專利名稱：一種灰樹花蛋白聚糖的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種食藥用菌蛋白聚糖的制備方法，尤其是一種灰樹花蛋白聚糖的制備方法。
背景技術(shù)：
灰樹花蛋白聚糖具有免疫活性與抗腫瘤活性。目前已有的制備方法熱水提取灰樹花得水提取液——將水提取液經(jīng)醇沉——沉淀物經(jīng)脫游離蛋白——經(jīng)酸提取后的殘余物用堿溶解——堿溶液經(jīng)醇沉后——脫蛋白——醇沉——沉淀物即為蛋白聚糖。該法的提取得率較低，大約在千分之二到千分之五；反復(fù)沉淀工序繁鎖；水提取后的灰樹花中的堿溶物中部分也有生物活性，未提取。(Nanba，1987；Chem.Parm.Bull 35(3)1162-1168；The Chemical Structure of anAntitumor Polysaccharide in Fruit Bodies of Grifola frondosa)。國內(nèi)對灰樹花蛋白聚糖的研究還少有開展，更未有對其制備方法的研究與報道。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種灰樹花蛋白聚糖的制備方法，以解決現(xiàn)有技術(shù)中蛋白聚糖提取得率低、提取工序繁瑣、提取不完全的缺點(diǎn)。
本發(fā)明的原理一種雙提取并結(jié)合超濾技術(shù)的方法，通過先用熱水提取灰樹花子實(shí)體，后用一定濃度的堿性溶液提取灰樹花子實(shí)體，并對其提取液分別利用超濾方法，截留獲得水溶性與堿溶性的灰樹花蛋白聚糖溶液，經(jīng)濃縮、干燥(噴霧或真空干燥、冷凍干燥)得到灰樹花蛋白聚糖干粉。該方法不僅獲得水提物中的蛋白聚糖，還能獲得堿溶性蛋白聚糖；同時減少了灰樹花蛋白聚糖制備的步驟。
本發(fā)明的目的是提供一種灰樹花蛋白聚糖的制備方法，該方法包括如下步驟①用5～50倍體積的水浸沒灰樹花子實(shí)體，在80～100℃條件下，保溫1～10小時；②重復(fù)提取1～5次；③提取液經(jīng)粗過濾后用10～100萬道爾頓的中空纖維超濾膜進(jìn)行超濾，收集被截留的部分為水溶性蛋白聚糖溶液；④水提后的灰樹花子實(shí)體加入10～50倍體積的堿溶液，在10-50℃條件下，保溫1～12小時；⑤重復(fù)提取1～5次；⑥提取液經(jīng)粗過濾后用10～100萬道爾頓的中空纖維超濾膜進(jìn)行超濾，收集被截留的部分為堿溶性蛋白聚糖溶液；⑦將水溶性與堿溶性的蛋白聚糖溶液一起濃縮干燥，即得到灰樹花蛋白聚糖干粉。
優(yōu)選的提取步驟為①用10～30倍體積的水浸沒灰樹花子實(shí)體，在90～100℃條件下，保溫2～4小時；②重復(fù)提取1～3次；
③提取液經(jīng)粗過濾后用10～75萬道爾頓的中空纖維超濾膜進(jìn)行超濾，收集被截留的部分為水溶性蛋白聚糖溶液；④水提后的灰樹花子實(shí)體加入10～30倍體積的堿溶液，在20-30℃條件下，保溫4～8小時；⑤重復(fù)提取2～4次；⑥提取液經(jīng)粗過濾后用10～75萬道爾頓的中空纖維超濾膜進(jìn)行超濾，收集被截留的部分為堿溶性蛋白聚糖溶液；⑦將水溶性與堿溶性的蛋白聚糖溶液一起濃縮干燥，即得到灰樹花蛋白聚糖干粉。
其中步驟④中所述的堿溶液為重量百分比為0.5％-10％的氫氧化鈉或氫氧化鉀中的一種或兩種。
優(yōu)選的堿溶液為重量百分比為2％-6％的氫氧化鈉溶液。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于①不僅提取了水溶性蛋白聚糖，而且提取了堿溶性蛋白聚糖，使蛋白聚糖的得率提高，適合大規(guī)模生產(chǎn)；②步驟簡單，易操作，耗時短；③盡可能多地獲得了灰樹花中的活性蛋白聚糖，蛋白聚糖的生物活性提高，利用率提高。
④獲得的蛋白聚糖具有抗腫瘤、提高生物體免疫活性的作用，可用于制備抗腫瘤、提高免疫活性的制劑。
實(shí)施例一①用10倍體積的水浸沒灰樹花子實(shí)體，在80℃條件下，保溫2個小時；②重復(fù)提取2次；③提取液經(jīng)粗過濾后用10萬道爾頓的中空纖維超濾膜進(jìn)行超濾，收集被截留的部分為水溶性蛋白聚糖溶液；④水提后的灰樹花子實(shí)體加入10倍體積的重量百分比濃度為6％的氫氧化鉀堿溶液，在10℃條件下，保溫12小時；⑤重復(fù)提取1次；⑥提取液經(jīng)粗過濾后用10萬道爾頓的中空纖維超濾膜進(jìn)行超濾，收集被截留的部分為堿溶性蛋白聚糖溶液；⑦將水溶性與堿溶性的蛋白聚糖溶液一起濃縮干燥，即得到灰樹花蛋白聚糖干粉。
