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一種金屬離子強(qiáng)化嗜熱溶胞菌用于抗生素菌渣減量化的方法與流程

文檔序號:12048993閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種金屬離子強(qiáng)化嗜熱溶胞菌用于抗生素菌渣減量化的方法,其特征在于包括以下步驟:

(1)嗜熱溶胞菌活化

以液體培養(yǎng)基為試驗活化嗜熱溶胞菌所用的培養(yǎng)基,取嗜熱溶胞菌按體積比6-12%接種于液體培養(yǎng)基中,置于55-65℃、110-130 r/min條件下的恒溫?fù)u床中恒溫培養(yǎng)66-80 h,將菌液取出后稀釋100-1000000倍,得稀釋液,在無菌條件下將稀釋液滴于固體培養(yǎng)基中,進(jìn)行平板涂布分離,將涂布后的平板倒置于55-65℃恒溫培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)20-28h,微生物在固體培養(yǎng)基上會形成單個菌落,根據(jù)菌落的形態(tài)特征,在固體培養(yǎng)基上劃線分離純化,得到單菌,將分離后得到的單菌菌株在2-6℃冰箱中保存,備用;

(2)金屬離子強(qiáng)化嗜熱溶胞菌對菌渣減量化處理

將步驟(1)中冷藏的單菌接種到液體培養(yǎng)基中活化20-28 h得嗜熱溶胞菌菌液,在離心管中加入抗生素菌渣后,加入體積比為6-12%的OD600nm為0.6-0.8的嗜熱溶胞菌菌液,加入金屬離子溶液,將有機(jī)負(fù)荷和pH值分別調(diào)節(jié)至0.8-1.2 kgCOD/(m3·d)和6.8-7.2,然后將其均置于溫度55-65℃,轉(zhuǎn)速110-130 r/min恒溫?fù)u床中進(jìn)行強(qiáng)化減量化處理,處理時間為1-48h。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述液體培養(yǎng)基組成為:牛肉膏5.0 g,蛋白胨10.0 g,NaCl 5.0 g,水1000 mL,pH=7.0,121℃條件下滅菌20 min;固體培養(yǎng)基為在液體培養(yǎng)基中加入質(zhì)量比為2%的瓊脂。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述金屬離子為鉀離子、鈉離子或鈣離子。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述金屬離子的濃度為100-400μmol·L-1。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述抗生素菌渣包括但不限于頭孢菌素菌渣、土霉素菌渣、紅霉素菌渣和青霉素菌渣。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述步驟(1)中嗜熱溶胞菌按體積比10%接種于液體培養(yǎng)基中,置于60℃、120 r/min條件下的恒溫?fù)u床中恒溫培養(yǎng)72 h。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述步驟(1)中稀釋液在固體培養(yǎng)基中的培養(yǎng)溫度為60℃,培養(yǎng)時間為24 h。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(2)中有機(jī)負(fù)荷和pH值分別調(diào)節(jié)至1.0 kgCOD/(m3·d)和7.0,將其均置于溫度60℃,轉(zhuǎn)速120 r/min恒溫?fù)u床中進(jìn)行強(qiáng)化減量化處理。

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