溶液溶解，過濾得到濾液A，該濾液A上微孔樹脂柱分離，先以2倍柱體積的水溶液洗脫除去雜質(zhì)，然后用2倍柱體積、體積分數(shù)50%的甲醇溶液、60%甲醇溶液進行臺階梯度洗脫，收集50%甲醇水洗脫物，該甲醇水洗脫物經(jīng)真空度為0.09 MPa、溫度為50 °C減壓干燥得酚酸類組分粗品17.6 go
[0026]其中:
甘西鼠尾草醇提物與微孔樹脂比例為I g:10 mL。
[0027]⑵硅膠柱富集:
將酚酸類組分粗品經(jīng)硅膠柱色譜分離后，用3倍柱體積的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，按每份500 mL收集餾分，并經(jīng)薄層色譜檢測，其中展開劑為氯仿-甲醇-水混合溶劑，顯色劑為體積濃度10%的濃硫酸乙醇溶液，合并Rf值為0.18-0.22的餾分；Rf值為0.18-0.22的餾分經(jīng)真空度為0.09 MPa、溫度為50 °0減壓干燥即得淡黃色粉末狀的迷迭香酸粗品7.9g°
[0028]其中: 娃膠柱的尺寸為60 mmX 100 mm。
[0029]氯仿-甲醇-水混合溶劑是指將氯仿、甲醇、水按7:3:0.5體積比(mL / mL)混合均勻而得。
[0030]⑶親水液相制備色譜精制:
迷迭香酸粗品用其質(zhì)量5倍的體積分數(shù)為100%的甲醇溶液溶解，然后配制樣品濃度為150.0 mg/mL,經(jīng)0.45 μ m微孔濾膜過濾，得到濾液B，該濾液B經(jīng)親水液相制備色譜分離，經(jīng)檢測波長為330 nm的紫外檢測器檢測，收集制備色譜圖中主要的色譜峰餾分，該色譜峰餾分經(jīng)真空度為0.09 MPa、溫度為50 °0減壓干燥即得純度大于98%的白色粉末狀的對照品
6.6 g0
[0031]其中:
親水液相制備色譜分離的工作參數(shù)是指色譜柱柱長250 mm、直徑20 mm，親水制備柱固定相為1ym X1n,流動相為體積分數(shù)90%的乙腈-水溶液，進樣體積為3.0 mL,流速為15 mL/minο
[0032]實施例3從三種高山鼠尾草植物中制備迷迭香酸化學對照品的方法，包括以下步驟:
⑴微孔樹脂(MCI)除雜:
500.0 g按常規(guī)方法制得的棕紅色浸膏狀的康定鼠尾草醇提物用其質(zhì)量8倍的體積分數(shù)20%的乙醇溶液溶解，過濾得到濾液A，該濾液A上微孔樹脂柱分離，先以3倍柱體積的水溶液洗脫除去雜質(zhì)，然后用3倍柱體積、體積分數(shù)40%的甲醇溶液、70%甲醇溶液進行臺階梯度洗脫，收集40%甲醇水洗脫物，該甲醇水洗脫物經(jīng)真空度為0.08 MPa、溫度為60 °C減壓干燥得酚酸類組分粗品86.2 go
[0033]其中:
康定鼠尾草醇提物與微孔樹脂比例為I g:10 mL。
[0034]⑵硅膠柱富集:
將酚酸類組分粗品經(jīng)硅膠柱色譜分離后，用4倍柱體積的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，按每份500 mL收集餾分，并經(jīng)薄層色譜檢測，其中展開劑為氯仿-甲醇-水混合溶劑，顯色劑為體積濃度10%的濃硫酸乙醇溶液，合并Rf值為0.18-0.22的餾分；Rf值為0.18-0.22的餾分經(jīng)真空度為0.08 MPa、溫度為60 °0減壓干燥即得淡黃色粉末狀的迷迭香酸粗品36.4 go
[0035]其中:
娃膠柱的尺寸為40 mmX80 mm。
[0036]氯仿-甲醇-水混合溶劑是指將氯仿、甲醇、水按7.5:2.5:0.35體積比(mL / mL)混合均勻而得。
[0037]⑶親水液相制備色譜精制:
迷迭香酸粗品用其質(zhì)量3倍的體積分數(shù)為90%的甲醇溶液溶解，然后配制樣品濃度為100.0 mg/mL,經(jīng)0.45 μ m微孔濾膜過濾，得到濾液B，該濾液B經(jīng)親水液相制備色譜分離，經(jīng)檢測波長為330 nm的紫外檢測器檢測，收集制備色譜圖中主要的色譜峰餾分，該色譜峰餾分經(jīng)真空度為0.08 MPa、溫度為60 °0減壓干燥即得純度大于98%的白色粉末狀的對照品29.3 go
[0038]其中:
