一種從海鮮菇下腳料中提取海鮮菇多糖的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種從海鮮菇下腳料中提取海鮮菇多糖的方法，屬于生化分離純化技術領域。
【背景技術】
[0002]海鮮葫([Hypsizygusmarmoreus (Peck) H.E.Bigelow)，中文正名真姬葫，又名玉蕈、斑玉蕈。屬低溫型草生菌，具有很高的營養(yǎng)價值和藥用價值，顏色潔白，菌肉肥厚，口感細膩，氣味芬芳，味道鮮美。該菇營養(yǎng)豐富，是一種非常珍貴的食用菌。
[0003]海鮮菇的蛋白質(zhì)中氨基酸種類齊全，包括8種人體必需氨基酸，其中賴氨酸、精氨酸含量高于一般菇類，對青少年智、增高起著重要作用。還含有數(shù)種多糖體。海鮮菇的提取物具有多種生理活性成份。其中真菌多糖、嘌呤、腺苷能增強免疫力，促進抗體形成抗氧化成分能延緩衰老、美容等等。β_1，3-D葡聚糖具有很高的抗腫瘤活性。而且從海鮮菇中分離得到的聚合糖酶的活性也比其它菇類要高許多。另外，海鮮菇的熱水提取物和有機溶劑提取物有清除體內(nèi)自由基作用。因此，有防止便秘、抗癌、防癌、提高免疫力、預防衰老、延長壽命的獨特功效。
[0004]目前對于真菌多糖提取通常采用熱水浸提、溶劑浸提和酶法浸提。熱水浸提工藝簡單，提取的主要是胞外多糖，得率較低。而酶法浸提常采用纖維素酶、果膠酶和蛋白酶，以除去胞壁合膜上的果膠、纖維素及蛋白質(zhì)等成分，有利于胞內(nèi)多糖的溶出，而使多糖的提取率提高。但由于提取過程需要加酶，不僅生產(chǎn)成本高，同時也給產(chǎn)物的分離帶來困難。溶劑提取法多采用酸性或堿性物質(zhì)，可能會對多糖的生物活性及其結構有一定的影響。
[0005]而對海鮮菇多糖的提取，除了上述方法外，也有聯(lián)合使用超聲波破壁和熱水浸提的研宄報道，由于采用先超聲波破碎海鮮菇，然后再恒溫水浴浸提多糖，使得海鮮菇的處理量少及提取時間均較長，無法正真走出實驗室，進行工業(yè)化生產(chǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]基于上述背景，本發(fā)明的目的在于提供一種從海鮮菇下腳料中提取活性多糖的方法，該方法與現(xiàn)有技術相比，使提取工藝簡單，提取時間短，可用于工業(yè)化生產(chǎn)。
[0007]本發(fā)明的目的是通過下述技術方案得以實現(xiàn):
一種從海鮮菇下腳料中提取活性多糖的方法，包括粉碎機粉碎、高壓均質(zhì)破碎、高速離心、磁性膜超濾和干燥。
[0008]更具體地，首先將海鮮菇下腳料經(jīng)過粉碎機粉碎成糊狀體后，通過高壓均質(zhì)機破碎后，通過濾布過濾，并將濾液在5000?18000轉/分鐘高速離心10?60min，去除沉淀物，上清液即為海鮮菇多糖粗提物。將上清液于磁性膜超濾系統(tǒng)中，在磁場大小為0.1?1.2T的條件下進行超濾，超濾時的操作壓力為0.1?0.5MPa，收集磁性膜超濾所得的海鮮菇多糖截留液，經(jīng)醇沉、干燥后得海鮮菇多糖。
[0009]作為優(yōu)選，所述高壓均質(zhì)破碎的條件為:均質(zhì)機的壓力為10?50MPa，均質(zhì)破碎次數(shù)為I?3次，破碎時溫度應控制在90°C以內(nèi)。
[0010]采用高壓均質(zhì)機來破碎海鮮菇下腳料，海鮮菇下腳料經(jīng)過粉碎機粉碎成糊狀體后，在增壓機構(10-150MPa)的作用下，高壓快速的通過均質(zhì)機的均質(zhì)腔，會同時受到高速剪切、高頻震蕩、空穴現(xiàn)象和對流撞擊等機械力作用和相應的熱效應，由此引發(fā)的機械力及化學效應可誘導物料大分子的物理、化學及結構性質(zhì)發(fā)生變化，最終達到超微破碎的效果，提高了海鮮菇活性物質(zhì)的提取率和加快了效率；操作簡便。同時，在破碎的過程中，海鮮菇體系溫度始終控制在90°C以內(nèi)。
[0011]所述高速離心是將濾液在5000?14000轉/分鐘高速離心10?30min。
[0012]所述磁性膜超濾中，磁場大小為0.2?0.6T。
