專利名稱：治療血栓形成疾病的吡咯烷、哌啶和六氫吖庚因的甲酰胺衍生物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明背景血小板集聚組成由血管損傷誘導的最初止血應答以阻止流血，然而，這個正常止血過程的病理延伸能夠導致血栓的形成，最終，血小板集聚的通常途徑是纖維蛋白原結合到激活即暴露的血小板糖蛋白IIb/IIIa(GPIIb/IIIa)上，因此，纖維蛋白原結合到GPIIb/IIIa上的干擾劑抑制血小板集聚。所以，這些干擾劑用于治療血小板介導的血栓形成疾病，如動脈和靜脈的血栓形成、急性心肌梗塞、不穩(wěn)定性心絞痛、伴隨溶血栓療法和血管成形術的再閉合、炎癥和各種血管閉合疾病。色質(如ADP、膠原和凝血酶)將激活功能區(qū)暴露于纖維蛋白原的兩個不同肽區(qū)域(α-鏈Arg-Gly-Asp(RGD)和γ-鏈His-His-Leu-Gly-Gly-Ala-Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val(HHLGGAKQAGDV，γ400-411)而激活纖維蛋白原受體(GPIIb/IIIa)。因為這些肽片段本身已顯示抑制纖維蛋白原結合到GPIIb/IIIa上的作用，所以這些片段的模擬物也將用作拮抗劑。事實上，本發(fā)明之前，基于RGD拮抗劑的效力已經揭示了其抑制纖維蛋白原結合到GPIIb/IIIa上并抑制血小板集聚的作用，例如，RO438857(L.Alig，醫(yī)學化學雜志(J.Med.Chem.)，1992，35，4393)對在體外由凝血酶引起的血小板集聚具有0.094μM的IC50值。一些這樣的拮抗劑也已顯示體內抗血栓形成劑的效力，并且有時用在協(xié)同纖維蛋白溶解療法中，例如，t-PA或鏈激酶(J.A.Zablocki，Current Pharmaceutical Design 1995，1，533)。正如下文描述的藥物研究結果所示，本發(fā)明化合物顯示阻斷纖維蛋白原結合到獨立的GPIIb/IIIa(IC50為0.0002-1.39μM)上的能力，在各種血小板色質存在下抑制體外血小板集聚(0.019-65.0μM，與凝血酶比較)，并在動物模型中進一步抑制體內血小板集聚。此外，正如這些抑制劑的前輩已經顯示的那樣，它們在動物血栓形成模型中顯示了效力(“作為抗血栓形成的化合物3-哌啶甲酸衍生物”1994.3.16申請、申請系列號為08/213772)。本發(fā)明化合物通過對血小板集聚預防能力的功效顯示了抗血栓形成劑的效力，此外，因為本發(fā)明化合物抑制整聯(lián)蛋白-介導的細胞-細胞或細胞-母體的黏附，所以它們也可以用于對抗炎癥、骨再吸作用、腫瘤細胞轉移病變等等(D.Cox.Drug News&Perspectives 1995，8，197)。
R2選自H、烷基或?；械娜魏位鶊F，優(yōu)選R2是氫；R5是H或C(O)NHQ(CHW)rCO2R8；其中Q選自CH2、CH-芳基、CH-雜芳基、CH-取代的雜芳基或CH-烷基；優(yōu)選Q是CH2、CH-取代的雜芳基或CH-雜芳基；W選自H或N(R6)T-R7，優(yōu)選當Q是CH時W是H，當Q是CH2時W是N(R6)T-R7；其中，R6選自H、烷基或?；械娜魏位鶊F，優(yōu)選R6是氫；T選自C(O)、C(N-CH)或SO2，優(yōu)選T是C(O)，和R7選自烷基、芳基、芳烷基、烷氧基或氨基烷基中的任何一種；和R8選自H、烷基或芳烷基，優(yōu)選R8是氫；m是整數1、2或3，優(yōu)選m是整數1或2；X選自C(O)、C(O)O、C(O)NH、CH2或SO2中的任何一種；n是整數1、2或3；r是0或1；R1選自H或環(huán)烷基；Y選自(CH2)p、CH(R3)(CH2)q、(CH2)qCH(R3)、(CH(COR4)CH2)q、(CH2)qCHOH或哌啶-3-羧酸中的任何一種；條件是當Y是(CH2)p和p是2時，X不是C(O)或當X是C(O)時，或者R1不是H、或者R2不是H，和條件是當Y是(CH(CO2R4)CH2)q時，X不是C(O)或CH2；p是2或3；q是1、2或3，優(yōu)選q是1；R3是烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、芳烷基或雜芳基；R4是H或烷基或環(huán)烷基，優(yōu)選R4是H；Z是CO2H、CO2烷基、SO3H、PO3H2或5-四唑；條件是R5和R10中至少有一個是氫。
優(yōu)選基團C(O)N(R1)YZ結合到中心氮雜環(huán)3-或4-位(大于5元環(huán)時的4-位)環(huán)碳原子上，最優(yōu)選結合到3-位上。
除非另有說明，在此所用的無論單獨或作為取代基部分使用的烷基和烷氧基包括具有1-8個碳原子的直鏈或支鏈，例如烷基包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、3-(2-甲基)丁基、2-戊基、2-甲基丁基、新戊基、正己基、2-己基和2-甲基戊基。烷氧基是前面所述直鏈或支鏈烷基所形成的氧醚。環(huán)烷基含有5-8個環(huán)碳原子，優(yōu)選含有6-7個碳原子。
在此單獨使用或與其它術語結合使用的術語“芳基”、“雜芳基”或“取代的雜芳基”是指芳香或雜芳香基團，如苯基、萘基、吡啶基、噻吩基、呋喃基或喹啉基、其中的取代基是烷基，術語“芳烷基”是指被芳基取代的烷基。
在此所用的術語“?；笔侵妇哂?-6個碳原子、衍生于除去羥基的有機酸的有機基團。
本發(fā)明化合物也可以藥用鹽的形式存在，藥用鹽通常是其中在1-哌啶(吡咯烷、哌嗪)取代基中的氮被無機或有機酸質子化的形式。代表性的有機或無機酸包括鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、高氯酸、硫酸、硝酸、磷酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、乳酸、琥珀酸、馬來酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、杏仁酸、甲磺酸、羥基乙磺酸、苯磺酸、草酸、pamoic酸、2-萘磺酸、對甲苯磺酸、環(huán)己基氨基磺酸、水楊酸、糖精酸或三氟乙酸。
特別優(yōu)選的本發(fā)明化合物包括表1中所示的那些化合物，其中“Subst”是指基團C(O)N(R1)YCO2H結合到中心氮雜環(huán)的位置，其中數字“3”后面的符號“R”是指絕對構型(Cahn-Ingold-Prelog規(guī)則)，這些沒有任何特定構型的數字是外消旋混合物。
表1 #SubstmnXR1R2YZ13 22C(O)HHCH(Ph)CH2CH23 12NHCOHHCH2CHMe CH33 12OC(O) HH(R)-CH(CO2Me)CH2CH43 21C(O)HHCH(3-Me-Ph)CH2CH54 22C(O)HHCH(Me)CH2CH64 22C(O)HHCH(4-CO2H-Ph)CH2CH73 22C(O)HMeCH2CH2CH8 見結構93 22C(O)HHCH(Me3Si-乙炔基)CH2CH10見結構11 3R 22CO HHCH2CH(OH)CH12 322SO2HHCH2CH2CH13見結構14 322CO HMeCH(3，4-OCH2O-Ph)CH2N15 322CO HMeCH(3-喹啉基)CH2N16 3R 22CO HH S-CH(3，4-OCH2O-Ph)CH2CH17 323CO HH CH(3-喹啉基)CH2CH18 3R 22CO HH S-CH(3-喹啉基)CH2CH19 3R 22CO HH S-CH(t-丁基乙炔基)CH2CH20 322CH2HH S-CH(3，4-OCH2O-Ph)CH2CH21 3R 22CO HH S-CH(3-吡啶基)CH2CH 其中R5是氫、R10是C(O)N(R1)YZ、M是(CH2)m和A是哌啶-2-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基、哌嗪-1-基、吡咯烷-2-基、吡咯烷-3-基或NHR2的本發(fā)明化合物可以如路線AA所示方法制備。在該流程圖中，可以在DIC/HOBT和叔胺存在下，用樹脂-結合的4-哌啶丙酸處理3-哌啶甲酸烯丙酯(外消旋混合物或獨立的對映體)，然后通過以鈀為媒介的催化劑除去烯丙酯，繼續(xù)重復的偶合過程，用三甲基甲硅烷醇酸(silanolate)鉀皂化，得到最終產物(例如化合物1)。依此類推，通過使固體支持的胺(醇)與氯甲酸對硝基苯酯反應，然后與3-哌啶甲酸乙酯反應(S.M.Hutchins，Tetrahedron Lett.1994，35，4055)制備基于尿素和氨基甲酸乙酯對于叔酰胺(化合物2和3)的置換物。
三取代的3-氨基丙酸酯中間體用改進的克及文納蓋爾方法(SchemeAG；E.Profft，J.Prakt.Chem.1965，30，18)，隨后通過費希爾羧酸產物(在市場上買不到時)的酯化制備。這些中間體通過外消旋苯基乙酰胺(如中間體AG3)的青霉素酰胺酶拆分以富含對映體的形式制備(V.A.Soloshonok，TetrahedronAsymmetry 1995，6，1601)，這里，在所需S-對映體留存在苯基乙酰基上的同時，用酰胺酶水解不需要的R-對映體，正如J.A.Zablocki，醫(yī)學化學雜志(J.Med.Chem.)，1995，38，2378中所述，拆分也可以在外消旋三取代的3-N-Boc-氨基丙酸的(-)-麻黃堿鹽上進行。3-哌啶甲酸乙酯和4-哌啶甲酸乙酯是可以購得的中間體。
