、C2-4鏈稀硫 基或C 2-4鏈炔硫基； Ri、R2為α-氨基酸的側(cè)鏈基團(tuán)； 尺為&-4烷基、&-4烷氧基、&-4烷硫基、C2-4鏈烯基或C2-4鏈炔基。
[0008] 所述的Ci-4烷基為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基或叔丁基;C2-4鏈烯 基為乙烯基、丙烯基、稀丙基、丁烯基、異丁烯基;C2-4鏈炔基可為乙炔基、丙炔基、塊丙基、丁 炔基、異丁炔基；鹵原子為氟、氯、溴或碘;其中，丁烯基的雙鍵在1位、2位或3位，異丁烯基的 雙鍵在1位或2位;丁炔基的叁鍵在1位、2位或3位、異丁炔基的叁鍵在1位或2位。
[0009] 手性寡肽膦酸酯硫脲衍生物在制備抗植物病毒劑中的應(yīng)用。
[0010] 手性寡肽膦酸酯硫脲衍生物的制備方法，包括如下步驟： 第一步:氨基苯甲膦酸酯的制備： 將取代苯甲醛滴加入質(zhì)量濃度為28%的氨水中，攪拌回流3_6h;將過(guò)濾獲得的沉淀物用 稀氨水洗滌后烘干，獲得固體A;再將固體A在70-80°C的反應(yīng)溫度下投入到亞膦酸二烷基酯 中，待固體A完全溶解后，攪拌反應(yīng)5-10h，獲得中間體B;然后在0°C下，將對(duì)甲基苯磺酸和四 氫呋喃混合溶液滴加到中間體B中，并攪拌反應(yīng)3-6h，濾出白色固體C，用四氫呋喃洗滌;再 將洗滌后的白色固體C轉(zhuǎn)入到質(zhì)量濃度為10%的氨水中，室溫?cái)嚢?-10h后；用乙醚萃取除去 雜質(zhì)反應(yīng)體系中的雜質(zhì)，再用乙酸乙酯萃取水相，有機(jī)相經(jīng)干燥、減壓脫溶劑后，用薄層層 析法，其中乙酸乙酯與石油醚的體積比為1:1-3,分離得到α-氨基苯甲膦酸酯； 第二步:異硫氰基苯甲膦酸酯的制備： 向α-氨基苯甲膦酸酯中加入三乙胺的無(wú)水乙醚溶液，在冰-鹽浴〇°C以下緩慢滴加二硫 化碳，滴加完畢后反應(yīng)2h，再在室溫下反應(yīng)2h;然后，在0°C下緩慢滴加氧氯化磷的無(wú)水乙醚 溶液，滴加完畢后在室溫下反應(yīng)2_4h;將反應(yīng)體系過(guò)濾，濾液用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，有 機(jī)相經(jīng)干燥、減壓脫溶劑后，用薄層層析法，其中乙酸乙酯與石油醚的體積比1:1-3,分離得 到異硫氰基苯甲膦酸酯； 第三步:手性二肽氨基酸酰胺衍生物的制備： 在氬氣保護(hù)下將手性N-Boc-L-氨基酸和縮合劑HBTU溶于干燥二氯甲烷中，再加入無(wú)水 二異丙基乙胺和取代芐胺，室溫下攪拌反應(yīng)，反應(yīng)體系從非均相逐漸成為均相，反應(yīng)時(shí)間為 4-6 h;用二氯甲烷溶解反應(yīng)混合液后再轉(zhuǎn)入分液漏斗中，加入1N鹽酸萃取分離，有機(jī)相經(jīng) 1N鹽酸洗滌，再用無(wú)水Na2S04干燥后過(guò)濾，經(jīng)減壓脫溶后得到N-Boc-L-氨基酸酰胺粗產(chǎn)物； 將N-Boc-L-氨基酸酰胺粗產(chǎn)物用干燥CH 2C12重新溶解，一次性注入三氟乙酸5.2 mL于反應(yīng) 液面下，在室溫下攪拌反應(yīng)2-4 h;反應(yīng)體系再用溫度為5 °C的冷的飽和Na2C03溶液分離，水 層用二氯甲烷萃取后，有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥、過(guò)濾、減壓脫溶劑，得到無(wú)色至淺黃色油 狀的L-氨基酸酰胺衍生物中間體;不經(jīng)處理作為氨基部分，同條件下與另一手性N-Boc-L-氨基酸進(jìn)行縮合，再經(jīng)TFA脫保護(hù)基-Boc后得到L-氨基酸酰胺二肽粗產(chǎn)物，再經(jīng)薄層層析分 離，展開(kāi)劑為質(zhì)量濃度為4-5%的CH 30H/CH2C12，純化后得到白色固體手性二肽氨基酸酰胺衍 生物； 第四步:手性寡肽膦酸酯硫脲衍生物的制備： 以無(wú)水二氯甲烷為溶劑，于異硫氰基苯甲膦酸酯中加入手性二肽氨基酸酰胺衍生 物，在室溫下攪拌反應(yīng)〇.5-lh;減壓脫去溶劑后薄層層析法，其中乙酸乙酯與石油醚的體積 比為1:1-3，分離得到目標(biāo)產(chǎn)物手性寡肽膦酸酯硫脲衍生物。
