本發(fā)明屬于煙草加工技術(shù)領(lǐng)域。更具體地，本發(fā)明涉及一種Amadori化合物合成法。
背景技術(shù)：
隨著對吸煙與健康問題認識不斷地深入，人們要求卷煙產(chǎn)品具有高吸食品質(zhì)，高吸食安全性。目前研究表明，卷煙對人體危害主要成分來自焦油，因此，提高吸煙安全性主要集中于減少焦油量?，F(xiàn)在降焦手段例如有濾嘴、高透氣度卷煙紙、煙草薄片、摻用膨脹煙絲和膨脹梗絲等，但這些技術(shù)仍存在一些技術(shù)缺陷，例如像損失香氣量、降低抽吸品質(zhì)、市場接受率低，于是制約煙草行業(yè)發(fā)展。為此，研制低焦油卷煙產(chǎn)品，使用香味前體物質(zhì)進行香味補償，改善抽吸品質(zhì)。其中Amadori化合物在自然條件下?lián)]發(fā)性弱，化學性質(zhì)穩(wěn)定，它本身沒有香味，而在煙草燃燒時能夠轉(zhuǎn)化產(chǎn)生吡嗪類致香物質(zhì)，這對卷煙的香氣風格和口味特征有重要的作用。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
[要解決的技術(shù)問題]
本發(fā)明的目的是提供一種Amadori化合物合成法。
[技術(shù)方案]
本發(fā)明是通過下述技術(shù)方案實現(xiàn)的。
本發(fā)明涉及一種Amadori化合物合成法。
該合成方法的步驟如下：
A、在室溫條件下，按照D-果糖與丙酮的重量比1：12～18，將D-果糖溶于丙酮中，得到一種D-果糖丙酮溶液；再按照D-果糖與濃硫酸的重量比1：1～2，往D-果糖丙酮溶液中滴加濃硫酸，攪拌1.2～1.8h，得到雙丙叉基果糖溶液；然后
所述的雙丙叉基果糖溶液用氫氧化鈉水溶液中和至pH7～8，接著在溫度20～40℃與壓力0.01～0.1MPa的條件下減壓濃縮回收丙酮；回收丙酮后得到的殘液用乙酸乙酯萃取，其中殘液與乙酸乙酯體積比為1：1～3；然后往乙酸乙酯有機相中加入無水硫酸鈉脫水，過濾，旋蒸回收溶劑，得到淺黃色固體產(chǎn)物；
B、在冰浴條件下，步驟A得到的淺黃色固體產(chǎn)物用吡啶溶劑溶解，其中固體產(chǎn)物與吡啶的重量比為1：10～15，再按照固體產(chǎn)物與三氟甲磺酸酐的重量比1：3～5往吡啶溶液中滴加三氟甲磺酸酐，接著在溫度-30～-10℃下反應25～35min，再加入0.8～1.2mol/L鹽酸水溶液中和至pH6～7；該中和溶液用乙酸乙酯萃取2～4次，每次中和溶液與乙酸乙酯的體積為1：1～3，合并的乙酸乙酯萃取液用無水硫酸鈉脫水，過濾，旋蒸回收溶劑，殘留物再通過硅膠柱純化，用石油醚與乙酸乙酯按照體積比8～12：1混合的混合物洗脫，收集Amadori化合物目標物餾分，減壓回收溶劑，得到殘留固體產(chǎn)物；
C、把氨基酸芐酯鹽加到燒瓶中，在冰浴中滴加濃度為以重量計5～10％的氨甲醇溶液，攪拌12～18min，靜置12～18min，再在溫度5～15℃與壓力0.01～0.1MPa的條件下減壓濃縮回收溶劑，得到活化氨基酸芐酯鹽；
D、按照氨基酸芐酯鹽與DMF溶劑的重量比1：1.5～2.5，將步驟D得到的氨基酸芐酯鹽溶于DMF溶劑中，接著加入步驟B得到的殘留固體產(chǎn)物，混合均勻，在油浴中在溫度70℃下進行反應1.0～2.5h，加入80～120ml去離子水淬滅反應，按照淬滅反應液與乙酸乙酯的體積1：0.5～1.0，淬滅反應液用乙酸乙酯萃取2～4次，分離的乙酸乙酯有機相用水洗滌，然后用飽和氯化鈉水溶液洗滌，接著用無水硫酸鈉脫水、過濾、回收溶劑，得到的粗品再通過硅膠柱純化，用石油醚與乙酸乙酯混合物洗脫，其中石油醚與乙酸乙酯的體積比為1.5～2.5：1，收集目標物餾分，回收溶劑，得到目標物；
