專利名稱：彈性蛋白酶的全氟烷基酮抑制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及作為彈性蛋白酶特別是人中性白細(xì)胞彈性蛋白酶抑制劑的化合物，它們用于各種生理上和最終的應(yīng)用，本發(fā)明還涉及制備所述抑制劑的方法。
人中性白細(xì)胞彈性蛋白酶被認(rèn)為是造成組織破壞的因素，所述組織破壞與各種炎癥如慢性細(xì)支氣管炎、囊纖維變性和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎有關(guān)，J.L.Malech和J.I.Gallin，Neu’Engl.J.Med.，317(11)，687(1987)。彈性蛋白酶對(duì)各種連接組織大分子包括彈性蛋白、纖連蛋白、膠原蛋白和蛋白聚糖具有廣泛的蛋白分解活性。酶促的彈性蛋白酶存在對(duì)這些疾病的病理產(chǎn)生作用。
正常血漿含有大量蛋白酶抑制劑，它控制包含在連接組織更新和炎癥中的各種酶。例如，α-1-蛋白酶抑制劑(α-1-PI)是一種阻滯彈性蛋白酶活性的絲氨酸蛋白酶抑制劑。α-1-PI得到極大的關(guān)注是因?yàn)樵谘獫{中的含量減少至少于正常量的15％與肺氣腫的早期形成有關(guān)。除了產(chǎn)生蛋白酶抑制劑的血漿外，分泌液包括支氣管、鼻、頸粘液和精液含有稱為分泌白細(xì)胞蛋白酶抑制劑(SLPI)的內(nèi)原性蛋白酶抑制劑，它能滅活彈性蛋白酶，并且被認(rèn)為在炎癥細(xì)胞蛋白酶存在下保持上皮的完整性中產(chǎn)生重要的作用。在某些病理狀態(tài)下α-1-PI和SLPI通過中性白細(xì)胞氧化機(jī)理滅活，從而使中性白細(xì)胞蛋白酶在基本無抑制劑的環(huán)境下產(chǎn)生作用。從患有成年人呼吸窘迫綜合征(ARDS)的患者的支氣管灌洗液中發(fā)現(xiàn)含有活性的彈性蛋白酶和被氧化滅活的α-1-PI。
除了氧化機(jī)理外，中性白細(xì)胞具有通過抗蛋白酶避免抑制的非氧化機(jī)理。從患有慢性肉芽腫病的患者得到的中性白細(xì)胞在過量的α-1-PI的存在下能夠降解內(nèi)皮細(xì)胞基質(zhì)。體外的大量證據(jù)表明被刺激的中性白細(xì)胞能與它們的底物緊密結(jié)合，從而血清抗蛋白酶被有效地排除在細(xì)胞-底物緊密接觸的微環(huán)境外。大量中性白細(xì)胞流入炎癥部位造成大量組織損害，這是由于在這個(gè)區(qū)域存在病理作用。
通過測(cè)定中性白細(xì)胞溶解產(chǎn)物、純化的彈性蛋白酶和刺激性的中性白細(xì)胞降解軟骨基質(zhì)蛋白多糖的能力，本申請(qǐng)人已經(jīng)確定彈性蛋白酶是一種主要的中性白細(xì)胞蛋白酶，它決定軟骨基質(zhì)蛋白多糖的降解。另外，以前本申請(qǐng)人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)肽衍生物用作彈性蛋白酶抑制劑具有有用的藥理活性。例如，在歐洲專利申請(qǐng)OPI No.0529568(發(fā)明人Peet等人，
公開日為1993年3月3日)中公開了用作彈性蛋白酶抑制劑的肽衍生物，其中端羧基已被全氟乙基羰基(-C(O)C2F5)基團(tuán)所代替，并且其中的N-端氨基酸被各種含有雜環(huán)的基團(tuán)如4-嗎啉羰基保護(hù)。因?yàn)橹苽淙榛驶牡男路椒?，本申?qǐng)人最近發(fā)現(xiàn)具有七氟丙基羰基和九氟丁基羰基部分的彈性蛋白酶抑制劑。
本發(fā)明涉及用作彈性蛋白酶抑制劑的具有下式I的化合物或其水合物、等排物或可藥用鹽，K-P4-P3-P2-NH-CH(R1)-C(＝O)-X′(I)(SEQ. ID NO.1)其中P4為Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal、Nle或一條鍵；P3為Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal、Nle或N-甲基衍生基團(tuán)，Pro、Ind、Tic或Tca，或在其ε氨基上有嗎啉代-B-基團(tuán)取代的Lys或在其β氨基上有嗎啉代-B-基團(tuán)取代的Orn；P2為Pro、Ind、Tic、Pip、Tca、Pro(4-OBzl)、Aze、Pro(4-OAc)或Pro(4-OH)；R1為Ala、Leu、Ile、Val、Nva或bVal的一條側(cè)鏈；X為-CF2CF2CF3或-CF2CF2CF2CF3；K為氫、甲?；?、乙?；㈢牾；?、苯甲酰基、叔丁氧羰基、芐氧羰基、甲苯磺?；?、丹?；?、異戊酰基、甲氧基琥珀?；?-金剛烷基磺?；?-金剛烷基乙?；?-羧基苯甲?；?、苯基乙酰基、叔丁基乙酰基、二(1-萘基)甲基)乙?；?、-C(＝O)N-(CH3)2， -A-Rz，其中A為 和Rz為含有6、10或12個(gè)碳原子的芳基，它可被1-3個(gè)獨(dú)立選自下列基團(tuán)的取代基合適地取代，所說取代基為氟、氯、溴、碘、三氟甲基、羥基、含有1-6個(gè)碳原子的烷基、含有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、羧基、其中烷基含有1-6個(gè)碳原子的烷基羰基氨基、5-四唑基以及含有1-15個(gè)碳原子的?；酋０被?，其條件是當(dāng)酰基磺酰氨基含有芳基時(shí)，芳基可進(jìn)一步被選自氟、氯、溴、碘和硝基的基團(tuán)取代；或 其中Z為N或CH，以及B為下式基團(tuán) 或 (波浪線 連接在分子的其他位置，即不與Z連接)并且其中的R’是氫或C1-6烷基。
式I化合物具有消炎作用，可用于治療痛風(fēng)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和其他炎癥疾病如成年人呼吸窘迫綜合征、敗血癥、散播的血管內(nèi)的凝固、囊纖維變性、慢性細(xì)支氣管炎、慢性阻塞性肺病、腸炎疾病(特別是潰瘍性結(jié)腸炎或節(jié)腸性回腸炎)以及用于治療肺氣腫。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案提供了制備下式化合物的新方法K＇-P4-P3-P2-NH-CH(R1)-C(＝O)-X (II) (SEQ.ID NO.2)其中P4為Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal、Nle或一條鍵；P3為Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal、Nle或N-甲基衍生基團(tuán)，Pro、Ind、Tic或Tca，或在其ε氨基上有嗎啉代-B-基團(tuán)取代的Lys或在其β氨基上有嗎啉代-B-基團(tuán)取代的Orn；P2為Pro、Ind、Tic、Pip、Tca、Pro(4-OBzl)、Aze、Pro(4-OAc)或Pro(4-OH)；R1為Ala、Leu、Ile、Val、Nva或bVal的一條側(cè)鏈；X 為-CF2CF3、-CF2CF2CF3或-CF2CF2CF2CF3；K’為氫、甲酰基、乙?；㈢牾；?、苯甲?；?、叔丁氧羰基、芐氧羰基、甲苯磺?；⒌；?、異戊?；⒓籽趸牾；?-金剛烷基磺?；?、1-金剛烷基乙?；?、2-羧基苯甲?；?、苯基乙酰基、叔丁基乙酰基、二((1-萘基)甲基)乙?；?C(＝O)N-(CH3)2， -A-Rz，其中A為 或 Rz為含有6、10或12個(gè)碳原子的芳基，它可被1-3個(gè)獨(dú)立選自下列基團(tuán)的取代基合適地取代，所說取代基為氟、氯、溴、碘、三氟甲基、羥基、含有1-6個(gè)碳原子的烷基、含有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、羧基、其中烷基含有1-6個(gè)碳原子的烷基羰基氨基、5-四唑基以及含有1-15個(gè)碳原子的?；酋０被?，其條件是當(dāng)?；酋０被蟹蓟鶗r(shí)，芳基可進(jìn)一步被選自氟、氯、溴、碘和硝基的基團(tuán)取代；該方法包括(a)在合適的偶合劑和合適的偶合溶劑存在下使式NH2CH(R1)C(＝O)OR2(其中R2為(C1-6)烷基或(C3-12)環(huán)烷基)的氨基酸酯與式K‘-P4-P3-P2-OH的合適N-保護(hù)的肽偶合得到合適的N-保護(hù)的肽酯；(b)在合適的堿金屬堿和合適的無水溶劑存在下使合適N-保護(hù)的肽酯與合適的全氟化劑反應(yīng)。
本發(fā)明進(jìn)一步提供了制備下式化合物的新方法K＂-P4-P3-P2-NH-CH(R1)-C(＝O)-X(III)(SEQ.ID NO.3)其中P4為Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal、Nle或一條鍵；P3為Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal、Nle或N-甲基衍生基團(tuán)，Pro、Ind、Tic或Tca，或在其ε氨基上有嗎啉代-B-基團(tuán)取代的Lys或在其β氨基上有嗎啉代-B-基團(tuán)取代的Orn；P2為Pro、Ind、Tic、Pip、Tca、Pro(4-OBzl)、Aze、Pro(4-OAc)或Pro(4-OH)；R1為Ala、Leu、Ile、Val、Nva或bVal的一條側(cè)鏈；X為-CF2CF3、-CF2CF2CF3或-CF2CF2CF2CF3；K”為或 其中Z為N或CH，以及B為下式基團(tuán) ·或 以及其中R’為氫或C1-6烷基；該方法包括(a)在合適的偶合劑和合適的偶合溶劑存在下使式NH2CH(R1)C(＝O)OR2(其中R2為(C1-6)烷基或(C3-12)環(huán)烷基)氨基酸酯與式K‘-P4-P3-P2-OH的合適N-保護(hù)的肽偶合得到合適的N-保護(hù)的肽酯；(b)在合適的堿金屬堿和合適的無水溶劑存在下使合適N-保護(hù)的肽酯與合適的全氟化試劑反應(yīng)得到合適N-保護(hù)的全氟烷基肽；(c)在合適的有機(jī)溶劑存在下用合適的脫保護(hù)劑使合適的N-保護(hù)的全氟烷基肽脫保護(hù)得到全氟烷基肽；(d)在合適的非親核堿和合適的有機(jī)溶劑存在下，使全氟烷基肽與下式化合物反應(yīng)， 其中B和Z定義如上。
本發(fā)明進(jìn)一步提供了制備式(II)化合物的新方法，包括下列步驟(a)在合適的堿金屬堿和合適的無水溶劑存在下使式Pg-NH-CH(R1)C(＝O)OR2(其中R2為(C1-6)烷基或(C3-12)環(huán)烷基和Pg為合適的保護(hù)基)的合適保護(hù)的氨基酸酯與合適的全氟化劑反應(yīng)得到合適的N-保護(hù)的全氟烷基酮；(b)在合適的有機(jī)溶劑存在下用合適的脫保護(hù)劑使合適的N-保護(hù)的全氟烷基酮脫保護(hù)得到全氟烷基酮；(c)在合適偶合劑和合適的偶合溶劑存在下使全氟烷基酮與式K‘-P4-P3-P2-OH的合適保護(hù)的肽偶合。
本發(fā)明進(jìn)一步提供了制備式(III)化合物的新方法，包括下列步驟(a)在合適的堿金屬堿和合適的無水溶劑存在下使式Pg-NH-CH(R1)C(＝O)OR2(其中R2為(C1-6)烷基或(C3-12)環(huán)烷基和Pg為合適的保護(hù)基)的合適保護(hù)的氨基酸酯與合適的全氟化劑得到合適的N-保護(hù)的全氟烷基酮；(b)在合適的有機(jī)溶劑存在下用合適的脫保護(hù)劑使合適的N-保護(hù)的全氟烷基酮脫保護(hù)得到全氟烷基酮；(c)在合適偶合劑和合適的偶合溶劑存在下使全氟烷基酮與式K‘ -P4-P3-P2-OH的合適保護(hù)的肽偶合。
本發(fā)明進(jìn)一步提供了具有新的下式(IV)化合物或其水合物、等排物或可藥用鹽，其中 其中P1為Ala、Val、NVa、bVal、Leu、Ile或Nle；P2為Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal、Met、Nle、Gly、Phe、Tyr、Trp、或Nal(l)其中α-氨基基團(tuán)的氮原子可被R基團(tuán)取代，其中的R為(C1-6)烷基，(C3-12)環(huán)烷基、(C3-12)環(huán)烷基(C1-6)烷基，(C4-11)雙環(huán)烷基，(C4-11)雙環(huán)烷基(C1-6)烷基，(C6-10)芳基，(C6-10)芳基(C1-6)烷基，(C3-7)雜環(huán)基，(C3-7)雜環(huán)基(C1-6)烷基，(C5-9)雜芳基、(C5-9)雜芳基(C1-6)烷基，稠合的(C6-10)芳基(C3-12)環(huán)烷基，稠合的(C6-10)芳基(C3-12)環(huán)烷基(C1-6)烷基，稠合的(C5-9)雜芳基(C3-12)環(huán)烷基或稠合的(C5-9)雜芳基(C3-12)環(huán)烷基(C1-6)烷基，或P2為Pro、Ind、Tic或Tca；P3為Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal或Nle；P4為Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal、Nle或一條鍵。
式(I)-(II)化合物的等排物包括其中(a)P2-P4取代基的一個(gè)或多個(gè)α-氨基殘基處于其非天然構(gòu)形(當(dāng)存在天然構(gòu)形時(shí))或(b)當(dāng)正常的肽酰胺鍵[-C(＝O)NH-]被改變形成-CH2NH-(還原)、-COCH2-(酮)、-CH(OH)CH2-(羥基)、-(CH(NH2)CH2-(氨基)、-CH2CH2-(烴)、-CH＝CH-(鏈烯基)的化合物。本發(fā)明化合物優(yōu)選不是等排物形式；特別優(yōu)選的是不存在修飾過的肽酰胺基團(tuán)，但如果存在的話，優(yōu)選使等排改變至最少。
