一種伊曲康唑的手性拆分方法
【技術(shù)領域】
[0001]本發(fā)明涉及手性藥物制備方法，尤其涉及一種伊曲康唑的手性拆分方法，屬于醫(yī)藥技術(shù)領域。
【背景技術(shù)】
[0002]伊曲康唑是一種三唑類廣譜抗真菌藥物，其英文名稱為Itraconazole，中文化學名順-4- [4- [4- [4- [ [-2- (2，4- 二氯苯基)-2- (1H-1，2，4-三唑-1-基甲基)-1，3- 二氧戊環(huán)-4-基]甲氧基]苯基]哌嗪-1-基]苯基]-2-[(2’ S)-l-甲基丙基]-1,2，4-三唑-3-酮。伊曲康唑有3個手性碳原子，共有8種光學異構(gòu)體，抗真菌臨床使用的是其結(jié)構(gòu)中二氧環(huán)戊烷上4個順式異構(gòu)體的混合物，對應為2 S，4 R，2 ’ R-伊曲康唑(A)、2S, 4R, 2’ S-伊曲康唑(C)、2R，4S, 2’ R-伊曲康唑(B)及2R, 4S, 2’ S-伊曲康唑(D)。研宄發(fā)現(xiàn)，伊曲康唑各異構(gòu)體的生物活性及毒副作用存在較大差異，如CN103263417A公開了伊曲康唑異構(gòu)體組合能夠提高對真菌和內(nèi)皮細胞的選擇性，同時是也是具有治療真菌及血管新生相關(guān)疾病潛力的候選藥物，單一構(gòu)型的光學純伊曲康唑還能顯著降低肝細胞毒性，可避免伊曲康唑引起的副作用。
[0003]光學純伊曲康唑可以通過手性合成的方法制得，如專利US2013/0102614A1提供了一種手性合成伊曲康唑4個順式異構(gòu)體的技術(shù)路線，但合成路線長，操作復雜，需要使用的光學純起始物料市場上沒有供應，需要特殊定制，因此價格比較昂貴，同時合成過程中也產(chǎn)生了大量有機廢液和廢渣，不符合綠色化合的要求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，提供伊曲康唑的手性拆分方法，制備純伊曲康唑光學異構(gòu)體，簡化制備的步驟，降低生產(chǎn)成本，制備過程符合綠色化合的要求。
[0005]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:
[0006]一種伊曲康唑的手性拆分方法，以消旋伊曲康唑為原料，利用超臨界流體手性色譜法，通過手性色譜柱，用二氧化碳和強極性有機溶劑組成的流動相進行洗脫，經(jīng)兩次分離純化，得到四種伊曲康唑光學異構(gòu)體。該方法工藝操作簡單，產(chǎn)品純度高，可作為藥物研發(fā)對照品使用，制備過程中，所用試劑可回收利用，生產(chǎn)中幾乎不產(chǎn)生污染。
[0007]該方法包括以下步驟:
[0008](I)將消旋伊曲康唑溶解，利用制備型超臨界流體色譜儀和手性色譜柱，制備型超臨界流體色譜儀為MG III preparative SFC ;手性色譜柱為ChiralPakAS-10 μ, 300 X 50mml.D，用流動相進行洗脫，將消旋伊曲康唑進行一次分離，得到2S, 4R, 2’ S-伊曲康唑和2S，4R, 2’ R-伊曲康唑的混合物為混合物I以及2R，4S, 2’ S-伊曲康唑和2R，4S, 2’ R-伊曲康唑的混合物為混合物II ；
[0009](2)將一次分離得到的混合物I溶解，利用制備型超臨界流體色譜儀和手性色譜柱，制備型超臨界流體色譜儀為MG III preparative SFC ;手性色譜柱為ChiralPakAS-1O μ，300X50mm1.D，用流動相進行洗脫，進行二次分離，得到2S，4R, 2’ S-伊曲康唑和2S, 4R，2’ R-伊曲康唑；
[0010](3)將一次分離得到的混合物II溶解，利用制備型超臨界流體色譜儀和手性色譜柱，制備型超臨界流體色譜儀為Thar 350 preparative SFC ;手性色譜柱為ChiralCel0J-10 μ，300X50mm1.D，用流動相進行洗脫，進行二次分離，得到2R，4S, 2’ R-伊曲康唑和2R, 4S，2’ S-伊曲康唑。