E、將步驟D得到的目標物溶于80～120mL四氫呋喃中，再加入以目標物重量計7～9％鈀碳催化劑，在溫度50～60℃的條件下進行加氫反應7～9h，讓反應溶液通過硅藻土過濾，得到的濾液進行減壓濃縮，得到一種濃縮物；
F、將步驟E得到的濃縮物溶于80～120mL濃度為以重量計8～12％的三氟乙酸水溶液中，置于油浴中在溫度56～64℃下反應1～2h，接著分多次向該反應液中添加無水乙醇，使反應液與無水乙醇的重量比達到1：1～2，再減壓濃縮，得到的濃縮物通過C18反相色譜柱純化，先以純水洗脫，然后用濃度為以重量計50～70％甲醇水溶液洗脫，收集第一段餾分作為目標物，它經(jīng)過冷凍干燥，得到所述的Amadori化合物。
根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選實施方式，在步驟A中，所述氫氧化鈉水溶液的濃度是1～4N。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟A中，在回收丙酮后得到的殘液使用乙酸乙酯以同樣的方式萃取2～4次。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟B中，以干法上柱在常溫條件下進行硅膠柱純化。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟B中，在壓力0.01～0.1MPa的條件下減壓回收由石油醚與乙酸乙酯組成的溶劑。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟C中，氨基酸芐酯鹽是脯氨酸芐酯鹽、丙氨酸芐酯鹽或甘氨酸芐酯鹽。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟D中，乙酸乙酯有機相按照有機相與水的體積比1：1～2用水洗滌1～3次，然后按照有機相與飽和氯化鈉水溶液的體積比1：1.0～1.5用飽和氯化鈉水溶液洗滌1～3次。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟D中，得到的粗品以干法上柱在常溫條件下通過硅膠柱進行純化。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟D中，采用減壓濃縮方法是在溫度40～60℃與壓力0.01～0.1MPa的條件下進行回收溶劑。
根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟E和步驟F中，采用減壓濃縮方法在溫度50～75℃與壓力0.01～0.1MPa的條件下進行減壓濃縮。
下面將更詳細地描述本發(fā)明。
本發(fā)明涉及一種Amadori化合物合成法。
該合成方法的步驟如下：
A、在室溫條件下，按照D-果糖與丙酮的重量比1：12～18，將D-果糖溶于丙酮中，得到一種D-果糖丙酮溶液；再按照D-果糖與濃硫酸的重量比1：1～2，往D-果糖丙酮溶液中滴加濃硫酸，攪拌1.2～1.8h，得到雙丙叉基果糖溶液；
根據(jù)文獻R.F.Brady,Carbohydr.Res.15,35(1970)知道，D-果糖與丙酮(濃硫酸催化)反應得到雙丙叉基果糖。