本文所用術(shù)語“(C1-6)烷基”是指1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、正戊基、仲戊基、異戊基和正己基。術(shù)語“(C3-12)環(huán)烷基”是指由3-8元環(huán)組成的環(huán)烷基，它可被低級(jí)烷基取代，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、4-甲基環(huán)己基、4-乙基環(huán)己基、環(huán)庚基和環(huán)辛基。術(shù)語“(C3-12)環(huán)烷基(C1-6)烷基”是指被(C3-12)環(huán)烷基取代的(C1-6)烷基，例如環(huán)己基甲基或環(huán)戊基乙基。術(shù)語“(C4-11)雙環(huán)烷基”是指含有一對(duì)橋碳原子的烷基，例如2-二環(huán)并[1.1.0]丁基，2-二環(huán)并[2.2.1]己基和1-二環(huán)并[2.2.2]辛烷。術(shù)語“(C4-11)雙環(huán)烷基(C1-6)烷基”是指被(C4-11)雙環(huán)烷基取代的(C1-6)烷基，例如2-雙環(huán)己基甲基。術(shù)語“(C6-10)芳基”是指共軛的碳原子的環(huán)狀、芳香性的組合，例如苯基、1-萘基和2-萘基。術(shù)語“(C6-10)芳基(C1-6)烷基，”是指被(C6-10)芳基取代的(C1-6)烷基，例如芐基、苯乙基和1-萘基甲基。術(shù)語“(C3-7)雜環(huán)烷基”是指含有1-3個(gè)選自氧、氮和硫的雜原子的非芳香的含碳環(huán)，例如嗎啉基和吡啶基。術(shù)語“(C3-7)雜環(huán)烷基(C1-6)烷基”是指被(C3-7)雜環(huán)烷基取代的(C1-6)烷基，例如嗎啉代甲基。術(shù)語“(C5-9)雜芳基”是指共軛的碳原子和1-3個(gè)氮、氧和硫原子的環(huán)狀和雙環(huán)的芳香的組合，例如吡啶基、2-喹喔啉基和喹啉基。術(shù)語“(C5-9)雜芳基(C1-6)烷基”是指被(C5-9)雜芳基取代的(C1-6)烷基，例如3-喹啉基甲基。術(shù)語“稠合的(C6-10)芳基(C3-12)環(huán)烷基”是指與“(C6-10)芳基”共享一條或多條邊的“(C3-12)環(huán)烷基”，例如包括苯和環(huán)戊基稠合生成的基團(tuán)，即2-(2，3-二氫化)茚基。術(shù)語“稠合的(C6-10)雜基(C3-12)環(huán)烷基(C1-6)烷基”是指被稠合的(C6-10)雜基(C3-12)環(huán)烷基取代的(C1-6)烷基。術(shù)語“稠合的(C5-9)雜芳基(C3-8)環(huán)烷基”是指被與“(C3-8)環(huán)烷基”共享一條或多條邊的(C5-9)雜芳基，例如包括環(huán)己基和吡啶稠合生成的基團(tuán)，即四氫喹啉。最后，術(shù)語“稠合的(C5-9)雜芳基(C3-8)環(huán)烷基(C1-6)烷基”是指被稠合的(C5-9)雜芳基(C3-12)環(huán)烷基取代的(C1-6)烷基。
式(I)-(IV)化合物可與任何無毒的、有機(jī)或無機(jī)酸形成可藥用鹽。形成合適的鹽的典型的無機(jī)酸包括鹽酸鹽、氫溴酸、硫酸和磷酸以及酸金屬鹽如正磷酸一氫酸鈉和硫酸氫鉀。形成合適的鹽的典型的有機(jī)酸包括一、二和三羧酸。這些酸的實(shí)例為乙酸、乙醇酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、馬來酸、羥基馬來酸、苯甲酸、羥基苯甲酸、苯基乙酸、肉桂酸、水楊酸、2-苯氧基苯甲酸和磺酸如甲磺酸和2-羥基乙烷硫酸。
每個(gè)α-氨基酸具有特征“R-基團(tuán)”，R基團(tuán)為與α-氨基酸的α-碳原子連接的側(cè)鏈或殘基。例如，甘氨酸的R-基團(tuán)側(cè)鏈為氫，丙氨酸的R-基團(tuán)側(cè)鏈為甲基，纈氨酸的R-基團(tuán)側(cè)鏈為異丙基。(因此，在本說明書中對(duì)于每個(gè)指定的α-氨基酸來說R1部分為R基團(tuán))，對(duì)于α-氨基酸的具體的R-基團(tuán)或側(cè)鏈可參考A.L.Lehninger的生物化學(xué)教科書(具體參見第四章)。
除了甘氨酸外，天然的氨基酸含有手性碳原子。除非另有具體說明，優(yōu)選的化合物為L構(gòu)形的旋光氨基酸；然而，本申請(qǐng)人預(yù)期式(I)-(IV)化合物的氨基酸既可以是D-或L-構(gòu)形也可以是D-和L-異構(gòu)體的混合物，包括外消旋混合物。α-氨基酸的公認(rèn)的縮寫列于表I中。
另外，用結(jié)構(gòu)和名稱說明的α-氨基酸的公認(rèn)的縮寫如下所示 Tic1，2，3，4-四氫-3-異喹啉甲酸 Tca噻唑烷-4-甲酸 Aze氮雜環(huán)丁烷甲酸 Pip2-哌啶酸 Pro(4-OH)4-羥基脯氨酸 Pro(4-OAc)4-乙酰氧基脯氨酸 4-芐氧基脯氨酸關(guān)于具有特定的一般用途的任何一組結(jié)構(gòu)上相關(guān)的化合物，優(yōu)選某些小組和構(gòu)形。優(yōu)選的式(I)化合物包括下列各組關(guān)于取代基P4，優(yōu)選其中P4為Ala或一條鍵的式(I)化合物。特別優(yōu)選其中P4為一條鍵的式(I)化合物。
關(guān)于取代基P3，優(yōu)選其中P3為Ile、Val或Ala的式(I)化合物。特別優(yōu)選其中P3為Val的式(I)化合物。
關(guān)于取代基P2，優(yōu)選其中P2為Pro、Tic、Pip、Tca、Pro(4-OBzl)、Aze、Pro(4-OAc)或Pro(4-OH)的式(I)化合物。特別優(yōu)選其中P2為Pro的式(I)化合物。
關(guān)于取代基R1，優(yōu)選其中R1為-CH(CH3)2或-CH2CH2CH3，即分別為氨基酸Val和Nva的特征“R-基團(tuán)”的化合物。特別優(yōu)選其中R1為-CH(CH3)2的式(I)化合物。
關(guān)于取代基K，優(yōu)選如下定義的式(I)化合物其中K為苯甲?；?、叔丁氧羰基、芐氧羰基、異戊?；?、-C(＝O)N(CH3)2， 或 其中Z為N和B為下式基團(tuán) 或 并且其中R’為氫或(C1-6)烷基。
特別優(yōu)選如下定義的化合物，其中K為 其中Z為N和B為下式基團(tuán) 或 并且其中R’為氫或C1-6烷基。
優(yōu)選的式(I)化合物的具體實(shí)例包括N-[4-(4-嗎啉基羰基)苯甲酰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-L-脯酰胺；N-[4-(4-嗎啉基羰基)苯甲酰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，6、6、6-九氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代己基]-L-脯酰胺；N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨酰基-N’-[3，3，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-L-脯酰胺；N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，6，6，6-九氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代己基]-L-脯酰胺；N-[4-(4-嗎啉基羰基)苯甲?；鵠-L-纈氨酰基-N’-[3，3，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-L-2-氮雜環(huán)丁烷酰胺；N-[4-(4-嗎啉基羰基)苯甲?；鵠-L-纈氨酰基-N’-[3，3，4，4，5，5，6、6、6-九氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代己基]-L-2-氮雜環(huán)丁烷酰胺；N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨酰基-N’-[3，3，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-L--2-氮雜環(huán)丁烷酰胺；N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，5，6，6，6-九氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代己基]-L-2-氮雜環(huán)丁烷酰胺；N-[4-(4-嗎啉基羰基)苯甲?；鵠-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-D，L-2-甲基哌啶酰胺；N-[4-(4-嗎啉基羰基)苯甲酰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，6、6、6-九氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代己基]-D，L-2-甲基哌啶酰胺；N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨酰基-N’-[3，3，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-D，L-2-甲基哌啶酰胺；N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，6，6，6-九氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代己基]-D，L-2-甲基哌啶酰胺；N-[4-(4-嗎啉基羰基)苯甲酰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-D，L-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉酰胺；N-[4-(4-嗎啉基羰基)苯甲酰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，6、6、6-九氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代己基]-D，L-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉酰胺；N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-D，L-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉酰胺；N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，6，6，6-九氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-D，L-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉酰胺；N-[4-(4-嗎啉基羰基)苯甲酰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-L-噻唑烷-4-羧酸；N-[4-(4-嗎啉基羰基)苯甲?；鵠-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，6、6、6-九氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代己基]-L-噻唑烷-4-羧酸；N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-L-噻唑烷-4-羧酸；N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，6，6，6-九氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代己基]-L-噻唑烷-4-羧酸；優(yōu)選的式(II)化合物包括下列各組關(guān)于取代基P4，優(yōu)選其中P4為Ala或一條鍵的式(II)化合物。特別優(yōu)選其中P4為一條鍵的式(II)化合物。
關(guān)于取代基P3，優(yōu)選其中P3為Ile、Val或Ala的式(II)化合物。特別優(yōu)選其中P3為Val的式(II)化合物。
關(guān)于取代基P2，優(yōu)選其中P2為Pro、Tic、Pip、Tca、Pro(4-Obzl)、Aze、Pro(4-OAc)或Pro(4-OH)的式(II)化合物。特別優(yōu)選其中P2為Pro的式(II)化合物。
關(guān)于取代基R1，優(yōu)選其中R1為-CH(CH3)2或-CH2CH2CH3，即分別為氨基酸Val和Nva的特征“R-基團(tuán)”的化合物。特別優(yōu)選其中R1為-CH(CH3)2的式(II)化合物。
關(guān)于取代基K’，優(yōu)選如下定義的式(II)化合物其中K’為苯甲?；⑹宥⊙豸驶?、芐氧羰基、異戊?；?、-C(＝O)N(CH3)2， 或 優(yōu)選的式(II)化合物的具體實(shí)例包括N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，4-五氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代丁基]-L-脯酰胺；N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-L-脯酰胺；N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，6，6，6-九氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代己基]-L-脯酰胺；優(yōu)選的式(III)化合物包括下列各組關(guān)于取代基P4，優(yōu)選其中P4為Ala或一條鍵的式(III)化合物。特別優(yōu)選其中P4為一條鍵的式(III)化合物。
關(guān)于取代基P3，優(yōu)選其中P3為Ile、Val或Ala的式(III)化合物。特別優(yōu)選其中P3為Val的式(III)化合物。
關(guān)于取代基P2，優(yōu)選其中P2為Pro、Tic、Pip、Tca、Pro(4-Obzl)、Aze、Pro(4-OAc)或Pro(4-OH)的式(III)化合物。特別優(yōu)選其中P2為Pro的式(III)化合物。
關(guān)于取代基R1，優(yōu)選其中R1為-CH(CH3)2或-CH2CH2CH3，即分別為氨基酸Val和Nva的特征“R-基團(tuán)”的化合物。特別優(yōu)選其中R1為-CH(CH3)2的式(III)化合物。
關(guān)于取代基K”，特別優(yōu)選如下定義的式(III)化合物，其中K”為 其中Z為N和B為下式基團(tuán) 或 并且其中R’為氫或C1-6烷基。
優(yōu)選的式(III)化合物的具體實(shí)例包括N-[4-(4-嗎啉基羰基)苯甲?；鵠-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，4-五氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代丁基]-L-脯酰胺；N-[4-(4-嗎啉基羰基)苯甲?；鵠-L-纈氨酰基-N’-[3，3，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-L-脯酰胺；N-[4-(4-嗎啉基羰基)苯甲?；鵠-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，6，6，6-九氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代己基]-L-脯酰胺。
