本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及PI3K抑制劑及其制備方法與在制藥中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

癌癥是威脅人類健康的重大疾病之一，2008年衛(wèi)生部發(fā)布的第三次全國(guó)死因調(diào)查表明，癌癥已成為我國(guó)城市人口的首位死因。分子靶向抗癌藥物作為新型的抗腫瘤藥物，作用于腫瘤細(xì)胞的特定分子靶點(diǎn)，利用腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞在基因、酶、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等諸多方面的差異，選擇性抑制腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移等惡性生物行為，從而產(chǎn)生抗腫瘤作用，而對(duì)正常細(xì)胞的毒副作用較小。因此，分子靶向抗癌藥物很少產(chǎn)生像傳統(tǒng)化療所帶來的毒副作用。統(tǒng)計(jì)表明，2001年以來美國(guó)FDA批準(zhǔn)的抗腫瘤藥物中分子靶向藥物所占的比例已達(dá)50％以上，預(yù)計(jì)此比例將來還會(huì)更高。

PI3K(phosphatidylinositol 3-kinases,磷脂酰肌醇3-激酶)于1984年首次發(fā)現(xiàn)，存在于體內(nèi)各種細(xì)胞中，屬于在肌醇環(huán)的D3位置上使磷酸肌醇磷酸化的一類脂激酶大家族(Cantley,Science,2002,296(5573):1655-7)，主要催化磷脂酰肌醇4,5-二磷酸(PIP2)磷酸化形成磷脂酰肌醇3,4,5-三磷酸(PIP3)，繼而激活其下游的AKT(蛋白激酶B)(Toker A等，J Nature,1997,387(6634):673-676)等靶向物質(zhì)而啟動(dòng)一系列信號(hào)聯(lián)級(jí)反應(yīng)，在細(xì)胞的有絲分裂、細(xì)胞存活、分化、細(xì)胞骨架的構(gòu)型與重塑、血管生成、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)控以及囊胞的運(yùn)輸中起著重要的作用(Eisenreich A等，J Cardiovasc Ther,2011,29(1):29-36)。PI3K基因突變、擴(kuò)增在癌癥患者中頻繁發(fā)生(Samuels Y等，J Science，2004,304(5670)：554)提示PI3K與腫瘤的發(fā)生有密切關(guān)系(Yuan Y L等，J Oncogene，2008，27(41)：5479-5510)。

PI3K根據(jù)其結(jié)構(gòu)、調(diào)控以及基質(zhì)特異性分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三種類型(Hawkins PT等，J Biochem Soc Trans，2006,34(Pt5)：647-662)。Ⅰ類：由一個(gè)調(diào)節(jié)亞單位p85和一個(gè)催化亞單位p110組成，催化亞單位p110又有p110α、p110β、p110γ、p110δ四種亞型，所以Ⅰ型PI3K又可分為PI3Kα、PI3Kβ、PI3Kγ、PI3Kδ四種亞型(Kong D等，J Curr Med Chem，2009,16(22)：2839-2854；Kong D等，JCancer Sci，2008,99(9)：1734-1740)，其中p110α、p110β以及p110δ能與p85形成二聚體并且由生長(zhǎng)因子和細(xì)胞激素經(jīng)由酪氨酸激酶依賴性機(jī)制活化(Jimenez等，J Biol Chem.，2002,277(44)：41556-62)，但是，p110γ并不與p85結(jié)合，而是與兩個(gè)調(diào)控亞基(p101和p84)締合且其活化由G蛋白偶聯(lián)受體的活化驅(qū)動(dòng)(Brock等，J Cell Biol.，2003,160(1)：89-99)。Ⅱ類：與Ⅰ類有45-50％同源，也具有與Ⅰ類相似的氨基末端區(qū)域和同源的C2結(jié)構(gòu)域，可調(diào)節(jié)鈣/磷結(jié)合，包含三個(gè)成員，分別為PI3KC2α、PI3KC2β和PI3KC2γ，其功能主要與膜運(yùn)輸有關(guān)。Ⅲ類PI3K只由酵母菌蛋白中的Vps34基因編碼，參與胞吞作用和囊胞運(yùn)輸?shù)墓δ芤褟V為人知。由于到目前為止研究最多的是Ⅰ型PI3K，所以人們通常把Ⅰ型PI3K稱為PI3K。PI3Kα和PI3Kβ在各種器官中均有表達(dá)；而PI3Kγ和PI3Kδ主要分布在骨髓細(xì)胞和白細(xì)胞中(Vanhaesebroeck等，Trends Biochem Sci.，2005,30(4)：194-204)。

LY294002和渥曼青霉素是兩種經(jīng)典的PI3K抑制劑，它們雖然顯示了一定的體內(nèi)和體外抗腫瘤作用。但由于毒性、溶解性及穩(wěn)定性等原因，未能進(jìn)入臨床試驗(yàn)(Kong D等，J.Curr.Med.Chem.，2009,16(22)2839-2854)。2004年《Science》上關(guān)于PIK3CA基因變異在各種癌癥中被發(fā)現(xiàn)的報(bào)道(Samuels Y等，J.Science，2004,304(5670)：554)引起了廣大制藥工作者的極大興趣。隨著p110α和p85α的三維結(jié)構(gòu)的闡明(Miled N等，J Science，2007,317(5835)：239-242)，以及PI3K及其抑制劑共晶結(jié)構(gòu)在不同化合物中的證實(shí)(Knight ZA等，J Cell，2006,125(4)：733-747)，對(duì)于了解PI3K家族中不同種類的藥效和特異性具有重要作用，大大促進(jìn)了基于結(jié)構(gòu)的藥物設(shè)計(jì)方法的成型。此后，專一性更強(qiáng)的新型PI3K抑制劑不斷出現(xiàn)，在渥曼青霉素和LY294002的基礎(chǔ)上，研發(fā)出了新一代產(chǎn)品，包括半合成的綠菌素、渥曼青霉素衍生物PX-866、LY294002-精氨酸-甘氨酸-天門冬氨酸-絲氨酸結(jié)合型前藥SF1126。這些新藥較渥曼青霉素和LY294002更為穩(wěn)定，藥效更強(qiáng)，可有效對(duì)抗卵巢腫瘤、結(jié)腸瘤、肺癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、前列腺癌和乳腺癌(Garlich JR等，J Cancer Res，2008,68(1)：206-215)。代表性的化合物是Calistoga公司開發(fā)的一種PI3Kδ特異性抑制劑CAL-101(IC87114)(Kong D等，J Curr Med Chem，2009,16(22)：2839-2854)。研究表明CAL-101可抑制急性骨髓白血病細(xì)胞的增殖，同時(shí)并不影響正常造血細(xì)胞的增殖，顯示出良好的體內(nèi)外抗急性白血病效果(Kong D等，J Acta Pharmacolsin，2010,31(9)：1189-1197)，目前作為治療急性骨髓性白血病的藥物已進(jìn)入臨床試驗(yàn)Ⅱ期。

為了滿足抑制PI3K的需要，更多更加有效的PI3K抑制劑的研究正在持續(xù)的開展當(dāng)中，主要是針對(duì)加強(qiáng)或抑制免疫以及發(fā)炎路徑(如用于器官移植的免疫抑制劑)，用于預(yù)防以及治療自身免疫性疾病(例如多發(fā)性硬化癥、哮喘、第I型糖尿病、炎性腸病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、克羅恩氏病(Crohn’s disease)、腎炎、阿茲海默氏病(Alzheimer’s disease)、自身免疫性甲狀腺病癥)、以及涉及活性過度炎性反應(yīng)的疾病(如濕疹)、肺病、過敏、癌癥(如白血病、乳癌、 多發(fā)性骨髓瘤、前列腺癌、結(jié)腸癌、腦癌等)和其它治療劑引起的一些免疫反應(yīng)(如腹瀉或皮疹或接觸性皮炎)的藥劑。本文所述的化合物及其合成方法是針對(duì)這些需要以及其它需要。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種新的PI3K抑制劑化合物及其制備方法和在制藥中的應(yīng)用。

本發(fā)明提供一種新的PI3K抑制劑，為結(jié)構(gòu)通式Ⅰ所示的化合物，或其藥物上可接受的鹽；

其中，X，Y，A，B獨(dú)立地選自N或-CH-；

m＝0或1；

n＝0或1；

k＝0或1；

(優(yōu)選m、n、k不同時(shí)為0，如k＝0，n＝1，m＝0或1，等)

R₀獨(dú)立地選自R₃為苯基、取代苯基或C₁-C₄烷基；

R₁獨(dú)立地選自H、NH₂、CH₃、OCH₃或鹵素(如F、Cl、Br或I)等；R₂獨(dú)立地選自H、C₁-C₄烷基、(R₄為C₁-C₄烷基)、(R₅為C₁-C₄烷基)、(R₆為C₃-C₅環(huán)烷基)、(R₇、R₈、R₉各自分別獨(dú)立地為C₁-C₄烷基)、(R₁₀為C₁-C₄烷基)、苯基(Ph-)、芳香基(Ar-)。

