一種蛇舌草多糖提取方法
【專利摘要】本發(fā)明揭示了一種蛇舌草多糖提取方法,包括如下步驟:步驟一,將蛇舌草切割成段,使用乙酸乙酯對(duì)蛇舌草進(jìn)行脫脂浸泡過(guò)夜;步驟二,使用水浸泡步驟一脫脂后瀝干的蛇舌草藥材兩次,每次4個(gè)小時(shí);步驟三,濃縮步驟二所得提取液至掛漿,加入95%純度的藥用乙醇至濃縮液中乙醇的含量為75%~85%,4攝氏度冷藏,靜置,過(guò)濾并用藥用乙醇沖洗濾渣,所得濾渣即是多糖。本發(fā)明提供了一種蛇舌草多糖的工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)方法,其工藝簡(jiǎn)單,成本低廉,操作方便。
【專利說(shuō)明】一種蛇舌草多糖提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域,尤其涉及一種蛇舌草多糖的提取方法。
【背景技術(shù)】
[0002]白花蛇舌草為茜草科一年生草本植物白花蛇舌草(Hedyotis diffusa Willd.)的干燥全草,廣泛分布于我國(guó)的廣東、廣西、福建及長(zhǎng)江以南各省市,夏秋季采集、洗凈、鮮用或曬干、切段。藥理研究表明:本藥材具有抗菌、增強(qiáng)免疫功能、抗腫瘤、抗衰老等多種功效。多糖是白花蛇舌草的免疫活性成分,抗感染作用較強(qiáng),并可能有增強(qiáng)腎上腺皮質(zhì)功能的作用,此與炎癥反應(yīng)和免疫反應(yīng)有關(guān)。蛇舌草黃酮小分子制劑已經(jīng)進(jìn)入國(guó)家藥典標(biāo)準(zhǔn),但其多糖尚未有一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)化的適于生產(chǎn)提取方法。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]鑒于上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷,本發(fā)明的目的是提出一種蛇舌草多糖提取方法,使其更適于工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)。
[0004]本發(fā)明的目的將通過(guò)以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn):
[0005]一種蛇舌草多糖提取方法,包括如下步驟:
[0006]步驟一,將蛇舌草切割成5厘米~10厘米段,使用乙酸乙酯對(duì)蛇舌草進(jìn)行脫脂浸泡過(guò)夜;
[0007]步驟二,使用50攝氏度~60攝氏度的水浸泡步驟一脫脂后浙干的蛇舌草藥材兩次,每次4個(gè)小時(shí),水量以完全浸沒(méi)藥材為準(zhǔn),合并浸泡提取液;
[0008]步驟三,濃縮步驟二所得提取液至掛漿,加入95%純度的藥用乙醇至濃縮液中乙醇的含量為75%~85%,4攝氏度冷藏,靜置12小時(shí)~15小時(shí),過(guò)濾并用藥用乙醇沖洗濾渣,所得濾渣即是多糖。
[0009]本發(fā)明的突出效果為:提供了一種蛇舌草多糖的工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)方法,其工藝簡(jiǎn)單,成本低廉,操作方便。
【具體實(shí)施方式】
[0010]下面通過(guò)具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的方法進(jìn)行說(shuō)明,但本發(fā)明并不局限于此。下述實(shí)施例中所述實(shí)驗(yàn)方法,如無(wú)特殊說(shuō)明,均為常規(guī)方法;所述試劑和材料,如無(wú)特殊說(shuō)明,均可從商業(yè)途徑獲得。
[0011]實(shí)施例:
[0012]本實(shí)施例一種蛇舌草多糖提取方法,包括如下步驟:
[0013]步驟一,將蛇舌草切割成5厘米~10厘米段,使用乙酸乙酯對(duì)蛇舌草進(jìn)行脫脂浸泡過(guò)夜;
[0014]步驟二,使用50攝氏度~60攝氏度的水浸泡步驟一脫脂后浙干的蛇舌草藥材兩次,每次4個(gè)小時(shí),水量以完全浸沒(méi)藥材為準(zhǔn),合并浸泡提取液;[0015]步驟三,濃縮步驟二所得提取液至掛漿,加入95 %純度的藥用乙醇至濃縮液中乙醇的含量為75%~85%,4攝氏度冷藏,靜置12小時(shí)~15小時(shí),過(guò)濾并用藥用乙醇沖洗濾渣,所得濾渣即是多糖。
[0016]對(duì)所得多糖用MTT法進(jìn)行細(xì)胞毒試驗(yàn)并與直接水煮所得蛇舌草浸膏進(jìn)行比較:取腫瘤細(xì)胞懸液(4X10) 180 μ 1,加于96孔培養(yǎng)板,在5% C02、37°C條件下(培養(yǎng)條件下同)預(yù)培養(yǎng)24h,更換其中的150 μ I培養(yǎng)基后,并加入含有不同濃度的工藝優(yōu)化后所得的多糖的培養(yǎng)基各20 μ 1,分別以不加樣品的培養(yǎng)基為對(duì)照,繼續(xù)培養(yǎng)48h。用MTT法分別測(cè)定OD值,計(jì)算相對(duì)增殖率。
[0017]結(jié)果顯示所得多糖具有一定的活性,且多糖活性大于直接水煮所得蛇舌草浸膏,同時(shí)在實(shí)驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn),多糖并不是直接殺死腫瘤細(xì)胞,而是通過(guò)增強(qiáng)細(xì)胞免疫力的方式抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖。
[0018]本實(shí)施例的突出效果為:提供了一種蛇舌草多糖的工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)方法,其工藝簡(jiǎn)單,成本低廉,操作方便。
[0019]本發(fā)明尚有多種實(shí)施方式,凡采用等同變換或者等效變換而形成的所有技術(shù)方案,均落在本發(fā)明 的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種蛇舌草多糖提取方法,其特征在于包括如下步驟: 步驟一,將蛇舌草切割成5厘米~10厘米段,使用乙酸乙酯對(duì)蛇舌草進(jìn)行脫脂浸泡過(guò)夜; 步驟二,使用50攝氏度~60攝氏度的水浸泡步驟一脫脂后浙干的蛇舌草藥材兩次,每次4個(gè)小時(shí),水量以完全浸沒(méi)藥材為準(zhǔn),合并浸泡提取液; 步驟三,濃縮步驟二所得提取液至掛漿,加入95%純度的藥用乙醇至濃縮液中乙醇的含量為75%~85%,4攝氏度冷藏,靜置12小時(shí)~15小時(shí),過(guò)濾并用藥用乙醇沖洗濾渣,所得濾渣即是多糖。
【文檔編號(hào)】C08B37/00GK103626883SQ201210311380
【公開(kāi)日】2014年3月12日 申請(qǐng)日期:2012年8月29日 優(yōu)先權(quán)日:2012年8月29日
【發(fā)明者】沈金輝 申請(qǐng)人:奇復(fù)康藥物研發(fā)(蘇州)有限公司