專利名稱：一種苦瓜多糖粗產(chǎn)品的快速純化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝技術(shù)領(lǐng)域中苦瓜產(chǎn)品的精制，具體涉及一種 苦瓜多糖粗產(chǎn)品的快速純化方法。
背景技術(shù)：
苦瓜(Momordica charantia)別名"涼瓜"、"癩瓜"、"錦荔枝"等，是葫蘆科 苦瓜屬蔓性草本植物，原產(chǎn)印度尼西亞，我國廣東、廣西、云南等地栽培較多。 苦瓜性苦味寒，具有清熱解暑、明目解毒、補(bǔ)腎潤脾等功效，傳統(tǒng)上作為藥食兩 用的瓜類蔬菜為人們所熟知。近代科學(xué)研究從理論上逐步揭示了苦瓜有益作用 的源泉，發(fā)現(xiàn)來源于苦瓜提取物中的多種組分在降糖、降脂、抗菌、抗腫瘤、 免疫等生理或功能活性方面具有重要作用，引發(fā)了人們對苦瓜中活性物質(zhì)在生 物醫(yī)藥、日用化工、保健食品等應(yīng)用領(lǐng)域的廣泛興趣?？喙隙嗵鞘强喙现兄饕?生物活性成分之一，具有多種生理功能。但目前對苦瓜的利用還是集中于食用蔬 菜和初級產(chǎn)品如苦瓜粉、苦瓜涼茶等。同時人們在研究、開發(fā)苦瓜產(chǎn)品時，多 集中于苦瓜多肽和苦瓜蛋白方面。
有些傳統(tǒng)的純化粗多糖的方法，例如有機(jī)溶劑分步沉淀法、鹽析法、金屬 絡(luò)合物法、季銨鹽沉淀法等，得到的產(chǎn)品純度較低，而且容易引入新的有害雜 質(zhì)，同時理化性質(zhì)和生理功能減弱甚至喪失。某些研究得到產(chǎn)品的純度雖然高， 但是工藝復(fù)雜、成本高、得率較低，不適于廣泛的應(yīng)用，且市場上也沒有高純 度苦瓜多糖的產(chǎn)品。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種苦瓜多糖粗產(chǎn)品的快速純化方法。該方法可得 到具有優(yōu)良理化性質(zhì)、高純度的產(chǎn)品，該基料可廣泛應(yīng)用于一般食品、化工用 品、保健藥物中，開發(fā)高附加值的苦瓜產(chǎn)品。
本發(fā)明的目的通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)。
一種苦瓜多糖粗產(chǎn)品的快速純化方法，包括如下步驟和工藝條件 (1)將從鮮苦瓜原料中提取的苦瓜多糖粗品溶解于蒸餾水中，進(jìn)柱上樣，在羥甲基纖維素填料柱上層析純化，所述苦瓜多糖粗品與蒸餾水的質(zhì)量體積比
為160mg: 9-llmL;分別以O(shè)、 0.25、 0.75mol/L氯化鈉溶液梯度洗脫，控制流速 為0.7 0.9mL/min，每5mL收集一管，以紫外分光光度計逐管檢測在486nm處的 OD值，收集洗脫峰處對應(yīng)的洗脫組分，將所得各組洗脫液均濃縮到所加入的蒸 餾水濃縮液；
(2) 將步驟(1)所得的濃縮液上樣，用葡聚糖凝膠柱進(jìn)一步純化，以蒸 餾水洗脫，控制流速為0.4 0.5mL/min，收集洗脫液，將洗脫液濃縮至原體積 的5 10%;
(3) 將步驟(2)所得的產(chǎn)物冷凍干燥，研磨成粉，即得到精制的苦瓜多 糖產(chǎn)品。
所述的從鮮苦瓜原料中提取的苦瓜多糖粗品是用如下方法提取新鮮苦瓜
原料切片、真空干燥、磨碎成苦瓜粉，再用4倍體積85% (重量)的乙醇回流 5~6h，過濾干燥得到的苦瓜粉；按水與苦瓜粉質(zhì)量比為1:10~11向苦瓜粉加入蒸 餾水，再用質(zhì)量百分比濃度0.2~0.6。％纖維素酶(unikzyme C20)處理10 12min， 過濾得濾渣，再按按水與濾渣質(zhì)量比為l:25 30加入蒸餾水，700w 1000w微波 處理3 5min，過濾得濾液；最后中性蛋白酶(unikneutral L )處理濾液、透析 袋透析、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、無水乙醇沉淀、40 45X:真空干燥得苦瓜多糖粗品。
