本發(fā)明總體上涉及用于治療絲狀病毒科(filoviridae)病毒感染的方法和化合物，特別是用于治療埃博拉病毒、馬爾堡病毒和彎曲病毒的方法和核苷。

背景技術(shù)：

絲狀病毒(例如埃博拉病毒(ebov)和馬爾堡病毒(marv))是最致命和最具破壞性的病毒之一。它們在人類和非人靈長類動物(例如猴、大猩猩和黑猩猩)中引起嚴(yán)重的、通常是致命的病毒性出血熱。由于可以作為氣溶膠傳播和武器化，因此絲狀病毒作為可能的生化武器而受到特別的關(guān)注。

絲狀病毒感染的潛伏期為2至21天。疾病的開始是突發(fā)的，其特征在于高燒、頭痛、關(guān)節(jié)和肌肉酸痛、喉嚨痛、疲勞、腹瀉、嘔吐和胃痛。一些患者可能會看到皮疹、紅眼、打嗝和內(nèi)外出血。在感染病毒的一周內(nèi)，大多數(shù)患者經(jīng)歷胸痛和多器官衰竭，進(jìn)入休克并死亡。有些患者在死亡前也會出現(xiàn)盲癥和大量出血。

絲狀病毒科是一種rna病毒家族。已鑒定了兩個絲狀病毒科家族成員：ebov和marv。已鑒定兩個關(guān)鍵的致病型絲狀病毒家族：埃博拉病毒和marv。存在一個確定的marv變種和五個已鑒定的埃博拉病毒的種：扎伊爾(即埃博拉病毒，ebov)、蘇丹、塔伊森林、邦地布優(yōu)和雷斯頓。絲狀病毒科的確切來源，位置和自然棲息地是未知的。然而，根據(jù)現(xiàn)有的證據(jù)和類似病毒的性質(zhì)，推測絲狀病毒科是人畜共患(即動物傳播)的，通常保持在非洲大陸本土的動物宿主中。

30多年來，埃博拉病毒與在中非洲地區(qū)出現(xiàn)的定期爆發(fā)的導(dǎo)致感染患者嚴(yán)重疾病的出血熱關(guān)聯(lián)起來。爆發(fā)時的死亡率從埃博拉病毒蘇丹種(sebov)的50％至高達(dá)埃博拉病毒扎伊爾種(ebov，zebov)的90％不等(sanchezetal.,filoviridae:marburgandebolaviruses,infieldsvirology(eds.knipe,d.m.&howley,p.m.)1409-1448(lippincottwilliams&wilkins,philadelphia))。2007年晚些時候由明顯新的埃博拉病毒物種在烏干達(dá)引起的疫情導(dǎo)致約25％的死亡率(towneretal.,plospathog.,4:e1000212(2008))。zebov也在非洲同一地區(qū)成批殺死了野生大猩猩(walshetal.,nature,422:611-614(2003))。

絲狀病毒、包括埃博拉病毒(即ebov)感染的預(yù)防和治療遇到了許多挑戰(zhàn)。事實(shí)上，目前還沒有用于預(yù)防或控制ebov感染的疫苗或暴露后治療形式?；颊咿D(zhuǎn)而接受支持性療法，即電解質(zhì)和液體平衡，氧氣、血壓維持和對任何二次感染的治療。

考慮到治療絲狀病毒感染的新療法的重要性，需要新的有效的制備核糖核苷、核糖核苷的磷酸鹽和前藥。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種制備式v化合物的方法：

制備式v化合物的方法包括在適于制備式v化合物的條件下形成含有偶聯(lián)劑、鹵代硅烷、式vi化合物和式vii化合物的反應(yīng)混合物：

其中各pg獨(dú)立地為羥基保護(hù)基，或者在相鄰碳原子上的兩個pg基團(tuán)可以一起形成-c(r¹⁹)2-基團(tuán)，r¹⁰為h或甲硅烷基，并且r¹⁹為h、c1-c8烷基、苯基或取代的苯基。

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了制備式v-a或式v-b化合物的方法：

制備式v-a或式v-b化合物的方法包括在適于制備式v-a或式v-b化合物的條件下形成含有去質(zhì)子化試劑、甲硅烷基化試劑、偶聯(lián)劑、添加劑、式vi-a化合物和式vii化合物的反應(yīng)混合物：

其中各r^b獨(dú)立地為羥基保護(hù)基，或者相鄰碳原子上的兩個r^b基團(tuán)可以一起形成–c(r¹⁹)2-基團(tuán)，r¹⁰為h或甲硅烷基，并且r¹⁹為h、c1-c8烷基、苯基或取代的苯基。

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了制備式xi化合物的方法：

其中r^c為h或羥基保護(hù)基，或者在相鄰碳原子上的兩個r^c可以一起形成-c(r¹⁹)2-基團(tuán)，并且r¹⁹為h或c1-c8烷基。

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了制備式xi-a化合物的方法：

其中該方法包括在適合于制備式xi化合物的條件下，形成含有氰化試劑、路易斯酸、布朗斯臺德酸、溶劑和式v-a或v-b化合物的反應(yīng)混合物：

其中r^b獨(dú)立地為羥基保護(hù)基，或者相鄰碳原子上的兩個r^b基團(tuán)一起形成–c(r¹⁹)2-基團(tuán)，r¹⁰為h或甲硅烷基，并且r¹⁹為h、c1-c8烷基、苯基或取代的苯基。

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了制備式xi-b化合物的方法：

其中該方法包括在適合制備式xi-b化合物的條件下形成含有路易斯酸、堿、溶劑、過濾試劑、以及式xi-a化合物的反應(yīng)混合物：

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了制備式xi-c化合物的方法：

其中該方法包括在適于制備式xi-c化合物的條件下形成含有溶劑、反應(yīng)劑和式xi-b化合物的反應(yīng)混合物：

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了制備式viii化合物的方法：

其中該方法包括在適于形成式viii化合物的條件下形成含有偶聯(lián)劑、非親核性堿、式ix化合物和式x化合物的反應(yīng)混合物：

其中各r^a為h或pg，各pg基團(tuán)為羥基保護(hù)基，或者兩個pg基團(tuán)一起形成-c(r¹⁹)2-，r^e1和r^e2各自獨(dú)立地為h、c1-c6烷基或芐基，r^f為h、c1-c8烷基、芐基、c3-c6環(huán)烷基或–ch2-c3-c6環(huán)烷基，r¹⁹為h、c1-c8烷基、苯基或取代的苯基，以及l(fā)g為離去基團(tuán)。

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了制備式viii化合物的方法：

其中該方法包括在適于形成式viii化合物的條件下形成含有偶聯(lián)劑、非親核性堿、式ix-a化合物和式x化合物的反應(yīng)混合物：

其中r^a獨(dú)立地為h或羥基保護(hù)基，或者相鄰碳原子上的兩個r^a可以一起形成-c(r¹⁹)2-基團(tuán)，r³⁵獨(dú)立地為h或羥基保護(hù)基，或者相鄰碳原子上的兩個r³⁵可以一起形成-c(r¹⁹)2-基團(tuán)，r¹⁹為h或c1-c8烷基，r^e1和r^e2各自獨(dú)立地為h、c1-c6烷基或芐基，r^f為h、c1-c8烷基、芐基、c3-c6環(huán)烷基、或–ch2-c3-c6環(huán)烷基，r¹⁹為h、c1-c8烷基、苯基或取代的苯基，并且lg為離去基團(tuán)。

在一個實(shí)施方案中，提供了一種通過對(2s)-2-(((4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸2-乙基丁基酯(式x-a)進(jìn)行結(jié)晶誘導(dǎo)的動態(tài)解析以提供(式x-b)的方法：

發(fā)明詳述

i.定義

除非另有說明，用于本文中的以下術(shù)語和短語具有如下含義：

當(dāng)本文使用商品名稱時，申請人希望獨(dú)立地包括商品名稱產(chǎn)品和商品名產(chǎn)品的活性藥物成分。

本文所用的“本發(fā)明化合物”或“式v化合物”是指式v化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或共晶體。在一些實(shí)施方案中，“本發(fā)明的化合物”或“式v化合物”是指式v化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。類似地，關(guān)于可分離的中間體，短語“式(編號)的化合物”是指該式及其藥學(xué)上可接受的鹽或共晶體的化合物。在一些實(shí)施方案中，關(guān)于可分離的中間體，短語“式(編號)的化合物”是指該式及其藥學(xué)上可接受的鹽的化合物。

“烷基”是含有正、仲、叔或環(huán)碳原子的烴。例如，烷基基團(tuán)可以具有1至20個碳原子(即c1-c20烷基)，1至8個碳原子(即c1-c8烷基)，或者1至6個碳原子(即c1-c6烷基)。合適的烷基的實(shí)例包括但不限于甲基(me，-ch3)、乙基(et，-ch2ch3)、1-丙基(n-pr，n-丙基，-ch2ch2ch3)、2-丙基(i-pr，i-丙基，-ch(ch3)2)、1-丁基(n-bu，n-丁基，-ch2ch2ch2ch3)、2-甲基-1-丙基(i-bu，i-丁基，-ch2ch(ch3)2)、2-丁基(s-bu，s-丁基，-ch(ch3)ch2ch3)、2-甲基-2-丙基(t-bu，t-丁基，-c(ch3)3)、1-戊基(n-戊基，-ch2ch2ch2ch2ch3)、2-戊基(-ch(ch3)ch2ch2ch3)、3-戊基(-ch(ch2ch3)2)、2-甲基-2-丁基(-c(ch3)2ch2ch3)、3-甲基-2-丁基(-ch(ch3)ch(ch3)2)、3-甲基-1-丁基(-ch2ch2ch(ch3)2)、2-甲基-1-丁基(-ch2ch(ch3)ch2ch3)、1-己基(-ch2ch2ch2ch2ch2ch3)、2-己基(-ch(ch3)ch2ch2ch2ch3)、3-己基(-ch(ch2ch3)(ch2ch2ch3))、2-甲基-2-戊基(-c(ch3)2ch2ch2ch3)、3-甲基-2-戊基(-ch(ch3)ch(ch3)ch2ch3)、4-甲基-2-戊基(-ch(ch3)ch2ch(ch3)2)、3-甲基-3-戊基(-c(ch3)(ch2ch3)2)、2-甲基-3-戊基(-ch(ch2ch3)ch(ch3)2)、2,3-二甲基-2-丁基(-c(ch3)2ch(ch3)2)、3,3-二甲基-2-丁基(-ch(ch3)c(ch3)3和辛基(-(ch2)7ch3)。

“烷氧基”是指具有式-o-烷基的基團(tuán)，其中如上定義的烷基經(jīng)由氧原子與母體分子連接。烷氧基的烷基部分可以具有1至20個碳原子(即c1-c20烷氧基)，1至12個碳原子(即c1-c12烷氧基)，或者1至6個碳原子(即c1-c6烷氧基)。合適的烷氧基的實(shí)例包括但不限于甲氧基(-o-ch3或–ome)、乙氧基(-och2ch3或-oet)、t-丁氧基(-o-c(ch3)3或–otbu)等。

“鹵代烷基”是如上定義的烷基，其中烷基的一個或多個氫原子被鹵素原子取代。鹵代烷基的烷基部分可以具有1至20個碳原子(即c1-c20鹵代烷基)、1至12個碳原子(即c1-c12鹵代烷基)，或1至6個碳原子(即c1-c6鹵代烷基)。合適的鹵代烷基基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于-cf3、-chf2、-cfh2、-ch2cf3等。

“烯基”是指含有正、仲、叔或環(huán)碳原子且具有至少一個不飽和位點(diǎn)即碳-碳sp2雙鍵的烴。例如，烯基可以具有2至20個碳原子(即c2-c20烯基)、2至8個碳原子(即c2-c8烯基)或2至6個碳原子(c2-c6烯基)。合適的烯基基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于乙烯基(-ch＝ch2)、烯丙基(-ch2ch＝ch2)、環(huán)戊烯基(-c5h7)和5-己烯基(-ch2ch2ch2ch2ch＝ch2)。

“炔基”是指含有正、仲、叔或環(huán)碳原子且具有至少一個不飽和位點(diǎn)即碳-碳sp三鍵的烴。例如，炔基可以具有2至20個碳原子(即c2-c20炔基)，2至8個碳原子(即c2-c8炔基)或2至6個碳原子(即c2-c6炔基)。合適的炔基基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于乙炔基(-c≡ch)，炔丙基(-ch2c≡ch)等。

“亞烷基”是指具有兩個單價基團(tuán)中心的飽和的支鏈或直鏈或環(huán)狀烴基，其通過從母體烷烴的同一碳原子或兩個不同碳原子去除兩個氫原子而獲得。例如，亞烷基可以具有1至20個碳原子，1至10個碳原子或1至6個碳原子。典型的亞烷基包括但不限于亞甲基(-ch2-)、1,1-亞乙基(-ch(ch3)-)、1,2-亞乙基(-ch2ch2-)、1,1-亞丙基(-ch(ch2ch3)-)、1,2-亞丙基(-ch2ch(ch3)-)、1,3-亞丙基(-ch2ch2ch2-)、1,4-亞丁基(-ch2ch2ch2ch2-)等。

“亞烯基”是指具有兩個單價基團(tuán)中心的不飽和的支鏈或者直鏈或環(huán)狀烴基，其通過從母體烯烴的同一碳原子或兩個不同碳原子去除兩個氫原子而獲得。例如，亞烯基可以具有1至20個碳原子、1至10個碳原子或1至6個碳原子。典型的亞烯基包括但不限于1,2-亞乙烯基(-ch＝ch-)。

“亞炔基”是指具有兩個單價基團(tuán)中心的不飽和的支鏈或直鏈或環(huán)狀烴基，其通過從母體炔的同一碳原子或兩個不同碳原子上除去兩個氫原子而獲得。例如，亞炔基可以具有1至20個碳原子，1至10個碳原子或1至6個碳原子。典型的亞炔基包括但不限于亞乙炔基(-c≡c-)、亞炔丙基(-ch2c≡c-)和4-亞戊炔基(-ch2ch2ch2c≡c-)。

“氨基”通常是指具有式-n(x)2的可以被認(rèn)為是氨的衍生物的氮自由基，其中每個“x”獨(dú)立地是h、取代或未取代的烷基、取代或未取代的碳環(huán)基、取代或未取代的雜環(huán)基等。氮的雜化近似sp³雜化。氨基的非限制性類型包括–nh2、-n(烷基)2、-nh(烷基)、-n(碳環(huán)基)2、-nh(碳環(huán)基)、-n(雜環(huán)基)2、-nh(雜環(huán)基)、-n(芳基)2、-nh(芳基)、-n(烷基)(芳基)、-n(烷基)(雜環(huán)基)、-n(碳環(huán)基)(雜環(huán)基)、-n(芳基)(雜芳基)、-n(烷基)(雜芳基)，等。術(shù)語“烷基氨基”是指被至少一個烷基基團(tuán)取代的氨基。氨基基團(tuán)的非限制性實(shí)例包括–nh2、-nh(ch3)、-n(ch3)2、-nh(ch2ch3)、-n(ch2ch3)2、-nh(苯基)、-n(苯基)2、-nh(芐基)、-n(芐基)2，等等。取代的烷基氨基通常是指如上所述的烷基氨基基團(tuán)，其中至少一個本文定義的取代的烷基連接至氨基氮原子。取代的烷基氨基的非限制性實(shí)例包括-nh(亞烷基-c(o)-oh)、-nh(亞烷基-c(o)-o-烷基)、-n(亞烷基-c(o)-oh)2、-n(亞烷基-c(o)-o-烷基)2，等等。

“芳基”是指通過從母體芳族環(huán)系統(tǒng)的單個碳原子除去一個氫原子衍生的芳族烴基。例如，芳基可以具有6至20個碳原子、6至14個碳原子或6至10個碳原子。典型的芳基包括但不限于衍生自苯(例如苯基)、取代的苯、萘、蒽、聯(lián)苯基等的基團(tuán)。其他典型的芳基團(tuán)包括但不限于苯基。

“芳基烷基”是指無環(huán)的烷基基團(tuán)，其中至少一個連接至碳原子的一個氫原子(通常為末端或sp³碳原子)被芳基基團(tuán)替代。通常的芳基烷基基團(tuán)包括但不限于芐基、2-苯基乙-1-基、萘甲基、2-萘乙-1-基、萘并芐基、2-萘并苯乙-1-基，等等。芳基烷基基團(tuán)可包含7至20個碳原子，例如烷基部分為1至6個碳原子，并且芳基部分為6至14個碳原子。

“芳基烯基”是指無環(huán)的烯基基團(tuán)，其中至少一個連接至碳原子的一個氫原子(通常為末端或sp³碳原子，也可以是sp²碳原子)被芳基基團(tuán)替代。芳基烯基的芳基部分可以包括例如本文公開的任何一種芳基基團(tuán)，并且芳基烯基的烯基部分可以包括例如本文公開的任何一種烯基。芳基烯基基團(tuán)可以包括8至20個碳原子，例如烯基部分為2至6個碳原子，芳基部分為6至14個碳原子。

“芳基炔基”是指無環(huán)的炔基基團(tuán)，其中至少一個連接至碳原子的一個氫原子(通常為末端或sp³碳原子，也可以是sp碳原子)被芳基基團(tuán)替代。芳基炔基的芳基部分可以包括例如本文公開的任何一種芳基基團(tuán)，并且芳基炔基的炔基部分可以包括例如本文公開的任何一種炔基。芳基炔基基團(tuán)可以包括8至20個碳原子，例如炔基部分為2至6個碳原子，芳基部分為6至14個碳原子。

在烷基、烯基、芳基、芳烷基、烷氧基、雜環(huán)基、雜芳基、碳環(huán)基等中的術(shù)語“取代的”，例如“取代的烷基”、“取代的烯基”、“取代的芳基”、“取代的芳烷基”、“取代的雜環(huán)基”和“取代的碳環(huán)基”中所提到的“取代的”是指其中一個或多個氫原子各自獨(dú)立地被非氫取代基替換的烷基、烯基、芳基、芳烷基、雜環(huán)基、碳環(huán)基。術(shù)語“取代的苯基”是指其中一個或多個氫原子各自獨(dú)立地被非氫取代基替換的苯基。典型的取代基包括但不限于-x、-r^b、-o^-、＝o、-or^b、-sr^b、-s^-、-nr^b2、-n⁺r^b3、＝nr^b、-cx3、-cn、-ocn、-scn、-n＝c＝o、-ncs、-no、-no2、＝n2、-n3、-nhc(＝o)r^b、-oc(＝o)r^b、-nhc(＝o)nr^b2、-s(＝o)2-、-s(＝o)2oh、-s(＝o)2r^b、-os(＝o)2or^b、-s(＝o)2nr^b2、-s(＝o)r^b、-op(＝o)(or^b)2、-p(＝o)(or^b)2、-p(＝o)(o^-)2、-p(＝o)(oh)2、-p(o)(or^b)(o^-)、-c(＝o)r^b、-c(＝o)x、-c(s)r^b、-c(o)or^b、-c(o)o^-、-c(s)or^b、-c(o)sr^b、-c(s)sr^b、-c(o)nr^b2、-c(s)nr^b2、-c(＝nr^b)nr^b2,，其中每個x獨(dú)立地為鹵素：f、cl、br或i；且每個r^b獨(dú)立地為h、烷基、芳基、芳烷基、雜環(huán)或保護(hù)基或前藥部分。亞烷基、亞烯基和亞炔基也可以相似地被取代。除非另有說明，當(dāng)術(shù)語“取代的”與諸如具有兩個或多個能夠取代的部分的芳基烷基結(jié)合使用時，取代基可以連接到芳基部分、烷基部分或兩者。

本文所用的術(shù)語“前藥”是指當(dāng)向生物機(jī)體施用時，由于自發(fā)化學(xué)反應(yīng)、酶催化的化學(xué)反應(yīng)、光解作用和/或代謝化學(xué)反應(yīng)生成藥物物質(zhì)即活性成分的任何化合物。因此，前藥是有治療活性化合物的共價修飾的類似物或潛在形式。

本領(lǐng)域技術(shù)人員會認(rèn)識到，式i-iv化合物的取代基和其它部分應(yīng)被選擇以提供足夠穩(wěn)定的化合物以提供藥學(xué)上可用的化合物，其可以被配制成可接受穩(wěn)定的藥物組合物。具有這種穩(wěn)定性的式i-iv化合物被認(rèn)為落入本發(fā)明的范圍內(nèi)。

“雜烷基”是指其中一個或多個碳原子已經(jīng)被雜原子如o、n或s替代的烷基基團(tuán)。例如，如果連接到母體分子的烷基基團(tuán)的碳原子被雜原子(例如o、n或s)替代，所得雜烷基分別是烷氧基(例如-och3等)、胺(例如-nhch3、-n(ch3)2等)或硫代烷基(例如，-sch3)。如果烷基的未連接到母體分子的非末端碳原子被雜原子(例如o、n或s)替代，則所得的雜烷基分別是烷基醚(例如-ch2ch2-o-ch3等)、烷基胺(例如-ch2nhch3、-ch2n(ch3)2等)或硫代烷基醚(例如-ch2-s-ch3)。如果烷基的末端碳原子被雜原子(例如o、n或s)替代，則所得雜烷基分別為羥烷基(例如-ch2ch2-oh)、氨基烷基(例如，-ch2nh2)或烷基硫醇基團(tuán)(例如，-ch2ch2-sh)。雜烷基可具有例如1至20個碳原子，1至10個碳原子或1至6個碳原子。c1-c6雜烷基意指具有1至6個碳原子的雜烷基。

本文中的“雜環(huán)”或“雜環(huán)基”包括例如但不限于如下文獻(xiàn)中描述的雜環(huán)：paquette,leoa.；principlesofmodernheterocyclicchemistry(w.a.benjamin,newyork,1968)，特別是第1、3、4、6、7和9章；thechemistryofheterocycliccompounds,aseriesofmonographs”(johnwiley&sons,newyork,1950至今)，特別是第13、14、16、19和28卷；以及j.am.chem.soc.(1960)82:5566。在本發(fā)明的一個具體實(shí)施方案中，“雜環(huán)”包括本文中定義的“碳環(huán)”，其中一個或多個(例如1、2、3或4個)碳原子被雜原子(例如o、n或s)代替。術(shù)語“雜環(huán)”或“雜環(huán)基”包括飽和的環(huán)、部分不飽和的環(huán)，以及芳香環(huán)(即雜芳環(huán))。取代的雜環(huán)基包括例如被本文公開的任何取代基(包括羰基)取代的雜環(huán)。羰基取代的雜環(huán)基的非限制性實(shí)例是：

雜環(huán)的實(shí)例包括但不限于吡啶基、二氫吡啶基、四氫吡啶基(哌啶基)、噻唑基、四氫苯硫基、硫氧化四氫苯硫基、嘧啶基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、四唑基、苯并呋喃基、硫茚基(thianaphthalenyl)、吲哚基，indolenyl、喹啉基、異喹啉基、苯并咪唑基、哌啶基、4-哌啶酮基、吡咯烷基、2-吡咯烷酮基、吡咯啉基、四氫呋喃基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基、十氫喹啉基、八氫異喹啉基、吖辛因基(azocinyl)、三嗪基、6h-1,2,5-噻二嗪基、2h,6h-1,5,2-二噻嗪基、噻吩基、噻蒽基、吡喃基、異苯并呋喃基、色烯基、呫噸基、phenoxathinyl、2h-吡咯基、異噻唑基、異噁唑基、吡嗪基、噠嗪基、吲嗪基(indolizinyl)、異吲哚基、3h-吲哚基、1h-吲唑基、嘌呤基、4h-喹嗪基、酞嗪基、萘啶基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、蝶啶基、4ah-咔唑基、咔唑基、β-咔啉基、菲啶基、吖啶基、嘧啶基、菲咯啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、呋咱基、吩噁嗪基、異色滿基、色滿基、咪唑烷基、咪唑啉基、吡唑烷基、吡唑啉基、哌嗪基、二氫吲哚基、異二氫吲哚基、奎寧環(huán)基、嗎啉基、噁唑烷基、苯并三唑基、苯并異噁唑基、羥吲哚基、苯并噁唑啉基、異鳥?；?isatinoyl)和雙-四氫呋喃基：

作為示例而非限制，碳鍵合的雜環(huán)連接在吡啶的2、3、4、5或6位；噠嗪的3、4、5或6位；嘧啶的2、4、5或6位；吡嗪的2、3、5或6位；呋喃、四氫呋喃、噻吩(thiofuran，thiophene)、吡咯或四氫吡咯的2、3、4或5位；噁唑、咪唑或噻唑的2、4或5位；異噁唑、吡唑或異噻唑的3、4或5位，吖啶的2或3位；氮雜環(huán)丁烷的2、3或4位；喹啉的2、3、4、5、6、7或8位或異喹啉的1、3、4、5、6、7或8位。更通常地，碳鍵合的雜環(huán)包括2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、5-吡啶基、6-吡啶基、3-噠嗪基、4-噠嗪基、5-噠嗪基、6-噠嗪基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、6-嘧啶基、2-吡嗪基、3-吡嗪基、5-吡嗪基、6-吡嗪基、2-噻唑基、4-噻唑基或5-噻唑基。

作為示例而非限制，氮鍵合的雜環(huán)在吖啶、氮雜環(huán)丁烷、吡咯、吡咯烷、2-吡咯啉、3-吡咯啉、咪唑、咪唑烷、2-咪唑啉、3-咪唑啉、吡唑、吡唑啉、2-吡唑啉、3-吡唑啉、哌啶、哌嗪、吲哚、二氫吲哚、1h-吲唑的1位；異吲哚或異二氫吲哚的2位；嗎啉的4位；咔唑或β-咔啉的9位。更通常地，氮鍵合的雜環(huán)包括1-吖啶基、1-氮雜環(huán)丁基、1-吡咯基、1-咪唑基、1-吡唑基和1-哌啶基。

“雜環(huán)基烷基”是指非環(huán)狀烷基基團(tuán)，其中與碳原子(通常為末端或sp³碳原子)鍵合的氫原子中的一個被雜環(huán)基代替(即雜環(huán)基-亞烷基-部分)。典型的雜環(huán)基烷基包括但不限于雜環(huán)基-ch2-，2-(雜環(huán)基)乙-1-基等，其中“雜環(huán)基”部分包括上文所述的任何雜環(huán)基，包括在principlesofmodernheterocyclicchemistry中公開的那些。本領(lǐng)域技術(shù)人員會理解，雜環(huán)基可以通過碳-碳鍵或碳-雜原子鍵連接至雜環(huán)基烷基的烷基部分上，前提是所得的基團(tuán)是化學(xué)穩(wěn)定的。雜環(huán)基烷基包括3至20個碳原子，例如芳烷基的烷基部分為1-6個碳原子，雜環(huán)基部分為2至14個碳原子。雜環(huán)基烷基的實(shí)例包括但不限于含硫、氧和/或氮的5-元雜環(huán)，例如噻唑基甲基、2-噻唑基乙-1-基、咪唑基甲基、噁唑基甲基、噻二唑基甲基等；含硫、氧和/或氮的6元雜環(huán)如哌啶基甲基、哌嗪基甲基、嗎啉基甲基、吡啶基甲基、吡啶基甲基、嘧啶基甲基、吡嗪基甲基等等。

“雜環(huán)基烯基”是指非環(huán)狀烯基基團(tuán)，其中與碳原子(通常為末端或sp³碳原子，也可以是sp²碳原子)鍵合的氫原子中的一個被雜環(huán)基代替(即雜環(huán)基-烯基-部分)。典型的雜環(huán)基烯基的雜環(huán)基部分包括本文中所描述的任何雜環(huán)基，包括在principlesofmodernheterocyclicchemistry中公開的那些，并且雜環(huán)基烯基的烯基部分包括本文所公開的任意烯基。本領(lǐng)域技術(shù)人員會理解，雜環(huán)基可以通過碳-碳鍵或碳-雜原子鍵連接至雜環(huán)基烯基的烯基部分，前提是所獲得的基團(tuán)是化學(xué)穩(wěn)定的。雜環(huán)基烯基基團(tuán)包括4至20個碳原子，例如，雜環(huán)基烯基的烯基部分為2至6個碳原子，并且雜環(huán)基部分為2至14個碳原子。

“雜環(huán)基炔基”是指非環(huán)狀炔基基團(tuán)，其中與碳原子(通常為末端或sp3碳原子，也可以是sp碳原子)鍵合的氫原子中的一個被雜環(huán)基代替(即雜環(huán)基-炔基-部分)。雜環(huán)基炔基的雜環(huán)基部分包括本文中所描述的任何雜環(huán)基，包括在principlesofmodernheterocyclicchemistry中公開的那些，并且雜環(huán)基炔基的炔基部分包括本文所公開的任意炔基。本領(lǐng)域技術(shù)人員會理解，雜環(huán)基可以通過碳-碳鍵或碳-雜原子鍵連接至雜環(huán)基炔基的炔基部分，前提是所獲得的基團(tuán)是化學(xué)穩(wěn)定的。雜環(huán)基炔基基團(tuán)包括4至20個碳原子，例如雜環(huán)基炔基的炔基部分為2至6個碳原子，并且雜環(huán)基部分為2至14個碳原子。

“雜芳基”是指在環(huán)中具有至少一個雜原子的芳族雜環(huán)基?？梢园ㄔ诜辑h(huán)中的合適雜原子的非限制性實(shí)例包括氧、硫和氮。雜芳基環(huán)的非限制性實(shí)例包括所有在“雜環(huán)基”的定義中列出的芳香環(huán)，包括吡啶基、吡咯基、噁唑基、吲哚基、異吲哚基、嘌呤基、呋喃基、噻吩基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、咔唑基、咪唑基、噻唑基、異噁唑基、吡唑基、異噻唑基、喹啉基、異喹啉基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基等。