優(yōu)選實(shí)施方案的描述

在一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的結(jié)構(gòu)通式Ⅰ所示的化合物，為式(Ⅱ)所示的化合物：

X選自N；Y選自-NH-；

R₀獨(dú)立地選自(R₃為苯基、取代苯基、C₁-C₄烷基)；

R₁獨(dú)立地選自H、NH₂、CH₃、OCH₃、鹵素(F、Cl、Br、I)等；

R₂獨(dú)立地選自H、C₁-C₄烷基、(R₄為C₁-C₄烷基)、(R₅為C₁-C₄烷基)、(R₆為C₃-C₅環(huán)烷基)、(R₇、R₈、R₉各自分別獨(dú)立地為C₁-C₄烷基)、(R₁₀為C₁-C₄烷基)、苯基(Ph-)、芳香基(Ar-)。

在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的結(jié)構(gòu)通式Ⅰ所示的化合物，為式(Ⅲ)所示的化合物：

X，Y，獨(dú)立地選自N或-CH-；

R₀獨(dú)立地選自(R₃為苯基、取代苯基、C₁-C₄烷基)；

R₁獨(dú)立地選自H、NH₂、CH₃、OCH₃、鹵素(F、Cl、Br、I)等；

R₂獨(dú)立地選自H、C₁-C₄烷基、(R₄為C₁-C₄烷基)、(R₅為C₁-C₄烷基)、(R₆為C₃-C₅環(huán)烷基)、(R₇、R₈、R₉各自分別獨(dú)立地為C₁-C₄烷基)、(R₁₀為C₁-C₄烷基)、苯基(Ph-)、芳香基(Ar-)。

優(yōu)選地，本發(fā)明提供的結(jié)構(gòu)通式Ⅰ所示的化合物，為式(Ⅳ)所示的化合物：

A，B獨(dú)立地選自N或-CH-；

R₀獨(dú)立地選自(R₃為苯基、取代苯基、C₁-C₄烷基)；

R₁獨(dú)立地選自H、NH₂、CH₃、OCH₃、鹵素(F、Cl、Br、I)等；

R₂獨(dú)立地選自H、C₁-C₄烷基、(R₄為C₁-C₄烷基)、(R₅為C₁-C₄烷基)、(R₆為C₃-C₅環(huán)烷基)、(R₇、R₈、R₉各自分別獨(dú)立地為C₁-C₄烷基)、(R₁₀為C₁-C₄烷基)、苯基(Ph-)、芳香基(Ar-)。

優(yōu)選地，R₀為苯磺酰基。

在R₁中，優(yōu)選地，鹵素為氯。

優(yōu)選地，A、B均為-CH-，R₂獨(dú)立地選自H、C₁-C₄烷基、苯基。

優(yōu)選地，A為-CH-，B為N，R₂為苯基。

最優(yōu)地，A為N，B為-CH-。

優(yōu)選地,R₁為Cl。

R₂為苯基、吡啶。

本發(fā)明還提供上述PI3K抑制劑的制備方法，其反應(yīng)路線如下：

其中，R₀，R₁，R₂，X，Y，m，n，k，A，B如上所述定義。具體步驟如下：

(1)把2-R₁-3-氨基-5-溴吡啶(記為SM-1)(0.8-1.2當(dāng)量)溶于二氯甲烷中，在有機(jī)堿(如吡啶)(1.0-3.0當(dāng)量)存在時(shí)，與烷基磺酰氯或芳基磺酰氯(SM-2)(0.9-1.6當(dāng)量)室溫反應(yīng)18-24h，原料反應(yīng)完全后經(jīng)洗滌，干燥，濃縮，二氯甲烷/石油醚重結(jié)晶，得到苯磺酰胺類中間體(記為Inter-1)；

(2)把Inter-1(0.8-1.2當(dāng)量)溶于有機(jī)溶劑(如1,4-二氧六環(huán)，乙二醇二甲醚，四氫呋喃等中的其中一種)，在有機(jī)鈀催化劑(如Pd(PPh₃)₄)(0.020-0.030當(dāng)量)催化下，與雙聯(lián)硼酸頻哪醇酯(E1)(0.9-1.8當(dāng)量)高溫反應(yīng)(回流)8-12h，反應(yīng)液墊硅膠過濾后濃縮，固體粗品用乙酸乙酯/石油醚重結(jié)晶，得到中間體(記為Inter-2)；

(3)把Inter-2(0.8-1.2當(dāng)量)與各種取代的鹵代物W(0.7-1.3當(dāng)量)在無機(jī)堿(如碳酸鉀)(1.8-3.2當(dāng)量)、催化劑(如Pd(PPh₃)₄)(0.020-0.030當(dāng)量)，共同作用下，加熱(70-100℃)反應(yīng)5-8h，反應(yīng)液經(jīng)過濾，濃縮后直接柱層析，得到最終活性目標(biāo)化合物。

特別地，對(duì)于各種取代的鹵代物W，當(dāng)n＝1，K＝0，A為N，Y為NH時(shí)，此類化合物記為W1(如下式所示)，具體做法如下表示：

其中，R₀，R₁，R₂，X，m，B如上述所述定義，具體表述為：

(1)把W1(如上述路線所示)(0.8-1.2當(dāng)量)與2-(三甲基硅烷基)乙氧甲基氯(1.0-2.1當(dāng)量)溶于DMF中，分批加入NaH(1.0-3.0當(dāng)量)，在冰水浴條件下攪拌5-17分鐘后室溫?cái)嚢?.5-1.5h，洗滌，分液，濃縮得到中間體W2；

(2)把W2(如上述路線所示)(0.8-1.2當(dāng)量)與Inter-2(0.7-1.3當(dāng)量)反應(yīng)同前，得到中間體W3(如上述路線所示)。

(3)將中間體W3加入EtOH/2N HCl溶液中，加熱(70-100℃)，攪拌8-12h，冷卻至室溫，真空濃縮，粗產(chǎn)物用二氯甲烷重結(jié)晶，過濾，濾餅用甲醇潤(rùn)洗，過濾、固體真空干燥后得到最終活性目標(biāo)化合物。

本發(fā)明提供PI3K抑制劑，可以是下列具體化合物：

N-[2-氯-5-(喹啉-3-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物1)；

N-[2-氯-5-(喹啉-3-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物2)；

N-{2-氯-5-[1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物3)；

N-{2-氯-5-[2-甲基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物4)；

N-{2-氯-5-[2-乙基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物5)；

N-{2-氯-5-[2-苯基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物6)；

N-{2-氯-5-[3-苯基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物7)；

N-{2-氯-5-[3-吡啶基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物8)；

N-{2-氯-5-[3-吡啶基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}-2-氟苯磺酰胺(化合物9)；

N-{2-氯-5-[3-吡啶基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}-4-氟苯磺酰胺(化合物10)；

N-{2-氯-5-[3-吡啶基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}甲磺酰胺(化合物11)；

N-[2-氯-5-(吡啶-3-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物12)；

N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)-2-氯吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物13)；

N-{6’-氯-5’-(苯磺酰胺)-[3,3’-二吡啶]-6-基}乙酰胺(化合物14)；

N-{6’-氯-6’-(乙基氨)-[3,3’-二吡啶]-5-基}苯磺酰胺(化合物15)；

N-{6’-氯-5’-(苯磺酰胺)-[3,3’-二吡啶]-6-基}環(huán)丙基甲酰胺(化合物16)；

N-{6-氯-6’-(甲基磺酰胺)-[3,3’-二吡啶]-5-基}苯磺酰胺(化合物17)；

N-{6-氯-6’-(3,3-二甲基脲)[3,3’-二吡啶]-5-基}苯磺酰胺(化合物18)；

N-{2-氯-5-[1H-吡唑(3,4-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物19)；

N-{2-氯-5-[2-苯基-3H-咪唑(4,5-b)吡啶-6-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物20)；

N-{2-氯-5-[3-苯基-1H-吡唑(3,4-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物21)；

N-{2-氯-5-[3-(吡啶-4-基)-1H-吡唑(3,4-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物22)；

N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物23)；

N-[2-氨基-5-(6-氨基吡啶-3-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物24)；

N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)-2-甲基吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物25)；

N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)-2-甲氧基吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物26)。

本發(fā)明中，所述上述化合物的藥物上可接受的鹽，為由本發(fā)明的化合物與生理學(xué)相容的有機(jī)酸和/或無機(jī)酸形成的鹽；或與生理學(xué)相容的有機(jī)堿和/或無機(jī)堿形成的堿加成鹽或季銨鹽。

上述有機(jī)酸可選自碳酸、乙酸、草酸、檸檬酸、水楊酸、苯甲酸、馬來酸、月桂酸、蘋果酸、富馬酸、琥珀酸、酒石酸、甲磺酸、乳酸、煙酸、樟腦酸、肉桂酸、對(duì)甲苯磺酸、苯磺酸、谷氨酸和扁桃酸。