[0011]消旋伊曲康唑、混合物I和混合物II的溶劑為甲醇、二氯甲烷或二者的混合溶劑。甲醇與二氯甲烷的混合溶劑二者之比為1:1。
[0012]流動相為二氧化碳和強極性有機溶劑的混合物，強極性有機溶劑為甲醇、乙醇、乙月青。
[0013]步驟(I)中強極性有機溶劑和二氧化碳的體積比為30:70?40:60，流動相的流速為180ml/min?220ml/min，手性色譜柱溫度為30°C?50°C，消旋伊曲康唑溶解濃度為20?30mg/ml。進樣量為6ml。
[0014]步驟(2)中強極性有機溶劑和二氧化碳的體積比為25:75?35:65，流動相的流速為180ml/min?220ml/min，手性色譜柱溫度為30°C?50°C，混合物I溶解濃度為15?25mg/ml。進樣量為4ml。
[0015]步驟(3)中強極性有機溶劑和二氧化碳的體積比為35:65?45:55，流動相的流速為180ml/min?220ml/min，手性色譜柱溫度為30°C?50°C，混合物II溶解濃度為15?25mg/ml。進樣量為4ml。
[0016]步驟(I)中強極性有機溶劑和二氧化碳的體積比為35:65，流動相的流速為200ml/min，手性色譜柱溫度為38°C。
[0017]步驟(2)中強極性有機溶劑和二氧化碳的體積比為30:70，流動相的流速為200ml/min，手性色譜柱溫度為38°C，混合物I的溶解濃度為20mg/ml。
[0018]步驟(3)中強極性有機溶劑和二氧化碳的體積比為40:60，流動相的流速為200ml/min ;手性色譜柱溫度為38°C，混合物II溶解濃度為20mg/ml。
[0019]強極性有機溶劑為甲醇。
[0020]本發(fā)明與現(xiàn)有相比，具有以下優(yōu)點:
[0021]方法工藝操作簡單，所用原料容易獲得，在制備過程中使用的有機試劑可通過減壓蒸餾回收利用，幾乎不產(chǎn)生污染，和手性合成所得到的產(chǎn)品相比，產(chǎn)品光學純度高，制備的光學純產(chǎn)品適合作為藥物研發(fā)中的對照品使用，這對進一步開發(fā)伊曲康唑的醫(yī)藥用途具有十分重要的意義。
【附圖說明】
[0022]圖1消旋伊曲康唑液相手性分析圖譜。
[0023]圖2 2S, 4R, 2’ R-伊曲康唑液相手性分析圖譜。
[0024]圖3 2S, 4R, 2’ S-伊曲康唑液相手性分析圖譜。
[0025]圖4 2R, 4S, 2’ R-伊曲康唑液相手性分析圖譜。
[0026]圖5 2R, 4S, 2’ S-伊曲康唑液相手性分析圖譜。
【具體實施方式】
[0027]下面結(jié)合【具體實施方式】，進一步闡明本發(fā)明，應理解這些實施方式僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍，在閱讀了本發(fā)明之后，本領域技術(shù)人員對本發(fā)明的各種等價形式的修改均落于本申請所附權(quán)利要求所限定的范圍。
[0028]一種伊曲康唑的手性拆分方法，包括以下步驟:
[0029](I)將消旋伊曲康唑溶解于甲醇、二氯甲烷或二者的混合溶劑，溶解濃度為20?30mg/ml，制備型超臨界流體色譜儀MG III preparative SFC和手性色譜柱ChiralPakAS-10 μ, 300X50mml.D，采用流動相進行洗脫，將消旋的伊曲康唑進行一次分離，收集的各組分于40°C下減壓蒸餾至干，得到2S，4R，2’ S-伊曲康唑和2S，4R，2’ R-伊曲康唑的混合物為混合物I以及2R，4S, 2’ S-伊曲康唑和2R，4S, 2’ R-伊曲康唑的混合物為混合物II，流動相二氧化碳和強極性有機溶劑的混合物，強極性有機溶劑為甲醇、乙醇、乙腈，強極性有機溶劑和二氧化碳的體積比為30:70?40:60，流動相的流速為180ml/min?220ml/min，優(yōu)選為200ml/min，手性色譜柱溫度為30°C?50°C，優(yōu)選38°C，消旋伊曲康唑溶解濃度為20?30mg/ml，進樣量為6ml，檢測波長為220nm，洗脫時間為9min ；。
