本發(fā)明主要涉及農(nóng)副產(chǎn)品深加工
技術(shù)領(lǐng)域：
，尤其涉及一種米糠多糖的提取方法。
背景技術(shù)：
：米糠是稻谷加工的副產(chǎn)品，是稻谷脫殼后碾米時(shí)從糙米表面碾除的糙米表面，其質(zhì)量占稻谷粒質(zhì)量的6~8%，集中了64%的稻米營養(yǎng)素和90%以上的人體必需元素，富含優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)、脂肪、維生素、礦物質(zhì)、膳食纖維、氨基酸等營養(yǎng)成分，被譽(yù)為“天賜營養(yǎng)源”，我國是世界第一產(chǎn)稻大國，水稻年產(chǎn)18000萬噸以上，米糠年產(chǎn)量為1200萬噸，資源十分豐富，是一種量大面廣的可再生資源，但是國內(nèi)產(chǎn)品化的高附加值米糠制品還比較少，只有10~15%的米糠被用來進(jìn)行深加工，造成了很大的資源浪費(fèi)；多糖能有效調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，且不會(huì)產(chǎn)生毒副作用，能夠刺激細(xì)胞免疫應(yīng)答增，強(qiáng)人體免疫功能，從米糠中提取米糠多糖，能夠變廢為寶，增加米糠附加值和農(nóng)民收入。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為了彌補(bǔ)已有技術(shù)的缺陷，本發(fā)明的目的是提供一種米糠多糖的提取方法。一種米糠多糖的提取方法，包括以下步驟：（1）酶解：將米糠粉碎至60~80目，加入脫脂米糠重量15~20倍量的蒸餾水，攪拌均勻，加入復(fù)合酶，于40~42℃酶解3~4小時(shí)，破壞米糠的組織結(jié)構(gòu)，促進(jìn)米糠多糖釋放，提高得率，再加入蛋白酶，于51~53℃酶解2~3小時(shí)，過濾，分解復(fù)合酶，提高米糠多糖的純度，破壞過氧化物酶的活性，抑制米糠氧化，保留多糖的生物活性，得一次濾液和一次濾渣；（2）一次提?。合蛞淮螢V渣中加入一次濾渣重量25~30倍量的蒸餾水，加熱至溫度為60~70℃，保溫40~50分鐘，促進(jìn)水溶性中性多糖釋放，自然降溫，過濾，得二次濾液和二次濾渣；（3）二次提?。合蚨螢V渣中加入二次濾渣重量50~60倍量的酸性蒸餾水，常溫浸泡3~4小時(shí)，促進(jìn)水溶性酸性多糖釋放，過濾，得三次濾液和三次濾渣；（4）一次純化：將一次濾液、二次濾液和三次濾液合并，真空濃縮至體積為原來的1/3，置于冰箱中冷凍20~24小時(shí)，取出后自然解凍，5000~6000轉(zhuǎn)/分鐘離心10~15分鐘，除沉淀，促進(jìn)不穩(wěn)定的金屬離子進(jìn)行沉淀，提高多糖純度和貯藏穩(wěn)定性，將濾液冷凍干燥至含水量為12~14%，得米糠粗多糖；（5）二次純化：向米糠粗多糖中加入米糠粗多糖重量8~10倍量的蒸餾水，攪拌至混合均勻，逐漸加入體積分?jǐn)?shù)為92~94%的酒精溶液，至終濃度為71~73%，于2~4℃、41~43轉(zhuǎn)/分鐘震蕩22~26小時(shí)，4000~5000轉(zhuǎn)/分鐘離心10~12分鐘，取沉淀，冷凍干燥至含水量7~9%，得米糠多糖；（6）包裝：真空包裝，輻射滅菌，得成品。