上述無機(jī)酸可選自鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸和磷酸。

上述有機(jī)堿可選自三乙胺、L-精氨酸、L-賴氨酸、肌氨酸、絲氨酸、N-乙基哌啶、N-甲基-D-葡萄糖、氨基乙二醇，1-氨基-2,3,4-丁三醇和二芐基胺。

上述無機(jī)堿可選自易溶解的堿金屬、堿土金屬的氫氧化物。

本發(fā)明提供的上述抑制劑(化合物)具有良好的特異性的酶抑制活性。因此，本發(fā)明還提供上述抑制劑(化合物)在制備治療和/或預(yù)防和/或輔助治療PI3K作用的癌癥、免疫病癥或炎性病癥藥物中的好應(yīng)用。例如可被開發(fā)成為治療腫瘤的靶向藥物。

其中，所述癌癥為乳癌、前列腺癌或白血病等。

其中，所述免疫病癥為第I型糖尿病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。

其中，所述炎性病癥為濕疹、心血管疾病等。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合下述實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，應(yīng)理解，下述實(shí)施例僅是為了說明本發(fā)明，而非限制本發(fā)明。

實(shí)施例1

N-[2-氯-5-(喹啉-3-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物1)

1：N-(2-氯-5溴吡啶-3-基)苯磺酰胺(1-J)的制備

100mL圓底燒瓶中，依次加入二氯甲烷(DCM)(50mL)，3-氨基-2-氯-5-溴吡啶(B1)(5.0g,24.0mmol)、吡啶(3.8g,48mmol)，冰水浴冷卻下，滴加苯磺酰氯(D1)(5.3g,31mmol)。反應(yīng)液緩慢升至室溫，攪拌24h，HPLC跟蹤反應(yīng)。反應(yīng)結(jié)束后，倒入水(30mL)中,分液，有機(jī)相依次用飽和檸檬酸水溶液(50ml)，飽和碳酸氫鈉(50ml)，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮除去DCM，析出固體。用石油醚(PE)/DCM重結(jié)晶得到淺白色固體產(chǎn)物N-(2-氯-5溴吡啶-3-基)苯磺酰胺(1-J),MS(ESIpositive ion)m/z:348.62(M+1).1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm 7.574-7.615(m,2H),7.673-7.692(m,1H),7.736-7.757(m,2H),7.936(d,J＝2.5Hz,1H),8.413(d,J＝2.5Hz,1H),10.622(brs,1H)。

2：N-[2-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(1-K)的制備

N₂保護(hù)下，250mL三頸瓶中依次加入1,4-二氧六環(huán)(100mL)，N-(2-氯-5溴吡啶-3-基)苯磺酰胺(1-J)(5.0g，14mmol)、雙聯(lián)硼酸頻哪醇酯(E1)(4.8g，19mmol)、無水乙酸鈉(3.4g,41mmol)、Pd(PPh₃)₄(0.4g,0.35mmol),攪拌下回流12h，TLC跟蹤至原料(1-J)消失。反應(yīng)體系冷卻到室溫，墊硅膠過濾，真空濃縮，析出的固體，用乙酸乙酯/正己烷重結(jié)晶，得到淺棕色的固體產(chǎn)物N-[2-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(1-K)，MS(ESI positive ion)m/z:395.68(M+1),1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm1.363(s,12H),6.902(brs,1H),7.441-7.482(m,2H),7.564-7.603(m,1H),7.765-7.787(m,2H),8.325(d,J＝1.5Hz,1H),8.437(d,J＝1.5Hz,1H)。

3：N-[2-氯-5-(喹啉-3-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物1)的制備

N₂保護(hù)下，25mL圓底燒瓶中依次加入乙二醇二甲醚(DME)(1.5mL)，N-[2-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(1-K)(100.0mg，0.253mmol)、3-溴喹啉(Q3)(58.0mg,0.279mmol)、Pd(PPh₃)₄(8.7mg,7.53×10^-3mmol)、K₂CO₃(87mg,0.633mmol)，油浴加熱回流，攪拌6h。冷卻到室溫，過濾，真空濃縮殘留物經(jīng)硅膠柱純化得產(chǎn)物N-[2-氯-5-(喹啉-3-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(1)，MS(ESI positive ion)m/z:396.86(M+1),1HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm3.757(s,1H),7.526(t,J＝8.0Hz,2H),7.613-7.682(m,2H),7.817(td,J＝6.8Hz,1.2Hz,1H),7.865(d,J＝7.6Hz,2H),7.954(d, J＝8.0Hz,1H),8.183(d,J＝8.4Hz,1H),8.327(dd,J＝6.0Hz,2.8Hz,2H),8.476(d,J＝2.0Hz,1H),9.082(d,J＝2.0Hz,1H)。

實(shí)施例2

N-[2-氯-5-(喹啉-3-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物2)

N-[2-氯-5-(喹啉-6-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物2)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中的化合物1的合成，只是將其中的3-溴喹啉(Q3)換為6-溴喹啉(Q6)，得到化合物2。MS(ESI positive ion)m/z:396.86(M+1),1HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm3.857(s,1H),7.504(t,J＝7.6Hz,2H),7.597-7.616(m,1H),7.831-7.851(m,2H),7.903(d,J＝8.0Hz,1H),8.010(d,J＝8.0Hz,1H),8.236-8.284(m,2H),8.343(d,2.8Hz,2H),8.477(d,J＝2.0Hz,1H),8.991(d,J＝4.0Hz,1H)。

實(shí)施例3

N-{2-氯-5-[1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物3)

N-{2-氯-5-[1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物3)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中化合物1的合成，只是將其中的3-溴喹啉(Q3)換成5-溴-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(B3)，得到產(chǎn)物N-{2-氯-5-[1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(3)。MS(ESI positive ion)m/z:385.84(M+1),1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm6.551(s,1H),7.595(t,J＝8.0Hz,3H),7.695(d,J＝6.8Hz,1H),7.783(d,J＝7.2Hz,2H),7.954(d,J＝2.4Hz,1H),8.224(d,J＝2.0Hz,1H),8.451(d,J＝2.0Hz,1H),8.613(d,J＝2.0Hz,1H),10.440(s,1H),11.866(s,1H)。

實(shí)施例4

N-{2-氯-5-[2-甲基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物4)

N-{2-氯-5-[2-甲基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物4)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中化合物1的合成，只是將其中的3-溴喹啉(Q3)換成2-甲基-5-溴-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(B4)，得到產(chǎn)物N-{2-氯-5-[2-甲基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(4)。MS(ESI positive ion)m/z:399(M+1),1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm2.418(s,3H),6.230(s,1H),7.595(t,J＝8.0Hz,2H),7.689-7.761(m,1H),7.773(d,J＝7.6Hz,2H),7.905(d,J＝2.4Hz,1H),8.038(d,J＝2.0Hz,1H),8.331(d,J＝2.0Hz,1H),8.579(d,J＝2.0Hz,1H),10.427(s,1H),11.666(s,1H)。

實(shí)施例5

N-{2-氯-5-[2-乙基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物5)

N-{2-氯-5-[2-乙基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物5)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中化合物1的合成，只是將其中的3-溴喹啉(Q3)換成2-乙基-5-溴-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(B5)，得到化合物5。MS(ESI positive ion)m/z:413(M+1),1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm1.294(t,J＝7.6Hz,3H),2.771(q,J＝8.8,2H),6.254(s,1H),7.595(t,J＝8.0Hz,2H),7.689-7.761(m,1H),7.773(d,J＝7.6Hz,2H),7.905(d,J＝2.4Hz,1H),8.038(d,J＝2.0Hz,1H),8.331(d,J＝2.0Hz,1H),8.579(d,J＝2.0Hz,1H),10.427(s,1H),11.715(s,1H)。

實(shí)施例6

N-{2-氯-5-[2-苯基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物6)

N-{2-氯-5-[2-苯基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物6)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中化合物1的合成，只是將其中的3-溴喹啉(Q3)換成2-苯基-5-溴-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(B6)，得到化合物6。MS(ESI positive ion)m/z:461(M+1),1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm7.040(s,1H),7.482(d,J＝4.8Hz,1H),7.582(q,J＝6.4Hz,4H),7.661-7.681(m,1H),7.766(d,J＝7.6Hz,2H),8.115-8.130(m,3H),8.768(d,J＝6.0Hz,2H),8.827(s,1H),10.453(s,1H),12.386(s,1H)。

實(shí)施例7

N-{2-氯-5-[3-苯基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物7)

1：3-苯基-5-溴-1H-吡咯(2，3-b)吡啶(B7)的制備

N₂保護(hù)下，25mL三頸瓶中依次加入1,4-二氧六環(huán)(3.0mL)、5-溴-3-碘-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(M1)(70.8mg,220mmol)、苯硼酸(N1)(27.0mg,220mmol)、Pd(PPh₃)₄(10.1mg,8.8×10^-3mmol)、K₂CO₃(90.0mg,660mmol)，油浴加熱回流反應(yīng)3h，冷卻到室溫，加入水(5.0mL)稀釋，二氯甲烷(10mL*2)萃取，有機(jī)相無水硫酸鈉干燥、過濾，真空條件下濃縮除去溶劑，通后經(jīng)硅膠柱純化得固體產(chǎn)物3-苯基-5-溴-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(B7)。