優(yōu)選的式(IV)化合物包括下列各組關(guān)于取代基P4，優(yōu)選其中P4為Ala或一條鍵的式(IV)化合物。特別優(yōu)選其中P4為一條鍵的式(IV)化合物。
關(guān)于取代基P3，優(yōu)選其中P3為Ile、Val或Ala的式(IV)化合物。特別優(yōu)選其中P3為Val的式(IV)化合物。
關(guān)于取代基P2，優(yōu)選其中P2為Pro、Ind、Tic或Tca的式(IV)化合物。特別優(yōu)選其中P2為Pro的式(IV)化合物。
關(guān)于取代基P1，特別優(yōu)選其中P1為Val和Nva的式(IV)化合物。
優(yōu)選的式(IV)化合物的具體實(shí)例包括N-[3-(3-吡啶基)丙?；鵠-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，4-五氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代丁基]-L-脯酰胺；N-[3-(3-吡啶基)丙酰基]-L-纈氨酰基-N’-[3，3，4，4，4-五氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代丁基]-D，L-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉酰胺；N-[3-(3-吡啶基)丙?；鵠-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，4-五氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代丁基]-L-噻唑烷-4-羧酸。
一般地，式(I)-(IV)化合物可用本領(lǐng)域公知的常規(guī)化學(xué)反應(yīng)和反應(yīng)路線A所述的方法制備。
反應(yīng)路線A
可將P2、P3和K-P4基團(tuán)與結(jié)構(gòu)式(1)的氨基酸衍生物的游離氨基連接，注意結(jié)構(gòu)式(1)表示P1部分，其中自由羧酸基團(tuán)已經(jīng)被上面定義的“X”部分取代?？捎霉碾呐己霞夹g(shù)使P2、P3和K-P4基團(tuán)與未保護(hù)的自由氨基化合物(P1-X)連接。另外，P1、P2、P3和K-P4基團(tuán)可按任意次序連接，只要最終化合物為K-P4-P3-P2-P1-X。例如，k-P4可與P3連接得到K-P4-P3，然后與P2-P1-X連接，或K-P4與P3-P2連接，然后與合適C-末端保護(hù)的P1連接，并將C-末端保護(hù)基轉(zhuǎn)化為X。
一般地，用所描述的方法，通過使α-胺的N-末端殘基脫保護(hù)，并且使下一個(gè)合適的N-保護(hù)的氨基酸與肽鏈偶合從而使肽鏈延長。重復(fù)這種脫保護(hù)和偶合步驟直至得到所需的序列。該偶合反應(yīng)可按反應(yīng)路線A所述的多步方法用組分氨基酸來進(jìn)行，或使片段(二種至幾種氨基酸)縮合，或用這二種方法的組合，或按照Merrfield，J.Am.Chem.Soc.，1963，85，2149-2154原來描述的方法，通過固相肽合成來進(jìn)行，上述文獻(xiàn)的內(nèi)容在此引入作為參考。當(dāng)使用固相合成方法時(shí)，C-末端羧酸與不溶的載體(通常為聚苯乙烯)連接。這些不溶載體含有能與醛基反應(yīng)形成一條鍵的基團(tuán)，所述的鍵對(duì)于鏈增長條件是穩(wěn)定的但以后容易裂解。不溶載體的實(shí)例為氯-或溴甲基樹脂，羥甲基樹脂和氨基甲基樹脂。已經(jīng)加入所需C-末端氨基酸的許多這樣的樹脂可從市場(chǎng)上購買。
另外，本發(fā)明化合物可用自動(dòng)肽合成裝置合成。除了上面所述之外，肽合成被描述在下列文獻(xiàn)中，Stewart and Young，＂Solid Phase PeptideSynthesis＂，2nd ed.，Pierce Chemical Co.，Rockford，IL(1984)；Gross，Meienhofer，Udenfriend，Eds.，＂The PeptidesAnalysis，Synthesis，Biology＂，Vol 1，2，3，5and9，Academic Press，New York，1980-1987；Bodanszky，＂PeptideChemistryA Practical Textbook＂，Springer-Verlag，New York(1988)；and Bodanszky，et al.＂The Practice of PeptideSynthesis＂Springer-Verlag，New York(1984)，這些文獻(xiàn)所公開的內(nèi)容在此引入作為參考。
二個(gè)氨基酸、一個(gè)氨基酸和一個(gè)肽或二個(gè)肽的片段的偶合可使用常規(guī)的偶合方法進(jìn)行，所說方法如疊氮化鈉方法，混合的碳酸-羧酸酐(氯甲酸異丁酯)方法，碳化二亞胺(二環(huán)己基碳化二亞胺，二異丙基碳化二亞胺或水溶性碳化二亞胺)方法，活化酯(對(duì)硝基苯基酯，N-羥基琥珀酰亞胺酯)方法，Woodward試劑K方法，羰基二咪唑方法，磷酰試劑如BOP-Cl或氧化-還原方法。一些這樣的方法(特別是碳化二亞胺方法)可通過加入1-羥基苯并三唑，N-羥基琥珀酰亞胺，二甲基氨基吡啶等來增強(qiáng)，這些偶合反應(yīng)可在溶液(液相)或固相中進(jìn)行。
在偶合反應(yīng)過程中一般將組分氨基酸的官能團(tuán)保護(hù)起來從而避免形成不需要的鍵?？墒褂玫谋Ｗo(hù)基列于Greene，“Protective Groups in OrganicChemistry”，John Wiley & Sons，New York(1981)和“ThePeptidesAnalysis，Synthesis，Biology”，Vol.3，Academic Press，NewYork(1981)，該文獻(xiàn)所公開的內(nèi)容在此引入作為參考。
C-末端殘基的α-羧基一般但不是必須被能夠裂解得到羧酸的酯保護(hù)?？墒褂玫谋Ｗo(hù)基包括1)烷基酯如甲基和叔丁基，2)芳基酯如芐基和取代的芐基，或3)通過弱堿處理或弱還原方法能夠裂解的酯如三氯乙基和苯酰基酯。
與增長肽鏈偶合的各氨基酸的α-氨基必須被保護(hù)，可以使用本領(lǐng)域已知的任何保護(hù)基。保護(hù)基的實(shí)例包括1)?；惾缂柞；阴；?，鄰苯二甲酰基，對(duì)甲苯磺酰基；2)芳香的氨基甲酸酯類如芐氧羰基(Cbz或Z)和取代的芐氧羰基，1-(對(duì)聯(lián)苯基)-1-甲基乙氧基羰基和9-芴基甲氧羰基(Fmoc)；3)脂族氨基甲酸酯類如叔丁氧羰基(Boc)，乙氧羰基、二異丙基甲氧羰基和烯丙氧羰基；4)環(huán)烷基氨基甲酸酯類如環(huán)戊氧羰基和金剛烷氧基羰基；5)烷基類如三苯基甲基和芐基；6)三烷基硅烷如三甲基硅烷；和7)含有硫醇的類型如苯基硫代羰基和二硫代琥珀?；?。優(yōu)選的α-氨基保護(hù)基為Boc或Fmoc，優(yōu)選Boc。用于肽合成的合適保護(hù)的許多氨基酸衍生物可以市購。
新加入的氨基酸殘基的α-氨基保護(hù)基在下一個(gè)氨基酸偶合之前裂解。當(dāng)使用Boc基團(tuán)時(shí)，所選擇的試劑是凈三氟乙酸或在二氯甲烷中的三氟乙酸，或在二惡烷乙醚中的HCl，或乙酸乙酯。然后在偶合之前或就地用堿性溶液如緩沖液或在二氯甲烷或二甲基甲酰胺中的叔胺中和所得的銨鹽。當(dāng)使用Fmoc時(shí)，所選擇的試劑為在二甲基甲酰胺中的哌啶或取代的哌啶，但也可使用任何仲胺或堿性水溶液。脫保護(hù)反應(yīng)可在0℃至室溫下進(jìn)行。
在制備肽過程中可使用任何上述基團(tuán)保護(hù)帶有側(cè)鏈官能團(tuán)的任何氨基酸。本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到選擇和使用用于這些側(cè)鏈官能團(tuán)的合適保護(hù)基將取決于氨基酸和在肽中存在的其他保護(hù)基。這些保護(hù)基的選擇的重要性在于在α-氨基的脫保護(hù)和偶合的過程中不必除去。
例如，當(dāng)使用Boc為α-氨基保護(hù)基，下列側(cè)鏈保護(hù)基是合適的對(duì)甲苯磺?；捎糜诒Ｗo(hù)氨基酸如Lys和Arg的氨基側(cè)鏈；對(duì)甲基芐基、乙酰氨基甲基，芐基(Bzl)或叔丁基磺?；捎糜诒Ｗo(hù)含硫的氨基酸如半胱氨酸的側(cè)鏈，和芐基(Bzl)可用于保護(hù)含有羥基的氨基酸如Ser或Thr的側(cè)鏈。
在Fmoc被選擇用于α-胺保護(hù)，通常叔丁基保護(hù)基是合適的，例如Boc可用于賴氨酸，叔丁基醚可用于絲氨酸和蘇氨酸，叔丁基酯用于谷氨酸。
一旦肽的增長完成后，則除去所有的保護(hù)基。當(dāng)使用液相合成時(shí)，用通過選擇保護(hù)基所規(guī)定的方法除去保護(hù)基。這些方法對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是公知的。
當(dāng)使用固相合成時(shí)，從樹脂中分裂肽，通常同時(shí)除去保護(hù)基。當(dāng)在合成中使用Boc保護(hù)的反應(yīng)路線時(shí)，用含有添加劑如二甲亞砜、苯甲醚、硫代苯甲醚或?qū)妆椒拥臒o水的HF在0℃下處理是優(yōu)選的從樹脂上裂解肽的方法。肽的裂解也可用其他酸試劑如三氟甲基磺酸/三氟乙酸混合物來完成。如果使用Fmoc保護(hù)反應(yīng)路線，則可用上述試劑裂解N-末端Fmoc基團(tuán)。使用三氟乙酸和各種添加劑如苯甲醚等的溶液從樹脂中裂解其他的保護(hù)基和肽。
另外，式(I)-(IV)化合物可用本領(lǐng)域公知的常規(guī)化學(xué)反應(yīng)和反應(yīng)路線B所述的方法制備。
反應(yīng)路線B 反應(yīng)路線B提供了制備式(I)-(IV)化合物的另外的一般的合成反應(yīng)路線。
如前面在反應(yīng)路線A中所述，可使P2，P3和K-P4基團(tuán)與結(jié)構(gòu)式(2)的氨基醇衍生物的自由氨基連接，得到式(3)的肽醇。
然后用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知和理解的技術(shù)和方法氧化結(jié)構(gòu)式(3)肽醇的醇官能團(tuán)，例如用草酰氯或三氟乙酸酐和二甲亞砜進(jìn)行Swern氧化，得到式I化合物。
對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說，用于反應(yīng)路線A和B的起始原料容易得到。例如，氨基酸P2、P3和K-P4(其中K為氫)可市購，連接體結(jié)構(gòu)式(L1)化合物被描述在J.Am.Chem.Soc.，114，3157-59(1992)中。另外，在歐洲專利申請(qǐng)公開號(hào)0363284(1990年4月11日)描述了取代的氨基酸K-P4其中K為乙?；㈢牾；?、苯甲?；⑹宥⊙豸驶?、芐氧羰基、甲苯磺酰基、丹?；愇祯；?、甲氧基琥珀?；?-金剛烷基磺?；?、1-金剛烷基乙酰基、2-羧基苯甲酰基、苯基乙酰基、叔丁基乙酰基、二((1-萘基)甲基)乙酰基或-A-Rz其中A為 Rz為含有6、10或12個(gè)碳原子的芳基，它可被1-3個(gè)獨(dú)立選自下列基團(tuán)合適地取代，所說基團(tuán)為氟、氯、溴、碘、三氟甲基、羥基、含有1-6個(gè)碳原子的烷基、含有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、羧基、其中烷基含有1-6個(gè)碳原子的烷基羰基氨基、5-四唑基以及含有1-15個(gè)碳原子的?；酋０被?即?；被酋；突酋；被驶?，其條件是當(dāng)酰基磺酰氨基含有芳基時(shí)，芳基可進(jìn)一步被選自氟、氯、溴、碘和硝基的基團(tuán)取代；以及功能上等效的其他末端氨基保護(hù)基。
對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說，結(jié)構(gòu)式(1)起始氨基化合物容易得到。例如，結(jié)構(gòu)式(1)中的X為-CF2CF3的氨基化合物被描述在歐洲專利申請(qǐng)?zhí)朞PI 0503203(1992年9月16日)中，另外，結(jié)構(gòu)式(1)中的X為-CF2CF3的氨基化合物被描述在歐洲專利申請(qǐng)?zhí)?410411(1991年1月30日)中。
另外，用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知和理解的下列合成方法可制備在反應(yīng)路線A和B中所用的其他起始原料。
可用本領(lǐng)域已知的常規(guī)化學(xué)反應(yīng)制備式K-P4的取代的氨基酸，其中K為 Z為N或CH，和B為下式基團(tuán) 或 其中R’為氫或C1-6烷基。
在反應(yīng)路線C中描述了制備取代的氨基酸K-P4的方法，其中K為 B為-C(＝O)-，P4和Z如上定義或?yàn)檫@些基團(tuán)的官能等效基團(tuán)。
反頻路線C 具體地，氨基酸K-P4(其中K為 B為-C(＝O)-)的制備可通過使氨基酸K-P4(其中K為氫)與結(jié)構(gòu)式(4)的酰氯在1至4摩爾當(dāng)量的可作為鹵化氫接受體的合適胺偶合。用作鹵化氫接受體的合適胺為有機(jī)叔胺如三(低級(jí)烷基)胺。例如，三乙胺或芳族胺如甲基吡啶，可力丁和吡啶。當(dāng)使用吡啶、甲基吡啶或可力丁時(shí)，可以使用高過量，因此可用作反應(yīng)溶劑。特別適合于反應(yīng)的是N-甲基嗎啉(“NMM”)。偶合反應(yīng)可通過加入對(duì)氨基酸K-P4(其中K為氫)溶液來說為過量如1-5優(yōu)選約4倍摩爾過量的胺，然后加入結(jié)構(gòu)式(4)酰氯進(jìn)行。溶劑可以是任何合適的溶劑。例如，石油醚、氯化的烴如四氯化碳、二氯乙烷、二氯甲烷或氯仿；氯化的芳烴如1，2，4-三氯苯或鄰二氯苯；二硫化碳；乙醚溶劑如乙醚、四氫呋喃或1，4-二惡烷，或芳烴溶劑如苯、甲苯、或二甲苯。二氯甲烷為該偶合反應(yīng)優(yōu)選的溶劑。反應(yīng)進(jìn)行大約15分鐘至大約6小時(shí)，這取決于反應(yīng)物、溶劑、濃度和其他因素，如溫度，可從大約0℃至大約60℃，一般在大約室溫即25℃。N-保護(hù)的氨基酸K-P4(其中K為 B為-C(＝O)-)可通過任何合適的技術(shù)如硅膠色譜法從反應(yīng)混合物中分離出來。取代的氨基酸K-P4(其中K為 其中B不是-C(＝O)-)可類似地制備，只是用合適的中間體 其中(B不是-C(＝O)-以及A為Cl或OH(相應(yīng)的酸、酰氯或磺酰氯))代替反應(yīng)路線C中的結(jié)構(gòu)式(5)化合物。