通過用吡咯烷-3-羧酸甲酯和六氫吖庚因-3-羧酸甲酯中間體的固相合成，將類似物從AA2轉化為AA3(路線AA)制備合成的3-哌啶甲酰胺的5-和7-元環(huán)類似物(分別為4和17)。如H.Rapoport，有機化學雜志(J.Org.Chem.)，1974，39，893中所述制備吡咯烷-3-羧酸甲酯和六氫吖庚因-3-羧酸甲酯。例如使N-芐基六氫吖庚因-2-酮與異丙基氨基化鋰/碳酸二乙酯反應，用氫化鋰鋁將該產物還原，得到N-芐基-3-羥基甲基六氫吖庚因。通過氫解(H2，Pd-C，MeOH)、氮保護的(碳酸二叔丁酯/氫氧化鈉)和用三氧化鉻氧化的醇除去芐基，得到N-Boc-六氫吖庚因-3-羧酸。用HCl/MeOH進行羧酸的酯化除去Boc基團，得到六氫吖庚因-3-羧酸甲酯。
如路線AB中所示，根據S.G.Gilbreath，美國化學會志(J.Am.Chem.Soc.)，1988，110，6172中所述制備哌嗪類似物。如Scheme AC；S.J.Wittenberger，有機化學雜志(J.Org.Chem.)，1993，58，4139中所述，用疊氮三甲基甲硅烷/二丁基氧化錫從相應的腈制備四唑(13)。這里腈前體AC2通過標準酰胺鍵與3-氨基丙腈偶合制備，并在最終合成步驟中用以二氧化鉑為媒介的氫化將其還原(W.J.Hoekstra，醫(yī)學化學雜志(J.Med.Chem.)，1995，38，1582)。
N-甲基哌啶類似物能夠通過基于Fmoc的固相肽合成技術如路線AD所示方法制備(P.Sieber，Tetrahedron Lett.1987，28，6147)，由20％哌啶/DMF使Fmoc保護基裂解，用DIC/HOBT/DMF偶合，用95％TFA從樹脂上除去最終產物。
如路線AE所示方法制備磺酰胺12，如J.I.DeGaw，雜環(huán)化學雜志(J.Heterocyclic Chem.)，1966，3，90中所述，通過氫化/保護這兩個步驟從4-吡啶乙磺酸分兩步分離中間體AE1，然后在標準亞硫酰氯條件下，使其氯化(P.J.Hearst，有機合成(Org.Syn.)，1950，30，58)，得到AE2，然后，用標準液相合成使中間體AE2向最終產物方向進行(W.J.Hoekstra，醫(yī)學化學雜志(J.Med.Chem.)，1995，38，1582)。
如路線AF所示方法制備哌啶丙基-3-哌啶甲酰胺20，用標準Boc-ON條件對酯AF1進行Boc保護(D.S.Tarbell，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 1972，69，730)，然后，用DiBAL-H/THF將其還原成相應的伯醇(E.Winterfeldt，Synthesis1975，617)，得到中間體AF2。用p-TsCl將該化合物轉化成其相應的甲苯磺酸酯AF3(L.F.Awad，日本化學學會通報(Bull.Chem.Soc.Jpn.)，1986，59，1587)，然后，在標準條件下(苯/加熱；I.Seki，日本化學藥學通報(Chem.Pharm.Bull.Jpn.)，1970，18，1104)，用中間體AF3烷基化3-哌啶甲酸乙酯。
通過外消旋物(如其相應的D-酒石酸鹽)的手性拆分(A.M.Akkerman，Rec.Trav.Chim.Pays-Bas 1951，70，899)分離富含對映體的R-(-)3-哌啶甲酸乙酯。路線AA 路線AB 路線AC 路線AD 路線AE 路線AF 路線AG 特別優(yōu)選的本發(fā)明化合物包括在表1(和表2)中所示的那些化合物，其中，在數字“3”后面的符號“R”表示絕對構型(Cahn-Ingold-Prelog規(guī)則)。
表II #nR1R2R3222HHNHCONH(3-MeOPh)232HHNHCOOCH2Ph242HHNHCOOCH2(3-ClPh)252HHNHSO2CH2Ph262HHNHCONH(3，5-二MeOPh)27 見下列結構282HHNHCONH(2-萘基)29 見下列結構302HHNHCONHCH2CH2Ph312H6-Me-3-吡啶基H322H5-Br-3-吡啶基H332CH(NH) 3-吡啶基 H 其中R5是C(O)NHQ(CHW)rCO2R8，R10是H，M是哌啶-1-基和A是 的本發(fā)明二氨基丙酸拮抗物可以如在路線AH中所示方法制備，用HBTU活化的AH1?；疦-α-Z-二氨基丙酸甲酯，通過氫解除去Z基團，得到AH2(Z基團留在化合物23中)，然后，使所得伯胺與所需的異氰酸酯反應(或若為得到24、則與氯甲酸烷基酯反應，若為得到25，則與烷基磺酰氯反應)，得到AH3。用HCl除去中間體AH3的Boc基團，并用HBTU活化的AH4?；玫降闹侔?，得到AH5。用氫氧化鋰使該產物皂化，并用HCl除去Boc基團，得到化合物22。路線AH
本發(fā)明基于二哌啶-脲的拮抗物可以如路線AJ所示方法制備，中間體AJ1如路線AG所示方法制備，用氯甲酸對硝基苯酯?；疉J1，然后與Boc二哌啶反應(合成，參見W.Bondinell，Patent application WO 94/14776)。用氫氧化鋰使酯AJ2皂化，并用HCl除去Boc基團，得到化合物27。取代的哌啶醛中間體如AK2通過氫化鋰鋁還原其相應的煙酸甲酯(AK1)，隨后用二氧化錳(路線AK)氧化來制備。然后，如路線AG所示，將醛轉化成β-氨基酸。甲脒AL3如路線AL所示方法制備，如M.K.Scott所述(醫(yī)學化學雜志(J.Med.Chem.)，1983，26，534)，用亞氨甲酸乙酯(ethyl formimidate)酰化胺AL1，用4N HCl皂化酯AL2(RT，20小時)，得到化合物33。三取代β-氨基酸型拮抗劑如路線AM所示方法制備，用HBTU活化的AM1酰化再溶解的6-甲基-吡啶-β-氨基酯，并用HCl處理偶合產物，得到胺AM2。用HBTU活化的AM4使胺酰化，皂化酯并用HCl除去Boc基團，得到化合物31。路線AJ 路線AK 路線AL 路線AM
按照常規(guī)藥物配制技術，將作為活性成分的一種或多種本發(fā)明式(I)化合物或其鹽與藥用載體混合制備本發(fā)明藥物組合物，其中的載體根據給藥(例如，口服或腸胃外給藥如肌肉注射)所需劑型可以有各種形式。在制備口服劑型中，可以使用任何常用藥物介質，然而，對于液體口服制劑，如，懸浮液、酏劑和溶液來說，合適的載體和添加劑包括水、乙二醇、油、醇、矯臭劑、防腐劑、著色劑等類似物；對于固體口服制劑，如粉劑、膠囊、caplet、gelcaps和片劑來說，合適的載體和添加劑包括淀粉、糖、稀釋劑、粒劑、潤滑劑、粘合劑、分裂劑等類似物。由于片劑和膠囊易于給藥，因此，它們代表最方便的口服劑量單位形式，其中，顯然使用固體藥用載體。如果需要，片劑可以通過標準技術糖包衣或腸包衣。對于腸胃外給藥，載體通常含有消毒水，還可以包括例如為助溶或防腐目的的全部其它成分。也可以制備注射懸浮液，其中，可以使用合適的液體載體、懸浮劑等類似物。本發(fā)明藥物組合物每劑量單位(如片劑、膠囊、粉劑、注射液、茶匙等等)將含有對于輸送如上所述有效劑量所必需的活性成分量。本發(fā)明藥物組合物含有每單位劑量單位(如片劑、膠囊、粉劑、注射液、茶匙等等)大約0.03mg-100mg/kg(優(yōu)選0.1-30mg/kg)，并可以定為約0.1-300mg/kg/日(優(yōu)選1-50mg/kg/日)的劑量。然而，劑量可以根據患者的需要、所治療疾病的嚴重程度和所用的化合物而改變，可以應用日給藥劑量或后周期劑量。生物學本發(fā)明化合物干擾纖維蛋白原結合到糖蛋白IIb/IIIa上，從而，抑制血小板集聚。因此，所述化合物用于治療血小板介導的血栓形成疾病，如動脈和靜脈的血栓形成、急性心肌梗塞、伴隨溶血栓療法和血管成形術的再閉合、炎癥和各種血管閉合疾病。因為最終正常血小板集聚通道是纖維蛋白原的結合以激活即暴露GPIIb/IIIa，抑制該結合表示貌似的抗血栓形成通道，通過ADP、膠原和凝血酶激活受體，將結合功能區(qū)暴露于纖維蛋白原的兩個不同肽區(qū)域α-鏈Arg-Gly-Asp(RGD)和γ-鏈400-411。正如下文描述的藥物研究結果所示，本發(fā)明化合物顯示阻斷纖維蛋白原結合到獨立的GPIIb/IIIa(IC50′s為0.0002-1.39μM)上的能力，在各種血小板色質存在下抑制體外血小板集聚(0.019-65.0μM，與凝血酶比較)，并在動物模型中進一步抑制體內血小板集聚。固相純化糖蛋白IIB/IIIA體外結合試驗在pH 7.4下，利用于10mM HEPES、150mM NaCl中的1mM RGD-親和性純的GPIIb/IIIa(有效范圍0.5-10μg/ml)以50μl/孔鋪于96孔Immulon-2微量滴定板(Dynatech-Immulon)中，蓋上該滴定板并在4℃下孵育過夜。棄去GPIIb/IIa溶液，加入150μl 5％BSA，并在室溫下孵育1-3小時，用改進的臺羅德氏緩沖液全面地洗滌該滴定板，將2×最終濃度的生物素化的纖維蛋白原(25μl/孔)加到含有試驗化合物(25μl/孔)的滴定板孔中，蓋上該滴定板并在室溫下孵育2-4小時，在孵育完成的20分鐘前，加入一滴試劑A(Vecta Stain ABC Horse RadishPeroxidase Kit，Vector Laboratories，Inc.)