在本發(fā)明中，如果D-果糖與濃硫酸的重量比大于1：1，則雙丙叉基果糖不完全催化生成；如果D-果糖與濃硫酸的重量比小于1：2，則果糖可能被過分脫水；因此，D-果糖與濃硫酸的重量比為1：1～2是恰當?shù)模瑑?yōu)選地是1：1.2～1.8，更優(yōu)選地是1：1.4～1.6；
所述的雙丙叉基果糖溶液用氫氧化鈉水溶液中和至pH7～8，接著在溫度20～40℃與壓力0.01～0.1MPa的條件下減壓濃縮回收丙酮；回收丙酮后得到的殘液用乙酸乙酯萃取，其中殘液與乙酸乙酯體積比為1：1～3；然后往乙酸乙酯有機相中加入無水硫酸鈉脫水，過濾，旋蒸回收溶劑，得到淺黃色固體產(chǎn)物；
優(yōu)選地，所述氫氧化鈉水溶液的濃度是1～4N。
在這個步驟中，在回收丙酮后得到的殘液在室溫下使用乙酸乙酯萃取，并且以同樣的方式萃取2～4次，這是因為中間產(chǎn)物易溶于有機相，故采用中等極性的有機溶劑將產(chǎn)物從水相中萃取出來。
在本發(fā)明中，乙酸乙酯有機相用無水硫酸鈉脫水是本技術(shù)領(lǐng)域里的一種常規(guī)操作方法。
本發(fā)明涉及的過濾是在本技術(shù)領(lǐng)域里的一種通常分離方法，使用的設(shè)備也是本技術(shù)領(lǐng)域里的常規(guī)設(shè)備。
本發(fā)明涉及的旋蒸回收溶劑是使用本技術(shù)領(lǐng)域里常見旋蒸設(shè)備在常規(guī)條件下進行回收溶劑。
因此，下面涉及有關(guān)無水硫酸鈉脫水、過濾、旋蒸回收溶劑等技術(shù)內(nèi)容時不再贅述。
B、在冰浴條件下，步驟A得到的淺黃色固體產(chǎn)物用吡啶溶劑溶解，其中固體產(chǎn)物與吡啶的重量比為1：10～15，再按照固體產(chǎn)物與三氟甲磺酸酐的重量比1：3～5往吡啶溶液中滴加三氟甲磺酸酐，接著在溫度-30～-10℃下反應25～35min，再加入0.8～1.2mol/L鹽酸水溶液中和至pH6～7；該中和溶液用乙酸乙酯萃取2～4次，每次中和溶液與乙酸乙酯的體積為1：1～3，合并的乙酸乙酯萃取液用無水硫酸鈉脫水，過濾，旋蒸回收溶劑，殘留物再通過硅膠柱純化，用石油醚與乙酸乙酯按照體積比8～12：1混合的混合物洗脫，收集Amadori化合物目標物餾分，減壓回收溶劑，得到殘留固體產(chǎn)物；
在本發(fā)明中，淺黃色固體產(chǎn)物與三氟甲磺酸酐進行取代反應。
優(yōu)選地，在這個步驟中使用的硅膠柱是本技術(shù)領(lǐng)域里通常使用的硅膠柱，硅膠柱預處理及其使用方法都是本本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員熟知的。具體地，以干法上柱在常溫條件下進行硅膠柱純化。
在這個步驟中，收集的Amadori化合物目標物餾分在壓力0.01～0.1MPa的條件下減壓回收由石油醚與乙酸乙酯組成的溶劑。
C、把氨基酸芐酯鹽加到燒瓶中，在冰浴中滴加濃度為以重量計5～10％的氨甲醇溶液，攪拌12～18min，靜置12～18min，再在溫度5～15℃與壓力0.01～0.1MPa的條件下減壓濃縮回收溶劑，得到活化氨基酸芐酯鹽；
在本發(fā)明中，氨基酸芐酯鹽進行活化的目的在于采用氨-甲醇試劑中和脫去氨基酸芐酯鹽中的鹽酸鹽。
所述的氨基酸芐酯鹽是脯氨酸芐酯鹽、丙氨酸芐酯鹽或甘氨酸芐酯鹽。本發(fā)明使用的氨基酸芐酯鹽都是目前市場上銷售的產(chǎn)品，例如由Sigma-Aldarich.公司以商品名L-脯氨酸芐酯鹽酸鹽銷售的脯氨酸芐酯鹽、由Sigma-Aldarich.公司以商品名L-丙氨酸芐酯鹽酸鹽銷售的丙氨酸芐酯鹽、由Sigma-Aldarich.公司以商品名L-甘氨酸芐酯鹽酸鹽銷售的甘氨酸芐酯鹽。
