhì)的方法是把杉樹(shù)花粉80g在20mM PBS(pH7.4)3.2L中，于4℃下，攪拌4小時(shí)，然后以6000rpm的速度進(jìn)行30分鐘的離心分離。離心分離后，在上清中加入硫酸銨，并使其最終濃度達(dá)到80％飽和，以6000rpm的轉(zhuǎn)速，進(jìn)行30分鐘的離心分離。離心分離后，反復(fù)進(jìn)行6次6小時(shí)的透析處理，再以10000rpm的轉(zhuǎn)速，進(jìn)行30分鐘的離心分離。離心分離后，對(duì)所得上清進(jìn)行冷凍干燥，作為抗原物質(zhì)液。
把供試驗(yàn)的抗原物質(zhì)液8ml放入到噴霧器1024中，與圖2所示裝置的散布抗原性物質(zhì)用的注入口1028連結(jié)。同一裝置的抗原物質(zhì)液的回收容器1025，設(shè)置在半密閉型圓筒容器1027的底部。噴霧器與空氣壓縮機(jī)連結(jié)，通過(guò)壓縮空氣(流量5L/分鐘)從注入口1028散布供試驗(yàn)的抗原性物質(zhì)。散布量，為8.0ml(散布時(shí)間為90分鐘)。通過(guò)回收容器捕集90分鐘內(nèi)沉降在半密閉型圓筒容器底部的抗原性物質(zhì)。被噴霧的抗原性物質(zhì)，在空氣中經(jīng)90秒鐘自然落下，與空氣中的正離子1022和負(fù)離子1023作用。
通過(guò)ELISA法對(duì)與從花粉癥患者采集的血清IgE抗體的反應(yīng)性進(jìn)行測(cè)定。其中正負(fù)兩種離子的濃度是按照如上所述的從設(shè)置有離子發(fā)生元件1021的半密閉型圓筒容器1027的散布抗原性物質(zhì)液體用的注入口1028處，通過(guò)空氣壓縮機(jī)以5L/分鐘的流量輸入空氣，在抗原性物質(zhì)液體回收容器1025中設(shè)置ダン科學(xué)制造的空氣離子計(jì)數(shù)器(商品號(hào)為83-1001B)測(cè)定該空間的正負(fù)兩種離子的總濃度?？臻g氣氛的溫度為25℃，相對(duì)濕度為60％RH?？梢酝茢啵鐖D8A、8B所示，被輸出的正離子為H3O+(H2O)n(n為0或任意自然數(shù))，負(fù)離子為O2-(H2O)m(m為0或任意自然數(shù))，該正負(fù)兩種離子，通過(guò)前述化學(xué)反應(yīng)(1)和(2)生成過(guò)氧化氫H2O2、二氧化氫HO2或羥基自由基·OH。
把離子發(fā)生元件1021不工作時(shí)的狀態(tài)定為未處理狀態(tài)，對(duì)該元件分別施加電極間的峰間值電壓是3.3kV～3.7kV的電壓，輸出正負(fù)兩種離子，研究使半密閉型圓筒容器1027內(nèi)部的正負(fù)兩種離子的濃度達(dá)到正負(fù)兩種離子分別為10萬(wàn)個(gè)/cm3時(shí)，抗原性物質(zhì)和IgE抗體的變應(yīng)反應(yīng)性降低的情況。結(jié)果如圖9A、9B和圖10A、10B所示。
圖9A、圖9B是表示用含有正負(fù)兩種離子的氣體，對(duì)杉樹(shù)抗原性物質(zhì)進(jìn)行處理時(shí)和未處理時(shí)，抗原性物質(zhì)與花粉癥患者19～40的血清IgE抗體的變應(yīng)反應(yīng)關(guān)系的圖表。
圖10A、圖10B是表示用含有正負(fù)兩種離子的氣體，對(duì)杉樹(shù)抗原性物質(zhì)進(jìn)行處理時(shí)和未處理時(shí)，抗原性物質(zhì)與花粉癥患者41～60的血清IgE抗體的變應(yīng)反應(yīng)關(guān)系的圖表。
如圖9A、9B和圖10A、10B所示，可以確認(rèn)離子發(fā)生元件不工作時(shí)(也就是不發(fā)生正負(fù)離子的狀態(tài)下)和正負(fù)兩種離子的濃度分別達(dá)到10萬(wàn)個(gè)/cm3時(shí)，花粉患者的血清IgE抗體的反應(yīng)性(結(jié)合性)在花粉患者42人中，有33人的血清IgE抗體反應(yīng)性呈現(xiàn)出顯著的降低。
在用噴霧器散布后，不使離子發(fā)生元件工作的未處理時(shí)，以及對(duì)該元件分別施加電極間的峰間值電壓為3.3kV～3.7kV的電壓，并輸出正負(fù)離子，使半密閉型圓筒容器1027內(nèi)的正負(fù)離子濃度分別達(dá)到10萬(wàn)個(gè)/cm3時(shí)，對(duì)Cry j 1和Cry j 2單克隆抗體和血清IgE抗體的反應(yīng)性降低情況進(jìn)行了研究。把結(jié)果如圖11所示。
圖11是表示用含有正負(fù)離子的氣體對(duì)杉樹(shù)抗原性物質(zhì)進(jìn)行處理時(shí)及未處理時(shí)，Cry j 1和Cry j 2與其單克降抗體反應(yīng)性關(guān)系的圖表。
可以確認(rèn)當(dāng)離子發(fā)生元件不工作時(shí)(也就是不發(fā)生正負(fù)離子的狀態(tài))和正負(fù)兩種離子分別達(dá)到10萬(wàn)個(gè)/cm3時(shí)，花粉患者的血清IgE抗體的反應(yīng)性(結(jié)合性)，在進(jìn)行離子處理時(shí)，Cry j 1和Cry j 2單克降抗體的血清IgE抗體反應(yīng)性呈現(xiàn)出顯著的降低。
為了對(duì)經(jīng)離子處理和未經(jīng)離子處理的杉樹(shù)抗原性物質(zhì)與花粉癥患者血清IgE的反應(yīng)性區(qū)別進(jìn)行定量評(píng)價(jià)，采用ELISA抑制法進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。