“碳環(huán)”或“碳環(huán)基”是指具有3至7個碳原子作為單環(huán)，7至12個碳原子作為雙環(huán)，和至多約20個碳原子作為多環(huán)的飽和、部分不飽和或芳香的環(huán)。單環(huán)碳環(huán)具有3至7個環(huán)原子，還更通常為5或6個環(huán)原子。雙環(huán)碳環(huán)具有7-12個環(huán)原子，例如排列為雙環(huán)[4,5]、[5,5]、[5,6]或[6,6]系統(tǒng)，或具有9或10個環(huán)原子，排列為雙環(huán)[5,6]或[6,6]系統(tǒng)，或者稠合螺環(huán)。單環(huán)碳環(huán)的非限制性實(shí)例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、1-環(huán)戊-1-烯基、1-環(huán)戊-2-烯基、1-環(huán)戊-3-烯基、環(huán)己基、1-環(huán)己-1-烯基、1-環(huán)己-2-烯基、1-環(huán)己-3-烯基和苯基。雙環(huán)碳環(huán)的非限制性實(shí)例包括萘基、四氫萘和十氫萘。

“碳環(huán)基烷基”是指非環(huán)狀烷基基團(tuán)，其中與碳原子鍵合的氫原子中的一個被如上定義的碳環(huán)基團(tuán)替代。典型但非限制性的碳環(huán)基烷基包括環(huán)丙基甲基、環(huán)丙基乙基、環(huán)丁基甲基、環(huán)戊基甲基和環(huán)己基甲基。

“芳基雜烷基”是指本文所定義的雜烷基，其中氫原子(其可連接于碳原子或雜原子上)已經(jīng)被本文定義的芳基代替。芳基可以與雜烷基的碳原子鍵合，或者與雜烷基的雜原子鍵合，條件是所得芳基雜烷基提供了化學(xué)上穩(wěn)定的基團(tuán)部分。例如，芳基雜烷基可以具有通式-亞烷基-o-芳基、-亞烷基-o-亞烷基-芳基、-亞烷基-nh-芳基、-亞烷基-nh-亞烷基-芳基、-亞烷基-s-芳基、-亞烷基-s-亞烷基芳基等。此外，上述通式中的任何亞烷基部分可以進(jìn)一步用本文定義或例舉的任何取代基取代。

“雜芳基烷基”是指本文所定義的烷基，其中氫原子已經(jīng)被本文定義的雜芳基替代。雜芳基烷基的非限制性實(shí)例包括-ch2-吡啶基、-ch2-吡咯基、-ch2-噁唑基、-ch2-吲哚基、-ch2-異吲哚基、-ch2-嘌呤基、-ch2-呋喃基、-ch2-噻吩基、-ch2-苯并呋喃基、-ch2-苯并噻吩基、-ch2-咔唑基、-ch2-咪唑基、-ch2-噻唑基、-ch2-異噁唑基、-ch2-吡唑基、-ch2-異噻唑基、-ch2-喹啉基、-ch2-異喹啉基、-ch2-噠嗪基、-ch2-嘧啶基、-ch2-吡嗪基、-ch(ch3)-吡啶基、-ch(ch3)-吡咯基、-ch(ch3)-噁唑基、-ch(ch3)-吲哚基、-ch(ch3)-異吲哚基、-ch(ch3)-嘌呤基、-ch(ch3)-呋喃基、-ch(ch3)-噻吩基、-ch(ch3)-苯并呋喃基、-ch(ch3)-苯并噻吩基、-ch(ch3)-咔唑基、-ch(ch3)-咪唑基、-ch(ch3)-噻唑基、-ch(ch3)-異噁唑基、-ch(ch3)-吡唑基、-ch(ch3)-異噻唑基、-ch(ch3)-喹啉基、-ch(ch3)-異喹啉基、-ch(ch3)-噠嗪基、-ch(ch3)-嘧啶基、-ch(ch3)-吡嗪基等。

在指代式i-iv化合物的特定部分(例如，任選取代的芳基)時，術(shù)語“任選取代”是指其中所有取代基為氫或其中基團(tuán)部分的一個或多個氫可以被諸如在“取代的”的定義下列出的取代基取代。

在提及本發(fā)明式i-iv的化合物的特定部分時的術(shù)語“任選替換的”(例如所述(c1-c8)烷基的碳原子可以任選地被-o-、-s-、或–nr^a-替換)是指(c1-c8)烷基的一個或多個亞甲基基團(tuán)被0、1、2或更多個所確定的取代基(例如–o-、-s-、或–nr^a-)替換。

在提及烷基、烯基、炔基、亞烷基、亞烯基或亞炔基部分時的術(shù)語“非末端碳原子”是指在基團(tuán)部分的第一個碳原子和最后一個碳原子之間插入的部分中的碳原子。因此，作為示例而非限制，在烷基部分-ch2(c^*)h2(c^*)h2ch3或烯基部分-ch2(c^*)h2(c^*)h2ch2-中，c^*原子可以被認(rèn)為是非末端碳原子。

一些q和q¹替代物是氮氧化物，例如⁺n(o)(r)或⁺n(o)(or)。這些附著在碳原子上的氮氧化物也可以由電荷分離的基團(tuán)表示，分別例如：

并且想要是與前述用于描述本發(fā)明的目的的代表物是等同的。

“接頭”或“連接”是指包含共價鍵或原子鏈的化學(xué)部分。接頭包括烷氧基重復(fù)單元(例如聚乙烯氧基、peg、聚亞甲基氧基)和烷基氨基(例如聚乙烯氨基、jeffamine^tm)重復(fù)單元；以及二酸酯和酰胺，包括琥珀酸酯、琥珀酰胺、二乙酸酯、丙二酸酯和己酰胺。

諸如“氧連接的”、“氮連接的”、“碳連接的”、“硫連接的”或“磷連接的”的術(shù)語意指在兩個部分之間的鍵可以通過使用基團(tuán)部分中多于一個的原子類型形成時，則部分之間經(jīng)由所指定的原子形成鍵。例如，氮連接的氨基酸將通過氨基酸的氮原子而不是通過氨基酸的氧或碳原子鍵合。

在式i-iv的化合物的一些實(shí)施方案中，z¹或z²中的一個或多個獨(dú)立地是氮連接的天然存在的α-氨基酸酯的基團(tuán)。天然存在的氨基酸的實(shí)例包括異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、色氨酸、纈氨酸、丙氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、脯氨酸、硒代半胱氨酸、絲氨酸、酪氨酸、精氨酸、組氨酸、鳥氨酸和?；撬?。這些氨基酸的酯包括對于取代基r所述的那些，特別是其中r是任選取代的(c1-c8)烷基的那些。

術(shù)語“嘌呤”或“嘧啶”堿包括但不限于腺嘌呤、n⁶-烷基嘌呤、n⁶-酰基嘌呤(其中?；莄(o)烷基、芳基、烷基芳基或芳基烷基)，n⁶-芐基嘌呤、n⁶-鹵代嘌呤、n⁶-乙烯基嘌呤、n⁶-炔基嘌呤、n⁶-?；堰?、n⁶-羥烷基嘌呤、n⁶-烯丙基氨基嘌呤、n⁶-硫代烯丙基嘌呤、n²-烷基嘌呤、n²-烷基-6-硫嘌呤、胸腺嘧啶、胞嘧啶、5-氟胞嘧啶、5-甲基胞嘧啶、6-氮雜嘧啶，包括6-氮雜胞嘧啶、2-和/或4-巰基嘧啶、尿嘧啶、5-鹵代尿嘧啶包括5-氟尿嘧啶、c⁵-烷基嘧啶、c⁵-芐基嘧啶、c⁵-鹵代嘧啶、c⁵-乙烯基嘧啶、c⁵-炔基嘧啶、c⁵-酰基嘧啶、c⁵-羥烷基嘌呤、c⁵-氨基嘧啶、c⁵-氰基嘧啶、c⁵-5-碘嘧啶、c⁶-碘-嘧啶、c⁵-br-乙烯基嘧啶、c⁶-br-乙烯基吡啶、c⁵-硝基嘧啶、c⁵-氨基-嘧啶、n²-烷基嘌呤、n²-烷基-6-硫嘌呤、5-氮雜胞嘧啶基、5-氮雜尿嘧啶基、三唑并吡啶基、咪唑并吡啶基、吡咯并嘧啶基和吡唑并嘧啶基。嘌呤堿包括但不限于鳥嘌呤、腺嘌呤、次黃嘌呤、2,6-二氨基嘌呤和6-氯嘌呤。嘌呤和嘧啶堿基通過堿的氮原子與核糖或其類似物連接。堿上的官能氧和氮基團(tuán)可以根據(jù)需要或期望進(jìn)行保護(hù)。合適的保護(hù)基是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的，包括三甲基甲硅烷基、二甲基己基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基和叔丁基二苯基甲硅烷基、三苯甲基、烷基、和?；缫阴；捅；⒓谆酋；蛯妆交酋；?。

除非另有說明，式i-iv化合物的碳原子為四價。在其中碳原子沒有足夠數(shù)量的連接以產(chǎn)生四價的變量的一些化學(xué)結(jié)構(gòu)表示中，提供四價化合物所需的剩余碳取代基應(yīng)認(rèn)為是氫。例如，

具有與相同的含義。

“保護(hù)基”是指掩蔽或改變官能團(tuán)的性質(zhì)或化合物整體的性質(zhì)的化合物的基團(tuán)部分。保護(hù)基的化學(xué)亞結(jié)構(gòu)變化很大。保護(hù)基團(tuán)的一個功能是用作合成親本藥物的中間體。化學(xué)保護(hù)基團(tuán)和保護(hù)/去保護(hù)的策略是本領(lǐng)域公知的。參見“protectivegroupsinorganicchemistry”，theodoraw.greene(johnwiley&sons,inc.,newyork,1991)。另參見protectivegroupsinorganicchemistry，petergmwutsandtheodoraw.greene，第4版，2006。保護(hù)基通常被用于掩蓋某些官能團(tuán)的反應(yīng)性，以幫助所需化學(xué)反應(yīng)的效率，例如以有序和計(jì)劃的方式制備和破壞化學(xué)鍵。除反應(yīng)性以外，化合物官能團(tuán)的保護(hù)還改變了受保護(hù)的官能團(tuán)的其他物理性質(zhì)，如極性、親脂性(疏水性)以及其他可通過常用分析工具測定的性質(zhì)，化學(xué)保護(hù)的中間體本身可能是生物活性的或無活性的?！傲u基保護(hù)基”是指可用于保護(hù)羥基(-oh)的保護(hù)基。

受保護(hù)的化合物還可以表現(xiàn)出改變的、并且在一些情況下優(yōu)化的體外和體內(nèi)性質(zhì)，例如穿過細(xì)胞膜和對酶降解或螯合具有抗性。在這個作用中，具有預(yù)期治療作用的受保護(hù)化合物可以被稱為前藥。保護(hù)基團(tuán)的另一個作用是將母體藥物轉(zhuǎn)化為前藥，由此前藥在體內(nèi)轉(zhuǎn)化以釋放母體藥物。因?yàn)榛钚郧八幙梢员饶阁w藥物更有效地吸收，所以前藥在體內(nèi)可能比母體藥物具有更大的效力。對于化學(xué)中間體，保護(hù)基團(tuán)在體外除去，而對于前藥，保護(hù)基團(tuán)在體內(nèi)除去。對于化學(xué)中間體，脫保護(hù)后得到的產(chǎn)物，例如醇是生理上可接受的這一點(diǎn)不是特別重要，但總地來說希望產(chǎn)品在藥理學(xué)上是無害的。

術(shù)語“手性”是指具有與其鏡像配偶體不重疊的性質(zhì)的分子，而術(shù)語“非手性”是指與其鏡像配偶體重疊的分子。

術(shù)語“立體異構(gòu)體”是指具有相同化學(xué)構(gòu)成但空間原子或基團(tuán)的排列不同的化合物。

“非對映體”是指具有兩個或更多個手性中心的立體異構(gòu)體，其分子不是彼此的鏡像。非對映異構(gòu)體具有不同的物理性質(zhì)，例如熔點(diǎn)、沸點(diǎn)、光譜性質(zhì)、反應(yīng)性和生物學(xué)特性。例如，當(dāng)r⁷是如下基團(tuán)時，式i-iv的化合物可具有手性磷原子：

其中z¹和z²不同。當(dāng)z¹或z²中的至少一個也具有手性中心時，例如z¹或z²是氮鍵連接的手性天然存在的α-氨基酸酯，則式i-iv化合物將以非對映異構(gòu)體存在，因?yàn)榉肿又杏袃蓚€手性中心。本文描述的所有這些非對映異構(gòu)體及其用途都包括在本發(fā)明中。非對映異構(gòu)體的混合物可以在高分辨率分析程序如電泳、結(jié)晶和/或色譜法下分離。非對映異構(gòu)體可以具有不同的物理屬性，例如但不限于溶解度、化學(xué)穩(wěn)定性和結(jié)晶度，并且還可以具有不同的生物學(xué)特性，例如但不限于酶穩(wěn)定性、吸收和代謝穩(wěn)定性。

“對映異構(gòu)體”是指化合物的兩種立體異構(gòu)體，它們是彼此不重疊的鏡像。

結(jié)合數(shù)量使用的修飾語“約”包括所述值，并具有上下文規(guī)定的含義(例如，包括與特定數(shù)量的測量相關(guān)聯(lián)的誤差程度)。

除非另有說明，本文所用的動詞術(shù)語“治療”是指逆轉(zhuǎn)、緩解、抑制該術(shù)語適用的病癥或病癥，或該癥狀或病癥的一種或多種癥狀。本文所用的名詞術(shù)語“治療”是指如在上面定義的動詞“治療”所描述的治療的行為。

本文所用的術(shù)語“治療有效量”是在氣道和肺的分泌物和組織中提供所需水平的藥物所需要的本文所述組合物中存在的式i-iv化合物的量，或者，當(dāng)通過所選擇的施用途徑施用這樣的組合物時，待處理對象的血流中產(chǎn)生預(yù)期的生理反應(yīng)或期望的生物效應(yīng)。精確的量將取決于許多因素，例如具體的式i-iv化合物、組合物的比活性、所用的遞送裝置、組合物的物理特性、其預(yù)期用途以及患者考慮如疾病狀態(tài)的嚴(yán)重性，患者協(xié)作等，并且可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員基于本文提供的信息容易地確定。

術(shù)語“生理鹽水”是指含有0.9％(w/v)nacl的水溶液。

術(shù)語“高滲鹽水”是指含有大于0.9％(w/v)nacl的水溶液。例如，3％高滲鹽水含有3％(w/v)nacl。

“形成反應(yīng)混合物”是指使至少兩種不同物質(zhì)接觸的過程，以使得它們混合在一起并且可以反應(yīng)。然而，應(yīng)當(dāng)理解，所得到的反應(yīng)產(chǎn)物可以直接從添加的試劑之間的反應(yīng)或從可由一種或多種添加的試劑的在反應(yīng)混合物中產(chǎn)生的中間體而產(chǎn)生。

“偶聯(lián)劑”是指能夠偶聯(lián)兩種不同化合物的試劑。偶聯(lián)劑可以是催化的或化學(xué)計(jì)量的。例如，偶聯(lián)劑可以是鋰基偶聯(lián)劑或鎂基偶聯(lián)劑如格氏試劑。示例性偶聯(lián)劑包括但不限于n-buli、mgcl2、iprmgcl、tbumgcl、phmgcl或其組合。

“硅烷”是指具有式sir4的含硅基團(tuán)，其中每個r基團(tuán)可以是烷基、烯基、環(huán)烷基、苯基或其它含硅基團(tuán)。當(dāng)硅烷與另一種化合物連接時，硅烷被稱為“甲硅烷基”，并具有式-sir3。

“鹵代硅烷”是指具有與硅原子連接的至少一個鹵素基團(tuán)的硅烷。代表性的鹵代硅烷具有式鹵素-sir3，其中每個r基團(tuán)可以是烷基、烯基、環(huán)烷基、苯基或其它含硅基團(tuán)。具體的鹵代硅烷包括cl-si(ch3)3和cl-si(ch3)2ch2ch2si(ch3)2-cl。

“非親核堿”是指電子供體，路易斯堿，例如氮堿，包括三乙胺、二異丙基乙基胺、n,n-二乙基苯胺、吡啶、2,6-二甲基吡啶、2,4,6-可力丁、4-二甲基氨基吡啶和奎寧環(huán)。

“離去基團(tuán)”是指在雜原子鍵斷裂期間保持鍵合電子對的基團(tuán)。例如，離去基團(tuán)在親核置換反應(yīng)期間容易被置換。合適的離去基團(tuán)包括但不限于氯化物、溴化物、甲磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、三氟甲磺酸鹽、4-硝基苯磺酸鹽、4-氯苯磺酸鹽、4-硝基苯氧基、五氟苯氧基等。本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識到其它在本發(fā)明中有用的離去基團(tuán)。

“脫保護(hù)劑”是指能夠除去保護(hù)基的任何試劑。脫保護(hù)劑將取決于所使用的保護(hù)基團(tuán)的類型。代表性的脫保護(hù)劑是本領(lǐng)域已知的，可以在protectivegroupsinorganicchemistry,peterg.m.wutsandtheodoraw.greene,4thed.,2006中找到。

ii.化合物的制備

本發(fā)明的化合物可以通過多種方法制備。例如，可以通過在合適的偶聯(lián)條件下將受保護(hù)的內(nèi)酯與碘取代的堿反應(yīng)來制備式v的被保護(hù)的核苷。然后可以通過部分保護(hù)的核苷與合適的前藥部分的反應(yīng)用前藥部分修飾核苷，然后除去保護(hù)基團(tuán)，得到本發(fā)明的化合物。

a.通過碘代堿制備核苷

在一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了制備式v化合物的方法：

制備式v化合物的方法包括在適合于制備式v化合物的條件下形成含有偶聯(lián)劑、鹵代硅烷、式vi化合物和式vii化合物的混合物：

其中各pg獨(dú)立地為羥基保護(hù)基，或者在相鄰的碳上的兩個pg基團(tuán)可以一起形成–c(r¹⁹)2基團(tuán)，r¹⁰為h或甲硅烷基，以及r¹⁹為h、c1-c8烷基、苯基或取代的苯基。

任何合適的偶聯(lián)劑都可用于制備式v化合物的方法中。偶聯(lián)劑可以是鋰偶聯(lián)劑、鈉偶聯(lián)劑、鎂偶聯(lián)劑等。例如，偶聯(lián)劑可以是去質(zhì)子化試劑，例如正丁基鋰(n-buli)、氫化鈉(nah)，氫化鋁鋰(lah或lialh4)等。偶聯(lián)劑也可以是鎂基偶聯(lián)劑，例如但不限于mgcl2、iprmgcl、tbumgcl、phmgcl或其組合。在一些實(shí)施方案中，偶聯(lián)劑可以是鋰偶聯(lián)劑或鎂偶聯(lián)劑。在一些實(shí)施方案中，偶聯(lián)劑可以是n-buli、mgcl2、iprmgcl、tbumgcl、phmgcl或其組合。在一些實(shí)施方案中，偶聯(lián)劑可以是n-buli。在一些實(shí)施方案中，偶聯(lián)劑可以是phmgcl和iprmgcl。

偶聯(lián)劑可以任何合適的量存在。例如，偶聯(lián)劑可以以與式v化合物至少1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。偶聯(lián)劑也可以以與式v化合物約1.0至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約1.0至約5.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，偶聯(lián)劑可以以與式v化合物約1.0至約5.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，偶聯(lián)劑可以以與式v化合物約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。

任何合適的鹵代硅烷可用在制備式v化合物的方法中。例如，鹵代硅烷可以是氟硅烷、氯硅烷、溴硅烷或碘硅烷。硅烷部分可以具有任何合適的取代基，例如烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基或苯基。示例性的鹵代硅烷包括但不限于cl-si(ch3)3或cl-si(ch3)2ch2ch2si(ch3)2-cl。在一些實(shí)施方案中，鹵代硅烷可以是氯硅烷。在一些實(shí)施方案中，鹵代硅烷可以是cl-si(ch3)3或cl-si(ch3)2ch2ch2si(ch3)2-cl。在一些實(shí)施方案中，鹵代硅烷可以是tmscl。

r¹⁰的甲硅烷基可以是任何合適的基團(tuán)，但可以取決于所選擇的鹵代硅烷。例如，當(dāng)鹵代硅烷是tmscl時，甲硅烷基可以是三甲基甲硅烷基。

鹵代硅烷可以任何合適的量存在。例如，鹵代硅烷可以以相對于式v化合物至少1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。鹵代硅烷也可以以相對于式v化合物約1.0至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約1.0至約5.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，鹵代硅烷可以以相對于式v化合物約1.0至約5.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，鹵代硅烷可以以相對于式v化合物約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。

羥基保護(hù)基可以是任何適用于羥基官能團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)。代表性的羥基保護(hù)基包括但不限于硅烷如三甲基硅烷(tms)、叔丁基二甲基硅烷(tbdms)或叔丁基二苯基硅烷(tbdps)，醚如甲基-甲氧基(mom)、四氫吡喃(thp)、叔丁基、烯丙基或芐基，以及酯如乙?；⑿挛祯；虮郊柞；?。在一些實(shí)施方案中，羥基保護(hù)基可以是三甲基硅烷(tms)、叔丁基二甲基硅烷(tbdms)、叔丁基二苯基硅烷(tbdps)、甲基-甲氧基(mom)、四氫吡喃(thp)、叔丁基、烯丙基、芐基、乙酰基、新戊?；虮郊柞；?。在一些實(shí)施方案中，羥基保護(hù)基可以是芐基。

相鄰碳上的羥基稱為1,2-羥基，其可以通過與二醚或酮反應(yīng)而形成稱為丙酮化合物的環(huán)狀保護(hù)基。示例性的丙酮化合物包括但不限于丙酮化合物和苯亞甲基縮醛。在一些實(shí)施方案中，相鄰碳原子上的羥基保護(hù)基團(tuán)可以組合形成丙酮化合物。

當(dāng)r¹⁹基團(tuán)為c1-c8烷基，r¹⁹可以是甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、新戊基、己基、異己基、新己基、壬基或辛基。在一些實(shí)施方案中，r¹⁹基團(tuán)可以是甲基。

在本發(fā)明的方法中可以使用任何合適的溶劑。代表性的溶劑包括但不限于戊烷、不同的戊烷、己烷、不同的己烷、庚烷、不同的庚烷、石油醚、環(huán)戊烷、不同的環(huán)己烷、苯、甲苯、二甲苯、三氟甲苯，鹵代苯如氯苯、氟苯、二氯苯和二氟苯，二氯甲烷、氯仿、丙酮、乙酸乙酯、二乙醚、四氫呋喃或其組合。在一些實(shí)施方案中，溶劑可以是四氫呋喃。

方法中的反應(yīng)混合物可以是任何合適的溫度。例如，反應(yīng)混合物可以是約-78℃至約100℃，或者為約-50℃至約100℃，或者為約-25℃至約50℃，或約-10℃至約25℃，或約0℃至約20℃。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)混合物的溫度可以是約0℃至約20℃。

該方法的反應(yīng)混合物可以處于任何合適的壓力下。例如，反應(yīng)混合物可以在大氣壓下。反應(yīng)混合物也可以暴露于任何合適的環(huán)境，例如大氣氣體，或惰性氣體如氮?dú)饣驓鍤狻?/p>

本發(fā)明的方法可以以任何合適的產(chǎn)率提供式v化合物。例如，式v化合物可以以至少約50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或至少約95％的產(chǎn)率制備。

本發(fā)明的方法可以提供任何純度的式v化合物。例如，式v化合物可以以至少約90、95、96、97、98或至少約99％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式v化合物可以至少95％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式v化合物可以以至少98％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式v化合物可以以至少99％的純度制備。

在一些實(shí)施方案中，該方法包括制備式v化合物：

其中該方法包括在適合于制備式v化合物的條件下形成具有tmscl、phmgcl、iprmgcl、式vi化合物和式vii化合物的反應(yīng)混合物：

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了化合物：

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了制備式v-a或式v-b化合物的方法：

制備式v-a或式v-b化合物的方法包括在適合于制備式v-a或式v-b化合物的條件下形成具有去質(zhì)子化試劑、甲硅烷基化試劑、偶聯(lián)劑、添加劑、式vi-a化合物，以及式vii化合物的反應(yīng)混合物：

其中各r^b獨(dú)立地為羥基保護(hù)基，或者相鄰碳原子上的兩個r^b基團(tuán)可以一起形成–c(r¹⁹)2-基團(tuán)，r¹⁰為h或甲硅烷基，并且r¹⁹為h、c1-c8烷基、苯基或取代的苯基。

任何合適的去質(zhì)子化試劑可用于制備式v-a或式v-b化合物的方法中。去質(zhì)子化試劑可以是鈉去質(zhì)子化試劑、鎂基去質(zhì)子化試劑、鋰基去質(zhì)子化試劑、鉀基去質(zhì)子化試劑等。例如，去質(zhì)子化試劑可以是氫化鈉(nah)、異丙基氯化鎂(iprmgcl)、叔丁基氯化鎂(tbumgcl)、苯基氯化鎂(phmgcl)、苯基溴化鎂(phmgbr)、丁基鋰(buli)、甲基鋰(meli)、甲基氯化鎂(memgcl)、甲基溴化鎂(memgbr)、叔丁基鋰(tbuli)、異丙基鋰(iprli)、苯基鋰(phli)、氫化鋰(lih)、氫化鉀(kh)、乙基鋰(etli)、乙基溴化鎂(etmgbr)、乙基氯化鎂(etmgcl)、丙基鋰(prli)、丙基溴化鎂(prmgbr)、丙基氯化鎂(prmgcl)、環(huán)己烷鋰(cyhexli)、環(huán)己烷溴化鎂(cyhexmgbr)、環(huán)己烷氯化鎂(cyhexmgcl)或其組合。在一些實(shí)施方案中，去質(zhì)子化試劑可以是phmgcl。

去質(zhì)子化試劑可以任何合適的量存在。例如，去質(zhì)子化試劑可以以相比于式vii化合物至少0.1當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1、0.5、1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。去質(zhì)子化試劑也可以以相比于式vii化合物約0.1至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1至約3.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，去質(zhì)子化試劑可以以相比于式vii化合物約0.1至1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，去質(zhì)子化試劑的存在量為相比于式vii化合物約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。

在制備式v-a或v-b化合物的方法中可以使用任何合適的甲硅烷基化劑。例如，甲硅烷化劑可以是氟硅烷、氯硅烷、溴硅烷或碘硅烷。例如，甲硅烷化劑可以是三取代的甲硅烷基氯、三取代的甲硅烷基溴、三取代的甲硅烷基碘或三取代的甲硅烷基氟。甲硅烷基部分可以具有任何合適的取代基，例如烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基或苯基。示例性甲硅烷基化劑包括但不限于cl-si(ch3)3、cl-si(ch3)2ch2ch2si(ch3)2-cl或叔丁基二苯基甲硅烷基(tbdps)。在一些實(shí)施方案中，甲硅烷基化劑可以是氯硅烷。在一些實(shí)施方案中，甲硅烷化劑可以是cl-si(ch3)3或cl-si(ch3)2ch2ch2si(ch3)2-cl。在一些實(shí)施方案中，甲硅烷基化劑可以是tmscl。

r¹⁰的甲硅烷基可以是任何合適的基團(tuán)，但可以取決于甲硅烷基化劑的選擇。例如，當(dāng)甲硅烷基化劑是tmscl時，甲硅烷基可以是三甲基甲硅烷基。

甲硅烷化劑可以任何合適的量存在。例如，甲硅烷化劑可以以相對于式vii化合物至少0.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.0、0.1、0.5、1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。甲硅烷基化劑也可以以相對于式vii化合物約0.0至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.0至約3.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，甲硅烷化劑可以以約相對于式vii化合物0.0至1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，甲硅烷化劑的存在量相對于式vii化合物為約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。

任何合適的偶聯(lián)劑都可用于制備v-a或v-b化合物的方法。偶聯(lián)劑可以是鋰偶聯(lián)劑、鎂基去質(zhì)子化試劑等。例如，偶聯(lián)劑可以是正丁基鋰(nbuli)、氯化鎂(mgcl2)、異丙基氯化鎂(iprmgcl)、異丙基氯化鎂-氯化鋰(iprmgcl-licl)、叔丁基氯化鎂(tbumgcl)、苯基氯化鎂(phmgcl)、甲基鋰(meli)、甲基氯化鎂(memgcl)、甲基溴化鎂(memgbr)、叔丁基鋰(tbuli)、異丙基鋰(iprli)、苯基鋰(phli)、氫化鋰(lih)、氫化鉀(kh)、氫化鈉(nah)、乙基鋰(etli)、乙基溴化鎂(etmgbr)、乙基氯化鎂(etmgcl)、丙基鋰(prli)、丙基溴化鎂(prmgbr)、丙基氯化鎂(prmgcl)、環(huán)己烷鋰(cyhexli)、環(huán)己烷溴化鎂(cyhexmgbr)、環(huán)己烷氯化鎂(cyhexmgcl)，或其組合。在一些實(shí)施方案中，偶聯(lián)劑可以是iprmgcl。

偶聯(lián)劑可以任何合適的量存在。例如，偶聯(lián)劑可以以相比于式vii化合物至少0.1當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1、0.5、1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。偶聯(lián)劑也可以以相對于式vii化合物約0.1至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1至約3.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，偶聯(lián)劑可以以相對于式vii化合物約0.1至1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，偶聯(lián)劑的存在量相對于式vii化合物為約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。