D、按照氨基酸芐酯鹽與DMF溶劑的重量比1：1.5～2.5，將步驟D得到的氨基酸芐酯鹽溶于DMF溶劑中，接著加入步驟B得到的殘留固體產(chǎn)物，混合均勻，在油浴中在溫度70℃下進行反應1.0～2.5h，加入80～120ml去離子水淬滅反應，按照淬滅反應液與乙酸乙酯的體積1：0.5～1.0，淬滅反應液用乙酸乙酯萃取2～4次，分離的乙酸乙酯有機相用水洗滌，然后用飽和氯化鈉水溶液洗滌，接著用無水硫酸鈉脫水、過濾、回收溶劑，得到的粗品再通過硅膠柱純化，用石油醚與乙酸乙酯混合物洗脫，其中石油醚與乙酸乙酯的體積比為1.5～2.5：1，收集目標物餾分，回收溶劑，得到目標物；
氨基酸芐酯鹽與步驟B得到的殘留固體產(chǎn)物的反應是氨基酸的芐酯鹽取代步驟B產(chǎn)物中三氟甲磺酸酐基團。
在這個步驟中，乙酸乙酯有機相按照有機相與水的體積比1：1～2用水洗滌1～3次，然后按照有機相與飽和氯化鈉水溶液的體積比1：1.0～1.5用飽和氯化鈉水溶液洗滌1～3次。
在這個步驟中，得到的粗品以干法上柱在常溫條件下通過硅膠柱進行純化。
在這個步驟中，采用減壓濃縮方法是在溫度40～60℃與壓力0.01～0.1MPa的條件下進行回收溶劑。
E、將步驟D得到的目標物溶于80～120mL四氫呋喃中，再加入以目標物重量計7～9％鈀碳催化劑，在溫度50～60℃的條件下進行加氫反應7～9h，讓反應溶液通過硅藻土過濾，得到的濾液進行減壓濃縮，得到一種濃縮物；
本發(fā)明使用的鈀碳催化劑是目前市場上銷售的產(chǎn)品，例如由Sigma-Aldarich公司以商品名Palladium銷售的鈀碳催化劑。
所述的加氫反應是在高壓反應釜中，通入2-3個大氣壓的氫氣后，攪拌反應。
F、將步驟E得到的濃縮物溶于80～120mL濃度為以重量計8～12％的三氟乙酸水溶液中，置于油浴中在溫度56～64℃下反應1～2h，接著分多次向該反應液中添加無水乙醇，使反應液與無水乙醇的重量比達到1：1～2，再減壓濃縮，得到的濃縮物通過C18反相色譜柱純化，先以純水洗脫，然后用濃度為以重量計50～70％甲醇水溶液洗脫，收集第一段餾分作為目標物，它經(jīng)過冷凍干燥，得到所述的Amadori化合物。
本發(fā)明使用的C18反相色譜柱是目前市場上銷售的產(chǎn)品，例如由默克公司以商品名TLC Silica gel 60RP-18F254S銷售的產(chǎn)品。
在步驟E和步驟F中，采用減壓濃縮方法在溫度50～75℃與壓力0.01～0.1MPa的條件下進行減壓濃縮。
在本發(fā)明中，冷凍干燥是使用目前市場上銷售的冷凍干燥箱在其說明書描述的溫度條件下按照其說明的操作方式進行的。
在這個步驟中，采用薄層層析分析方法在展開劑(甲醇：水體積比＝1:1),稀硫酸顯色條件下分析確定，第一段餾分目標物經(jīng)過冷凍干燥所得到的產(chǎn)物為Amadori化合物，具體地是1-脫氧-1-L-甘氨酸-D-果糖、1-脫氧-1-L-脯氨酸-D-果糖、1-脫氧-1-L-丙氨酸-D-果糖等Amadori化合物。
[有益效果]
本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明Amadori化合物制備方法步驟簡單、條件溫和，不排放任何污染物或有毒廢物，有利于環(huán)境保護，該制備方法收率高達90％以上，產(chǎn)物純度達到98％以上。
【具體實施方式】
通過下述實施例將能夠更好地理解本發(fā)明。
實施例1：本發(fā)明Amadori化合物合成
該實施例的實施步驟如下：