2：N-{2-氯-5-[3-苯基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物7)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中化合物1的合成，只是將其中的3-溴喹啉(Q3)換成3-苯基-5-溴-1H-吡咯(2,3-b)吡啶(B7),得到產(chǎn)物N-{2-氯-5-[3-苯基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(7)。MS(ESI positive ion)m/z:461(M+1),1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm7.301(s,1H),7.482(d,J＝4.8Hz,1H),7.582(q,J＝6.4Hz,4H),7.661-7.681(m,1H),7.766(d,J＝7.6Hz,2H),8.115-8.130(m,3H),8.768(d,J＝6.0Hz,2H),8.827(s,1H),10.446(s,1H),12.158(s,1H)。

實(shí)施例8

N-{2-氯-5-[3-吡啶基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物8)

1：5-溴-3-碘-1-(苯磺?；?-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(B8)的制備

100mL圓底燒瓶中分別加入5-溴-3-碘-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(M1)(100.0mg，3.1mmol)、20mL二氯甲烷，三乙胺(930mg，9.2mmol)、DMAP(40mg，0.31mmol)，在冰水浴條件下，將苯磺酰氯(N1)(1100mg，6.2mmol)溶于10mL二氯甲烷中，通過恒壓滴液漏斗滴加入上述溶液中，滴加完畢后，室溫?cái)嚢?h，TLC檢測(cè)，無M1剩余，水洗3次，分液，有機(jī)相無水硫酸鈉干燥、濃縮除去溶劑，5mL乙酸乙酯重結(jié)晶得白色固體，烘干得5-溴-3-碘-1-(苯磺?；?-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(B8)。MS(ESI positive ion)m/z:462.85(M+1),1HNMR(400MHz,CD₃Cl):δppm 7.517(t,J＝8.0Hz,2H),7.622(t,J＝7.6Hz,1H),8.818(d,J＝2.4Hz,1H),7.875(s,1H),8.193(d,J＝3.6Hz,1H),8.457(d,J＝2.0Hz,1H)。

2：3-吡啶基-5-溴-1H-吡咯(2，3-b)吡啶(B9)的制備

N₂保護(hù)下，25mL三頸瓶中依次加入1,4-二氧六環(huán)(3.0mL)、5-溴-3-碘-1-(苯磺?；?-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(B8)(100.0mg,0.22mmol)、吡啶硼酸(N1)(27.0mg,0.22mmol)、Pd(PPh₃)₄(10.1mg,8.8×10^-3mmol)、K₂CO₃(90.0mg,660mmol)，油浴加熱回流反應(yīng)1.5h后，加入6N NaOH溶液,繼續(xù)反應(yīng)0.5h，TLC檢測(cè)，無原料剩余，冷卻到室溫，加入6N HCl溶液，調(diào)節(jié)pH至中性，二氯甲烷(10mL*2)萃取，有機(jī)相無水硫酸鈉干燥、過濾，真空條件下濃縮除去溶劑，經(jīng)硅膠柱純化得固體產(chǎn)物3-吡啶基-5-溴-1H-吡咯(2，3-b)吡啶(B9)。MS(ESI positive ion)m/z:273.99(M+1),1HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm7.773(dd,J＝3.2Hz,2H),8.070(s,1H),8.371(d,J＝2.0Hz,1H),8.543(dd,J＝3.2Hz,2H),8.575(d,J＝2.0Hz,1H)。

3：N-{2-氯-5-[3-吡啶基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物8)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中化合物1的合成，只是將其中的3-溴喹啉(Q3)換成3-吡啶基-5-溴-1H-吡咯(2,3-b)吡啶(B9),得到產(chǎn)物N-{2-氯-5-[3-吡啶基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(8)。MS(ESI positive ion)m/z:462.07(M+1),1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm7.570-7.607(m,2H),7.654-7.673(m,J＝2.8Hz,1H),7.775(d,J＝7.2Hz,2H),7.867(d,J＝4.8Hz,2H),8.021(s,1H),8.328(s,1H),8.528(s,1H),8.599(d,J＝4.0Hz,3H),8.694(s,1H),12.645(s,1H)。

實(shí)施例9

N-{2-氯-5-[3-吡啶基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}-2-氟苯磺酰胺(化合物9)

1：N-(2-氯-5溴吡啶-3-基)-2-氟苯磺酰胺(9-J)的制備

100mL圓底燒瓶中，依次加入二氯甲烷(DCM)(30mL)，3-氨基-2-氯-5-溴吡啶(B1)(3.0g,14.46mmol)、吡啶(2.28g,28.92mmol)，冰水浴冷卻下，滴加2-氟苯磺酰氯(9-D)(3.66g,18.8mmol)。反應(yīng)液緩慢升至室溫，攪拌24h，HPLC跟蹤反應(yīng)。反應(yīng)結(jié)束后，倒入水(30mL)中,分液，有機(jī)相依次用飽和檸檬酸水溶液(30mL)，飽和碳酸氫鈉(30mL)，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮除去DCM，析出固體。用石油醚(PE)/DCM重結(jié)晶得到淺白色固體產(chǎn)物N-(2-氯-5溴吡啶-3-基)-2-氟苯磺酰胺(9-J)。MS(ESI positive ion)m/z:364.91(M+1),1HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm7.226(d,J＝8.4Hz,1H),7.297(dt,J＝7.6Hz,1H),7.341(s,1H),7.607-7.663(m,1H),7.891(dt,J＝7.2,1H),8.110(d,J＝2.4Hz,1H),8.164(d,J＝2.4Hz,1H)。

2：N-[2-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]-2-氟苯磺酰胺(9-K)的制備

N₂保護(hù)下，50mL三頸瓶中依次加入1,4-二氧六環(huán)(10mL)，N-(2-氯-5溴吡啶-3-基)-2-氟苯磺酰胺(9-J)(0.5g,1.37mmol)、雙聯(lián)硼酸頻哪醇酯(E1)(0.52g,2.05mmol)、無水乙酸鈉(0.4g,4.11mmol)、Pd(PPh₃)₄(0.04g,0.035mmol),攪拌下回流12h，TLC跟蹤至原料(9-J)消失。反應(yīng)體系冷卻到室溫，墊硅膠過濾，真空濃縮，析出的固體，用乙酸乙酯/正己烷重結(jié)晶，得到淺棕色的固體產(chǎn)物N-[2-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]-2-氟苯磺酰胺(9-K)，MS(ESI positive ion)m/z:413.08(M+1),1HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm1.339(s,12H),7.218(q,J＝7.2,2H),7.545-7.618(m,1H),7.843(t,J＝6.8,1H),8.263(d,J＝1.2,1H),8.422(d,J＝0.8Hz,1H)。

3:N-{2-氯-5-[3-吡啶基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}-2-氟苯磺酰胺(化合物9)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例8中化合物8的合成，只是將其中的1-K換成N-[2-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]-2-氟苯磺酰胺(9-K),得到產(chǎn)物N-{2-氯-5-[3-吡啶基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}-2-氟苯磺酰胺(化合物9)。MS(ESI positive ion)m/z:480.06(M+1),1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm7.323(t,J＝3.2Hz,1H),7.454(d,J＝9.2Hz,1H),7.707-7.770(m,2H),7.905(t,J＝1.6Hz,2H),8.136(s,1H),8.349(s,1H),8.565(s,1H),8.596(t,J＝2.0Hz,2H),8.645(s,1H),8.686(s,1H),12.490(br s,1H)。

實(shí)施例10

N-{2-氯-5-[3-吡啶基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}-4-氟苯磺酰胺(化合物10)

1：N-(2-氯-5溴吡啶-3-基)-4-氟苯磺酰胺(10-J)的制備

100mL圓底燒瓶中，依次加入二氯甲烷(DCM)(30mL)，3-氨基-2-氯-5-溴吡啶(B1)(3.0g,14.46mmol)、吡啶(2.28g,28.92mmol)，冰水浴冷卻下，滴加4-氟苯磺酰氯(9-D)(3.66g,18.8mmol)。反應(yīng)液緩慢升至室溫，攪拌24h，HPLC跟蹤反應(yīng)。反應(yīng)結(jié)束后，倒入水(30mL)中,分液，有機(jī)相依次用飽和檸檬酸水溶液(30mL)，飽和碳酸氫鈉(30mL)，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮除去DCM，析出固體。用石油醚(PE)/DCM重結(jié)晶得到淺白色固體產(chǎn)物N-(2-氯-5溴吡啶-3-基)-4-氟苯磺酰胺(10-J)。MS(ESI positive ion)m/z:364.91(M+1),1HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm7.032(s,1H),7.191(t,J＝8.0Hz,2H),7.836(q,J＝5.2Hz,2H),8.145(s,1H),8.200(s,1H)。