任何合適的添加劑可以用于制備式v-a或式v-b化合物的方法中。在一些實(shí)施方案中，所述添加劑為路易斯酸。在一些實(shí)施方案中，所述添加劑可以是bf3-oet2、sm(otf)3、sc(otf)3、fecl3、licl、libr、ticl(oipr)3、sccl3、bu4nbr+lacl3-2licl、nlacl3+mlicl，其中m為0.5至50，n為1至100、lacl3+2licl、sm(otf)3+licl、smcl3、雙[2-(n,n-二甲基氨基)乙基]醚、tmeda、ndcl3、ndcl3+cscl、nndcl3+mlicl，其中m為0.5至50，n為1至100、ndcl3+2licl、ndcl3+libr、ndcl3+lii、ndbr3、ndbr3+cscl、nndbr3+mlicl，其中m為0.5至50，n為1至100、ndbr3+2licl、ndbr3+libr、ndbr3+lii、nd(otf)3、cecl3、cecl3+cscl、ncecl3+mlicl，其中m為0.5至50，n為1至100、cecl3+2licl、cecl3+libr、cecl3+lii、cebr3、ce(otf)3、ycl3、ycl3+cscl、nycl3+mlicl，其中m為0.5至50，n為1至100、ycl3+2licl、ycl3+libr、ycl3+lii、ybr3、ybr3+cscl、nybr3+mlicl，其中m為0.5至50，n為1至100、ybr3+2licl、ybr3+libr、ybr3+lii、y(otf)3、lacl3、la(otf)3、mgcl2、ticl4、sncl4、alcl3、bu4ncl、二乙二醇二甲醚(dgde)、dgde+bu4ncl、dgde+bu4nbr、dgde+bu4ni、cacl2、cabr2、cai2、ca(otf)2、ycl3、ycl3-2licl、ycl3-licl或其組合。在一些實(shí)施方案中，所述添加劑可為licl、ca(otf)2、cacl2和mgcl2、cecl3、lacl3或其組合。在一些實(shí)施方案中，所述添加劑可為ycl3、cecl3、ndcl3、lacl3或其組合。

添加劑可以任何合適的量存在。例如，添加劑可以以相比于式vii化合物至少0.1當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1、0.5、1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。添加劑也可以以相比于式vii化合物約0.1至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1至約3.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，添加劑可以以相比于式vii化合物約0.1至1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，添加劑的存在量相比于式vii化合物約為1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。

在一些實(shí)施方案中，添加劑為lacl3-2licl，并且以相比于式vii化合物至少0.1當(dāng)量(mol/mol)，例如約0、0.1、0.3、0.5、1.0、2、或約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，添加劑為lacl3-2licl，其量相比于式vii化合物為約0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)，例如約0至約0.3當(dāng)量(mol/mol)，或?yàn)榧s0至約0.5當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，添加劑為lacl3-2licl，并且其存在量相比于式vii化合物為約0至0.5當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，添加劑為lacl3-2licl，并且其相比于式vii化合物的存在量為約0.5當(dāng)量(mol/mol)。

在一些實(shí)施方案中，添加劑為cecl3，并且其存在量相比于式vii化合物為至少0.1當(dāng)量(mol/mol)，例如約0、0.1、0.3、0.5、1.0、2，或約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，添加劑為cecl3，并且其存在量相比于式vii化合物為約0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)，例如約0至約0.3當(dāng)量(mol/mol)，或約0至約0.5當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，添加劑為cecl3，并且其存在量相比于式vii化合物為約0至0.5當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，添加劑為cecl3，并且其存在量相比于式vii化合物為約0.5當(dāng)量(mol/mol)。

在一些實(shí)施方案中，添加劑為ndcl3，并且其存在量相比于式vii化合物為至少0.1當(dāng)量(mol/mol)，例如約0、0.1、0.3、0.5、1.0、2，或約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，添加劑為ndcl3，并且其存在量相比于式vii化合物為約0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)，例如約0至約0.3當(dāng)量(mol/mol)，或約0至約0.5當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，添加劑為ndcl3，并且其存在量相比于式vii化合物為約0至0.5當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，添加劑為ndcl3，并且其存在量相比于式vii化合物為約0.5當(dāng)量(mol/mol)。

在一些實(shí)施方案中，添加劑為ycl3，并且其存在量相比于式vii化合物為至少0.1當(dāng)量(mol/mol)，例如約0、0.1、0.3、0.5、1.0、2，或約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，添加劑為ycl3，并且其存在量相比于式vii化合物為約0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)，例如約0至約0.3當(dāng)量(mol/mol)，或約0至約0.5當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，添加劑為ycl3，并且其存在量相比于式vii化合物為約0至0.5當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，添加劑為ycl3，并且其存在量相比于式vii化合物為約0.5當(dāng)量(mol/mol)。

當(dāng)r¹⁹基團(tuán)為c1-c8烷基時，r¹⁹可以是甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、新戊基、己基、異己基、新己基、庚基或辛基。在一些實(shí)施方案中，r¹⁹基團(tuán)可為甲基。

當(dāng)r^b基團(tuán)為羥基保護(hù)基時，r^b可以是任何在protectivegroupsinorganicchemistry,peterg.m.wutsandtheodoraw.greene,4thed.,2006中描述的保護(hù)基的實(shí)例。在一些實(shí)施方案中，r^b基團(tuán)可為芐基。在一些實(shí)施方案中，r^b基團(tuán)可為tbs。

羥基保護(hù)基可以是任何適用于羥基官能團(tuán)的保護(hù)基。代表性的羥基保護(hù)基包括但不限于硅烷、醚、酯等。代表性的羥基保護(hù)基包括但不限于三甲基硅烷(tms)、叔丁基二甲基硅烷(tbdms)、叔丁基二苯基硅烷(tbdps)、甲基甲氧基(mom)、四氫吡喃(thp)、叔丁基、烯丙基、芐基、乙酰基、新戊酰基或苯甲?；Ｔ谝恍?shí)施方案中，羥基保護(hù)基可以是三甲基硅烷(tms)、叔丁基二甲基硅烷(tbdms)、叔丁基二苯基硅烷(tbdps)、甲基甲氧基(mom)、四氫吡喃(thp)、叔丁基、烯丙基、芐基、乙酰基、新戊酰基或苯甲?；?。在一些實(shí)施方案中，羥基保護(hù)基可以是芐基。在一些實(shí)施方案中，羥基保護(hù)基可以是tbs。

相鄰碳上的羥基被稱作1,2-羥基，它們通過與醛、縮醛、酮或縮酮反應(yīng)可以形成被稱作縮醛或縮酮的環(huán)狀保護(hù)基。示例性的縮醛和縮酮包括但不限于亞芐基縮醛和丙酮化合物。在一些實(shí)施方案中，相鄰碳上的羥基基團(tuán)的羥基保護(hù)基可以一起以形成丙酮化合物。

任何合適的溶劑可以用于本發(fā)明的方法中。代表性的溶劑包括但不限于戊烷，不同的戊烷，己烷，不同的己烷，庚烷，不同的庚烷，石油醚，環(huán)戊烷，環(huán)己烷，苯，甲苯，二甲苯，二氯甲烷，三氟甲苯，鹵代苯如氯苯，氟苯，二氯苯和二氟苯，亞甲基氯，氯仿，丙酮，乙酸乙酯，二乙基醚，四氫呋喃(thf)，2-甲基四氫呋喃，二丁基醚，二異丙醚，甲基叔丁基醚，二甲氧基乙烷，二噁烷(1,4-二噁烷)，n-甲基吡咯烷酮(nmp)，二異丙醚或其組合。在某些實(shí)施方案中，溶劑可以是thf、methf、甲苯、thf+二噁烷、thf+吡啶或thf+dcm或其組合。在一些實(shí)施方案中，溶劑可以為thf。

該方法的反應(yīng)混合物可具有任意合適的溫度。例如，反應(yīng)混合物的溫度可以為約-78℃至約100℃，或約-50℃至約100℃，或約-25℃至約50℃，或約-10℃至約25℃，或約0℃至約20℃。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)混合物的溫度可為約0℃至約20℃。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)混合物的溫度可為約-30℃至約-10℃。

該方法的反應(yīng)混合物可具有任意合適的壓力。例如，反應(yīng)混合物可以在大氣壓下。反應(yīng)混合物也可以暴露于任何合適的環(huán)境，例如大氣氣體，或惰性氣體如氮?dú)饣驓鍤狻?/p>

本發(fā)明的方法可以以任何合適的產(chǎn)率提供式v-a或式v-b化合物。例如，式v-a或式v-b化合物可以以至少約50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或至少約95％的產(chǎn)率制備。

本發(fā)明的方法可以以任何合適的純度提供式v-a或式v-b化合物。例如，式v-a或式v-b化合物可以以至少約90、95、96、97、98或至少約99％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式v-a或式v-b化合物可以至少95％純度制備。在一些實(shí)施方案中，式v-a或式v-b化合物可以至少98％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式v-a或式v-b化合物可以至少99％純度制備。

在一些實(shí)施方案中，該方法包括制備式v-a或式v-b化合物：

其中該方法包括在適用于制備式v-a或式v-b化合物的條件下形成具有tmscl、phmgcl、iprmgcl、lacl3-2licl、式vi化合物和式vii化合物的反應(yīng)混合物：

在一些實(shí)施方案中，該方法包括制備式v-a或式v-b化合物：

其中該方法包括在適合于制備式v-a或式v-b化合物的條件下形成具有tmscl、phmgcl、iprmgcl、cecl3式vi化合物和式vii化合物的反應(yīng)混合物：

在一些實(shí)施方案中，該方法包括制備式v-a或式v-b化合物：

其中該方法包括在適合于制備式v-a或式v-b化合物的條件下形成具有tmscl、phmgcl、iprmgcl、ndcl3、式vi化合物和式vii化合物的反應(yīng)混合物：

在一些實(shí)施方案中，該方法包括制備式v-a或式v-b化合物:

其中該方法包括在適合于制備式v-a或式v-b化合物的條件下形成具有tmscl、phmgcl、iprmgcl、ycl3、式vi化合物和式vii化合物的反應(yīng)混合物：

在一些實(shí)施方案中，該方法包括制備式v-a化合物：

其中該方法包括在適合于制備式v-a化合物的條件下形成具有tmscl、phmgcl、iprmgcl-licl、lacl3-2licl、式vi化合物和式vii化合物的反應(yīng)混合物：

b.氰基核苷的制備

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了制備式xi化合物的方法：

其中r^c為h或羥基保護(hù)基，或者相鄰碳上的兩個r^c可以一起形成-c(r¹⁹)2-基團(tuán)，并且r¹⁹為h或c1-c8烷基。

當(dāng)r¹⁹基團(tuán)為c1-c8烷基時，r¹⁹可為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、新戊基、己基、異己基、新己基、庚基或辛基。在一些實(shí)施方案中，r¹⁹基團(tuán)可為甲基。

當(dāng)r^c基團(tuán)為羥基保護(hù)基時，羥基保護(hù)基可為任何適用于羥基官能團(tuán)的保護(hù)基。代表性的羥基保護(hù)基包括但不限于硅烷、醚、酯等。代表性的羥基保護(hù)基包括但不限于三甲基硅烷(tms)、叔丁基二甲基硅烷(tbdms)、叔丁基二苯基硅烷(tbdps)、甲基-甲氧基(mom)、四氫吡喃(thp)、叔丁基、烯丙基、芐基、乙?；⑽祯；虮郊柞；?。在一些實(shí)施方案中，羥基保護(hù)基可為三甲基硅烷(tms)、叔丁基二甲基硅烷(tbdms)、叔丁基二苯基硅烷(tbdps)、甲基-甲氧基(mom)、四氫吡喃(thp)、叔丁基、烯丙基、芐基、乙?；?、戊?；虮郊柞；?。在一些實(shí)施方案中，羥基保護(hù)基可為芐基。在一些實(shí)施方案中，羥基保護(hù)基可為tbs。

相鄰碳上的羥基稱為1,2-羥基，其可以通過與醛、縮醛、酮或縮酮的反應(yīng)而形成稱為縮醛或縮酮的環(huán)狀保護(hù)基。示例性的縮醛和縮酮包括但不限于亞芐基縮醛和丙酮化合物。在一些實(shí)施方案中，相鄰碳原子上的羥基保護(hù)基團(tuán)可以一起形成丙酮化合物。

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種制備式xi-a化合物的方法：

其中該方法包括在適用于制備式xi-a化合物的條件下形成具有氰化劑、路易斯酸、布朗斯臺德酸、溶劑，以及式v-a或式v-b化合物的反應(yīng)混合物：

其中r^b獨(dú)立地為羥基保護(hù)基，或者，在相鄰碳上的兩個r^b可以一起形成形成–c(r¹⁹)2-基團(tuán)，r¹⁰為h或甲硅烷基，并且r¹⁹為h、c1-c8烷基、苯基或取代的苯基。

任何合適的氰化劑都可用于制備式xi-a化合物的方法。例如，氰化劑可以是tmscn、tbscn、tescn、hcn、kcn、nacn、4-甲苯磺酰氰、cucn、cucn*licl、licn、zn(cn)2、k4[fe(cn)6]、四丁基氰化銨、四甲基氰化銨、四乙基氰化銨、四丁基氰化銨(包括四烷基氰化銨，其中烷基獨(dú)立地為me、et、pr、ipr、bu、ibu、叔丁基、戊基、己基)，氰化三丁基錫，氰化三甲基錫，氰化三乙基錫，氰化三丙基錫，(包括三烷基錫氰化物，其中烷基獨(dú)立地為me、et、pr、ipr、bu、ibu、叔丁基、戊基、己基)，2-羥基-2-甲基丙腈或其組合。在一些實(shí)施方案中，氰化劑可以是tmscn。

氰化劑可以任何合適的量存在。例如，氰化劑可以以相比于式v-a或式v-b化合物至少0.1當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1、0.5、1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。氰化劑也可以以相比于式v-a或式v-b化合物約0.1至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1至約3.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，氰化劑可以以相比于式v-a或式v-b化合物約0.1至1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，氰化劑的存在量相比于式v-a或式v-b化合物為約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。

任何合適的路易斯酸可用于制備式xi-a化合物的方法。例如，路易斯酸可為tmsotf、tmsotf、tbsotf、tesotf,bf3、bf3-oet2、bcl3、bf3-thf、mgcl2、mgi2、mgbr2、mgbr2-oet2、zncl2、znbr2、zni2、licl、libr、lii、alcl3、albr3、ali3、me2si(otf)2、et2si(otf)2、pr2si(otf)2、ipr2si(otf)2,(tbu)2si(otf)2、(c6f5)3b、mesicl3、me2sicl2、sicl4、tmscl、tmsi、tmsvr、tbscl、tbsbr、tbsi、tescl、tesbr、tesi、smcl3、smbr3、smi2、smi3、sci3、scbr3、sci3、sm(otf)3、sc(otf)3、ticl4、ti(oipr)4、ti(oipr)3cl、ti(oipr)2cl2、ti(oipr)cl3,zn(bf4)2、libf4、mg(bf4)2、zrcl4、fecl2、fecl3、febr2、febr3、fei2、fei3、cu(otf)、cu(otf)2、4-甲苯磺?；然?、苯磺?；?、4-甲苯磺?；谆撬狨?、苯磺?；谆撬狨?、甲基磺酰氯、甲基磺酸酐、incl3、inbr3、ini3、in(otf)3、mg(so4)2、naso4；或其組合。在一些實(shí)施方案中，路易斯酸可為tmsotf。在一些實(shí)施方案中，如下物質(zhì)可代替路易斯酸用于制備式xi-a化合物的方法中：二環(huán)己基碳二亞胺、1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基_碳二亞胺、苯磺酸、hcl、4-甲苯磺酸、三氟甲磺酸、三氟乙酸、4-硝基苯甲酸、甲基磺酸、硫酸、磷酸、hbr、乙酸、甲酸、hi；或其組合。

路易斯酸可以任何合適的量存在。例如，所述路易斯酸可以以相比于式v-a或式v-b化合物至少0.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.0、0.5、1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。路易斯酸可以以相比于式v-a或式v-b化合物約0.0至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.0至約3.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，路易斯酸可以以相比于式v-a或式v-b化合物約0.0至1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，路易斯酸可以以相比于式v-a或式v-b化合物約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。

在制備式xi-a化合物的方法中可以使用任何合適的布朗斯臺德酸。例如，布朗斯臺德酸可以是tfa、苯磺酸、hcl、4-甲苯磺酸、三氟甲磺酸、三氟乙酸、4-硝基苯甲酸、甲基磺酸、硫酸、磷酸、hbr、乙酸、甲酸、hi、三氟甲磺酸、4-氟苯甲酸、新戊酸、hbf4、硝酸、4-氯-苯甲酸、五氟苯酚、hpf6、樟腦磺酸；或其組合。在一些實(shí)施方案中，布朗斯臺德酸可以是tfa。

布朗斯臺德酸可以任何合適的量存在。例如，布朗斯臺德酸可以以相比于式v-a或v-b化合物至少約0.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.0、0.5、1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。布朗斯臺德酸也可以以相比于式v-a或v-b化合物約0.0至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.0至約3.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，布朗斯臺德酸可以以相比于式v-a或v-b化合物約0.0至約1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，布朗斯臺德酸可以以相比于式v-a或v-b化合物約為1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。

在制備式xi-a化合物的方法中可以使用任何合適的溶劑。例如，溶劑可以是dcm、thf、methf、et2o、mecn、etcn、甲苯、苯、氯苯、硝基苯、氟苯、甲醇、乙醇、2-丙醇、丙醇、丁醇、mtbe、etoac、iproac、me2o、(tms)2o、丙酮、2-丁酮、氯仿、1,2-二氯乙烷、二甘醇二甲醚、二噁烷、乙酸、甲酸、三氟乙酸、甲基異丁基酮、dmac、dmf、nmp、dmso；或其組合。在一些實(shí)施方案中，溶劑可以是dcm。

溶劑可以任何合適的量存在。例如，溶劑可以以相比于式v-a或v-b化合物至少0.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.0、0.1、0.5、1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。溶劑也可以以相比于式v-a或v-b化合物約0.0至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.0至約3.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，溶劑可以以相比于式v-a或v-b化合物約0.1至約1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，溶劑可以以相比于式v-a或v-b化合物約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。

該方法的反應(yīng)混合物可以具有任何合適的溫度。例如，反應(yīng)混合物的溫度可以為約-150℃至約0℃，或約-120℃至約0℃，或約-100℃至約0℃，或約-100℃至約-50℃，或約-100℃至約-70℃。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)混合物的溫度可以為約-120℃至約-70℃。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)混合物的溫度可以為約-120℃至約-100℃。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)混合物的溫度可為-80℃至約-30℃。

該方法的反應(yīng)混合物可在任何合適的壓力下進(jìn)行。例如，反應(yīng)混合物可以在大氣壓下。反應(yīng)混合物也可以暴露于任何合適的環(huán)境，例如大氣氣體，或惰性氣體如氮?dú)饣驓鍤狻?/p>

本發(fā)明的方法可以以任何合適的產(chǎn)率提供式xi-a的化合物。例如，式xi-a的化合物可以以至少約50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或至少約95％的產(chǎn)率制備。

本發(fā)明的方法可以提供任何合適純度的式xi-a化合物。例如，式xi-a的化合物可以以至少約90、95、96、97、98或至少約99％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式xi-a的化合物可以以至少約95％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式xi-a的化合物可以以至少約98％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式xi-a的化合物可以以至少約99％的純度制備。

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法可以分批法進(jìn)行。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法可以通過流動化學(xué)進(jìn)行。

在一些實(shí)施方案中，該方法包括制備式xi-a的化合物：

其中該方法包括在適合于制備式xi-a化合物的條件下形成具有tfa、tmscn、tmsotf和式v-a化合物或式v-b的反應(yīng)混合物：

在一些實(shí)施方案中，制備式xi-a的方法在約-120℃至約20℃之間進(jìn)行。在另一個實(shí)施方案中，制備式xi-a的方法在約-120℃至約0℃之間進(jìn)行。在另一個實(shí)施方案中，制備式xi-a的方法在約-40℃至約-20℃之間進(jìn)行。

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了制備式xi-a²化合物的方法：

其中所述方法包括在適合于制備式xi-a²化合物的條件下形成具有氰化劑、路易斯酸、布朗斯臺德酸、溶劑，以及式v-a化合物的反應(yīng)混合物：

其中r^b獨(dú)立地為羥基保護(hù)基，或者，相鄰碳上的兩個r^b基團(tuán)可以一起形成–c(r¹⁹)2-基團(tuán)，r¹⁰為h或甲硅烷基，并且r¹⁹為h、c1-c8烷基、苯基或取代的苯基。

任何合適的氰化劑都可用于制備式xi-a²化合物的方法。例如，氰化劑可以是tmscn、tbscn、tescn、hcn、kcn、nacn、4-甲苯磺酰氰、cucn、cucn*licl、licn、zn(cn)2、k4[fe(cn)6]、四丁基氰化銨、四甲基氰化銨、四乙基氰化銨、四丁基氰化銨(包括四烷基氰化銨，其中烷基獨(dú)立地為me、et、pr、ipr、bu、ibu、叔丁基、戊基、己基)，氰化三丁基錫、氰化三甲基錫、氰化三乙基錫、氰化三丙基錫、(包括三烷基錫氰化物，其中烷基獨(dú)立地為me、et、pr、ipr、bu、ibu、叔丁基、戊基、己基)，2-羥基-2-甲基丙腈；或其組合。在一些實(shí)施方案中，氰化劑可以是tmscn。

氰化劑可以任何合適的量存在。例如，氰化劑可以以相比于式v-a化合物至少0.1當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1、0.5、1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。氰化劑也可以以相比于式v-a化合物約0.1至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1至約3.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，氰化劑可以以相比于式v-a化合物約0.1至1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，氰化劑的存在量相比于式v-a化合物為約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。

任何合適的路易斯酸可用于制備式xi-a²化合物的方法。例如，路易斯酸可為tmsotf、tmsotf、tbsotf、tesotf,bf3、bf3-oet2、bcl3、bf3-thf、mgcl2、mgi2、mgbr2、mgbr2-oet2、zncl2、znbr2、zni2、licl、libr、lii、alcl3、albr3、ali3、me2si(otf)2、et2si(otf)2、pr2si(otf)2、ipr2si(otf)2,(tbu)2si(otf)2、(c6f5)3b、mesicl3、me2sicl2、sicl4、tmscl、tmsi、tmsvr、tbscl、tbsbr、tbsi、tescl、tesbr、tesi、smcl3、smbr3、smi2、smi3、sci3、scbr3、sci3、sm(otf)3、sc(otf)3、ticl4、ti(oipr)4、ti(oipr)3cl、ti(oipr)2cl2、ti(oipr)cl3,zn(bf4)2、libf4、mg(bf4)2、zrcl4、fecl2、fecl3、febr2、febr3、fei2、fei3、cu(otf)、cu(otf)2、4-甲基苯磺酰氯化物、苯磺酰氯、4-甲苯磺?；谆撬狨?、苯磺?；谆撬狨?、甲基磺酰氯、甲基磺酸酐、incl3、inbr3、ini3、in(otf)3、mg(so4)2、naso4；或其組合。在一些實(shí)施方案中，路易斯酸可為tmsotf。在一些實(shí)施方案中，如下物質(zhì)可代替路易斯酸用于制備式xi-a²化合物的方法中：二環(huán)己基碳二亞胺、1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亞胺、苯磺酸、hcl、4-甲苯磺酸、三氟甲磺酸、三氟乙酸、4-硝基苯甲酸、甲基磺酸、硫酸、磷酸、hbr、乙酸、甲酸、hi；或其組合。

路易斯酸可以任何合適的量存在。例如，所述路易斯酸可以以相比于式v-a化合物至少0.1當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1、0.5、1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。路易斯酸可以以相比于式v-a化合物約0.1至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1至約3.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，路易斯酸可以以相比于式v-a化合物約0.1至1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，路易斯酸可以以相比于式v-a化合物約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。

在制備式xi-a²化合物的方法中可以使用任何合適的布朗斯臺德酸。例如，布朗斯臺德酸可以是tfa、苯磺酸、hcl、4-甲苯磺酸、三氟甲磺酸、三氟乙酸、4-硝基苯甲酸、甲基磺酸、硫酸、磷酸、hbr、乙酸、甲酸、hi、三氟甲磺酸、4-氟苯甲酸、新戊酸、hbf4、硝酸、4-氯-苯甲酸、五氟苯酚、hpf6、樟腦磺酸；或其組合。在一些實(shí)施方案中，布朗斯臺德酸可以是tfa。

布朗斯臺德酸可以任何合適的量存在。例如，布朗斯臺德酸可以以相比于式v-a化合物至少約0.1當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1、0.5、1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。布朗斯臺德酸也可以以相比于式v-a化合物約0.1至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1至約3.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，布朗斯臺德酸可以以相比于式v-a化合物約0.1至約1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，布朗斯臺德酸可以以相比于式v-a化合物約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。

在制備式式xi或xi-a²化合物的方法中可以使用任何合適的溶劑。例如，溶劑可以是dcm、thf、methf、et2o、mecn、etcn、甲苯、苯、氯苯、硝基苯、氟苯、甲醇、乙醇、2-丙醇、丙醇、丁醇、mtbe、etoac、iproac、me2o、(tms)2o、丙酮、2-丁酮、氯仿、1,2-二氯乙烷、二甘醇二甲醚、二噁烷、乙酸、甲酸、三氟乙酸、甲基異丁基酮、dmac、dmf、nmp、dmso；或其組合。在一些實(shí)施方案中，溶劑可以是dcm。

溶劑可以任何合適的量存在。例如，溶劑可以以相比于式v-a化合物至少0.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.0、0.1、0.5、1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。溶劑也可以以相比于式v-a化合物約0.0至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.0至約3.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，溶劑可以以相比于式v-a化合物約0.1至約1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，溶劑可以以相比于式v-a化合物約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。

該方法的反應(yīng)混合物可以具有任何合適的溫度。例如，反應(yīng)混合物的溫度可以為約-150℃至約0℃，或約-120℃至約0℃，或約-100℃至約0℃，或約-100℃至約-50℃，或約-100℃至約-70℃。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)混合物的溫度可以為約-120℃至約-70℃。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)混合物的溫度可以為約-120℃至約-100℃。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)混合物的溫度可為-80℃至約-30℃。

該方法的反應(yīng)混合物可在任何合適的壓力下進(jìn)行。例如，反應(yīng)混合物可以在大氣壓下。反應(yīng)混合物也可以暴露于任何合適的環(huán)境，例如大氣氣體，或惰性氣體如氮?dú)饣驓鍤狻?/p>

本發(fā)明的方法可以以任何合適的產(chǎn)率提供式xi-a²的化合物。例如，式xi-a²的化合物可以以至少約50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或至少約95％的產(chǎn)率制備。

本發(fā)明的方法可以提供任何合適純度的式xi-a²化合物。例如，式xi-a²的化合物可以以至少約90、95、96、97、98或至少約99％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式xi-a²的化合物可以以至少約95％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式xi-a²的化合物可以以至少約98％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式xi-a²的化合物可以以至少約99％的純度制備。

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法可以分批法進(jìn)行。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法可以連續(xù)進(jìn)行。

在一些實(shí)施方案中，該方法包括制備式xi-a²的化合物：

其中該方法包括在適合于制備式xi-a²化合物的條件下形成具有tfa、tmscn、tmsotf和式v-a化合物的反應(yīng)混合物：

在一些實(shí)施方案中，該制備式xi-a²的方法在約-120℃至約20℃下進(jìn)行。在另一個實(shí)施方案中，該制備式xi-a²的方法在約-120℃至約0℃下進(jìn)行。在另一個實(shí)施方案中，該制備式xi-a²的方法在約-40℃至約-20℃下進(jìn)行。

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了制備式xi-b的方法：

其中該方法包括在適合于制備式xi-b化合物的條件下形成具有路易斯酸、堿、溶劑、過濾劑，以及式xi-a化合物的反應(yīng)混合物：

任何合適的路易斯酸可用于制備式xi-b化合物的方法。例如，路易斯酸可為tmsotf、tmsotf、tbsotf、tesotf、bf3、bf3-oet2、bcl3、bf3-thf、mgcl2、mgi2、mgbr2、mgbr2-oet2、zncl2、znbr2、zni2、licl、libr、lii、alcl3、albr3、ali3、me2si(otf)2、et2si(otf)2、pr2si(otf)2、ipr2si(otf)2、(tbu)2si(otf)2、(c6f5)3b、mesicl3、me2sicl2、sicl4、tmscl、tmsi、tmsvr、tbscl、tbsbr、tbsi、tescl、tesbr、tesi、smcl3、smbr3、smi2、smi3、sci3、scbr3、sci3、sm(otf)3、sc(otf)3、ticl4、ti(oipr)4、ti(oipr)3cl、ti(oipr)2cl2、ti(oipr)cl3、zn(bf4)2、libf4、mg(bf4)2、zrcl4、fecl2、fecl3、febr2、febr3、fei2、fei3、cu(otf)、cu(otf)2、4-甲基苯磺酰氯化物、苯磺酰氯、4-甲苯磺?；谆撬狨?、苯磺酰基三氟甲磺酸酯、甲基磺酰氯、甲基磺酸酐、incl3、inbr3、ini3、in(otf)3、mg(so4)2、naso4；或其組合。在一些實(shí)施方案中，路易斯酸可為bcl3。在一些實(shí)施方案中，如下物質(zhì)可代替路易斯酸用于制備式xi-b化合物的方法中：二環(huán)己基碳二亞胺、1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亞胺、苯磺酸、hcl、4-甲苯磺酸、三氟甲磺酸、三氟乙酸、4-硝基苯甲酸、甲基磺酸、硫酸、磷酸、hbr、乙酸、甲酸、hi；或其組合。

路易斯酸可以任何合適的量存在。例如，所述路易斯酸可以以相比于式xi-a化合物至少0.1當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1、0.5、1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。路易斯酸可以以相比于式xi-a化合物約0.1至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1至約3.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，路易斯酸可以以相比于式xi-a化合物約0.1至1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，路易斯酸可以以相比于式xi-a化合物約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。