所述的在羥甲基纖維素填料柱上層析純化前還包括對羥甲基纖維素填料進(jìn) 行浸泡活化除菌處理，先用1 2mol/LKCl浸泡2 3h，用布氏漏斗抽濾，反復(fù)用 蒸餾水抽洗至PH值為中性。
所述的用葡聚糖凝膠柱進(jìn)一步純化前還包括對葡聚糖凝膠進(jìn)行活化除菌處 理，凝膠在蒸餾水中膨脹，濕凝膠在水浴中逐漸加熱至90~95°C，處理時間 1.5 2h。
本發(fā)明的原理
1、本發(fā)明利用DEAE-Cellulose DE-52離子交換色譜和葡聚糖凝膠(Sephadex) 色譜柱復(fù)合純化，效果顯著，得到的產(chǎn)品純度高。其中DEAE-Cdlulose DE-52
離子交換色譜是以離子交換劑為固定相，洗脫液為流動相得層析系統(tǒng)。離子交 換劑與水溶液中離子或離子化合物的反應(yīng)主要以離子交換方式進(jìn)行，或借助離 子交換劑上電荷基團(tuán)對溶液中離子或離子化合物的吸附作用，這些過程都是可逆的。離子交換層析依據(jù)離子交換劑對各種離子化合物的不同結(jié)合力而將各種 無機(jī)離子、有機(jī)離子或生物大分子物質(zhì)分開。同時離子交換層析適用的范圍較 光，目前已成為適合于分離各種酸性、中性多糖和粘多糖。2、葡聚糖凝膠(Sephadex)為凝膠色譜柱，是利用分子篩作用的作用，根據(jù) 多糖分子的大小和形狀不同而達(dá)到進(jìn)一步分離目的。分子篩是一種硅鋁酸鹽， 主要由硅鋁通過氧橋連接組成空曠的骨架結(jié)構(gòu)，在結(jié)構(gòu)中有很多孔徑均勻的孔 道和排列整齊、內(nèi)表面積很大的空穴。此外還含有電價較低而離子半徑較大的 金屬離子和化合態(tài)的水。由于水分子在加熱后連續(xù)地失去，但晶體骨架結(jié)構(gòu)不 變，形成了許多大小相同的空腔，空腔又有許多直徑相同的微孔相連，比孔道 直徑小的物質(zhì)分子吸附在空腔內(nèi)部，而把比孔道大的分子排斥在外，從而使不 同大小形狀的分子分開，直到篩分分子的作用。本發(fā)明生產(chǎn)的精制苦瓜多糖產(chǎn)品，多糖純度可達(dá)約96%，且理化性質(zhì)、生 理功能基本不變。本發(fā)明與現(xiàn)有傳統(tǒng)提取技術(shù)相比，具有如下優(yōu)點(diǎn)和有益效果(1) 本發(fā)明以Sephadex G-75和DEAE-Cellulose DE-52柱層析聯(lián)合法將苦瓜 多糖粗產(chǎn)品快速純化，提出了一種制備苦瓜多糖精制產(chǎn)品的有效方法，在苦瓜 工業(yè)領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景；(2) 采用利用凝膠色譜作為主要手段，重現(xiàn)性好，不僅避免了加入其他化學(xué) 試劑，而且柱填料可再生，從而簡化了生產(chǎn)工藝及成本，安全環(huán)保效率高；(3) 苦瓜多糖產(chǎn)品由多種結(jié)構(gòu)不同的多糖組分混合而成，本發(fā)明通過 DEAE-Cellulose DE-52梯度洗脫，根據(jù)洗脫曲線收集洗脫峰處對應(yīng)的洗脫組分， 其余洗脫組分放棄，再將各對應(yīng)組分依次通過Sephadex G-75進(jìn)一步純化混合收 集。此方法避免了多次過柱純化，工藝過程中舍棄的洗脫組分絕大多數(shù)均為雜 質(zhì)，在產(chǎn)率損失較小的前提下具有工序簡單，產(chǎn)品的純度高的特點(diǎn)。(4) 本發(fā)明生產(chǎn)所用原料為天然可再生的農(nóng)產(chǎn)品，既提高了農(nóng)副產(chǎn)品的附加 值，又適合國家可持續(xù)發(fā)展的戰(zhàn)略規(guī)劃，同時也豐富了植物多糖科學(xué)的研究領(lǐng) 域。
