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基因修飾的間充質(zhì)干細(xì)胞及其用于生產(chǎn)BsAb抗體的方法與流程

文檔序號(hào):12108639閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種基因修飾的間充質(zhì)干細(xì)胞,其是利用攜帶BsAb抗體基因的非病毒載體轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細(xì)胞而得到的。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基因修飾的間充質(zhì)干細(xì)胞,其中,所述間充質(zhì)干細(xì)胞來源于滑膜、骨骼、肌肉、肺臟、肝臟、胰腺、脂肪、臍帶、臍帶血、胎盤、骨髓、子宮內(nèi)膜或牙髓;以及包括以iPS技術(shù)誘導(dǎo)成體細(xì)胞轉(zhuǎn)化為的間充質(zhì)干細(xì)胞。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基因修飾的間充質(zhì)干細(xì)胞,其中,所述攜帶BsAb抗體基因的非病毒載體選自:質(zhì)粒DNA、微環(huán)質(zhì)粒DNA或核糖核酸載體。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基因修飾的間充質(zhì)干細(xì)胞,其中,所述BsAb抗體選自antiCD19×antiCD3、antiCD20×antiCD3、antiEGFR×antiCD3、antiGPC3×antiCD3、antiEpCAM×antiCD3、anticMet×antiCD3、antiEGFRvIII×antiCD3、antiIGF1R×antiCD3、antiCD44v6×antiCD3或antiPDL-1×antiCD3。

5.權(quán)利要求1~4任一項(xiàng)所述的基因修飾的間充質(zhì)干細(xì)胞的制備方法,該方法包括:

將攜帶BsAb抗體基因的非病毒載體轉(zhuǎn)染至間充質(zhì)干細(xì)胞,完成對間充質(zhì)干細(xì)胞的基因修飾,得到基因修飾的間充質(zhì)干細(xì)胞。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法,其中,所述轉(zhuǎn)染為利用化學(xué)轉(zhuǎn)染試劑的化學(xué)轉(zhuǎn)染方法、或電穿孔轉(zhuǎn)染方法。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法,其中,所述化學(xué)轉(zhuǎn)染試劑包括:脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,聚陽離子轉(zhuǎn)染試劑,或是無機(jī)納米顆粒轉(zhuǎn)染試劑、有機(jī)納米顆粒轉(zhuǎn)染試劑、或無機(jī)有機(jī)雜化納米顆粒轉(zhuǎn)染試劑。

8.權(quán)利要求1~4任一項(xiàng)所述的基因修飾的間充質(zhì)干細(xì)胞用于生產(chǎn)BsAb抗體中的應(yīng)用。

9.一種生產(chǎn)BsAb抗體的方法,該方法包括:

培養(yǎng)權(quán)利要求1~4任一項(xiàng)所述的基因修飾的間充質(zhì)干細(xì)胞以分泌表達(dá)雙特異性單鏈抗體。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法,其中,所述培養(yǎng)條件為:37℃、5%CO2靜置培養(yǎng);優(yōu)選的培養(yǎng)基為含10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基。

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