具體是把噴霧后回收的杉樹(shù)抗原性物質(zhì)放入到離心分離機(jī)(Centriprep YM-10)中，以2500rpm的轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心濃縮。再把該濃縮液放到離心分離機(jī)(ULTRA FLEE-MC)中，以7000rpm轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心濃縮。對(duì)濃縮的離子處理杉樹(shù)抗原性物質(zhì)和未經(jīng)處理的杉樹(shù)抗原性物質(zhì)，從蛋白質(zhì)濃度11μg/ml反復(fù)進(jìn)行8次5倍稀釋。分別將稀釋的各抗原性物質(zhì)50μl和10倍稀釋的患者血清IgE 50μl混合，在4℃下預(yù)孵育一夜。
在ELISA用96-孔板上施加用碳酸氫鹽緩沖液(Bicarbonatebuffer)稀釋到1μg/ml的杉樹(shù)抗原性物質(zhì)(也可以不進(jìn)行散布)，每孔加50μl，靜止放置2小時(shí)。用洗滌緩沖液(Washing buffer)對(duì)板進(jìn)行3次洗滌，然后施加封閉緩沖液(Blocking buffer)300μl，在4℃下靜止放置一夜。對(duì)板進(jìn)行3次洗滌后，分別向每孔加入經(jīng)預(yù)孵育的試樣50μl，靜止放置4小時(shí)。
對(duì)板進(jìn)行3次洗滌后，施加經(jīng)(3％脫脂乳+1％BSA)/PBST稀釋1000倍的生物素標(biāo)記的抗人IgE，每孔50μl，靜止放置2.5小時(shí)。對(duì)板進(jìn)行3次洗滌后，施加經(jīng)(3％脫脂乳+1％BSA)/PBST稀釋1000倍的堿性磷酸酶標(biāo)記的鏈霉抗生物素50μl，在室溫下靜止放置1.5小時(shí)。
對(duì)板進(jìn)行4次洗滌后，施加AttophosTM底物緩沖液，每孔50μl，在遮光狀態(tài)下放置至發(fā)色。通過(guò)CytoTMF luorII測(cè)定熒光強(qiáng)度。對(duì)未使離子發(fā)生元件工作的未處理時(shí)、以及向該元件中分別施加作為電極間的峰間值電壓是3.3kV～3.7kV的電壓，輸出正負(fù)兩種離子，使半密閉型圓筒容器1027內(nèi)正負(fù)兩種離子的濃度分別達(dá)到10萬(wàn)個(gè)/cm3時(shí)，花粉患者的血清IgE抗體的反應(yīng)性(結(jié)合性)進(jìn)行了研究。其結(jié)果如圖12所示。
圖12是表示在用含有正負(fù)兩種離子的氣體處理杉樹(shù)抗原性物質(zhì)時(shí)及未處理時(shí)，通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附抑制法，測(cè)定抗原性物質(zhì)和花粉癥患者的血清IgE抗體變應(yīng)反應(yīng)性關(guān)系圖。
當(dāng)離子發(fā)生元件不工作時(shí)(也就是不發(fā)生正負(fù)離子的狀態(tài))，50％抑制所必需的杉樹(shù)抗原性物質(zhì)量為2.53×103pg；與此相反，當(dāng)正負(fù)兩種離子濃度分別為10萬(wàn)個(gè)/cm3時(shí)，50％抑制所必需的杉樹(shù)抗原性物質(zhì)量為1.34×104pg，可以確認(rèn)其反應(yīng)失活率為81％。
通過(guò)結(jié)核菌素用注射器，分別把用0.9％NaCl對(duì)經(jīng)離子處理和未經(jīng)離子處理的杉樹(shù)花粉抗原性物質(zhì)稀釋到蛋白濃度為0.5μg/ml的稀釋液0.02ml注射到杉樹(shù)花粉癥患者的前臂內(nèi)側(cè)皮內(nèi)，約15分鐘后測(cè)定出現(xiàn)的紅斑、腫脹部分的長(zhǎng)徑和短徑，通過(guò)其平均直徑評(píng)價(jià)反應(yīng)性。結(jié)果如表1所示。
表1

把紅斑＜10mm的記為-，把紅斑為10-20mm的記為±，把紅斑為20-30mm、腫脹部分＜10mm的記為+，把紅斑為30-40mm、腫脹部分為10-14mm的記為++，把紅斑＞40mm、腫脹部分＞15mm、并且腫脹部分出現(xiàn)偽足的記為+++。如表1所示，在離子發(fā)生元件不工作的未處理情況(也就是不產(chǎn)生正負(fù)離子的狀態(tài))下，和在正負(fù)兩種離子濃度分別達(dá)到10萬(wàn)個(gè)/cm3的情況下，可以確認(rèn)花粉癥患者的皮內(nèi)反應(yīng)性呈現(xiàn)顯著的降低。
再通過(guò)移液器把用0.9％NaCl對(duì)經(jīng)離子處理和未經(jīng)離子處理的杉樹(shù)抗原性物質(zhì)稀釋到蛋白濃度為0.5μg/ml的稀釋液5μl滴入到杉樹(shù)花粉患者的眼中，大約15分鐘后，觀察作為結(jié)膜反應(yīng)的半月襞，眼瞼皮以及球結(jié)膜的充血，發(fā)癢程度，流淚等情況。判定時(shí)，把完全看不到充血的情況定為-，把稍微可以看到充血的具有癢感的情況定為±，把球結(jié)膜的上部或下部一側(cè)出現(xiàn)充血的定為+，把球結(jié)膜的上部和下部都出現(xiàn)充血的定為++，把整個(gè)球結(jié)膜中出現(xiàn)充血的定為+++，把眼瞼出現(xiàn)浮腫的定為++++。把觀察結(jié)果如表1所示。
如表1所示，在離子發(fā)生元件不工作的未處理情況(也就是不產(chǎn)生正負(fù)離子的狀態(tài)下)，和在正負(fù)兩種離子濃度分別達(dá)到10萬(wàn)個(gè)/cm3的情況下，可以確認(rèn)花粉癥患者的結(jié)膜反應(yīng)性呈現(xiàn)顯著的降低。
<實(shí)施例2>
使用上述酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法中患者19的血清IgE作為抗體，使抗原性物質(zhì)(杉樹(shù)抗原性物質(zhì))濃度(作為蛋白質(zhì)濃度)分別為100ng/ml、200ng/ml、400ng/ml、800ng/ml的4種濃度，按照與上述相同的操作(也就是裝置采用上述圖3所示的裝置；進(jìn)行離子處理時(shí)，正負(fù)離子濃度分別為10萬(wàn)個(gè)/cm3)，通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附法分別求出未處理的杉樹(shù)抗原性物質(zhì)和經(jīng)離子處理的杉樹(shù)抗原性物質(zhì)的熒光強(qiáng)度。并且通過(guò)該熒光強(qiáng)度，根據(jù)下述計(jì)算式(3)求出變應(yīng)反應(yīng)的反應(yīng)失活率。把結(jié)果如表2所示。