結(jié)構(gòu)式(4)的酰氯和合適的下式中間體 其中(B不是-C(＝O)-以及A為Cl或OH(相應(yīng)的酸、酰氯或磺酰氯))可以市購或可用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的和可理解的技術(shù)和方法容易制備。
例如，合適的下式中間體 可按反應(yīng)路線D所述制備，其中所有的取代基定義如上。
反應(yīng)路線D 反應(yīng)路線D提供了制備合適的下式中間體的一般合成方法 Z定義如上。
在步驟a中，用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的和可理解的技術(shù)和方法可將合適的2，5-吡啶二羧酸2-甲基酯(6)(Nippon Kgaku Zasshi，1967，88，563)的羧酸官能團(tuán)轉(zhuǎn)化為其酰氯如亞硫酰氯，從而得到相應(yīng)的6-甲氧羰基煙酰氯(7)。
在步驟b中，用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的和可理解的技術(shù)和方法，用嗎啉(8)酰胺化酰氯(7)得到相應(yīng)的5-(嗎啉-4-羰基)-2-吡啶羧酸甲酯(9)。
在步驟C中，用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的和可理解的技術(shù)和方法，例如用氫氧化鋰的甲醇溶液水解甲基酯官能團(tuán)(9)得到5-(嗎啉-4-羰基)-2-吡啶羧酸(10)。
另外，合適的下式中間體 可按反應(yīng)路線E所述制備，其中所有的取代基定義如上。
反應(yīng)路線E 反應(yīng)路線E提供了制備合適的下式中間體的一般合成方法 其中Z定義如上。
在步驟a中，用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的和可理解的技術(shù)和方法可將合適的2，5-吡啶二羧酸2-甲基酯(6)(Nippon Kgaku Zasshi，1967，88，563)的游離的羧酸官能團(tuán)轉(zhuǎn)化為其叔丁基酯，如二環(huán)己基碳化二亞胺的叔丁醇加成物(Synthesis，1979，570)，得到相應(yīng)的2，5-吡啶二羧酸2-甲基酯、5-叔丁基酯(11)。
例如，2，5-吡啶二羧酸2-甲基酯(6)與摩爾過量的二環(huán)己基碳化二亞胺的叔丁醇加成物在合適的有機(jī)溶劑如二氯甲烷中混合。反應(yīng)一般在0℃至室溫的溫度下進(jìn)行，反應(yīng)時(shí)間為2-24小時(shí)。用本領(lǐng)域已知的常規(guī)萃取方法從反應(yīng)混合物中分離出2，5-吡啶二羧酸2-甲基酯，5-叔丁基酯(11)，并且可用結(jié)晶方法純化。
在步驟b中，用嗎啉(8)酰胺化(11)的甲基酯官能團(tuán)得到相應(yīng)的6-(嗎啉-4-羰基)煙酸叔丁基酯(12)。
例如，2，5-吡啶二羧酸2-甲基酯，5-叔丁基酯(11)與摩爾過量的嗎啉在合適的有機(jī)溶劑如四氫呋喃中反應(yīng)。反應(yīng)一般在室溫至回流溫度下進(jìn)行，反應(yīng)為5小時(shí)至3天。用本領(lǐng)域已知的常規(guī)萃取方法從反應(yīng)混合物中分離出6-(嗎啉-4-羰基)煙酸叔丁基酯(12)，并且可用結(jié)晶方法純化。
在步驟C中，例如用HCl的硝基甲烷溶液水解(12)的叔丁基酯官能團(tuán)得到相應(yīng)的6-(嗎啉-4-羰基)煙酸(13)。
制備式(1)中X＝-CF2CF3的化合物的另一途徑如反應(yīng)路線F所示。
反應(yīng)路線F 化合物(14)定義的所需的起始原料容易得到，即可以購買也可以用已知的現(xiàn)有的原理和技術(shù)制備。術(shù)語“Pg”是指合適的保護(hù)基，前面已經(jīng)有較詳細(xì)的定義。
在反應(yīng)路線F步驟a中，被保護(hù)的氨基酸(14)轉(zhuǎn)化為異羥肟酸酯(15)，該酰胺化可利用二種氨基酸的偶合反應(yīng)使用被保護(hù)的氨基酸(14)與N-烷基O-烷基羥胺來進(jìn)行。常規(guī)的偶合反應(yīng)可使用前面所述的二種氨基酸的偶合反應(yīng)的常規(guī)偶合反應(yīng)得到異羥肟酸酯(15)。
在步驟b中，被保護(hù)的異羥肟酸酯(15)轉(zhuǎn)化為被保護(hù)的全氟酮(17)[或(18)]。該反應(yīng)可利用在參考文獻(xiàn)M.R.Angelastro.J.P.Burkhart，P.Bey，N.P.Peet，Tetrahedron Letters，33(1992)，3265-3268描述的反應(yīng)類型進(jìn)行。
在步驟C中，在T.H.Green“Protection Groupsin OrganicSynthesis”，John Wiley & Sons，1981，第7章中所述的本領(lǐng)域公知的條件下脫保護(hù)，得到脫保護(hù)的異羥肟酸酯。異羥肟酸酯的鏈增長可通過下列方法進(jìn)行得到鏈增長的肽(16)用在反應(yīng)路線A中所述的方法通過與下一個(gè)合適的被保護(hù)的氨基酸經(jīng)過肽鍵偶合，或通過片段的縮合，或這兩種方法的組合。
在步驟d中，在上述條件下使酮(17)脫保護(hù)，脫保護(hù)的酮(17)的鏈增長可通過下列方法進(jìn)行得到鏈增長的酮(18)用在反應(yīng)路線A中所述的方法通過與下一個(gè)合適的被保護(hù)的氨基酸經(jīng)過肽鍵偶合，或通過片段的縮合，或這兩種方法的組合。
另外，(14)的相應(yīng)的N-被保護(hù)的氨基酸酯[即PgNH-CH(R1)C(＝O)OR2(15a)，其中R2和Pg定義如上]可用于代替異羥肟酸酯(15)。(14)的相應(yīng)的N-被保護(hù)的氨基酸酯可以市購或用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的方法由(14)合成。在步驟b中，用類似用于相應(yīng)的異羥肟酸酯的方法將氨基酸酯(15a)轉(zhuǎn)化為N-保護(hù)的全氟酮(17)[或(18)]。步驟c和d與當(dāng)使用異羥肟酸酯(15)時(shí)所使用的步驟相同。
反應(yīng)路線F也可用于制備式結(jié)構(gòu)(1)化合物其中X為-CF2CF2CF3或-CF2CF2CF2CF3，氨基酸酯(15a)與合適的全氟化劑如4-8當(dāng)量的全氟丙基碘或全氟丁基碘反應(yīng)，盡管也可使用等當(dāng)量的溴化物。所述反應(yīng)在合適的堿金屬堿例如4-8當(dāng)量的MeLi/LiBr存在下在合適的無水溶劑(或混合的溶劑)如乙醚、叔丁基甲基醚或甲苯中進(jìn)行，合適的堿金屬堿的其他實(shí)例包括t-BuLi，EtMgBr，PhMgBr，n-BuLi等。反應(yīng)在低溫-100℃至0℃優(yōu)選-30℃至-80℃下進(jìn)行，分別得到被保護(hù)的全氟丙基氨基酮和被保護(hù)的全氟丁基氨基酮。步驟c和d與當(dāng)使用異羥肟酸酯(15)時(shí)所使用的步驟相同。
另外，N-保護(hù)的氨基酸酯(15a)首先脫保護(hù)，然后在合適的偶合劑存在下以及在合適的偶合溶劑存在下與合適的N-保護(hù)的肽偶合。然后用類似用于相應(yīng)的異羥肟酸酯的方法將生成的N-保護(hù)的肽酯[KP4P3P2NH-CH(R1)C(＝O)OR2，(16a)]全氟化。步驟c和d與當(dāng)使用異羥肟酸酯(15)時(shí)所使用的步驟相同。
對(duì)于本發(fā)明來說，術(shù)語“合適的偶合劑”和“合適的偶合溶劑”是指包括在上述常規(guī)偶合方法中所用的任何常規(guī)偶合劑和溶劑。同樣，術(shù)語“合適的脫保護(hù)劑”和“合適的有機(jī)溶劑”是指包括在上述常規(guī)脫保護(hù)方法中所用的任何常規(guī)脫保護(hù)劑和溶劑。有關(guān)的方法被描述在Gassman，P.G.，O’Reilly，N.J.，J.Org.Chem.1987，52，2481和Portella，C.，Doussot，P.，Dondy，B.，Synthesis 1992，995。
在式1化合物的合成中使用的所有氨基酸可以市購或本領(lǐng)域技術(shù)人員容易合成。例如，用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的技術(shù)，在P2中定義的氨基酸衍生物 可通過酯化下式化合物來制備 下列實(shí)施例表示反應(yīng)路線A-F所述的典型合成。這些實(shí)施例應(yīng)被理解為僅是用于說明，而不是對(duì)本發(fā)明的范圍的任何限制。在本文中使用的下列術(shù)語具有指定的含義“g”是指克；“mmol”是指毫摩爾；“mL”是指毫升；“bp”是指沸點(diǎn)，“℃”是指攝氏溫度；“mmHg”是指毫米汞柱；“μL”是指微升；“μg”是指微克；以及“μM”是指毫摩爾；“ DME”是指1，2-二甲氧基乙烷；“DCC”是指二環(huán)己基碳化二亞胺；“h”是指小時(shí)；“DMF”是指N，N’-二甲基甲酰胺；“conc”是指濃縮；“NMM”是指N-甲基嗎啉，“in vacuo”是指在減壓下除去溶劑；“GC”是指氣相色譜；“ Rt”是指保留時(shí)間。
實(shí)施例1N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨?；?N’-[3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-2-氧代丙基]-L-脯酰胺的制備 在-20℃下向N-(叔丁氧羰基)-L-纈氨?；?L-脯酰胺(得自AdvancedChemTech，3.1g，0.01mol)和NMM(1.10mL，0.01mol)的CH2Cl2(100mL)溶液中加入氯甲酸異丁酯(1.30mL，0.01mol)。攪拌20分鐘后，加入另外等量的NMM(1.10mL，0.01mol)，接著一次性加入固體L-纈氨酸甲基酯鹽酸鹽(1.67g，0.01mol，Aldrich)。在-20℃下將反應(yīng)混合物再攪拌1小時(shí)，然后加熱至室溫，接著反應(yīng)混合物用CH2Cl2(50mL)稀釋，用1N HCl(3×50mL)、飽和NaHCO3(2×50mL)和鹽水(1×50mL)洗滌，將所得的有機(jī)萃取液干燥(MgSO4)，真空濃縮得到白色泡沫狀的所需的產(chǎn)物(MDL 104，259)(4.27g，100％)。
TLC Rf0.33(3∶1Et2O-hexane)；FT-IR(KBr)3553，3537，3520，3510，3310，2968，2935，2876，1741，1687，1631，1527，1440，1390，1367，1338，1309，1244，1203，1172，1114，1093，1043，1016，962，923，883，831，754，665，628，603cm-1；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.22(br d，1H，J＝8.4Hz，NH)，5.24(br d，1H，J＝11.0Hz，NH)，4.62(dd，1H，J＝8.2，2.9Hz，CH of Val)，4.43(app.dd，1H，J＝8.6，5.1Hz，CH of Pro)，4.30(dd，1H，J＝9.5，6.4Hz，CH of Val)，3.75-3.70 and 3.63-3.59(pr m，2H，CH2N)，3.7(s，3H，OMe)，2.36(m，1H，β-CH ofVal)，2.17-1.91(m，5H，CH2CH2and β-CH of Val)，1.43(s，9H，t-Bu)，1.00(d，3H，J＝6.7Hz，CH3)，0.95-0.90(m，9H，3 X CH3)；13C CMRδ172.5，172.1，170.9，155.8，79.5，77.4，77.1，76.9，76.8，76.5，59.9，57.5，56.7，52.0，47.6，31.4，31.0，28.3，28.2，27.1，25.1，19.5，18.9，17.8，17.3；MS(CI/CH4)m/z(rel intensity)428(MH+，22)，372(68)，328(100). Anal.Calcd.for C21H37N3O6C，58.99；H，8.72；N，9.83.FoundC，58.68；H，8.79；N，9.55.
實(shí)施例2N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4-五氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代丙基]-L-脯酰胺的制備 向-78℃下的實(shí)施例1的產(chǎn)物(3.8g，9.0mmol)的Et2O(100mL)溶液中加入濃縮的五氟乙基碘(5.5mL，48.0mmol)。以保持內(nèi)部反應(yīng)溫度低于-70℃的速度向混合物中加入甲基鋰-溴化鋰配合物(28.5mL，42.0mmol)，反應(yīng)混合物在-78℃下攪拌0.5小時(shí)，撤去冷卻浴并且繼續(xù)攪拌5分鐘，將混合物傾入H2O(100mL)中，用1N HCl酸化水相，水相再用Et2O(100mL)萃取，合并的乙醚萃取液干燥(Mg2SO4)。真空除去溶劑得到粗黃色油狀物，馬上進(jìn)行快速色譜純化(4.0×25cm柱，用3∶1 Et2O-己烷洗脫)得到白色泡沫狀的所需的產(chǎn)物(MDL 102，051)(1.95g，42％)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.60(br d，1H，J＝7.6Hz，NH)，5.23(brd，1H，J＝9.2Hz，NH)，4.94(dd，1H，J＝7.6，4.4Hz，CHof Val)，4.63(dd，1H，J＝8.1，2.8Hz，CH of Pro)，4.28(dd，1H，J＝9.3，6.5Hz，α-CH of Val)，3.81-3.69 and 3.64-3.54(pr m，2H，CH2N)，2.44-1.81(series of m，6H，β-CH ofVal，CH2CH2)，1.44(s，9H，t-Bu)，1.02(d，3H，J＝6.8Hz，CH3)，0.98(d，3H，J＝6.8Hz，CH3)，0.95(d，3H，J＝6.8Hz，CH3)，0.88(d，3H，J＝6.8Hz，CH3)；19F NMRδ-82.15(s，CF3)，-121.70 and-122.70(AB quartet，J＝296Hz，CF2)；MS(CI/CH4)m/z(rel.intensity)516(MH+，52)，460(100)，416(26).
