全血灌流用吸附低密度脂蛋白的吸附劑及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領域和高分子化學領域，特別是一種全血灌流用吸附低密度 脂蛋白的吸附劑及其制備方法。
[0002] 心血管疾病是威脅人類健康的三大疾病之一，而動脈粥樣硬化是導致心血管疾病 發(fā)生的重要因素。研宄表明，人體血液中低密度脂蛋白（LDL)和極低密度脂蛋白（VLDL)濃 度過高是引起動脈粥樣硬化的主要原因。另外，高血脂患者體內(nèi)總膽固醇（TC)和甘油三酯 (TG)等含量過高也容易引起動脈粥樣硬化。
[0003] 降低血液中LDL、TC和TG的濃度，可以有效降低動脈粥狀硬化的發(fā)病率，從而有 效預防和治療心血管疾病。近年來越來越多的血液凈化技術和產(chǎn)品被應用于清除血液中的 LDL等，例如血漿置換法、體外肝素沉淀法、血漿吸附法和直接全血灌流吸附等。直接全血灌 流法可以不用分離血漿、依靠吸附劑直接吸附除去血液中的LDUTC和TG，因此具有治療費 用低、方便快捷、適用范圍廣的優(yōu)點。
[0004] 專利號為ZL200710061324. 6的中國發(fā)明專利公開一種制備用于體外全血灌流吸 附低密度脂蛋白的吸附劑的方法，該方法是以不溶于水的親水性載體如殼聚糖、纖維素或 聚乙烯醇微球為載體，固載磷酸鹽配基制得。由于磷酸鹽是小分子物質(zhì)，對低密度脂蛋白等 目標物質(zhì)的清除效果有限，同時磷酸鹽配基對載體具有選擇性，部分性能優(yōu)良的載體無法 使用，配基的固載量也受到限制，進而影響吸附劑對目標物質(zhì)的吸附效果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明要解決的技術問題之一是提供一種新的全血灌流用吸附低密度脂蛋白的 吸附劑。
[0006] 為解決上述技術問題，本發(fā)明提供的技術方案為：全血灌流用吸附低密度脂蛋 白的吸附劑，以大孔聚苯乙烯類吸附樹脂為載體，固載聚陰離子配基，其中所述聚陰離子配 基為硫酸葡聚糖、肝素或者肝素類衍生物。
[0007] 較好的方案為大孔聚苯乙烯類吸附樹脂的比表面積范圍為50-1000m2/g ;孔體積 范圍為0. 3-2. 0cm3/g ;平均孔徑范圍為3-160nm ;粒徑范圍為0. 4-2mm。
[0008] 更好的方案為配基的固載量為0.5 - 1.5 ymol/mL，再好的方案為配基的固載量 為 0· 5 - I. 0 μ mol/mL。
[0009] 本發(fā)明的全血灌流用吸附低密度脂蛋白的吸附劑以聚苯乙烯類樹脂為載體，固載 硫酸葡聚糖、肝素或肝素類衍生物等聚陰離子配基。其中，聚陰離子配基有類似手臂作用， 可以更好地捕獲低密度脂蛋白等目標物質(zhì)，提高對致病物質(zhì)的清除效果。此外，聚苯乙烯類 樹脂具有疏水性骨架，在提高對低密度脂蛋白清除效果的同時，提高對膽固醇和甘油等致 病物質(zhì)的清除效果。
[0010] 本發(fā)明要解決的另一技術問題為提供一種新的全血灌流用吸附低密度脂蛋白的 吸附劑的制備方法。