[0013]因膜分離沒有相變、常溫操作，特別適用于多糖活性物質(zhì)的分離、濃縮、純化。超濾膜技術與凝膠柱層、化學試劑法等傳統(tǒng)工藝相比，分離多糖得率高、能耗低、不容易破壞多糖的生理活性，在多糖分離方面具有廣闊的應用前景。
[0014]雖然超濾技術在多糖分離中的應用日益廣泛，目前制造的各種分離膜，其截留分子量是固定的，只能分離一定分子量的物質(zhì)，調(diào)控范圍較小。多糖類物質(zhì)分子量分布范圍廣泛，欲得到多組不同分子量的目標物質(zhì)，則需要通過更換不同截留分子量的超濾膜多次操作，不但操作繁瑣而且使生產(chǎn)成本大大增加。為解決膜分離在實際應用中受到的限制，本發(fā)明采用一種截留率可調(diào)控的電磁約束分離膜(它是通過在制膜液中添加納米磁性粒子，使制成的超濾膜具有一定的磁性，可以通過調(diào)節(jié)外加磁場的大小和方向，改變超濾膜的皮膚層和膜孔結構，從而改變膜對物質(zhì)的截留率，使一系列不同的物質(zhì)先后被分離開來)。與普通的超濾膜相比，磁性超濾膜具有可連續(xù)分離一系列物質(zhì)的特性，增加了分離對象范圍，從而節(jié)約了成本。
[0015]作為優(yōu)選，采用的磁性超濾膜的納米磁性粒子為Fe304、γ -Fe2O3> Fe、Co、N1、納米氧化鋪鐵等。
[0016]所述干燥為真空冷凍干燥。
[0017]真空冷凍干燥技術是先將濕物料在共晶點溫度以下凍結，使水分變成固態(tài)的冰，然后在適當?shù)恼婵斩认?，使冰直接升華為水蒸汽，再用真空系統(tǒng)中的水氣凝結器將水蒸汽冷凝，從而獲得干燥制品的技術。由于整個干燥過程是在高真空(0.1mmHg)、超低溫的條件下完成的，縮短了冷凍時間，有效地保證了物質(zhì)的活性構象，避免了氧化及高溫對生物活性物質(zhì)的作用，最大限度地保存了產(chǎn)品中的生物活性物質(zhì)。冷凍干燥的基礎是冰從樣品中升華，即水分從固態(tài)直接轉化為氣態(tài)，不經(jīng)過中間的液態(tài)，不存在氣相和液相之間的表面張力對樣品的作用，從而減輕在干燥過程中對樣品的損傷且干燥后的產(chǎn)品呈多孔海綿狀結構，極易溶于水(甚至在冰水中)而迅速復原。
[0018]本發(fā)明采用的破碎方法，破碎效率高，破碎時間短，使海鮮菇活性多糖物質(zhì)的提取率高(提取率在70%以上)、功能活性保存完好，可用于工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。本發(fā)明的從海鮮菇下腳料中提取活性多糖的方法，提取工藝簡單，提取時間短，成本降低，可用于工業(yè)化生產(chǎn)。所得制品可供制備不同類型的食品、保健食品或藥品使用。
【具體實施方式】
[0019]以下通過實施例對本發(fā)明【具體實施方式】的描述說明但不限制本發(fā)明。
[0020]實施例1、一種從海鮮菇下腳料中提取活性多糖的制備方法
稱取鮮海鮮菇下腳料500g，加入100ml純凈水中，用粉碎機進行初粉碎成糊狀體，將糊狀體通過高壓均質(zhì)機破碎提取。均質(zhì)機的壓力為70MPa，均質(zhì)破碎次數(shù)為I次，破碎時溫度應控制在90°C以內(nèi)。
[0021]破碎液通過在5000轉/分鐘(rpm)高速離心60min，去除沉淀物，將上清液于磁性膜(Psf+ Fe3O4膜，Mw=LOXlO 5Da)超濾系統(tǒng)中，在磁場大小為0.3T的范圍內(nèi)下進行超濾，超濾時的操作壓力為0.5MPa，收集磁性膜超濾所得的海鮮菇多糖截留液，加入3倍體積的75%乙醇，置于4°C環(huán)境中沉淀。醇沉液5000rpm離心15min，收集沉淀。沉淀用超純水溶解，并經(jīng)真空冷凍干燥后得海鮮菇多糖。
[0022]實施例2、一種從海鮮菇下腳料中提取活性多糖的制備方法
稱取鮮海鮮菇下腳料500g，加入100ml純凈水中，用粉碎機進行初粉碎成糊狀體，將糊狀體通過高壓均質(zhì)機破碎提取。均質(zhì)機的壓力為50MPa，均質(zhì)破碎次數(shù)為I次，破碎時溫度應控制在90°C以內(nèi)。