實(shí)施例3N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代丙基]-L-脯酰胺的制備 在氮?dú)夥障孪?78℃下的實(shí)施例1的產(chǎn)物(3.8g，9.0mmol)的Et2O(100mL)溶液中滴加入濃縮的全氟丙基碘(6.6mL，48.0mmol，得自Aldrich，用Cu穩(wěn)定)。以保持內(nèi)部反應(yīng)溫度低于-70℃的速度向混合物中加入甲基鋰-溴化鋰配合物(28.5mL，42.0mmol)，反應(yīng)混合物在-78℃下攪拌1小時(shí)，撤去冷卻浴并且繼續(xù)攪拌5分鐘，將混合物傾入H2O(100mL)中，用1N HCl酸化水相，水相再用Et2O(100mL)萃取，合并的乙醚萃取液干燥(Mg2SO4)。真空除去溶劑得到粗黃色油狀物，馬上進(jìn)行快速色譜純化(4.0×25cm柱，用3∶1Et2O-己烷洗脫)得到白色泡沫狀的所需的產(chǎn)物(MDL 103，830)(654mg，13％)；FT-IR(KBr)3423，3292，2972，2937，2879，2823，2771，2739，2253，1755，1687，1635，1525，1444，1392，1367，1348，1313，1232，1178，1126，1041，1018，966，922，910，877，837，798，756，736，667，650，632，596cm-1；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.63(d，1H，J＝8.2Hz，NH)，5.44(d，1H，J＝9.2Hz，NH)，5.02(dd，1H，J＝7.8，4.5Hz，CH of Val)，4.64(dd，1H，J＝8.0，3.0Hz，CH ofPro)，4.30(dd，1H，J＝9.2，6.8Hz，α-CH of Val)，3.80-3.74 and 3.66-3.60(pr m，2H，CH2N)，2.31-1.92(series of m，6H，β-CH of Val，CH2CH2)，1.44(s，9H，t-Bu)，1.02(d，3H，J＝7.0Hz，CH3)，0.98(d，3H，J＝6.9Hz，CH3)，0.94(d，3H，J＝6.7Hz，CH3)，0.88(d，3H，J＝6.9Hz，CH3)；13C NMRδ193.3，193.0，192.7，172.9，171.1，155.7，118.7，115.8，111.3，108.9，108.6，108.2，105.9，79.6，77.3，77.2，76.9，76.6，59.7，59.3，56.8，47.8，31.4，29.0，28.3，26.9，25.1，19.9，19.8，19.7，19.5，19.4，17.5，17.4，16.3，16.1；19FNMR(376.3MHz，CDCl3)δ-80.91(t，CF3)，-119.03 and-120.43(AB quartet，J＝297Hz，CF2)，-126.62(s，CF2)；MS(CI/CH4)m/z(rel.intensity)566(MH+，100).HRMS(C23H34F7N3O5)(M+)calcd 566.2492，obsd 566.2475.
實(shí)施例4N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨酰基-N’-[3，3，4，4，5，5，6，6，6-九氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代己基]-L-脯酰胺的制備 在氮?dú)夥障孪?78℃下的實(shí)施例1的產(chǎn)物(3.8g，9.0mmol)的無水Et2O(100mL)溶液中滴加入全氟丙基碘(7.6mL，48.0mmol，得自Aldrich)。以保持內(nèi)部反應(yīng)溫度低于-70℃的速度向混合物中加入甲基鋰-溴化鋰配合物(28.5mL，42.0mmol)，反應(yīng)混合物在-78℃下攪拌1小時(shí)，撤去冷卻浴并且繼續(xù)攪拌5分鐘，然后將混合物傾入H2O(100mL)中，用1N HCl酸化水相，水相再用Et2O(100mL)萃取，合并的乙醚萃取液干燥(Mg2SO4)。真空除去溶劑得到粗黃色油狀物，馬上進(jìn)行快速色譜純化(4.0×25cm柱，用3∶1Et2O-己烷洗脫)得到白色泡沫狀的所需的產(chǎn)物(MDL 105，731)(493mg，9％)；
FT-IR(KBr)3421，3292，2972，2937，2879，2773，1755，1687，1637，1525，1444，1392，1367，1309，1238，1174，1138，1093，1043，1016，960，927，875，848，744，709，690，667，653，632，599，574cm-1；13C NMRδ173.0，170.9，155.7，79.7，77.2，77.1，76.9，76.6，59.7，59.3，56.8，47.8，31.3，28.9，28.3，26.7，25.1，19.8，19.5，17.4，16.2；19F NMR(376.2MHz，CDCl3)δ-81.35(s，CF3)，-118.27 and-119.91(AB quartet，J＝297Hz，CF2)，-123.09(s，CF2)，-125.97(s，CF2)；MS(CI/CH4)m/z(rel.intensity)616(MH+，68)，560(100)，516(31).Anal.Calcd.for C24H34F9N3O5C46.83；H，5.57；N，6.83.FoundC，46.32；H，5.65；N，6.66.HRMS(C24H34F9N3O5)(M+)calcd616.2433，obsd 616.2435.
實(shí)施例5N-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-L-脯酰胺的制備 向在冰-水浴中冷卻的攪拌下的實(shí)施例3的產(chǎn)物(0.21g，0.37mmol)的EtOAc(10mL)溶液中鼓泡通入HCl氣體4分鐘，停止鼓泡，用干燥的試管塞住反應(yīng)物，攪拌下加熱至室溫。1小時(shí)后，濃縮反應(yīng)混合物，用CCl4共沸，在高真空下放置，得到白色固體的所需產(chǎn)物(185mg，100％)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.29(br s，2H，NH2)，7.88(br s，1H，NH)，5.70(m，1H，CH)，4.89(m，1H，CH)，4.16-3.55(a series of m，4H，CH，CH，CH2N)，2.40-1.94(a series of m，5H，β-CH of Val andCH2CH2)，1.13(br s，6H，2 X CH3)，1.01(d，3H，J＝5.8Hz，CH3)，0.94(d，3H，J＝4.8Hz，CH3)；19F NMRδ-81.02(s，CF3)，-120.11(s，CF2)，-126.75(s，CF2).
實(shí)施例6N-[4-(4-嗎啉基羰基)苯甲?；鵠-L-纈氨酰基-N’-[3，3，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-L-脯酰胺的制備 向攪拌下的4-(4-嗎啉羰基)苯甲酸(0.13g，0.53mmol)和氯化芐基三乙基銨(1mg，0.004mmol)的1，2-二氯甲烷(20mL)的懸浮液中加入亞硫酰氯(0.05mL，0.53mmol)，將反應(yīng)混合物加熱回流。2.5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，真空濃縮，然后殘余物用CCl4共沸，在高真空下放置，得到淺橙色油狀物(定量)，不必進(jìn)一步純化則可使用，在分開的RB燒瓶中，將攪拌著的實(shí)施例5的產(chǎn)物(185mg，0.37mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液冷卻至-20℃。加入NMM(0.2mL，2.0mmol)，接著馬上以保持內(nèi)反應(yīng)溫度處于-10℃或低于-10℃的速度滴加入酰氯的CH2Cl2(5mL)溶液，加完后，將反應(yīng)混合物加熱至室溫，在室溫下1.5小時(shí)后，反應(yīng)混合物用CH2Cl2(20ml)稀釋，用1N HCl(2×20mL)、飽和的NaHCO3(2×20mL)和鹽水(1×20mL)洗滌，干燥(MgSO4)并且真空濃縮得到粗的所需產(chǎn)物(260mg)。粗的白色泡沫狀物馬上進(jìn)行快速色譜純化(2×15cm柱，用1∶27 MeOH-CH2Cl2洗脫)得到白色泡沫狀的所需產(chǎn)物(MDL 105，495)(162mg，64％)；IR(KBr)3431，3323，3049，2970，2935，2877，1755，1693，1631，1529，1437，1394，1346，1300，1278，1259，1232，1161，1118，1068，1014，933，896，862，842，798，785，740，686，653，628，596cm-1；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.86(d，2H，J＝8.4Hz，aryl)，7.52(d，1H，J＝8.4Hz，NH)，7.46(d，2H，J＝8.3Hz，aryl)，7.12(d，1H，J＝8.7Hz，NH)，5.04(dd，1H，J＝8.2，4.2Hz，α-CH of Val)，4.84(dd，1H，J＝8.6，7.3Hz，α-CH ofVal)，4.62(dd，1H，J＝7.9，2.9Hz，CH of Pro)，3.94-3.37(m，10H，2X NCH2CH2O and NCH2of Pro)，2.29-1.97(series ofm，6H，2X β-CH of Val and CH2CH2)，1.06(d，3H，J＝6.8Hz，CH3)，1.01(d，6H，J＝6.7Hz，2 X CH3)，0.86(d，3H，J＝6.9Hz，CH3)；13C NMRδ172.2，170.9，169.2，166.3，138.5，135.1，127.4，127.3，77.4，77.1，76.9，76.5，66.7，59.9，59.3，55.9，47.9，31.8，29.1，27.0，25.1，19.8，19.5，17.8，16.2；19F NMR(470.2MHz，CDCl3)δ-80.24(t，J＝9Hz，CF3)，-118.39 and-119.87(dq，J＝295，9Hz，COCF2)，-125.99(AB m，CF2)；MS(CI/CH4)m/z(rel.intensity)683(MH+，59)，367(100).Anal.Calcd.for C30H37F7N4O6·1.3H2OC，51.01；H，5.65；N，7.92.FoundC，51.34；H，5.27；N，7.87.
實(shí)施例7Boc-Val-CF2CF3的制備 將Boc-Val-OCH3(2.27g，9.81mmol)的Et2O(14mL)/PhMe(11.3mL)的溶液冷卻至-50℃，用CF3CF2I(3.7mL，31.1mmol，3.2eq.)處理，然后進(jìn)一步冷卻至-60℃，滴加入甲基鋰-溴化鋰配合物處理(55分鐘，-60℃至-50℃；1.5M的Et2O，20mL，30mmol，3.1eq)。將所得的反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)，然后滴加入異丙醇(20分鐘；＜-50℃)處理，攪拌30分鐘后，將反應(yīng)混合物加熱至0℃，然后傾入到1M KHSO4(60mL)中。分離各相，水相用Et2O(1×50mL)萃取，合并有機(jī)相并且干燥(MgSO4)，過濾并將濾液真空蒸發(fā)(室溫，15mmHg)，得到白色固體。粗產(chǎn)物表明所需的產(chǎn)物與起始原料的比例為3∶1，沒有其他不純物＞1％總面積(GC)。粗白色固體進(jìn)行硅膠色譜純化(40g，3×6.5cm；己烷(400mL)，然后400mL10％EtOAc/己烷)得到2.22g(70％產(chǎn)率)的所需產(chǎn)物。該固體用己烷重結(jié)晶(40mL，回流，然后冷卻至0℃)，得到1.62g，57％純的所需產(chǎn)物(MDL 101，286)(首批；將產(chǎn)物保留在母液中)；Rf＝0.77在20％的EtOAc/己烷中；Mp69-70℃；1HNMR(CDCl3)5.0(m，1H)，4.8(m，1H)，2.3(m，1H)，1.44(s，9H)，1.1(d，3H，J＝6.8Hz)，0.84(d，3H，J＝6.9Hz)；19FNMR(CDCl3)-82.1(s)，-121.4(d，J＝297Hz)，-122.8(d，J＝297Hz)；IR(CHCl3)vmax 344 3，2976，1753，1716，1500，1369，1234，1197，1163cm-1；UV(MeOH)λmax 225nm(ε＝754)；CIMS(CH4)m/e(％relative intensity)320(M+H+，100). Anal.Calcd.for C12H18NO3F5C，45.14；H，5.68；N，4.39.FoundC，45.28；H，5.71；N，4.26.
實(shí)施例8Boc-Val-CF2CF3的另一制備方法 將288.0g(1.11mol)的Boc-Val N-甲基-O-甲基異羥肟酸和4.7L的無水Et2O的混合物加入到裝有攪拌器、溫度計(jì)、干冰濃縮器、氣體分散管和連續(xù)的氮?dú)鉀_洗器的12L三頸瓶中，將所得的溶液冷卻至-60℃至-65℃，在大約30分鐘內(nèi)通過氣體分散管將總計(jì)885.2g(3.60mol)的C2F5I加到Boc-Val N-甲基-O-甲基異羥肟酸溶液中，同時(shí)保持溫度為大約-65℃。在加完氣體后，馬上在1小時(shí)內(nèi)加入總計(jì)2.39L的1.5M CH3Li·LiBr的Et2O(3.59moL)，保持反應(yīng)溫度為-52℃至-58℃。在加入大約1/3的CH3Li·LiBr后形成沉淀，但在加完后，則完全為溶液。所得的溶液在-52℃至-58℃下攪拌1小時(shí)，用GC監(jiān)測(cè)反應(yīng)(MDL 101，286的Rt＝1.3分鐘，Boc-Val N-甲基-O-甲基異羥肟酸的Rt＝5.1分鐘)并且發(fā)現(xiàn)含有7.2％Boc-Val N-甲基-O-甲基異羥肟酸。在大約15分鐘內(nèi)加入總計(jì)255mL(3.47mol)的丙酮，同時(shí)保持反應(yīng)溫度為-52℃至-58℃，將所得的混合物攪拌10分鐘，將混合物傾入到含有4.7L的0.75MKHSO4的22L燒瓶中，并且冷卻至大約0℃，分離有機(jī)層，用3L水洗滌，用500gMgSO4干燥有機(jī)層，過濾除去干燥劑，在40℃/100托下濃縮得到半固體重量409克，在45℃下將粗產(chǎn)物溶于1.2L己烷中，在大約30分鐘內(nèi)緩慢冷卻至-25℃至-30℃，過濾出結(jié)晶出的固體，在-30℃下用250ml己烷洗滌，所得的MDL101，286真空干燥得到(25℃/100托)得到176.7g。在35℃/100托下濃縮濾液得到殘余物重量153.5g，將產(chǎn)物置于Kugelrohr蒸餾器上，收集至多40℃/0.6托下的初餾物，更換接受器，在40℃-60℃/0.6托下收集總計(jì)為100.5g粗MDL101，286。在大約50℃下，將粗產(chǎn)物溶于500mL己烷中，所得的溶液冷卻至-30℃，過濾出結(jié)晶出的固體，用100mL冷的(-30℃)己烷洗滌，產(chǎn)物在25℃/100托下真空干燥得到另外的68.0g MDL101，286，總產(chǎn)量為244.7g(70％產(chǎn)率)，經(jīng)GC測(cè)量純度為99.9％。
元素分析C12H18F5NO3(319.28)；理論值C，45.14，H，5.68，N，4.39；實(shí)測(cè)值C，45.30，H，5.50，N，4.26，4.35實(shí)施例9N-[3-(3-吡啶基)丙?；鵠-L-纈氨酰基-N-[3，3，4，4，4-五氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代丁基]-L-脯酰胺的制備 a)H-Val-CF2CF3·鹽酸鹽的制備將Boc-Val-CF2CF3(350mg，1.1mmol)溶于乙酸乙酯(50mL)中，冷卻至0℃。用氯化氫氣體處理5分鐘，攪拌30分鐘，真空除去溶劑得到標(biāo)題化合物。b)Boc-Val-Pro-Val-CF2CF3的制備將Boc-Val-Pro-OH(314mg，1.0mmol)溶于二氯甲烷(4ml)中，加入N-甲基嗎啉(252mg，2.5mmol)。冷卻至-22℃，加入氯甲酸異丁基酯(136mg，1.0mmol)。攪拌20分鐘，加入H-Val-CF2CF3·鹽酸鹽(1.1mmol)。在-22℃下攪拌1小時(shí)后，加熱至室溫，并且攪拌3小時(shí)。用硅膠色譜純化(40％乙酸乙酯/己烷)得到標(biāo)題化合物(405mg)。c)H-Val-Pro-Val-CF2CF3·鹽酸鹽的制備將Boc-Val-Pro-Val[CF2CF3](385mg，0.74mmol)溶于乙酸乙酯(50mL)中，冷卻至0℃。用氯化氫氣體處理5分鐘，攪拌30分鐘，真空蒸發(fā)溶劑得到標(biāo)題化合物(334mg)。d)N-[3-(3-吡啶基)丙?；鵠-L-纈氨?；?N-[3，3，4，4，4-五氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代丁基]-L-脯酰胺的制備將3-(3-吡啶基)丙酸(174mg，1.15mmol，Walker，F(xiàn).A.etal.，J.Amer.Chem.Soc.，102，5530-5538(1989))的二氯甲烷(15mL)中，加入N-甲基嗎啉(0.38mL，3.45mmol)和三乙胺(0.32mL，2.30mmol)，冷卻所得的清澄無色溶液至-18℃。加入氯甲酸異丁基酯(0.15mL，1.15mmol)并且攪拌20分鐘，接著加入N-甲基嗎啉(0.13ml，1.15mmol)和H-Val-Pro-Val-CF2CF3·鹽酸鹽(520mg，1.15mmol)并且在-20℃下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物加熱至室溫，再用二氯甲烷(35mL)稀釋反應(yīng)混合物，接著依次用1N HCl(3×20mL)，飽和的NaHCO3(2×20mL)和鹽水(1×20mL)洗滌，干燥和濃縮粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物用快速色譜純化(7525丙酮EtOAc)得到白色固體泡沫狀的標(biāo)題化合物(產(chǎn)量470mg，74％，31LLLLLD)。
TLC Rf0.42(31acetoneEtOAc)；1H NMRδ8.49(br s，1H，aryl)，8.45(br d，1H，J＝4.2Hz，aryl)，7.84(br d，1/4H，J＝7.7Hz，NH)，7.53(dt，1H，J＝7.8，1.7Hz，aryl)，7.50(br d，3/4H，NH)，7.21(dd，1H，J＝7.7，4.8Hz，aryl)，6.31(br d，3/4H，J＝8.9Hz，NH)，6.24(br d，1/4H，J＝8.9Hz，NH)，5.02-4.92(m，1H，CH)，4.67(dd，1/4H，J＝8.1，2.1Hz，α-CH of Pro)，4.63-4.55(m，l 3/4H，α-CH of Pro and α-CH of Val)，3.87-3.72 and 3.70-3.55(pr m，2H，CH2N)，3.07-2.87 and 2.63-2.50(pr m，4H，aryl CH2CH2CO)，2.50-1.80(m，6H，2Xβ-CH and CH2CH2)，1.12-0.79(series of d，12H，4XCH3)；19F NMRδ-82.13(s，CF3，major isomer)，-82.17(s，CF3，minor isomer)，-121.53 and-122.71(AB quartet，J＝295Hz，CF2，minor isomer)，-121.59and-122.61(AB quartet，J＝295Hz，CF2，major isomer)；MS(EI)m/z(rel intensity)548(M+，4)，401(6)，233(65)，205(100)，134(45)，106(35)，70(77).Anal.(C25H33F5N4O4·0.3H2O)C，H，N.