表2

反應(yīng)失活率％＝(1-C/D)×100 ...(3)C經(jīng)離子處理的杉樹(shù)抗原性物質(zhì)的熒光強(qiáng)度D未經(jīng)處理的杉樹(shù)抗原性物質(zhì)的熒光強(qiáng)度接著，以上述抗原性物質(zhì)的濃度為200ng/ml的情況作為基準(zhǔn)進(jìn)行選擇，在離子濃度和抗原性物質(zhì)濃度之間存在以下關(guān)系的前提下，求出不同正負(fù)離子濃度與反應(yīng)失活率的關(guān)系。也就是可以認(rèn)為如果反應(yīng)失活率一定，那么在離子濃度和抗原性物質(zhì)濃度之間就存在一定關(guān)系，例如設(shè)離子濃度一定，將抗原性物質(zhì)濃度減到一半的狀態(tài)，與設(shè)抗原性物質(zhì)濃度一定，將離子濃度增加到2倍的狀態(tài)下，可以得到相同的反應(yīng)失活率。因此以上述抗原性物質(zhì)濃度為200ng/ml的兩個(gè)點(diǎn)為基準(zhǔn)，把不同正負(fù)離子濃度與反應(yīng)失活率的關(guān)系出示在圖13中。也就是圖13中，正負(fù)離子濃度為2.5萬(wàn)個(gè)/cm3、5萬(wàn)個(gè)/cm3、10萬(wàn)個(gè)/cm3、20萬(wàn)個(gè)/cm3的數(shù)據(jù)，分別對(duì)應(yīng)于上述酶聯(lián)免疫吸附法中的抗原性物質(zhì)濃度800ng/ml、400ng/ml、200ng/ml、100ng/ml時(shí)的數(shù)據(jù)(圖13的橫坐標(biāo)表示正負(fù)離子的不同濃度)。
如圖13明確所示，如果正負(fù)離子濃度增加，則反應(yīng)失活率也提高，特別是如果正負(fù)離子濃度分別為5萬(wàn)個(gè)/cm3，則反應(yīng)失活率可以達(dá)到78％左右，可以獲得穩(wěn)定的抗原性物質(zhì)失活的效果。另外如果正負(fù)離子濃度分別為10萬(wàn)個(gè)/cm3，則反應(yīng)失活率可以達(dá)到83％，如果進(jìn)一步使正負(fù)離子濃度分別為20萬(wàn)個(gè)/cm3，則反應(yīng)失活率可以達(dá)到94％，可以期待有效抑制花粉癥和壁虱過(guò)敏等變應(yīng)性疾病。
在實(shí)施例1和實(shí)施例2中，作為活化氣體使用了含有正負(fù)兩種離子的氣體；作為抗原性物質(zhì)使用了來(lái)源于杉樹(shù)花粉的抗原性物質(zhì)，但是如果通過(guò)使用本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能的評(píng)價(jià)方法，對(duì)于其它種類(lèi)的活化氣體和其它種類(lèi)的抗原性物質(zhì)，也同樣可以準(zhǔn)確而簡(jiǎn)便地對(duì)活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能進(jìn)行評(píng)價(jià)。
另外在實(shí)施例1和實(shí)施例2中，使用如圖2所示的作為本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的生成裝置，生成了經(jīng)處理抗原性物質(zhì)，即使使用如圖3～圖6所示的裝置生成經(jīng)處理抗原性物質(zhì)，也同樣可以準(zhǔn)確而簡(jiǎn)便地對(duì)活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能進(jìn)行評(píng)價(jià)。
<實(shí)施例3>
本實(shí)施例是使用壁虱粉塵的抗原性物質(zhì)，確認(rèn)通過(guò)正負(fù)兩種離子的作用使抗原性物質(zhì)失活的情況。以下參照?qǐng)D14和圖15進(jìn)行說(shuō)明。
圖14是實(shí)施通過(guò)正離子和負(fù)離子作用使抗原性物質(zhì)失活方法的裝置略圖。圖15是表示通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法對(duì)壁虱抗原性物質(zhì)(簡(jiǎn)稱為Derf)與患者a～r共計(jì)18名的血清IgE反應(yīng)性進(jìn)行評(píng)價(jià)的圖。圖14的裝置，與圖2的裝置一樣，具有圖7所示的離子發(fā)生元件，通過(guò)該元件輸出的正離子和負(fù)離子的質(zhì)譜如圖8A、8B所示。
<實(shí)施使抗原性物質(zhì)失活方法的裝置>
首先本實(shí)施例中所用的圖14所示的裝置與圖2所示的裝置是一樣的(因此，圖2和圖14中標(biāo)有相同參照符號(hào)的部分表示相同部分或相當(dāng)部分)，只是在具備降低臭氧濃度的裝置這一點(diǎn)上有所不同。也就是圖14所示的裝置中，一側(cè)的排氣口1026和噴霧器1024是通過(guò)過(guò)濾器1029連結(jié)的。該過(guò)濾器1029包含有活性炭和分子篩，具有除去在圓筒型密閉容器1027中所發(fā)生的臭氧的作用。因此該圓筒型密閉容器1027中的臭氧濃度可以維持在0.025ppm或其以下。
在圖14所示的裝置中，與圖2的裝置一樣，抗原性物質(zhì)1038由注入口1028噴入，然后自然落下到回收容器1025上，在這期間暴露在正負(fù)兩種離子中，并受到其作用。
<壁虱粉塵和抗原性物質(zhì)>
作為抗原性物質(zhì)，使用由壁虱粉塵中提取的抗原性物質(zhì)。壁虱粉塵以一般存在于家庭中的壁虱粉塵為對(duì)象，通過(guò)安裝有網(wǎng)布的吸塵器，從坐墊與絨毯中收集。