2：N-[2-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]-4-氟苯磺酰胺(10-K)的制備

N₂保護(hù)下，50mL三頸瓶中依次加入1,4-二氧六環(huán)(10mL)，N-(2-氯-5溴吡啶-3-基)-4-氟苯磺酰胺(10-J)(0.5g,1.37mmol)、雙聯(lián)硼酸頻哪醇酯(E1)(0.52g,2.05mmol)、無水乙酸鈉(0.4g,4.11mmol)、Pd(PPh₃)₄(0.04g,0.035mmol),攪拌下回流12h，TLC跟蹤至原料(10-J)消失。反應(yīng)體系冷卻到室溫，墊硅膠過濾，真空濃縮，析出的固體，用乙酸乙酯/正己烷重結(jié)晶，得到淺棕色的固體產(chǎn)物N-[2-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]-4-氟苯磺酰胺(10-K)，MS(ESI positive ion)m/z:413.08(M+1),1HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm1.357(s,12H),6.893(s,1H),7.136(t,J＝8.8Hz,2H),7.766-7.800(m,2H),8.306(d,J＝1.2,1H),8.452(d,J＝1.2Hz,1H)。

3:N-{2-氯-5-[3-吡啶基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}-4-氟苯磺酰胺(化合物10)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例8中化合物8的合成，只是將其中的1-K換成N-[2-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]-4-氟苯磺酰胺(10-K),得到產(chǎn)物N-{2-氯-5-[3-吡啶基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}-4-氟苯磺酰胺(化合物10)。MS(ESI positive ion)m/z:480.06(M+1),1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm7.424(t,J＝8.4Hz,2H),7.805-7.834(m,2H),7.883(q,J＝2.8Hz,2H),8.074(s,1H),8.332(s,1H),8.554(s,1H),8.587(d,J＝0.9,2H),8.636(s,1H),8.696(s,1H),12.473(br s,1H)。

實(shí)施例11

N-{2-氯-5-[3-吡啶基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}甲磺酰胺(化合物11)

1：N-(2-氯-5溴吡啶-3-基)甲磺酰胺(11-J)的制備

50mL圓底燒瓶中，依次加入二氯甲烷(DCM)(20mL)，3-氨基-2-氯-5-溴吡啶(B1)(2.0g,9.64mmol)、吡啶(1.52g,19.28mmol)，冰水浴冷卻下，滴加甲磺酰氯(11-D)(1.1g,9.64mmol)。反應(yīng)液緩慢升至室溫，攪拌24h，HPLC跟蹤反應(yīng)。反應(yīng)結(jié)束后，倒入水(20mL)中,分液，有機(jī)相依次用飽和檸檬酸水溶液(20mL)，飽和碳酸氫鈉(20mL)，飽和食 鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮除去DCM，析出固體。用石油醚(PE)/DCM重結(jié)晶得到淺白色固體產(chǎn)物N-(2-氯-5溴吡啶-3-基)甲磺酰胺(11-J)。MS(ESI positive ion)m/z:284.90(M+1),1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm3.185(s,3H),8.082(d,J＝2.4Hz,1H),8.421(d,J＝2.4Hz,2H),9.964(s,1H)。

2：N-[2-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]-甲磺酰胺(11-K)的制備

N₂保護(hù)下，50mL三頸瓶中依次加入1,4-二氧六環(huán)(10mL)，N-(2-氯-5溴吡啶-3-基)甲磺酰胺(10-J)(0.5g,1.75mmol)、雙聯(lián)硼酸頻哪醇酯(E1)(0.67g,2.63mmol)、無水乙酸鈉(0.52g,5.25mmol)、Pd(PPh₃)₄(0.04g,0.035mmol),攪拌下回流12h，TLC跟蹤至原料(11-J)消失。反應(yīng)體系冷卻到室溫，墊硅膠過濾，真空濃縮，析出的固體，用乙酸乙酯/正己烷重結(jié)晶，得到淺棕色的固體產(chǎn)物N-[2-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]甲磺酰胺(11-K)，MS(ESI positive ion)m/z:333.08(M+1),1HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm1.348(s,12H),3.038(s,3H),6.808(brs,1H),8.264(d,J＝1.2Hz,1H),8.522(d,J＝1.6Hz,2H)。

3:N-{2-氯-5-[3-吡啶基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}甲磺酰胺(化合物11)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例8中化合物8的合成，只是將其中的1-K換成N-[2-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]甲磺酰胺(11-K),得到產(chǎn)物N-{2-氯-5-[3-吡啶基-1H-吡咯(2,3-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}甲磺酰胺(化合物10)。MS(ESI positive ion)m/z:400.06(M+1),1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm3.129(s,3H),7.859(d,J＝6.0Hz,2H),8.177(d,J＝2.0Hz,1H),8.299(d,J＝2.4Hz,1H),8.553( d,J＝1.2Hz,2H),8.617(d,J＝1.6Hz,1H),8.648(s,1H),8.670(s,1H),9.842-9.875(brs,1H),12.430(s,1H)。

實(shí)施例12

N-[2-氯-5-(吡啶-3-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物12)

N-[2-氯-5-(吡啶-3-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物12)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中的第三步化合物1的合成，將其中的3-溴喹啉(Q3)換為3-溴吡啶(B10),得到產(chǎn)物N-[2-氯-5-(吡啶-3-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(12)。MS(ESI positive ion)m/z:346.8(M+1),1HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm3.756(s,1H),7.619(q,J＝4.8Hz1H),7.509(t,J＝8.0Hz,2H),7.619(t,J＝7.6Hz,1H),7.825-7.880(m,3H),8.191(d,J＝2.0Hz,1H),8.338(d,J＝2.0Hz,1H),8.706(d-d,J＝4.8,1.2Hz,1H),8.809(d,J＝2.0Hz,1H)。

實(shí)施例13

N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)-2-氯吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物13)

N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)-2-氯吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物13)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中的第三步化合物1的合成，將其中的3-溴喹啉(Q3)換為2-氨基-5-溴吡啶(B11)得到產(chǎn)物N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)-2-氯吡啶-3-基]苯磺酰胺(13)。MS(ESI positive ion)m/z:361.82(M+1),1HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm3.756(s,1H),4.663(s,2H),7.619(q,J＝4.8Hz,1H),7.509(t,J＝8.0Hz,2H),7.619(t,J＝7.6H z,1H),7.825-7.880(m,3H),8.338(d,J＝2.0Hz,1H),8.706(dd,J＝4.8,1.2Hz,1H),8.809(d,J＝2.0Hz,1H)。

實(shí)施例14

N-{6’-氯-5’-(苯磺酰胺)-[3,3’-二吡啶]-6-基}乙酰胺(化合物14)

N-{6’-氯-5’-(苯磺酰胺)-[3,3’-二吡啶]-6-基}乙酰胺(化合物14)的制備

10mL圓底燒瓶中依次加入N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)-2-氯吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物13)(100.0mg，280mmol)和乙酸酐(B12)(2mL)，室溫?cái)嚢?.0h，真空濃縮，殘留物用DCM(5mL)溶解，依次用飽和碳酸氫鈉溶液，水，飽和食鹽水洗滌，干燥、過濾，濃縮得到產(chǎn)物N-{6’-氯-5’-(苯磺酰胺)-[3,3’-二吡啶]-6-基}乙酰胺(14)。MS(ESI positive ion)m/z:403(M+1),1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm2.124(s,3H),4.026(s,1H),7.619(q,J＝4.8Hz,1H),7.509(t,J＝8.0Hz,2H),7.619(t,J＝7.6Hz,1 H),7.825-7.880(m,3H),8.338(d,J＝2.0Hz,1H),8.706(dd,J＝4.8,1.2Hz,1H),8.809(d,J＝2.0Hz,1H),9.257(s,1H)。

實(shí)施例15

N-{6’-氯-6’-(乙基氨)-[3,3’-二吡啶]-5-基}苯磺酰胺(化合物15)

1：N-(5-溴吡啶-2-基)乙酰胺(C1)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例14中的化合物14的合成，將其中的N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)-2-氯吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物13)換為2-氨基-5-溴吡啶(B11)，得到固體產(chǎn)物N-(5-溴吡啶-2-基)乙酰胺(C1)。

2：5-溴-N-乙基吡啶-2-氨(B13)的制備

N₂保護(hù)下，10mL圓底燒瓶中依次加入THF(1.4mL)、N-(5-溴吡啶-2-基)乙酰胺(C1)(100.0mg,0.47mmol)，冰水浴下分批滴加BH₃-THF(1.2mL)，滴完，升至室溫?cái)嚢?2h，再加入乙醇(2.0mL)和濃鹽酸(1.0mL)，水浴中加熱回流1h，濃縮除去有機(jī)溶劑，殘余物加水溶解，然后用2N NaOH調(diào)至pH＝7～8，乙酸乙酯萃取、水洗、無水硫酸鈉干燥后，過濾，真空濃縮，經(jīng)硅膠柱純化得到固體產(chǎn)物5-溴-N-乙基吡啶-2-氨(B13)。