所述步驟（1）的米糠，為新鮮全脂米糠。所述步驟（1）的復(fù)合酶，添加量為脫脂米糠重量的0.12~0.14%，由以下重量份的酶制劑組成：纖維素酶14~16、脂肪酶11~13、半纖維素酶7~9、淀粉酶7~9。所述步驟（1）的蛋白酶，為菠蘿蛋白酶，添加量為脫脂米糠重量的0.07~0.09%。所述步驟（4）的酸性蒸餾水，為醋酸水溶液，ph為4.2~4.6。所述米糠多糖的提取方法，得到的米糠多糖。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是：本發(fā)明提供的米糠多糖的提取方法，方法簡單，使米糠多糖的得率為6.96%，純度為73.2%，明顯提高米糠的附加值，使經(jīng)濟(jì)收入提高18.3%；以新鮮全脂米糠為原料，避免米糠在傳統(tǒng)的脫脂過程中造成多糖損失，提高多糖得率；米糠粉碎后經(jīng)復(fù)合酶酶解，破壞米糠的組織結(jié)構(gòu)，促進(jìn)米糠多糖釋放，提高得率，再加入蛋白酶進(jìn)行酶解，分解復(fù)合酶，提高米糠多糖的純度，破壞過氧化物酶的活性，抑制米糠氧化，保留多糖的生物活性；酶解后再次加入高溫蒸餾水，促進(jìn)水溶性中性多糖釋放；過濾后加入常溫酸性蒸餾水，促進(jìn)水溶性酸性多糖釋放；三次濾液合并后進(jìn)行低溫冷凍，促進(jìn)不穩(wěn)定的金屬離子進(jìn)行沉淀，提高多糖純度和貯藏穩(wěn)定性。具體實(shí)施方式下面用具體實(shí)施例說明本發(fā)明。實(shí)施例1一種米糠多糖的提取方法，包括以下步驟：（1）酶解：將新鮮全脂米糠粉碎至60目，加入脫脂米糠重量15倍量的蒸餾水，攪拌均勻，加入復(fù)合酶，于40℃酶解3小時(shí)，破壞米糠的組織結(jié)構(gòu)，促進(jìn)米糠多糖釋放，提高得率，再加入蛋白酶，于51℃酶解2小時(shí)，過濾，分解復(fù)合酶，提高米糠多糖的純度，破壞過氧化物酶的活性，抑制米糠氧化，保留多糖的生物活性，得一次濾液和一次濾渣；（2）一次提?。合蛞淮螢V渣中加入一次濾渣重量25倍量的蒸餾水，加熱至溫度為60℃，保溫40分鐘，促進(jìn)水溶性中性多糖釋放，自然降溫，過濾，得二次濾液和二次濾渣；（3）二次提取：向二次濾渣中加入二次濾渣重量50倍量的酸性蒸餾水，常溫浸泡3~4小時(shí)，促進(jìn)水溶性酸性多糖釋放，過濾，得三次濾液和三次濾渣；（4）一次純化：將一次濾液、二次濾液和三次濾液合并，真空濃縮至體積為原來的1/3，置于冰箱中冷凍20~24小時(shí)，取出后自然解凍，5000~6000轉(zhuǎn)/分鐘離心10~15分鐘，除沉淀，促進(jìn)不穩(wěn)定的金屬離子進(jìn)行沉淀，提高多糖純度和貯藏穩(wěn)定性，將濾液冷凍干燥至含水量為12~14%，得米糠粗多糖；（5）二次純化：向米糠粗多糖中加入米糠粗多糖重量8倍量的蒸餾水，攪拌至混合均勻，逐漸加入體積分?jǐn)?shù)為92%的酒精溶液，至終濃度為71%，于2℃、41轉(zhuǎn)/分鐘震蕩22小時(shí)，4000~5000轉(zhuǎn)/分鐘離心10~12分鐘，取沉淀，冷凍干燥至含水量7~9%，得米糠多糖；（6）包裝：真空包裝，輻射滅菌，得成品。