為了從壁虱粉塵中提取抗原性物質(zhì)，把壁虱粉塵0.1g置于20mM的磷酸緩沖溶液(PBS，pH7.4)15ml中，在4℃的溫度條件下，攪拌16小時(shí)后，使其通過(guò)膜過(guò)濾器(0.2μm)把得到的物質(zhì)作為壁虱抗原性物質(zhì)。該壁虱抗原性物質(zhì)中還含有抗原性物質(zhì)Derf1和Derf2。
<通過(guò)Folin-Lowry法進(jìn)行的蛋白質(zhì)定量>
把含有壁虱抗原性物質(zhì)的溶液0.2ml和下述D液1ml混合，放置10分鐘。接著加入下述A液0.1ml，放置30分鐘后，測(cè)定其在750nm處的吸光率。再用牛血清蛋白質(zhì)(BSA)制備標(biāo)準(zhǔn)系列，按照相同順序制備校正曲線，作為BSA換算量，對(duì)壁虱抗原性物質(zhì)的蛋白質(zhì)的量進(jìn)行定量。結(jié)果其蛋白質(zhì)濃度為94.1ng/ml。其中所用的各種試劑如下(試劑)A液以1N的苯酚試劑作為酸溶液。
B液2％Na2CO3+0.1N的NaOH
C液0.5％CuSO4·5H2O+1％檸檬酸鈉D液B液∶C液＝50∶1(v/v)<抗原性物質(zhì)的噴霧與回收>
將這樣得到的含有抗原性物質(zhì)即壁虱抗原性物質(zhì)的溶液(蛋白質(zhì)濃度為200ng/ml)8ml放入到噴霧器1024中，連結(jié)到圖14中所示裝置的抗原性物質(zhì)溶液噴霧用的注入口1028上。另一方面為了能夠回收含有所噴霧抗原性物質(zhì)的溶液，在圓筒型密閉容器1027的底部設(shè)置回收容器1025。
將噴藥?kù)F化器與空氣壓縮機(jī)連結(jié)，通過(guò)壓縮空氣(流量為5L/分鐘)從注入口1028對(duì)抗原性物質(zhì)1038進(jìn)行噴霧。噴霧量為8.0ml(噴霧時(shí)間90分鐘)。90分鐘后，通過(guò)回收容器1025回收沉降在圓筒型密閉容器1027底部的抗原性物質(zhì)。噴霧的抗原性物質(zhì)1038通過(guò)圓筒型容器1027自然落下約需要90秒鐘。
噴霧和回收該抗原性物質(zhì)1038，是在使離子發(fā)生元件1021工作時(shí)(即進(jìn)行離子處理時(shí))和使其不工作時(shí)(即不處理時(shí))，進(jìn)行兩遍。
使離子發(fā)生元件1021工作，使正離子和負(fù)離子作用于抗原性物質(zhì)時(shí)，其氣氛中(也就是圓筒型密封容器1027中)的正負(fù)兩種離子濃度是如下求出的從由設(shè)置離子發(fā)生元件1021的圓筒型密閉容器1027的抗原性物質(zhì)溶液噴霧用的注入口1028，通過(guò)空氣壓縮機(jī)，使空氣以5L/分鐘的流量流過(guò)，在抗原性物質(zhì)溶液的回收容器1025上設(shè)置アンデス電氣制造的空氣離子計(jì)數(shù)器(商品號(hào)為ITC-201A)測(cè)定正負(fù)兩種離子的濃度。結(jié)果對(duì)該離子發(fā)生元件1021分別施加電極間的峰間值電壓為3.3kV～3.7kV的電壓時(shí)，圓筒型密閉容器1027內(nèi)氣氛中的正負(fù)兩種離子濃度分別達(dá)到10萬(wàn)個(gè)/cm3?？臻g氣氛的其它條件是溫度為25℃，相對(duì)濕度為60％RH?？梢酝茢?，如圖8A、8B所示，被輸出的正離子為H3O+(H2O)n，(n為0或自然數(shù))，負(fù)離子為O2-(H2O)m(m為0或自然數(shù))，該正負(fù)兩種離子，通過(guò)前述化學(xué)反應(yīng)(1)～(2)生成過(guò)氧化氫H2O2、二氧化氫HO2以及羥基自由基·OH。
<通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法進(jìn)行反應(yīng)性的評(píng)價(jià)>
接著通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定這樣收集得到的壁虱抗原性物質(zhì)和從壁虱過(guò)敏患者a～r采集的血清IgE抗體的反應(yīng)性。對(duì)于抗原性物質(zhì)，通過(guò)對(duì)經(jīng)如上所述的正負(fù)離子作用的處理物質(zhì)(離子處理壁虱抗原性物質(zhì))和未處理物質(zhì)(未經(jīng)處理的壁虱抗原性物質(zhì))進(jìn)行比較，評(píng)價(jià)其反應(yīng)性。
具體做法是在酶聯(lián)免疫吸附用96孔板(ELISA用96-孔板)上施加用碳酸氫鈉緩沖液(Bicarbonate buffer)稀釋到0.1μg/ml的離子處理壁虱抗原性物質(zhì)和未處理的壁虱抗原性物質(zhì)，每孔50μl。同時(shí)用碳酸氫鈉緩沖液從200μg/ml開(kāi)始，對(duì)人IgE標(biāo)準(zhǔn)(human IgE standard)反復(fù)進(jìn)行5次2倍稀釋，將稀釋物分別添加到孔中，每孔50μl，在室溫下靜止放置2小時(shí)。用洗滌用緩沖溶液(Washing Buffer)對(duì)板進(jìn)行3次洗滌，然后施加封閉用的緩沖液(Blocking buffer)300μl，在4℃下靜止放置一夜。
靜止放置一夜后，對(duì)板進(jìn)行3次洗滌，向每孔加入經(jīng)用(3％脫脂乳+1％BSA)/PBST對(duì)壁虱過(guò)敏患者的血清稀釋20倍，并進(jìn)行1小時(shí)孵育的物質(zhì)50μl/孔，靜止放置4小時(shí)。對(duì)板進(jìn)行3次洗滌后，施加經(jīng)(3％脫脂乳+1％BSA)/PBST稀釋1000倍的生物素標(biāo)記抗人IgE，每孔50μl，靜止放置2小時(shí)。
該靜止放置后，對(duì)板進(jìn)行4次洗滌，然后施加經(jīng)(3％脫脂乳+1％BSA)/PBST稀釋1000倍的堿磷酸酶標(biāo)記鏈霉抗生物素50μl，在室溫下靜止放置1小時(shí)。對(duì)板進(jìn)行5次洗滌后，施加Attophos(注冊(cè)商標(biāo))底物緩沖液，每孔50μl，在遮光狀態(tài)下放置至發(fā)色。通過(guò)分光光度計(jì)(Cyto(注冊(cè)商標(biāo))FluorII)測(cè)定其熒光強(qiáng)度。結(jié)果如圖15所示。