實(shí)施例10N-[3-(3-吡啶基)丙酰基]-L-纈氨?；?N-[3，3，4，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-L-脯酰胺的制備 a)Boc-Val-Pro-Val-OCH3的制備在-20℃下將氯甲酸異丁基酯(1.30mL，0.01mol)加到Boc-Val-Pro-OH(3.1g，0.01mol，Advanced ChemTech)的二氯甲烷(100ml)溶液中，并且攪拌20分鐘。再加入等當(dāng)量的N-甲基嗎啉(1.10mL，0.01mol)。一次性加入固體L-纈氨酸甲基酯鹽酸鹽(1.67g，0.01mol，Aldrich)，在-20℃下攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)，然后加熱至室溫。再用二氯甲烷(50mL)稀釋，接著用1N HCl(3×50mL)，飽和的NaHCO3(2×50mL)和鹽水(1×50mL)洗滌，干燥(MgSO4)所得的有機(jī)萃取液并且真空濃縮得到白色泡沫狀的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率4.27g，100％)。TLC Rf0.33(3∶1 Et2O-hexane)；FT-IR(KBr)3553，3537，3520，3510，3310，2968，2935，2876，1741，1687，1631，1527，1440，1390，1367，1338，1309，1244，1203，1172，1114，1093，1043，1016，962，923，883，831，754，665，628，603cm-1；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.22(br d，1H，J＝8.4Hz，NH)，5.24(brd，1H，J＝11.0Hz，NH)，4.62(dd，1H，J＝8.2，2.9Hz，CHof Val)，4.43(app.dd，1H，J＝8.6，5.1Hz，CH of Pro)，4.30(dd，1H，J＝9.5，6.4Hz，CH of Val)，3.75-3.70 and3.63-3.59(pr m，2H，CH2N)，3.7(s，3H，OMe)，2.36(m，1H，β-CH of Val)，2.17-1.91(m，5H，CH2CH2and β-CH of Val)，1.43(s，9H，t-Bu)，1.00(d，3H，J＝6.7Hz，CH3)，0.95-0.90(m，9H，3 X CH3)；13C CMRδ172.5，172.1，170.9，155.8，79.5，77.4，77.1，76.9，76.8，76.5，59.9，57.5，56.7，52.0，47.6，31.4，31.0，28.3，28.2，27.1，25.1，19.5，18.9，17.8，17.3；MS(CI/CH4)m/z(rel intensity)428(MH+，22)，372(68)，328(100). Anal.Calcd. for C21H37N3O6C，58.99；H，8.72；N，9.83.FoundC，58.68；H，8.79；N，9.55.b)Boc-Val-Pro-Val-CF2CF2CF3的制備在氮?dú)夥障孪?78℃下的Boc-Val-Pro-Val-OCH3(3.8g，9.0mmol)的無水乙醚(100mL)溶液中滴加入全氟丙基碘(6.6mL，48.0mmol，得自Aldrich，用Cu穩(wěn)定)。以保持內(nèi)部反應(yīng)溫度低于-70℃的速度加入甲基鋰-溴化鋰配合物(28.5mL，42.0mmol)，反應(yīng)混合物在-78℃下攪拌1小時(shí)，撤去冷卻浴并且繼續(xù)攪拌5分鐘，將混合物傾入H2O(100mL)中，用1N HCl酸化水相，水相再用乙醚(100mL)萃取，將合并的乙醚萃取液干燥(Mg2SO4)。真空除去溶劑將所得的黃色泡沫狀物通過快速色譜純化(4.0×25cm柱，用3∶1Et2O-己烷洗脫)得到白色泡沫狀的標(biāo)題化合物(產(chǎn)量654mg，13％)；FT-IR(KBr)3423，3292，2972，2937，2879，2823，2771，2739，2253，1755，1687，1635，1525，1444，1392，1367，1348，1313，1232，1178，1126，1041，1018，966，922，910，877，837，798，756，736，667，650，632，596cm-1；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.63(d，1H，J＝8.2Hz，NH)，5.44(d，1H，J＝9.2Hz，NH)，5.02(dd，1H，J＝7.8，4.5Hz，CH of Val)，4.64(dd，1H，J＝8.0，3.0Hz，CH of Pro)，4.30(dd，1H，J＝9.2，6.8Hz，α-CH of Val)，3.80-3.74and3.66-3.60(pr m，2H，CH2N)，2.31-1.92(series of m，6H，β-CH of Val，CH2CH2)，1.44(s，9H，t-Bu)，1.02(d，3H，J＝7.0Hz，CH3)，0.98(d，3H，J＝6.9Hz，CH3)，0.94(d，3H，J＝6.7Hz，CH3)，0.88(d，3H，J＝6.9Hz，CH3)；13C NMRδ193.3，193.0，192.7，172.9，171.1，155.7，118.7，115.8，111.3，108.9，108.6，108.2，105.9，79.6，77.3，77.2，76.9，76.6，59.7，59.3，56.8，47.8，31.4，29.0，28.3，26.9，25.1，19.9，19.8，19.7，19.5，19.4，17.5，17.4，16.3，16.1；19F NMR(376.3MHz，CDCl3)δ-80.91(t，CF3)，-119.03 and-120.43(AB quartet，J＝297Hz，CF2)，-126.62(s，CF2)；MS(CI/CH4)m/z(rel.intensity)566(MH+，100).HRMS(C23H34F7N3O5)(M+)calcd 566.2492，obsd 566.2475.c)H-Val-Pro-Val-CF2CF2CF3·鹽酸鹽的制備鼓泡通入HCl氣體至攪拌下的Boc-Val-Pro-Val-CF2CF2CF3(0.21g，0.37mmol)的乙酸乙酯(50mL)溶液中，并且在冰水浴中冷卻，用氯化氫氣體處理4分鐘，將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)，加熱至室溫。濃縮反應(yīng)混合物，用CCl4共沸，在高真空下放置，得到白色固體的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率185mg，100％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.29(br s，2H，NH2)，7.88(br s，1H，NH)，5.70(m，1H，CH)，4.89(m，1H，CH)，4.16-3.55(aseries of m，4H，CH，CH，CH2N)，2.40-1.94(a series of m，5H，β-CH of Val and CH2CH2)，1.13(br s，6H，2 X CH3)，1.01(d，3H，J＝5.8Hz，CH3)，0.94(d，3H，J＝4.8Hz，CH3)；19F NMRδ-81.02(s，CF3)，-120.11(s，CF2)，-126.75(s，CF2).d)3-(3-吡啶基)丙酰氯的制備將亞硫酰氯(0.05mL，0.53mmol)加到攪拌著的3-(3-吡啶基)丙酸(80.2mg，0.53mmol)和氯化芐基三乙基銨(1mg，0.004mmol)的1，2-二氯乙烷(20mL)懸浮液中，加熱回流2.5小時(shí)，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并且真空濃縮，將殘余物與CCl4共沸，并且在真空下放置，不必進(jìn)一步純化則可使用所得的酰氯。e)N-[3-(3-吡啶基)丙?；鵠-L-纈氨?；?N-[3，3，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-L-脯酰胺的制備在攪拌下將H-Val-Pro-Val-CF2CF2CF3·鹽酸鹽(185mg，0.37mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，并且冷卻至-20℃。加入N-甲基嗎啉(0.2mL，2.0mmol)，接著馬上以保持內(nèi)部反應(yīng)溫度處于-10℃或低于-10℃的速度滴加入3-(3-吡啶基)丙酰氯的二氯甲烷(5mL)溶液。加完后，將反應(yīng)混合物加熱至室溫，在室溫下1.5小時(shí)后，用二氯甲烷(20mL)稀釋反應(yīng)混合物，接著用1N HCl(2×20mL)，飽和的NaHCO3(2×20mL)和鹽水(1×20mL)洗滌，干燥(MgSO4)和真空濃縮得到粗狀的標(biāo)題化合物。粗產(chǎn)物馬上用快速色譜純化(2×15cm柱，用1∶27MeOH-CH2Cl2洗脫)得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例11N-[3-(3-吡啶基)丙?；鵠-L-纈氨酰基-N-[3，3，4，4，5，5，6，6，6-九氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代己基]-L-脯酰胺的制備 a)Boc-Val-Pro-Val[CF2CF2CF2CF3]的制備在氮?dú)夥障孪?78℃下的Boc-Val-Pro-Val[CO2CH3](3.8g，9.0mmol)的無水乙醚(100mL)溶液中滴加入全氟丁基碘(7.6mL，48.0mmol，得自Aldrich)。以保持內(nèi)部反應(yīng)溫度低于-70℃的速度加入甲基鋰-溴化鋰配合物(28.5mL，42.0mmol)，反應(yīng)混合物在-78℃下攪拌1小時(shí)，撤去冷卻浴并且繼續(xù)攪拌5分鐘，將混合物傾入H2O(100mL)中，用1N HCl酸化水相，水相再用乙醚(100mL)萃取，將合并的乙醚萃取液干燥(Mg2SO4)。真空除去溶劑將所得的黃色粗油狀物通過快速色譜純化(4.0×25cm柱，用3∶1 Et2O-己烷洗脫)得到白色泡沫狀的標(biāo)題化合物(產(chǎn)量493mg，9％)。FT-IR(KBr)3421，3292，2972，2937，2879，2773，1755，1687，1637，1525，1444，1392，1367，1309，1238，1174，1138，1093，1043，1016，960，927，875，848，744，709，690，667，653，632，599，574cm-1；13C NMRδ173.0，170.9，155.7，79.7，77.2，77.1，76.9，76.6，59.7，59.3，56.8，47.8，31.3，28.9，28.3，26.7，25.1，19.8，19.5，17.4，16.2；19F NMR(376.2MHz，CDCl3)δ-81.35(s，CF3)，-118.27 and-119.91(ABquartet，J＝297Hz，CF2)，-123.09(s，CF2)，-125.97(s，CF2)；MS(CI/CH4)m/z(rel.intensity)616(MH+，68)，560(100)，516(31).Anal.Calcd.for C24H34F9N3O5C46.83；H，5.57；N，6.83.FoundC，46.32；H，5.65；N，6.66.HRMS(C24H34F9N3O5)(M+)calcd 616.2433，obsd 616.2435.b)H-Val-Pro-Val-CF2CF2CF2CF3·鹽酸鹽的制備鼓泡通入HCl氣體至攪拌下的Boc-Val-Pro-Val-CF2CF2CF2CF3(245mg，0.40mmol)的乙酸乙酯(50mL)溶液中，并且在冰水浴中冷卻，用氯化氫氣體處理4分鐘，將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)，加熱至室溫。濃縮反應(yīng)混合物，用CCl4共沸，在高真空下放置，得到白色固體的標(biāo)題化合物。c)N-[3-(3-吡啶基)丙?；鵠-L-纈氨?；?N-[3，3，4，4，5，5，6，6，6-九氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代己基]-L-脯酰胺的制備在攪拌下將H-Val-Pro-Val-CF2CF2CF2CF3·鹽酸鹽(221.0mg，0.40mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，并且冷卻至-20℃。加入N-甲基嗎啉(0.2mL，2.0mmol)，接著馬上以保持內(nèi)部反應(yīng)溫度處于-10℃或低于-10℃的速度滴加入3-(3-吡啶基)丙酰氯的二氯甲烷(5mL)溶液。加完后，將反應(yīng)混合物加熱至室溫，在室溫下1.5小時(shí)后，用二氯甲烷(20mL)稀釋反應(yīng)混合物，接著用1N HCl(2×20mL)，飽和的NaHCO3(2×20mL)和鹽水(1×20mL)洗滌，干燥(MgSO4)和真空濃縮得到粗狀的標(biāo)題化合物。粗產(chǎn)物馬上用快速色譜純化(2×15cm柱，用1∶27MeOH-CH2Cl2洗脫)得到標(biāo)題化合物。