[0011] 所述的步驟一中，固體A與亞膦酸二烷基酯的摩爾比為1:1.2。
[0012] 所述的步驟一中，白色固體C與氨水的物質(zhì)的量的比為1:1.5。
[0013] 所述的步驟一中，苯甲醛：氨水：亞磷酸二烷基酯：PTSA的摩爾比為1:1.5 :1.2: 1.2〇
[0014] 所述的步驟二中，α-氨基苯甲膦酸酯:三乙胺:二硫化碳:氧氯化磷的摩爾比為1: 3:1:1〇
[0015] 所述的步驟三中，手性L-氨基酸:HBTU:DIEA:取代芐胺的摩爾比為1 :1:1-2:1-2。
[0016] 所述的步驟四中，手性二肽氨基酸酰胺衍生物與膦酸酯異硫氰酸酯的摩爾比為1: 1〇
[0017] 由于采用了上述技術(shù)方案，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明設(shè)計(jì)合成了一系列結(jié)構(gòu)新穎 的手性寡肽膦酸酯硫脲類衍生物，它既含有氨基酸骨架，也含有硫脲基功能團(tuán)，還含有氨基 膦酸酯成分，而且分子結(jié)構(gòu)中有多個(gè)手性中心。同時(shí)，發(fā)現(xiàn)該系列化合物對(duì)植物病毒具有較 好的抑制作用，適合制備抗植物病毒劑，特別是對(duì)煙草花葉病毒(TMV)的新農(nóng)藥創(chuàng)制研究。 本發(fā)明所提供的制備方法可靠性好，具有良好的對(duì)稱選擇性和高收率，為后續(xù)研究提供了 材料基礎(chǔ)。本發(fā)明材料來(lái)源簡(jiǎn)單，易于獲取，成本低廉，使用效果好。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 本發(fā)明的實(shí)施例1:化合物0, 0'-二乙基(3-(芐胺基-甘氨酸-L-苯甘氨酸)-α-硫 脲基)苯甲磷酸酯(化合物編號(hào)a )的合成： (1) 0, 0'-二乙基氨基(苯基）甲基磷酸酯的合成： 將苯甲醛(30mmol，3.18g)和氨水（28%，60mL)滴加到100mL干燥三口瓶中，室溫下攪 拌3h。在此過(guò)程中，有白色沉淀產(chǎn)生，經(jīng)過(guò)濾，稀氨水洗滌后烘干。再在75°C回流并攪拌反應(yīng) 下，將此白色固體轉(zhuǎn)入盛有亞磷酸二乙酯（15mmo 1，2.08g)的干燥三口瓶中，固體慢慢溶 解，反應(yīng)8h后生成中間體。然后滴加對(duì)甲苯磺酸（lOmmol，1.72g)和THF 50mL的混合液于此 中間體中，在〇°C以下攪拌反應(yīng)1 Oh。有大量白色固體生成，將其過(guò)濾，再用少量THF洗滌該白 色固體后烘干。將此白色固體轉(zhuǎn)入1 OOmL干燥三口瓶中，加入28%的氨水60mL，在室溫下攪拌 過(guò)夜。用乙醚(3 X20mL)萃取氨水反應(yīng)體系，除去雜質(zhì)。氨水相再用乙酸乙酯（3 X50mL)萃 取，酯層經(jīng)脫溶劑后得到無(wú)色液體二乙基氨基(苯基）甲基磷酸酯，收率57.1%。