3：N-{6’-氯-6’-(乙基氨)-[3,3’-二吡啶]-5-基}苯磺酰胺(化合物15)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中的第三步化合物1的合成，將其中的3-溴喹啉(Q3)換為5-溴-N-乙基吡啶-2-氨(B13)，得到產(chǎn)物N-{6’-氯-6’-(乙基氨)-[3,3’-二吡啶]-5-基}苯磺酰胺(15)。MS(ESI positive ion)m/z:389(M+1),1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm1.145(t,J＝3.2Hz,3H),3.298(q,J＝6.4Hz,2H),4.153(s,1H),7.619(q,J＝4.8Hz,1H),7.509(t,J＝8.0Hz,2H),7.619(t,J＝7.6Hz,1H),7.825-7.880(m,3H),8.338(d,J＝2.0Hz,1H),8.706(dd,J＝4.8,1.2Hz,1H),8.809(d,J＝2.0Hz,1H),10.368(br s,1H)。

實(shí)施例16

N-{6’-氯-5’-(苯磺酰胺)-[3,3’-二吡啶]-6-基}環(huán)丙基甲酰胺(化合物16)

N-{6’-氯-5’-(苯磺酰胺)-[3,3’-二吡啶]-6-基}環(huán)丙基甲酰胺(化合物16)的制備

10mL圓底燒瓶中依次加入DMF(2.0mL)、N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)-2-氯吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物13)(100.0mg，280mmol)、環(huán)丙基甲酸(B14)(25.7mg,300mmol)、HATU(120mg,0.3mmol)、DIEA(72mg,560mmol)，室溫?cái)嚢?h，加水稀釋，然后用乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥、過濾，真空濃縮，經(jīng)硅膠柱純化，得到淺黃色固體產(chǎn)物N-{6’-氯-5’-(苯磺酰胺)-[3,3’-二吡啶]-6-基}環(huán)丙基甲酰胺(16)。MS(ESI positive ion)m/z:429(M+1),1HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm0.934(d,J＝3.2,2H),0.953(d,J＝3.6,2H),1.254(m,1H),4.026(s,1H),7.619(q,J＝4.8Hz,1H),7 .509(t,J＝8.0Hz,2H),7.619(t,J＝7.6Hz,1H),7.825-7.880(m,3H),8.338(d,J＝2.0Hz,1H),8.706(dd,J＝4.8,1.2Hz,1H),8.809(d,J＝2.0Hz,1H),9.967(s,1H)。

實(shí)施例17

N-{6-氯-6’-(甲基磺酰胺)-[3,3’-二吡啶]-5-基}苯磺酰胺(化合物17)

1：N-(5-溴吡啶-2-基)甲磺酰胺(B15)的制備

2-氨基-5-溴吡啶(B11)(500.0mg,2.89mmol)溶于二氯甲烷(5.0mL)，冰水浴下，依次滴加吡啶(2.5mL)和甲磺酸酐(C2)(650.0mg,3.76mmol)，繼續(xù)攪拌1h，過濾，收集固體，真空干燥得到產(chǎn)物N-(5-溴吡啶-2-基)甲磺酰胺(B15)。

2：N-{6-氯-6’-(甲基磺酰胺)-[3,3’-二吡啶]-5-基}苯磺酰胺(化合物17)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中的第三步化合物1的合成，將其中的3-溴喹啉(Q3)換為N-(5-溴吡啶-2-基)甲磺酰胺(B15)，得到產(chǎn)物N-{6-氯-6’-(甲基磺酰胺)-[3,3’-二吡啶]-5-基}苯磺酰胺(17)。MS(ESI positive ion)m/z:439(M+1),1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm3.336(s,3H),7.619(q,J＝4.8Hz,1H),7.509(t,J＝8.0Hz,2H),7.619(t,J＝7.6Hz,1H),7.825-7.880(m,3H),8.338(d,J＝2.0Hz,1H),8.706(dd,J＝4.8,1.2Hz,1H),8.809(d,J＝2.0Hz,1H),10.462(s,1H),10.857(s,1H)。

實(shí)施例18

N-{6-氯-6’-(3,3-二甲基脲)[3,3’-二吡啶]-5-基}苯磺酰胺(化合物18)

1：3-(5-溴吡啶-2-基)-1，1-二甲基脲(B14)的制備

25mL圓底燒瓶中依次加入DMF(5.0mL)、2-氨基-5-溴吡啶(B11)(1.0g,5.78mmol)、1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲酰胺(C3)(1.03g,8.67mmol)，油浴加熱，

130℃反應(yīng)12h，TLC檢測(cè)，原料(B11)消失，冷卻至室溫，加入水，然后用乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾、真空濃縮析出固體，真空干燥得到產(chǎn)物3-(5-溴吡啶-2-基)-1，1-二甲基脲(B16)。

2：N-{6-氯-6’-(3,3-二甲基脲)[3,3’-二吡啶]-5-基}苯磺酰胺(化合物18)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中的第三步化合物1的合成，將其中的3-溴喹啉(Q3)換為3-(5-溴吡啶-2-基)-1，1-二甲基脲(B16)得到產(chǎn)物N-{6-氯-6’-[4-(3,3’-二甲基脲)吡啶]吡啶-3-基}苯磺酰胺(18)。MS(ESI positive ion)m/z:431.9(M+1),1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm3.352(s,6H),5.107(s,1H),7.619(q,J＝4.8Hz,1H),7.509(t,J＝8.0Hz,2H),7.619(t,J＝7.6Hz,1H),7.825-7.880(m,3H),8.338(d,J＝2.0Hz,1H),8.706(dd,J＝4.8,1.2Hz,1H),8.809(d,J＝2.0Hz,1H),10.787(s,1H)。

實(shí)施例19

N-{2-氯-5-[1H-吡唑(3,4-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物19)

N-{2-氯-5-[1H-吡唑(3,4-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物19)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中的第三步化合物1的合成，將其中的3-溴喹啉(Q3)換為5-溴-1H-吡唑[3,4-b]吡啶胺(B17)，得到淺棕色固體產(chǎn)物N-{2-氯-5-[1H-吡唑(3,4-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(19)。MS(ESI positive ion)m/z:386.83(M+1),1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm7.568-7.606(m,2H),7.663-7.705(m,1H),7.768(d,J＝7.6Hz,2H),8.041(s,1H),8.261(d,J＝0.4Hz,1H),8.529(d,J＝0.8,1H),8.642(t,J＝0.8Hz,1H),8.786(t,J＝0.8,1H),10.482(s,1H),13.855(s,1H)。

實(shí)施例20

N-{2-氯-5-[2-苯基-3H-咪唑(4,5-b)吡啶-6-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物20)

1：2-苯基-6-溴-3H-咪唑[4,5-b]吡啶(B20)的制備

100mL圓底燒瓶中依次加入2，3-二氨基-5-溴吡啶(C6)(1.0g,5.3mmol)、苯甲酸(C7)(0.65g,5.3mmol)、PPA(39.4g,116.6mmol)，反應(yīng)溫度升至200℃，攪拌12h后，降溫至80℃，加入水(40mL)進(jìn)行稀釋，然后用乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮，析出的固體真空干燥得到產(chǎn)物2-苯基-6-溴-3H-咪唑[4,5-b]吡啶(B18)。

2：N-{2-氯-5-[2-苯基-3H-咪唑(4,5-b)吡啶-6-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物20)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中的第三步化合物1的合成，將其中的3-溴喹啉(Q3)換2-苯基-6-溴-3H-咪唑[4,5-b]吡啶(B18)，得產(chǎn)物N-{2-氯-5-[2-苯基-3H-咪唑(4,5-b)吡啶-6-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(20)。MS(ESI positive ion)m/z:462(M+1),1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm3.327(s,1H),7.482(d,J＝4.8Hz,1H),7.582(q,J＝6.4Hz,4H),7.661-7.681(m,1H),7.766(d,J＝7.6Hz,2H),8.115-8.130(m,3H),8.768(d,J＝6.0Hz,2H),8.827(s,1H),10.481(br s,1H)。

實(shí)施例21

N-{2-氯-5-[3-苯基-1H-吡唑(3,4-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物21)

1：5-溴-3-碘-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑[3,4-b]吡啶(T1)的制備

冰水浴下，25mL圓底燒瓶中依次加入干燥的DMF(8mL)、5-溴-3-碘-1H-吡唑[3,4-b]吡啶(F1)(1.0g,3.1mmol),然后分批加入NaH(0.16g,6.18mmol,含量為60％的礦物油混合物)，攪拌10分鐘后，滴加2-(三甲基硅烷基)乙氧甲基氯(C8)(0.93mL,5.25mmol),滴加完畢，室溫?cái)嚢?h。加水破壞，乙酸乙酯萃取(3×10mL)，無水硫酸鈉干燥、過濾，真空濃縮，粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱純化，得到產(chǎn)物5-溴-3-碘-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑[3，4-b]吡啶(T1)。