所述步驟（1）的復(fù)合酶，添加量為脫脂米糠重量的0.12%，由以下重量份的酶制劑組成：纖維素酶14、脂肪酶11、半纖維素酶7、淀粉酶7。所述步驟（1）的蛋白酶，為菠蘿蛋白酶，添加量為脫脂米糠重量的0.07%。所述步驟（4）的酸性蒸餾水，為醋酸水溶液，ph為4.2~4.6。所述米糠多糖的提取方法，得到的米糠多糖。實(shí)施例2一種米糠多糖的提取方法，包括以下步驟：（1）酶解：將新鮮全脂米糠粉碎至60目，加入脫脂米糠重量18倍量的蒸餾水，攪拌均勻，加入復(fù)合酶，于41℃酶解3小時(shí)，破壞米糠的組織結(jié)構(gòu)，促進(jìn)米糠多糖釋放，提高得率，再加入蛋白酶，于52℃酶解2小時(shí)，過濾，分解復(fù)合酶，提高米糠多糖的純度，破壞過氧化物酶的活性，抑制米糠氧化，保留多糖的生物活性，得一次濾液和一次濾渣；（2）一次提取：向一次濾渣中加入一次濾渣重量28倍量的蒸餾水，加熱至溫度為65℃，保溫45分鐘，促進(jìn)水溶性中性多糖釋放，自然降溫，過濾，得二次濾液和二次濾渣；（3）二次提?。合蚨螢V渣中加入二次濾渣重量55倍量的酸性蒸餾水，常溫浸泡3小時(shí)，促進(jìn)水溶性酸性多糖釋放，過濾，得三次濾液和三次濾渣；（4）一次純化：將一次濾液、二次濾液和三次濾液合并，真空濃縮至體積為原來的1/3，置于冰箱中冷凍20~24小時(shí)，取出后自然解凍，5000~6000轉(zhuǎn)/分鐘離心10~15分鐘，除沉淀，促進(jìn)不穩(wěn)定的金屬離子進(jìn)行沉淀，提高多糖純度和貯藏穩(wěn)定性，將濾液冷凍干燥至含水量為12~14%，得米糠粗多糖；（5）二次純化：向米糠粗多糖中加入米糠粗多糖重量9倍量的蒸餾水，攪拌至混合均勻，逐漸加入體積分?jǐn)?shù)為93%的酒精溶液，至終濃度為72%，于3℃、42轉(zhuǎn)/分鐘震蕩24小時(shí)，4000~5000轉(zhuǎn)/分鐘離心10~12分鐘，取沉淀，冷凍干燥至含水量7~9%，得米糠多糖；（6）包裝：真空包裝，輻射滅菌，得成品。所述步驟（1）的復(fù)合酶，添加量為脫脂米糠重量的0.13%，由以下重量份的酶制劑組成：纖維素酶15、脂肪酶12、半纖維素酶8、淀粉酶8。所述步驟（1）的蛋白酶，為菠蘿蛋白酶，添加量為脫脂米糠重量的0.08%。所述步驟（4）的酸性蒸餾水，為醋酸水溶液，ph為4.2~4.6。所述米糠多糖的提取方法，得到的米糠多糖。實(shí)施例3一種米糠多糖的提取方法，包括以下步驟：（1）酶解：將新鮮全脂米糠粉碎至80目，加入脫脂米糠重量20倍量的蒸餾水，攪拌均勻，加入復(fù)合酶，于42℃酶解4小時(shí)，破壞米糠的組織結(jié)構(gòu)，促進(jìn)米糠多糖釋放，提高得率，再加入蛋白酶，于53℃酶解3小時(shí)，過濾，分解復(fù)合酶，提高米糠多糖的純度，破壞過氧化物酶的活性，抑制米糠氧化，保留多糖的生物活性，得一次濾液和一次濾渣；（2）一次提?。合蛞淮螢V渣中加入一次濾渣重量30倍量的蒸餾水，加熱至溫度為60~70℃，保溫40~50分鐘，促進(jìn)水溶性中性多糖釋放，自然降溫，過濾，得二次濾液和二次濾渣；（3）二次提?。