在另一具體實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了治療患有與中性白細(xì)胞有關(guān)炎癥的患者的方法，包括給患者施用治療有效量的式(I)-(IV)化合物。術(shù)語“與中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥”是指特征在于中性白細(xì)胞遷移至炎癥部位并且參與生物基質(zhì)的蛋白降解的疾病或病癥。用式(I)-(IV)化合物治療特別有用的與中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥包括氣腫、囊纖維變性、成年人呼吸窘迫綜合征、敗血癥、慢性細(xì)支氣管炎、腸炎疾病(特別是潰瘍性結(jié)腸炎或節(jié)腸性回腸炎)、散播的血管內(nèi)的凝固、痛風(fēng)、風(fēng)溫性關(guān)節(jié)炎。特別優(yōu)選治療與中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥的式(I)-(IV)化合物包括N-[4-(4-嗎啉基羰基)苯甲?；鵠-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-L-脯酰胺；N-[4-(4-嗎啉基羰基)苯甲?；鵠-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，6、6、6-九氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代己基]-L-脯酰胺；N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-L-脯酰胺；N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，5，6，6，6-九氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-L-脯酰胺；-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-L-噻唑烷-4-羧酸；N-[3-(3-吡啶基)丙?；鵠-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，4-五氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代丁基]-L-脯酰胺；
N-[3-(3-吡啶基)丙?；鵠-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，4-五氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代丁基]-D，L-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉酰胺；N-[3-(3-吡啶基)丙?；鵠-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，4-五氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代丁基]-L-噻唑烷-4-羧酸。
本文所用的術(shù)語“患者”是指患有特別的炎癥的溫血?jiǎng)游锶绮溉閯?dòng)物，當(dāng)然豚鼠、狗、貓、大鼠、小鼠、馬、牛、羊和人是在術(shù)語含義范圍內(nèi)的動(dòng)物的實(shí)例。
術(shù)語“治療有效量”是指當(dāng)單劑量或多劑量給藥于患者能夠減輕與中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥的有關(guān)癥狀時(shí)為有效的量。本文所用的呼吸疾病癥狀的減輕是指減少在沒有治療時(shí)所預(yù)期的嚴(yán)重性，但不是指完全去除或治愈疾病。在決定治療有效量或劑量時(shí)，主治醫(yī)生考慮的各種因素包括但不局限于哺乳動(dòng)物的種類；大小；年齡和一般的健康狀態(tài)；所涉及的具體疾??；疾病的復(fù)雜或嚴(yán)重的程度；個(gè)體患者的反應(yīng)；所施用的具體化合物；給藥途徑；施用的制劑的生物適應(yīng)特征；所選擇的劑量使用規(guī)則，伴隨的藥療法的使用；以及其他有關(guān)的情況。
式(I)-(IV)化合物的治療有效量預(yù)期在大約0.1毫克/千克體重/天(mg/kg/天)至大約100mg/kg/天變化，優(yōu)選的劑量預(yù)期在大約0.5至大約10mg/kg/天內(nèi)變化。
本發(fā)明的化合物為彈性蛋白酶特別是人中性細(xì)胞彈性蛋白酶的高效抑制劑?？梢韵嘈疟景l(fā)明的化合物在抑制酶促彈性蛋白酶中產(chǎn)生抑制作用，從而能夠減輕彈性蛋白酶介導(dǎo)的疾病，它包括但不局限于氣腫、囊纖維變性、成年人呼吸窘迫綜合征、敗血癥、慢性細(xì)支氣管炎、腸炎疾病(特別是潰瘍性結(jié)腸炎或節(jié)腸性回腸炎)、散播的血管內(nèi)的凝固、痛風(fēng)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。然而，應(yīng)當(dāng)理解本發(fā)明不受解釋在最終應(yīng)用中其效果的任何特別理論或預(yù)期的機(jī)理的限制。
在有效治療患有上述病癥的患者時(shí)，式(I)-(IV)化合物可以使有效量的化合物生物利用的任何形式或方式給藥，包括口服、氣霧劑和胃腸外途徑。例如，式(I)-(IV)化合物可以口服、氣霧化、皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、經(jīng)皮、鼻內(nèi)、直腸、局部等給藥。制備制劑的本領(lǐng)域技術(shù)人員可容易選擇合適的給藥形式和方式，它取決于所選擇的化合物的具體特征，所治療的病癥、疾病的階段和其他有關(guān)的情況。Remington’sPharmaceutical Sciences，18th Editon，Mack Publishing Co.(1990)。
本發(fā)明化合物可以單獨(dú)給藥或以與可藥用載體或賦形劑混合的藥物組合物形式給藥，載體或賦形劑的比例和性質(zhì)可由所選擇的化合物的溶解性和化學(xué)性質(zhì)、所選擇的給藥途徑和常規(guī)藥理實(shí)踐來決定，盡管本發(fā)明的化合物本身是有效的，但為了穩(wěn)定性、適宜結(jié)晶、提高溶解性等，它們可以配制和以其可藥用鹽例如酸加成鹽形式給藥。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了組合物，它包括式(I)-(IV)化合物與一種或多種惰性載體混合或結(jié)合。這些組合物可用作試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)、作為制備大容量載貸的合適手段或作為藥物組合物?？蓽y(cè)定的式(I)-(IV)化合物的量為本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的和可理解的標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)方法和技術(shù)容易測(cè)量的量，可測(cè)定的式(I)-(IV)化合物的量為一般為組合物重量的大約0.001％至大約75％。惰性載體可為不降解或另外共價(jià)地與式(I)-(IV)化合物反應(yīng)的任何物質(zhì)，合適的惰性載體的實(shí)例為水；水緩沖液如一般用于高效液相色譜(HPLC)分析的緩沖液；有機(jī)溶劑如乙腈、乙酸乙酯、己烷等；以及可藥用載體或賦形劑。
更具體地，本發(fā)明提供了藥物組合物，它包括治療有效量的式(I)-(IV)化合物與一種或多種惰性載體混合或結(jié)合。
藥物組合物可按藥物領(lǐng)域公知的方法制備，載體或賦形劑可以是固體、半固體或液體，它們可以作為活性成分的載體或介質(zhì)。合適的載體或賦形劑在本領(lǐng)域是公知的。藥物組合物可合適于口服、胃腸外或局部使用，它們可以以片劑、膠囊劑、栓劑、溶液、懸浮液等給藥于患者。
本發(fā)明的化合物可以口服給藥，例如與惰性稀釋劑或與可食的載體混合。它們可以包含在明膠膠囊中，或壓入片劑中。為了口服治療給藥，本發(fā)明的化合物可與賦形劑混合，并且可以片劑、錠劑、膠囊劑、劑、懸浮液、糖漿劑、糯米紙囊劑、嚼膠等。這些制劑含有至少4％本發(fā)明化合物即活性成分，但可根據(jù)形式而變化，合適地為4％至大約70％重量單位。在組合物中化合物的量為使能得到合適的劑量。制備優(yōu)選的本發(fā)明的組合物和制劑以便口服劑量單位形式含有5.0-300mg本發(fā)明化合物。
片劑、丸劑、膠囊劑、錠劑等也可含有一種或多種下列輔助劑粘合劑如微結(jié)晶纖維素、黃蓍膠、明膠；賦形劑如淀粉或乳糖，崩解劑如藻酸、淀粉羥乙羧鈉(Primogel)、玉米淀粉等；潤滑劑如硬脂酸鎂或Sterotex；滑動(dòng)劑如膠狀二氧化硅；以及也可加入增甜劑如蔗糖或糖精或調(diào)味劑如薄荷、水楊酸甲基酯或橙調(diào)味劑。當(dāng)劑量單位形式為膠囊時(shí)，除了上述物質(zhì)外，它可含有液體載體如聚乙二醇或脂肪油。其他劑量單位可含有其他各種改變劑量單位物理形式如包覆的物質(zhì)，因此片劑或丸劑可用糖、蟲膠或其他包腸衣劑。除了本發(fā)明的化合物外，糖漿劑可含有作為增甜劑的蔗糖和某些防腐劑、染料、著色劑和調(diào)味劑。在制備各種組合物時(shí)所用的物質(zhì)應(yīng)該是藥物純的并且在使用量下無毒。
為了胃腸外治療給藥，本發(fā)明化合物可加入到溶液或懸浮液中，這些制劑可含有至少0.1％本發(fā)明化合物，但可在0.1至大約50％重量的范圍內(nèi)變化。在這些組合物中本發(fā)明化合物的量應(yīng)使能得到合適的劑量。所制備的優(yōu)選的本發(fā)明組合物和制劑應(yīng)使胃腸外劑量單位含有5.0至100mg本發(fā)明化合物。
本發(fā)明的式(I)-(IV)化合物也可通過噴霧給藥。所用術(shù)語噴霧是指膠狀性質(zhì)至由加壓包裝組成的裝置的各種系統(tǒng)。給藥可以通過液化或壓縮氣體或合適的分散活性成分的泵裝置進(jìn)行。式(I)-(IV)化合物的氣霧劑可以單相、雙相或三相體系給藥以便給出活性成分。氣霧劑給藥裝置包括必須的容器、激活器、閥門、子容器等。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠確定優(yōu)選的氣霧劑。
本發(fā)明的式(I)-(IV)化合物也可以局部給藥，如果這樣的話，載體可合適地包括溶液、軟膏劑或凝膠基質(zhì)。例如，基質(zhì)可包括一種或多種下列成分凡士林、羊毛脂、聚乙二醇、蜜蜂蠟、礦物油、稀釋劑如水和醇以及乳化劑和穩(wěn)定劑。典型的制劑可含有的式1化合物或其可藥用鹽的濃度為大約0.1至大約10％w/v(單位體積重量)。
溶液或懸浮液也可含有一種或多種下列輔助劑無菌稀釋劑如注射水、鹽水溶液、固定油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其他合成的溶劑；抗菌劑如如芐醇或?qū)αu基苯甲酸甲酯；抗氧化劑如抗壞血酸或硫酸氫鈉；偶合劑如亞乙基二胺四乙酸；緩沖劑如乙酸鹽、檸檬酸鹽或磷酸鹽以及強(qiáng)壯調(diào)節(jié)劑如氯化鈉和葡萄糖。胃腸外制劑可包含在由玻璃或塑料制成的安瓿瓶、可處理的注射器或多劑量小瓶中。
使用市售的N-MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-對(duì)硝基苯胺作為底物體外測(cè)定人中性細(xì)胞彈性蛋白酶。試驗(yàn)的緩沖液、pH和試驗(yàn)技術(shù)類似于Mehdi等人，Biochemical and Biophysical Research Communications，166，595(1990)所描述的。從人痰中純化出酶，盡管最近它已經(jīng)可從市場(chǎng)上購買，用Dixon圖表示直接抑制劑的動(dòng)力學(xué)特征，而緩慢和/或緊密結(jié)合的抑制劑的特征使用Williams和Morrison綜述的數(shù)據(jù)分析技術(shù)。高敏感的和合適的彈性蛋白酶底物的合成和分析使用被描述在J.Bieth，B.Spiess和C.G.Wermuth，Biochemical Medicine，11(1974)350-375。表2總結(jié)了所選擇的化合物抑制彈性蛋白酶的能力。對(duì)于此表來說，MCBz是指4-(4-嗎啉羰基)苯甲酰基和Pyr是指3-(3-吡啶基)丙?；?。
表2
體內(nèi)試驗(yàn)在嚙齒動(dòng)物氣管中滴入HNE產(chǎn)生急性肺損傷，它可在支氣管洗出液(“BAL”)中通過測(cè)量血紅蛋白(“Hgb”)而定量測(cè)定；Fletcher，D.S.，等.，Am.Rev.Resp.Dis.141，672-677(1990)。用Fletcher，D.S.，等，Id.和Shah，S.K.等J.Med.Chem.35，3745-3754(1992)所述的方法，用嚙齒動(dòng)物的肺出血模型體內(nèi)測(cè)定式(I)-(IV)化合物降低肺出血和/或表示出抑制人中性白細(xì)胞彈性蛋白酶(“HNE”)的功效。
例如，用N-[3-(3-吡啶基)丙酰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，4-五氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代丁基]-L-脯酰胺(“Pyr-Val-Pro-Val-CF2CF3”)預(yù)處理倉鼠(10，25或50mg/kg，口服)，然后用HNE激發(fā)(20μg，氣管內(nèi)給藥)。在激發(fā)后1小時(shí)后殺死動(dòng)物，在氣管內(nèi)用HNE激發(fā)之前30分鐘給倉鼠服用25mg/kg口服劑量的Pyr-Val-Pro-Val-CF2CF3，通過BAL Hgb測(cè)定可得到HNE誘導(dǎo)的肺出血的抑制率為67±6％。
序列表(1)一般資料(I)申請(qǐng)人(A)名稱Merrell Dow Pharmacuticals Inc.