如圖15所示，可以確認(rèn)，對(duì)未使離子發(fā)生元件1021工作時(shí)(也就是不發(fā)生正負(fù)兩種離子的未處理狀態(tài))以及正負(fù)兩種離子濃度分別達(dá)到10萬(wàn)個(gè)/cm3時(shí)，壁虱過(guò)敏患者血清IgE抗體和壁虱抗原性物質(zhì)的反應(yīng)性(結(jié)合性)在壁虱過(guò)敏患者a～r的所有18人中，經(jīng)前述處理的抗原和上述患者的血清IgE抗體的反應(yīng)性顯著降低(熒光強(qiáng)度越低，表示反應(yīng)性越低)。其中所用的各種試劑如下所示(試劑)碳酸氫鈉緩沖溶液100mM的NaHCO3(pH 9.2～9.5)，磷酸緩沖溶液(PBS)用蒸餾水把4g的NaCl、0.1g的Na2HPO4·12H2O、1.45g的KCl、1g的KH2PO4定溶到500ml，PBSTPBS+0.5％吐溫-20(Tween-20)，
封閉用緩沖溶液PBS+3％脫脂乳+1％BSA，洗滌用緩沖溶液用蒸餾水把43g的Na2HPO4·12H2O、3.6g的NaH2PO4、263g的NaCl、15ml的吐溫-20(Tween-20)定容到3L。
<反應(yīng)失活率>
使用上述酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法中的患者a～r的血清IgE作為抗體，通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附法分別求出未處理的壁虱抗原性物質(zhì)和經(jīng)離子處理的壁虱抗原性物質(zhì)的熒光強(qiáng)度，并且用該熒光強(qiáng)度，根據(jù)下述計(jì)算式(4)求出變應(yīng)反應(yīng)的反應(yīng)失活率。把結(jié)果出示在下述表3中。
表3

反應(yīng)失活率％＝(1-E/F)×100 ...(4)E經(jīng)離子處理的壁虱抗原性物質(zhì)的熒光強(qiáng)度F未經(jīng)處理的壁虱抗原性物質(zhì)的熒光強(qiáng)度表3表明患者a～r的平均反應(yīng)失活率為57.8％，可以期待獲得有效抑制壁虱變應(yīng)性疾病的效果。
<實(shí)施例4>
本實(shí)施例中，直接使用壁虱粉塵，確認(rèn)通過(guò)正負(fù)離子作用處理的壁虱粉塵(其中所含的抗原性物質(zhì))的失活情況。參照以下圖11～13進(jìn)行說(shuō)明。其中通過(guò)Folin-Lowry法對(duì)壁虱粉塵中所含的壁虱抗原性物質(zhì)中的蛋白質(zhì)量進(jìn)行定量的操作與實(shí)施例3相同。
<壁虱粉塵的擴(kuò)散與回收>
壁虱粉塵的擴(kuò)散與回收采用如圖16所示的裝置進(jìn)行(其中圖16中注明有與其它圖相同參照符號(hào)表示相同部分或相當(dāng)部分)。也就是該裝置由安裝有鼓風(fēng)機(jī)1033和操作用窗口1034的密閉箱1030組成，在該鼓風(fēng)機(jī)1033的空氣噴出口處設(shè)置離子發(fā)生元件1021。
首先使離子發(fā)生元件1021工作，與此同時(shí)使鼓風(fēng)機(jī)1033工作。其條件為將該離子發(fā)生元件1021的電極間的峰間值電壓調(diào)節(jié)至90V，以使正負(fù)兩種離子的空間平均濃度分別達(dá)到3000個(gè)/cm3，并將該鼓風(fēng)機(jī)1033的送風(fēng)量調(diào)至2m3/分鐘。
該密閉箱1030中的正負(fù)兩種離子的空間平均濃度，是通過(guò)アンデス電氣公司制造的空氣離子計(jì)數(shù)器(商品號(hào)為ITC-201A)分別測(cè)定該密閉箱中心附近的相互距離50cm或其以上的5個(gè)點(diǎn)的正負(fù)兩種離子的濃度，使正負(fù)兩種離子的平均值分別達(dá)到3000個(gè)/cm3。另外該密閉箱1030中的空間氣氛溫度為25℃，相對(duì)濕度為60％RH?？梢酝茢?，如圖8A、8B所示，被輸出的正離子為H3O+(H2O)n(n為0或自然數(shù))，負(fù)離子為O2-(H2O)m(m為0或自然數(shù))，該正負(fù)兩種離子，通過(guò)前述化學(xué)反應(yīng)(1)～(2)生成過(guò)氧化氫H2O2、二氧化氫HO2和羥基自由基·OH。
本發(fā)明中的所謂正負(fù)兩種離子的空間平均濃度，是指具有一定體積的整個(gè)空間的平均濃度，例如可以通過(guò)離子計(jì)數(shù)器(例如アンデス電氣公司制造的空氣離子計(jì)數(shù)器(商品號(hào)為ITC-201A))分別測(cè)定在有適當(dāng)空氣滯留的室內(nèi)中心附近，相互距離50cm或其以上的5個(gè)點(diǎn)的正負(fù)兩種離子的濃度，然后通過(guò)求出該5個(gè)點(diǎn)的平均濃度進(jìn)行測(cè)定。
接著使離子發(fā)生元件1021和該鼓風(fēng)機(jī)1033暫時(shí)停止工作，然后在該密閉箱1030中設(shè)置擔(dān)載壁虱粉塵(2g)的物品1032，再一次在與上述相同的條件下，使離子發(fā)生元件1021和鼓風(fēng)機(jī)1033工作。
接著通過(guò)操作窗口1034，使用擴(kuò)散工具1035敲打物品1032，使壁虱粉塵1031擴(kuò)散(散布或懸浮)。其中，作為物品1032，可以列舉被褥、毛毯、絨毯、草褥子、枕頭、坐墊、靠墊等等。本實(shí)施例中采用了坐墊。作為擴(kuò)散工具1035，可以列舉敲打被褥的拍子、撣子、掃帚等等。本實(shí)施例中使用了敲打被褥的拍子。作為擴(kuò)散操作，除了敲打物品1032以外，還可以采用抖動(dòng)或使其墜落的方法。本實(shí)施例中是采用敲打被褥用的拍子作為擴(kuò)散工具1035，對(duì)物品1032坐墊用力進(jìn)行敲打，時(shí)間為5分鐘，總計(jì)敲打次數(shù)為20次。