和一滴試劑B，使其與5ml改進的臺羅德氏緩沖液混合，并使其靜止，棄去配體溶液，用改進的臺羅德氏緩沖液洗滌該滴定板(5×200μl/孔)，加入Vecta Stain HRP Biotin-Avidin試劑(50μl/孔，如上制備)，并在室溫下孵育15分鐘，棄去Vecta Stain溶液，并用改進的臺羅德氏緩沖液洗滌(5×200μl/孔)，加入顯影緩沖液(10ml 50mM檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液@pH5.3，6mg鄰亞苯基二胺，6μl30％H2O2；50μl/孔)，并在室溫下孵育3-5分鐘，然后，加入2N H2SO4(50μl/孔)，在490nm處讀吸收值，結果顯示于表III和IV中。體外抑制凝血酶誘導、凝膠過濾的血小板集聚試驗以化合物處理血小板濃度相對于空白處理血小板濃度透光性的增加計算血小板集聚的百分率，管中含有0.13M檸檬酸鈉的人血得自于無藥的、正常的給予體，通過在25℃下，以200×g的轉速離心全血10分鐘收集血小板富集的血漿(PRP)，該PRP(5ml)通過瓊脂糖2B(床體積50ml)過濾，將血小板計數調至每個樣品2×107個血小板，將下列成分加到硅化比色杯中其量與350μl、50μl的20mM鈣和50μl試驗化合物相等的濃血小板濾液和臺羅德氏緩沖液(0.14M NaCl，0.0027MKCl，0.012M NaHCO3，0.76mM Na2HPO4，0.0055M葡萄糖，2mg/mlBSA和5.0mM HEPES@pH7.4)，隨著促效藥(1單位/ml的凝血酶50μl)的加入用生物數據集合度計檢測集聚3分鐘，結果顯示于表III和IV中。
表III體外結果纖維蛋白原結合 血小板集聚 *化合物 #％Inh.(50μM)IC50(μM)％Inh.(50μM)IC50(μM)1 95.0％0.00383.0％3.62 93.0％0.02795.7％54.03 81.0％NT 26.2％＞1004 89.9％0.12181.0％26.05 89.0％0.012100％ 10.06 90.7 0.19771.2％73.07 100％ 0.00675.6％2.48 93.0％0.33294.8％65.09 99.0％0.00290.9％0.371091.3％0.01985.0％1.61179.6％0.00499.2％1.551297.0％0.02588.0％15.51395.0％1.39 67.0％25.51499.0％0.00491.0％0.9115100％ 0.0091 92.2％1.916100％ 0.0005 94.0％0.0281796.0％0.00589.6％0.4518100％ 0.0002 100％ 0.0191999.0％0.02192.1％0.0792099.0％0.0007 89.7％37.021100％ 0.0005 100％ 0.060*凝血酶誘導、凝膠過濾的血小板集聚表IV體外結果纖維蛋白原結合 血小板集聚*化合物#％Inh.(50μM)IC50(μM)％Inh.(50μM)IC50(μM)22 100％0.000794.0％0.04623 100％0 000397.0％0.02724 100％0.0004100％ 0.01825 100％0.000397.0％0.00726 100％0.000397.0％0.01627 100％0.0006100％ 0.4528 100％0.0002100％ 0.1729 100％0.068 100％ 4230 100％0.0008100％ 0.1931 100％0.0003100％ 0.04532 100％0.0004100％ 0.02033 100％0.0007100％ 0.30*凝血酶誘導、凝膠過濾的血小板集聚狗體內(ex vivo)研究用戊巴比妥鈉(35mg/kg，i.v)麻醉成年mongrel狗(8-13kg)并進行人工呼吸，用插入股骨動脈的Millar導管端部的壓力傳送器測定動脈血壓和心率，將另一個Millar傳送器放置于頸動脈左側(LV)以測定LV末端舒張壓和心肌收縮指數。從肢體電極記錄導聯(lián)II心電圖。將導管放置于股骨動脈和靜脈以分別抽血樣和灌注藥物。用儀器數據取得調節(jié)系統(tǒng)連續(xù)檢測反應。
抽取動脈血樣(5-9ml)于含有3.8％的檸檬酸鈉管中，以制備血小板富集的血漿(PRP)并測定對于凝固參數的影響凝血酶原時間(PT)和激活部分凝血激酶時間(APTT)。抽取血樣(1.5ml)于EDTA中，以測定血細胞比容和細胞計數(血小板，RBC′s和白細胞)。用symplate刻痕裝置和瓦特曼濾紙從頰面得到試物流血時間。
用生物數據集合度計進行PRP的集聚，全血的集聚使用Chronolog阻抗集合度計，用生物數據或ACL3000+凝固分析儀測定PT和APTT，用sysmex K-1000計數細胞。
將化合物溶解在小體積二甲基甲酰胺中(DMF)，并用鹽水稀釋至10％DMF的最終濃度，用哈佛灌注泵通過靜脈途徑給入化合物，以0.33ml/分的恒定速率、15分鐘的間歇給入藥劑，每劑后和30分鐘間歇中收集數據，之后結束給藥。通過注射器以水溶液的形式給入口服藥劑。
化合物產生明顯的體內血小板集聚反應的抑制作用，然而，在全血中，化合物以0.1-10mg/kg的劑量抑制膠原(或ADP)刺激的集聚伴隨著明顯的抑制膠原刺激的血小板ATP的釋放。PRP中，化合物還以0.1-10mg/kg的劑量在抑制膠原刺激的血小板集聚中具有明顯活性?；衔镌谶_到1mg/kg靜注劑量時無可測定出的血液動力學作用，藥物以0.1-1mg/kg的劑量延長試物流血時間并伴隨著治療后的迅速恢復。治療期間沒有觀察到無效的集聚(PT或APTT)，并且血小板、白細胞和RBC計數在任何化合物的劑量下均不變。
結果表明化合物以0.1-1mg/kg的劑量靜注給藥或以1-10mg/kg的劑量口服給藥(表V和VI)時是體內血小板集聚廣譜有效的抑制劑(既拮抗膠原又拮抗ADP通道)，較高劑量時抗集聚效果伴隨著的流血時間的延長，沒有觀察到其它血液動力學作用或血液學作用。
表V狗體內研究結果靜注劑量 口服劑量化合物#劑量持續(xù)時間*劑量持續(xù)時間*151mpk 30min10mpk 120min160.1mpk60min1mpk60min0.3mpkNT 3mpk＞180min180.1mpk30min1mpk150min191mpk 30min10mpk 90min210.3mpk150min 1mpk180min*表明持續(xù)時間＞50％膠原或ADP誘導的體內血小板集聚的抑制表VI狗體內研究結果靜注劑量 口服劑量化合物#劑量持續(xù)時間劑量持續(xù)時間*22 0.3mpk180min 3mpk60min23 0.1mpk60min 1mpk180min0.3mpkNT 3mpk150min24 0.3mpk90min 3mpk120min25 0.3mpk30min 3mpk60min26 0.3mpkNT 3mpk60min27 0.3mpk60min 3mpk120min28 0.3mpkNT 3mpk120min30 0.3mpk105min 3mpk180min31 0.3mpk120min 3mpk＞180min31 0.3mpk60min 3mpk180min*表明持續(xù)時間＞50％膠原誘導的體內血小板集聚的抑制?；衔?6和18以依賴于劑量的形式顯示了在血栓形成的犬動靜脈旁路模型中的效力(在序列申請?zhí)枮?8/213772，于1994年3月16日申請的專利，“作為抗血栓形成化合物的3-哌啶甲酸衍生物”中的方法)，例如，化合物16通過靜注，以10、30和100μl/kg/分的累計劑量抑制血栓形成(與賦形劑空白對比，分別為75％、37％、12％血栓重量)，化合物18通過靜注、以3、10和30μl/kg/分的累計劑量抑制血栓形成(與賦形劑空白對比，分別為82％、41％、12％血栓重量)。
TMSN3＝疊氮基三甲基甲硅烷Z＝芐氧羰基3-(4-哌啶)丙酸烯丙酯·HCl(AA1前體)在氮氣保護下，向3-(4-哌啶)丙烯酸(10.0g，0.066mol)和HCl水溶液(2.0N，50ml)的混合物中加入氧化鉑(IV)(0.54g)，在50psi和RT下氫化該混合物21小時，將其通過硅藻土過濾并蒸發(fā)，得到白色粉末狀3-(4-哌啶)丙酸·HCl(12.9g，99％)，用烯丙醇(50ml)處理該粉末并在50℃溫熱2小時，將該溶液冷卻至RT，蒸發(fā)至大約10ml體積，并用Et2O(250ml)稀釋，收集所得沉淀，并用Et2O洗滌，得到白色粉末(14.5g，94％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ8.7-9.1(m，2H)，5.9(m，1H)，5.25(dd，J＝7，15，2H)，4.53(d，J＝4，2H)，3.21(d，J＝8，2H)，2.74(t，J＝7，2H)，2.35(t，J＝4，2H)，1.72(d，J＝8，2H)，1.5(m，3H)，1.3(m，2H)；MS m/e198(MH+).(S)-3-氨基-3-(3-吡啶基)丙酸甲酯·2HCl(AG5)如路線AG所示，用標準方法(E.Profft，J.Prakt.Chem.1965，30，18)制備苯基乙酰胺中間體AG3?