本發(fā)明涉及微生物，具體而言，涉及一種乳酸菌細菌素及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、單核細胞增生李斯特菌(listeria?monocytogenes)是一種革蘭氏陽性的人獸共患致病菌，也是對人類健康威脅性最強的食源性致病菌之一。單核細胞增生李斯特菌可引起李斯特菌病和胃腸炎，導(dǎo)致腦膜炎、流產(chǎn)、敗血癥等病癥。單核細胞增生李斯特菌的感染性和危害性使其治療措施顯得尤為重要。傳統(tǒng)治療上述食源性致病菌的方法是抗生素療法，但由于抗生素的濫用，耐多藥的致病菌對抗生素如青霉素、環(huán)丙沙星等已經(jīng)表現(xiàn)出廣泛的耐藥性，這使得開發(fā)新的治療手段迫在眉睫。隨著食品工業(yè)科技的不斷發(fā)展，人們更傾向于綠色、溫和、天然環(huán)保的抑菌方式，天然抗菌劑的出現(xiàn)，如來自動物的乳過氧化物酶、乳鐵蛋白、溶菌酶、來自植物的精油和草藥提取物，以及來自微生物的細菌素為人們提供了新的思路。

2、乳酸菌(lactic?acid?bacteria)可以分泌具有抑菌活性的代謝產(chǎn)物，如有機酸、細菌素和h2o2等，從而抑制致病菌的生長。nisin和pediocin是研究最多的可作為商業(yè)天然防腐劑的細菌素。細菌素是菌株如乳酸乳球菌和糞腸球菌的核糖體中合成的細菌素。

3、鑒于此，特提出本發(fā)明。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的之一包括提供一種乳酸菌細菌素。

2、本發(fā)明的目的之二包括提供上述乳酸菌細菌素的制備方法。

3、本發(fā)明的目的之三包括提供上述乳酸菌細菌素在制備抑菌產(chǎn)品中的應(yīng)用。

4、本發(fā)明的目的之四包括提供一種抑菌產(chǎn)品。

5、本發(fā)明解決其技術(shù)問題是采用以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的：

6、本發(fā)明提出一種乳酸菌細菌素，該乳酸菌細菌素從戊糖乳植物桿菌中提取獲得，該戊糖乳植物桿菌的保藏編號為cctcc?no：m?2022431。

7、可選地，上述乳酸菌細菌素分子量約為5988da。

8、可選地，上述乳酸菌細菌素的氨基酸序列如seq?id?no:1所示。

9、本發(fā)明還提供了一種乳酸菌細菌素的制備方法，其通過戊糖乳植物桿菌發(fā)酵產(chǎn)物獲取，或者通過化學合成方式獲取。

10、可選地，上述制備方法包括：將戊糖乳植物桿菌的發(fā)酵液離心取上清液，向上清液中加入硫酸銨使上清液中硫酸銨的飽和度分別為80％～100％，再次離心后取沉淀，然后依次進行重溶、透析和冷凍干燥，獲得細菌素粗品。

11、可選地，戊糖乳植物桿菌發(fā)酵液的制備包括：將戊糖乳植物桿菌接種至發(fā)酵培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)。

12、可選地，發(fā)酵培養(yǎng)基包含：蛋白胨10g/l，牛肉浸粉8g/l，酵母提取物4g/l，葡萄糖20g/l，無水山梨醇單油酸酯1ml/l，磷酸氫二鉀2g/l，三水醋酸鈉5g/l，檸檬酸三銨2g/l，七水硫酸鎂0.2g/l，四水硫酸錳0.05g/l。

13、可選地，制備方法還包括對細菌素粗品進行純化，純化包括：將細菌素粗品溶解后再用sephadex?g-50凝膠層析柱對其進行分離，再次透析和冷凍干燥后即可獲得乳酸菌細菌素。

14、此外，本發(fā)明還提出一種上述乳酸菌細菌素在制備抑菌產(chǎn)品中的應(yīng)用。

15、可選地，上述抑菌產(chǎn)品包括抑制單核細胞增生李斯特菌生長的抑菌劑。

16、本發(fā)明還提出一種抑菌產(chǎn)品，其包含上述乳酸菌細菌素。

17、本發(fā)明具有以下有益效果：

18、本發(fā)明從保藏編號為cctcc?no：m?2022431的戊糖乳植物桿菌中提取到一種細菌素，該細菌素具有熱穩(wěn)定性，并且能夠耐受低溫，在很寬的ph范圍內(nèi)保持其活性。同時，該細菌素能夠抑制食源性致病菌單核細胞增生李斯特菌的生長增殖，由于來源于可食用的四川泡菜中，所以該細菌素對人類身體無害，還能夠為預(yù)防或治療食源性致病菌造成的疾病提供新的研究方向，因此具有良好的應(yīng)用前景。

技術(shù)特征：

1.一種乳酸菌細菌素，其特征在于，所述乳酸菌細菌素從戊糖乳植物桿菌中提取獲得，所述戊糖乳植物桿菌的保藏編號為cctcc?no：m2022431。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的乳酸菌細菌素，其特征在于，所述乳酸菌細菌素分子量約為5988da。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的乳酸菌細菌素，其特征在于，所述乳酸菌細菌素的氨基酸序列如seq?id?no:1所示。

4.如權(quán)利要求1-3任一項所述的乳酸菌細菌素的制備方法，其特征在于，所述乳酸菌細菌素從所述戊糖乳植物桿菌的發(fā)酵產(chǎn)物中提取獲得，或者通過化學合成方式獲取。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，包括：將所述戊糖乳植物桿菌的發(fā)酵液離心取上清液，向所述上清液中加入硫酸銨，使上清液中硫酸銨的飽和度為80％～100％，再次離心后取沉淀，然后依次進行重溶、透析和冷凍干燥，獲得細菌素粗品。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述戊糖乳植物桿菌發(fā)酵液的制備包括：將所述戊糖乳植物桿菌接種至發(fā)酵培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)；

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述制備方法還包括對細菌素粗品進行純化，所述純化包括：將所述細菌素粗品溶解后再用sephadex?g-50凝膠層析柱對其進行分離，再次透析和冷凍干燥后即可獲得所述乳酸菌細菌素。

8.如權(quán)利要求1-3任一項所述的乳酸菌細菌素在制備抑菌產(chǎn)品中的應(yīng)用。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述抑菌產(chǎn)品包括抑制單核細胞增生李斯特菌生長的抑菌劑。

10.一種抑菌產(chǎn)品，其特征在于，包含權(quán)利要求1-3任一項所述的乳酸菌細菌素。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種乳酸菌細菌素及其制備方法和應(yīng)用，屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明從保藏編號為CCTCC?NO：M?2022431的戊糖乳桿菌中提取到一種細菌素，該細菌素具有熱穩(wěn)定性，并且能夠耐受低溫，在很寬的pH范圍內(nèi)保持其活性。同時，該細菌素能夠抑制食源性致病菌單核細胞增生李斯特菌的生長增殖，由于來源于可食用的四川泡菜中，所以該細菌素對人類身體無害，還能夠為預(yù)防或治療食源性致病菌造成的疾病提供新的研究方向，因此具有良好的應(yīng)用前景。

技術(shù)研發(fā)人員：吳重德,徐步青,米婷,金垚,周榮清
受保護的技術(shù)使用者：四川大學
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/2