接著對(duì)坐墊敲打結(jié)束后，使設(shè)置在該密閉箱1030上部的空吸泵1037工作，通過(guò)回收過(guò)濾器1036抽吸收集密封箱1030中的粉塵，抽吸收集時(shí)間為30分鐘。
經(jīng)過(guò)30分鐘后，接著使空吸泵1037停止工作，再次用擴(kuò)散工具1035的拍子對(duì)物品1032坐墊敲打5分鐘，共敲打20次。然后再次使空吸泵1037工作，通過(guò)回收過(guò)濾器1036抽吸收集密閉箱1030中的粉塵，抽吸時(shí)間為30分鐘。
對(duì)按照上述操作，通過(guò)2次抽吸收集，用回收過(guò)濾器1036收集到的粉塵量進(jìn)行稱重的結(jié)果為0.7mg。
以上操作是使離子發(fā)生元件1021工作，使正離子和負(fù)離子作用于粉塵的操作(也就是把這樣處理得到的物質(zhì)稱為離子處理壁虱粉塵，把從其中提取的物質(zhì)稱為離子處理壁虱抗原性物質(zhì))，為了進(jìn)行比較，還進(jìn)行除了使離子發(fā)生元件1021不工作以外，其它操作完全與上述相同的操作，收集壁虱粉塵(即把該比較用的粉塵稱為未處理的壁虱粉塵，把從其中提取的物質(zhì)稱為未處理的壁虱抗原性物質(zhì))。
此外，作為進(jìn)行該項(xiàng)操作所使用的裝置，除了上述圖16中所示的裝置以外，還可以使用各種裝置，例如如圖17(與圖16相同的符號(hào)表示相同部分或相當(dāng)部分)所示，設(shè)置回收容器1025替代圖16中的空吸泵1037和回收過(guò)濾器1036，收集自然落下的粉塵。
<通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附抑制法進(jìn)行評(píng)價(jià)>
為了對(duì)經(jīng)離子處理的壁虱抗原性物質(zhì)和未經(jīng)處理的壁虱抗原性物質(zhì)與壁虱過(guò)敏患者的血清IgE的反應(yīng)性進(jìn)行定量評(píng)價(jià)，通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附抑制法進(jìn)行確認(rèn)。
具體是從擴(kuò)散后回收的壁虱粉塵中提取的壁虱抗原，放入到離心分離機(jī)(Centriprep YM-10)中，以2500rpm的轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心濃縮。再把該濃縮液放到離心分離機(jī)(ULTRA FLEE-MC)中，以7000rpm轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心濃縮。對(duì)濃縮的離子處理壁虱抗原性物質(zhì)和未經(jīng)處理的壁虱抗原性物質(zhì)，從蛋白質(zhì)濃度7.66μg/ml反復(fù)進(jìn)行11次5倍稀釋。分別將稀釋的抗原性物質(zhì)50μl和10倍稀釋的患者血清IgE 50μl混合，在4℃下預(yù)孵育一夜。
在酶聯(lián)免疫吸附用96孔板(ELISA用96-孔板)上施加用碳酸氫鈉緩沖溶液(Bicarbonate buffer)稀釋到1μg/ml的壁虱抗原性物質(zhì)(也可以是沒(méi)有進(jìn)行噴霧的物質(zhì))，每孔50μl，靜止放置2小時(shí)。用洗滌用緩沖溶液(Washing Buffer)對(duì)板進(jìn)行3次洗滌，然后施加封閉用緩沖液(Blocking buffer)300μl，在4℃下靜止放置一夜。
靜止放置一夜后，對(duì)板進(jìn)行4次洗滌，分別向每孔提供經(jīng)預(yù)孵育的試樣50μl，靜止放置4小時(shí)。對(duì)板進(jìn)行5次洗滌后，施加經(jīng)(3％脫脂乳+1％BSA)/PBST稀釋1000倍的生物素標(biāo)記抗人IgE，每孔50μl，靜止放置2.5小時(shí)。
靜止放置后，對(duì)板進(jìn)行3次洗滌，施加經(jīng)(3％脫脂乳+1％BSA)/PBST稀釋1000倍的堿磷酸酶標(biāo)記鏈霉抗生物素50μl，在室溫下靜止放置1.5小時(shí)。對(duì)板進(jìn)行4次洗滌后，施加Attophos(注冊(cè)商標(biāo))底物緩沖溶液，每孔50μl，在遮光狀態(tài)下放置至發(fā)色。通過(guò)分光光度計(jì)(Cyto(注冊(cè)商標(biāo))FluorII)測(cè)定其熒光強(qiáng)度。其中，試劑，只要是沒(méi)有特別事先說(shuō)明，可以使用與上述相同的各種試劑。
對(duì)未使離子發(fā)生元件工作的未處理時(shí)(也就是未經(jīng)處理的壁虱抗原性物質(zhì))、以及使該元件工作，并使正負(fù)兩種離子的空間平均濃度分別達(dá)到3000個(gè)/cm3條件下進(jìn)行處理時(shí)(也就是經(jīng)離子處理的壁虱抗原性物質(zhì))，對(duì)抗原性物質(zhì)與壁虱過(guò)敏患者的血清IgE抗體的反應(yīng)性(結(jié)合性)進(jìn)行了研究。其結(jié)果如圖18所示。
如圖18所示，未處理的壁虱抗原性物質(zhì)，其50％抑制(壁虱抗原性物質(zhì)對(duì)血清IgE抗體的反應(yīng)性降低到50％)所必需的壁虱抗原性物質(zhì)量為500ng/ml；與此相反，經(jīng)離子處理的抗原性物質(zhì)，其50％抑制所必需的壁虱抗原性物質(zhì)量為500ng/ml，可以確認(rèn)其反應(yīng)失活率為74％。其中反應(yīng)失活率可以通過(guò)與上述化學(xué)式(1)相同的化學(xué)式求出。