在制備式xi-b化合物的方法中可以使用任何合適的堿。例如，所述堿可為(c1-8烷基)3n。在一些實(shí)施方案中，所述堿可為et3n。

堿可以任何合適的量存在。例如，所述堿可以以相比于式xi-a化合物至少0.1當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1、0.5、1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。堿可以以相比于式xi-a化合物約0.1至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1至約3.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，堿可以以相比于式xi-a化合物約0.1至1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，堿可以以相比于式xi-a化合物約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。

在制備式xi-b化合物的方法中可以使用任何合適的溶劑。例如，溶劑可以是meoh、dcm、thf、methf、et2o、mecn、etcn、甲苯、苯、氯苯、硝基苯、氟苯、甲醇、乙醇、2-丙醇、丙醇、丁醇、mtbe、etoac、iproac、me2o、(tms)2o、丙酮、2-丁酮、氯仿、1,2-二氯乙烷、二甘醇二甲醚、二噁烷、乙酸、甲酸、三氟乙酸、甲基異丁基酮、dmac、dmf、nmp、dmso；或其組合。在一些實(shí)施方案中，溶劑可以是meoh。

溶劑可以任何合適的量存在。例如，溶劑可以以相比于式xi-a化合物至少0.1當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1、0.5、1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。溶劑也可以以相比于式xi-a化合物約0.1至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1約3.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，溶劑可以以相比于式xi-a化合物約0.1至約1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，溶劑可以以相比于式xi-a化合物約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。

任何合適的過濾劑可用于制備式xi-b化合物的方法。例如，過濾劑可以是硅膠、或它們的組合。在一些實(shí)施方案中，過濾劑可以是

過濾劑可以任何合適的量存在。例如，過濾劑可以以相比于式xi-a化合物至少0.1當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1、0.5、1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。過濾劑也可以以相比于式xi-a化合物約0.1至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1約3.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，過濾劑可以以相比于式xi-a化合物約0.1至約1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，過濾劑可以以相比于式xi-a化合物約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。

該方法的反應(yīng)混合物可以處于任何合適的溫度。例如，反應(yīng)混合物的溫度可以為約-50℃至約0℃，或約-40℃至約0℃，或約-30℃至約0℃，或約-20℃至約0℃，或約-20℃至約-10℃。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)混合物的溫度可為約-30℃至約0℃。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)混合物的溫度可為約-20℃至約-10℃。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)混合物的溫度可為約-25℃至約-15℃。

該方法的反應(yīng)混合物可以處于任何合適的壓力下。例如，反應(yīng)混合物可以在大氣壓下。反應(yīng)混合物也可以暴露于任何合適的環(huán)境，例如大氣氣體，或惰性氣體如氮?dú)饣驓鍤狻?/p>

本發(fā)明的方法可以以合適的產(chǎn)率提供式xi-b的化合物。例如，式xi-b的化合物可以以至少約50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或至少約95％的產(chǎn)率制備。

本發(fā)明的方法可以以任何合適的純度提供式xi-b的化合物。例如，式xi-b的化合物可以以至少約90、95、96、97、98或至少約99％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式xi-b的化合物可以至少約95％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式xi-b的化合物可以至少約98％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式xi-b的化合物可以以至少約99％的純度制備。

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了制備式xi-b化合物的方法：

其中所述方法包括在適合于制備式xi-b化合物的條件下形成具有bcl3、et2n、meoh、以及式xi-a化合物的反應(yīng)混合物。

在一些實(shí)施方案中，制備式xi-b的方法在約-30℃至約0℃之間進(jìn)行。在另一個實(shí)施方案中，制備式xi的方法在約-20℃至約0℃之間進(jìn)行。

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了制備式xi-c化合物的方法：

其中該方法包括在適合于制備式xi-c化合物的條件下形成具有溶劑、試劑、酸以及式xi-b化合物的反應(yīng)混合物：

在制備式xi-c化合物的方法中可以使用任何合適的溶劑。例如，溶劑可以是meoh、dcm、thf、methf、et2o、mecn、etcn、甲苯、苯、氯苯、硝基苯、氟苯、甲醇、乙醇、2-丙醇、丙醇、丁醇、mtbe、etoac、iproac、me2o、(tms)2o、丙酮、2-丁酮、氯仿、1,2-二氯乙烷、二甘醇二甲醚、二噁烷、乙酸、甲酸、三氟乙酸、甲基異丁基酮、dmac、dmf、nmp、dmso；或其組合。在一些實(shí)施方案中，溶劑可以是丙酮。

溶劑可以任何合適的量存在。例如，溶劑可以以相比于式xi-b化合物至少0.1當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1、0.5、1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。溶劑也可以以相比于式xi-b化合物約0.1至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1約3.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，溶劑可以以相比于式xi-b化合物約0.1至約1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，溶劑可以以相比于式xi-b化合物約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。

任何合適的試劑可用于制備式xi-c化合物的方法。例如，試劑可以是2,2-二甲氧基丙烷、丙酮、2-甲氧基丙烯、2,2-二乙基丙烷、2-乙氧基丙烯、2,2-二甲基-1,3-二氧戊環(huán)、2,2-二甲基-1,3-二噁烷；或其組合。在一些實(shí)施方案中，試劑可以是2,2-二甲氧基丙烷。

試劑可以任何合適的量存在。例如，試劑可以以相比于式xi-b化合物至少0.1當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1、0.5、1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。試劑也可以以相比于式xi-b化合物約0.1至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.1約3.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，試劑可以以相比于式xi-b化合物約0.1至約1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，試劑可以以相比于式xi-b化合物約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。

在制備式xi-c化合物的方法中可以使用任何合適的酸。例如，酸可以是tmsotf、tmsotf、tbsotf、tesotf、bf3、bf3-oet2、bcl3、bf3-thf、mgcl2、mgi2、mgbr2、mgbr2-oet2、zncl2、znbr2、zni2、licl、libr、lii、alcl3、albr3、ali3、me2si(otf)2、et2si(otf)2、pr2si(otf)2、ipr2si(otf)2、(tbu)2si(otf)2、(c6f5)3b、mesicl3、me2sicl2、sicl4、tmscl、tmsi、tmsvr、tbscl、tbsbr、tbsi、tescl、tesbr、tesi、smcl3、smbr3、smi2、smi3、sci3、scbr3、sci3、sm(otf)3、sc(otf)3、ticl4、ti(oipr)4、ti(oipr)3cl、ti(oipr)2cl2、ti(oipr)cl3,zn(bf4)2、libf4、mg(bf4)2、zrcl4、fecl2、fecl3、febr2、febr3、fei2、fei3、cu(otf)、cu(otf)2、4-甲苯磺酰氯、苯磺酰氯、4-甲苯磺酰基三氟甲磺酸酯、苯磺酰基三氟甲磺酸酯、甲基磺酰氯、甲基磺酸酐、incl3,inbr3,ini3,in(otf)3,mg(so4)2,naso4,二環(huán)己基碳二亞胺、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺、苯磺酸、hcl、4-甲苯磺酸、三氟甲磺酸、三氟乙酸、4-硝基苯甲酸、甲基磺酸、硫酸、磷酸、hbr、乙酸、甲酸、hi、tfa、苯磺酸、hcl、4-甲苯磺酸、三氟甲磺酸、三氟乙酸、4-硝基苯甲酸、甲基磺酸、硫酸、磷酸、hbr、乙酸、甲酸、hi、三氟甲磺酸、4-氟苯甲酸、新戊酸、hbf4、硝酸、4-氯-苯甲酸、五氟苯酚、hpf6、樟腦磺酸；或其組合。在一些實(shí)施方案中，所述酸可為硫酸。

酸可以任何合適的量存在。例如，所述酸可以以相比于式xi-b化合物至少0.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.0、0.5、1.0、2、3、4、5、6、7、8、9或約10.0當(dāng)量(mol/mol)。酸可以以相比于式xi-b化合物約0.0至約10.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在，例如約0.0至約3.0當(dāng)量(mol/mol)，或約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)。在一些實(shí)施方案中，酸可以以相比于式xi-b化合物約0.0至1.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。在一些實(shí)施方案中，酸可以以相比于式xi-b化合物約1.0至約2.0當(dāng)量(mol/mol)的量存在。

該方法的反應(yīng)混合物可以處于任何合適的溫度。例如，反應(yīng)混合物的溫度可以為約-50℃至約50℃，或約0℃至約50℃，或約0℃至約40℃，或約0℃至約30℃，或約0℃至約25℃。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)混合物的溫度可以為約0℃至約23℃。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)混合物的溫度可以為約0℃至約25℃。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)混合物的溫度可以為約0℃至約30℃。

該方法的反應(yīng)混合物可以處于任何合適的壓力下。例如，反應(yīng)混合物可以在大氣壓下。反應(yīng)混合物也可以暴露于任何合適的環(huán)境，如環(huán)境氣體，或惰性氣體如氮?dú)饣驓鍤狻?/p>

本發(fā)明的方法可以任何合適的產(chǎn)率提供式xi-c的化合物。例如，式xi-c的化合物可以以至少約50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或至少約95％的產(chǎn)率制備。

本發(fā)明的方法可以提供任何合適純度的式xi-c化合物。例如，式xi-c的化合物可以以至少約90、95、96、97、98或至少約99％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式xi-b的化合物可以至少約95％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式xi-b的化合物可以至少約98％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式xi-b的化合物可以以至少約99％的純度制備。

在一些實(shí)施方案中，該方法包括制備式xi-c化合物：

其中所述方法包括在適合于制備式xi-c化合物的條件下形成具有丙酮、2,2-二甲氧基丙烷、硫酸以及式xi-b化合物的反應(yīng)混合物：

在一些實(shí)施方案中，制備式xi-c的方法在約0℃至約30℃下進(jìn)行。在另一些實(shí)施方案中，制備式xi的方法在約10℃至約30℃下進(jìn)行。

c.前藥基團(tuán)的加入

本發(fā)明還提供了將前藥部分偶聯(lián)至核苷以提供本發(fā)明化合物的方法。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了制備式viii化合物的方法：

其中該方法包括在適于形成式viii化合物的條件下形成含有偶聯(lián)劑、非親核性堿、式ix化合物，以及式x化合物的反應(yīng)混合物：

其中各r^a為h或pg，各pg基團(tuán)為羥基保護(hù)基，或者兩個pg基團(tuán)一起形成-c(r¹⁹)2-，r^e1和r^e2各自獨(dú)立地為h、c1-c6烷基或芐基，r^f為h、c1-c8烷基、芐基、c3-c6環(huán)烷基或–ch2-c3-c6環(huán)烷基，r¹⁹為h、c1-c8烷基、苯基或取代的苯基，并且lg為離去基團(tuán)。

如上文對于制備式v化合物所述的任何合適的偶聯(lián)劑可用于本發(fā)明的制備式viii化合物的方法中。在一些實(shí)施方案中，偶聯(lián)劑可為鎂偶聯(lián)劑。在一些實(shí)施方案中，偶聯(lián)劑可為mgcl2、iprmgcl、tbumgcl、phmgcl或其組合。在一些實(shí)施方案中，偶聯(lián)劑可為mgcl2。

任何合適的非親核堿可用于制備式viii化合物的方法中。代表性的非親核堿包括但不限于三乙胺、二異丙基乙基胺、n,n-二乙基苯胺、吡啶、2,6-二甲基吡啶、2,4,6-可力丁、4-二甲基氨基吡啶和奎寧環(huán)。在一些實(shí)施方案中，非親核堿可以是二異丙基乙胺(dipea)。

保護(hù)基pg可以是如上文制備式v化合物的方法中所述的任何合適的羥基保護(hù)基。示例性保護(hù)基pg可以是芐基，或pg基團(tuán)可以一起形成丙酮化合物。示例性的丙酮化合物包括但不限于丙酮化合物和亞芐基縮醛。在一些實(shí)施方案中，相鄰碳原子上的羥基保護(hù)基可以一起形成丙酮化合物。在一些實(shí)施方案中，多個pg基團(tuán)一起形成-c(r¹⁹)2-。在一些實(shí)施方案中，各r^a是保護(hù)基pg，其中pg基團(tuán)一起形成–c(me)2-。

當(dāng)r^e基團(tuán)為c1-c8烷基時，各r^e可為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、新戊基、己基、異己基、新己基、庚基或辛基。在一些實(shí)施方案中，各r^e基團(tuán)可為甲基。

當(dāng)r^f基團(tuán)為c1-c8烷基時，r^f可為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、新戊基、己基、異己基、新己基、庚基或辛基。在一些實(shí)施方案中，r^f基團(tuán)可為甲基、乙基、異丙基、叔丁基，或異己基。當(dāng)r^f基團(tuán)為c3-c6環(huán)烷基時，r^f可為環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基。在一些實(shí)施方案中，r^f可為環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基。

當(dāng)r¹⁹基團(tuán)為c1-c8烷基時，r¹⁹可以是甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、新戊基、己基、異己基、新己基、庚基或辛基。在一些實(shí)施方案中，r¹⁹基團(tuán)可為甲基。

離去基團(tuán)可以是任何合適的離去基團(tuán)。合適的離去基團(tuán)lg包括但不限于氯化物、溴化物、甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、三氟甲磺酸酯、4-硝基苯磺酸酯、4-氯苯磺酸酯、4-硝基苯氧基、五氟苯氧基等。在一些實(shí)施方案中，離去基團(tuán)lg可以是4-硝基苯氧基或五氟苯氧基。在一些實(shí)施方案中，離去基團(tuán)lg可以是4-硝基苯氧基。

在一些實(shí)施方案中，各r^a為這樣的pg，其中所述pg基團(tuán)一起形成-c(r¹⁹)2-，r^f為c1-c8烷基，r¹⁹為c1-c8烷基，并且離去基團(tuán)lg為4-硝基苯氧基或五氟苯氧基。

在一些實(shí)施方案中，偶聯(lián)劑為mgcl2，并且非親核堿為二異丙基乙基胺。

在一些實(shí)施方案中，式viii化合物可為

在一些實(shí)施方案中，式viii化合物可為

在一些實(shí)施方案中，式viii化合物可為

在一些實(shí)施方案中，制備式viii化合物的方法包括在適用于形成式viii化合物：

的條件下形成含有mgcl2、dipea、式ix化合物和式x化合物的反應(yīng)混合物：

當(dāng)式viii化合物的r^a基團(tuán)為羥基保護(hù)基pg時，該方法還可包含除去保護(hù)基以形成其中各r^a為h的式viii化合物的步驟。在一些實(shí)施方案中，制備式viii化合物的方法包括在適用于除去保護(hù)基pg以形成其中各r^a為h的式viii化合物的條件下，形成第二反應(yīng)混合物，其包含脫保護(hù)劑和其中r^a基團(tuán)為保護(hù)基pg的式viii化合物。脫保護(hù)劑可以是去除保護(hù)基pg的任何合適的試劑，如氫和氫化催化劑或酸。例如，如果保護(hù)基pg為芐基，則脫保護(hù)劑可以是氫和碳負(fù)載的鉑?；蛘?，當(dāng)保護(hù)基pg為丙酮化合物時，脫保護(hù)劑可以是酸。代表性的酸包括但不限于乙酸、冰醋酸、三氟乙酸(tfa)，鹽酸，濃鹽酸等。在一些實(shí)施方案中，制備式viii化合物的方法包括在適于形成其中各r^a為h的式viii化合物的條件下形成第二反應(yīng)混合物，其包括酸和式viii化合物(其中r^a基團(tuán)在合適條件下合并形成-c(r¹⁹)2-)。在一些實(shí)施方案中，酸可以是鹽酸。

在本發(fā)明的方法中可以使用任何合適的溶劑。代表性的溶劑包括但不限于戊烷、不同的戊烷、己烷、不同的己烷、庚烷、不同的庚烷、石油醚、環(huán)戊烷、環(huán)己烷、苯、甲苯、二甲苯、三氟甲苯、鹵代苯如氯苯、氟苯、二氯苯和二氟苯、亞甲基氯、氯仿、丙酮、乙酸乙酯、二乙基醚、四氫呋喃、乙腈或其組合。在一些實(shí)施方案中，溶劑可以是乙腈。

該方法的反應(yīng)混合物可以處于任何合適的溫度。例如，反應(yīng)混合物的溫度可以為約-78℃至約100℃，或約-50℃至約100℃，或約-25℃至約50℃或約-10℃至約25℃，或約0℃至約20℃。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)混合物的溫度可以為約0℃至約20℃。

該方法的反應(yīng)混合物可以處于任何合適的壓力下。例如，反應(yīng)混合物可以在大氣壓下。反應(yīng)混合物也可以暴露于任何合適的環(huán)境，例如大氣氣體，或惰性氣體如氮?dú)饣驓鍤狻?/p>

本發(fā)明的方法可以任何合適的產(chǎn)率提供式viii化合物。例如，式viii化合物可以以至少約50％，55％，60％，65％，70％，75％，80％，85％，90％或至少約95％的產(chǎn)率制備。

本發(fā)明的方法可提供任何合適純度的式viii化合物。例如，式viii化合物可以以至少約90、95、96、97、98或至少約99％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式viii化合物可以至少95％純度制備。在一些實(shí)施方案中，式viii化合物可以至少98％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式viii化合物的純度可以為至少99％。

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了如下化合物

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了制備式viii化合物的方法：

其中該方法包括在適合于形成式viii化合物的條件下形成含有偶聯(lián)劑、非親核性堿、式ix-a化合物，以及式x化合物的反應(yīng)混合物：

其中r^a獨(dú)立地為h或羥基保護(hù)基，或者相鄰碳上的兩個r^a可一起形成-c(r¹⁹)2-基團(tuán)，r³⁵獨(dú)立地為h或羥基保護(hù)基，或者相鄰碳上的兩個r³⁵基團(tuán)可一起形成-c(r¹⁹)2-基團(tuán)，r¹⁹為h或c1-c8烷基，r^e1和r^e2各自獨(dú)立地為h、c1-c6烷基或芐基，r^f為h、c1-c8烷基、芐基、c3-c6環(huán)烷基，或–ch2-c3-c6環(huán)烷基，r¹⁹為h、c1-c8烷基、苯基或取代的苯基，并且lg為離去基團(tuán)。

在制備式viii化合物的方法中可以使用如上所述制備式v化合物的方法中的任何合適的偶聯(lián)劑。在一些實(shí)施方案中，偶聯(lián)劑可以是鎂偶聯(lián)劑。在一些實(shí)施方案中，偶聯(lián)劑可以為mgcl2、iprmgcl、tbumgcl、phmgcl，或其組合。在一些實(shí)施方案中，偶聯(lián)劑可為mgcl2。

任何合適的非親核堿可用于制備式viii化合物的方法中。代表性的非親核堿包括但不限于三乙胺、二異丙基乙基胺、n,n-二乙基苯胺、吡啶、2,6-二甲基吡啶、2,4,6-可力丁、4-二甲基氨基吡啶和奎寧環(huán)。在一些實(shí)施方案中，非親核堿可以是二異丙基乙胺(dipea)。

羥基保護(hù)基為如上所述制作式v化合物的方法中描述的。示例性的羥基保護(hù)基可為芐基、sir3，其中每個r基團(tuán)可以是氫、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、苯基或其它含硅基團(tuán)，或者pg基團(tuán)可以一起形成丙酮化合物。示例性硅烷包括但不限于叔丁基二甲基甲硅烷基(tbs)。示例性的丙酮化合物包括但不限于丙酮化合物和亞芐基縮醛。在一些實(shí)施方案中，相鄰碳原子上的羥基保護(hù)基團(tuán)可以一起形成丙酮化合物。在一些實(shí)施方案中，將pg基團(tuán)一起形成–c(r¹⁹)2-。在一些實(shí)施方案中，每個r^a是pg基團(tuán)，其中pg基團(tuán)一起形成–c(me)2-。在其它實(shí)施方案中，pg是sir3。在其它實(shí)施方案中，pg是叔丁基二甲基甲硅烷基(tbs)。

當(dāng)r^e基團(tuán)為c1-c8烷基時，各r^e可為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、新戊基、己基、異己基、新己基、庚丁或辛基。在一些實(shí)施方案中，各r^e基團(tuán)可為甲基。

當(dāng)r^f基團(tuán)為c1-c8烷基時，r^f可為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、新戊基、己基、異己基、新己基、庚丁或辛基。在一些實(shí)施方案中，r^f基團(tuán)可為甲基、乙基、異丙基、叔丁基，或異己基。當(dāng)r^f基團(tuán)為c3-c6環(huán)烷基，r^f可為環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基。在一些實(shí)施方案中，r^f可為環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基。

當(dāng)r¹⁹基團(tuán)為c1-c8烷基時，r¹⁹可為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、新戊基、己基、異己基、新己基、庚丁或辛基。在一些實(shí)施方案中，r¹⁹基團(tuán)可為甲基。

當(dāng)r³⁵基團(tuán)為羥基保護(hù)基時，r³⁵可為在protectivegroupsinorganicchemistry,peterg.m.wutsandtheodoraw.greene,4thed.,2006中描述的任何實(shí)例保護(hù)基。在一些實(shí)施方案中，r³⁵基團(tuán)可為芐基。在一些實(shí)施方案中，r³⁵基團(tuán)中為tbs。

離去基團(tuán)可以是任何合適的離去基團(tuán)。合適的離去基團(tuán)lg包括但不限于氯化物、溴化物、甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、三氟甲磺酸酯、4-硝基苯磺酸酯、4-氯苯磺酸酯、4-硝基苯氧基、五氟苯氧基等。在一些實(shí)施方案中，離去基團(tuán)lg可以是4-硝基苯氧基或五氟苯氧基。在一些實(shí)施方案中，離去基團(tuán)lg可以是4-硝基苯氧基。

在一些實(shí)施方案中，各r^a為pg，其中pg基團(tuán)一起形成-c(r¹⁹)2-，r^f為c1-c8烷基，r¹⁹為c1-c8烷基，并且離去基團(tuán)lg為4-硝基苯氧基或五氟苯氧基。

在一些實(shí)施方案中，偶聯(lián)劑為mgcl2，并且非親核性堿為二異丙基乙基胺。

在一些實(shí)施方案中，式viii化合物可為：

在一些實(shí)施方案中，式viii化合物可為：

在一些實(shí)施方案中，式viii化合物可為：

在一些實(shí)施方案中，制備式viii化合物的方法包括在適用于制備式viii化合物

的條件下形成含有mgcl2、dipea、式ix化合物和式x化合物的反應(yīng)混合物：

當(dāng)式viii化合物的r^a基團(tuán)為羥基保護(hù)基pg時，該方法可進(jìn)一步包含除去保護(hù)基以形成其中各r^a為h的式viii化合物的步驟。在一些實(shí)施方案中，制備式viii化合物的方法包括在適合于形成其中各r^a為h的式viii化合物的條件下形成第二反應(yīng)混合物，其包含脫保護(hù)劑和其中各r^a為保護(hù)基pg的式viii化合物。脫保護(hù)劑可以是去除保護(hù)基pg的任何合適的試劑，如氫和氫化催化劑或酸。例如，如果保護(hù)基pg為芐基，則脫保護(hù)劑可以是氫和碳負(fù)載的鉑。或者，當(dāng)保護(hù)基pg為丙酮化合物時，脫保護(hù)劑可以是酸。代表性的酸包括但不限于乙酸、冰乙酸、三氟乙酸(tfa)、鹽酸、濃鹽酸、甲酸、甲苯磺酸、硫酸等。其他代表性的酸包括但不限于在greene,t.w.；wuts,p.g.m.protectivegroupsinorganicsynthesis,4thed.,johnwiley&sons:newyork,2006中描述的那些。在一些實(shí)施方案中，制備式viii化合物的方法包括在適合于形成其中r^a基團(tuán)為h的式viii化合物的條件下形成第二反應(yīng)混合物，其含有酸和其中r^a基團(tuán)一起形成-c(r¹⁹)2-的式viii化合物。在一些實(shí)施方案中，酸可為鹽酸?；蛘撸?dāng)保護(hù)基pg為sir3時，脫保護(hù)劑可為tbaf、吡啶hf、hcl、tsoh、樟腦磺酸、accl溶于meoh、bf³oet²、tfa、acog、甲酸、hbr、f、hf、et3n-hf、kf-h2o、khf2、naf、lif、licl、libr、lii等。

在本發(fā)明的方法中可以使用任何合適的溶劑。代表性的溶劑包括但不限于戊烷、不同的戊烷、己烷、不同的己烷、庚烷、不同的庚烷、石油醚、環(huán)戊烷、環(huán)己烷、苯、甲苯、二甲苯、三氟甲苯、鹵代苯如氯苯、氟苯、二氯苯和二氟苯、亞甲基氯、氯仿、丙酮、乙酸乙酯、二乙基醚、四氫呋喃、乙腈或其組合。在一些實(shí)施方案中，溶劑可以是乙腈。在一些實(shí)施方案中，溶劑可以是mecn。在一些實(shí)施方案中，溶劑可以是四氫呋喃。

該方法的反應(yīng)混合物可以處于任何合適的溫度。例如，反應(yīng)混合物的溫度可以為約-78℃至約100℃，或約-50℃至約100℃，或約-25℃至約50℃，或約-10℃至約25℃，或約0℃至約20℃。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)混合物的溫度可以為約0℃至約20℃。

該方法的反應(yīng)混合物可以處于任何合適的壓力下。例如，反應(yīng)混合物可以在大氣壓下。反應(yīng)混合物也可以暴露于任何合適的環(huán)境，例如大氣氣體，或惰性氣體如氮?dú)饣驓鍤狻?/p>

本發(fā)明的方法可以任何合適的產(chǎn)率提供式viii化合物。例如，式viii化合物可以以至少約50％，55％，60％，65％，70％，75％，80％，85％，90％或至少約95％的產(chǎn)率制備。

本發(fā)明的方法可提供任何合適純度的式viii化合物。例如，式viii化合物可以以至少約90、95、96、97、98或至少約99％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式viii化合物可以以至少95％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式viii化合物可以至少約98％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式viii化合物可以以至少99％的純度制備。

在一些實(shí)施方案中，式viii化合物可為：

在一些實(shí)施方案中，制備式viii化合物的方法包括在適合于制備式viii化合物

的條件下形成包含mgcl2、dipea式ix-a²化合物和式x化合物的反應(yīng)混合物：

該方法可以包括除去保護(hù)基以形成其中每個tbs為h的式viii化合物的另外的步驟。

該方法的反應(yīng)混合物可以處于任何合適的溫度。例如，反應(yīng)混合物的溫度可以為約-78℃至約100℃，或約-50℃至約100℃，或約-25℃至約50℃或約-10℃至約25℃，或約0℃至約20℃。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)混合物的溫度可以為約0℃至約20℃。

該方法的反應(yīng)混合物可以處于任何合適的壓力下。例如，反應(yīng)混合物可以在大氣壓下。反應(yīng)混合物也可以暴露于任何合適的環(huán)境，例如大氣氣體，或惰性氣體如氮?dú)饣驓鍤狻?/p>

本發(fā)明的方法可以以任何合適的產(chǎn)率提供式viii化合物。例如，式viii化合物可以以至少約50％，55％，60％，65％，70％，75％，80％，85％，90％或至少約95％的產(chǎn)率制備。

本發(fā)明的方法可提供任何合適純度的式viii化合物。例如，式viii化合物可以以至少約90％、95％、96％、97％、98％或至少約99％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式viii化合物可以以至少95％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式viii化合物可以至少約98％的純度制備。在一些實(shí)施方案中，式viii化合物的純度可以以至少99％的純度制備。

d.通過結(jié)晶誘導(dǎo)的動態(tài)拆分來制備式x-b

在一個實(shí)施方案中，提供了一種通過結(jié)晶誘導(dǎo)對(2s)-2-(((4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯(式x-a)進(jìn)行的動態(tài)拆分的方法：

以提供(s)-2-(((s)-(4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯(式x-b)。該方法包括在適于提供選擇性結(jié)晶(s)-2-(((s)-(4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙2-乙基丁基酸酯的條件下，使包含：a)合適的溶劑；b)合適的堿；c)(2s)-2-(((4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯；以及任選的d)一種或多種(s)-2-(((s)-(4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯晶種，的溶液處于提供磷中心的差向異構(gòu)化的條件下。

結(jié)晶可以在任何合適的溶劑中進(jìn)行。例如，它可以在非質(zhì)子有機(jī)溶劑或其混合物中進(jìn)行。例如，非質(zhì)子有機(jī)溶劑可以包括乙酸乙酯、乙酸甲酯、乙酸丙酯、乙酸異丙酯、二乙基醚、二異丙醚、四氫呋喃、二氯甲烷、丙酮、甲基乙基酮、甲基叔丁基醚、甲苯或乙腈，或其混合物。在一個實(shí)施方案中，溶劑包括乙腈。

拆分可以在任何合適的堿存在下進(jìn)行。例如，拆分可以在選自1,5-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-5-烯(dbn)、1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(dbu)、7-甲基-1,5,7-三氮雜雙環(huán)[4.4.0]癸-5-烯(mtbd)、三乙胺(et3n)，hunig堿(ipr2net)、四甲基胍、verkade堿(例如，2,8,9-三異丙基-2,5,8,9-四氮雜-1-磷雜雙環(huán)[3.3.3]十一烷和2,8,9三異丁基-2,5,8,9四氮雜-1磷雜雙環(huán)[3.3.3]十一烷)、金屬碳酸鹽(例如mxco3)、金屬酚鹽(m+-oph)和photms的堿與氟離子源(例如，r4n^+-f、tasf(三(二甲基氨基)锍二氟三甲硅酸鹽)或tbat(四丁基銨三苯基二氟硅酸鹽)及其混合物組合，其中每個m是合適的金屬如堿金屬或堿土金屬，并且每個r是例如(c1-c6)烷基。在一個具體實(shí)例中，堿是dbu。

拆分也可以在任何合適的溫度下進(jìn)行，例如在約0℃至約50℃的溫度范圍內(nèi)。在一個具體實(shí)施方案中，拆分在約0℃的溫度下進(jìn)行。

在一個具體的實(shí)施方案中，拆分在酚的存在下進(jìn)行。

(s)-2-(((s)-(4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸2-乙基丁基酯在起始的非對映異構(gòu)體混合物中的百分比可為約0％至約99％的任何數(shù)值。在本發(fā)明的一個實(shí)施方案中，(s)-2-(((s)-(4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯在起始的非對映異構(gòu)體混合物中的百分比為約0％至約20％。在一個實(shí)施方案中，化合物(s)-2-(((s)-(4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸2-乙基丁基酯在起始的非對映異構(gòu)體混合物中的百分比為約20％至約99％。在一個實(shí)施方案中，化合物(s)-2-(((s)-(4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯在起始的非對映異構(gòu)體混合物中的百分比為約50％至約99％。在一個實(shí)施方案中，最終化合物(s)-2-(((s)-(4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯為至少約90％、約95％、約97％，或約99％的非對映異構(gòu)體純。在一個實(shí)施方案中，最終化合物(s)-2-(((s)-(4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯包含少于1％的非對映異構(gòu)體雜質(zhì)。在一個實(shí)施方案中，最終化合物(s)-2-(((s)-(4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯不含任何可檢測的非對映異構(gòu)體雜質(zhì)。

實(shí)施例

一些縮寫和首字母縮略詞用于描述實(shí)驗(yàn)的細(xì)節(jié)。雖然本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解這些中的大多數(shù)，但是表1包含許多這些縮寫和首字母縮略詞的列表。

表1：縮寫和首字母縮略詞列表

e.化合物的制備

實(shí)施例1：(2s)-2-(氯(苯氧基)磷?；被?丙酸乙酯(氯化物a)

將丙氨酸乙酯鹽酸鹽(1.69g，11mmol)溶于無水ch2cl2(10ml)中，將混合物在n2(g)下攪拌冷卻至0℃。加入苯基二氯磷酸酯(1.49ml，10mmol)，然后在約10分鐘內(nèi)滴加et3n。然后將反應(yīng)混合物緩慢溫?zé)嶂潦覝夭嚢杓s12小時。加入無水et2o(50ml)，將混合物攪拌約30分鐘。通過過濾除去形成的固體，減壓濃縮濾液。將剩余物進(jìn)行硅膠色譜，用0-50％etoac的己烷溶液洗脫，得到中間體a。¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.39-7.27(m,5h),4.27(m,3h),1.52(m,3h),1.32(m,3h).³¹pnmr(121.4mhz,cdcl3)δ8.2,7.8.