；亓飨录訜酇G1(0.47mol)、EtOH(100ML)、NH4OAc(0.47mol)和丙二酸(0.70mol)的混合物6小時，冷卻并過濾，用EtOH和MeOH洗滌白色固體并干燥，將該固體溶解在2∶1丙酮/水(360ml)中，用三乙胺(0.72mol)和苯基乙酰氯(0.36ml)處理，并攪拌22小時。蒸發(fā)該混合物，將殘渣溶解在水(500ml)中，并調至pH 12(1NNaOH)，將水層調至pH 2(濃鹽酸)，用Et2O萃取并蒸發(fā)至白色泡沫狀，用硅膠色譜(10％MeOH/DCM)純化該泡沫，得到AG3，在RT下，用KOH(3.0N)將化合物AG3(0.22mol)的水(600ml)溶液調至pH7.5，并用青霉素酰胺酶(91520單位，Sigma)對其處理，攪拌該混合物47小時，將其用HCl(濃)酸化至pH1，通過硅藻土過濾所得ppt，用Et2O(3×300ml)萃取濾液，真空下將其濃縮，對其用MeOH/濃NH4OH(9∶1)處理、該含產物的溶液用硅膠層析(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH78∶18∶4)純化，得到(S)-3-苯基乙酰胺基-3-(3-吡啶基)丙酸銨鹽(19.5g，58％)，將該產物用HCl(6.0N，292ml)處理，回流加熱5小時，冷卻至RT并用Et2O(3×200ml)萃取，將水層調至pH 12，真空濃縮，用MeOH(2×300ml)研制所得固體，蒸發(fā)該溶液，得到大約14g鈉鹽。用MeOH(500ml)、2，2-二甲氧基丙烷(44ml)和HCl(4N的二噁烷溶液，84ml)處理該產物，室溫下攪拌90小時，過濾該混合物，真空濃縮濾液，用Et2O(2×150ml)研制所得米色固體并干燥，得到白色、無定形固體狀化合物AG5(16.7g，96％ee)。
實施例1N-3-(4-哌啶丙?；?-3-哌啶甲?；?(3-氨基-3-苯基)丙酸·TFA(1)在氮氣下，將2-氯三苯甲基氯樹脂(0.24g，0.36mmol，新興生物化學企業(yè))和DMF(5ml)裝入25ml燒結的玻璃容器，在氮氣下，攪拌樹脂5分鐘，除去溶漲部分和DMF，順序用DMF(5ml)、DIEA(0.31ml，5當量)和3-(4-哌啶)丙酸烯丙酯·HCl(0.20g，2.4當量)處理樹脂并攪拌8小時，除去所得黑綠色溶液，用DMF(3×5ml)，含水DMF(25％，3×5ml)、THF(3×5ml)、DCM(3×5ml)和Et2O(5ml)洗滌樹脂，用DCE(5ml)溶漲樹脂，并用四丁基氟化銨水合物(0.28g，3當量)、疊氮基三甲基甲硅烷(0.38ml，10當量)、四(三苯基膦)鈀(0.084g，20mol％)和DCE(5ml)的混合物對其處理，攪拌該樹脂15小時并除去桔黃色溶液，用DCM(3×5ml)，DMF(3×5ml)、THF(3×5ml)和Et2O(5ml)洗滌樹脂，用DMF(5ml)溶漲樹脂，并用DIEA(0.18ml，3當量)、3-哌啶甲酸烯丙酯·HCl(0.17g，3當量)、DIC(0.17ml，3當量)和HOBT(1mg)對其處理，攪拌該樹脂15小時，然后除去反應溶液，用DMF(3×5ml)、含水DMF(25％，3×5ml)、THF(3×5ml)、DCE(3×5ml)和Et2O(5ml)洗滌樹脂，用DCE(5ml)溶漲樹脂，并用四丁基氟化銨水合物(0.28g，3當量)、疊氮基三甲基甲硅烷(0.38ml，10當量)、四(三苯基膦)鈀(0.084g，20mol％)和DCE(5ml)的混合物對其處理，攪拌該樹脂15小時并除去桔黃色溶液，用DCM(3×5ml)、DMF(3×5ml)、THF(3×5ml)和Et2O(5ml)洗滌樹脂，用DMF(5ml)溶漲樹脂，并用DIEA(0.18ml，3當量)、D，L-3-氨基-3-苯基丙酸甲酯·HCl(0.23g，3當量)、DIC(0.17ml，3當量)和HOBT(1mg)對其處理，攪拌該樹脂17小時，然后除去反應溶液，用DMF(3×5ml)、含水DMF(25％，3×5ml)、THF(3×5ml)、DCM(3×5ml)和Et2O(5ml)洗滌樹脂，用THF(5ml)溶漲樹脂，并用KOTMS溶液(0.23g，10當量)和THF(2ml)對其處理，攪拌該樹脂18小時，然后除去反應溶液，用DMF(3×5ml)、乙酸/THF(1∶1，兩次)、含水DMF(25％，3×5ml)、THF(3×5ml)、DCM(3×5ml)和Et2O(5ml)洗滌樹脂，用TFA/DCM(1∶1，10ml)處理樹脂15分鐘，收集得到的紅色溶液，蒸發(fā)該溶液，用Et2O(3×5ml)研制得到的油并干燥，得到透明玻璃狀化合物1(0.11g)
1H NMR(DMSO-d6)δ8.6(m，1H)，8.42(d，J＝7，1H)，8.2(m，1H)，7.3(m，3H)，7.2(m，2H)，5.18(d，J＝6，1H)，4.3(m，1H)，3.7(m，1H)，3.2(m，3H)，2.8(m，2H)，2.6(m，2H)，2.3(m，5H)，1.1-1.9(m，11H)；MS m/e 416(MH+).
用如實施例1所述的同樣常用固相合成技術，按照特定實施例中所述的路線AA，制備指定實施例的化合物。
實施例2N-(4-哌啶甲基氨基羰基)-3-哌啶甲?；?(3-氨基-2-甲基)丙酸·TFA(2)如路線AA所示方法制備化合物2。用DCE(5ml)溶漲樹脂結合的4-哌啶甲基胺(0.36mmol)，用氯甲酸對硝基苯酯(0.36mmol)和DIEA(0.36mmol)對其處理，將其攪拌1小時并除去溶劑，洗滌樹脂(參見實施例1)，用DCE(5ml)溶漲樹脂，用3-哌啶甲酸烯丙酯·HCl(0.36mmol)和DIEA(0.72mmol)對其處理，攪拌16小時，除去溶劑，洗滌樹脂(參見實施例1)，使烯丙酯裂解成相應的酸(參見實施例1)，用DMF(5ml)溶漲樹脂，使酸與3-氨基-2-甲基丙酸甲酯(0.36mmol)結合，并如實施例1所示方法完成合成，分離得到無色玻璃狀化合物21H NMR(CD3OD)δ3.9(m，2H)，3.2(m，4H)，3.10(d，J＝7，2H)，2.9(m，3H)，2.6(m，2H)，2.3(m，1H)，1.9(m，4H)，1.7-1.9(m，5H)，1.3-1.5(m，5H)，1.11(d，J＝7，3H)；MS m/e 355(MH+).
實施例3N-(4-哌啶甲基氧羰基)-3-哌啶甲?；?D-天門冬氨酸α-甲酯·TFA(3)如路線AA所示方法制備化合物3。用DCE(5ml)溶漲樹脂結合的4-哌啶甲醇(0.36mmol)，用氯甲酸對硝基苯酯(0.36mmol)和DIEA(0.36mmol)對其處理，將其攪拌1小時并除去溶劑，洗滌樹脂(參見實施例1)，用DCE(5ml)溶漲樹脂，用3-哌啶甲酸烯丙酯·HCl(0.36mmol)和DIEA(0.72mmol)對其處理，攪拌16小時，除去溶劑，洗滌樹脂(參見實施例1)，使烯丙酯裂解成相應的酸(參見實施例1)，用DMF(5ml)溶漲樹脂，使酸與H-D-天門冬氨酸(OBn)-OMe(0.36mmol)結合，并如實施例1所示方法完成合成，分離得到黃色玻璃狀化合物3
1H NMR(CD3OD)δ4.8(m，2H)，3.9(m，3H)，3.70(d，J＝9，4H)，3.39(s，3H)，3.3(m，2H)，2.9(m，4H)，2.8(m，2H)，1.9(m，4H)，1.7(m，2H)，1.4(m，4H)；MS m/e 400(MH+).
實施例4N-3-(4-哌啶丙酰基)-吡咯烷基-3-羧基-[3-氨基-3-(4-甲苯)]丙酸·TFA(4)如路線AA所示方法制備化合物3。用DCE(5ml)溶漲中間體AA2(0.36mmol)，用吡咯烷-3-羧酸甲酯·HCl(0.36mmol)、DIC(0.72mmol)和DIEA(0.72mmol)對其處理，將其攪拌16小時并除去溶劑，洗滌樹脂(參見實施例1)，用KOTMS使甲酯裂解成相應的酸(參見實施例1)，用DMF(5ml)溶漲樹脂，使酸與3-氨基-3-(4-甲苯)丙酸甲酯(0.36mmol)結合，然后如實施例1所示方法完成合成，分離得到透明玻璃狀化合物4(0.081g)1H NMR(CD3OD)δ7.19(d，J＝5，2H)，7.10(d，J＝5，2H)，5.31(dd，J＝3，10；1H)3.6(m，4H)，3.3(m，2H)，2.9(m，4H)，2.7(m，2H)，2.3(m，2H)，2.1(m，3H)，1.9(m，4H)，1.6(m，4H)，1.3(m，4H)；MS m/e 416(MH+).
實施例5N-3-(4-哌啶丙酰基)-4-哌啶甲?；?(3-氨基-3-甲基)丙酸·TFA(5)如路線AA所示方法制備化合物5。用DCE(5ml)溶漲中間體AA2(0.36mmol)，用4-哌啶甲酸乙酯(0.36mmol)、DIC(0.72mmol)和DIEA(0.72mmol)對其處理，將其攪拌16小時并除去溶劑，洗滌樹脂(參見實施例1)，用KOTMS使乙酯裂解成相應的酸(參見實施例1)，用DMF(5ml)溶漲樹脂，使酸與3-氨基-3-甲基丙酸甲酯(0.36mmol)結合，然后如實施例1所示方法完成合成，分離得到黃褐色玻璃狀化合物5(0.033g)1H NMR(CD3OD)δ4.5(m，1H)，4.2(m，1H)，3.9(m，1H)，3.3(m，2H)，3.3(m，3H)，3.1(m，1H)，2.9(m，3H)，2.7(m，2H)，2.4(m，2H)，2.0(m，2H)，1.7(m，2H)，1.5(m，6H)，1.3(m，2H)，1.15(d，J＝9，3H)；MS m/e 354(MH+).
