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一種菌絲球小且多的杏鮑菇液體菌種及其發(fā)酵方法_4

文檔序號(hào):9270924閱讀:來(lái)源:國(guó)知局
瓶培養(yǎng)基組成為:黃豆餅粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草藥提取 物1.Og/l,磯酸二氨鐘0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/l,木屑粉0. 4g/L,VBi〇.Olg/l,余量為水,抑值 6. 0 ;
[0092] 所述種子罐培養(yǎng)基組成為;黃豆餅粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草藥提 取物1. 2g/l,磯酸二氨鐘0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/l,木屑粉0. 5g/L,VBi〇.Olg/l,余量為水,pH 值 6. 0 ;
[0093] 所述發(fā)酵培養(yǎng)基的組成為;黃豆餅粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草藥提 取物2g/l,木屑粉1.Og/l,磯酸二氨鐘0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/L,VBi〇.Olg/l,余量為水,抑值 6. 0 ;
[0094] 所述發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法為;按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱量各原料,首先取黃豆餅 粉質(zhì)量6倍的水,用乳酸調(diào)節(jié)抑值為6,加入加/g黃豆餅粉的耐高溫a-淀粉酶,邊攬拌邊 加入黃豆餅粉,升溫至95°C,保溫,液化15min,然后降溫至60°C,保溫,邊攬拌邊加入40u/ g黃豆餅粉的糖化酶和30u/g黃豆餅粉的蛋白酶水解30min,邊攬拌邊加入剩余水和其它原 料,均勻混合,調(diào)整抑值為6. 0,121°C滅菌30min即得發(fā)酵培養(yǎng)基。
[0095] 經(jīng)上述方法制備的菌絲球小且多的杏鮑茹液體菌種菌絲球密度為4. 8X105個(gè)/ L菌絲球直徑為0. 5mm,菌絲球干重為92g/l,胞外多糖為3.Ig/L。
[00M] 實(shí)施例5
[0097] 一種菌絲球小且多的杏鮑茹液體菌種的發(fā)酵方法,包括如下步驟:
[009引步驟1)至4)同實(shí)施例2 ;
[0099] 5)首先將種子罐種子W8%接種量接種于3化發(fā)酵罐,發(fā)酵培養(yǎng)基裝液量15L于 32°C、通氣量化/min恒溫發(fā)酵2化,然后W0. 15°C/min的速率降溫至22 °C,向發(fā)酵罐中 加入13g包被殼聚糖和900mL種子罐種子,在通氣量化/min條件下恒溫發(fā)酵lOh,最后W 0. 15°C/min的速率升溫至24°C,在通氣量化/min條件下恒溫發(fā)酵45h即得菌絲球小且多 的杏鮑茹液體菌種;
[0100] 所述平板培養(yǎng)基組成同實(shí)施例2 ;
[0101] 所述液體種子培養(yǎng)基組成為;葡萄糖30g/l,酵母浸出汁5g/l,蛋白腺2g/L, 瓊脂2g/l,中草藥提取物0.Ig/l,磯酸二氨鐘0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/l,木屑粉0. 15g/l, VBi〇.Olg/L,余量為水,抑值6. 0 ;
[0102] 所述搖瓶培養(yǎng)基組成為:黃豆餅粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草藥提取 物0. 5g/l,磯酸二氨鐘0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/l,木屑粉0. 4g/L,VBi〇.Olg/l,余量為水,抑值 6. 0 ;
[0103] 所述種子罐培養(yǎng)基組成為;黃豆餅粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草藥提 取物0. 8g/l,磯酸二氨鐘0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/l,木屑粉0. 5g/L,VBi〇.Olg/l,余量為水,pH 值 6. 0 ;
[0104] 所述發(fā)酵培養(yǎng)基的組成為;黃豆餅粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草藥提 取物1. 5g/l,木屑粉1.Og/l,磯酸二氨鐘0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/L,VBi〇.Olg/l,余量為水,pH 值 6. 0 ;
[01化]所述發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法為;按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱量各原料,首先取黃豆餅 粉質(zhì)量4倍的水,用乳酸調(diào)節(jié)抑值為6,加入加/g黃豆餅粉的耐高溫a-淀粉酶,邊攬拌邊 加入黃豆餅粉,升溫至90°C,保溫,液化15min,然后降溫至50°C,保溫,邊攬拌邊加入40u/ g黃豆餅粉的糖化酶和30u/g黃豆餅粉的蛋白酶水解30min,邊攬拌邊加入剩余水和其它原 料,均勻混合,調(diào)整抑值為6. 0,121°C滅菌40min即得發(fā)酵培養(yǎng)基。
[0106] 經(jīng)上述方法制備的菌絲球小且多的杏鮑茹液體菌種菌絲球密度為4. 6X105個(gè)/ L菌絲球直徑為0.7mm,菌絲球干重為90g/l,胞外多糖為3.Ig/L。
[0107] 實(shí)施例6
[0108] 一種菌絲球小且多的杏鮑茹液體菌種的發(fā)酵方法,包括如下步驟:
[0109] 步驟1)至4)同實(shí)施例2 ;