合蚨螢V渣中加入二次濾渣重量60倍量的酸性蒸餾水，常溫浸泡3~4小時(shí)，促進(jìn)水溶性酸性多糖釋放，過濾，得三次濾液和三次濾渣；（4）一次純化：將一次濾液、二次濾液和三次濾液合并，真空濃縮至體積為原來的1/3，置于冰箱中冷凍20~24小時(shí)，取出后自然解凍，5000~6000轉(zhuǎn)/分鐘離心10~15分鐘，除沉淀，促進(jìn)不穩(wěn)定的金屬離子進(jìn)行沉淀，提高多糖純度和貯藏穩(wěn)定性，將濾液冷凍干燥至含水量為12~14%，得米糠粗多糖；（5）二次純化：向米糠粗多糖中加入米糠粗多糖重量10倍量的蒸餾水，攪拌至混合均勻，逐漸加入體積分?jǐn)?shù)為94%的酒精溶液，至終濃度為73%，于4℃、43轉(zhuǎn)/分鐘震蕩26小時(shí)，4000~5000轉(zhuǎn)/分鐘離心10~12分鐘，取沉淀，冷凍干燥至含水量7~9%，得米糠多糖；（6）包裝：真空包裝，輻射滅菌，得成品。所述步驟（1）的復(fù)合酶，添加量為脫脂米糠重量的0.14%，由以下重量份的酶制劑組成：纖維素酶16、脂肪酶13、半纖維素酶9、淀粉酶9。所述步驟（1）的蛋白酶，為菠蘿蛋白酶，添加量為脫脂米糠重量的0.09%。所述步驟（4）的酸性蒸餾水，為醋酸水溶液，ph為4.2~4.6。所述米糠多糖的提取方法，得到的米糠多糖。對(duì)比例1去除步驟（1）中的復(fù)合酶，其余方法，同實(shí)施例1。對(duì)比例2去除步驟（1）中的蛋白酶，其余方法，同實(shí)施例1。對(duì)比例3去除步驟（2），其余方法，同實(shí)施例1。對(duì)比例4去除步驟（3），其余方法，同實(shí)施例1。對(duì)比例5去除步驟（4），其余方法，同實(shí)施例1。對(duì)比例6去除步驟（5），其余方法，同實(shí)施例1。對(duì)比例7現(xiàn)有文獻(xiàn)“米糠多糖和大豆多糖的結(jié)構(gòu)特征及免疫調(diào)節(jié)活性比較，易陽”中的米糠多糖的提取方法。實(shí)施例和對(duì)比例米糠多糖提取方法的提取效果：分別取新鮮全脂米糠和脫脂米糠適量，分別按照實(shí)施例和對(duì)比例的方法提取米糠多糖，并按照“米糠多糖和大豆多糖的結(jié)構(gòu)特征及免疫調(diào)節(jié)活性比較，易陽”中的檢測(cè)多糖的得率和純度，純度（%）=多糖質(zhì)量/提取物總質(zhì)量×100%，實(shí)施例和對(duì)比例米糠多糖提取方法的提取效果見表1。表1：實(shí)施例和對(duì)比例米糠多糖提取方法的提取效果項(xiàng)目得率/（%）純度/（%）實(shí)施例16.9672.5實(shí)施例26.7873.2實(shí)施例36.8572.7對(duì)比例13.1376.3對(duì)比例23.3463.4對(duì)比例35.5167.2對(duì)比例43.5761.6對(duì)比例54.6264.7對(duì)比例65.6867.5對(duì)比例71.3351.8從表1的結(jié)果表明，實(shí)施例的米糠多糖的提取方法，得率和純度明顯較對(duì)比例高，說明本發(fā)明提供的米糠多糖的提取方法具有很好的提取。當(dāng)前第1頁12