實(shí)施例2：(2s)-2-(氯(苯氧基)磷酰基氨基)丙酸2-乙基丁基酯(氯化物b)

2-乙基丁基丙氨酸氯代磷酰氨基酯b用與氯化物a相同的方法制備，不同之處在于用2-乙基丁基丙氨酸酯代替乙基丙氨酸酯。該物質(zhì)以粗品用于之后的反應(yīng)。用甲醇或乙醇處理形成具有所需lcms信號的置換產(chǎn)物。

實(shí)施例3：(2s)-2-(氯(苯氧基)磷酰基氨基)丙酸異丙基酯(氯化物c)

異丙基丙氨酸氯代磷酰氨基酯c使用與氯化物a相同的方法制備，不同之處在于用異丙基丙氨酸酯代替乙基丙氨酸酯。該材料作為粗品用于下一反應(yīng)中。用甲醇或乙醇處理形成具有所需lcms信號的置換產(chǎn)物。

實(shí)施例4：(2r,3r,4s,5r)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-二羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈(化合物1)

(2r,3r,4s,5r)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-二羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈的制備在下文描述。

在n2(g)下，將市售的內(nèi)半縮醛(10g，23.8mmol)溶于無水dmso(30ml)中。加入ac2o(20ml)，所得反應(yīng)混合物在室溫下攪拌約48小時。將反應(yīng)混合物倒入冰h2o(500ml)中，將混合物攪拌20分鐘?；旌衔镉胑toac(3×200ml)萃取，然后將合并的有機(jī)萃取液用h2o(3×200ml)洗滌。將有機(jī)萃取液用無水mgso4干燥，過濾并減壓濃縮。將剩余物溶于ch2cl2中并進(jìn)行硅膠色譜，用25％etoac的己烷溶液洗脫，得到內(nèi)酯。¹hnmr(400mhz,dmso)δ7.30-7.34(m,13h),7.19-7.21(m,2h),4.55-4.72(m,6h),4.47(s,2h),4.28(d,j＝3.9hz,1h),3.66(m,2h).lcmsm/z436.1[m+h2o],435.2[m+oh]-tr＝2.82min.hplctr＝4.59[2-98％acn溶于h2)，以2ml/min在5分鐘內(nèi)流動。

在n2(g)下將溴代吡唑(根據(jù)wo2009/132135制備)(0.5g，2.4mmol)懸浮于無水thf(10ml)中。攪拌懸浮液，并加入tmscl(0.67ml，5.28mmol)。將混合物在室溫下攪拌20分鐘。然后冷卻至約-78℃，然后緩慢加入n-buli(6ml，1.6n于己烷中，9.6mmol)的溶液。將反應(yīng)混合物在約-78℃下攪拌10分鐘，然后通過注射器加入內(nèi)酯(1g，2.4mmol)。當(dāng)通過lcms確定反應(yīng)完成時，加入acoh以淬滅反應(yīng)。將混合物減壓濃縮，將剩余物溶于ch2cl2和h2o(100ml，1:1)的混合物中。分離有機(jī)層，用h2o(50ml)洗滌。有機(jī)層用無水mgso4干燥、過濾并減壓濃縮。剩余物用硅膠色譜處理，用0-50％的etoac己烷溶液洗滌，以提供1:1端基異構(gòu)體混合物的產(chǎn)物。lcmsm/z553[m+h].

在n2(g)下，將羥基核苷(1.1g，2.0mmol)溶于無水ch2cl2(40ml)中，并將溶液冷卻至-78℃。加入tmscn(0.931ml，7mmol)，將混合物再攪拌10分鐘。將tmsotf(1.63ml，9.0mmol)緩慢加入反應(yīng)物中，將混合物攪拌1小時。然后將反應(yīng)混合物用ch2cl2(120ml)稀釋，加入nahco3水溶液(120ml)以淬滅反應(yīng)。將反應(yīng)混合物再攪拌10分鐘，分離有機(jī)層。水層用ch2cl2(150ml)萃取，合并的有機(jī)萃取液用無水mgso4干燥、過濾并減壓濃縮。將剩余物溶解在最少量的ch2cl2中，并進(jìn)行硅膠色譜，用0-75％的etoac和己烷進(jìn)行梯度洗脫，得到作為端基異構(gòu)體混合物的三芐基氰基核苷。¹hnmr(300mhz,cd3cn)δ7.94(s,0.5h),7.88(s,0.5h),7.29-7.43(m,13h),7.11-7.19(m,1h),6.82-6.88(m,1h),6.70-6.76(m,1h),6.41(bs,2h),5.10(d,j＝3.9hz,0.5h),4.96(d,j＝5.1hz,0.5h),4.31-4.85(m,7h),4.09-4.18(m,2h),3.61-3.90(m,2h).lcmsm/z562[m+h].

在n2(g)下，將三芐基氰基核苷(70mg,0.124mmol)溶于無水ch2cl2(2ml)中，并冷卻至約-20℃。加入bcl3溶液(1n于ch2cl2中，0.506ml，0.506mmol)，將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌1小時。當(dāng)通過lc/ms確認(rèn)反應(yīng)完成時，加入meoh以淬滅反應(yīng)。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，并在減壓下除去溶劑。將剩余物進(jìn)行c18反相hplc，用h2o(0.1％tfa)洗脫5分鐘，隨后在35分鐘內(nèi)用0-70％mecn的h2o(0.1％tfa)梯度洗脫，以洗脫獲得α-端基異構(gòu)體和β-端基異構(gòu)體1。(α-端基異構(gòu)體)¹hnmr(300mhz,d2o)δ7.96(s,1h),7.20(d,j＝4.8hz,1h),6.91(d,j＝4.8hz,1h),4.97(d,j＝4.4hz,1h),4.56-4.62(m,1h),4.08-4.14(m,1h),3.90(dd,j＝12.9,2.4hz,1h),3.70(dd,j＝13.2,4.5hz,1h).(β-端基異構(gòu)體)¹hnmr(400mhz,dmso)δ7.91(s,1h),7.80-8.00(brs,2h),6.85-6.89(m,2h),6.07(d,j＝6.0hz,1h),5.17(brs,1h),4.90(brs,1h),4.63(t,j＝3.9hz,1h),4.02-4.06(m,1h),3.94(brs,1h),3.48-3.64(m,2h).lcmsm/z292.2[m+h],290.0[m-h].tr＝0.35min.13cnmr(400mhz,dmso),156.0,148.3,124.3,117.8,117.0,111.2,101.3,85.8,79.0,74.7,70.5,61.4.hplctr＝1.32min

實(shí)施例4-a：(2r,3r,4s,5r)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-二羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈(化合物1)

(2r,3r,4s,5r)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-二羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈的制備如下描述。

使用lacl3-2licl制備(3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙(芐氧基)-5-((芐氧基)甲基)四氫呋喃-2-醇

在thf(67ml)中制備7-碘代吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺的溶液(7.5g,28.8mmol,1.0當(dāng)量)。將溶液冷卻至約0℃，加入tmscl(3.3ml，30.3mmol，1.05當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物攪拌約30分鐘，然后加入phmgcl(2m于thf中；28ml，56.8mmol，1.97當(dāng)量)，同時保持內(nèi)部溫度低于5℃。將反應(yīng)混合物在約0℃下攪拌約35分鐘，然后冷卻至約-15℃。然后加入iprmgcl(2m于thf中，14ml，30.2mmol，1.05當(dāng)量)，同時保持內(nèi)部溫度低于約-10℃。在約-15℃下約15分鐘后，加入lacl3-2licl(0.6m于thf中，50ml，14.4mmol，0.5當(dāng)量)，同時保持內(nèi)部溫度低于約-15℃。將反應(yīng)混合物在約-20℃下攪拌約25分鐘。

在一個單獨(dú)的燒瓶中，在thf(45ml)中制備(3r,4r,5r)-3,4-雙(芐氧基)-5-((芐氧基)甲基)二氫呋喃-2(3h)-酮的溶液(10.0g，23.9mmol，0.83當(dāng)量)。將溶液冷卻至約-20℃，然后轉(zhuǎn)移至格氏溶液中，同時保持內(nèi)部溫度低于約-15℃。將所得反應(yīng)混合物在約-20℃下攪拌約30分鐘。

將反應(yīng)用2mhcl(53ml)淬滅，混合物升溫至約15℃。加入iproac(38ml)，分離有機(jī)相和水相。排出底部水層，依次用2.5重量％nahco3(53ml)，2.5重量％nahco3(53ml)和10重量％nacl(53ml)洗滌上層有機(jī)層。

將有機(jī)相濃縮至約45ml，然后用iproac(75ml)稀釋。將溶液再次濃縮至約45ml，然后用iproac(23ml)稀釋。將溶液濃縮至約45ml，然后在celite的墊上過濾。將過濾出的溶液濃縮至約26ml，然后用mtbe(75ml)稀釋。2小時后，緩慢加入庚烷(23ml)，將漿液在約25℃下攪拌約2小時，然后在約8小時內(nèi)冷卻至約-5℃。通過過濾分離固體，濾餅用mtbe/庚烷(4:1，23ml)洗滌。將固體在不超過約35℃的真空烘箱中干燥，得到(3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙(芐氧基)-5-((芐氧基)甲基)四氫呋喃-2-醇。

使用cecl3制備(3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙(芐氧基)-5-((芐氧基)甲基)四氫呋喃-2-醇

將碘吡唑(5.02g，19.3mmol)溶于thf(45g)中，并將溶液在攪拌下冷卻至約0℃。加入tmscl(2.04g，18.7mmol)，約1小時后，加入苯基氯化鎂(2.0m于thf中，19.9g，38.2mmol)。將反應(yīng)混合物冷卻至約-20℃，緩慢加入異丙基氯化鎂(2.0m于thf中，9.99g，20.5mmol)。約30分鐘后，將反應(yīng)混合物在約-20℃下轉(zhuǎn)移到無水氯化鈰(4.75g，19.3mmol)在thf(22g)中的混合物中。約1.5小時后，緩慢加入內(nèi)酯(6.73g，16.1mmol)在thf(22g)中的溶液，將所得反應(yīng)混合物攪拌約1小時。加入2mhcl(41g)，將混合物升溫至約15℃，加入乙酸異丙酯(35g)。分離各層，有機(jī)層用2.5％nahco3(2×40g)、10％nacl(1×35g)洗滌并濃縮至約30ml體積。加入乙酸異丙酯(44g)，將溶液濃縮至約30ml體積。加入乙酸異丙酯(43g)，將溶液濃縮至約30ml體積。將溶液過濾并將濾液濃縮至約18ml體積。加入叔丁基甲基醚(37g)，然后加入產(chǎn)物晶種(10.7mg)。約14小時后，加入正庚烷(10.5g)，將混合物冷卻至約-5℃并過濾。固體在約-5℃下用叔丁基甲基醚(9g)洗滌，并在約34℃真空干燥約15小時以提供產(chǎn)物。

使用cecl3和iprmgcl-licl制備(3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙(芐氧基)-5-((芐氧基)甲基)四氫呋喃-2-醇

在n2(g)下，將碘吡唑(5.03g，19.3mmol)溶解在thf(45g)中，并將溶液攪拌冷卻至約0℃。加入tmscl(2.06g，19.0mmol)，約1小時后，加入氯化鎂(2.0m于thf中，20.23g，38.8mmol)。將反應(yīng)混合物冷卻至約-20℃，緩慢加入異丙基氯化鎂-氯化鋰絡(luò)合物(2.0m于thf中，15.37g，21.0mmol)。約1小時后，將反應(yīng)混合物在約-20℃下轉(zhuǎn)移到氯化鈰(4.77g，19.4mmol)在thf(22g)中的混合物中。約1小時后，緩慢加入內(nèi)酯(6.75g，16.1mmol)在thf(23g)中的溶液，將所得反應(yīng)混合物攪拌約1.5小時。加入2mhcl(40g)，將混合物升溫至約15℃，加入乙酸異丙酯(35g)。分離各層，有機(jī)層用2.5％nahco3(2×40g)、10％nacl(1×36g)洗滌，并濃縮至約30ml體積。加入乙酸異丙酯(44g)，將溶液濃縮至約30ml體積。將溶液過濾并將濾液濃縮至約18ml體積。加入叔丁基甲基醚(37g)，然后加入產(chǎn)物晶種(10.5mg)。約14小時后，加入正庚烷(11g)，將混合物冷卻至約-5℃并過濾。固體在約-5℃下用叔丁基甲基醚(9g)洗滌，并在約34℃下真空干燥約15小時以提供產(chǎn)物。

使用ycl3制備(3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙(芐氧基)-5-((芐氧基)甲基)四氫呋喃-2-醇

將碘吡唑(4.99g，19.2mmol)溶于thf(44g)中，并將溶液在攪拌下冷卻至約0℃。加入tmscl(2.45ml，19.4mmol)，約30分鐘后，加入苯基氯化鎂(2.0m于thf中，20.29g，39.0mmol)。將反應(yīng)混合物冷卻至約-20℃，緩慢加入異丙基氯化鎂(2.0m于thf中，9.85g，20.1mmol)。約30分鐘后，將反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)移到約-20℃的無水氯化釔(3.76g，19.3mmol)和內(nèi)酯(6.68g，16.0mml)在thf(24g)中的混合物中。約2.5小時后，加入2mhcl(30g)，將混合物升溫至約15℃，加入乙酸異丙酯(22g)。分離各層，有機(jī)層用2.5％nahco3(2×40g)、10％nacl(1×35g)洗滌并濃縮至約30ml體積。加入乙酸異丙酯(44g)，將溶液濃縮至約30ml體積。加入乙酸異丙酯(45g)，將溶液濃縮至約30ml體積。將溶液過濾并將濾液濃縮至約18ml體積。加入叔丁基甲基醚(37g)，然后加入產(chǎn)物晶種(11.5mg)。約1小時后，加入正庚烷(15ml)，將混合物冷卻至約-5℃并攪拌約17小時。漿液過濾，固體用預(yù)先冷卻到約-5℃的叔丁基甲醚(8g)/正庚烷(2g)混合物洗滌。將所得固體在真空下在約34℃下干燥約22小時，得到產(chǎn)物。

使用ndcl3制備(3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙(芐氧基)-5-((芐氧基)甲基)四氫呋喃-2-醇

在n2(g)下，將碘吡唑(5.02g，19.3mmol)溶于thf(38g)中，并將溶液攪拌冷卻至約0℃。加入tmscl(2.45ml，19.4mmol)，約1小時后，加入苯基氯化鎂(2.0m于thf中，19.75g，38.0mmol)。將反應(yīng)混合物冷卻至約-20℃，緩慢加入異丙基氯化鎂(2.0m于thf中，9.40g，19.2mmol)。約1.5小時后，將反應(yīng)混合物在約-20℃下轉(zhuǎn)移到無水氯化釹(iii)(4.03g，16.1mmol)和內(nèi)酯(6.70g，16.0mml)在thf(22g)中的混合物中。約1.5小時后，將反應(yīng)混合物升溫至-10℃，另外2小時后，加入2mhcl(36g)。將混合物升溫至約15℃，加入乙酸異丙酯(23g)。分離各層，有機(jī)層用2.5％nahco3(2×44g)、10％nacl(1×41g)洗滌并濃縮至約30ml體積。加入乙酸異丙酯(44g)，將溶液濃縮至約30ml體積。加入乙酸異丙酯(45g)，將溶液濃縮至約30ml體積。將溶液過濾并將濾液濃縮至約18ml體積。加入叔丁基甲基醚(37g)，然后加入產(chǎn)物晶種(11.9mg)。約1小時后，加入正庚烷(15ml)，將混合物冷卻至約-5℃并攪拌約15小時。將漿液過濾，固體用預(yù)冷至約-5℃的叔丁基甲基醚(8g)/正庚烷(11g)混合物洗滌。將所得固體在真空下在約34℃下干燥約25小時，得到產(chǎn)物。

(2r,3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙(芐氧基)-5-((芐氧基)甲基)四氫呋喃-2-甲腈的制備

向預(yù)冷(-40℃)的(3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙(芐氧基)-5-((芐氧基)甲基)四氫呋喃-2-醇(10.0克，18.1毫摩爾，1.0當(dāng)量)在dcm(100ml)中的溶液中加入三氟乙酸6.19克，54.3毫摩爾，3.0當(dāng)量)，然后加入預(yù)冷(-30℃)的tmsotf(24.1克，108.6毫摩爾，6.0當(dāng)量)和tmscn(10.8克，108.6毫摩爾，6.0當(dāng)量)在dcm(50ml)中的溶液，同時保持內(nèi)部溫度低于約-25℃。將反應(yīng)混合物在低于約-30℃下攪拌不少于10分鐘，并加入到預(yù)冷(約-10℃)的20重量％的koh水溶液(120ml)中以淬滅反應(yīng)。將雙相混合物升溫至環(huán)境溫度。分離有機(jī)層，用10重量％nacl水溶液(3×50ml)洗滌。將有機(jī)相過濾，真空濃縮至約50ml，用甲苯(200ml)再稀釋并在約50℃下真空濃縮至140ml。將該溶液用(2r,3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙(芐氧基)-5-((芐氧基)甲基)四氫呋喃-2-甲腈在約55℃下接種。在約55℃下攪拌約1小時，并在約6小時內(nèi)冷卻至約0℃。通過過濾分離固體，濾餅用甲苯(30ml)洗滌。固體在約50℃真空干燥。

經(jīng)流動化學(xué)(flowchemistry)制備(2r,3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙(芐氧基)-5-((芐氧基)甲基)四氫呋喃-2-甲腈

(3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙(芐氧基)-5-((芐氧基)甲基)四氫呋喃-2-醇(23.0g，460.07gdcm)、tmsotf(55.81g，138.07gdcm)和tmscn(25.03g，138.10gdcm)的溶液在約-40℃下依次被泵入管式反應(yīng)器。將反應(yīng)混合物收集在保持在冰浴中的含有20％koh水溶液(46.91gkoh和210g水)的燒瓶中。分離各層，有機(jī)相依次用10％koh水溶液(10gkoh和90ml水)和10％鹽水(2×100g)洗滌。將有機(jī)相在真空下濃縮至約4體積，加入異丙醇(162.89g)，并將混合物在真空下濃縮至約10體積。將內(nèi)容物加熱至約60℃，然后在約6.5小時內(nèi)調(diào)節(jié)至約0℃，并在約0℃下攪拌約15.5小時。將所得漿液過濾，固體用異丙醇(61.79g)漂洗，然后在約50℃下減壓干燥過夜，得到產(chǎn)物。

(2r,3r,4s,5r)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-二羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈的制備

將三芐基氰基核苷(48.8g，86.9mmol，1.0當(dāng)量)溶于無水ch2cl2(244ml)中并冷卻至約-20℃。滴加bcl3溶液(1m在ch2cl2中，295ml，295mmol，3.4當(dāng)量)，保持內(nèi)部溫度低于約-15℃。加入后，將反應(yīng)混合物在約-20℃下攪拌1小時。滴加meoh(340ml)，保持內(nèi)部溫度低于-15℃。將所得溶液蒸餾至約250ml，然后再補(bǔ)充約250mlmeoh。將所得溶液再次蒸餾至約250ml，然后再補(bǔ)充約250mlmeoh，最后蒸餾至約125ml。加入水(125ml)，然后加入k2co3溶液(20wt％水溶液，125ml)。檢查ph，發(fā)現(xiàn)其為～3。加入k2co3溶液(20重量％，在水中，50ml)，其ph為～8。將所得漿液攪拌過夜，然后過濾并用水(50ml)和meoh(50ml)洗滌。將濕產(chǎn)品濾餅在約40℃下干燥過夜。¹hnmr(300mhz,d2o)δ7.96(s,1h),7.20(d,j＝4.8hz,1h),6.91(d,j＝4.8hz,1h),4.97(d,j＝4.4hz,1h),4.56-4.62(m,1h),4.08-4.14(m,1h),3.90(dd,j＝12.9,2.4hz,1h),3.70(dd,j＝13.2,4.5hz,1h).

實(shí)施例5：(2r,3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-氟-4-羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈(化合物2)

(2r,3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-氟-4-羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈的制備如下描述。

2-脫氧-2-氟-4,5-o,o-二芐基-d-阿拉伯糖.1’-甲氧基-2-脫氧-2-氟-4,5-o,o-二芐基-d-阿拉伯糖(1.0g,2.88mmol)的tfa(13.5ml)溶液用h2o(1.5ml)處理，將所得的混合物攪拌5小時。然后將混合物用etoac(100ml)稀釋，并用飽和nahco3(50ml)處理。分離有機(jī)層并用nacl(50ml)洗滌，用無水mgso4干燥，過濾并減壓濃縮。將剩余物進(jìn)行硅膠色譜(80gsio2combiflashhpgoldcolumn)，用0-100％etoac的己烷溶液洗脫，得到白色固體2-脫氧-2-氟-4,5-o,o-二芐基-d-阿拉伯糖：rf＝0.52(25％etoac于己烷中)。¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.30(m,10h),5.35(m,1h),4.68–4.29(m,7h),3.70(d,j＝10.5hz,1h),3.50(d,j＝10.5hz,2h).¹⁹fnmr(282.2mhz,cdcl3)δ–207(m),–211(m).lcmsm/z350[m+h2o].

(3r,4r,5r)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟二氫呋喃-2(3h)-酮。將2-脫氧-2-氟-4,5-o,o-二芐基-d-阿拉伯糖(4.3g，12.8mmol)溶于ch2cl2(85ml)中，用ms(10g)和吡啶鎓重鉻酸鹽(14.4g，38.3mmol)處理。將所得混合物攪拌24小時，然后通過墊過濾。將洗脫液減壓濃縮，剩余物進(jìn)行硅膠色譜(120gsio2hpgoldcombiflashcolumn)，用0-100％etoac的己烷溶液洗脫，得到澄清油狀物的(3r,4r,5r)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟二氫呋喃-2(3h)-酮(3.5g，83％)：rf＝0.25(25％etoac的己烷溶液)。¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.37(m,10h),5.45(dd,j＝49,5.7,hz,1h),4.85(d,j＝11.7hz,1h),4.52(m,4h),4.29(d,j＝5.4hz,1h),2.08(dd,j＝15.3,10.2hz,2h).¹⁹fnmr(282.2mhz,cdcl3)δ–216.lcmsm/z348[m+h2o].hplc(6–98％mecn–h2o梯度，0.05％tfa改性)tr＝5.29min.phenomenexsynergi4mhydro-rp80a,50×4.60mm,4微米；2ml/min流速

(3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-醇。將7-溴吡咯并[1,2-f][1,2,4]-三嗪-4-胺(68mg，0.319mmol)在thf(1.4ml)中的溶液用tmscl(89μl，0.703mmol)處理，并將混合物攪拌2小時。然后將混合物冷卻至約-78℃，并用nbuli(1.0m于己烷中，1.09ml，1.09mmol)處理。將溶液攪拌約30分鐘，然后滴加在thf(1.4ml)中的(3r,4r,5r)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟二氫呋喃-2(3h)-酮(106mg，0.319mmol)進(jìn)行處理。將所得混合物攪拌30分鐘，然后加入在thf(1.0ml)中的acoh(83μl，1.44mmol)以淬滅反應(yīng)。將混合物溫?zé)嶂潦覝兀缓鬁p壓濃縮。將剩余物用etoac(100ml)稀釋，并用飽和nacl溶液(50ml)洗滌。將有機(jī)層用無水mgso4干燥、過濾并減壓濃縮。將剩余物進(jìn)行硅膠色譜(40gsio2hpgoldcombiflashcolumn)，用0-100％etoac的己烷溶液洗脫，然后用0-100％梯度的(20％meoh的etoac溶液)的etoac溶液洗脫，得到白色固體的(3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-醇(68mg，44％，60/40的α/β異構(gòu)體混合物)。rf＝0.32(etoac).¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ8.05(s,1h),7.86(s,1h),7.81(s,1h),7.64(s,1h),7.26(m,10h),6.95(m,1h),6.71(m,1h),6.08(m,1h),5.34(m,1h),4.65(m,6h),4.71(m,2h).¹⁹fnmr(282.2mhz,cdcl3)δ–211(m).lcmsm/z465[m+h].hplc(6–98％mecn–h2o梯度，0.05％tfa改性劑)tr＝4.37min.(α-異構(gòu)體),4.54min.(β-異構(gòu)體).

(3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-甲腈。(3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-醇(195mg，0.42mmol)溶于mecn(1.4ml)中，用tmscn(336μl，2.52mmol)和in(otf)3(708mg，1.26mmol)處理。將溶液在約70℃下攪拌18小時，然后冷卻至約0℃。將混合物用飽和nahco3溶液(20滴)處理，然后溫?zé)嶂潦覝?，并用etoac(100ml)和h2o(50ml)稀釋。分離有機(jī)層并用飽和nacl溶液(50ml)洗滌，用mgso4干燥，過濾并減壓濃縮。將剩余物進(jìn)行硅膠色譜(40gsio2hpgoldcombiflashcolumn)，用0-100％etoac的己烷溶液洗脫，得到白色固體的(3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-甲腈(60/40的α/β異構(gòu)體混合物)。兩種異構(gòu)體的數(shù)據(jù)：rf＝0.53(etoac).¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ8.01(s,1h),7.94(s,1h),7.30(m,10h),7.00(d,j＝4.5hz,1h),6.93(d,j＝4.8hz,1h),6.87(d,j＝5.4hz,1h),6.70(d,j＝4.8hz,1h),5.85(dd,j＝52,3.3hz,1h),5.55(dd,j＝53,4.5hz,1h),4.71(m,7h),3.87(m,2h),3.72(m,2h).¹⁹fnmr(282.2mhz,cdcl3)δ–196(m),–203(m).lcmsm/z474[m+h].hplc(6–98％mecn–h2o梯度,0.05％tfa改性劑)tr＝4.98min.

(2r,3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-氟-4-羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈(2)(3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-甲腈(110mg，0.23mmol)溶于ch2cl2(1.5ml)中并冷卻至約0℃。將反應(yīng)混合物用bcl3(1.0m，在ch2cl2中，766μl，0.77mmol)處理并攪拌2小時。然后將混合物冷卻至約-78℃，并用et3n(340μl，2.44mmol)處理，接著用meoh(2ml)處理，然后升溫至室溫。將反應(yīng)物減壓濃縮，然后與meoh(3×5ml)共蒸發(fā)。然后將剩余物懸浮于h2o(5ml)中，并用nahco3(1g)處理。將溶液攪拌10分鐘，然后減壓濃縮。將剩余物過濾，并在燒結(jié)玻璃漏斗(粗)上用meoh(3×10ml)洗滌，減壓濃縮洗脫液。將剩余物進(jìn)行反相hplc(具有0.05％tfa改性劑的6-98％mecn于h2o中的梯度)，得到白色固體形式的(2r,3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-氟-4-羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈2的α-異構(gòu)體。β-異構(gòu)體的數(shù)據(jù)：rf＝0.13(10％meoh于etoac中).¹hnmr(300mhz,cd3od)δ8.09(s,1h),7.28(d,j＝5.1hz,1h),7.17(d,j＝5.1hz,1h),5.42(dd,j＝53,3.3hz,1h),4.20(m,2h),3.99(d,j＝3.6hz,1h),3.77(d,j＝3.6hz,1h).¹⁹fnmr(282.2mhz,cdcl3)δ–197(m).lcmsm/z294[m+h].hplc(2–98％mecn–h2o梯度,0.05％tfa改性劑)tr＝1.49min.