[0110]5)首先將種子罐種子W8%接種量接種于3化發(fā)酵罐,發(fā)酵培養(yǎng)基裝液量15L于 30°C、通氣量化/min恒溫發(fā)酵12h,然后W0. 25°C/min的速率降溫至18°C,向發(fā)酵罐中 加入15g包被殼聚糖和900mL種子罐種子,在通氣量化/min條件下恒溫發(fā)酵16h,最后W 0. 05°C/min的速率升溫至26°C,在通氣量化/min條件下恒溫發(fā)酵52h即得菌絲球小且多 的杏鮑茹液體菌種;
[0111] 所述平板培養(yǎng)基組成同實(shí)施例2 ;
[0112] 所述液體種子培養(yǎng)基組成為;葡萄糖30g/l,酵母浸出汁5g/l,蛋白腺2g/L, 瓊脂2g/l,中草藥提取物0. 3g/l,磯酸二氨鐘0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/l,木屑粉0. 05g/l, VBi〇.Olg/L,余量為水,抑值6. 0 ;
[0113] 所述搖瓶培養(yǎng)基組成為:黃豆餅粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草藥提取 物1.Og/l,磯酸二氨鐘0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/l,木屑粉0. 2g/L,VBi〇.Olg/l,余量為水,抑值 6. 0 ;
[0114] 所述種子罐培養(yǎng)基組成為;黃豆餅粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草藥提 取物1. 2g/l,磯酸二氨鐘0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/l,木屑粉0. 3g/L,VBi〇.Olg/l,余量為水,pH 值 6. 0 ;
[0115] 所述發(fā)酵培養(yǎng)基的組成為;黃豆餅粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草藥提 取物2g/l,木屑粉0. 6g/l,磯酸二氨鐘0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/L,VBi〇.Olg/l,余量為水,抑值 6. 0 ;
[0116] 所述發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法為;按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱量各原料,首先取黃豆餅 粉質(zhì)量6倍的水,用乳酸調(diào)節(jié)抑值為5,加入加/g黃豆餅粉的耐高溫a-淀粉酶,邊攬拌邊 加入黃豆餅粉,升溫至95°C,保溫,液化lOmin,然后降溫至60°C,保溫,邊攬拌邊加入40u/ g黃豆餅粉的糖化酶和30u/g黃豆餅粉的蛋白酶水解20min,邊攬拌邊加入剩余水和其它原 料,均勻混合,調(diào)整抑值為6. 0,123°C滅菌30min即得發(fā)酵培養(yǎng)基。
[0117] 經(jīng)上述方法制備的菌絲球小且多的杏鮑茹液體菌種菌絲球密度為5. 2X105個(gè)/ L菌絲球直徑為0. 6mm,菌絲球干重為98g/l,胞外多糖為3. 4g/L。
[011引實(shí)施例7
[0119] 一種菌絲球小且多的杏鮑茹液體菌種的發(fā)酵方法,包括如下步驟:
[0120] 步驟1)至4)同實(shí)施例2 ;
[0121] 5)首先將種子罐種子W8%接種量接種于3化發(fā)酵罐,發(fā)酵培養(yǎng)基裝液量15L于 3rC、通氣量化/min恒溫發(fā)酵1她,然后W0. 2°C/min速率降溫至20°C,向發(fā)酵罐中加入 14g包被殼聚糖和900血種子罐種子,在通氣量化/min條件下恒溫發(fā)酵13h,最后W0.rC/ min速率升溫至25°C,在通氣量化/min條件下恒溫發(fā)酵4她即得菌絲球小且多的杏鮑茹液 體菌種;
[0122] 所述平板培養(yǎng)基組成為;馬鈴馨200g/l,葡萄糖20g/l,蛋白腺5g/l,磯酸二氨鐘 3g/L,硫酸儀 1. 5g/l,瓊脂 20g/L,VBi〇. 02g/L,余量為水,抑值 6. 0 ;
[0123] 所述液體種子培養(yǎng)基組成為;葡萄糖30g/l,酵母浸出汁5g/l,蛋白腺2g/l,瓊脂 2g/l,中草藥提取物0. 2g/l,磯酸二氨鐘0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/l,木屑粉0.Ig/L,VBi〇.Olg/ L,余量為水,抑值6.0 ;
[0124] 所述搖瓶培養(yǎng)基組成為:黃豆餅粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草藥提取 物0. 8g/l,磯酸二氨鐘0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/l,木屑粉0. 3g/L,VBi〇.Olg/l,余量為水,抑值 6. 0 ;
[0125] 所述種子罐培養(yǎng)基組成為;黃豆餅粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草藥提 取物1.Og/l,磯酸二氨鐘0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/l,木屑粉0. 4g/L,VBi〇.Olg/l,余量為水,pH值 6. 0;
[01%] 所述發(fā)酵培養(yǎng)基的組成為;黃豆餅粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草藥提 取物1. 8g/l,木屑粉0. 8g/l,磯酸二氨鐘0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/L,VBi〇.Olg/l,余量為水,pH值 6. 0。
[0127] 經(jīng)上述方法制備的菌絲球小且多的杏鮑茹液體菌種菌絲球密度為4. 5X105個(gè)/ L菌絲球直徑為0. 7mm,菌絲球干重為90g/l,胞外多糖為3.Og/L。
[0128] 實(shí)施例8本發(fā)明菌絲球小且多的杏鮑茹液體菌種的栽培試驗(yàn)<
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