[0023]破碎液通過在18000轉/分鐘(rpm)高速離心lOmin，去除沉淀物，將上清液于磁性膜(Psf+ Fe膜，1.0 X 15Da)超濾系統(tǒng)中，在磁場大小為1.2T的范圍內(nèi)下進行超濾，超濾時的操作壓力為0.1MPa,收集磁性膜超濾所得的海鮮菇多糖截留液，，加入3倍體積的75%乙醇，置于4°C環(huán)境中沉淀。醇沉液5000rpm離心15min，收集沉淀。沉淀用超純水溶解，并經(jīng)真空冷凍干燥后得海鮮菇多糖。
[0024]實施例3、一種從海鮮菇下腳料中提取活性多糖的制備方法
稱取鮮海鮮菇下腳料500g，加入100ml純凈水中，用粉碎機進行初粉碎成糊狀體，將糊狀體通過高壓均質(zhì)機破碎提取。均質(zhì)機的壓力為lOMPa，均質(zhì)破碎次數(shù)為3次，破碎時溫度應控制在90°C以內(nèi)。破碎液通過在14000轉/分鐘(rpm)高速離心30min，去除沉淀物，將上清液于磁性膜(Psf+納米氧化鏑鐵膜，1.0X 15Da)超濾系統(tǒng)中，在磁場大小為0.5T的范圍內(nèi)下進行超濾，超濾時的操作壓力為0.2MPa，收集磁性膜超濾所得的海鮮菇多糖截留液，加入3倍體積的75%乙醇，置于4°C環(huán)境中沉淀。醇沉液5000rpm離心15min，收集沉淀。沉淀用超純水溶解，并經(jīng)真空冷凍干燥后得海鮮菇多糖。
【主權項】
1.一種從海鮮菇下腳料中提取海鮮菇多糖的方法，其特征在于:所述方法包括粉碎機粉碎、高壓均質(zhì)破碎、高速離心、磁性膜超濾和干燥。
2.根據(jù)權利要求1所述的從海鮮菇下腳料中提取海鮮菇多糖的方法，其特征在于:所述方法的具體步驟包括:首先將海鮮菇下腳料經(jīng)過粉碎機粉碎成糊狀體后，通過高壓均質(zhì)機破碎、濾布過濾，并將濾液在5000?18000轉/分鐘高速離心10?60min，去除沉淀物，上清液即為海鮮菇多糖粗提物，將上清液于磁性膜超濾系統(tǒng)中，在磁場大小為0.1?1.2T的條件下進行超濾，超濾時的操作壓力為0.1?0.5MPa，收集磁性膜超濾所得的海鮮菇多糖截留液，經(jīng)醇沉、干燥后得海鮮菇多糖。
3.根據(jù)權利要求1所述的從海鮮菇下腳料中提取海鮮菇多糖的方法，其特征在于:所述高壓均質(zhì)破碎的條件為:高壓均質(zhì)機的壓力為10?50MPa，均質(zhì)破碎次數(shù)為I?3次，破碎時溫度應控制在90°C以內(nèi)。
4.根據(jù)權利要求1所述的從海鮮菇下腳料中提取海鮮菇多糖的方法，其特征在于:所述高速離心是將濾液在5000?14000轉/分鐘高速離心10?30min。
5.根據(jù)權利要求1所述的從海鮮菇下腳料中提取海鮮菇多糖的方法，其特征在于:所述磁性膜超濾的磁場大小為0.2?0.6T。
6.根據(jù)權利要求1所述的從海鮮菇下腳料中提取海鮮菇多糖的方法，其特征在于:所述磁性超濾膜的納米磁性粒子為Fe3O4、γ -Fe2O3、Fe、Co、Ni或納米氧化鏑鐵。
7.根據(jù)權利要求1所述的從海鮮菇下腳料中提取海鮮菇多糖的方法，其特征在于:所述干燥為真空冷凍干燥。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種從海鮮菇下腳料中提取海鮮菇多糖的方法，屬于生化分離純化技術領域。所述方法包括粉碎機粉碎、高壓均質(zhì)破碎、高速離心、磁性膜超濾和干燥。該方法與現(xiàn)有技術相比，使提取工藝簡單，提取時間短，可用于工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明采用的破碎方法，破碎效率高，破碎時間短，使海鮮菇活性多糖物質(zhì)的提取率高(提取率在70%以上)、功能活性保存完好，可用于工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。本發(fā)明的從海鮮菇下腳料中提取活性多糖的方法，提取工藝簡單，提取時間短，成本降低，可用于工業(yè)化生產(chǎn)。所得制品可供制備不同類型的食品、保健食品或藥品使用。
【IPC分類】C08B37-00
【公開號】CN104761655
【申請?zhí)枴緾N201510206816
【發(fā)明人】謝金鑒, 駱建華, 謝新辭
【申請人】福建省神六保健食品有限公司
【公開日】2015年7月8日
【申請日】2015年4月28日