親水液相制備色譜分離的工作參數(shù)是指色譜柱柱長250 mm、直徑20 mm，親水制備柱固定相為1ym X1n,流動相為體積分數(shù)85%的乙腈-水溶液，進樣體積為2.5 mL,流速為15 mL/minο
【主權(quán)項】
1.從三種高山鼠尾草植物中制備迷迭香酸化學對照品的方法，包括以下步驟: ⑴微孔樹脂除雜: 按常規(guī)方法制得的棕紅色浸膏狀的粘毛鼠尾草、甘西鼠尾草或康定鼠尾草中的一種醇提物用其質(zhì)量5~10倍的體積分數(shù)10~30%的乙醇溶液溶解，過濾得到濾液A，該濾液A上微孔樹脂柱分離，先以2~5倍柱體積的水溶液洗脫除去雜質(zhì)，然后用2~5倍柱體積、體積分數(shù)30-80%的甲醇溶液進行臺階梯度洗脫，收集30°/『50%甲醇水洗脫物，該甲醇水洗脫物經(jīng)減壓干燥得酚酸類組分粗品；所述粘毛鼠尾草、甘西鼠尾草或康定鼠尾草中的一種醇提物與所述微孔樹脂比例為I g:10 mL ； ⑵硅膠柱富集: 將所述酚酸類組分粗品經(jīng)硅膠柱色譜分離后，用3~5倍柱體積的氯仿-甲醇-水混合溶劑洗脫，按每份500 mL收集餾分，并經(jīng)薄層色譜檢測，其中展開劑為氯仿-甲醇-水混合溶劑，顯色劑為體積濃度10%的濃硫酸乙醇溶液，合并Rf值為0.18-0.22的餾分；所述Rf值為0.18-0.22的餾分經(jīng)減壓干燥即得淡黃色粉末狀的迷迭香酸粗品； ⑶親水液相制備色譜精制: 所述迷迭香酸粗品用其質(zhì)量2~5倍的體積分數(shù)為80°/『100%的甲醇溶液溶解，然后配制樣品濃度為100.0-150.0 mg/mL，經(jīng)0.45 μ m微孔濾膜過濾，得到濾液B，該濾液B經(jīng)親水液相制備色譜分離，經(jīng)檢測波長為330 nm的紫外檢測器檢測，收集制備色譜圖中主要的色譜峰餾分，該色譜峰餾分經(jīng)減壓干燥即得純度大于98%的白色粉末狀的對照品。2.如權(quán)利要求1所述的從三種高山鼠尾草植物中制備迷迭香酸化學對照品的方法，其特征在于:所述步驟⑴和所述步驟⑵及所述步驟⑶中的減壓干燥的條件均是指真空度為0.06-0.09 MPa,溫度為 50-70 °C。3.如權(quán)利要求1所述的從三種高山鼠尾草植物中制備迷迭香酸化學對照品的方法，其特征在于:所述步驟⑵中娃膠柱的尺寸為30 mm~60 mmX60 mm -100 mm。4.如權(quán)利要求1所述的從三種高山鼠尾草植物中制備迷迭香酸化學對照品的方法，其特征在于:所述步驟⑵中氯仿-甲醇-水混合溶劑是指將氯仿、甲醇、水按8:2:0.2-7:3:0.5體積比混合均勻而得。5.如權(quán)利要求1所述的從三種高山鼠尾草植物中制備迷迭香酸化學對照品的方法，其特征在于:所述步驟⑶中親水液相制備色譜分離的工作參數(shù)是指色譜柱柱長250 _、直徑mm，親水制備柱固定相為10 μπι XAmide或X1n，流動相為體積分數(shù)809^90%的乙腈-水溶液，進樣體積為2.0-3.0mL，流速為15 mL/min。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種從三種高山鼠尾草植物中制備迷迭香酸化學對照品的方法，該方法包括以下步驟：⑴微孔樹脂除雜：粘毛鼠尾草、甘西鼠尾草或康定鼠尾草中的一種醇提物用乙醇溶液溶解，過濾、上微孔樹脂柱分離，先以水溶液洗脫除雜，然后用甲醇溶液進行臺階梯度洗脫，收集30%~50%甲醇水洗脫物，該甲醇水洗脫物經(jīng)減壓干燥得酚酸類組分粗品；⑵硅膠柱富集：將酚酸類組分粗品經(jīng)硅膠柱色譜分離后洗脫，收集Rf值為0.18~0.22的餾分；餾分經(jīng)減壓干燥即得淡黃色粉末狀的迷迭香酸粗品；⑶親水液相制備色譜精制：迷迭香酸粗品用甲醇溶液溶解，經(jīng)過濾、親水液相制備色譜分離，收集色譜峰餾分，該色譜峰餾分經(jīng)減壓干燥即得白色粉末狀的對照品。本發(fā)明工藝簡單、易規(guī)?；?。
【IPC分類】C07C67/56, C07C69/732
【公開號】CN104926659
【申請?zhí)枴緾N201510274646
【發(fā)明人】黨軍, 邵赟, 張莉, 王啟蘭, 梅麗娟, 陶燕鐸, 苑祥, 岳會蘭
【申請人】中國科學院西北高原生物研究所
【公開日】2015年9月23日
【申請日】2015年5月27日