實施例6N-3-(4-哌啶丙?；?-4-哌啶甲酰基-[3-氨基-3-(4-羧基苯基)]丙酸·TFA(6)如路線AA所示方法制備化合物6。用DCE(5ml)溶漲中間體AA2(0.36mmol)，用4-哌啶甲酸乙酯(0.36mmol)、DIC(0.72mmol)和DIEA(0.72mmol)對其處理，將其攪拌16小時并除去溶劑，洗滌樹脂(參見實施例1)，用KOTMS使乙酯裂解成相應的酸(參見實施例1)，用DMF(5ml)溶漲樹脂，使酸與3-氨基-3-(4-羧基甲基苯基)丙酸甲酯(0.36mmol)結合，然后如實施例1所示方法完成合成，分離得到黃褐色玻璃狀化合物6(0.034g)1H NMR(CD3OD)δ7.9(m，3H)，7.43(d，J＝5，2H)，5.4(m，1H)，4.5(m，1H)，4.0(m，1H)，3.3(m，4H)，3.1(m，1H)，2.9(m，2H)，2.7(m，2H)，2.7(m，1H)，2.5(m，4H)，2.0(m，2H)，1.2-1.9(m，10H)；MS m/e 460(MH+).
實施例7N-3-(4-N-甲基-哌啶丙酰基)-3-哌啶甲?；?3-氨基丙酸·TFA(7)如路線AD所示方法制備化合物7。用20％哌啶/DMF(10ml)處理樹脂結合的Fmoc-β-Ala(1mmol)，將其攪拌2小時并除去溶劑，用DMF洗滌樹脂，用DMF(10ml)使其溶漲并用Fmoc-3-哌啶甲酸(1mmol)、DIC(2mmol)和DIEA(1mmol)對其處理，將其攪拌16小時并除去溶劑，用DMF和DCM洗滌樹脂，用20％哌啶/DMF(10ml)處理樹脂2小時，除去溶劑，用DMF洗滌樹脂，用DMF(10ml)溶漲樹脂，用4-N-甲基哌啶丙酸(1mmol)、DIC(2mmol)和DIEA(1mmol)對其處理，將其攪拌16小時，除去溶劑，用Dmf和DCM洗滌樹脂，用95％TFA(10ml)使樹脂裂解，蒸發(fā)TFA，得到白色粉末狀化合物7(0.26g)mp 172-177℃；1H NMR(CDCl3)δ4.4(m，1H)，3.7(m，1H)，3.4(m，1H)，3.2(m，1H)，3.1(m，1H)，2.7(m，2H)，2.3(m，6H)，2.21(s，3H)，1.9(m，4H)，1.3-1.8(m，10H)；MSm/e 354(MH+).
實施例8N-3-(4-哌啶丙?；?-3-哌啶甲酰基-4-氧代-3-哌啶甲酸·TFA(8)如路線AA所示方法制備化合物8。用DCE(5ml)溶漲中間體AA2(0.36mmol)，用-3-哌啶甲酸乙酯(0.36mmol)、DIC(0.72mmol)和DIEA(0.72mmol)對其處理，將其攪拌16小時并除去溶劑，洗滌樹脂(參見實施例1)，用KOTMS使乙酯裂解成相應的酸(參見實施例1)，用DMF(5ml)溶漲樹脂，使酸與4-氧代-3-哌啶甲酸甲酯(0.36mmol)結合，然后如實施例1所示方法完成合成，分離得到透明玻璃狀化合物8(0.04g)1H NMR(DMSO-d6)δ8.5(m，1H)，8.2(m，1H)，6.5(m，1H)，4.3(m，1H)，3.4-3.8(m，4H)，3.2(m，2H)，3.0(m，1H)，2.8(m，2H)，2.2-2.6(m，6H)，1.8(m，2H)，1.1-1.7(m，11H)；MS m/e 394(MH+).
實施例9N-3-(4-哌啶丙?；?-3-哌啶甲?；?[3-氨基-3-(2-三甲基硅烷基乙炔基)]丙酸·TFA(9)如路線AA所示方法制備化合物9。用DCE(5ml)溶漲中間體AA2(0.36mmol)，用-3-哌啶甲酸乙酯(0.36mmol)、DIC(0.7mmol)和DIEA(0.72mmol)對其處理，將其攪拌16小時并除去溶劑，洗滌樹脂(參見實施例1)，用KOTMS使乙酯裂解成相應的酸(參見實施例1)，用DMF(5ml)溶漲樹脂，使酸與3-氨基-3-(2-三甲基硅烷基乙炔基)-3-哌啶甲酸甲酯(關于制備，參見J.Zablocki，J.Med.Chem，1995，38，2378；0.36mmol)結合，然后如實施例1所示方法完成合成，分離得到黃色玻璃狀化合物9(0.12g)1H NMR(CD3OD)δ3.8(m，1H)，3.2-3.4(m，4H)，2.9(m，3H)，2.7(m，2H)，2.3-2.5(m，2H)，1.9(m，4H)，1.1-1.9(m，13H)，0.0(s，9H)；MS m/e 436(MH+).
實施例10N-(6-氨基己酰基)-3-哌啶甲?；?3-氨基-3-(3-吡啶基)丙酸·3TFA(10)如路線AA所示方法制備化合物10。用DCE(5ml)溶漲樹脂結合的6-氨基己酸(0.36mmol)，用-3-哌啶甲酸乙酯(0.36mmol)、DIC(0.72mmol)和DIEA(0.72mmol)對其處理，將其攪拌16小時，除去溶劑，洗滌樹脂(參見實施例1)，用KOTMS使乙酯裂解成相應的酸(參見實施例1)，用DMF(5ml)溶漲樹脂，使酸與3-氨基-3-(3-吡啶基)丙酸甲酯(0.36mmol)結合，然后如實施例1所示方法完成合成，分離得到透明玻璃狀化合物10(0.008g)1H NMR(DMSO-d6)δ8.6(m，2H)，8.1(s，1H)，7.0-7.7(m，5H)，5.15(t，J＝3，1H)，4.4(m，1H)，4.1(m，1H)，3.7(m，2H)，3.1(m，1H)，2.7(m，4H)，2.5(m，1H)，2.3(m，2H)，1.2-1.9(m，11H)；MS m/e 391(MH+).Anal.calcd.for C20H30N4O4·3TFA·2H2O(768.60)C，40.63；H，4.85；N，7.29；F，22.25.FoundC，40.81；H，4.70；N，6.12；F，23.83.
實施例11N-3-(4-哌啶丙酰基)-R-(-)-3-哌啶甲?；?(3-氨基-2-羥基)丙酸·TFA(11)如路線AA所示方法制備化合物11。用DCE(5ml)溶漲中間體AA2(0.36mmol)，用R-3-哌啶甲酸乙酯(0.36mmol)、DIC(0.72mmol)和DIEA(0.72mmol)對其處理，將其攪拌16小時并除去溶劑，洗滌樹脂(參見實施例1)，用KOTMS使乙酯裂解成相應的酸(參見實施例1)，用DMF(5ml)溶漲樹脂，使酸與3-氨基-2-羥基丙酸甲酯(0.36mmol)結合，然后如實施例1所示方法完成合成，分離得到粉紅色玻璃狀化合物11(0.05g)1H NMR(DMSO-d6)δ8.5(m，1H)，8.2(m，1H)，7.6(m，1H)，4.0-4.4(m，2H)，3.7(m，1H)，3.2(m，3H)，2.8(m，3H)，2.6(m，1H)，2.1-2.3(m，3H)，1.8(m，4H)，1.0-1.4(m，10H)；MS m/e 356(MH+).
實施例12N-3-(4-哌啶乙基磺?；?-3-哌啶甲?；?3-氨基丙酸·HCl(12)如路線AE所示方法制備化合物12。通過下述方法合成中間體AE1，將2-(4-吡啶)乙磺酸(3.0g，0.016mol)溶解在含水HCl(2.0N，12ml)中，用二氧化鉑(0.13g)處理該溶液，并在50psi和RT下氫化18小時，使混合物通過硅藻土過濾并蒸發(fā)，得到2-(4-哌啶)乙磺酸·HCl(3.5g，白色粉末)，在RT下，將該粉末溶解在含水THF(1∶1，70ml)中，用NMM(3.7ml，2.2當量)和氯甲酸芐基酯(2.2ml，1當量)處理該粉末，攪拌該混合物15小時，用含水檸檬酸酸化，用CHCl3(2×100ml)萃取，用Na2SO4干燥有機層，并蒸發(fā)，得到2-(4-N-Z-哌啶)乙磺酸(2.75g，金黃色油)，以5步合成步驟(路線AE，W.J.Hoekstra，醫(yī)學化學雜志(J.Med.Chem.)，1995，38，1582)將該油轉化成最終產物12并純化為透明玻璃狀(0.060g)。
1H NMR(DMSO-d6)δ8.9(m，1H)，8.6(m，1H)，3.5(m，2H)，3.1-3.3(m，4H)，3.0(m，2H)，2.6-2.8(m，4H)，2.3(m，3H)，1.65-1.9(m，5H)，1.6(m，3H)，1.2-1.4(m，5H)；MS m/e 376(MH+).
實施例13N-3-(4-哌啶丙酰基)-3-哌啶甲?；?5H-(2-氨基乙基)四唑·HCl(13)如路線AC所示方法制備化合物13。將中間體AC1(如在W.J.Hoekstra，醫(yī)學化學雜志(J.Med.Chem.)，1995，38，1582中所制備，1.9mmol)溶解在DCM(50ml)中，用BOP-Cl(1.9mmol)、NMM(1.9mmol)和3-氨基丙腈(1.9mmol)對其處理，并攪拌18小時，用飽和NH4Cl溶液稀釋并使其分層，蒸發(fā)有機層，通過硅膠層析(10％EtOH/DCM)純化產物，得到油狀物，將其溶解在甲苯(10ml)中，將其用疊氮基三甲基甲硅烷(2.4mmol)和二丁基錫氧化物(1.2mmol)處理、回流加熱16小時，冷卻、用Et2O對其研制，得到棕色產物，在50psi下，于MeOH(12ml)中，用二氧化鉑(0.08g)氫化該固體15小時，過濾并蒸發(fā)，得到黃色泡沫狀混合物13(0.065g)。
1H NMR(DMSO-d6)δ8.9(m，1H)，8.6(m，1H)，8.13(d，J＝28，1H)，4.2(m，2H)，3.2(m，3H)，3.0(m，4H)，2.7(m，4H)，2.31(q，J＝8，2H)，1.7-1.9(m，3H)，1.4-1.6(m，5H)，1.1-1.3(m，4H)；MS m/e 364(MH+).
