一種布雷菲德菌素a糖基化衍生物及其制備與應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種式（Ⅰ）所示布雷菲德菌素A糖基化衍生物及其制備方法與應(yīng)用，本發(fā)明提供一種新的布雷菲德菌素A糖基化衍生物，糖基化布雷菲德菌素A水溶性增強(qiáng)，且保留了布雷菲德菌素A的腫瘤抑制活性，體外檢測對人食管癌等癌細(xì)胞的有效抑制率高達(dá)80%；通過化合物(Ⅱ)條件優(yōu)化，獲得優(yōu)選的布雷菲德菌素A糖基化衍生物制備方法；式（Ⅰ）中，R為五碳糖、六碳糖、氨基六碳糖或六碳糖酸。
【專利說明】一種布雷菲德菌素A糖基化衍生物及其制備與應(yīng)用
(-)【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種布雷菲德菌素A衍生物合成技術(shù)，特別涉及一類布雷菲德菌素A糖基化衍生物制備及其應(yīng)用。
(二)【背景技術(shù)】
[0002]布雷菲德菌素A ((+)-Brefeldin A, BFA),是一種絲狀真菌合成的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，也稱之為斜臥菌素、殼二孢素。布雷菲德菌素A分子結(jié)構(gòu)中含有5個(gè)手性中心和I個(gè)13元大環(huán)內(nèi)酯結(jié)構(gòu)，結(jié)構(gòu)如式(I)所示。1958年,Singleton等人從Penicillium decumben發(fā)酵液中首次分離得到布雷菲德菌素A。大量研究報(bào)道，布雷菲德菌素A誘導(dǎo)高爾基體分解，抑制蛋白質(zhì)由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)向高爾基體的順向轉(zhuǎn)運(yùn)過程，具有抗真菌、抗病毒、抗有絲分裂和抗線蟲等生物學(xué)活性。美國腫瘤研究院(NCI)研究發(fā)現(xiàn)，布雷菲德菌素A能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化和凋亡，在小鼠腫瘤模型上表現(xiàn)出明確的抗腫瘤活性。布雷菲德菌素A作為化療試劑母核用于癌癥治療藥物具有廣闊的應(yīng)用前景。
[0003]然而，就成藥性而言,布雷菲德菌素A尚存在一些不足:①布雷菲德菌素A水溶性低?、诓祭追频戮谹胞內(nèi)半衰期短，Bruening等發(fā)現(xiàn)布雷菲德菌素A在細(xì)胞內(nèi)會在谷胱甘肽轉(zhuǎn)硫酶的作用下，迅速與谷胱甘肽結(jié)合并隨后被轉(zhuǎn)移出細(xì)胞；③布雷菲德菌素A缺乏作用靶標(biāo)專一性，對 正常體細(xì)胞有毒副作用。為了克服這些缺陷，對布雷菲德菌素A進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾提高其成藥性日益受到重視。
[0004]
【權(quán)利要求】
1.一種式(I)所示布雷菲德菌素A糖基化衍生物，

2.如權(quán)利要求1所述布雷菲德菌素A糖基化衍生物，其特征在于所述R為D-α -葡萄糖、D- α -氨基葡萄糖、D- α -阿拉伯糖、D- α -葡萄糖酸或D- α -甘露糖。
3.一種制備權(quán)利要求1所述布雷菲德菌素A糖基化衍生物的方法，其特征在于所述方法為:(I)將式(III)所示化合物和式(IV)所示布雷菲德菌A溶于有機(jī)溶劑中，加入活化的分子篩a，室溫下磁力攪拌10~60分鐘，降溫至O~-70°C，再加入催化劑和活化的分子篩b，磁力攪拌反應(yīng)完全后，反應(yīng)液經(jīng)分離純化獲得式(II)所示化合物；所述分子篩a為3 A型、
4.A型或5 A型分子篩，所述分子篩b與分子篩a相同，所述催化劑為路易斯酸；所述布雷菲德菌A與式(III)所示化合物的質(zhì)量比為1:2~5，所述布雷菲德菌A與活化的分子篩a和活化的分子篩b的質(zhì)量比為1:2~5:2~5，所述催化劑的體積用量以布雷菲德菌A質(zhì)量用量計(jì)為50~200微升/克，所述有機(jī)溶劑的體積用量以布雷菲德菌A質(zhì)量用量計(jì)為100~300毫升/克；(2)將式(II)化合物用溶劑溶解，冰浴條件下加入試劑，在0°C下攪拌IOmin后再于O~35°C下攪拌反應(yīng)2h，向反應(yīng)液中加入陽離子交換樹脂攪拌至反應(yīng)液pH為中性，過濾，獲得濾餅和濾液a，濾餅用二氯甲烷淋洗,合并濾液a和洗滌液并用飽合食鹽水清洗，無水硫酸鎂干燥，過濾，獲得濾液b，濾液b減壓濃縮，濃縮液以體積比1:1的乙酸乙酯和石油醚混合液為展開劑進(jìn)行薄層層析分離，收集Rf值為0.1~0.2的組分，減壓濃縮后真空干燥，得式(I )所示布雷菲德菌素A糖基化衍生物；所述溶劑為無水甲醇、無水乙醇、水或乙腈，所述試劑為甲醇鈉、乙醇鈉、乙酸或甲酸；
5.如權(quán)利要求1所述制備布雷菲德菌素A糖基化衍生物的方法，其特征在于步驟(1)所述布雷菲德菌A與式(III)所示化合物、活化的分子篩a和活化的分子篩b的質(zhì)量比為1:2.5~4:2.5:2.5，所述催化劑的體積用量以布雷菲德菌A質(zhì)量用量計(jì)為200微升/克；所述有機(jī)溶劑的體積用量以布雷菲德菌A質(zhì)量用量計(jì)為150毫升/克。
6.如權(quán)利要求1所述制備布雷菲德菌素A糖基化衍生物的方法，其特征在于步驟(1)所述催化劑為三氟化硼乙醚、三氟甲磺酸三甲基硅烷、三氟甲磺酸三乙基硅烷或三氟甲磺酸銀中的一種。
7.如權(quán)利要求1所述制備布雷菲德菌素A糖基化衍生物的方法，其特征在于步驟(1)所述反應(yīng)是在-70~O°C條件下反應(yīng)3~8小時(shí)。
8.如權(quán)利要求1所述制備布雷菲德菌素A糖基化衍生物的方法，其特征在于步驟(1)所述反應(yīng)液分離純化的方法為:反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)液過濾，獲得濾液c和濾餅,濾餅用二氯甲烷淋洗，將洗滌液與濾液c合并后用飽合食鹽水洗滌后加入無水硫酸鎂干燥,過濾,獲得濾液d，濾液d減壓濃縮，濃縮液以體積比1:1的乙酸乙酯與石油醚混合液為展開劑進(jìn)行薄層層析，收集Rf值為0.1~0.2的組分，減壓濃縮后真空干燥，獲得式(II)所示化合物。
9.如權(quán)利要求1所述制備布雷菲德菌素A糖基化衍生物的方法，其特征在于步驟(2)所述式(II)化合物與試劑的質(zhì)量比為1:0.1~0.2，所述溶劑體積用量以式(II)化合物質(zhì)量計(jì)為200~400毫升/克。
10.一種權(quán)利要求1所述布雷`菲德菌素A糖基化衍生物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】C07H1/00GK103739644SQ201310754867
【公開日】2014年4月23日 申請日期:2013年12月31日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月31日
【發(fā)明者】鄭裕國, 王亞軍, 吳植獻(xiàn), 薛鋒, 沈寅初 申請人:浙江工業(yè)大學(xué)