A、在室溫條件下，按照D-果糖與丙酮的重量比1：16，將D-果糖溶于丙酮中，得到一種D-果糖丙酮溶液；再按照D-果糖與濃硫酸的重量比1：1.4，往D-果糖丙酮溶液中滴加濃硫酸，攪拌1.4h，得到雙丙叉基果糖溶液；然后
所述的雙丙叉基果糖溶液用濃度1N氫氧化鈉水溶液中和至pH7.2，接著在溫度20℃與壓力0.1MPa的條件下減壓濃縮回收丙酮；回收丙酮后得到的殘液用乙酸乙酯萃取，其中殘液與乙酸乙酯體積比為1：1；乙酸乙酯有機相用水洗滌3次，每次乙酸乙酯與水的體積比為1：2，然后往乙酸乙酯有機相中加入無水硫酸鈉脫水，過濾，旋蒸回收溶劑，得到淺黃色固體產(chǎn)物；
B、在冰浴條件下，步驟A得到的淺黃色固體產(chǎn)物用吡啶溶劑溶解，其中固體產(chǎn)物與吡啶的重量比為1：14，再按照固體產(chǎn)物與三氟甲磺酸酐的重量比1：3往吡啶溶液中滴加三氟甲磺酸酐，接著在溫度-30℃下反應25min，再加入0.8mol/L鹽酸水溶液中和至pH6.4；該中和溶液用乙酸乙酯萃取3次，每次中和溶液與乙酸乙酯的體積為1：1，合并的乙酸乙酯萃取液用無水硫酸鈉脫水，過濾，旋蒸回收溶劑，殘留物再以干法上柱在常溫條件下進行硅膠柱純化，用石油醚與乙酸乙酯按照體積比8：1混合的混合物洗脫，收集Amadori化合物目標物餾分，在壓力0.01MPa的條件下減壓回收由石油醚與乙酸乙酯組成的溶劑，得到殘留固體產(chǎn)物；
C、把脯氨酸芐酯鹽加到燒瓶中，在冰浴中滴加濃度為以重量計7％的氨甲醇溶液，攪拌16min，靜置12min，再在溫度12℃與壓力0.01MPa的條件下減壓濃縮回收溶劑，得到活化氨基酸芐酯鹽；
D、按照氨基酸芐酯鹽與DMF溶劑的重量比1：2.2，將步驟D得到的氨基酸芐酯鹽溶于DMF溶劑中，接著加入步驟B得到的殘留固體產(chǎn)物，混合均勻，在油浴中在溫度70℃下進行反應1.0h，加入80ml去離子水淬滅反應，按照淬滅反應液與乙酸乙酯的體積1：0.5，淬滅反應液用乙酸乙酯萃取3次，分離的乙酸乙酯有機相用按照有機相與水的體積比1：1用水洗滌1次，然后按照有機相與飽和氯化鈉水溶液的體積比1：1.0用飽和氯化鈉水溶液洗滌2次，接著用無水硫酸鈉脫水、過濾、回收溶劑，得到的粗品再以干法上柱在常溫條件下通過硅膠柱進行純化，用石油醚與乙酸乙酯混合物洗脫，其中石油醚與乙酸乙酯的體積比為1.5：1，收集目標物餾分，采用減壓濃縮方法是在溫度40℃與壓力0.08MPa的條件下進行回收溶劑，得到目標物；
E、將步驟D得到的目標物溶于80mL四氫呋喃中，再加入以目標物重量計7％鈀碳催化劑，在溫度50℃的條件下進行加氫反應9h，讓反應溶液通過硅藻土過濾，得到的濾液采用減壓濃縮方法在溫度58℃與壓力0.01MPa的條件下進行減壓濃縮，得到一種濃縮物；
F、將步驟E得到的濃縮物溶于94mL濃度為以重量計8％的三氟乙酸水溶液中，置于油浴中在溫度56℃下反應1.0h，接著分多次向該反應液中添加無水乙醇，使反應液與無水乙醇的重量比達到1：1，再采用減壓濃縮方法在溫度50℃與壓力0.01MPa的條件下進行減壓濃縮，得到的濃縮物通過C18反相色譜柱純化，先以純水洗脫，然后用濃度為以重量計50％甲醇水溶液洗脫，收集第一段餾分作為目標物，它經(jīng)過冷凍干燥，得到所述的Amadori化合物。
采用本說明書描述的分析方法確定，第一段餾分目標物經(jīng)過冷凍干燥所得到的產(chǎn)物為1-脫氧-1-L-甘氨酸-D-果糖Amadori化合物。
該實施例制備Amadori化合物的收率92％，產(chǎn)物純度98.6％。
實施例2：本發(fā)明Amadori化合物合成
該實施例的實施步驟如下：