具體實施方式
為了更好地理解本發(fā)明，下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于實施例表示的范圍。 實施例l苦瓜多糖粗產(chǎn)品的快速純化方法，包括如下步驟和工藝條件第 一步對美國Waterman公司生產(chǎn)的的羥甲基纖維素填料DEAE-Cellulose DE-52和葡聚糖凝膠填料Sephadex G-75進(jìn)行浸泡活化除菌處理。DEAE-Cellulose DE-52先用lmol/LKCl浸泡2h，用布氏漏斗抽濾，反復(fù)用蒸餾水抽洗至PH值至中 性。Sephadex G-75凝膠在蒸餾水中膨脹，濕凝膠在水浴中逐漸加熱至9(TC，處 理時間2h。 DEAE-CelluloseDE-52裝填于1.6cmx60cm玻璃柱中，床體積為75mL， S印hadexG-75裝填于1.6x40cm的玻璃柱中，床體積為40mL。 BT-200B恒流泵連 接柱頂端打入洗脫液控制流速、DBS-100電腦全自動收集器連接柱下方收集洗脫 組分，并以蒸餾水來平衡柱。第二步苦瓜多糖粗品通過自制獲取，制備方法如下新鮮苦瓜原料切片、 真空干燥、磨碎成苦瓜粉，再用4倍體積85% (重量)的乙醇回流5h、過濾干燥 得到的苦瓜粉用做后續(xù)工藝的原料；按水與苦瓜粉的質(zhì)量比為1:10向苦瓜粉中加 入蒸餾水，再用0.2%質(zhì)量百分比濃度纖維素酶(unikzymeC20)處理10min，過 濾得濾渣，接著再按水與濾渣的質(zhì)量比為1:25加入蒸餾水，700w微波處理3min， 過濾得濾液；最后中性蛋白酶(unikneutralL)處理濾液、透析袋透析、旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)、無水乙醇沉淀、4(TC真空干燥得苦瓜多糖粗品，經(jīng)測純度約為75%。將80mg 苦瓜多糖粗樣品溶解于4.5mL蒸餾水中，進(jìn)柱上樣，在DEAE-Cellulose DE-52柱 上層析純化以0、 0.25mol/L、 0,75 mol/L氯化鈉溶液梯度洗脫，控制流速都為 0.7mL/min，每5mL收集一管，逐管檢測在486nm處的OD值，依次得到4個洗脫 峰，分別收集對應(yīng)4個洗脫峰的組分，將所得4組洗脫液均濃縮至4.5mL。第三步第二步所得的4組濃縮液依次進(jìn)柱上樣，用Sephadex G-75葡聚糖 凝膠柱進(jìn)一步純化，以蒸餾水洗脫，控制流速為0.4mL/min，收集洗脫液，將洗 脫液均濃縮至8mL;第四步將第三步所得的產(chǎn)物混合后冷凍干燥，研磨成粉，即得精制的苦瓜 多糖產(chǎn)品。經(jīng)DNS法測定苦瓜多糖純度為95.83%。DEAE-Cellulose DE-52通過濃度為0.5mol/L NaOH和2mol/L NaCl混合溶液 浸泡可再生循環(huán)使用，Sephadex G-75—次裝柱后，可反復(fù)使用，只須在每次層析后用3~4倍柱床體積的洗脫液過柱即可。 實施例2第一步按照產(chǎn)品說明對美國Waterman公司的羥甲基纖維素填料DEAE -Cellulose DE-52和葡聚糖凝膠填料Sephadex G-75進(jìn)行浸泡活化除菌處理，DEAE -Cellulose DE-52先用2mol/L KCl浸泡2h，用布氏漏斗抽濾，反復(fù)用蒸餾水抽洗 至PH值至中性。