[0011] 為解決上述技術問題，本發(fā)明提供的技術方案為：全血灌流用吸附低密度脂蛋白 的吸附劑的制備方法，吸附劑以大孔聚苯乙烯類吸附樹脂為載體，固載聚陰離子配基，其中 聚陰離子配基為硫酸葡聚糖、肝素或者肝素類衍生物，制備方法包含以下步驟： 步驟一：對大孔聚苯乙烯類吸附樹脂進行環(huán)氧化改性： 步驟I. 1向100質(zhì)量份的大孔聚苯乙烯類吸附樹脂中加入100 - 300質(zhì)量份的濃度為 0. 05-0. 3M的次氯酸鈉水溶液和100 - 300質(zhì)量份摩爾濃度為0. 1-0. 6M的溴化鈉水溶液， 攪拌并加熱至60-90°C后，再滴加50 - 200質(zhì)量份質(zhì)量濃度為10-30%的硫酸溶液，并于1-4 小時內(nèi)滴加完畢，滴加完后繼續(xù)反應〇. 5-2小時，反應結(jié)束后水洗至中性； 步驟1. 2向步驟I. 1所得物質(zhì)中加入100 - 300質(zhì)量份質(zhì)量濃度為10-30%的強堿水 溶液，于40-60°C下反應3-5小時，反應結(jié)束后水洗至中性，即獲得環(huán)氧化改性后的大孔聚 苯乙烯類吸附樹脂； 步驟二：在步驟一得到的環(huán)氧化改性的大孔聚苯乙烯類吸附樹脂上固載聚陰離子配 基： 向步驟一所得的環(huán)氧化改性后的大孔聚苯乙烯類吸附樹脂中，加入300 - 600質(zhì)量份 質(zhì)量百分數(shù)為5-30%的聚陰離子化合物的水溶液，于40-60 °C下滴加50-200質(zhì)量份、摩爾濃 度為2. 5-5 M的強堿水溶液，攪拌反應2-8小時，得到全血灌流用吸附低密度脂蛋白的吸附 劑，其中，聚陰離子化合物為硫酸葡聚糖、肝素鈉或者肝素類衍生物。
[0012] 較好的方案為大孔聚苯乙烯類吸附樹脂的比表面積范圍為50-1000m2/g ;孔體積 范圍為0. 3-2. 0cm3/g ;平均孔徑范圍為3-160nm ;粒徑范圍為0. 4-2mm。
[0013] 更好的方案為硫酸葡聚糖的分子量為500-20000,硫含量為8-20%。
[0014] 還好的方案為硫酸葡聚糖的分子量為2000-5000,硫含量10-15%。
[0015] 再好的方案為大孔聚苯乙烯吸附樹脂由苯乙烯類單體和多乙烯基類交聯(lián)劑在致 孔劑和引發(fā)劑的作用下，于分散介質(zhì)中懸浮聚合制成，其中，苯乙烯類單體選自苯乙烯、甲 基苯乙條、乙基苯乙條中的一種或兩種。
[0016] 再好的方案為多乙烯基類交聯(lián)劑為二乙烯苯、二乙烯基甲苯、二乙烯基二甲苯、二 乙烯基乙基苯中的一種或多種，所述多乙烯基類交聯(lián)劑占單體總重量的55%-80%。
[0017] 再好的方案為苯乙烯類單體中至少包含占單體總重量20% - 45%的乙基苯乙烯， 多乙烯基類交聯(lián)劑中至少含有占單體總重量55% - 80%的二乙烯苯。
[0018] 本發(fā)明全血灌流用吸附低密度脂蛋白的吸附劑的制備方法利用聚苯乙烯樹脂上 的殘留雙鍵的反應活性，通過鹵醇法成功地實現(xiàn)了在聚苯乙烯類大孔吸附樹脂上直接進行 環(huán)氧基團功能基化，進而在聚苯乙烯類大孔吸附樹脂上固載聚陰離子配基。本發(fā)明的方法 可以通過控制大孔吸附樹脂上雙鍵的含量而控制環(huán)氧基團含量。此外，該方法還具有反應 步驟少，工藝簡單，試劑毒害小，反應后處理簡單等顯著優(yōu)點。在聚苯乙烯類大孔吸附樹脂 上固載硫酸葡聚糖、肝素等聚陰離子配基，通過結(jié)合聚陰離子的負電性、聚苯乙烯樹脂骨架 結(jié)構(gòu)的疏水性、大孔吸附樹脂的孔吸附作用得以制備出一種對LDL、TG和TC均具有優(yōu)異吸 附性能的全血灌流吸附劑。