A、在室溫條件下，按照D-果糖與丙酮的重量比1：12，將D-果糖溶于丙酮中，得到一種D-果糖丙酮溶液；再按照D-果糖與濃硫酸的重量比1：1.0，往D-果糖丙酮溶液中滴加濃硫酸，攪拌1.2h，得到雙丙叉基果糖溶液；然后
所述的雙丙叉基果糖溶液用濃度4N氫氧化鈉水溶液中和至pH7.8，接著在溫度26℃與壓力0.06MPa的條件下減壓濃縮回收丙酮；回收丙酮后得到的殘液用乙酸乙酯萃取，其中殘液與乙酸乙酯體積比為1：2；乙酸乙酯有機相用水洗滌2次，每次乙酸乙酯與水的體積比為1：1，然后往乙酸乙酯有機相中加入無水硫酸鈉脫水，過濾，旋蒸回收溶劑，得到淺黃色固體產(chǎn)物；
B、在冰浴條件下，步驟A得到的淺黃色固體產(chǎn)物用吡啶溶劑溶解，其中固體產(chǎn)物與吡啶的重量比為1：10，再按照固體產(chǎn)物與三氟甲磺酸酐的重量比1：5往吡啶溶液中滴加三氟甲磺酸酐，接著在溫度-22℃下反應30min，再加入1.0mol/L鹽酸水溶液中和至pH6.0；該中和溶液用乙酸乙酯萃取2次，每次中和溶液與乙酸乙酯的體積為1：2，合并的乙酸乙酯萃取液用無水硫酸鈉脫水，過濾，旋蒸回收溶劑，殘留物再以干法上柱在常溫條件下進行硅膠柱純化，用石油醚與乙酸乙酯按照體積比10：1混合的混合物洗脫，收集Amadori化合物目標物餾分，在壓力0.04MPa的條件下減壓回收由石油醚與乙酸乙酯組成的溶劑，得到殘留固體產(chǎn)物；
C、把丙氨酸芐酯鹽加到燒瓶中，在冰浴中滴加濃度為以重量計5％的氨甲醇溶液，攪拌12min，靜置18min，再在溫度5℃與壓力0.1MPa的條件下減壓濃縮回收溶劑，得到活化氨基酸芐酯鹽；
D、按照氨基酸芐酯鹽與DMF溶劑的重量比1：1.5，將步驟D得到的氨基酸芐酯鹽溶于DMF溶劑中，接著加入步驟B得到的殘留固體產(chǎn)物，混合均勻，在油浴中在溫度70℃下進行反應2.5h，加入100ml去離子水淬滅反應，按照淬滅反應液與乙酸乙酯的體積1：0.6，淬滅反應液用乙酸乙酯萃取2次，分離的乙酸乙酯有機相用按照有機相與水的體積比1：2用水洗滌3次，然后按照有機相與飽和氯化鈉水溶液的體積比1：1.5用飽和氯化鈉水溶液洗滌1次，接著用無水硫酸鈉脫水、過濾、回收溶劑，得到的粗品再以干法上柱在常溫條件下通過硅膠柱進行純化，用石油醚與乙酸乙酯混合物洗脫，其中石油醚與乙酸乙酯的體積比為2.5：1，收集目標物餾分，采用減壓濃縮方法是在溫度60℃與壓力0.03MPa的條件下進行回收溶劑，得到目標物；
E、將步驟D得到的目標物溶于95mL四氫呋喃中，再加入以目標物重量計8％鈀碳催化劑，在溫度52℃的條件下進行加氫反應8.2h，讓反應溶液通過硅藻土過濾，得到的濾液采用減壓濃縮方法在溫度50℃與壓力0.02MPa的條件下進行減壓濃縮，得到一種濃縮物；
F、將步驟E得到的濃縮物溶于80mL濃度為以重量計10％的三氟乙酸水溶液中，置于油浴中在溫度58℃下反應2.0h，接著分多次向該反應液中添加無水乙醇，使反應液與無水乙醇的重量比達到1：2，再采用減壓濃縮方法在溫度60℃與壓力0.1MPa的條件下進行減壓濃縮，得到的濃縮物通過C18反相色譜柱純化，先以純水洗脫，然后用濃度為以重量計60％甲醇水溶液洗脫，收集第一段餾分作為目標物，它經(jīng)過冷凍干燥，得到所述的Amadori化合物。
采用本說明書描述的分析方法確定，第一段餾分目標物經(jīng)過冷凍干燥所得到的產(chǎn)物為1-脫氧-1-L-脯氨酸-D-果糖Amadori化合物。
該實施例制備Amadori化合物的收率93.2％，產(chǎn)物純度98.4％。
實施例3：本發(fā)明Amadori化合物合成
該實施例的實施步驟如下：