這樣就可以確認(rèn)正負(fù)兩種離子不僅直接對(duì)抗原性物質(zhì)發(fā)生作用，而且其作用還涉及到含有抗原性物質(zhì)的壁虱粉塵。并且可以確認(rèn)當(dāng)正負(fù)兩種離子的空間平均濃度分別達(dá)到3000個(gè)/cm3時(shí)，能夠發(fā)揮使抗原性物質(zhì)失活的效果。
<實(shí)施例5>
本實(shí)施例中，正負(fù)兩種離子的空間平均濃度分別為10000個(gè)/cm3(該離子發(fā)生元件1021的電極間峰間值電壓為100V，該鼓風(fēng)機(jī)1033的送風(fēng)量為8m3/分鐘)，除此之外其它完全按照與實(shí)施例4相同的操作，確認(rèn)正負(fù)兩種離子對(duì)于壁虱粉塵的作用。結(jié)果如圖19所示。
如圖19所示，未處理的壁虱抗原性物質(zhì)，其60％抑制(壁虱抗原性物質(zhì)對(duì)血清IgE抗體的反應(yīng)性降低到60％)所必需的壁虱抗原性物質(zhì)量為345ng/ml；與此相反，經(jīng)離子處理的壁虱抗原性物質(zhì)，其60％抑制所必需的壁虱抗原性物質(zhì)量為3823ng/ml，可以確認(rèn)其反應(yīng)失活率為91％。其中反應(yīng)失活率同樣可以通過(guò)上述計(jì)算式(1)求出。
這樣就可以確認(rèn)當(dāng)正負(fù)兩種離子的空間平均濃度分別為10000個(gè)/cm3時(shí)，能發(fā)揮使抗原性物質(zhì)失活的效果。
如果對(duì)圖18和圖19進(jìn)行比較，雖然存在著50％抑制和60％抑制的差異，但是可以認(rèn)為根據(jù)圖18判斷50％抑制和60％抑制時(shí)的反應(yīng)失活率大致相同，所以可以確認(rèn)，空間平均濃度越高反應(yīng)失活率越高。
這樣如果按照本發(fā)明方法，通過(guò)使正負(fù)兩種離子作用，能夠有效地使抗原性物質(zhì)失活，所以可以期待有效降低由這種抗原性物質(zhì)引起的花粉癥和壁虱過(guò)敏等各種變應(yīng)性疾病。
同時(shí)，通過(guò)在空氣調(diào)節(jié)裝置內(nèi)部或外部使用本發(fā)明方法或裝置，可以輸送使抗原性物質(zhì)失活的空氣以及有可能通過(guò)放出上述離子的作用而直接使懸浮在空氣中的抗原性物質(zhì)失活。
在上述各實(shí)施方案中，特別著重對(duì)花粉和壁虱中所含的過(guò)敏源進(jìn)行了說(shuō)明，可以認(rèn)為即使對(duì)于除花粉和壁虱以外的霉等中所含有的變應(yīng)原，以本發(fā)明為依據(jù)的空氣凈化裝置，也可以發(fā)揮效果。
這次公開(kāi)的實(shí)施方案和實(shí)施例在所有方面均為示例，不應(yīng)將其視為限定。本發(fā)明范圍不是上述說(shuō)明，而是如權(quán)利要求所示，包括與權(quán)利要求相等的意義和在其范圍內(nèi)的所有修改。
產(chǎn)業(yè)上的實(shí)用性如下所示，通過(guò)使用本發(fā)明的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)方法和裝置，可以準(zhǔn)確而簡(jiǎn)便地對(duì)各種活化氣體使各種抗原性物質(zhì)失活的性能進(jìn)行評(píng)價(jià)。
權(quán)利要求
1.活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)方法，它具備使抗原性物質(zhì)和活化氣體發(fā)生反應(yīng)，獲得經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟，使相對(duì)于前述抗原性物質(zhì)的抗體和前述經(jīng)處理抗原性物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，測(cè)定前述經(jīng)處理抗原性物質(zhì)相對(duì)于前述抗體的結(jié)合活性的步驟。
2.活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)方法，它具備使抗原性物質(zhì)和活化氣體發(fā)生反應(yīng)，獲得經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟，使相對(duì)于前述抗原性物質(zhì)的抗體和前述經(jīng)處理抗原性物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，測(cè)定前述經(jīng)處理抗原性物質(zhì)相對(duì)于前述抗體結(jié)合活性的步驟，將前述經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的結(jié)合活性與前述抗原性物質(zhì)相對(duì)于前述抗體的結(jié)合活性進(jìn)行比較的步驟。
3.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)方法，其中，獲得前述經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟包括使懸浮在空中的前述抗原性物質(zhì)和前述活化氣體進(jìn)行反應(yīng)的步驟。
4.根據(jù)權(quán)利要求3中所述的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)方法，其中，使前述反應(yīng)進(jìn)行的步驟包括在容器中散布含有前述抗原性物質(zhì)的溶液的步驟，使前述散布的含有前述抗原性物質(zhì)的溶液在前述容器中懸浮的步驟和向前述容器中導(dǎo)入前述活化氣體的步驟。
5.根據(jù)權(quán)利要求3中所述的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)方法，其中，獲得前述經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟包括通過(guò)對(duì)前述抗原性物質(zhì)施加振動(dòng)和/或沖擊，使前述抗原性物質(zhì)懸浮在空中的步驟。