實(shí)施例6：(2r,3r,4r,5s)-5-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-4-氟-2-(羥基甲基)-5-甲基四氫呋喃-3-醇(化合物3)

(2r,3r,4r,5s)-5-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-4-氟-2-(羥基甲基)-5-甲基四氫呋喃-3-醇的制備如下描述。

在n2(g)下，將起始核苷(如化合物2的合成中所述的方法制備)(0.355g，0.765mmol)溶于無水thf(35ml)中，并在攪拌理冷卻至約0℃。加入甲基氯化鎂(2ml，6mmol)的溶液(3n于thf中)，將所得混合物攪拌過夜。加入乙酸(7mmol)以淬滅反應(yīng)，然后在減壓下通過旋轉(zhuǎn)除去溶劑。將剩余物重新溶解在ch2cl2中，溶液經(jīng)過硅膠塞以從粗混合物中分離產(chǎn)物(0.355g)。lc/ms(m/z:480,m⁺¹)。將粗物質(zhì)溶于無水ch2cl2(20ml)中并置于n2(g)下。將溶液攪拌并用甲磺酸(0.2ml，2.74mmol)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌約12小時，然后通過加入et3n(3.5mmol)淬滅。將混合物減壓濃縮，剩余物進(jìn)行硅膠色譜分離，得到甲基取代的核苷，其為β-和α-端基異構(gòu)體的4:1混合物。¹hnmr(300mhz,cd3cn)主要端基異構(gòu)體δ7.87(s,1h),7.27-7.40(m,10h),6.77(d,j＝4.5hz,1h),6.70(d,j＝4.5hz,1h),6.23(brs,2h),5.53(dd,j＝55,3.3hz,1h),4.42-4.75(m,4h),4.19-4.26(m,1h),3.65-4.00(m,3h),1.74(d,j＝3.9hz,3h).¹⁹fnmr(282.2mhz,cd3cn)主要端基異構(gòu)體δ-207(m,1f).lcmsm/z463[m+h].

將芐基化的核苷物質(zhì)(0.134g，0.290mmol)，degussa催化劑(0.268g)和acoh(30ml)混合在一起。向反應(yīng)氣氛中加入h2(g)，將反應(yīng)物攪拌約2小時。通過過濾除去催化劑，并將混合物減壓濃縮。將剩余物溶解在最少量的h2o中并進(jìn)行反相hplc(c¹⁸hydrorp柱)以分離β-端基異構(gòu)體3.¹hnmr(300mhz,d2o)δ7.87(s,1h),7.22(d,j＝4.8hz,1h),6.87(d,j＝4.8hz,1h),5.35(dd,j＝54,3.6hz,1h),3.97-4.10(m,2h),3.81(dd,j＝12.6,2.1hz,1h),3.64(dd,j＝12.6,4.8hz,1h),1.65(d,j＝4.2hz,3h).¹⁹fnmr(282.2mhz,cd3cn)δ-207(m,1f).

少量的α端基異構(gòu)體表征如下。¹hnmr(300mhz,d2o)δ7.86(s,1h),7.26(d,j＝4.8hz,1h),6.85(d,j＝4.8hz,1h),5.31(dd,j＝54,3.9hz,1h),4.39(ddd,j＝26.1,9.9,3.6hz,2h),4.00-4.05(m,1h),3.90(dd,j＝12.3,2.1hz,1h),3.66(dd,j＝12.6,4.8,1h),1.56(s,3h).¹⁹fnmr(282.2mhz,cd3cn)δ-198(dd,j＝54,26hz,1f).

實(shí)施例7：(2s)-2-(((((2r,3r,4r,5s)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-4-氟-3-羥基5-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基苯氧基)磷?；?氨基)丙酸異丙基酯(化合物4)

將核苷3(0.011g，0.04mmol)溶解在磷酸三甲酯(2ml)中并冷卻至0℃。將混合物在n2(g)氣氛和1-甲基咪唑(0.320ml，5mmol)中攪拌，隨后加入丙氨酰基單異丙基單酚磷酰氯c(0.240ml，4.4mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌2小時，然后緩慢升溫至室溫，同時通過lc/ms進(jìn)行監(jiān)測。當(dāng)通過lcms確定完成時，將反應(yīng)混合物用h2o(5ml)處理，然后減壓濃縮。將剩余物溶于ch2cl2中并進(jìn)行硅膠色譜，用0-100％etoac的己烷溶液洗脫。收集產(chǎn)物級分并濃縮。將剩余物進(jìn)行制備型hplc，得到作為異構(gòu)體混合物的丙氨酸異丙基的單氨基化合物前藥4。¹hnmr(300mhz,cd3cn)δ7.87(s,1h),7.17-7.44(m,5h),6.71-6.83(m,2h),6.14(br,s,2h),5.38(dd,j＝56,3.3hz,1h),4.92-5.01(m,1h),3.86-4.46(m,6h),3.58(m,1h),1.73(m,3h),1.18-1.34(m,9h).lcmsm/z552[m+h].

實(shí)施例8：(2s)-2-(((((2r,3r,4r,5s)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-4-氟-3-羥基-5-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸乙酯(化合物5)

將核苷3(0.026g，0.092mmol)溶于磷酸三甲酯(2ml)中并冷卻至0℃。將混合物在n2(g)下攪拌，加入1-甲基咪唑(0.062ml，0.763mmol)，然后加入氯化物a(0.160g，0.552mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌2小時，然后緩慢升溫至室溫。加入h2o(5ml)以淬滅反應(yīng)，然后將混合物減壓濃縮。將剩余物溶于ch2cl2中并進(jìn)行硅膠色譜，用0-100％etoac的己烷溶液洗脫。收集產(chǎn)物級分并濃縮。使用0至100％etoac的己烷溶液洗脫粗產(chǎn)物。收集粗產(chǎn)物并減壓濃縮。將剩余物進(jìn)行制備型hplc，得到化合物5。lcmsm/z538[m+h].

實(shí)施例9：((2r,3r,4r,5s)-5-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-4-氟-3-羥基-5-甲基四氫呋喃-2-基)甲基四氫三磷酸酯(化合物6)

將核苷3(0.022g，0.056mmol)溶解在磷酸三甲酯(1ml)中并在n2(g)下攪拌。加入三氯氧磷(0.067ml，0.73mmol)，將混合物攪拌約2小時。通過分析型離子交換柱監(jiān)測，確定形成>80％單磷酸酯的時間。加入溶于無水dmf(1ml)中的三丁基胺(0.44ml，1.85mmol)和焦磷酸三乙酯(0.327g，0.72mmol)的溶液。將反應(yīng)混合物攪拌20分鐘，然后通過在向h2o(5ml)中加入1n三乙基碳酸氫銨溶液淬滅。將混合物減壓濃縮，殘留物再溶解于h2o中。將溶液進(jìn)行離子交換色譜，得到標(biāo)題產(chǎn)物化合物6。lcmsm/z521[m-h].tr＝0.41.hplc離子交換tr＝9.40min

實(shí)施例10：(2r,3r,5s)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-羥基-5-(羥基甲基)-四氫呋喃-2-甲腈(化合物7)

(2r,3r,5s)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-羥基-5-(羥基甲基)-四氫呋喃-2-甲腈的制備如下所述。

((3αr,5s,6αr)-2,2-二甲基-四氫呋喃并[2,3-d][1,3]二氧戊環(huán)-5-基)甲醇。將乙酸酯材料(1.2g，5.5mmol)(j.org.chem.1985,50,3577，debernardo等人)溶解在1:1的meoh和thf(10ml)混合物中。加入1nnaoh水溶液(10ml)直至ph為13。將反應(yīng)混合物攪拌約2小時，然后加入acoh中和至ph為8-9?；旌衔镉胑toac(10×30ml)萃取，合并的有機(jī)萃取液用無水na2so4干燥，過濾并減壓濃縮。對剩余物進(jìn)行硅膠色譜，用0-70％etoac的己烷溶液洗脫，得到所需產(chǎn)物(866mg，90％)。¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ5.84(d,j＝3.6hz,1h),4.78(t,j＝4.5hz,1h),4.38(m,1h),3.93-3.54(m,2h),2.04-1.84(m,2h),1.52(s,3h),1.33(s,3h).

(3αr,5s,6αr)-5-(芐氧基甲基)-2,2-二甲基-四氫呋喃并[2,3-d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯。將氫化鈉(188mg，7.46mmol)溶于無水thf(5ml)中，并在室溫下在n2(g)下攪拌。將醇(866mg，4.97mmol)溶于無水thf(3ml)中，然后在5分鐘內(nèi)分批加入至氫化鈉混合物。將所得混合物攪拌約20分鐘，然后加入芐基溴(892μl，7.46mmol)。將反應(yīng)物攪拌約2小時，然后倒入冰冷的nahco3水溶液和etoac(30ml)的混合物中。分離有機(jī)層，然后將水層用etoac(30ml)再萃取。將合并的有機(jī)萃取物用無水na2so4干燥，過濾并減壓濃縮。將剩余物進(jìn)行硅膠色譜，用0-40％etoac的己烷溶液洗脫，得到芐基醚產(chǎn)物。¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.35-7.27(m,5h),5.86(d,j＝3.6hz,1h),4.74(t,j＝4.2hz,1h),4.60(s,2h),4.42(m,1h),3.69-3.53(m,2h),2.10-2.04(m,1h),1.83-1.77(m,1h),1.52(s,3h),1.33(s,3h).

(3r,5s)-5-(芐氧基甲基)-四氫呋喃-2,3-二醇。將芐基醚(910mg，3.44mmol)溶于1:1acoh和h2o(20ml)的混合物中，并在約60℃下攪拌約7小時。將混合物減壓濃縮，剩余物進(jìn)行硅膠色譜，用0-70％etoac的己烷溶液洗脫，得到二醇產(chǎn)物(705mg，91％)。¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.36-7.27(m,5h),5.40(d,j＝3.9hz,0.5h),5.17(s,0.5h),4.67-4.56(m,3h),4.33(m,0.5h),4.24(d,j＝4.8hz,0.5h),3.71-3.67(m,1h),3.56-3.42(m,2h),2.31-2.22(m,1h),2.08-1.89(m,2h).

(3r,5s)-5-(芐氧基甲基)-3-羥基-二氫呋喃-2(3h)-酮。將二醇(705mg，3.14mmol)溶于苯(30ml)中并用碳酸銀硅藻土(celite)混合物(3.46g，6.28mmol)處理。將所得混合物在約80℃，n2(g)下攪拌約2小時。然后將混合物冷卻至室溫，過濾并減壓濃縮。將剩余物進(jìn)行硅膠色譜，用0-70％etoac的己烷溶液洗脫，得到內(nèi)酯產(chǎn)物。¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.39-7.27(m,5h),4.75-4.68(m,1h),4.60-4.49(m,2h),3.74-3.54(m,2h),2.61-2.35(m,2h),2.38-2.28(m,1h).

(3r,5s)-3-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-二氫呋喃-2(3h)-酮。將內(nèi)酯(600mg，2.7mmol)溶于etoac(30ml)中，用氧化銀(626mg，2.7mmol)處理，然后用芐基溴(387μl，3.24mmol)處理。然后將反應(yīng)混合物在約50℃，n2(g)下攪拌約8小時。然后加入另外的氧化銀(300mg)，所得混合物在約50℃下攪拌約16h。加入另外的芐基溴(50ul)和氧化銀(150mg)，將混合物再攪拌約8小時。將反應(yīng)混合物冷卻，過濾，然后減壓濃縮。將剩余物進(jìn)行硅膠色譜，用0-20％etoac的己烷溶液洗脫，得到標(biāo)題產(chǎn)物。¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.39-7.27(m,10h),4.99(d,j＝11.4hz,1h),4.72(m,2h),4.56(m,2h),4.39(t,j＝8.1hz,1h),3.72-3.51(m,2h),2.42-2.25(m,2h).

(3r,5s)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-四氫呋喃-2-醇。將7-溴吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(607mg，2.85mmol)溶于無水thf(10ml)中，并在ar(g)下在室溫下攪拌。滴加tmscl(1.1ml，8.55mmol)，將混合物攪拌約2小時。將反應(yīng)物減壓濃縮，然后在高真空下干燥。將剩余物懸浮在thf(20ml)中，并在ar(g)下在約-78℃下攪拌。在約10分鐘內(nèi)滴加2.5mn-buli己烷溶液(2.28ml，5.7mmol)，并將所得混合物攪拌約60分鐘。在約20分鐘內(nèi)將溶于無水thf(7ml)的內(nèi)酯(742mg，2.37mmol)加入到上述混合物中。將反應(yīng)混合物攪拌約2小時，然后用acoh淬滅直至ph為5-6。將混合物升溫至室溫，然后用etoac稀釋。溶液用飽和nahco3溶液、飽和nacl洗滌，用無水na2so4干燥并減壓濃縮。將剩余物進(jìn)行硅膠色譜，用0-80％etoac的己烷溶液洗脫，得到標(biāo)題產(chǎn)物。lcmsm/z447.2[m+h],445.1[m–h].

(3r,5s)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-四氫呋喃-2-甲腈。將醇(250mg，0.56mmol)溶于無水ch2cl2(10ml)中，并在ar(g)下在約-15℃下攪拌。滴加tmscn(448μl，3.36mmol)，將混合物攪拌約10分鐘。在10分鐘內(nèi)滴加tmsotf(466μl，2.58mmol)，將所得混合物在約-15℃下攪拌約90分鐘。加入另外的tmscn(224μl，3當(dāng)量)和tmsotf(202μl，2當(dāng)量)，繼續(xù)攪拌約5小時。加入飽和nahco3水溶液以淬滅反應(yīng)，將混合物攪拌約10分鐘。分離有機(jī)層，用飽和nahco3溶液、飽和nacl溶液洗滌，用無水na2so4干燥，過濾并減壓濃縮。將剩余物進(jìn)行硅膠色譜，用0-70％etoac的己烷溶液洗脫，得到標(biāo)題產(chǎn)物。lcmsm/z456.3[m+h],454.1[m–h].

(2r,3r,5s)2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-羥基-5-(羥基甲基)-四氫呋喃-2-甲腈(7)。將芐基醚(150mg，0.329mmol)溶于無水ch2cl2(2ml)中，并將混合物在ar(g)下在約-20℃下攪拌。滴加1mbcl3的ch2cl2溶液(724μl，0.724mmol)，將所得混合物攪拌約2小時。加入另外的1m溶于ch2cl2的bcl3(724μl，0.724mmol)，繼續(xù)攪拌2小時。然后將混合物冷卻至約-78℃，并用et3n和meoh(3ml)的2:1混合物緩慢處理。將混合物攪拌約10分鐘，然后用meoh(10ml)處理。使反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝?，然后減壓濃縮。將剩余物溶于meoh中并減壓濃縮。將剩余物再次溶解在meoh中并用固體nahco3處理。將混合物攪拌約5分鐘，然后通過過濾除去固體。將溶液在減壓下濃縮并進(jìn)行制備型hplc以提供所需產(chǎn)物7。¹hnmr(300mhz,d2o)δ7.71(s,1h),6.75(d,j＝4.5hz,1h),6.65(d,j＝4.8hz,1h),4.91(t,j＝6.3hz,1h),4.57(m,1h),3.67-3.47(m,2h),2.18(m,2h).lcmsm/z276.1[m+h],274.0[m–h].

實(shí)施例11：(2s)-2-((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)-磷酰基氨基)丙酸異丙基酯(化合物8)

將核苷1(45mg，0.15mmol)溶于無水磷酸三甲酯(0.5ml)中，并將溶液在約0℃下在n2(g)下攪拌。向該溶液中加入甲基咪唑(36μl，0.45mmol)。將氯代氨基磷酸酯c(69mg，0.225mmol)溶于無水thf(0.25ml)中并滴加到核苷混合物中。當(dāng)通過lcms確定反應(yīng)完成時，將反應(yīng)混合物用etoac稀釋并用飽和nahco3水溶液、飽和nacl洗滌，用無水na2so4干燥，過濾并減壓濃縮。將剩余物進(jìn)行硅膠色譜，用0-5％meoh的ch2cl2洗脫，然后通過制備型hplc，得到產(chǎn)物。¹hnmr(300mhz,cd3od)δ7.95(m,1h),7.31-6.97(m,7h),4.94(m,1h),4.78(m,1h),4.43(m,3h),4.20(m,1h),3.80(d,1h),1.30-1.18(m,9h).³¹pnmr(121.4mhz,cd3od)δ3.8.lcmsm/z561.0[m+h],559.0[m-h].

實(shí)施例12：(2s)-2-((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；被?丙酸2-乙基丁基酯(化合物9)

化合物9可通過如下描述的幾種方法制備。

方式1

根據(jù)與化合物8的制備方法相同的方法由化合物1和氯化物b制備。¹hnmr(300mhz,cd3od)δ7.87(m,1h),7.31-7.16(m,5h),6.92-6.89(m,2h),4.78(m,1h),4.50-3.80(m,7h),1.45-1.24(m,8h),0.95-0.84(m,6h).³¹pnmr(121.4mhz,cd3od)δ3.7.lcmsm/z603.1[m+h],601.0[m-h].

方式2

(2s)-2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸2-乙基丁基酯。(2s)-2-(((4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯(1.08g，2.4mmol)溶于無水dmf(9ml)，并在室溫下在氮?dú)鈿夥障聰嚢琛?2r,3r,4s,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-二羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈(350mg，1.2mmol)一次加入到反應(yīng)混合物中。然后在約10分鐘內(nèi)將叔丁基氯化鎂在thf中的溶液(1m，1.8ml，1.8mmol)滴加到反應(yīng)中。將反應(yīng)物攪拌約2小時，此時將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(50ml)稀釋，并用飽和碳酸氫鈉水溶液(3×15ml)洗滌，然后用飽和氯化鈉水溶液(15ml)洗滌。有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮。所得油狀物用硅膠柱色譜法純化(0-10％meoh的dcm溶液)，得到白色固體形式的(2s)-2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯(311mg，43％，在磷上的1:0.4非對映體混合物)。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.85(m,1h),7.34–7.23(m,2h),7.21–7.09(m,3h),6.94–6.84(m,2h),4.78(d,j＝5.4hz,1h),4.46–4.33(m,2h),4.33–4.24(m,1h),4.18(m,1h),4.05–3.80(m,3h),1.52–1.39(m,1h),1.38–1.20(m,7h),0.85(m,6h).³¹pnmr(162mhz,cd3od)δ3.71,3.65.lcmsm/z603.1[m+h],600.9[m-h].hplc(2–98％mecn–h2o梯度，含0.1％tfa改性劑，8.5min內(nèi),1.5ml/min,柱:phenomenexkinetexc18,2.6um4.6x100mm)tr＝5.544min,5.601min

(s)和(r)非對映異構(gòu)體的分離

(2s)-2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸2-乙基丁基酯溶于乙腈中。所得的溶液上樣至luxcellulose-2手性柱中，用乙腈平衡，并用恒溶液乙腈/甲醇(95:5體積/體積)洗脫。首先洗脫的非對映異構(gòu)體的保留時間為17.4分鐘，隨后洗脫的非對映異構(gòu)體的保留時間為25.0分鐘。

首先洗脫的非對映異構(gòu)體是(s)-2-(((r)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯：

¹hnmr(400mhz,cd3od)δ8.05(s,1h),7.36(d,j＝4.8hz,1h),7.29(brt,j＝7.8hz,2h),7.19–7.13(m,3h),7.11(d,j＝4.8hz,1h),4.73(d,j＝5.2hz,1h),4.48–4.38(m,2h),4.37–4.28(m,1h),4.17(t,j＝5.6hz,1h),4.08–3.94(m,2h),3.94–3.80(m,1h),1.48(sep,j＝12.0,6.1hz,1h),1.34(p,j＝7.3hz,4h),1.29(d,j＝7.2hz,3h),0.87(t,j＝7.4hz,6h).³¹pnmr(162mhz,cd3od)δ3.71(s).hplc(2–98％mecn–h2o梯度，含0.1％tfa改性劑，8.5min內(nèi),1.5ml/min,柱:phenomenexkinetexc18,2.6um4.6x100mm)tr＝5.585min.

隨后洗脫的非對映異構(gòu)體是(s)-2-(((s)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸2-乙基丁基酯：

¹hnmr(400mhz,cd3od)δ8.08(s,1h),7.36–7.28(m,3h),7.23–7.14(m,3h),7.08(d,j＝4.8hz,1h),4.71(d,j＝5.3hz,1h),4.45–4.34(m,2h),4.32–4.24(m,1h),4.14(t,j＝5.8hz,1h),4.08–3.94(m,2h),3.93–3.85(m,1h),1.47(sep,j＝6.2hz,1h),1.38–1.26(m,7h),0.87(t,j＝7.5hz,6h).

³¹pnmr(162mhz,cd3od)δ3.73(s).hplc(2–98％mecn–h2o梯度，含0.1％tfa改性劑，8.5min內(nèi),1.5ml/min,柱:phenomenexkinetexc18,2.6um4.6x100mm)tr＝5.629min.

實(shí)施例13：(2s)-2-((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；被?丙酸乙酯(化合物10)

(2s)-2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸乙酯的制備如下描述。

方式1、經(jīng)由氯化物a的制備

使用與制備化合物8相同的方法由化合物1和氯化物a制備。¹hnmr(300mhz,cd3od)δ7.95(m,1h),7.32-6.97(m,7h),4.78(m,1h),4.43-4.08(m,6h),3.83(m,1h),1.31-1.18(m,6h).³¹pnmr(121.4mhz,cd3od)δ3.7.lcmsm/z547.0[m+h],545.0[m-h].

方式2、經(jīng)由硝基苯化合物l制備

將化合物1(50mg，0.17mmol)溶于nmp-thf(1:1ml)中，并用冰浴冷卻。然后在約5分鐘內(nèi)加入tbumgcl(0.257ml，0.257mmol)。將所得混合物升溫至室溫，并攪拌約30分鐘。然后加入化合物l(根據(jù)us20120009147制備，74.6mg，0.189mmol)在thf(2ml)中的溶液。約30分鐘后，將反應(yīng)混合物用hplc(乙腈10-80％水溶液)純化，得到黃色固體的化合物29。將固體用硅膠色譜法(meoh0至20％dcm)進(jìn)一步純化，得到化合物29。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.76(d,j＝6.0hz,1h),7.25–7.14(m,2h),7.11–6.99(m,3h),6.87–6.72(m,2h),4.70(d,j＝5.4hz,1h),4.39–4.24(m,2h),4.20(dddd,j＝9.7,7.9,5.1,2.8hz,1h),4.10(dt,j＝12.8,5.5hz,1h),4.06–3.91(m,2h),3.72(ddq,j＝14.3,9.3,7.1hz,1h),1.17(dd,j＝7.1,1.0hz,1h),1.14–1.06(m,5h).³¹pnmr(162mhz,cd3od)δ3.73,3.68.msm/z＝547(m+1)⁺.

實(shí)施例14：(2s)-2-((((2r,3r,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-4-氟-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；被?丙酸乙酯(化合物11)

使用與制備化合物8相同的方法由化合物2和氯化物a制備化合物11。¹hnmr(300mhz,cd3od)δ7.91(m,1h),7.33-7.16(m,5h),6.98-6.90(m,2h),5.59(m,1h),4.50-4.15(m,4h),4.12-3.90(m,3h),1.33-1.18(m,6h).³¹pnmr(121.4mhz,cd3od)δ3.8.lcmsm/z549.0[m+h],547.1[m-h].

實(shí)施例15：(2s,2's)-2,2'-((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)磷酰基)雙(氮烷二基)二丙酸二乙酯(化合物12)

將核苷1(14.6mg，0.05mmol)溶于無水磷酸三甲酯(0.5ml)中，并在室溫下在n2(g)下攪拌。加入pocl3(9.2μl，0.1mmol)，將混合物攪拌約60分鐘。加入丙氨酸乙酯鹽酸鹽(61mg，0.4mmol)，然后加入et3n(70μl，0.5mmol)。將所得混合物攪拌約15分鐘，然后加入另外的et3n(70μl，0.5mmol)，得到ph為9-10的溶液。將混合物攪拌約2小時，然后用etoac稀釋，用飽和nahco3水溶液洗滌，然后用飽和nacl水溶液洗滌。將有機(jī)層用無水na2so4干燥并減壓濃縮。將剩余物進(jìn)行制備型hplc(c18柱)，得到產(chǎn)物12。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ8.13(s,1h),7.41(d,j＝4.8hz,1h),7.18(d,j＝4.8hz,1h),4.78(d,j＝5.6hz,1h),4.36(m,1h),4.25-4.08(m,7h),3.83(m,2h),1.33-1.23(m,12h).³¹pnmr(121.4mhz,cd3od)δ13.8.lcmsm/z570.0[m+h],568.0[m-h].

實(shí)施例16：(2s,3r,4s,5r)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-乙炔基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-3,4-二醇(化合物13)

(2s,3r,4s,5r)-2-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-乙炔基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-3,4-二醇的制備如下所述。

將核苷醇(0.6g，1.08mmol)(如化合物1合成中所述制備)溶于無水thf(8ml)中并置于n2(g)下。將反應(yīng)混合物攪拌并冷卻至約0℃，然后用0.5n乙炔基溴化鎂的thf溶液(17.2ml，17.2mmol)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。加入acoh(1.5ml)以淬滅反應(yīng)。將混合物減壓濃縮，殘留物再溶解于ch2cl2中。溶液經(jīng)過硅膠塞處理，用0至80％etoac的己烷溶液洗脫，得到標(biāo)題產(chǎn)物，為粗混合物。lcmsm/z579[m+h].

將粗乙炔基醇(0.624g，1.08mmol)溶解在無水ch2cl2(10ml)中并置于n2(g)下。攪拌混合物，并加入磺酸(0.2ml，2.74mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌約12小時。當(dāng)通過lcms確認(rèn)完成時，加入et3n(0.56ml)以淬滅反應(yīng)。將反應(yīng)物減壓濃縮，剩余物進(jìn)行硅膠色譜，用0至75％etoac的己烷溶液洗脫，得到端基異構(gòu)體的混合物的乙炔基核苷。lcmsm/z561[m+h].

將三芐基核苷(0.650g，1.16mmol)溶于無水ch2cl2(30ml)中，并在n2(g)下冷卻至-78℃。加入三溴化硼溶液(1n于ch2cl2中，5.5ml)，將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌1小時。加入meoh(10ml)和吡啶(2ml)的溶液以淬滅反應(yīng)，并將混合物升至室溫。將混合物減壓濃縮并進(jìn)行制備型hplc，得到α-端基異構(gòu)體(20mg)和β-端基異構(gòu)體13(110mg)。(β-端基異構(gòu)體)¹hnmr(300mhz,dmso)δ7.81(s,1h),7.76(brs,2h),6.80-6.85(m,2h),5.11(d,j＝7.2hz,1h),4.90(d,j＝6.0hz,1h),4.82(dd,j＝7.2,4.8hz,1h),4.62(t,j＝6.3hz,1h),3.95-3.99(m,1h),3.85-3.91(dd,j＝11.4,5.7hz,1h),3.61-3.67(m,1h),3.47-3.55(m,1h),3.52(d,j＝0.9hz,1h).(α-端基異構(gòu)體)¹hnmr(300mhz,dmso)δ7.80(s,1h),7.59(bs,2h),6.80(d,j＝4.5hz,1h),6.54(d,j＝4.2hz,1h),5.00(d,j＝7.2hz,1h),4.89(d,j＝4.8hz,1h),4.74(t,j＝5.7hz,1h),4.58(t,j＝4.5hz,1h),4.27(m,1h),3.88(m,1h),3.64-3.72(m,1h),3.51-3.59(m,1h),3.48(d,j＝0.6hz,1h).lcmsm/z291[m+h].

實(shí)施例17：(2r,3r,4r)-5-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-1,3,4-三(芐氧基)己烷-2,5-二醇(化合物14)

(2r,3r,4r)-5-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-1,3,4-三(芐氧基)己烷-2,5-二醇的制備如下所述。

將來自化合物1合成的三芐基醇(0.250g，0.453mmol)溶于無水thf(25ml)中，并在n2(g)下攪拌。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，然后加入3.0n甲基氯化鎂的thf溶液(1.2ml，3.62mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。加入乙酸(1.5ml)以淬滅反應(yīng)，然后將混合物減壓濃縮。將剩余物在ch2cl2中再溶解并經(jīng)硅膠塞處理，用0至80％etoac的己烷溶液洗脫。然后將粗產(chǎn)物(0.452g)不進(jìn)行進(jìn)一步純化用于下一反應(yīng)。lcmsm/z569[m+h].

將粗甲基核苷(0.452g，0.796mmol)溶于無水ch2cl2(20ml)中，并在n2(g)下攪拌。加入甲磺酸(0.2ml，2.78mmol)，反應(yīng)物在室溫下攪拌約12小時。加入et3n(0.56ml)以淬滅反應(yīng)，然后將混合物減壓濃縮。將剩余物進(jìn)行硅膠色譜，用0至75％etoac的己烷溶液洗脫，得到產(chǎn)物，為端基異構(gòu)體的混合物。lcmsm/z551[m+h].

將三芐基核苷(0.20g，0.364mmol)溶于acoh(30ml)中。并加入pd/c(degussa)(400mg)。將攪拌的混合物用n2(g)沖洗三次，然后加入h2(g)。將反應(yīng)在h2(g)下攪拌2小時。然后通過過濾除去催化劑。將溶液在減壓下濃縮，并將剩余物再溶解于h2o中。將溶液在中性條件下進(jìn)行制備型hplc，得到α-端基異構(gòu)體和β-端基異構(gòu)體14。(α-端基異構(gòu)體)¹hnmr(300mhz,d2o)δ7.81(s,1h),7.22(d,1h),6.75(d,1h),4.47(d,1h),4.25-4.31(m,1h),3.88-4.95(m,1h),3.58-3.86(dd,2h),1.50(s,3h).(β-端基異構(gòu)體)¹hnmr(300mhz,d2o)δ7.91(s,1h),7.26(d,1h),6.90(d,1h),4.61(d,1h),4.00-4.09(m,2h),3.63-3.82(dd,2h),1.67(s,3h).lcmsm/z281[m+h].