A、在室溫條件下，按照D-果糖與丙酮的重量比1：18，將D-果糖溶于丙酮中，得到一種D-果糖丙酮溶液；再按照D-果糖與濃硫酸的重量比1：2.0，往D-果糖丙酮溶液中滴加濃硫酸，攪拌1.6h，得到雙丙叉基果糖溶液；然后
所述的雙丙叉基果糖溶液用濃度2N氫氧化鈉水溶液中和至pH 8.0，接著在溫度34℃與壓力0.04MPa的條件下減壓濃縮回收丙酮；回收丙酮后得到的殘液用乙酸乙酯萃取，其中殘液與乙酸乙酯體積比為1：3；乙酸乙酯有機相用水洗滌4次，每次乙酸乙酯與水的體積比為1：2，然后往乙酸乙酯有機相中加入無水硫酸鈉脫水，過濾，旋蒸回收溶劑，得到淺黃色固體產(chǎn)物；
B、在冰浴條件下，步驟A得到的淺黃色固體產(chǎn)物用吡啶溶劑溶解，其中固體產(chǎn)物與吡啶的重量比為1：15，再按照固體產(chǎn)物與三氟甲磺酸酐的重量比1：4往吡啶溶液中滴加三氟甲磺酸酐，接著在溫度-16℃下反應35min，再加入1.2mol/L鹽酸水溶液中和至pH6.8；該中和溶液用乙酸乙酯萃取4次，每次中和溶液與乙酸乙酯的體積為1：3，合并的乙酸乙酯萃取液用無水硫酸鈉脫水，過濾，旋蒸回收溶劑，殘留物再以干法上柱在常溫條件下進行硅膠柱純化，用石油醚與乙酸乙酯按照體積比12：1混合的混合物洗脫，收集Amadori化合物目標物餾分，在壓力0.1MPa的條件下減壓回收由石油醚與乙酸乙酯組成的溶劑，得到殘留固體產(chǎn)物；
C、把甘氨酸芐酯鹽加到燒瓶中，在冰浴中滴加濃度為以重量計10％的氨甲醇溶液，攪拌14min，靜置14min，再在溫度15℃與壓力0.08MPa的條件下減壓濃縮回收溶劑，得到活化氨基酸芐酯鹽；
D、按照氨基酸芐酯鹽與DMF溶劑的重量比1：2.5，將步驟D得到的氨基酸芐酯鹽溶于DMF溶劑中，接著加入步驟B得到的殘留固體產(chǎn)物，混合均勻，在油浴中在溫度70℃下進行反應1.6h，加入100ml去離子水淬滅反應，按照淬滅反應液與乙酸乙酯的體積1：1.0，淬滅反應液用乙酸乙酯萃取4次，分離的乙酸乙酯有機相用按照有機相與水的體積比1：2用水洗滌2次，然后按照有機相與飽和氯化鈉水溶液的體積比1：1.2用飽和氯化鈉水溶液洗滌3次，接著用無水硫酸鈉脫水、過濾、回收溶劑，得到的粗品再以干法上柱在常溫條件下通過硅膠柱進行純化，用石油醚與乙酸乙酯混合物洗脫，其中石油醚與乙酸乙酯的體積比為1.8：1，收集目標物餾分，采用減壓濃縮方法是在溫度48℃與壓力0.01MPa的條件下進行回收溶劑，得到目標物；
E、將步驟D得到的目標物溶于120mL四氫呋喃中，再加入以目標物重量計9％鈀碳催化劑，在溫度56℃的條件下進行加氫反應7.6h，讓反應溶液通過硅藻土過濾，得到的濾液采用減壓濃縮方法在溫度66℃與壓力0.1MPa的條件下進行減壓濃縮，得到一種濃縮物；
F、將步驟E得到的濃縮物溶于120mL濃度為以重量計12％的三氟乙酸水溶液中，置于油浴中在溫度64℃下反應1.5h，接著分多次向該反應液中添加無水乙醇，使反應液與無水乙醇的重量比達到1：1，再采用減壓濃縮方法在溫度75℃與壓力0.04MPa的條件下進行減壓濃縮，得到的濃縮物通過C18反相色譜柱純化，先以純水洗脫，然后用濃度為以重量計70％甲醇水溶液洗脫，收集第一段餾分作為目標物，它經(jīng)過冷凍干燥，得到所述的Amadori化合物。
采用本說明書描述的分析方法確定，第一段餾分目標物經(jīng)過冷凍干燥所得到的產(chǎn)物為1-脫氧-1-L-丙氨酸-D-果糖Amadori化合物。
該實施例制備Amadori化合物的收率95.1％，產(chǎn)物純度99.2％。
實施例4：本發(fā)明Amadori化合物合成
