專利名稱：特利加壓素的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于多肽藥物制備方法技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及特利加壓素的制備方法。
背景技術(shù)：
特利加壓素具有以下的結(jié)構(gòu)
權(quán)利要求
1.特利加壓素的制備方法，包括固相多肽合成法制備特利加壓素線性肽樹脂、特利加壓素線性肽樹脂酸解得到特利加壓素線性肽粗品、特利加壓素線性肽粗品氧化后得到特利加壓素粗品、特利加壓素粗品純化得到特利加壓素純品，其中固相多肽合成法制備特利加壓素線性肽樹脂的方法為氨基樹脂通過固相偶聯(lián)合成法依次接入下列序列中對應(yīng)片段的 Fmoc-保護氨基酸，制備特利加壓素線性肽樹脂；R1-X-Cys (R2) -Tyr (tBu) -Phe-Gln (R3) -Asn (R3) -Cys (R2) -Pro-Lys (Boc) -Gly-樹脂其中，X 片段為 Gly-Gly-Gly, R1 為 R4 或 H，& 為 Trt 或 Acm，R3 為 Trt 或 H，R4 為 Fmoc 或 Boc ；接入X片段時僅用1次固相偶聯(lián)合成反應(yīng)，接入X時對應(yīng)的Fmoc-保護氨基酸為 Fmoc-Gly-Gly-Gly-OHo
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的特利加壓素的制備方法，其特征在于所述氨基樹脂取代值為 0. 2 1. 2mmol/g 樹脂。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的特利加壓素的制備方法，其特征在于所述氨基樹脂選自Rink Amide AM樹脂、Rink Amide樹脂、Rink MBHA樹脂和Sieber樹脂中的一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的特利加壓素的制備方法，其特征在于所述Fmoc-保護氨基酸種類分別為鞏-X-OH、Fmoc-Cys (R2) -OH、Fmoc-Asn (R3) -OH、Fmoc-Gln (R3) -0H、 Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH>Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH ；其中，X 為 Gly-Gly-Gly，R2 為 Trt 或 Acm，R3 為 Trt 或 H，R4 為 Fmoc 或 Boc。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的特利加壓素的制備方法，其特征在于=Fmoc-保護氨基酸用量為所投料樹脂總摩爾數(shù)的1. 2 6倍。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的特利加壓素的制備方法，其特征在于固相偶聯(lián)合成法具體為前一步反應(yīng)得到的Fmoc-保護氨基酸-樹脂脫去保護Fmoc后再與下一個保護氨基酸偶聯(lián)反應(yīng)；脫去Fmoc保護的試劑為哌啶/N，N-二甲基甲酰胺溶液，哌啶體積比為10 30%。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的特利加壓素的制備方法，其特征在于固相偶聯(lián)合成法需添加縮合試劑和活化試劑，縮合試劑選自N，N-二異丙基碳二亞胺、N，N-二環(huán)己基碳二亞胺， 六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷、2- (7-氮雜-IH-苯并三氮唑-1-基)-1，1， 3，3-四甲基脲六氟磷酸酯、苯并三氮唑-N，N，N' ,N'-四甲基脲六氟磷酸鹽或O-苯并三氮唑-N，N，N' ,N'-四甲基脲四氟硼酸酯；活化試劑選自1-羥基苯并三唑、N-羥基-7-氮雜苯并三氮唑。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的特利加壓素的制備方法，其特征在于縮合試劑的摩爾用量為氨基樹脂中氨基總摩爾數(shù)的1. 2 6倍；活化試劑用量為氨基樹脂中氨基總摩爾數(shù)的 1. 2 6倍。
9.根據(jù)權(quán)利要求1 8任一項所述的特利加壓素的制備方法，其特征在于特利加壓素線性肽樹脂經(jīng)酸解同時脫去樹脂及側(cè)鏈保護基得到特利加壓素線性肽粗品H-X-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-LyS-Gly-NH2其中，X 為 Gly-Gly-Gly。酸解劑為三氟醋酸、1，2-乙二硫醇和水混合溶劑，混合溶劑的配比為三氟醋酸的體積比為80 95%，1，2-乙二硫醇的體積比為1 10%，余量為水；酸解劑用量為每克肽樹脂4 15ml酸解劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求1 8任一項所述的特利加壓素的制備方法，其特征在于特利加壓素線性肽粗品氧化后得到特利加壓素粗品時，特利加壓素線性肽先用醋酸溶解，過濾后用氧化劑氧化環(huán)化，氧化劑為碘、H2O2或DMSO中的至少一種。
全文摘要
本發(fā)明屬于多肽藥物制備方法技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及特利加壓素的制備方法。本發(fā)明方法使用了保護氨基酸片段Gly-Gly-Gly為原料，避免了雜質(zhì)的產(chǎn)生。本發(fā)明特方法包括固相多肽法制特利加壓素線性肽樹脂、酸解得到特利加壓素線性肽粗品、氧化后得到特利加壓素粗品、純化得特利加壓素純品，其中固相多肽法為氨基樹脂通過固相偶聯(lián)合成法依次接入下列序列中對應(yīng)片段的Fmoc-保護氨基酸，制備特利加壓素線性肽樹脂;R1-X-Cys(R2)-Tyr(tBu)-Phe-Gln(R3)-Asn(R3)-Cys(R2)-Pro-Lys(Boc)-Gly-樹脂其中，X片段為Gly-Gly-Gly，R1為R4或H，R2為Trt或Acm，R3為Trt或H，R4為Fmoc或Boc；接入X片段時僅用1次固相偶聯(lián)合成反應(yīng)。本發(fā)明使用了新原料，提高了產(chǎn)品收率，使生產(chǎn)周期大大縮短。
文檔編號C07K7/16GK102408471SQ20111017115
公開日2012年4月11日 申請日期2011年6月23日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月23日
發(fā)明者文永均, 王曉莉, 郭德文 申請人:成都圣諾科技發(fā)展有限公司