實(shí)施例18：s,s'-2,2'-((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)磷?；?雙(氧代)雙(乙烷-2,1-二基)雙(2,2-二甲基硫代丙酸酯)(化合物15)

將核苷1(0.028g，0.096mmol)溶解在磷酸三甲酯(1ml)中。將反應(yīng)在n2(g)下攪拌，然后用1h-四唑(0.021g，0.29mmol)處理。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，加入磷烷(87mg，0.192mmol)(nucleosidenucleotides,nucleicacids；14；3-5；1995；763-766.lefebvre，isabelle；pompon，alain；perigaud，christian；girardet，jean-luc；gosselin，gilles等人)。將反應(yīng)物攪拌2小時，然后用30％過氧化氫(0.120ml)淬滅。將混合物在室溫下攪拌30分鐘，然后用飽和硫代硫酸鈉水溶液(1ml)處理。將混合物攪拌10分鐘，然后減壓濃縮。將剩余物進(jìn)行制備型hplc分離標(biāo)題產(chǎn)物15。¹hnmr(300mhz,cd3cn)δ7.98(s,1h),6.92(d,1h),6.81(d,1h),6.44(bs,2h),4.82(m,2h),4.47(m,1h),4.24(m,2h),4.00(m,4h),3.80(bs,1h),3.11(m,4h),1.24(s,9h).³¹pnmr(121.4mhz,cd3cn)δ-1.85(s).lcmsm/z661[m+h].

實(shí)施例19：s,s'-2,2'-((((2r,3s,4r,5s)-5-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-乙炔基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)磷?；?雙(氧代)雙(乙烷-2,1-二基)雙(2,2-二甲基硫代丙酸酯)(化合物16)

使用與化合物15相同的方法制備化合物16，只是用化合物13作為起始核苷。¹hnmr(300mhz,cd3cn)δ7.91(s,1h),6.86(d,j＝4,8hz,1h),6.76(d,j＝4.5hz,1h),6.29(bs,2h),4.69(t,j＝2.7hz,1h),4.58(d,j＝5.7hz,1h),4.14-4.33(m,5h),3.99-4.07(m,4h),3.53(d,j＝5.4hz,1h),3.11(q,j＝5.7hz,4h),1.22(s,18h).lcmsm/z658.9[m+].tr＝2.31

實(shí)施例1:((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲基四氫三磷酸酯(化合物17)

使用與化合物6的制備類似的方法由化合物1制備化合物17。分離產(chǎn)物，其為鈉鹽。¹hnmr(400mhz,d2o)δ7.76(s,1h),6.88(d,j＝4.8hz,1h),6.73(d,j＝4.4hz,1h),4.86(d,j＝5.2hz,1h),4.43(m,1h),4.39(m,1h),4.05(m,1h),3.94(m,1h).³¹pnmr(121.4mhz,d2o)δ-5.4(d,1p),-10.8(d,1p),-21.1(t,1p).lcmsm/z530[m-h],531.9[m+h]tr＝0.22min.hplc離子交換tr＝9.95min.

實(shí)施例2.((2r,3s,4r,5s)-5-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-乙炔基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲基四氫三磷酸酯(化合物18)

使用與化合物6的制備類似的方法，由化合物13制備化合物18。將產(chǎn)物分離，為tea鹽。¹hnmr(300mhz,d2o)δ7.85(s,1h),7.09(d,j＝4.6hz,1h),6.95(d,j＝4.7hz,1h),4.23(m,2h),4.08(m,2h),3.06(q,j＝7.4hz,20h),1.14(t,j＝7.3hz,30h).³¹pnmr(121.4mhz,d2o)δ-10.8(d,1p),-11.2(d,1p),-23.2(t,1p).lcmsm/z530.8[m+h],tr＝0.46.hplc離子交換tr＝9.40min.

實(shí)施例3.((2r,3s,4r,5s)-5-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-二羥基-5-甲基四氫呋喃-2-基)甲基四氫三磷酸酯(化合物19)

使用與化合物6的制備類似的方法，由化合物14制備化合物19。¹hnmr(400mhz,d2o)δ7.78(s,1h),6.98(m,1h),6.84(m,1h),4.45(m,1h),4.04(m,4h),1.54(s,3h).³¹pnmr(161mhz,d2o)δ-10.6(m),-23.0(m).lcmsm/z521.0[m+h].

實(shí)施例4.((2r,3r,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-4-氟-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲基四氫三磷酸酯(化合物20)

使用與化合物6的制備類似的方法，由化合物2制備化合物20。¹hnmr(400mhz,d2o)δ7.78(s,1h),6.93(d,j＝4.4hz,1h),6.78(d,j＝4.8hz,1h),5.45(dd,j＝53,4.4hz,1h),4.38-4.50(m,2h),4.13-4.20(m,2h).³¹pnmr(161mhz,d2o)δ-5.7(d,1p),-11.0(d,1p),-21.5(t,1p).lcmsm/z533.9.0[m+h],532.0[m-h]tr＝1.25min.hplc離子交換tr＝11.0min.

實(shí)施例5：(2s)-2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)-3-苯基丙酸乙酯(21)

(2s)-2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)-3-苯基丙酸乙酯的制備如下所述。

(s)-2-氨基-3-苯基丙酸乙酯鹽酸鹽的制備。

將l-苯基丙氨酸(5g，30mmol)溶于etoh(30ml)中。在室溫下將tmscl(6.915ml，54mmol)加入到反應(yīng)中。反應(yīng)容器裝有回流冷凝器，反應(yīng)物置于80℃浴中。將反應(yīng)攪拌過夜。第二天將反應(yīng)冷卻至室溫，減壓濃縮，將所得殘余物溶于et2o中。將所得漿液過濾，并將分離的固體進(jìn)一步用et2o洗滌。將洗滌的固體置于高真空下，得到本實(shí)施例(s)-2-氨基-3-苯基丙酸乙酯鹽酸鹽。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.52(s,3h),7.30(m,5h),4.24(abx,jax＝7.8hz,jbx＝6.2hz,1h),4.11(m,2h),3.17,3.05(abx,jab＝-14hz,jbx＝5.8hz,jax＝7.6hz,2h),1.09(t,j＝6.8hz,3h).

(2s)-2-(((4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)-3-苯基丙酸乙酯(化合物d)的制備

(s)-2-氨基-3-苯基丙酸乙酯鹽酸鹽(1.01g，4.41mmol)溶于dcm(50ml)中。將該溶液冷卻至約0℃，加入phop(o)cl2(0.656ml，4.41mmol)，然后在5分鐘內(nèi)緩慢加入et3n(1.62ml，11.5mmol)。除去冷浴，使反應(yīng)升溫至室溫，并攪拌80分鐘。加入p-no2phoh(0.583g，4.19mmol)，隨后加入更多的et3n(0.3ml，2.1mmol)。通過lc/ms監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程。反應(yīng)完成后，用et2o稀釋，過濾除去所得固體。濃縮濾液，通過硅膠柱色譜法(25g干燥負(fù)載柱，120g柱；洗脫液：100％己烷至55％etoac的己烷溶液)分離化合物d。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ8.17(m,2h),7.33(m,2h),7.09-7.25(m,10h),4.17(m,1h),4.07(m,2h),3.08(m,1h),2.84(m,1h),1.14(m,3h).³¹pnmr(162mhz,dmso-d6)δ-1.479(s),-1.719(s).msm/z＝471.01[m+1].

(2s)-2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)-3-苯基丙酸乙酯(化合物21)的制備

將化合物1(0.030g，0.103mmol)溶于dmf(1ml)中，然后加入thf(0.5ml)。在劇烈攪拌下，逐滴加入t-bumgcl(1m/thf，154.5μl，0.154μmol)至反應(yīng)中。將所得白色漿液在室溫下攪拌約30分鐘。在室溫下滴加化合物d(0.058g，0.124mmol)在thf(1ml)中的溶液。通過lc/ms監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程。當(dāng)反應(yīng)進(jìn)行到50％轉(zhuǎn)化時，將反應(yīng)在冰浴中冷卻并用冰醋酸(70μl)淬滅。將反應(yīng)濃縮，通過反相hplc從殘余物中分離出化合物21。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.91(d,j＝4hz,1h),7.90(brs,2h),7.09-7.30(m,8h),7.01,(t,j＝8.2hz,2h),6.89(d,j＝4.4hz,1h),6.82(t,j＝4.4hz,1h),6.27(m,1h),6.14(m,1h),5.34(m,1h),4.62(t,j＝5.6hz,1h),4.15(m,1h),3.78-4.01(m,6h),2.92(m,1h),2.78(m,1h),1.04(m,3h).³¹pnmr(162mhz,dmso-d6)δ3.69(s),3.34(s).msm/z＝623.0[m+h].

實(shí)施例6：(2s)-2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)-3-甲基丁酸乙酯(22)

(2s)-2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)-3-甲基丁酸乙酯的制備如下所述。

(2s)-3-甲基-2-(((4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丁酸乙酯(化合物e)的制備

將(s)-2-氨基-3-甲基丁酸乙酯(0.351g，1.932mmol)溶于dcm(17ml)中。將該溶液在冰浴中冷卻，加入phop(o)cl2(0.287ml，1.932mmol)，然后在約5分鐘內(nèi)緩慢加入et3n(1.62ml，11.4mmol)。除去冷浴，使反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝夭嚢?小時。加入p-no2phoh(0.255g，1.836mmol)，通過lc/ms監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程。反應(yīng)完成后，將混合物用et2o稀釋，過濾除去所得固體。將濾液濃縮，通過硅膠柱色譜法(12g干燥負(fù)載筒，80g柱；洗脫液：100％己烷至55％etoac的己烷溶液)分離化合物e。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.30(d,j＝9.2hz,2h),7.48(t,j＝9.6hz,2h),7.40(t,j＝7.8hz,2h),7.20-7.27(m,3h),6.60(quart,j＝11.6hz,1h),4.01(m,2h),3.61(m,1h),1.93(m,1h),1.11(m,3h),0.79(m,6h).³¹pnmr(162mhz,dmso-d6)δ-0.342(s),-0.578(s).msm/z＝422.9[m+h].

(2s)-2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)-3-甲基丁酸乙酯(化合物22)的制備

將化合物1(0.040g，0.137mmol)溶于nmp(1.5ml)中，然后加入thf(0.25ml)。將該溶液在冰浴中冷卻，在劇烈攪拌下滴加t-bumgcl(1m/thf，425.7μl，0.426μmol)。除去冰浴，將得到的白色漿液在室溫下攪拌約15分鐘。將化合物e(0.081g，0.192mmol)在thf(0.5ml)中的溶液以滴加方式加入到室溫下的反應(yīng)中。通過lc/ms監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程。當(dāng)反應(yīng)進(jìn)行到50％轉(zhuǎn)化時，將反應(yīng)在冰浴中冷卻并用冰醋酸(70μl)淬滅。將反應(yīng)濃縮，通過反相hplc從殘余物中半純化化合物22。半純的物質(zhì)通過硅膠柱色譜法(12g干燥負(fù)載柱，40g柱；洗脫液：100％etoac至10％meoh的etoac溶液)進(jìn)一步純化，得到化合物22。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.91(d,j＝1.6hz,1h),7.88(brs,2h),7.32(m,2h),7.15(m,3h),6.90(t,j＝4.2hz,1h),6.84(d,j＝4.8hz,1h),6.26(dd,j＝13.4,6.2hz,1h),5.87(quart.j＝11.2hz,1h),5.35(m,1h),4.64(m,1h),4.25(m,2h),3.93-4.15(m,4h),3.45(m,1h),1.87(m,1h),1.09-1.16(m,3h),0.70-0.83(m,6h).³¹pnmr(162mhz,dmso-d6)δ4.59(s),4.47(s).msm/z＝575.02[m+h].

實(shí)施例7：(s)-2-(((r)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸異丙基酯(23)

(s)-2-(((r)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸異丙基酯的制備如下描述。

將化合物1(60.0mg，206μmol)溶于nmp(0.28ml)中。加入thf(0.2ml)，然后在室溫下在氬氣氛下加入叔丁基氯化鎂(1.0m四氫呋喃溶液，0.309ml)。20分鐘后，加入化合物f(根據(jù)cho，a.etalj.med.chem.2014,57,1812-1825制備，81mg，206μmol)在thf(0.2ml)中的溶液，將所得混合物加熱至約50℃。3小時后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并通過制備型hplc(phenominexsynergi4uhydro-×150×30mm柱，5-100％乙腈/水梯度)直接純化，得到化合物23。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.86(s,1h),7.34–7.26(m,2h),7.21–7.12(m,3h),6.91(d,j＝4.6hz,1h),6.87(d,j＝4.6hz,1h),4.92(sept,j＝6.3hz,1h),4.80(d,j＝5.4hz,1h),4.43–4.34(m,1h),4.33–4.24(m,1h),4.18(t,j＝5.6hz,1h),3.82(dq,j＝9.7,7.1hz,2h),1.27(dd,j＝7.1,1.0hz,3h),1.18(dd,j＝6.3,4.8hz,6h).³¹pnmr(162mhz,cd3od)δ3.72(s).lc/ms:tr＝1.39min,msm/z＝561.11[m+h]；lc系統(tǒng)：thermoaccela1250uhplc；ms系統(tǒng)：thermolcqfleet；柱:kinetex2.6μxb-c18100a,50x4.6mm；溶劑：含0.1％乙酸的can，含0.1％乙酸的水；梯度：0min-2.0min2-100％acn,2.0min-3.05min100％acn,3.05min-3.2min100％-2％acn,3.2min-3.5min2％acn以2μl/min.hplc:tr＝2.523min；hplc系統(tǒng)：agilent1100series.；柱：gemini5μc18110a,50x4.6mm；溶劑：含0.1％tfa的can，含0.1％tfa的水；梯度：0min-5.0min2-98％acn,5.0min-6.0min98％acn，以2ml/min。

實(shí)施例27：(2s)-2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸環(huán)丁基酯(24)

(2s)-2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸環(huán)丁基酯的制備如下描述。

(2s)-2-(((4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸環(huán)丁基酯(化合物g)的制備

將二氯磷酸苯基酯(1.49ml，10mmol)溶解在10ml無水dcm中，并在冰浴中在氮?dú)夥障聰嚢琛Ｒ淮涡约尤雔-丙氨酸異丁基酯鹽酸鹽(0.9g，5mmol)。然后滴加三乙胺(765μl，5.5mmol)。反應(yīng)攪拌約1小時。再滴加三乙胺(765μl，5.5mmol)，將反應(yīng)物攪拌約45分鐘。一次性加入對硝基苯酚(1.25g，9mmol)，攪拌約30分鐘。加入三乙胺(765μl，5.5mmol)，將反應(yīng)混合物攪拌約2小時。然后加入另外的對硝基苯酚(1.25g，9mmol)和三乙胺(765μl，5.5mmol)，將反應(yīng)物再攪拌約2小時。將反應(yīng)混合物減壓濃縮。將所得粗品用etoac稀釋并用5％檸檬酸水溶液洗滌兩次，然后用飽和氯化鈉水溶液洗滌。然后將有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。將粗殘余物用硅膠柱(0-20-50％etoac的己烷溶液)純化，得到化合物g。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ8.33–8.23(m,2h),7.52–7.33(m,4h),7.33–7.17(m,3h),4.96–4.85(m,1h),4.07–3.96(m,1h),2.27(m,2h),2.07–1.91(m,2h),1.83–1.70(m,1h),1.70–1.55(m,1h),1.32(m,3h).³¹pnmr(162mhz,cd3od)δ-1.36,-1.59.msm/z＝420.9[m+h].

(2s)-2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸環(huán)丁基酯(化合物24)的制備

將化合物1(58mg，0.2mmol)與化合物g(101mg，0.24mmol)在2ml無水dmf中混合。一次加入氯化鎂(42mg，0.44mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至約50℃。加入dipea(87μl，0.5mmol)，將反應(yīng)物在約50℃下攪拌約2小時。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用etoac稀釋，并用5％檸檬酸水溶液，然后用飽和氯化鈉水溶液洗滌。然后將有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。將粗殘余物用硅膠柱(0-2-5％meoh的dcm溶液)純化，得到化合物24。¹hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.85(m,1h),7.34–7.22(m,2h),7.22–7.08(m,3h),6.94–6.84(m,2h),4.95–4.85(m,1h),4.79(m,1h),4.46–4.34(m,2h),4.34–4.24(m,1h),4.19(m,1h),3.81(m,1h),2.27(m,2h),2.01(m,2h),1.84–1.68(m,1h),1.62(m,1h),1.30–1.16(m,3h).³¹pnmr(162mhz,cd3od)δ3.70,3.65.msm/z＝573.0[m+h].

實(shí)施例8：(2s)-2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)-3-苯基丙酸異丙基酯(25)

(2s)-2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)-3-苯基丙酸異丙基酯的制備如下所述。

(2s)-2-(((4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)-3-苯基丙酸異丙基酯(化合物h)的制備

將二氯磷酸苯酯(718μl，4.8mmol)溶解在10ml無水dcm中，并在氮?dú)夥障略诒≈袛嚢?。一次加入l-苯基丙氨酸異丙酯鹽酸鹽(1g，4.1mmol)。加入另外10ml無水dcm。滴加三乙胺(736μl，5.3mmol)，將反應(yīng)混合物攪拌約30分鐘。然后滴加更多的三乙胺(736μl，5.3mmol)，將反應(yīng)混合物攪拌30分鐘。然后滴加另外的三乙胺(736μl，5.3mmol)，將反應(yīng)混合物攪拌約15分鐘。然后加入對硝基苯酚(600mg，4.32mmol)。然后除去冰浴，使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝夭嚢杓s2小時。加入更多的對硝基苯酚(50mg)和三乙胺(736μl，5.3mmol)，將反應(yīng)混合物攪拌約1小時。

然后將反應(yīng)混合物減壓濃縮，并用etoac稀釋并用5％檸檬酸水溶液洗滌兩次，然后用飽和氯化鈉水溶液洗滌。有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮。將粗產(chǎn)物用硅膠柱(0-15％etoac的己烷溶液)純化，得到化合物h。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.17(m,2h),7.38–7.13(m,10h),7.13–7.02(m,2h),4.95(m,1h),4.31(m,1h),3.69(m,1h),3.02(dd,j＝6.1,1.8hz,2h),1.21–1.08(m,6h).³¹pnmr(162mhz,cdcl3)δ-2.96,-2.98.msm/z＝485.0[m+h].

(2s)-2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)-3-苯基丙酸異丙基酯(化合物25)的制備

將化合物1(58mg，0.2mmol)和化合物h(116mg，0.24mmol)混合，加入2ml無水dmf。將反應(yīng)混合物在氮?dú)夥障略谑覝叵聰嚢?。?分鐘內(nèi)滴加1mtbumgcl的thf溶液(300μl，0.3mmol)，然后將反應(yīng)混合物攪拌約16小時。將反應(yīng)混合物用etoac稀釋并用5％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗滌。有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮。將粗殘余物用硅膠柱(0-5％meoh的dcm溶液)純化，得到化合物25。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.84(m,1h),7.27–7.08(m,8h),7.08–6.97(m,2h),6.88(m,2h),4.91–4.84(m,1h),4.74(m,1h),4.26(m,1h),4.19–4.04(m,2h),4.04–3.91(m,2h),2.97(m,1h),2.82(m,1h),1.14(m,3h),1.06(m,3h).³¹pnmr(162mhz,cd3od)δ3.63,3.25.msm/z＝637.0[m+h].

實(shí)施例29：(s)-2-(((s)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸甲酯(26)

(s)-2-(((s)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸甲酯的制備如下所述。

將化合物1(100mg，0.34mmol)溶于thf(2ml)中，并用冰水浴冷卻。然后緩慢滴加1mt-bumgcl(0.52ml，0.77mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌約30分鐘。然后在5分鐘內(nèi)加入化合物i(根據(jù)wo2012142085制備，219mg，0.52mmol)在thf(2ml)中的溶液，并將所得混合物在室溫下攪拌約24小時。然后將反應(yīng)混合物用etoac稀釋，在冰水浴下冷卻，用nahco3水溶液(2ml)洗滌，用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，真空濃縮。所得混合物通過硅膠柱色譜法(meoh0至20％的dcm溶液)和制備型hplc(乙腈10至80％的水溶液)純化，得到化合物26。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.86(s,1h),7.29(dd,j＝8.6,7.2hz,2h),7.21–7.09(m,3h),6.94–6.81(m,2h),4.79(d,j＝5.4hz,1h),4.38(ddq,j＝10.8,5.3,2.7hz,2h),4.33–4.23(m,1h),4.18(t,j＝5.5hz,1h),3.86(dq,j＝9.9,7.1hz,1h),3.62(s,3h),1.27(dd,j＝7.2,1.1hz,3h).msm/z＝533(m+1)⁺.

實(shí)施例30：(s)-2-(((s)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸新戊基酯(27)

(s)-2-(((s)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸新戊基酯的制備如下描述。

將化合物1(100mg，0.34mmol)溶于thf(2ml)中，并在冰水浴下冷卻。然后緩慢滴加1mt-bumgcl(0.52ml，0.77mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌約30分鐘。然后在約5分鐘內(nèi)加入化合物j(根據(jù)wo2012075140制備，248mg，0.52mmol)，所得混合物在室溫下攪拌約24小時，用etoac稀釋，在冰水浴下冷卻，用nahco3水溶液(2ml)處理，鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，真空濃縮。所得混合物通過硅膠柱色譜(meoh0至20％，在dcm中)和制備型hplc(乙腈10至80％水溶液)純化，得到化合物27。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.86(s,1h),7.36–7.24(m,2h),7.23–7.10(m,3h),6.96–6.85(m,2h),4.78(d,j＝5.4hz,1h),4.38(tdd,j＝10.0,4.9,2.5hz,2h),4.32–4.24(m,1h),4.17(t,j＝5.6hz,1h),3.91(dq,j＝9.8,7.1hz,1h),3.81(d,j＝10.5hz,1h),3.69(d,j＝10.5hz,1h),1.31(dd,j＝7.2,1.1hz,3h),0.89(s,9h).msm/z＝589(m+1)⁺.

實(shí)施例31：(2s)-2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸環(huán)戊基酯(28)

(2s)-2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸環(huán)戊基酯的制備如下所述。

將化合物1(100mg，0.34mmol)溶于thf(2ml)中，并在冰水浴下冷卻。然后緩慢滴加1mt-bumgcl(0.52ml，0.77mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌約30分鐘。然后在約5分鐘內(nèi)加入在thf(2ml)中的化合物k(根據(jù)wo2012075140制備，247mg，0.52mmol)，并將所得混合物在室溫下攪拌約24小時，用etoac稀釋，在冰水浴中冷卻，用nahco3水溶液(2ml)處理，鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，真空濃縮。所得混合物通過硅膠柱色譜法(meoh0至20％在dcm中)和制備型hplc(乙腈10至80％水溶液)純化，得到實(shí)施例28。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.85(s,1h),7.33–7.22(m,2h),7.14(tdd,j＝7.6,2.1,1.1hz,3h),6.95–6.87(m,2h),5.13–5.00(m,1h),4.78(d,j＝5.4hz,1h),4.48–4.35(m,2h),4.30(ddd,j＝10.6,5.7,3.6hz,1h),4.19(t,j＝5.4hz,1h),3.78(dq,j＝9.2,7.1hz,1h),1.81(dtd,j＝12.5,5.9,2.4hz,2h),1.74–1.49(m,6h),1.21(dd,j＝7.1,1.2hz,3h).msm/z＝587(m+1)⁺.

實(shí)施例9.(2s)-2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸環(huán)己基酯(29)

在約0℃下，約5分鐘內(nèi)向化合物1(50mg，0.343mmol)，化合物m(根據(jù)us20130143835制備，93mg，0.209mmol)和mgcl2(24.5mg，0.257mmol)在dmf(1ml)中的混合物中滴加二異丙基乙胺(0.075ml，0.43mmol)。將所得混合物在約50℃下攪拌約1小時。然后將反應(yīng)混合物用冰水浴冷卻，用1m檸檬酸(0.5ml)處理，并通過制備型hplc(acn0至70％在水中)直接純化，得到化合物29。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.84(s,1h),7.32–7.23(m,2h),7.18–7.10(m,3h),6.93–6.87(m,2h),4.78(d,j＝5.4hz,1h),4.67(td,j＝8.7,4.2hz,1h),4.48–4.35(m,2h),4.30(ddd,j＝10.8,5.7,3.7hz,1h),4.20(t,j＝5.4hz,1h),3.88–3.71(m,1h),1.83–1.63(m,4h),1.58–1.46(m,1h),1.46–1.24(m,5h),1.24(s,3h).³¹pnmr(162mhz,cd3od)δ3.75.msm/z＝601(m+1)+.

實(shí)施例10.2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)-2-甲基丙酸乙酯(30)

2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)-2-甲基丙酸乙酯的制備如下描述。

2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸乙酯的制備

將三苯基膦(6.18g，25.00mmol)加入thf(30ml)中。接下來加入diad(4.92ml，25.00mmol)，并在室溫下攪拌10分鐘。將2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸(5.08g，25.00mmol)溶于thf(20ml)中并加入到反應(yīng)混合物中，然后加入乙醇(2.19ml，37.49mmol)。使反應(yīng)在室溫下攪拌約1小時。在減壓下除去溶劑，將粗產(chǎn)物溶于1:1的et2o:己烷(120ml)中。濾出固體三苯基膦氧化物，減壓除去溶劑。將粗品加入最少量的ch2cl2中并通過0-50％etoac/hex的硅膠色譜純化，得到2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸乙酯。¹hnmr(400mhz,氯仿-d)δ4.18(q,j＝7.1hz,2h),1.49(s,6h),1.43(s,9h),1.27(t,j＝7.1hz,3h).

2-氨基-2-甲基丙酸乙酯鹽酸鹽的制備

將2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸乙酯(2.71g，11.72mmol)加入ch2cl2(25ml)中，并緩慢加入4nhcl的二噁烷(25mmol)溶液并在室溫下攪拌。1小時后，通過tlc確定反應(yīng)完成。在減壓下除去溶劑，將粗品與et2o共蒸發(fā)兩次，然后置于高真空下，得到2-氨基-2-甲基丙酸乙酯鹽酸鹽。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.70(s,3h),4.18(q,j＝7.1hz,2h),1.46(s,6h),1.21(t,j＝7.1hz,3h).

2-甲基-2-(((4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸乙酯(化合物n)的制備

將二氯磷酸苯酯(0.97ml，6.50mmol)和2-氨基-2-甲基丙酸乙酯鹽酸鹽(1.09g，6.50mmol)加入ch2cl2(50ml)中。將反應(yīng)混合物冷卻至約0℃，并緩慢加入tea(1.75ml，12.45mmol)。移除冷浴，并使反應(yīng)混合物在室溫下攪拌。約2小時后，通過³¹pnmr確定氨基酸的加入完成。加入對硝基苯酚(0.860g，6.17mmol)，然后加入tea(0.87g，7.69mmol)。使反應(yīng)在室溫下攪拌。約2小時后，通過lcms確定反應(yīng)完成。將反應(yīng)用et2o稀釋，并將tea·hcl鹽濾出。將粗產(chǎn)物濃縮并通過硅膠色譜法(0-50％etoac/hex)純化，得到化合物n。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.37–8.21(m，2h)，7.55–7.44(m，2h)，7.43–7.33(m，2h)，7.30–7.09(m，3h)，6.57(d,j＝10.1hz,1h),3.99(q,j＝7.1hz,2h),1.39(s,6h),1.08(t,j＝7.1hz,3h).³¹pnmr(162mhz,dmso-d6)δ-2.87.lc/ms:tr＝1.65min,msm/z＝408.97[m+1].；lc系統(tǒng)：thermoaccela1250uhplc；ms系統(tǒng)：thermolcqfleet；柱：kinetex2.6μxb-c18100a,50x3.00mm；溶劑：含0.1％甲酸的乙腈，含0.1％甲酸的水；梯度：0min-2.4min2-100％acn,2.4min-2.80min100％acn,2.8min-2.85min100％-2％acn,2.85min-3.0min2％acn，以1.8ml/min.

2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)-2-甲基丙酸乙酯(化合物30)的制備

將化合物1(66mg，0.23mmol)加入nmp(2.0ml)中。將混合物冷卻至約0℃，并緩慢加入tbumgcl(1.0m的thf溶液，0.34ml，0.34mmol)。使反應(yīng)物在約0℃下攪拌約30分鐘，然后加入化合物n(139mg，0.34mmol)溶解在thf(1.0ml)中的溶液。移除冷浴，將反應(yīng)放在約50℃的預(yù)熱油浴中。約2小時后，將反應(yīng)冷卻至室溫，用乙酸和甲醇淬滅。將粗產(chǎn)物濃縮并通過無改性劑的反相hplc純化，得到化合物30。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.89(m,3h),7.31(q,j＝8.1hz,2h),7.22–7.05(m,3h),6.87(d,j＝4.5,1h),6.80(d,j＝4.5hz,1h),6.27(d,j＝11.7,1h),5.81(d,j＝9.7,1h),5.35(d,j＝5.6hz,1h),4.64(dt,j＝9.0,5.6hz,1h),4.24(m,2h),4.11(m,1h),4.04–3.90(m,3h),1.39–1.23(m,6h),1.10(t,j＝7.1,3h).³¹pnmr(162mhz,dmso-d6)δ2.45,2.41.lc/ms:tr＝1.03min,msm/z＝561.03[m+1]；lc系統(tǒng)：thermoaccela1250uhplc；ms系統(tǒng)：thermolcqfleet；柱：kinetex2.6μxb-c18100a,50x3.00mm；溶劑：含0.1％甲酸的乙腈，含0.1％甲酸的水；梯度：0min-2.4min2-100％acn,2.4min-2.80min100％acn,2.8min-2.85min100％-2％acn,2.85min-3.0min2％acn，以1.8ml/min.