[0019] 本發(fā)明全血灌流用吸附低密度脂蛋白的吸附劑的制備方法中所用的強堿可以是 氫氧化鈉、氫氧化鉀中的任一種，也可以是氫氧化鈉和氫氧化鉀的混合物。
[0020] 本發(fā)明中的聚陰離子化合物是指其分子中具有多個陰離子官能團、且含有多個羥 基的化合物。例如肝素鈉及肝素類衍生物、硫酸葡聚糖等。大孔聚苯乙烯吸附樹脂作為常 用的吸附劑載體，其合成方法已有很多記載。本發(fā)明大孔聚苯乙烯吸附樹脂的合成可以采 用已知的方法合成，也可以采用苯乙烯類單體和多乙烯基類交聯(lián)劑，在致孔劑和引發(fā)劑的 作用下，于分散介質(zhì)中懸浮聚合的方法得到，本發(fā)明對此沒有嚴格的限制。優(yōu)選的大孔聚苯 乙烯吸附樹脂的比表面積（BET)范圍為50-1000m 2/g，更優(yōu)選的為100-800 m2/g。優(yōu)選的大 孔聚苯乙烯吸附樹脂的孔體積范圍為0. 3-2. 0cm3/g，更優(yōu)選的為0. 6-1. 7cm3/g。優(yōu)選的大 孔聚苯乙烯吸附樹脂的平均孔徑范圍為3-160nm，更優(yōu)選的為7-20nm。優(yōu)選的大孔聚苯乙 稀吸附樹脂的粒徑范圍為0· 4-2mm，更好的為0· 6-1. 2mm。
[0021] 本發(fā)明中，大孔聚苯乙烯吸附樹脂可以通過以下方法合成： 用苯乙烯類單體和多乙烯基類交聯(lián)劑，在致孔劑和引發(fā)劑作用下，于分散介質(zhì)中懸浮 聚合制得大孔聚苯乙烯白球。聚合反應溫度為50-100°C，反應時間為6 - 18小時。優(yōu)選 反應溫度為70-95°C，反應時間為8 - 12小時。優(yōu)選的，待油相混合物在分散介質(zhì)溶液中形 成一定大小的均勻液滴后，升溫至75°C，聚合3 - 8小時，再升溫至80°C固化2 - 5小時后 停止反應。
[0022] 上述方法中的苯乙稀類單體選自苯乙稀、甲基苯乙稀、乙基苯乙稀的一種或兩種。 優(yōu)選乙基苯乙烯，更優(yōu)選的，苯乙烯類單體中乙基苯乙烯占單體總重量的20% -45%。
[0023] 上述方法中的交聯(lián)劑為多乙烯基單體，如二乙烯苯（DVB)、二乙烯基甲苯、二乙烯 基二甲苯、二乙烯基乙基苯等，優(yōu)選二乙烯苯，占單體總重量的55-80%。二乙烯苯的比例越 高，最后制得的吸附樹脂上含有的殘留雙鍵的量就越大，環(huán)氧化改性后樹脂上的環(huán)氧基團 量就越多，進而可以提高配基的固載量。
[0024] 上述方法中的致孔劑與單體的重量比為40%-200%。致孔劑可以為芳烴類、高級 醇類、烷烴類、酯類。芳烴類的如甲苯、二甲苯；高級醇類如丁醇、己醇、環(huán)己醇；烷烴類如正 庚烷、200#汽油、液體石蠟、固體石蠟；酯類如乙酸丁酯、乙酸乙酯、丁酸丁酯等。較為優(yōu)選 的致孔劑為甲苯、汽油。致孔劑可以單獨使用上述的任何一種，也可以將上述任何二種或三 種致孔劑混合使用。
[0025] 上述方法中的引發(fā)劑的用量為單體總量的0. 5%-2%。引發(fā)劑可以選擇有機過氧 化物，如過氧化苯甲酰、過氧化-2-乙基己酸叔丁酯、過氧化-2-乙基己酸叔戊酯等，優(yōu)選過 氧化苯甲酰。
[0026] 上述方法中的分散介質(zhì)可以為水或鹽水，分散介質(zhì)與油相的體積比為1-3 : 1 ; 可供選用的分散劑包括明膠、聚乙烯醇或羧甲基纖維素等，優(yōu)選明膠，分散劑的用量為分散 介質(zhì)重量的0.5% -2%。
[0027] 上述方法