2：3-苯基-5-溴-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑[3，4-b]吡啶(T2)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例7中化合物B7的合成，5-溴-3-碘-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(M1)換成5-溴-3-碘-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑[3，4-b]吡啶(T1)，得到產(chǎn)物3-苯基-5-溴-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑[3，4-b]吡啶(T2)。

3：N-{2-氯-5-[3-苯基-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑[3，4-b]吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(T3)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中的第三步化合物1的合成，將其中的3-溴喹啉(Q3)換成3-苯基-5-溴-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑[3，4-b]吡啶(T2)，得到產(chǎn)物N-{2-氯-5-[3-苯基-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑[3，4-b]吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(T3)。

4：N-{2-氯-5-[3-苯基-1H-吡唑(3,4-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物21)的制備

N-{2-氯-5-[3-苯基-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(T3)(100mg,0.169mmol)溶于乙醇，滴加2N HCl溶液2mL，70℃攪拌12h，冷卻至室溫，真空徹底濃縮至干，粗產(chǎn)物用二氯甲烷重結(jié)晶，得到產(chǎn)物N-{2-氯-5-[3-苯基-1H-吡唑(3,4-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(21)。MS(ESI positive ion)m/z:462(M+1),1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm3.353(s,1H),7.482(d,J＝4.8Hz,1H),7.582(q,J＝6.4Hz,4H),7.661-7.681(m,1H),7.766(d,J＝7.6Hz,2H),8.115-8.130(m,3H),8.768(d,J＝6.0Hz,2H),8.827(s,1H),10.481(s,1H)。

實(shí)施例22

N-{2-氯-5-[3-(吡啶-4-基)-1H-吡唑(3,4-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物22)

1：3-(吡啶-4-基)-5-溴-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑[3，4-b]吡啶(T4)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例7中化合物B7的合成，5-溴-3-碘-1H-吡咯[2,3-b]吡啶(M1)替換成5-溴-3-碘-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑[3，4-b]吡啶(T1)，苯硼酸替換為4-吡啶硼酸，得到產(chǎn)物3-(吡啶-4-基)-5-溴-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑[3，4-b]吡啶(T4)。

2：N-{2-氯-5-[3-(吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑[3，4-b]吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(T5)

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中的第三步化合物1的合成，將其中的3-溴喹啉(Q3)替換為3-(吡啶-4-基)-5-溴-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑[3,4-b]吡啶(T4)，得到產(chǎn)物N-{2-氯-5-[3-(吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(T5)。

3：N-{2-氯-5-[3-(吡啶-4-基)-1H-吡唑(3,4-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(化合物22)的制備

100mL圓底燒瓶中依次加入N-{2-氯-5-[3-(吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑[3，4-b]吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(T5)(100mg,0.169mmol)、EtOH/2N HCl(1:1,20mL)，油浴加熱，將反應(yīng)溫度升至90℃，攪拌12h，TLC檢測(cè)，原料(T5)消失，冷卻至室溫，真空濃縮，粗產(chǎn)物用二氯甲烷重結(jié)晶，過濾，濾餅用甲醇潤(rùn)洗，過濾、固體真空干燥后得到產(chǎn)物N-{2-氯-5-[3-(吡啶-4-基)-1H-吡唑(3,4-b)吡啶-5-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺(22)。MS(ESI positive ion)m/z:463(M+1),1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm 3.780(brs,1H),7.589(t,J＝8.0Hz,2H),7.691(t,J＝7.6Hz,1H),7.754(d,J＝7.2Hz,2H),8.257(d,J＝2.0Hz ,1H),8.700(d,J＝6.4Hz,2H),8.801(d,J＝2.0Hz,1H),8.950(d,J＝2.0Hz,1H),8.974(d,J＝6.4Hz,2H),9.101(d,J＝1.6Hz,1H),10.558(br s,1H)。

實(shí)施例23

N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物23)

N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(23)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中的化合物1的合成，只是將N-[2-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(1-K)替換為N-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二雜氧戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(2-K)，3-溴喹啉(Q3)替換為2-氨基-5-溴吡啶(B11)，得到淺棕色的固體產(chǎn)物N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(23)。MS(ESI positive ion)m/z:357.06(M+1),1HNMR(400MHz,CD₃OD):δppm3.875(s,1H),4.890(s,2H),6.673(d,J＝8.8,1H),7.527(t,J＝6.8,2H),7.606(t,J＝7.6Hz,1H),7.666-7.694(m,2H),7.818(d,J＝7.6Hz,2H),8.083(d,J＝1.6Hz,1H),8.160(d,J＝2.0Hz,1H),8.422(d,J＝1.6Hz,1H)。

實(shí)施例24

N-[2-氨基-5-(6-氨基吡啶-3-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物24)

1：叔丁基-5-溴吡啶-2-基羧酸胺(S1)

250mL圓底燒瓶中依次加入二氯甲烷(75mL)、2-氨基-5-溴吡啶(B11)(2.5g,14.455mmol)、二碳酸二叔丁酯(C5)(3.47g,15.9mmol)、三乙胺(2.19g,21.68mmol)、DMAP(0.79g,6.5mmol)，室溫下攪拌24h，反應(yīng)液用水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮，析出固體用正己烷重結(jié)晶，得到產(chǎn)物2-(N-叔丁氧羰基)氨基-5-溴吡啶(S1)。

2：叔丁基[5-(4，4,5,5-四甲基-1,3,2-二雜氧戊硼烷-2-基)吡啶-2-基羧酸胺(S2)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中的化合物1-K的合成，只是將N-(2-氯-5溴吡啶-3-基)苯磺酰胺(1-J)替換為2-(N-叔丁氧羰基)氨基-5-溴吡啶(S1)，得到淺白色的固體產(chǎn)物2-(N-叔丁氧羰基)氨基-[5-(4，4,5,5-四甲基-1,3,2-二雜氧戊硼烷-2-基)吡啶(S2)。

3：2-(N-叔丁氧羰基)氨基-[6-氨基-5-(苯磺酰胺)吡啶-3-基]吡啶(S3)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中的化合物1的合成，其中N-[2-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(1-K)替換為2-(N-叔丁氧羰基)氨基-[5-(4，4,5,5-四甲基-1,3,2-二雜氧戊硼烷-2-基)(S2)，3-溴喹啉(Q3)替換為N-(2-氨基-5-溴吡啶-3-基)苯磺酰胺(X1)，得到淺白色的固體產(chǎn)物2-(N-叔丁氧羰基)氨基-[6-氨基5-(苯磺酰胺)吡啶-3-基]吡啶(S3)。

4：N-[2-氨基-5-(6-氨基吡啶-3-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(24)的制備

25mL的圓底燒瓶中依次加入2-(N-叔丁氧羰基)氨基-[6-氨基5-(苯磺酰胺)吡啶-3-基]吡啶(S3)(54mg,0.12mmol)、三氟乙酸(1.5mL)、二氯甲烷(1.5mL)，室溫?cái)嚢?h，真空濃縮，殘余物DCM溶解，飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，干燥，過濾，濃縮，二氯甲烷/乙酸乙酯重結(jié)晶得到淺白色的固體產(chǎn)物N-[2-氨基-5-(6-氨基吡啶-3-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(24)。MS(ESI positive ion)m/z:342.39(M+1),1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δppm 4.828-4.865(brs,4H),6.602(d,J＝8.4,1H),7.474(t,J＝6.0Hz,2H),7.596(t,J＝8.0Hz,2H),7.679(d,J＝7.6Hz,2H),7.753(d,J＝7.6Hz 2H),8.126(d,J＝7.2Hz,1H),8.457(s,1H)。

實(shí)施例25

N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)-2-甲基吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物25)

1：N-[2-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二雜氧戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(3-K)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中的化合物1-K的合成，只是將N-(2-氯-5溴吡啶-3-基)苯磺酰胺(1-J)替換為N-(2-甲基-5溴吡啶-3-基)苯磺酰胺(3-J)，得到淺棕色的固體產(chǎn)物N-[2-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二雜氧戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(3-K)。

2：N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)-2-甲基吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物25)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中的化合物1的合成，只是將N-[2-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(1-K)替換為N-[2-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二雜氧戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(3-K)，3-溴喹啉(Q3)替換為2-氨基-5-溴吡啶(B11)，得到淺棕色的固體產(chǎn)物N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)-2-甲基吡啶-3-基]苯磺酰胺(25)。MS(ESI positive ion)m/z:341.1(M+1),1HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm 2.255(s,3H),4.828-4.865(br s,2H),6.602(d,J＝8.4,1H),7.474(t,J＝6.0Hz,2H),7.596(t,J＝8.0Hz,2H),7.679(d,J＝7.6Hz,2H),7.753(d,J＝7.6Hz 2H),8.126(d,J＝7.2Hz,1H),8.457(s,1H)。

實(shí)施例26

N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)-2-甲氧基吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物26)