實(shí)施例34：2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)-2-甲基丙酸異丙酯(31)

2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)-2-甲基丙酸異丙酯的制備如下描述。

2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸異丙酯的制備

將三苯基膦(6.17g，25.00mmol)加入thf(30ml)中。接下來加入diad(4.92ml，25.00mmol)并在室溫下攪拌約10分鐘。將2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸(5.07g，25.00mmol)溶解于thf(20ml)中，并加入到反應(yīng)混合物中，然后加入異丙醇(1.91ml，25.00mmol)。使反應(yīng)在室溫下攪拌約1小時。在減壓下除去溶劑，將粗產(chǎn)物溶于1:1et2o:己烷(120ml)中。濾出固體三苯基膦氧化物，減壓除去溶劑。將粗產(chǎn)物溶于最少量的ch2cl2中并通過硅膠色譜法(0-50％etoac/hex)純化，得到2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸異丙酯。¹hnmr(400mhz,氯仿-d)δ5.03(p,j＝6.2hz,1h),1.48(s,6h),1.40(d,j＝6.2hz,9h),1.24(d,j＝6.3hz,6h).

2-氨基-2-甲基丙酸異丙酯鹽酸鹽的制備

將2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸異丙酯(4.09g，16.67mmol)加入ch2cl2(50ml)中，緩慢加入4nhcl的二噁烷(50mmol)溶液，并在室溫下攪拌。約1小時后，通過tlc測定反應(yīng)完成。在減壓下除去溶劑，粗產(chǎn)物與et2o共蒸發(fā)兩次，然后置于高真空下，得到2-氨基-2-甲基丙酸異丙酯鹽酸鹽。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.61(s,3h),4.96(p,j＝6.2hz,1h),1.44(s,6h),1.22(d,j＝6.2hz,6h).

2-甲基-2-(((4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸異丙酯(化合物o)的制備

將二氯磷酸苯酯(0.83ml，5.58mmol)和2-氨基-2-甲基丙酸異丙酯鹽酸鹽(1.01g，5.58mmol)加入ch2cl2(50ml)中。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，緩慢加入tea(1.61ml，11.45mmol)。移除冷浴，并使反應(yīng)混合物在室溫下攪拌。約2小時后，通過³¹pnmr確定氨基酸的加入完成。加入對硝基苯酚(0.74g，5.30mmol)，然后加入tea(0.81,5.87mmol)。使反應(yīng)在室溫下攪拌。約2小時后，通過lcms確定反應(yīng)完成。將反應(yīng)用et2o稀釋，并將tea·hcl鹽濾出。將粗產(chǎn)物濃縮并通過硅膠色譜(0-50％etoac/hex)純化，得到化合物o。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.42–8.19(m,2h),7.55–7.43(m,2h),7.39(dd,j＝8.6,7.2hz,2h),7.30–7.12(m,3h),6.53(d,j＝10.1hz,1h),4.82(hept,j＝6.3hz,1h),1.38(s,6h),1.09(d,j＝6.3,6h).³¹pnmr(162mhz,dmso-d6)δ-2.84.lc/ms:tr＝1.73min,msm/z＝422.92[m+1]；lc系統(tǒng)：thermoaccela1250uhplc；ms系統(tǒng)：thermolcqfleet；柱：kinetex2.6μxb-c18100a,50x3.00mm；溶劑：含0.1％甲酸的乙腈，含0.1％甲酸的水；梯度：0min-2.4min2-100％acn,2.4min-2.80min100％acn,2.8min-2.85min100％-2％acn,2.85min-3.0min2％can，以1.8ml/min.

2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)-2-甲基丙酸異丙酯(化合物31)的制備

將化合物1(66mg，0.23mmol)加入nmp(2.0ml)中。將混合物冷卻至約0℃，并緩慢加入tbumgcl(1.0m在thf中，0.57ml，0.57mmol)。使反應(yīng)物在約0℃下攪拌約30分鐘，然后加入化合物o(143mg，0.34mmol)在thf(1.0ml)中的溶液。移除冷浴，將反應(yīng)物置于約50℃的預(yù)熱油浴中。約2小時后，將反應(yīng)冷卻至室溫，用乙酸和甲醇淬滅。將粗產(chǎn)物濃縮并通過未改性的反相hplc純化，得到化合物31。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.88(m,3h),7.30(td,j＝8.5,7.0hz,2h),7.20–7.04(m,3h),6.87(d,j＝4.5,1h),6.80(d,j＝4.5hz,1h),6.27(d,6.1hz,1h),5.75(t,j＝9.1hz,1h),5.34(d,j＝5.7hz,1h),4.81(p,j＝6.3hz,1h),4.71–4.50(m,1h),4.23(m,2h),4.11(m,1h),4.03–3.83(m,1h),1.37–1.23(m,6h),1.18–1.04(m,6h).³¹pnmr(162mhz,dmso)δ2.47,2.43.lc/ms:tr＝1.08min,msm/z＝575.06[m+1]；lc系統(tǒng)：thermoaccela1250uhplc；ms系統(tǒng)：thermolcqfleet；柱：kinetex2.6μxb-c18100a,50x3.00mm；溶劑：含0.1％甲酸的乙腈，含0.1％甲酸的水；梯度：0min-2.4min2-100％acn,2.4min-2.80min100％acn,2.8min-2.85min100％-2％acn,2.85min-3.0min2％acn，以1.8ml/min.

實(shí)施例35：(s)-2-(((s)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯(32)

(s)-2-(((s)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯的制備如下所述。

(3r,4r,5r)-3,4-雙(芐氧基)-5-((芐氧基)甲基)二氫呋喃-2(3h)-酮的制備。

(3r,4r,5r)-3,4-雙(芐氧基)-5-((芐氧基)甲基)四氫呋喃-2-醇(15.0g)與mtbe(60.0ml)、kbr(424.5mg)、k2hpo4水溶液(2.5m，14.3ml)和tempo(56mg)合并。將該混合物冷卻至約1℃。分部分緩慢加入水性漂白劑溶液(7.9％重量)，直到通過淀粉/碘化物測試所示的原料完全消耗。分離各層，水層用mtbe萃取。將合并的有機(jī)相用mgso4干燥并減壓濃縮，得到固體產(chǎn)物。

(4-氨基-7-碘代吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪)的制備

向4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(10.03g；74.8mmol)在n,n-二甲基甲酰胺(70.27g)的溶液中分部分加入n-碘代琥珀酰亞胺(17.01g；75.6mmol)，同時保持內(nèi)容物在約0℃。反應(yīng)完成后(在約0℃下約3小時)，將反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)移到1m氫氧化鈉水溶液(11gnaoh和276ml水)中，同時將內(nèi)容物保持在約20-30℃。將所得漿液在約22℃下攪拌1.5小時，然后過濾。將固體用水(50ml)沖洗并在真空下在約50℃下干燥，得到4-氨基-7-碘代吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪固體。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.90(s,1h),7.78(brs,2h),6.98(d,j＝4.4hz,1h),6.82(d,j＝4.4hz,1h).¹³cnmr(101mhz,dmso-d6)δ155.7,149.1,118.8,118.1,104.4,71.9.msm/z＝260.97[m+h].

經(jīng)由(4-氨基-7-碘代吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪)制備(3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙(芐氧基)-5-((芐氧基)甲基)四氫呋喃-2-醇

向氮?dú)夥障碌姆磻?yīng)器中加入碘代堿2(81g)和thf(1.6l)。將所得溶液冷卻至約5℃，加入tmscl(68g)。然后緩慢加入phmgcl(345ml，1.8m于thf中)，同時保持內(nèi)部溫度在約≤5℃。將反應(yīng)混合物在約0℃下攪拌30分鐘，然后冷卻至約-15℃。緩慢加入iprmgcl-licl(311ml，1.1m于thf中)，同時保持內(nèi)部溫度低于約-12℃。在約-15℃下攪拌約10分鐘后，將反應(yīng)混合物冷卻至約-20℃，加入內(nèi)酯1(130g)的thf(400ml)溶液。然后將反應(yīng)混合物在約-20℃下攪拌約1小時，并用acoh(57ml)淬滅。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂良s0℃，并用nahco3水溶液(5重量％，1300ml)調(diào)節(jié)至ph7-8。然后將反應(yīng)混合物用etoac(1300ml)稀釋，分離有機(jī)層和水層。有機(jī)層用1nhcl(1300ml)、nahco3水溶液(5wt％，1300ml)和鹽水(1300ml)洗滌，然后用無水na2so4干燥并濃縮至干。通過硅膠柱色譜法使用由meoh和etoac的混合物組成的梯度純化，得到產(chǎn)物。

制備((2s)-2-(((全氟苯氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯)(sp和rp的混合物)

將l-丙氨酸2-乙基丁基酯鹽酸鹽(5.0g，23.84mmol)與亞甲基氯(40ml)合并，冷卻至約-78℃，加入二氯磷酸苯酯(3.65ml，23.84mmol)。在約-78℃下在約60分鐘內(nèi)加入三乙胺(6.6ml，47.68mmol)，將所得混合物在環(huán)境溫度下攪拌3小時。將反應(yīng)混合物冷卻至約0℃，加入五氟苯酚(4.4g，23.84mmol)。在約60分鐘內(nèi)加入三乙胺(3.3ml，23.84mmol)。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌約3小時，并在減壓下濃縮。將殘余物溶于etoac中，用碳酸鈉水溶液洗滌數(shù)次，減壓濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜純化，使用etoac和己烷(0至30％)的梯度洗脫。將含有產(chǎn)物的級分在減壓下濃縮，得到固體的(2s)-2-(((全氟苯氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯。¹hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.41–7.32(m,4h),7.30–7.17(m,6h),4.24–4.16(m,1h),4.13–4.03(m,4h),4.01–3.89(m,1h),1.59–1.42(m,8h),1.40–1.31(m,8h),0.88(t,j＝7.5hz,12h).³¹pnmr(162mhz,氯仿-d)δ-1.52.¹⁹fnmr(377mhz,氯仿-d)δ-153.63,-153.93(m),-160.05(td,j＝21.9,3.6hz),-162.65(qd,j＝22.4,20.5,4.5hz).msm/z＝496[m+h].

((2s)-2-(((全氟苯氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯)的制備。

將l-丙氨酸2-乙基丁基酯鹽酸鹽(40.10g，0.191mmol)溶于二氯甲烷(533g)中，在n2(g)下攪拌至溶液冷卻至約-15℃。加入二氯磷酸苯酯(40.32g，0.191mol)，然后緩慢加入三乙胺(41.58g，0.411mmol)，將反應(yīng)混合物在約-15℃下攪拌約1.5小時。加入五氟苯酚(35.14g，0.191mol)，然后加入三乙胺(19.23g，0.190mol)，將反應(yīng)混合物攪拌約2小時。將反應(yīng)混合物升溫至約0℃，加入0.5mhcl(279.19g)。將混合物升溫至約22℃，分離有機(jī)層并用5％khco3水溶液(281g)洗滌，然后用水(281g)洗滌。將等分的有機(jī)層(453.10g，604.30g溶液)濃縮至約120ml體積，加入乙酸異丙酯(157g)，將溶液濃縮至干。將殘余物溶于乙酸異丙酯(158g)中。將所得溶液濃縮至約120ml體積，并將溫度調(diào)節(jié)至約45℃。加入正庚烷(165g)，混合物在約1小時內(nèi)冷卻至22℃。加入正庚烷(167g)，將混合物冷卻至約0℃。加入三乙胺(2.90g，0.0287mol)，將混合物在0℃下攪拌約17小時。將混合物過濾，固體用正庚烷(145g)漂洗，固體在約40℃下真空干燥約15小時，得到((s)-(五氟苯氧基)(苯氧基)磷?；?-l-丙氨酸2-乙基丁基酯。

((s)-(4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷酰基)-l-丙氨酸2-乙基丁基酯的制備：

將l-丙氨酸2-乙基丁基酯鹽酸鹽(20.08g，95.8mmol)和乙酸異丙酯(174g)的漿液攪拌冷卻至約-20℃。加入二氯磷酸苯酯(20.37g，96.5mmol)，然后緩慢加入三乙胺(20.97g，207.2mmol)，并將混合物在約-20℃下攪拌約1小時。加入4-硝基苯酚(13.23g，95.1mmol)，然后緩慢加入三乙胺(10.01g，98.8mmol)，將反應(yīng)混合物攪拌約1.5小時。將反應(yīng)混合物升溫至約0℃，加入0.5mhcl(140g)。分離有機(jī)層并用5％na2co3(2×100g)和10％nacl(2×100g)洗滌。然后將有機(jī)層濃縮至約80ml體積，加入乙酸異丙基酯(4g)，然后加入正庚烷(110g)。加入產(chǎn)物晶種(0.100g)，隨后加入第二份正庚烷(110g)，將混合物冷至約0℃。加入1,8二氮雜雙環(huán)十一碳-7-烯(1.49g，9.79mmol)，并將混合物在約0℃下攪拌約21小時。將所得固體過濾并首先用正庚烷(61g)，然后用h2o(2×100g)洗滌。將固體與h2o(200g)一起攪拌約1.5小時，過濾，并用h2o(3×100g)洗滌，然后用正庚烷(61g)沖洗。將所得固體在約40℃真空干燥約19小時，得到((s)-(4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷?；?-l-丙氨酸2-乙基丁基酯。

標(biāo)題化合物的制備(sp和rp的混合物)：

將核苷(29mg，0.1mmol)和膦酰胺(60mg，0.12mmol)和n,n-二甲基甲酰胺(2ml)在環(huán)境溫度下合并。緩慢加入叔丁基氯化鎂(1m于thf中，0.15ml)。約1小時后，將反應(yīng)用乙酸乙酯稀釋，用檸檬酸水溶液(5％重量)、飽和nahco3水溶液和飽和鹽水溶液洗滌。將有機(jī)相用na2so4干燥并減壓濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜純化，使用甲醇和ch2cl2(0至5％)的梯度。含有產(chǎn)物的級分在減壓下濃縮，得到產(chǎn)物。

(3ar,4r,6r,6ar)-4-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-6-(羥基甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃并[3,4-d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-4-甲腈的制備：

環(huán)境溫度下，向(2r,3r,4s,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-二羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈(5.8g，0.02mol)、2,2-二甲氧基丙烷(11.59ml，0.09mol)和丙酮(145ml)的混合物中加入硫酸(18m，1.44ml)。將混合物升溫至約45℃。約30分鐘后，將混合物冷卻至環(huán)境溫度，加入碳酸氫鈉(5.8g)和水(5.8ml)。15分鐘后，將混合物減壓濃縮。將殘余物溶于乙酸乙酯(150ml)和水(50ml)中。水層用乙酸乙酯(2×50ml)萃取。合并的有機(jī)相用硫酸鈉干燥并減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物(2r,3r,4s,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-二羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.84(s,1h),6.93(d,j＝4.6hz,1h),6.89(d,j＝4.6hz,1h),5.40(d,j＝6.7hz,1h),5.00(dd,j＝6.7,3.3hz,1h),4.48–4.40(m,1h),3.81–3.72(m,2h),1.71(s,3h),1.40(s,3h).msm/z＝332.23[m+1].

(3ar,4r,6r,6ar)-4-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-6-(羥基甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃并[3,4-d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-4-甲腈tsoh鹽的制備：

在環(huán)境溫度下，向(2r,3r,4s,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-二羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈(5.0g，17.2mmol，1.0當(dāng)量)、2,2-二甲氧基丙烷(10.5ml，86mmol，5.0當(dāng)量)和丙酮(25ml)的混合物中加入對甲苯磺酸(3.59g，1.1當(dāng)量)。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌。約30分鐘后，在約1小時內(nèi)加入乙酸異丙酯(25ml)。將所得漿液過濾并用2:1庚烷：乙酸異丙酯(25ml)沖洗。產(chǎn)物在約40℃真空干燥。

(3ar,4r,6r,6ar)-4-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-6-(羥基甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃并[3,4-d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-4-甲腈的制備：

在環(huán)境溫度下，向(2r,3r,4s,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-二羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈(5g，17.2mmol，1.0當(dāng)量)、2,2-二甲氧基丙烷(10.5ml，86mmol，5.0當(dāng)量)和丙酮(25ml)加入對甲苯磺酸(3.59g，1.1當(dāng)量)。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌。30分鐘后，用1小時加入乙酸異丙酯(25ml)。將所得漿液過濾并用2:1庚烷：乙酸異丙酯(25ml)沖洗。產(chǎn)物在40℃下真空干燥。將分離的固體加入到反應(yīng)器中，加入5％k2co3溶液(50ml)和乙酸乙酯(50ml)。分離各層，水層用乙酸乙酯(25ml)洗滌。合并的有機(jī)層用水(25ml)洗滌，然后濃縮至約25ml。將反應(yīng)器用乙酸異丙酯(25ml)重新填充并濃縮至約25毫升。再次用乙酸異丙酯(25毫升)重新填充反應(yīng)器，濃縮至25毫升。將所得溶液接種，產(chǎn)生稠漿。在1小時內(nèi)向其中加入庚烷(25ml)。將所得漿液過濾并用2:1庚烷：乙酸異丙酯(25ml)沖洗。產(chǎn)物在40℃下真空干燥。(3ar,4r,6r,6ar)-4-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-6-(羥基甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃并[3,4-d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-4-甲腈。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.84(s,1h),6.93(d,j＝4.6hz,1h),6.89(d,j＝4.6hz,1h),5.40(d,j＝6.7hz,1h),5.00(dd,j＝6.7,3.3hz,1h),4.48–4.40(m,1h),3.81–3.72(m,2h),1.71(s,3h),1.40(s,3h).msm/z＝332.23[m+1].

(2s)-2-(((((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯的制備：

在環(huán)境溫度下，將乙腈(100ml)與(2s)-2-(((4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷酰基)-氨基)丙酸2-乙基丁基酯(9.6g，21.31mmol)、底物醇(6.6g，0.02mol)、氯化鎂(1.9g，19.91mmol)混合。將混合物攪拌約15分鐘，加入n,n-二異丙基乙胺(8.67ml，49.78mmol)，約4小時后，用乙酸乙酯(100ml)稀釋反應(yīng)物，冷卻至約0℃，并與檸檬酸水溶液(5％重量，100ml)混合，有機(jī)相用檸檬酸水溶液(5％重量，100ml)和飽和氯化銨水溶液(40ml)、碳酸鉀水溶液(10％重量，2×100ml)和飽和鹽水溶液(100ml)洗滌。有機(jī)相用硫酸鈉干燥，減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物。¹hnmr(400mhz,cd3od)δ7.86(s,1h),7.31–7.22(m,2h),7.17–7.09(m,3h),6.93–6.84(m,2h),5.34(d,j＝6.7hz,1h),4.98(dd,j＝6.6,3.5hz,1h),4.59–4.50(m,1h),4.36–4.22(m,2h),4.02(dd,j＝10.9,5.7hz,1h),3.91(dd,j＝10.9,5.7hz,1h),3.83(dq,j＝9.7,7.1hz,1h),1.70(s,3h),1.50–1.41(m,1h),1.39(s,3h),1.36–1.21(m,7h),0.86(t,j＝7.4hz,6h).msm/z＝643.21[m+1].

(s)-2-(((s)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯(化合物32)的制備

將粗丙酮化合物(12.85g)與四氫呋喃(50ml)合并，并減壓濃縮。將殘余物溶于四氫呋喃(100ml)中，冷卻至約0℃，并緩慢加入濃hcl(20ml)。將混合物溫?zé)嶂镰h(huán)境溫度。如hplc分析顯示消耗起始的丙酮化合物后，加入水(100ml)，然后加入飽和碳酸氫鈉水溶液(200ml)?；旌衔镉靡宜嵋阴?100ml)萃取，有機(jī)相用飽和食鹽水溶液(50ml)洗滌，用硫酸鈉干燥并減壓濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜法使用甲醇和乙酸乙酯(0至20％)的梯度純化。含有產(chǎn)物的級分在減壓下濃縮，得到產(chǎn)物。

(s)-2-(((s)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯(化合物32)的制備

向含有(s)-2-(((s)-(((3ar,4r,6r,6ar)-6-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-6-氰基-2,2-二甲基四氫呋喃并[3,4-d][1,3]二氧雜環(huán)戊烯-4-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯(30mg，0.05mmol)的小瓶中加入80％甲酸水溶液(1.5ml)。在約20℃下18小時后，通過hplc和lc-ms證實(shí)完全轉(zhuǎn)化。ms(m/z)＝603(m+1)⁺.

經(jīng)由直接偶聯(lián)制備(s)-2-(((s)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯(化合物32)

向(2r,3r,4s,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-二羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈(0.5g，2mmol)、(s)-2-(((s)-(4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯(0.9g，2mmol)和mgcl2(0.2g，2mmol)的混合物中加入n,n-二甲基乙酰胺(10ml)。將所得混合物在恒定攪拌下加熱至約30℃。然后緩慢加入n,n-二異丙基乙胺(0.7ml，4mmol)，將反應(yīng)混合物攪拌約6小時。加入水(10ml)h2o，然后加入2-methf(10ml)，分離有機(jī)相和水相。然后將水層用2-methf(10ml)反萃取。合并有機(jī)層，并用10重量％檸檬酸溶液(10ml)洗滌，然后用10重量％的k2co3溶液(10ml)和h2o(10ml)洗滌。加入少量鹽水以在各層分離之前在洗滌水中分解乳液。將有機(jī)層蒸發(fā)至干，得到0.65g泡沫。加入iproac(2.6ml)，然后將混合物加熱至約40℃以進(jìn)行拆分。將溶液冷卻至約20℃，并將混合物攪拌約3天。通過過濾分離固體，濾餅用少量iproac洗滌。將固體干燥，得到(s)-2-(((s)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯。

向(2r,3r,4s,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-二羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈(0.2g，0.7mmol)、(s)-2-(((s)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯(0.3g，0.7mmol)和mgcl2(0.1g，1mmol)的混合物中加入n,n-二甲基乙酰胺(4ml)。將所得混合物在恒定攪拌下加熱至約30℃。然后緩慢加入n,n-二異丙基乙胺(0.3ml，2mmol)，將反應(yīng)混合物攪拌5小時。通過uplc分析確認(rèn)產(chǎn)品轉(zhuǎn)化。

(3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-醇的制備

在thf(280ml)中制備7-碘代吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(13.9g，53.5mmol)的溶液。將溶液冷卻至約0℃，并加入tmscl(13.6ml，107mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌約20分鐘，然后加入phmgcl(2m的thf溶液；53.5ml，56.8mmol)，同時保持內(nèi)部溫度低于約5℃。將反應(yīng)混合物在約0℃下攪拌約30分鐘，然后冷卻至約-20℃。然后加入iprmgcl-licl(1.3m于thf中，43.1ml，56mmol)，同時保持內(nèi)部溫度低于約-15℃。將反應(yīng)混合物在約-20℃下攪拌約30分鐘。

在單獨(dú)的燒瓶中，制備(3r,4r,5r)-3,4-雙((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)二氫呋喃-2(3h)-酮(25.0g，50.9mmol，0.83當(dāng)量)在lacl3-2licl(0.6m于thf中，85ml，50.9mmol)中的溶液。然后將溶液轉(zhuǎn)移至格氏溶液，同時保持內(nèi)部溫度低于-20℃。將所得反應(yīng)混合物在約-20℃下攪拌約4小時。

將反應(yīng)用1mhcl(140ml)淬滅，并將混合物加熱至環(huán)境溫度。加入etoac(140ml)，分離有機(jī)相和水相。水層用etoac(200ml)萃取。合并的etoac層依次用飽和nahco3水溶液(2×200ml)、水(200ml)和鹽水(200ml)萃取。將有機(jī)層濃縮，然后通過硅膠色譜法(30％etoac/己烷)純化，得到(3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-醇。¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ8.15–7.88(m,1h),7.51(d,j＝4.8hz,0.5h),7.02–6.92(m,0.5h),6.65–6.57(m,1h),5.66–5.24(m,3h),4.49–3.50(m,4h),0.97–0.78(26h),0.65(s,1.5h),0.19–0.00(m,15.5h),–0.22(s,1h),–0.55(s,1h)..msm/z＝626(m+h).

(2r,3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈的制備

(3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-醇(1.50g，2.40mmol)在ch2cl2(15ml)中的溶液冷卻至約-40℃。加入三氟乙酸(0.555ml，7.20mmol)，保持溫度低于-20℃。在單獨(dú)的燒瓶中，在約15℃下，將三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(2.60ml，14.4mmol)加入到5mlch2cl2(5ml)中，隨后加入三甲基甲硅烷基氰化物(1.92ml，14.4mmol)，并將溶液冷卻至約-30℃。將冷卻的溶液加入到(3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-醇中，同時保持溫度低于-25℃。將反應(yīng)混合物在約-30℃下攪拌15分鐘。將反應(yīng)用三乙胺(3.34ml，24.0mmol)淬滅并將混合物升溫至約0℃。加入水(50ml)，同時保持溫度低于約20℃。當(dāng)添加完成時，將混合物在室溫下攪拌15分鐘。分離各層，有機(jī)層依次用koh(20ml)，水(20ml)和鹽水(20ml)洗滌。將有機(jī)層用na2so4干燥，濃縮，然后通過硅膠色譜法(30％etoac/己烷)純化，得到3.8:1非對映體混合物的產(chǎn)物。通過制備型hplc(acn0至95％于水中)進(jìn)一步純化混合物，得到產(chǎn)物，為單一非對映異構(gòu)體。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.14-7.92(m,2h),7.89(s,1h),6.95(d,j＝4.8hz,1h),6.88(d,j＝4.4hz,1h),5.27(d,j＝4.6hz,1h),5.10(dd,j＝7.7,4.6hz,1h),4.31(dd,j＝4.7,1.4hz,1h),4.12(ddd,j＝5.9,4.1,1.4hz,1h),3.80–3.69(m,1h),3.56(td,j＝7.8,3.9hz,1h),0.93(s,9h),0.75(s,9h),0.11(s,3h),0.09(s,3h),-0.15(s,3h),-0.62(s,3h).msm/z＝520(m+h).

(s)-2-(((s)-(((2r,3r,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-氰基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯的制備

向(2r,3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈(16mg，0.03mmol)、(s)-2-(((s)-(4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯(17mg，0.04mmol)和mgcl2(4mg，0.05mmol)的混合物中中加入thf(0.3ml)。將所得混合物一直攪拌加熱至約50℃。然后加入n,n-二異丙基乙胺(0.013ml，0.08mmol)，將反應(yīng)混合物攪拌21小時。通過uplc和lc-ms分析確認(rèn)產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化。msm/z＝831(m+h).

將(2r,3r,4r,5r)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈(16mg，0.03mmol)的thf(0.3ml)溶液冷卻至-10℃。滴加tbumgcl(0.07ml，0.07mmol)，然后加入(s)-2-(((s)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸2-乙基丁基酯(22mg，0.04mmol)的thf(0.15ml)溶液。將反應(yīng)混合物加熱至5℃，并攪拌16小時。用meoh終止反應(yīng)，濃縮，然后通過硅膠色譜法(etoac/己烷)純化，得到產(chǎn)物。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.97(s,1h),7.38–7.29(m,2h),7.25–7.21(m,2h),7.21–7.13(m,1h),7.11(d,j＝4.6hz,1h),6.65(d,j＝4.6hz,1h),5.88(brs,2h),5.35(d,j＝4.4hz,1h),4.49–4.41(m,1h),4.41–4.35(m,1h),4.32–4.26(m,1h),4.24(dd,j＝4.5,1.7hz,1h),4.10–3.99(m,2h),3.96(dd,j＝10.9,5.7hz,1h),3.80–3.72(m,1h),1.48(h,j＝6.2hz,1h),1.39–1.28(m,7h),0.96(s,9h),0.85(t,j＝7.5hz,6h),0.80(s,9h),0.08(s,3h),0.07(s,3h),-0.13(s,3h),-0.56(s,3h).31pnmr(162mhz,cdcl3)δ2.74(s).msm/z＝831(m+h).

(s)-2-(((s)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸2-乙基丁基酯的制備

將(s)-2-(((s)-(((2r,3r,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-氰基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯的粗制溶液冷卻至約0℃，緩慢加入濃hcl(0.05ml，0.62mmol)。將反應(yīng)混合物在約20℃下攪拌約72小時。通過uplc和lc-ms分析確認(rèn)轉(zhuǎn)化形成產(chǎn)物。msm/z＝603(m+h).

(s)-2-(((s)-(((2r,3r,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-雙((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-氰基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯在氟化物或酸中的溶液可以去保護(hù)形成(s)-2-(((s)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷?；?氨基)丙酸2-乙基丁基酯。代表性的氟化物包括但不限于tbaf、kf、氫氟酸吡啶鎓、氫氟酸三乙銨、氟化氫、鹽酸、甲苯磺酸或任何其它合適的氟化物源。代表性的酸包括但不限于在greene,t.w.；wuts,p.g.m.protectivegroupsinorganicsynthesis,4thed.,johnwiley&sons:newyork,2006中發(fā)現(xiàn)的那些。

上文引用的所有出版物，專利和專利文獻(xiàn)通過引用并入本文，如同通過引用單獨(dú)并入的一樣。

已經(jīng)參考各種具體和優(yōu)選的實(shí)施方案和技術(shù)描述了本發(fā)明。然而，本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，可以在保持在本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)進(jìn)行許多變化和修改。