實(shí)施例二①用20倍體積的水浸沒灰樹花子實(shí)體，在90℃條件下，保溫1個小時；②重復(fù)提取3次；③提取液經(jīng)粗過濾后用50萬道爾頓的中空纖維超濾膜進(jìn)行超濾，收集被截留的部分為水溶性蛋白聚糖溶液；④水提后的灰樹花子實(shí)體加入20倍體積的重量百分比濃度為4％的氫氧化鈉堿溶液，在20℃條件下，保溫8小時；⑤重復(fù)提取2次；⑥提取液經(jīng)粗過濾后用10萬道爾頓的中空纖維超濾膜進(jìn)行超濾，收集被截留的部分為堿溶性蛋白聚糖溶液；
⑦將水溶性與堿溶性的蛋白聚糖溶液一起濃縮干燥，即得到灰樹花蛋白聚糖干粉。
實(shí)施例三①用40倍體積的水浸沒灰樹花子實(shí)體，在100℃條件下，保溫2個小時；②重復(fù)提取1次；③提取液經(jīng)粗過濾后用50萬道爾頓的中空纖維超濾膜進(jìn)行超濾，收集被截留的部分為水溶性蛋白聚糖溶液；④水提后的灰樹花子實(shí)體加入40倍體積的2％氫氧化鈉堿溶液，在30℃條件下，保溫4小時；⑤重復(fù)提取5次；⑥提取液經(jīng)粗過濾后用50萬道爾頓的中空纖維超濾膜進(jìn)行超濾，收集被截留的部分為堿溶性蛋白聚糖溶液；⑦將水溶性與堿溶性的蛋白聚糖溶液一起濃縮干燥，即得到灰樹花蛋白聚糖干粉。
權(quán)利要求
1.一種灰樹花蛋白聚糖的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟①用5～50倍體積的水浸沒灰樹花子實(shí)體，在80～100℃條件下，保溫1～10小時；②重復(fù)提取1～5次；③提取液經(jīng)粗過濾后用10～100萬道爾頓的中空纖維超濾膜進(jìn)行超濾，收集被截留的部分為水溶性蛋白聚糖溶液；④水提后的灰樹花子實(shí)體加入10～50倍體積的堿溶液，在10-50℃條件下，保溫1～12小時；⑤重復(fù)提取1～5次；⑥提取液經(jīng)粗過濾后用10～100萬道爾頓的中空纖維超濾膜進(jìn)行超濾，收集被截留的部分為堿溶性蛋白聚糖溶液；⑦將水溶性與堿溶性的蛋白聚糖溶液一起濃縮干燥，即得到灰樹花蛋白聚糖干粉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的灰樹花蛋白聚糖的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟①用10～30倍體積的水浸沒灰樹花子實(shí)體，在90～100℃條件下，保溫2～4小時；②重復(fù)提取1～3次；③提取液經(jīng)粗過濾后用10～75萬道爾頓的中空纖維超濾膜進(jìn)行超濾，收集被截留的部分為水溶性蛋白聚糖溶液；④水提后的灰樹花子實(shí)體加入10～30倍體積的堿溶液，在20-30℃條件下，保溫4～8小時；⑤重復(fù)提取2～4次；⑥提取液經(jīng)粗過濾后用10～75萬道爾頓的中空纖維超濾膜進(jìn)行超濾，收集被截留的部分為堿溶性蛋白聚糖溶液；⑦將水溶性與堿溶性的蛋白聚糖溶液一起濃縮干燥，即得到灰樹花蛋白聚糖干粉。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2任一項所述的灰樹花蛋白聚糖的制備方法，其特征在于步驟④中所述的堿溶液為重量百分比為0.5％-10％的氫氧化鈉或氫氧化鉀中的一種或兩種。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的灰樹花蛋白聚糖的制備方法，其特征在于所述的堿溶液為重量百分比為2％-6％的氫氧化鈉溶液。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種灰樹花蛋白聚糖的制備方法，通過先用熱水提取灰樹花子實(shí)體，后用堿性溶液提取灰樹花子實(shí)體，并對其提取液進(jìn)行中空纖維超濾，截留獲得水溶性與堿溶性的灰樹花蛋白聚糖溶液，經(jīng)濃縮、干燥得到灰樹花蛋白聚糖干粉。該方法同時獲得水溶性和堿溶性蛋白聚糖，提高了蛋白聚糖的得率，簡化了提取步驟，且易操作，適于工業(yè)上應(yīng)用。
文檔編號C08B37/00GK1634983SQ200410067300
公開日2005年7月6日 申請日期2004年10月20日 優(yōu)先權(quán)日2004年10月20日
發(fā)明者周昌艷, 張勁松, 賈薇, 楊焱, 郭倩, 劉艷芳 申請人:上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院