該實施例的實施步驟如下：
A、在室溫條件下，按照D-果糖與丙酮的重量比1：14，將D-果糖溶于丙酮中，得到一種D-果糖丙酮溶液；再按照D-果糖與濃硫酸的重量比1：1.6，往D-果糖丙酮溶液中滴加濃硫酸，攪拌1.8h，得到雙丙叉基果糖溶液；然后
所述的雙丙叉基果糖溶液用濃度3N氫氧化鈉水溶液中和至pH 7.5，接著在溫度40℃與壓力0.01MPa的條件下減壓濃縮回收丙酮；回收丙酮后得到的殘液用乙酸乙酯萃取，其中殘液與乙酸乙酯體積比為1：2；乙酸乙酯有機相用水洗滌3次，每次乙酸乙酯與水的體積比為1：3，然后往乙酸乙酯有機相中加入無水硫酸鈉脫水，過濾，旋蒸回收溶劑，得到淺黃色固體產(chǎn)物；
B、在冰浴條件下，步驟A得到的淺黃色固體產(chǎn)物用吡啶溶劑溶解，其中固體產(chǎn)物與吡啶的重量比為1：12，再按照固體產(chǎn)物與三氟甲磺酸酐的重量比1：4往吡啶溶液中滴加三氟甲磺酸酐，接著在溫度-10℃下反應30min，再加入1.0mol/L鹽酸水溶液中和至pH7.0；該中和溶液用乙酸乙酯萃取3次，每次中和溶液與乙酸乙酯的體積為1：2，合并的乙酸乙酯萃取液用無水硫酸鈉脫水，過濾，旋蒸回收溶劑，殘留物再以干法上柱在常溫條件下進行硅膠柱純化，用石油醚與乙酸乙酯按照體積比10：1混合的混合物洗脫，收集Amadori化合物目標物餾分，在壓力0.08MPa的條件下減壓回收由石油醚與乙酸乙酯組成的溶劑，得到殘留固體產(chǎn)物；
C、把脯氨酸芐酯鹽加到燒瓶中，在冰浴中滴加濃度為以重量計75109％的氨甲醇溶液，攪拌18min，靜置16min，再在溫度8℃與壓力0.06MPa的條件下減壓濃縮回收溶劑，得到活化氨基酸芐酯鹽；
D、按照氨基酸芐酯鹽與DMF溶劑的重量比1：1.8，將步驟D得到的氨基酸芐酯鹽溶于DMF溶劑中，接著加入步驟B得到的殘留固體產(chǎn)物，混合均勻，在油浴中在溫度70℃下進行反應2.1h，加入120ml去離子水淬滅反應，按照淬滅反應液與乙酸乙酯的體積1：0.8，淬滅反應液用乙酸乙酯萃取3次，分離的乙酸乙酯有機相用按照有機相與水的體積比1：1用水洗滌2次，然后按照有機相與飽和氯化鈉水溶液的體積比1：1.4用飽和氯化鈉水溶液洗滌2次，接著用無水硫酸鈉脫水、過濾、回收溶劑，得到的粗品再以干法上柱在常溫條件下通過硅膠柱進行純化，用石油醚與乙酸乙酯混合物洗脫，其中石油醚與乙酸乙酯的體積比為2.4：1，收集目標物餾分，采用減壓濃縮方法是在溫度55℃與壓力0.1MPa的條件下進行回收溶劑，得到目標物；
E、將步驟D得到的目標物溶于110mL四氫呋喃中，再加入以目標物重量計8％鈀碳催化劑，在溫度60℃的條件下進行加氫反應7.0h，讓反應溶液通過硅藻土過濾，得到的濾液采用減壓濃縮方法在溫度75℃與壓力0.07MPa的條件下進行減壓濃縮，得到一種濃縮物；
F、將步驟E得到的濃縮物溶于108mL濃度為以重量計9％的三氟乙酸水溶液中，置于油浴中在溫度62℃下反應1.7h，接著分多次向該反應液中添加無水乙醇，使反應液與無水乙醇的重量比達到1：2，再采用減壓濃縮方法在溫度70℃與壓力0.06MPa的條件下進行減壓濃縮，得到的濃縮物通過C18反相色譜柱純化，先以純水洗脫，然后用濃度為以重量計60％甲醇水溶液洗脫，收集第一段餾分作為目標物，它經(jīng)過冷凍干燥，得到所述的Amadori化合物。
采用本說明書描述的分析方法確定，第一段餾分目標物經(jīng)過冷凍干燥所得到的產(chǎn)物為1-脫氧-1-L-脯氨酸-D-果糖Amadori化合物。
該實施例制備Amadori化合物的收率90.8％，產(chǎn)物純度98.6％。