6.根據(jù)權(quán)利要求5中所述的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)方法，其中，前述進(jìn)行懸浮的步驟包括把前述抗原性物質(zhì)設(shè)置在具有撓曲性的試樣臺(tái)上的步驟和對(duì)前述試樣臺(tái)施加振動(dòng)和/或沖擊的步驟。
7.根據(jù)權(quán)利要求5中所述的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)方法，其中，前述進(jìn)行懸浮的步驟包括把前述抗原性物質(zhì)設(shè)置在選自被褥、毛毯、坐墊、枕頭、墊子、海綿、布、紙、苯乙烯泡沫的一種或以上材料的具有撓曲性的試樣臺(tái)上的步驟和通過(guò)敲打和/或振動(dòng)前述試樣臺(tái)，對(duì)前述試樣臺(tái)施加振動(dòng)和/或沖擊的步驟。
8.根據(jù)權(quán)利要求2中所述的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)方法，其中，獲得前述經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟，包括使懸浮在空中的前述抗原性物質(zhì)和前述活化氣體發(fā)生反應(yīng)的步驟。
9.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)方法，其中，獲得前述經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟，包括使前述抗原性物質(zhì)和選自含有正離子的氣體、含有負(fù)離子的氣體、含有自由基的氣體、臭氧氣體、硝酸氣體等的一種或以上的氣體反應(yīng)的步驟。
10.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)方法，其中，獲得前述經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟，包括選自杉樹(shù)花粉和/或壁虱粉塵中所含的抗原性物質(zhì)、杉樹(shù)花粉、壁虱粉塵的一種或一種以上的物質(zhì)與活化氣體進(jìn)行反應(yīng)而獲得經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟。
11.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)方法，其中，前述測(cè)定步驟包括通過(guò)ELISA法和ELISA抑制法，使相對(duì)于前述抗原性物質(zhì)的抗體與前述經(jīng)處理抗原性物質(zhì)進(jìn)行反應(yīng)，測(cè)定前述經(jīng)處理抗原性物質(zhì)相對(duì)于前述抗體的結(jié)合活性的步驟。
12.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)方法，其中，前述測(cè)定步驟包括通過(guò)對(duì)除人以外的，具有相對(duì)于前述抗原性物質(zhì)的抗體產(chǎn)生細(xì)胞的動(dòng)物進(jìn)行皮內(nèi)反應(yīng)試驗(yàn)和/或結(jié)膜反應(yīng)試驗(yàn)，使前述抗體和前述經(jīng)處理抗原性物質(zhì)反應(yīng)，測(cè)定前述經(jīng)處理抗原性物質(zhì)相對(duì)于前述抗體的結(jié)合活性的步驟。
13.作為活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的生成裝置，其具備容器，向前述容器中散布抗原性物質(zhì)的裝置和在前述容器內(nèi)發(fā)生或?qū)肭笆龌罨瘹怏w的裝置。
14.根據(jù)權(quán)利要求13中所述的作為活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的生成裝置，其中，前述容器含有部分透明材質(zhì)或者全部是透明材質(zhì)。
15.作為活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的生成裝置，其包括容器，把抗原性物質(zhì)封入到前述容器內(nèi)的裝置和在前述容器內(nèi)發(fā)生或?qū)肭笆龌罨瘹怏w的裝置。
16.根據(jù)權(quán)利要求15中所述的作為活化氣體使抗原性物質(zhì)失活的性能評(píng)價(jià)試樣的經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的生成裝置，其中，前述容器含有部分透明材質(zhì)或者全部是透明材質(zhì)。
全文摘要
本發(fā)明提供一種評(píng)價(jià)活化氣體使各種抗原性物質(zhì)失活的性能的評(píng)價(jià)方法，它是包括使抗原性物質(zhì)和活化氣體反應(yīng)，獲得經(jīng)處理抗原性物質(zhì)的步驟(S101)；使針對(duì)該抗原性物質(zhì)的抗體與該經(jīng)處理抗原性物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，測(cè)定該經(jīng)處理抗原性物質(zhì)相對(duì)于該抗體結(jié)合活性的步驟(S103)，該方法可以準(zhǔn)確而簡(jiǎn)便地評(píng)價(jià)各種活化氣體使各種抗原性物質(zhì)失活的性能。
文檔編號(hào)G01N33/53GK1777808SQ20048001042
公開(kāi)日2006年5月24日 申請(qǐng)日期2004年2月13日 優(yōu)先權(quán)日2003年2月18日
發(fā)明者西川和男, 野島秀雄, 米田哲也, 小埜和久, 重田征子, 大下昌利 申請(qǐng)人:夏普株式會(huì)社