實施例14N-3-(4-N-甲基-哌嗪丙酰基)-3-哌啶甲?；?[3-氨基-3-(3，4-亞甲基二氧基苯基)]丙酸·Na(14)如路線AB所示方法制備化合物14。將3-哌啶甲酸乙酯(3mmol)溶解在DCM(50ml)中，用丙烯酰氯(3mmol)和NMM(3mmol)對其處理，并攪拌1小時，蒸除溶劑，將殘渣溶解在EtOH(50ml)中，并用N-甲基哌嗪(3mmol)處理，將該溶液在60℃下溫熱15小時，冷卻至室溫，蒸除溶劑，使殘渣在DCM(100ml)和水(10ml)之間分配，分層，干燥有機層并蒸發(fā)，得到泡沫狀物，將其溶解在水中，用NaOH(3mmol)處理，攪拌1小時，蒸發(fā)，得到AB3.Na，如(W.J.Hoekstra，醫(yī)學化學雜志(J.Med.Chem.)，1995，38，1582)所述，用3-氨基-3-(3，4-亞甲基二氧基苯基)丙酸甲酯(2.5mmol)完成合成，得到白色無定形固體狀化合物14(0.14g)。
1H NMR(D2O)δ6.8(m，3H)，5.91(s，2H)，5.0(m，1H).4.0(m，1H)，3.7(m，1H)，2.8-3.4(m，11H)，2.69(s，3H)，2.4-2.6(m，7H).1.9(m.1H)，1.7(m，2H)，1.5(m，1H)；MS m/e 475(MH+).Anal.calcd.for C24H33N4O6·Na-H2O(514.56)C，56.02；H，6.86；N，10.89.FoundC，55.72；H，6.78；N，10.52.
實施例15N-3-(4-N-甲基-哌嗪丙?；?-3-哌啶甲?；?[3-氨基-3-(3-喹啉基)]丙酸·3TFA(15)如實施例14所述制備化合物15。如(W.J.Hoeksta，醫(yī)學化學雜志(J.Med.Chem.)，1995，38，1582)所述，用3-氨基-3-(3-喹啉基)丙酸甲酯(6mmol)與AB3完成該合成，分離得到黃色粉末狀化合物15(1.89g)。
1H NMR(DMSO-d6)δ8.94(s，1H)，8.12(s，1H)，7.9(m，2H)，7.6(m，2H)，7.07(d，J＝4，1H)，5.2(m，1H)，4.1(m，1H)，3.7(m，1H)，3.1-3.3(m，2H)，2.9(m，2H)，2.6(m，2H)，2.43(s，3H)，1.9-2.4(m，12H)，1.2-1.5(m，4H)；MS m/e 482(MH+).
實施例16N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-3-氨基-3-(3，4-亞甲基二氧基苯基)]丙酸·HCl(16)向冷卻的(5℃)Boc-R-3-哌啶甲酸(9mmol)和(S)-3-氨基-3-(3，4-亞甲基二氧基苯基)]丙酸甲酯(參見AG5實施例；9mmol)的MeCN(100ml)溶液中加入HBTU(9mmol)、HOBT(9mmol)和NMM(18mmol)，攪拌該混合物15小時，將其用水(10ml)稀釋并蒸發(fā)，用EtOAc(100ml)稀釋殘渣，干燥有機層并蒸發(fā)，得到白色泡沫狀物，用HCl(2N，于二噁烷中，20ml)處理該泡沫，將其攪拌3小時，蒸發(fā)至泡沫狀，將該泡沫狀物溶解在MeCN(100ml)中，用Boc-哌啶丙酸(7mmol)、HBTU(7mmol)、HOBT(7mmol)和NMM(14mmol)對其處理，并攪拌6小時，用水(10ml)稀釋混合物并蒸發(fā)，用EtOAc(100ml)稀釋，將有機層干燥、蒸發(fā)并通過硅膠層析(7％EtOH/DCM)純化，得到泡沫狀物，向冰浴冷卻的泡沫狀物(4.6mol)的THF溶液中滴加LiOH.H2O(6.9mmol，溶于30ml水中)，攪拌混合物1.5小時，用AcOH(1.7ml)酸化并溫熱至室溫，用CHCl3(75ml)稀釋該溶液并使層分離，干燥有機層(Na2SO4)并蒸發(fā)至白色泡沫，將泡沫溶解在二噁烷(20ml)和苯甲醚(0.3ml)中，用冰浴冷卻、用HCl(4.0N，于二噁烷中，15ml)處理并攪拌3小時，得到沉淀物，過濾該沉淀物，用Et2O(150ml)和MeCN(20ml)洗滌，得到白色粉末狀的化合物16(1.78g)。
mp 190-1H NMR(DMSO-d6)δ8.9(m，1H)，8.6(m，1H)，8.4(m，1H)，6.83(d，J＝5，1H)，6.79(d，J＝5，1H)，6.7(m，1H)，5.95(s，2H)，5.08(dd，J＝5，11，1H)，4.1-4.3(m，1H)，3.7(m，1H)，3.15(d，J＝10，2H)，3.0(m，1H)，2.7(m，2H)，2.6(m，3H)，2.31(d，J＝7，2H)，1.81(d，J＝10，2H)，1.2-1.7(m，11H)；MSm/e 460(MH+)；[α]24D-0.478°(c 1.00，MeOH).
實施例17N-3-(4-哌啶丙?；?-六氫吖庚因-3-羧酸-[3-氨基-3-(3-喹啉基)]丙酸·2TFA(17)如路線AA所示方法制備化合物17。用DCE(5ml)溶漲中間體AA2(0.36mmol)，用六氫吖庚因-3-羧酸甲酯·HCl(0.36mmol)、DIC(0.72mmol)和DIEA(0.72mmol)對其處理，將其攪拌16小時并除去溶劑，洗滌樹脂(參見實施例1)，用KOTMS使甲酯裂解成相應的酸(參見實施例1)，用DMF(5ml)溶漲樹脂，使酸與3-氨基-3-(3-喹啉基)丙酸甲酯(0.36mmol)結合，然后如實施例1所示方法完成合成，分離得到玻璃狀化合物17(0.10g)1HNMR(D2O)δ9.06(s，1H)，8.9(m，1H)，8.2(m，1H)，8.04(s，1H)，8.0(t，J＝4，2H)，7.8(t，J＝4，2H)，5.5(m，1H)，3.8(m，1H)，3.3(m，4H)，3.0(m，2H)，2.7(m，4H)，2.0-2.4(m，6H)，1.7-1.9(m，4H)，1.1-1.6(m，8H)；MS m/e 481(MH+).
實施例18N-3-(4-哌啶丙酰基)-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-3-氨基-3-(3-喹啉基)]丙酸·2HCl(18)根據實施例16所述方法，以Boc-R-3-哌啶甲酸(7.1mmol)和(S)-3-氨基-3-(3-喹啉基)丙酸甲酯(參見實施例AG5；7.1mmol)為起始原料，制備化合物18，分離得到白色片狀化合物(1.11g)。
mp 142-144℃；MS m/e 467(MH+)；[α]24D-173°(c 0.1，MeOH).Anal.calcd.forC26H34N4O4·2.25 HCl·H2O(566.64)C，55.11；H，6.80；N，9.89；Cl，14.08.FoundC，54.85；H，6.62；N，10.04；Cl，13.68.
實施例19N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲酰基-[(S)-3-氨基-3-(2-叔丁基乙炔基)]丙酸·HCl(19)根據實施例16所述方法，由Boc-R-3-哌啶甲酸(3.2mmol)和(S)-3-氨基-3-(2-叔丁基乙炔基)丙酸甲酯(參見J.A.Zablocki，醫(yī)學化學雜志(J.Med.Chem.)，1995，38，2378；3.2mmol)為起始原料制備化合物19，分離得到白色粉末狀化合物(0.33g)。
MS m/e 420(MH+).Anal.calcd.for C23H37N3O4·1.07HCl·0.43H2O(468.97)C，59.21；H，8.42；N，8.96；Cl，8.09.FoundC，58.92；H，8.58；N，8.76；Cl，7.82.
實施例20N-3-(4-哌啶丙基)-3-哌啶甲?；?[(S)-3-氨基-3-(3，4-亞甲基二氧基苯基)]丙酸·2TFA(20)如路線AF所示方法制備化合物20。將中間體AF3(2.8mmol)溶解在苯(50ml)中，用3-哌啶甲酸乙酯(2.8mmol)處理，并回流加熱7小時，冷卻反應物，使其在水(15ml)和EtOAc(70ml)中分配，使其分層，干燥有機層并蒸發(fā)，得到AF4，如前所述(W.J.Hoekstra，醫(yī)學化學雜志(J.Med.Chem.)，1995，38，1582)，將AF4轉化成化合物20，分離得到白色粉末狀化合物20(0.33g)。
1H NMR(CD3OD)δ8.6-8.8(m，3H)，6.7-6.9(m，3H)5.91(s，2H)，5.1-5.2(m，1H)，3.3-3.5(m，4H)，2.8-3.1(m，6H)，2.6-2.7(m，3H)，1.5-2.0(m，11H)，1.2-1.4(m，4H)；MS m/e 446(MH+).
實施例21N-3-(4-哌啶丙酰基)-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-3-氨基-3-(3-吡啶基)]丙酸·2TFA(21)根據實施例16所述方法，以Boc-R-3-哌啶甲酸(6.4mmol)和(S)-3-氨基-3-(3-吡啶基)丙酸甲酯(參見實施例AG5；6.4mmol)為起始原料制備化合物21，分離得到白色無定形固體狀化合物(1.60g)。
mp 74-81℃；MS m/e 417(MH+).Anal.calcd.for C22H32N4O4·2.1C2HF3O2·0.7H2O(668.58)C，47.07；H，5.35；N，8.38；F，17.90；KF，1.89.FoundC，47.08；H，5.31；N，8.41；F，17.68；KF，2.00.