SephadexG-75凝膠在蒸餾水中膨脹，濕凝膠在水浴中逐漸加熱 至95。C，處理時間1.5h。 DEAE-CelluloseDE-52裝填于1.6cmx60cm玻璃柱中，床 體積約為80mL， SephadexG-75裝填于1.6x40cm的玻璃柱中，床體積約為45mL。 BT-200B恒流泵連接柱頂端打入洗脫液控制流速、DBS-100電腦全自動收集器連 接柱下方收集洗脫組分，并以蒸餾水來平衡柱。第二步苦瓜多糖粗品通過自制獲取，制備方法如下新鮮苦瓜原料切片、 真空干燥、磨碎成苦瓜粉，再用4倍體積85X的乙醇回流5 6h、過濾干燥得到 的苦瓜粉用做后續(xù)工藝的原料；按水與苦瓜粉的質(zhì)量比為1:11向苦瓜粉中蒸餾 水，再用0.4%質(zhì)量百分比濃度纖維素酶(unikzyme C20)處理12min，過濾得 濾渣，接著再按水與濾渣的質(zhì)量比為l:30加入蒸餾水，1000w微波處理5min， 過濾得濾液；最后中性蛋白酶(unikneutralL)處理濾液、透析袋透析、旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)、無水乙醇沉淀、42X:真空干燥得苦瓜多糖粗品，經(jīng)測純度約為75%。將80mg 苦瓜多糖粗樣品溶解于5.5mL蒸餾水中，進(jìn)柱上樣，在DEAE-Cellulose DE-52 柱上層析純化以0、 0.25、 0.75 mol/L氯化鈉溶液梯度洗脫，控制流速都為 0.9mL/min，每5mL收集一管，逐管檢測在486nm處的OD值，依次得到4個 洗脫峰，分別收集對應(yīng)4個洗脫峰的組分，將所得4組洗脫液均濃縮至5.5mL 濃縮液；第三步第二步所得的濃縮液依次進(jìn)柱上樣，用Sephadex G-75葡聚糖凝膠 柱進(jìn)一步純化，以蒸餾水洗脫，控制流速為0.5mL/min，收集洗脫液，將洗脫液 均濃縮至10mL;第四步將第三步所得的產(chǎn)物混合后冷凍干燥，研磨成粉，即得到精制的苦 瓜多糖產(chǎn)品。經(jīng)DNS法測定苦瓜多糖純度為95.68%。 實施例3第一步按照產(chǎn)品說明對美國Waterman公司的羥甲基纖維素填料DEAE -Cellulose DE-52和葡聚糖凝膠填料Sephadex G-75進(jìn)行浸泡活化除菌處理， DEAE-Cellulose DE-52先用lmol/LKCl浸泡3h，用布氏漏斗抽濾，反復(fù)用蒸餾 水抽洗至PH值至中性。SephadexG-75凝膠在蒸餾水中膨脹，濕凝膠在水浴中逐 漸加熱至92。C，處理時間1.8h。 DEAE-CelluloseDE-52裝填于1.6cmx60cm玻璃柱 中，床體積約為78mL， SephadexG-75裝填于1.6x40cm的玻璃柱中，床體積約為 42mL。 BT-200B恒流泵連接柱頂端打入洗脫液控制流速、DBS-100電腦全自動收 集器連接柱下方收集洗脫組分，并以蒸餾水來平衡柱。第二歩苦瓜多糖粗品通過自制獲取，制備方法如下新鮮苦瓜原料切片、 真空干燥、磨碎成苦瓜粉，再用4倍體積85X的乙醇回流5 6h、過濾干燥得到 的苦瓜粉用做后續(xù)工藝的原料；按水與苦瓜粉的質(zhì)量比為1:10向苦瓜粉中加入 蒸餾水，再用0.6%質(zhì)量百分比濃度(unikzyme C20)纖維素酶處理llmin，過 濾得濾渣，接著再按水與濾渣的質(zhì)量比為1:28加入蒸餾水，900w微波處理4min， 過濾得濾液；最后(imikneutralL)中性蛋白酶處理濾液、透析袋透析、旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)、無水乙醇沉淀、45X:真空干燥得苦瓜多糖粗品，經(jīng)測純度約為75%。