(B)街道2110 E.Galbraith Road(C)城市辛辛那提(D)州俄亥俄(E)國家美國(F)郵政編碼(ZIP)45215(G)電話513-948-7960(H)傳真513-948-7961(I)電傳214320(ii)發(fā)明名稱彈性蛋白酶的全氟烷基酮抑制劑及其制備方法(iii)序列數(shù)量6(iv)計(jì)算機(jī)讀取形式(A)介質(zhì)軟盤(B)計(jì)算機(jī)IBM PC兼容機(jī)(C)操作系統(tǒng)PC-DOS/MS-DOS(D)軟件PatenIn Release#1.0，Version#1.30(EPO)(2)關(guān)于SEQ ID NO1的資料(I)序列特征(A)長度4個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)直鏈(ii)分子類型肽(xi)序列描述SEQ ID NO1Xaa Xaa Xaa Xaa1(2)關(guān)于SEQ ID NO2的資料(I)序列特征(A)長度4個(gè)氨基酸
(B)類型氨基酸(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)直鏈(ii)分子類型肽(xi)序列描述SEQ ID NO2Xaa Xaa Xaa Xaa1(2)關(guān)于SEQ ID NO3的資料(I)序列特征(A)長度4個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)直鏈(ii)分子類型肽(xi)序列描述SEQ ID NO3Xaa Xaa Xaa Xaa1(2)關(guān)于SEQ ID NO4的資料(I)序列特征(A)長度4個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)直鏈(ii)分子類型肽(xi)序列描述SEQ ID NO4Xaa Xaa Xaa Xaa1(2)關(guān)于SEQ ID NO5的資料(I)序列特征(A)長度4個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)直鏈(ii)分子類型肽(xi)序列描述SEQ ID NO權(quán)利要求
1.下式化合物或其水合物、等排物或可藥用鹽，K-P4-P3-P2-NH-CH(R1)-C(＝O)-X′(SEQ.ID NO.1)其中P4為Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal、Nle或一條鍵；P3為Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal、Nle或N-甲基衍生基團(tuán)，Pro、Ind、Tic或Tca，或在其ε氨基上有嗎啉代-B-基團(tuán)取代的Lys或在其β氨基上有嗎啉代-B-基團(tuán)取代的Orn；P2為Pro、Ind、Tic、Pip、Tca、Pro(4-Obzl)、Aze、Pro(4-OAc)或Pro(4-OH)；R1為Ala、Leu、Ile、Val、Nva或bVal的一條側(cè)鏈；X為-CF2CF2CF3或-CF2CF2CF2CF3；K為氫、甲?；?、乙?；?、琥珀酰基、苯甲?；?、叔丁氧羰基、芐氧羰基、甲苯磺?；?、丹?；?、異戊酰基、甲氧基琥珀?；?、1-金剛烷基磺?；?、1-金剛烷基乙?；?-羧基苯甲?；?、苯基乙酰基、叔丁基乙?；?、二(1-萘基)甲基)乙?；?、-C(＝O)N-(CH3)2， -A-Rz，其中A為 Rz為含有6、10或12個(gè)碳原子的芳基，它可被1-3個(gè)獨(dú)立選自下列基團(tuán)的取代基合適地取代，所說取代基為氟、氯、溴、碘、三氟甲基、羥基、含有1-6個(gè)碳原子的烷基、含有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、羧基、其中烷基含有1-6個(gè)碳原子的烷基羰基氨基、5-四唑基以及含有1-15個(gè)碳原子的?；酋０被錀l件是當(dāng)?；酋０被蟹蓟鶗r(shí)，芳基可進(jìn)一步被選自氟、氯、溴、碘和硝基的基團(tuán)取代；或 其中Z為N或CH，以及B為下式基團(tuán) 或 并且其中的R是氫或C1-6烷基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1為-CH(CH3)2。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中K為叔丁氧羰基、芐氧羰基或?yàn)?其中Z為N，B為下式基團(tuán) 或 并且其中的R是氫或C1-6烷基。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中P3為Ile、Val或Ala。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中P4為Ala或一條鍵。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中P2為Pro、Pip、Pro(4-OBzl)或Aze。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中P3為Val。
8.權(quán)利要求7的化合物，其中P4為一條鍵。
9.權(quán)利要求8的化合物，其中P2為Pro。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中化合物為N-[4-(4-嗎啉基羰基)苯甲酰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-L-脯酰胺。
11.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中化合物為N-[4-(4-嗎啉基羰基)苯甲?；鵠-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，6、6、6-九氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代己基]-L-脯酰胺。
12.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中化合物為N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，5-七氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代戊基]-L-脯酰胺。
13.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中化合物為N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨?；?N’-[3，3，4，4，5，5，5，6，6，6-九氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代己基]-L-脯酰胺。
14.一種組合物，它包括權(quán)利要求1的化合物和載體。
15.一種藥物組合物，它包括權(quán)利要求1的化合物和可藥用載體。
16.一種抑制需要如此治療的患者的人中性白細(xì)胞彈性蛋白酶的方法，所說方法包括給患者施用治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
17.一種治療患有與中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥的方法，所說方法包括給患者施用治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中所述的與中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥為肺氣腫。
19.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中所述的與中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥為囊纖維變性。
20.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中所述的與中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥為慢性細(xì)支氣管炎。
21.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中所述的與中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥為慢性阻塞性肺病。
22.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中所述的與中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥為腸炎疾病。
23.制備下式化合物的方法K′-P4-P3-P2-NH-CH(R1)-C(＝O)-X(SEQ.ID NO.2)其中P4為Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal、Nle或一條鍵；P3為Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal、Nle或N-甲基衍生基團(tuán)，Pro、Ind、Tic或Tca，或在其ε氨基上有嗎啉代-B-基團(tuán)取代的Lys或在其β氨基上有嗎啉代-B-基團(tuán)取代的Orn；P2為Pro、Ind、Tic、Pip、Tca、Pro(4-OBzl)、Aze、Pro(4-OAc)或Pro(4-OH)；R1為Ala、Leu、Ile、Val、Nva或bVal的一條側(cè)鏈；X為-CF2CF3、-CF2CF2CF3或-CF2CF2CF2CF3；K為氫、甲?；?、乙?；?、琥珀?；?、苯甲酰基、叔丁氧羰基、芐氧羰基、甲苯磺?；?、丹?；愇祯；?、甲氧基琥珀?；?-金剛烷基磺?；?、1-金剛烷基乙?；?、2-羧基苯甲酰基、苯基乙酰基、叔丁基乙酰基、二((1-萘基)甲基)乙?；?、-C(＝O)N-(CH3)2， -A-Rz，其中A為 Rz為含有6、10或12個(gè)碳原子的芳基，它可被1-3個(gè)獨(dú)立選自下列基團(tuán)的取代基合適地取代，所說取代基為氟、氯、溴、碘、三氟甲基、羥基、含有1-6個(gè)碳原子的烷基、含有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、羧基、其中烷基含有1-6個(gè)碳原子的烷基羰基氨基、5-四唑基以及含有1-15個(gè)碳原子的?；酋０被?，其條件是當(dāng)?；酋０被蟹蓟鶗r(shí)，芳基可進(jìn)一步被選自氟、氯、溴、碘和硝基的基團(tuán)取代；該方法包括(a)在合適偶合劑和合適的偶合溶劑存在下使式NH2CH(R1)C(＝O)OR2(其中R2為(C1-6)烷基或(C3-12)環(huán)烷基)與式K-P4-P3-P2-OH的合適N-保護(hù)的肽偶合得到合適的N-保護(hù)的肽酯；(b)在合適的堿金屬堿和合適的無水溶劑存在下使合適N-保護(hù)的肽酯與合適的全氟化試劑反應(yīng)。
24.制備下式化合物的方法K＂-P4-P3-P2-NH-CH(R1)-C(＝O)-X(SEQ.ID NO.3)其中P4為Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal、Nle或一條鍵；P3為Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal、Nle或N-甲基衍生基團(tuán)，Pro、Ind、Tic或Tca，或在其ε氨基上有嗎啉代-B-基團(tuán)取代的Lys或在其β氨基上有嗎啉代-B-基團(tuán)取代的Orn；P2為Pro、Ind、Tic、Pip、Tca、Pro(4-Obzl)、Aze、Pro(4-OAc)或Pro(4-OH)；R1為Ala、Leu、Ile、Val、Nva或bVal的一條側(cè)鏈；X’為-CF2CF3、-CF2CF2CF3或-CF2CF2CF2CF3；K”為或 其中Z為N或CH，以及B為下式基團(tuán) 或 以及其中R 為氫或C1-6烷基；該方法包括(a)在合適偶合劑和合適的偶合溶劑存在下使式NH2CH(R1)C(＝O)OR2(其中R2為(C1-6)烷基)的氨基酸酯與式K‘-P4-P3-P2-OH的合適N-保護(hù)的肽偶合得到合適的N-保護(hù)的肽酯；(b)在合適的堿金屬堿和合適的無水溶劑存在下使合適N-保護(hù)的肽酯與合適的全氟化試劑反應(yīng)得到合適N-保護(hù)的全氟烷基肽；(c)在合適的有機(jī)溶劑存在下用合適的脫保護(hù)劑使合適的N-保護(hù)的全氟烷基肽脫保護(hù)得到全氟烷基肽；(d)在合適的非親核堿和合適的有機(jī)溶劑存在下，使全氟烷基肽與下式化合物反應(yīng)， 其中B和Z定義如上。
25.制備權(quán)利要求23的化合物的方法，包括下列步驟(a)在合適的堿金屬堿和合適的無水溶劑存在下使式Pg-NH-CH(R1)C(＝O)OR2(其中R2為(C1-6)烷基和Pg為合適的保護(hù)基)的合適保護(hù)的氨基酸酯與合適的全氟化劑反應(yīng)得到合適的N-保護(hù)的全氟烷基酮；(b)在合適的有機(jī)溶劑存在下用合適的脫保護(hù)劑使合適的N-保護(hù)的全氟烷基酮脫保護(hù)得到全氟烷基酮；(c)在合適偶合劑和合適的偶合溶劑存在下使全氟烷基酮與式K‘-P4-P3-P2-OH的合適保護(hù)的肽偶合。
26.制備權(quán)利要求24的化合物的方法，包括下列步驟(a)在合適的堿金屬堿和合適的無水溶劑存在下使式Pg-NH-CH(R1)C(＝O)OR2(其中R2為(C1-6)烷基和Pg為合適的保護(hù)基)的合適保護(hù)的氨基酸酯與合適的全氟化劑反應(yīng)得到合適的N-保護(hù)的全氟烷基酮；(b)在合適的有機(jī)溶劑存在下用合適的脫保護(hù)劑使合適N-保護(hù)的全氟烷基酮脫保護(hù)得到全氟烷基酮；(c)在合適偶合劑和合適的偶合溶劑存在下使全氟烷基酮與式K-P4-P3-P2-OH的合適保護(hù)的肽偶合。
27.下式化合物或其水合物、等排物或可藥用鹽， 其中P1為Ala、Val、 Nva、bVal、Leu、Ile或Nle；P2為Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal、Met、Nle、Gly、Phe、Tyr、Trp、或Nal(l)其中α-氨基基團(tuán)的氮原子可被R基團(tuán)取代，其中的R為(C1-6)烷基，(C3-12)環(huán)烷基、(C3-12)環(huán)烷基(C1-6)烷基，(C4-11)雙環(huán)烷基，(C4-11)雙環(huán)烷基(C1-6)烷基，(C6-10)芳基，(C6-10)芳基(C1-6)烷基，(C3-7)雜環(huán)基，(C3-7)雜環(huán)基(C1-6)烷基，(C5-9)雜芳基、(C5-9)雜芳基(C1-6)烷基，稠合的(C6-10)芳基(C3-12)環(huán)烷基，稠合的(C6-10)芳基(C3-12)環(huán)烷基(C1-6)烷基，稠合的(C5-9)雜芳基(C3-12)環(huán)烷基或稠合的(C5-9)雜芳基(C3-12)環(huán)烷基(C1-6)烷基，或P2為Pro、Ind、Tic或Tca；P3為Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal或Nle；P4為Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal、Nle或一條鍵。
28.權(quán)利要求27的化合物，其中P1為Val或Nva；P2為Pro、Tic或Tca；P3為Val、Nva、Ala或bVal；以及P4為Ala或一條鍵。
29.權(quán)利要求28的化合物，其中P1為Val；P3為Val；以及P4為一條鍵。
30.權(quán)利要求27的化合物，其中化合物為N-[3-(3-吡啶基)丙?；鵠-L-纈氨酰基-N’-[3，3，4，4，4-五氟-1-(1-甲基乙基)-2-氧代丁基]-L-脯酰胺。
31.一種組合物，它包括權(quán)利要求27的化合物和載體。
32.一種藥物組合物，它包括權(quán)利要求27的化合物和可藥用載體。
33.一種抑制需要如此治療的患者的人中性白細(xì)胞彈性蛋白酶的方法，所說方法包括給患者施用治療有效量的權(quán)利要求27的化合物。
34.一種治療患有與中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥的方法，所說方法包括給患者施用治療有效量的權(quán)利要求27的化合物。
35.根據(jù)權(quán)利要求34的方法，其中所述的與中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥為肺氣腫。
36.根據(jù)權(quán)利要求34的方法，其中所述的與中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥為囊纖維變性。
37.根據(jù)權(quán)利要求34的方法，其中所述的與中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥為慢性細(xì)支氣管炎。
38.根據(jù)權(quán)利要求34的方法，其中所述的與中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥為慢性阻塞性肺病。
39.根據(jù)權(quán)利要求34的方法，其中所述的與中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥為腸炎疾病。
40.權(quán)利要求1-13之一的化合物用作藥物活性化合物。
41.權(quán)利要求1-13之一的化合物的用途，它任選與可藥用載體混合制備人中性白細(xì)胞彈性蛋白酶抑制劑。
42.權(quán)利要求1-13之一的化合物的用途，它任選與可藥用載體混合制備治療與中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥的藥物組合物。
43.權(quán)利要求1-13之一的化合物的用途，它任選與可藥用載體混合制備治療氣腫的藥物組合物。
44.權(quán)利要求27-30之一的化合物用作藥物活性化合物。
45.權(quán)利要求27-30之一的化合物的用途，它任選與可藥用載體混合制備人中性白細(xì)胞彈性蛋白酶抑制劑。
46.權(quán)利要求27-30之一的化合物的用途，它任選與可藥用載體混合制備治療與中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥的藥物組合物。
47.權(quán)利要求27-30之一的化合物的用途，它任選與可藥用載體混合制備治療肺氣腫的藥物組合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及作為彈性蛋白酶特別是人中性白細(xì)胞彈性蛋白酶抑制劑的化合物，本發(fā)明還涉及制備上述化合物的新方法，作為人中性白細(xì)胞彈性蛋白酶抑制劑，本發(fā)明化合物可用于治療患有與中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥的患者。
文檔編號(hào)C07K5/103GK1149876SQ95193376
公開日1997年5月14日 申請(qǐng)日期1995年5月1日 優(yōu)先權(quán)日1994年6月2日
發(fā)明者小·W·A·梅茨, T·T·柯蘭, J·P·伯克哈特, M·R·安杰拉斯特羅, N·P·皮特 申請(qǐng)人:默里爾藥物公司