實施例22N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-2-(3-甲氧基苯胺基)羰基氨基-3-氨基]丙酸(22)將Boc-R-3-哌啶甲酰基-[(S)-2-Z-氨基-3-氨基]丙酸甲酯(如實施例16所示從N-α-Z-L二氨基丙酸甲酯和Boc-R-3-哌啶甲酸制備，9.5mmol)溶解在MeOH(40ml)中，并在50psi下，用氫氧化鉑(0.4g)氫化24小時，將混合物過濾并蒸發(fā)，得到白色固體AH2，將AH2(9.1mmol)溶解在DCM(100ml)中，冷卻(5℃)，用異氰酸(3-甲氧基苯基)酯(9.1mmol)和NMM(9.1mmol)對其處理，攪拌17小時，用飽和NH4Cl(10ml)稀釋溶液，使其分層，干燥有機層，蒸發(fā)至油狀物，用硅膠層析(4％EtOH/DCM)純化，得到AH3，如實施例16所述以4步將中間體AH3轉化成化合物22，得到白色無定形固體(1.35g)。
mp 72-76℃；1H NMR(DMSO-d6)δ8.7(m，3H)，7.8(m，1H)，7.1(m，2H)，6.8(d，1H)，6.5(d，2H)，3.66(s，3H)，3.4(m，2H)，3.2(d，2H)，2.7(dd，4H)，2.3(m，3H)，1.6(m，3H)，1.1-1.7(m，11H)；MS m/e 504(MH+).Anal.calcd.forC25H37N5O6·1.2HCl·1.0H2O(565.37)C，53.11；H，7.17；N，12.39；Cl，7.53.FoundC，53.40；H，7.44；N，12.14；Cl，7.66.
用如如實施例22所述的同樣常用合成技術，按照特定實施例所述的路線AH，制備實施例26、28-30中的化合物。對于氨基甲酸酯類似物，所用的酰化試劑是合適的氯甲酸烷基酯(類似于AH2向AH3的轉化；1摩爾當量)；對于磺酰胺類，所用的磺?；噭┦呛线m的磺酰氯(1摩爾當量)。
實施例23N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-2-芐氧基羰基氨基-3-氨基]丙酸·HCl(23)根據實施例16所述方法，以N-α-Z-L-二氨基丙酸甲酯(8.8mmol)和Boc-R-3-哌啶甲酸(8.8mmol)為起始原料制備化合物23，分離得到白色粉末狀化合物(1.65g)。
mp 110-113℃；MS m/e 489(MH+).Anal.calcd.for C25H36N4O6·1.15HCl·0.5H2O·0.5 Dioxane(583.57)C，55.56；H，7.41；N，9.60；Cl，6.99.FoundC，55.23；H，7.79；N，9.85；Cl，7.01.
實施例24N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲酰基-[(S)-2-(3-氯芐基氧基)羰基氨基-3-氨基]丙酸·HCl(24)如實施例22所述，通過使3-氯芐基氧基羰基氯(6.6mmol)與AH2(6.6mmol)反應制備、分離得到白色無定形固體狀化合物24(1.33g)。
mp 89-96℃；MS m/e 524(MH+).Anal.calcd.for C25H35ClN4O6·1.25 HCl·0.5 H2O·1.0 Dioxane(637.20)C，50.89；H，7.08；N，8.78；Cl，12.52.FoundC，51.10；H，6.71；N，8.38；Cl，12.20.
實施例25N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-2-芐基磺?；被?3-氨基]丙酸·HCl(25)如實施例22所述，通過使芐基磺酰氯(5.2mmol)與AH2(5.2mmol)反應制備、分離得到白色粉末狀化合物25(0.87g)。(0.87g)mp 145-149℃；MS m/e 509(MH+).Anal.calcd.for C24H36N4O6S·1.3HCl·0.3Dioxane(568.06)C，50.75；H，7.04；N，9.86；Cl，8.11.FoundC，51.03；H，6.93；N，9.46；Cl，7.85.
實施例26N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-2-(3，5-二甲氧基苯胺基)羰基氨基-3-氨基]丙酸·HCl(26)如實施例22所述，通過使異氰酸3，5-二甲氧基苯基酯(10.2mmol)與AH2(10.2mmol)反應制備、分離得到白色粉末狀化合物26(1.89g)。
mp 190-193℃；MS m/e 534(MH+).Anal.calcd.forC26H39N5O7·1.2HCl·0.2 Dioxane(585.40)C，53.35；H，7.20；N，11.96；Cl.7.27.FoundC，53.48；H，7.38；N，12.05；Cl，6.97.
實施例27N-[(4，4′-二哌啶-1-基)羰基]-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-3-氨基-3-(3-吡啶基)丙酸·3HCl(27)將如實施例16所述方法制備的中間體AJ1(5.5mmol)溶解在DCM(140ml)中，冷卻(5℃)，用氯甲酸對硝基苯酯(5.5mmol)和(16.5mmol)對其處理并攪拌2小時，混合物用水(15ml)稀釋，使其分層，干燥有機層并蒸發(fā)至油狀物，將該油溶于MeCN(70ml)中，用N-Boc-4，4′-二哌啶(7.5mmol)和DMAP(5.5mmol)對其處理，并加熱回流24小時。將混合物冷卻、蒸發(fā)至固體，使其在EtOAc(150ml)和NaOH(1N，20ml)中分配，分離各層，干燥有機層，蒸發(fā)至固體，通過硅膠層析(8％EtOH/DCM)純化，得到綠色玻璃狀AJ2(1.5mmol)，如實施例16所述將AJ2皂化和脫保護，得到淺黃色粉末狀化合物27(0.73g)。
mp121-125℃；MS m/e 472(MH+).Anal.calcd.for C25H37N5O4·3.6HCl·1.0Dioxane(690.98)C，50.41；H，7.09；N，10.14；Cl，18.47.FoundC，50.80；H7.31；N，10.20；Cl，18.78.
實施例28N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲酰基-[(S)-2-(2-萘基氨基)羰基氨基-3-氨基]丙酸·HCl(28)如實施例22所述，通過使異氰酸2-萘基酯(8.5mmol)與AH2(8.5mmol)反應制備、分離得到白色粉末狀化合物28(1.65g)。
mp187-193℃；MS m/e 524(MH+).Anal.calcd.for C28H37N5O5·1.36HCl·0.72Dioxane(602.07)C，55.86；H，7.39；N，11.63；Cl，8.01.FoundC，56.03；H，7.11；N，11.23；Cl，7.97.
實施例29N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲?；?氨基甲基-5-(S)-(3-N-芐基)咪唑啉-2，4二酮·HCl(29)如實施例22所述，從中間體AH2(4.4mmol)和異氰酸芐基酯(4.4mmol)制備N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-2-(2-芐基氨基)羰基氨基-3-氨基]丙酸鹽酸鹽(0.15g)，將其溶解在含水HCl(3N)中，并在室溫下攪拌18小時，真空中濃縮該溶液，得到白色固體，研制該固體，得到白色泡沫狀化合物29(0.144g)。
1H NMR(DMSO-d6)δ9.0(m，1H)，8.6(m，1H)，8.3(m，1H)，7.2(m，5H)，4.48(s，2H)，4.2(m，2H)，3.7(m，1H)，3.4(m，1H)，3.2(d，3H)，2.7(d，3H)，2.2(m，3H)，1.7(m，3H)，1.0-1.6(m，10H)；MS m/e 470(MH+).
實施例30N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲酰基-[(S)-2-(2-苯乙胺基)羰基氨基-3-氨基]丙酸·HCO2H(30)如實施例22所述，通過使異氰酸2-苯乙基酯(4.1mmol)與AH2(4.1mmol)反應制備、分離得到黃褐色泡沫狀化合物30(0.41g)。mp 65-72℃；MS m/e 502(MH+).Anal.calcd.forC26H39N5O5·1.2HCO2H·1.0H2O(574.87)C，56.83；H，7.61；N，12.18.FoundC，57.12；H，7.80；N，11.85.6-甲基-3-吡啶-甲醛(AK2)用標準條件以2步制備醛前體AK2，將AK1(0.066mol)溶解在THF(100ml)中，冷卻(-78℃)，用LiAlH4(0.066mol)對其處理，攪拌4小時，用飽和NH4Cl終止反應，將其溫熱、用CHCl3洗滌液(250ml)洗滌過濾，分離各層，干燥有機層并蒸發(fā)，得到澄清油(0.054mol)，將該油溶解在DCM(200ml)中，用MnO2(70g)處理，回流加熱6小時，冷卻該混合物，過濾，蒸發(fā)溶劑，得到棕色油狀AK2(0.052mol)。
實施例31N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-3-氨基-3-(6-甲基-3-吡啶基)]丙酸·2HCl(31)如實施例16所述，通過使Boc-R-3-哌啶甲酸(6.9mmol)與(S)-3-氨基-3-(6-甲基-3-吡啶)丙酸甲酯(參見實施例AG5；6.9mmol)反應制備化合物31，分離得到白色泡沫狀化合物31(1.20g)。
mp 99-105℃；MS m/e 431(MH+).Anal.calcd.for C23H34N4O4·2.24HCl·1.0H2O·0.24 Acetonitrile(534.33)C，51.70；H，7.35；N，11.11；Cl，14.82.FoundC，51.32；H，7.45；N，11.23；Cl，14.42.
實施例32N-3-(4-哌啶丙酰基)-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-3-氨基-3-(5-溴-3-吡啶基)]丙酸·2HCl(32)如實施例16所述，從Boc-R-3-哌啶甲酸(4.8mmol)和3-S-氨基-3-(5-溴-3-吡啶)丙酸甲酯(參見實施例AK5、AG5；4.8mmol)開始制備化合物32，分離得到白色泡沫狀化合物(1.24g)。
mp 98-101℃；MS m/e 496(MH+).Anal.calcd.forC22H31BrN4O4·2.2HCl·1.0H2O(593.67)C，44.51；H，5.98；N，9.44；Cl，13.14.FoundC，44.17；H，6.37；N，9.81；Cl，13.10.