將80mg 苦瓜多糖粗樣品溶解于5.0mL蒸餾水中，進(jìn)柱上樣，在DEAE-Cellulose DE-52 柱上層析純化以0、 0.25、 0.75 mol/L氯化鈉溶液梯度洗脫，控制流速為 0.8mL/min，每5mL收集一管，逐管檢測在486nm處的OD值，依次得到4個 洗脫峰，分別收集對應(yīng)4個洗脫峰的組分，將所得4組洗脫液均濃縮至5.0mL 濃縮液；第三步第二步所得的濃縮液依次進(jìn)柱上樣，用Sephadex G-75葡聚糖凝膠 柱進(jìn)一步純化，以蒸餾水洗脫，控制流速為0.45mL/min，收集洗脫液，將洗脫 液均濃縮至9mL;第四步將第三歩所得的產(chǎn)物混合后冷凍干燥，研磨成粉，即得到精制的苦 瓜多糖產(chǎn)品。經(jīng)DNS法測定苦瓜多糖純度為96.32%。 實施例4:第 一 步 按照產(chǎn)品說明對美國Waterman公司的羥甲基纖維素填料 DEAE-Cellulose DE-52和葡聚糖凝膠填料Sephadex G-75進(jìn)行浸泡活化除菌處理， DEAE-Cellulose DE-52先用2mol/LKCl浸泡2.5h,用布氏漏斗抽濾，反復(fù)用蒸餾 水抽洗至PH值至中性。SephadexG-75凝膠在蒸餾水中膨脹，濕凝膠在水浴中逐漸加熱至90。C,處理時間2h完成。DEAE-Cellulose DE-52裝填于1.6cmx60cm玻 璃柱中，床體積約為76mL， SephadexG-75裝填于1.6x40cm的玻璃柱中，床體積 約為45mL。 BT-200B恒流泵連接柱頂端打入洗脫液控制流速、DBS-100電腦全自 動收集器連接柱下方收集洗脫組分，并以蒸餾水來平衡柱。第二歩苦瓜多糖粗品通過自制獲取，制備方法如下新鮮苦瓜原料切片、 真空干燥、磨碎成苦瓜粉，再用4倍體積85X的乙醇回流5 6h、過濾干燥得到 的苦瓜粉用做后續(xù)工藝的原料；按水與苦瓜粉的質(zhì)量比為1:11向苦瓜粉中加入 蒸餾水，再用0.5%質(zhì)量百分比濃度(unikzyme C20)纖維素酶處理12min，過 濾得濾渣，接著再按水與濾渣的質(zhì)量比為1:26加入蒸餾水，800w微波處理5min, 過濾得濾液；最后(unikneutralL)中性蛋白酶處理濾液、透析袋透析、旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)、無水乙醇沉淀、4(TC真空干燥得苦瓜多糖粗品，經(jīng)測純度約為75%。將80mg 苦瓜多糖粗樣品溶解于4.5mL蒸餾水中，進(jìn)柱上樣，在DEAE-Cellulose DE-52 柱上層析純化以0、 0.25、 0.75 mol/L氯化鈉溶液梯度洗脫，控制流速都為 0.9mL/min，每5mL收集一管，逐管檢測在486nm處的OD值，依次得到4個 洗脫峰，分別收集對應(yīng)4個洗脫峰的組分，將所得4組洗脫液均濃縮至4.5mL 濃縮液；第三步第二步所得的濃縮液依次進(jìn)柱上樣，用Sephadex G-75葡聚糖凝膠 柱進(jìn)一歩純化，以蒸餾水洗脫，控制流速為0.5mL/min，收集洗脫液，將洗脫液 均濃縮至10mL;第四步將第三步所得的產(chǎn)物混合后冷凍干燥，研磨成粉，即得到精制的苦 瓜多糖產(chǎn)品。經(jīng)DNS法測定苦瓜多糖純度為96.16%。
權(quán)利要求