[0030](2)將一次分離得到的混合物I溶解于甲醇、二氯甲烷或二者的混合溶劑，制備型超臨界流體色譜儀為MG III preparative SFC ;手性色譜柱為ChiralPakAS-10 μ，300X50mm1.D，采用流動相進行洗脫，進行二次分離，收集的各組分于40°C下減壓蒸餾至干，得到2S，4R, 2’S-伊曲康唑和2S，4R, 2’R-伊曲康唑，流動相二氧化碳和強極性有機溶劑的混合物，強極性有機溶劑為甲醇、乙醇、乙腈，強極性有機溶劑和二氧化碳的體積比為25:75?35:65，優(yōu)選30:70，流動相的流速為180ml/min?220ml/min，優(yōu)選為200ml/min，手性色譜柱溫度為30°C?50°C，優(yōu)選38°C，混合物II溶解濃度為15?25mg/ml，優(yōu)選20mg/ml，進樣量為4ml，檢測波長為220nm，洗脫時間為3.5min ；
[0031](3)將一次分離得到的混合物II溶解于甲醇、二氯甲烷或二者的混合溶劑，制備型超臨界流體色譜儀為Thar 350 preparative SFC ;手性色譜柱為ChiralCel0J-10 μ，300X50mm1.D，用流動相進行洗脫，進行二次分離，收集的各組分于40°C下減壓蒸餾至干，得到2R，4S, 2’ R-伊曲康唑和2R，4S, 2’ S-伊曲康唑，流動相為二氧化碳和強極性有機溶劑的混合物，強極性有機溶劑為甲醇、乙醇、乙腈，強極性有機溶劑和二氧化碳的體積比為35:65?45:55，優(yōu)選40:60，流動相的流速為180ml/min?220ml/min，優(yōu)選200ml/min,手性色譜柱溫度為30°C?50°C，優(yōu)選38°C，混合物II溶解濃度為15?25mg/ml，優(yōu)選為20mg/ml，進樣量為4ml，檢測波長為220nm，洗脫時間為5min。
[0032]消旋伊曲康唑、混合物I和混合物II的溶劑為甲醇、二氯甲烷或二者的混合溶劑，優(yōu)選甲醇與二氯甲烷的混合溶劑二者之比為1:1。
[0033]實施例一
[0034]2S, 4R, 2’ S-伊曲康唑和2S，4R, 2’ R-伊曲康唑混合物(混合物I )及2S, 4R, 2’ S-伊曲康唑和2S，4R, 2’ R-伊曲康唑的混合物(混合物II )的制備
[0035]將消旋伊曲康唑溶于甲醇與二氯甲烷按體積比1:1組成的混合溶劑中，制備得到樣品溶液，濃度為25mg/ml ；
[0036]利用制備型超臨界流體色譜儀MG III preparative SFC,將樣品注入色譜柱，色譜柱為ChiralPak AS-10 μ，300X50mm,并用甲醇和二氧化碳組成的洗脫劑進行洗脫，進樣量為6ml，甲醇和二氧化碳的體積比為35:65，洗脫溶劑流速為200ml/min，色譜柱溫度為38°C，檢測波長為220nm ;總洗脫時間為9min ；
[0037]收集先出峰的兩個色譜峰，將收集液于40°C下減壓濃縮至干，得到混合物I約73mg ;收集后出峰的兩個色譜峰，將收集液于40°C下減壓濃縮至干，得到混合物II約74mg。
[0038]實施例二
[0039]2S, 4R, 2’ S-伊曲康唑和2S，4R, 2’ R-伊曲康唑的混合物(混合物I )及2S, 4R, 2’ S-伊曲康唑和2S，4R, 2’ R-伊曲康唑的混合物(混合物II )的制備
[0040]將消旋伊曲康唑溶于甲醇中，制備得到樣品溶液，濃度為20mg/ml ;
[0041]利用制備型超臨界流體色譜儀MG III preparative SFC,將樣品注入色譜柱，色譜柱為ChiralPak AS-10 μ，300 X 50mm,并用二氧化碳和甲醇組成的洗脫劑進行洗脫，進樣量為6ml，甲醇和二氧化碳的體積比為30:70，洗脫溶劑流速為220ml/min，色譜柱溫度為50°C，檢測波長為220nm ;總洗脫時間為9min ；
[0042]收集先出峰的兩