[0019] (2) 二乙基異硫氰基(苯基）甲基磷酸酯的合成： 將二乙基氨基（苯基）甲基磷酸酯（6謹(jǐn)〇1，1.46g)、三乙胺（18謹(jǐn)〇1，1.82g)和 15mL無(wú)水乙醚加入到150mL干燥三口瓶中，在冰-鹽浴0 °C以下緩慢滴加二硫化碳(6mmo 1， 〇.46g)。滴加完畢后繼續(xù)反應(yīng)2h，然后撤去冰-鹽浴，在室溫下反應(yīng)2h。再在0°C下，緩慢滴加 氧氯化磷(6mmol，0.92g)和10mL無(wú)水乙醚的混合溶液，滴加完畢后在室溫下繼續(xù)反應(yīng)2h。 將反應(yīng)液過(guò)濾，用少量乙醚洗滌后，濾液用3 X 20mL的飽和碳酸鈉溶液萃取，有機(jī)層經(jīng)無(wú)水 硫酸鈉干燥過(guò)夜，減壓脫溶劑后經(jīng)柱層析（乙酸乙酯:石油醚=1:2)分離得到無(wú)色油狀產(chǎn)物 二乙基異硫氰基(苯基）甲基磷酸酯，收率60%。
[0020] (3)芐胺基-甘氨酸-L-苯甘氨酸二肽的制備 于100mL干燥三口瓶中加入N-Boc-甘氛酸（5mmol，0 · 88g)、縮合劑HBTU( 5mmol， 1.90g)和無(wú)水二氯甲燒30mL，攪拌溶解后加入DIEA(10mmol，1.68mL)和節(jié)胺（5mmol， 0.63mL)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)4h后，用1 N HCl(3X20mL)分離萃取，有機(jī)層經(jīng)干燥脫溶劑后得到 中間體N-Boc-甘氨酰芐胺。用無(wú)水二氯甲烷將此中間體轉(zhuǎn)入100mL干燥三口瓶中，在反應(yīng)液 面下注入TFA(7.5mmol，5.6mL)，室溫下攪拌反應(yīng)lh。減壓脫溶劑后加入冰乙醚，有白色固 體析出，經(jīng)過(guò)濾并用少量冰乙醚洗滌，干燥得中間體甘氨酰芐胺。
[0021 ] 將上述所得甘氨酰芐胺溶于30mL無(wú)水二氯甲烷中，加 DIEA(6mmol，7.76g)，固體 迅速溶解，再依次加入固體HBTU(5mmol，1.9g)和N-Boc-L-苯甘氨酸(5mmol，1.26g)，室溫 下攪拌反應(yīng)4h后用1 N HCl(3X30mL)分離萃取，有機(jī)層干燥、脫溶劑后經(jīng)冰乙醚重結(jié)晶得 到二肽固體粗產(chǎn)物芐胺基-甘氨酸-N-Boc-L-苯甘氨酸。將此固體用無(wú)水二氯甲烷(30mL)轉(zhuǎn) 入100mL干燥三口瓶中，再注入TFA(7.5mmol，5.6mL)，室溫下攪拌反應(yīng)lh后加入冷的飽和 碳酸鈉溶液，調(diào)節(jié)PH至8-9之間，用乙酸乙酯(3 X 30mL)萃取，再經(jīng)柱層析（乙酸乙酯:石油醚 =1:1)分離純化后得二肽中間體芐胺基-甘氨酸-L-苯甘氨酸，收率70.29%。
[0022] (4) 0, 0'_二乙基(3_(芐胺基-甘氨酸-L-苯甘氨酸)-α_硫脲基)苯甲磷酸酯的合 成： 于25mL單口圓底燒瓶中加入二肽節(jié)胺基-甘氨酸-L-苯甘氨酸（lmmol，0.30g)和5mL THF，室溫?cái)嚢柘略偌尤攵一惲蚯杌ū交┘谆姿狨ィ╨mmol，0.29g)，反應(yīng)lh 后減壓脫溶劑，經(jīng)柱層析分離純化得到目標(biāo)產(chǎn)物二乙基(3-(芐胺基-甘氨酸-L-苯甘 氨酸)-α_硫脲基)苯甲磷酸酯，白色固體:恪點(diǎn)179-180°C，收率91 · 60%。
[0023]部分合成的手性二肽膦酸酯硫脲類化合物a-r的理化性質(zhì)、紅外譜（IR:KBr，υ maxcm-3、核磁共振譜NMR:400MHz, CDC13，TMS作內(nèi)標(biāo)；13C 匪R:101MHz, CDC13; 31Ρ NMR: 162MHz, CDC13; 19F NMR:376MHz)S (ppm)和元素分析數(shù)據(jù)如表 1所示。
[0024]表1化合物的理化性質(zhì)、紅外、核磁共振譜和元素分析數(shù)據(jù)