1、一種苦瓜多糖粗產(chǎn)品的快速純化方法，其特征在于包括如下步驟和工藝條件(1)將從鮮苦瓜原料中提取的苦瓜多糖粗品溶解于蒸餾水中，進(jìn)柱上樣，在羥甲基纖維素填料柱上層析純化，所述苦瓜多糖粗品與蒸餾水的質(zhì)量體積比為160mg∶9～11mL；分別以0、0.25、0.75mol/L氯化鈉溶液梯度洗脫，控制流速為0.7～0.9mL/min，每5mL收集一管，以紫外分光光度計逐管檢測在486nm處的OD值，收集洗脫峰處對應(yīng)的洗脫組分，將所得各組洗脫液均濃縮到所加入的蒸餾水濃縮液；(2)將步驟(1)所得的濃縮液上樣，用葡聚糖凝膠柱進(jìn)一步純化，以蒸餾水洗脫，控制流速為0.4～0.5mL/min，收集洗脫液，將洗脫液濃縮至原體積的5～10％；(3)將步驟(2)所得的產(chǎn)物冷凍干燥，研磨成粉，即得到精制的苦瓜多糖產(chǎn)品。
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的苦瓜多糖粗產(chǎn)品的快速純化方法，其特征在于-所述的從鮮苦瓜原料中提取的苦瓜多糖粗品是用如下方法提取新鮮苦瓜原料 切片、真空干燥、磨碎成苦瓜粉，再用4倍體積855^ (重量)的乙醇回流5 6h， 過濾干燥得到的苦瓜粉；按水與苦瓜粉質(zhì)量比為1:10 U向苦瓜粉加入蒸餾水， 再用質(zhì)量百分比濃度0.2~0.6%纖維素酶(unikzymeC20)處理10 12min,過濾 得濾渣，再按按水與濾渣質(zhì)量比為1:25-30加入蒸餾水，700w 1000w微波處理 3 5min，過濾得濾液；最后中性蛋白酶(unikneutral L )處理濾液、透析袋透析、 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、無水乙醇沉淀、40 45。C真空干燥得苦瓜多糖粗品。
3、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的苦瓜多糖粗產(chǎn)品的快速純化方法，其特征在于 所述的在羥甲基纖維素填料柱上層析純化前還包括對羥甲基纖維素填料進(jìn)行浸 泡活化除菌處理，先用1 2mol/LKCl浸泡2 3h，用布氏漏斗抽濾，反復(fù)用蒸餾 水抽洗至PH值為中性。
4、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的苦瓜多糖粗產(chǎn)品的快速純化方法，其特征在于 所述的用葡聚糖凝膠柱進(jìn)一步純化前還包括對葡聚糖凝膠進(jìn)行活化除菌處理， 凝膠在蒸餾水中膨脹，濕凝膠在水浴中逐漸加熱至90 95"C,處理時間1.5 2h。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種苦瓜多糖粗產(chǎn)品的快速純化方法。該方法將從鮮苦瓜原料中提取的苦瓜多糖粗品溶解于蒸餾水中，進(jìn)柱上樣，在羥甲基纖維素填料柱上層析純化，分別以0、0.25、0.75mol/L氯化鈉溶液梯度洗脫，以紫外分光光度計逐管檢測在486nm處的OD值，收集洗脫峰處對應(yīng)的洗脫組分，將所得各組洗脫液均濃縮到所加入的蒸餾水濃縮液；將所得的濃縮液上樣，用葡聚糖凝膠柱進(jìn)一步純化，以蒸餾水洗脫，控制流速為0.4～0.5mL/min，收集洗脫液，將洗脫液濃縮至原體積的5～10％；所得的產(chǎn)物冷凍干燥，研磨成粉，即得到精制的苦瓜多糖產(chǎn)品。該方法安全、產(chǎn)品損失小，純度高，且產(chǎn)品溶解性、生理活性均得到很好的保持。
文檔編號C08B37/00GK101591398SQ20091004070
公開日2009年12月2日 申請日期2009年6月30日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月30日
發(fā)明者何艷克, 飛 胡 申請人:華南理工大學(xué)