實施例33N-3-(4-甲脒基哌啶丙酰基)-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-3-氨基-3-(3-吡啶基)]丙酸·2HCl(33)如路線AL所述，按照M.K.Scott(醫(yī)學化學雜志(J.Med.Chem.)，1983，26，534)的方法制備甲脒33，將中間體AL1(參見實施例21；2.3mmol)溶解在EtOH(20ml)中，用甲亞胺酸乙酯(ethyl formimidate)·HCl(3.7mmol)對其處理，攪拌22小時，過濾，用Et2O(40ml)處理濾液，用冰浴冷卻，過濾，得到玻璃狀AL2，將AL2溶解在含水HCl(4N，15g)中，攪拌28小時，蒸發(fā)，得到白色泡沫狀化合物33(0.75g)。
mp 49-55℃.1H NMR(DMSO-d6)δ9.35(s，1H)，9.1(m，2H)，8.8(m，2H)，8.70(d，1H)，8.5(m，1H)，7.8(m，2H)，5.2(dd，1H)，4.2(m，1H)，3.8(m，2H)，3.2(m，2H)，2.8(m，2H)，2.6(m，1H)，2.3(m，2H)，1.8(m，3H)，1.0-1.7(m，12H)；MS m/e 444(MH+).
權利要求
1.通式(I)表示的化合物或其對映體或其藥用鹽 其中M是(CH2)m或哌啶-1-基；A選自哌啶-2-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基、哌嗪-1-基、吡咯烷-2-基、吡咯烷-3-基、NHR2或 中的任何基團，其中，R9選自H、烷基、CH(NH)、CMe(NH)或?；械娜魏位鶊F；R10是H或C(O)N(R1)YZR1選自H或環(huán)烷基；R2選自H、烷基或酰基中的任何基團；R5是H或C(O)NHQ(CHW)rCO2R8；其中Q選自CH2、CH-芳基、CH-雜芳基、CH-取代的雜芳基或CH-烷基；W選自H或N(R6)T-R7，其中，R6選自H、烷基或?；械娜魏位鶊F；T選自C(O)、C(N-CN)或SO2，和R7選自烷基、芳基、芳烷基、烷氧基或氨基烷基中的任何一種；和R8選自H、烷基或芳烷基；m是整數1、2或3；X選自C(O)、C(O)O、C(O)NH、CH2或SO2中的任何一種；n是整數1、2或3；r是0或1；R1選自H或環(huán)烷基；Y選自(CH2)p、CH(R3)(CH2)q、(CH2)qCH(R3)、(CH(COR4)CH2)q、(CH2)qCHOH或哌啶-3-羧酸中的任何一種；條件是當Y選自(CH2)p和p是2時，X不是C(O)或當X是C(O)時，或者R1不是H、或者R2不是H，和條件是當Y是(CH(CO2R4)CH2)q時，X不是C(O)或CH2；p是2或3；q是1、2或3；R3是烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、芳基、芳烷基或雜芳基；R4是H或烷基或環(huán)烷基；Z是CO2H、CO2烷基、SO3H、PO3H2或5-四唑；條件是R5和R10中至少有一個是氫。
2.權利要求1的化合物，其中，R5是H，R10是H或C(O)N(R1)YZ，M是(CH2)m和A選自哌啶-2-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基、哌嗪-1-基、吡咯烷-2-基、吡咯烷-3-基或NHR2中的任何一種。
3.權利要求1的化合物，其中R5是H和R2是氫。
4.權利要求1的化合物，其中R5是H和m是1或2。
5.權利要求1的化合物，其中R5是H和X是C(O)。
6.權利要求1的化合物，其中R5是H和R1是氫。
7.權利要求1的化合物，其中R5是H和Y是4-氧代-3-哌啶甲酸。
8.權利要求1的化合物，其中R5是H和q是1。
9.權利要求1的化合物，其中R5是H和R3是芳基。
10.權利要求1的化合物，其中R5是H和R4是氫。
11.權利要求1的化合物，其中R5是H和Z是CO2H。
12.權利要求1的化合物，其中C(O)N(R1)YZ結合到中心氮雜環(huán)的3-或4-位上。
13.權利要求1的化合物，其中C(O)N(R1)YZ結合到中心氮雜環(huán)的3-位上。
14.權利要求1的化合物，選自下列中的任何一個N-3-(4-哌啶丙?；?-3-哌啶甲?；?(3-氨基-3-苯基)丙酸；N-(4-哌啶甲基氨基羰基)-3-哌啶甲酰基-(3-氨基-2-甲基)丙酸；N-(4-哌啶甲基氧羰基)-3-哌啶甲?；?D-天門冬氨酸α-甲酯；N-3-(4-哌啶丙?；?-吡咯烷基-3-羧基-[3-氨基-3-(4-甲苯)]丙酸；N-3-(4-哌啶丙?；?-4-哌啶甲酰基-(3-氨基-3-甲基)丙酸；N-3-(4-哌啶丙?；?-4-哌啶甲?；?[3-氨基-3-(4-羧基苯基)]丙酸；N-3-(4-N-甲基-哌啶丙?；?-3-哌啶甲?；?3-氨基丙酸；N-3-(4-哌啶丙?；?-3-哌啶甲?；?4-氧代-3-哌啶甲酸；N-3-(4-哌啶丙?；?-3-哌啶甲酰基-[3-氨基-3-(2-三甲基硅烷基乙炔基)]丙酸；N-(6-氨基己?；?-3-哌啶甲?；?3-氨基-3-(3-吡啶基)丙酸；N-3-(4-哌啶丙酰基)-R-(-)-3-哌啶甲?；?(3-氨基-2-羥基)丙酸；N-3-(4-哌啶乙基磺?；?-3-哌啶甲?；?3-氨基丙酸；N-3-(4-哌啶丙酰基)-3-哌啶甲?；?5H-(2-氨基乙基)四唑；N-3-(4-N-甲基-哌嗪丙?；?-3-哌啶甲酰基-[3-氨基-3-(3，4-亞甲基二氧基苯基)]丙酸；N-3-(4-N-甲基-哌嗪丙?；?-3-哌啶甲酰基-[3-氨基-3-(3-喹啉基)]丙酸；N-3-(4-哌啶丙酰基)-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-3-氨基-3-(3，4-亞甲基二氧基苯基)]丙酸；N-3-(4-哌啶丙酰基)-六氫吖庚因-3-羧基-[3-氨基-3-(3-喹啉基)]丙酸；N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲酰基-[(S)-3-氨基-3-(3-喹啉基)]丙酸；N-3-(4-哌啶丙酰基)-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-3-氨基-3-(2-叔丁基乙炔基)]丙酸；N-3-(4-哌啶丙基)-3-哌啶甲?；?[(S)-3-氨基-3-(3，4-亞甲基二氧基苯基)]丙酸；和N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-3-氨基-3-(3-吡啶基)]丙酸。
15.權利要求1的化合物，其中R10是H，R5是H或C(O)NHQ(CHW)rCO2R8，M是哌啶-1-基和A是
16.權利要求1的化合物，其中R10是H和X是C(O)。
17.權利要求1的化合物，其中R10是H和Q是(CH2)。
18.權利要求1的化合物，其中R10是H和W是N(R6)-T-R7。
19.權利要求1的化合物，其中R10是H和T是C(O)。
20.權利要求1的化合物，其中R10是H和R9是H。
21.權利要求1的化合物，其中R10是H和R6是氫。
22.權利要求1的化合物，其中R10是H和R7是NH(CH2)2Ph。
23.權利要求1的化合物，其中R10是H和R7是H。
24.權利要求1的化合物，其中n是2。
25.權利要求1的化合物，選自下列中的任何一個N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-2-(3-甲氧基苯胺基)羰基氨基-3-氨基]丙酸；N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-2-芐氧基羰基氨基-3-氨基]丙酸；N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-2-(3-氯芐基氧基)羰基氨基-3-氨基]丙酸；N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-2-芐基磺酰基氨基-3-氨基]丙酸；N-3-(4-哌啶丙酰基)-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-2(3，5-二甲氧基苯胺基)羰基氨基-3-氨基]丙酸；N-[(4，4′-二哌啶-1-基)羰基]-R-(-)-3-哌啶甲酰基-[(S)-3-氨基-3-(3-吡啶基)]丙酸；N-3-(4-哌啶丙酰基)-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-2-(2-萘基氨基)羰基氨基-3-氨基]丙酸；N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲?；?氨基甲基-5-(S)-(3-N-芐基)咪唑啉-2，4二酮·HCl；N-3-(4-哌啶丙酰基)-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-2-(2-苯乙胺基)羰基氨基-3-氨基]丙酸；N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-3-氨基-3-(6-甲基-3-吡啶基)]丙酸；N-3-(4-哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲?；?[(S)-3-氨基-3-(5-溴-3-吡啶基)]丙酸；和N-3-(4-甲脒基哌啶丙?；?-R-(-)-3-哌啶甲酰基-[(S)-3-氨基-3-(3-吡啶基)]丙酸。
26.治療血小板介導的血栓形成疾病的組合物，該組合物含有治療所述疾病有效量的權利要求1化合物和藥用載體。
27.治療血小板介導的血栓形成疾病的方法，包括將治療所述疾病有效量的權利要求1化合物施用于經受所述疾病痛苦的患者。
28.權利要求17的方法，其中所述量是0.1-300mg/kg/天。
29.制備式AG4化合物的方法 包括用青霉素酰胺酶處理式AG3化合物
30.權利要求19的方法，其中在用青霉素酰胺酶處理前，將AG3化合物放于水溶液中，將pH調節(jié)至大約7.5。
31.式AG4化合物
全文摘要
本發(fā)明公開了用于治療血小板介導的血栓形成疾病的式(Ⅰ)吡咯烷、哌啶和六氫吖庚因的甲酰胺衍生物。
文檔編號C07D241/00GK1286684SQ97194303
公開日2001年3月7日 申請日期1997年4月29日 優(yōu)先權日1996年5月1日
發(fā)明者M·J·科斯坦佐, W·J·赫克斯特拉, B·E·馬雅諾夫 申請人:奧索·麥克尼爾藥品公司