1：N-[2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二雜氧戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(4-K)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中的化合物1-K的合成，只是將N-(2-氯-5溴吡啶-3-基)苯磺酰胺(1-J)替換為N-(2-甲氧基-5溴吡啶-3-基)苯磺酰胺(4-J)，得到淺棕色的固體產(chǎn)物N-[2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二雜氧戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(4-K)。

2：N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)-2-甲氧基吡啶-3-基]苯磺酰胺(26)的制備

實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中的化合物1的合成，只是將N-[2-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(1-K)替換為N-[2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二雜氧戊硼烷-2-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(4-K)，3-溴喹啉(Q3)替換為2-氨基-5-溴吡啶(B11)，得到淺棕色的固體產(chǎn)物N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)-2-甲氧基吡啶-3-基]苯磺酰胺(26)。MS(ESI positive ion)m/z:357.06(M+1),1HNMR(400MHz,CDCl₃):δppm3.835(s,3H),4.561-4.563(br s,2H),6.589(d,J＝8.4,1H),6.949-6.984(brs,1H),7.461(t,J＝8.0Hz,2H),7.563(m,2H),7.814(d,J＝7.2Hz,2H),7.891(d,J＝2.0Hz,1H),7.973(d,J＝2.4Hz,1H),8.201(d,J＝2.0Hz,1H)。

本發(fā)明化合物對(duì)PI3Kα和PI3Kγ活性抑制的檢測(cè)和結(jié)果

本發(fā)明化合物對(duì)PI3Kα的活性抑制作用通過下述Kinase-Glo Luminescent Kinase Assay方法評(píng)價(jià)；對(duì)PI3Kγ的活性抑制作用通過下述ADP-Glo Luminescent Kinase Assay方法來評(píng)價(jià)。

體外PI3Kα抑制測(cè)試：

檢測(cè)工具：

采用Kinase-Glo Plus Luminescent Kinase Assay(Kinase-Glo Plus激酶發(fā)光檢測(cè))試劑盒來測(cè)試目標(biāo)化合物激酶抑制活性。

原理：

Kinase-Glo Plus Luminescent Kinase Assay是一種均質(zhì)的非放射性的檢測(cè)方法，它是通過檢測(cè)激酶反應(yīng)體系中ATP的含量來定量測(cè)定純化激酶的活性。ATP含量的測(cè)定是通過由Mg²⁺、ATP和氧催化螢火蟲熒光素(beetle luciferin)發(fā)生氧化后產(chǎn)生的光強(qiáng)度來定量的。在反應(yīng)體系中加入一定量的ATP，激酶反應(yīng)需要消耗ATP，剩余的ATP可以與Kinase-Glo試劑中的螢火蟲熒光素酶發(fā)生反應(yīng)后發(fā)光，從而可以定量檢測(cè)剩余的ATP的量，間接地測(cè)定反應(yīng)激酶的活性。

檢測(cè)方法：

將受試化合物用100％二甲亞砜(DMSO)配制為最高反應(yīng)抑制濃度的100×濃度，吸取100μL至96孔板一孔中，然后用100％DMSO逐孔進(jìn)行3倍的濃度梯度稀釋，配制10個(gè)濃度，“完 全”和“空白”對(duì)照孔用100μL的100％DMSO代替。其中，“完全”對(duì)照孔為無化合物組，“空白”對(duì)照孔為無激酶組。配制含4％DMSO的化合物中間稀釋物，配制方法為向檢測(cè)板的各孔中加入4μL化合物和96μL 1×激酶基礎(chǔ)緩沖液。將2.5μL上述化合物中間稀釋物加入反應(yīng)板，然后將2.5μL 4×激酶溶液(將激酶加入1×激酶基礎(chǔ)緩沖液(50mM HEPES、pH 7.5、1mM EGTA、100mM NaCl、3mM MgCl₂、2mM DTT、0.03％CHAPS配制而成))加入至檢測(cè)板各孔中。室溫孵育10分鐘。將5μL 2×的底物溶液(將PIP2和ATP加入1×激酶基礎(chǔ)緩沖液配制而成)加入檢測(cè)板各孔中，室溫孵育1小時(shí)，加入10μL終止液(Kinase-Glo reagent)終止反應(yīng)。振蕩，離心1分鐘，低速振蕩15分鐘，然后Flexstation讀板進(jìn)行檢測(cè)，最后根據(jù)RLU值及“完全”和“空白”對(duì)照孔的讀數(shù)計(jì)算出化合物各濃度下的抑制率，結(jié)合化合物濃度作圖計(jì)算IC₅₀值。

體外PI3Kγ抑制測(cè)試：

目標(biāo)化合物對(duì)PI3Kγ的抑制作用通過ADP-Glo Luminescent Kinase Assay方法來評(píng)價(jià)。

ADP-Glo Luminescent Kinase Assay方法的檢測(cè)原理：

ADP-Glo Luminescent Kinase Assay是一個(gè)發(fā)光法的激酶檢測(cè)試劑盒，它檢測(cè)激酶反應(yīng)中所形成的ADP，ADP被轉(zhuǎn)化成ATP，再進(jìn)一步被Ultra-Glo熒光素酶轉(zhuǎn)化發(fā)光。發(fā)光信號(hào)與激酶活性正相關(guān)。

檢測(cè)方法：

將受試化合物用100％二甲亞砜(DMSO)配制為最高反應(yīng)抑制濃度的100×濃度，吸取100μL至96孔板一孔中，然后用100％DMSO逐孔進(jìn)行3倍的濃度梯度稀釋，配制10個(gè)濃度，“陰性”和“陽(yáng)性”對(duì)照孔用100μL的100％DMSO代替。其中，“陰性”對(duì)照孔為DMSO有酶組，“陽(yáng)性”對(duì)照孔為無激酶組。隨后，配制含4％DMSO的化合物中間稀釋物，配制方法為向檢測(cè)板的各孔中加入4μL化合物和96μL 1×激酶基礎(chǔ)緩沖液。將2.5μL上述化合物中間稀釋物加入反應(yīng)板，然后將2.5μL 4×激酶溶液(將激酶加入1×激酶基礎(chǔ)緩沖液(50mM HEPES、pH 7.5、1mM EGTA、100mM NaCl、3mM MgCl₂、2mM DTT、0.03％CHAPS配制而成))加入至檢測(cè)板各孔中。室溫孵育10分鐘。將5μL 2×的底物溶液(將PIP2和ATP加入1×激酶基礎(chǔ)緩沖液配制而成)加入檢測(cè)板各孔中，室溫孵育1小時(shí)，加入5μL終止液(ADP-Glo reagent)終止反應(yīng)。室溫孵育1小時(shí),加入10μL激酶檢測(cè)液(Kinase detection reagent)振蕩，離心1分鐘，低速振蕩1小時(shí)，然后SnygerMax讀板進(jìn)行檢測(cè)，最后根據(jù)RLU值及“陽(yáng)性”和“陰性”對(duì)照孔的讀數(shù)計(jì)算出化合物各濃度下的抑制率，結(jié)合化合物濃度作圖計(jì)算IC₅₀值。

測(cè)試結(jié)果：

經(jīng)PI3K激酶生物化學(xué)活性測(cè)試法測(cè)試，所有實(shí)施例1-26中的化合物1-26都對(duì)PI3Kα、PI3Kγ激酶的活性有明顯的抑制作用。除了下列化合物以外，所有其它化合物在3微摩爾濃度下對(duì)PI3Kα、PI3Kγ激酶的活性抑制率都超過了50％，最高的達(dá)到了100％。

下列化合物在3微摩爾濃度下對(duì)PI3Kα激酶的活性抑制率在20-50％之間：

N-{6-氯-6’-(甲基磺酰胺)-[3,3’-二吡啶]-5-基}苯磺酰胺(化合物17)；

N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物23)；

N-[2-氨基-5-(6-氨基吡啶-3-基)吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物24)；

N-[5-(6-氨基吡啶-3-基)-2-甲基吡啶-3-基]苯磺酰胺(化合物25)。

下列化合物在3微摩爾濃度下對(duì)PI3Kγ激酶的活性抑制率在20-50％之間：

N-{6-氯-6’-(甲基磺酰胺)-[3,3’-二吡啶]-5-基}苯磺酰胺(化合物17)。

值得特別強(qiáng)調(diào)的是，本發(fā)明實(shí)施例中的化合物2、化合物3、化合物15對(duì)PI3Kα的IC₅₀值甚至低于100nM，；化合物2、化合物3、化合物4、化合物7、化合物14、化合物15、化合物16、化合物17、化合物18對(duì)PI3Kγ的IC₅₀值低于100nM，這些化合物顯示了很強(qiáng)的對(duì)PI3Kα、PI3Kγ亞型的抑制作用，可以進(jìn)一步開發(fā)成PI3K激酶亞型高選擇性抑制劑。

以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并非用于限制本發(fā)明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，本發(fā)明可以有各種變化或改變。凡在本發(fā)明的精神和原則范圍之內(nèi)，所做出的任何修改、修飾、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。