專利名稱：一種瀉鼠李皮苷b的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種瀉鼠李皮苷B的制備方法，尤其是一種從植物中提取瀉鼠李皮苷 B的制備方法。
背景技術(shù)：
瀉鼠李皮苷B (Frangulin B)，分子式C2(1H1809，分子量402. 357，CAS 登錄號 14101-04-3，主要存在于鼠李科多種植物中。其中鼠李科植物歐鼠李Rhamnus frangula L.的樹皮中含量豐富，其分子式如下。現(xiàn)代研究表明，瀉鼠李皮苷B具有抗腫瘤、抑制血小板聚集等作用，同時其也作為合成其它活性衍生物的原料。鼠李科植物歐鼠李Rhemnus frangula L.的樹皮被作為中藥藥綠材使用，能潤腸通便?，F(xiàn)有技術(shù)中，尚沒有適用于高純度瀉鼠李皮苷B工業(yè)化大生產(chǎn)的制備工藝報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種利于大生產(chǎn)操作、產(chǎn)品純度高的瀉鼠李皮苷B的制備方法。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用下列技術(shù)方案。取歐鼠李樹皮，粉碎，加入其質(zhì)量8-12倍量體積濃度為50-70%的乙醇，投入微波萃取裝置中進行微波萃取，萃取功率300-600W，萃取1-3次，每次3-10分鐘，合并萃取液，濾過，減壓回收乙醇并濃縮，以比例為3:1的乙酸乙酯-水混合溶劑進行6-8級逆流萃取，合并乙酸乙酯層，減壓回收乙醇并濃縮，通過大孔吸附樹脂吸附，70-80%乙醇洗脫，收集3-8 倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，加入丙酮結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥，即得。微波萃取用乙醇的濃度為60%，用量為原料質(zhì)量的10倍量體積。微波萃取功率500W，萃取2次，每次8分鐘。逆流萃取的級數(shù)為7級。大孔吸附樹脂選自AB-8型、HPD-700型、H-50型大孔吸附樹脂中的一種。大孔吸附樹脂洗脫用乙醇的濃度為75%。大孔吸附樹脂洗脫用乙醇的收集量為5倍量柱體積。制備所得瀉鼠李皮苷B可采用下列方法檢測。
試驗例1 HPLC法測定瀉鼠李皮苷B純度。色譜條件
色譜柱十八烷基硅烷鍵合膠硅膠為填充劑；流動相甲醇-乙腈溶液(90 10)；流速:lmL/min ；檢測波長:255nm ；柱溫:30°C。測定方法
精密稱取瀉鼠李皮苷B2mg，置于50mL量瓶中，加人甲醇20mL，超聲振蕩使溶解，甲醇定容至刻度，吸取10 μ L，注入高效液相色譜儀，采用歸一化法測定樣品純度。采用本發(fā)明制備瀉鼠李皮苷B，利于大生產(chǎn)操作，能耗小，污染小。下面將結(jié)合具體實施方式
對本發(fā)明作進一步闡述，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施例方式實施例1
取歐鼠李樹皮10Kg，粉碎，加入80L濃度為50%的乙醇，投入微波萃取裝置中進行微波萃取，萃取功率300W，萃取1次，3分鐘，合并萃取液，濾過，減壓回收乙醇并濃縮，以比例為 3:1的乙酸乙酯-水混合溶劑進行6級逆流萃取，合并乙酸乙酯層，減壓回收乙醇并濃縮， 通過AB-8型大孔吸附樹脂吸附，70%乙醇洗脫，收集3倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，加入丙酮結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥，即得瀉鼠李皮苷Bll. 3g，經(jīng)HPLC檢測，純度為 95. 0%，UV、IKMSjHNMR^CMffi等表征其物理性狀的數(shù)據(jù)與現(xiàn)有技術(shù)相一致。實施例2
取歐鼠李樹皮10Kg，粉碎，加入120L濃度為70%的乙醇，投入微波萃取裝置中進行微波萃取，萃取功率600W，萃取3次，每次10分鐘，合并萃取液，濾過，減壓回收乙醇并濃縮， 以比例為3:1的乙酸乙酯-水混合溶劑進行8級逆流萃取，合并乙酸乙酯層，減壓回收乙醇并濃縮，通過HPD-700型大孔吸附樹脂吸附，80%乙醇洗脫，收集8倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，加入丙酮結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥，即得瀉鼠李皮苷B13. 3g，經(jīng)HPLC檢測，純度為94. 2%，UV、IR, MS,2HNMR, 13CNMR等表征其物理性狀的數(shù)據(jù)與現(xiàn)有技術(shù)相一致。實施例3
取歐鼠李樹皮10Kg，粉碎，加入100L濃度為60%的乙醇，投入微波萃取裝置中進行微波萃取，萃取功率500W，萃取2次，每次8分鐘，合并萃取液，濾過，減壓回收乙醇并濃縮，以比例為3 1的乙酸乙酯-水混合溶劑進行7級逆流萃取，合并乙酸乙酯層，減壓回收乙醇并濃縮，通過H-50型大孔吸附樹脂吸附，75%乙醇洗脫，收集5倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，加入丙酮結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥，即得瀉鼠李皮苷B12. 9g，經(jīng)HPLC檢測，純度為98. 3%，UV、IR, MS,2HNMR, 13CNMR等表征其物理性狀的數(shù)據(jù)與現(xiàn)有技術(shù)相一致。
權(quán)利要求
1.一種瀉鼠李皮苷B的制備方法，其特征在于所述的方法由下列步驟組成取歐鼠李樹皮，粉碎，加入其質(zhì)量8-12倍量體積濃度為50-70%的乙醇，投入微波萃取裝置中進行微波萃取，萃取功率300-600W，萃取1-3次，每次3-10分鐘，合并萃取液，濾過，減壓回收乙醇并濃縮，以比例為3:1的乙酸乙酯-水混合溶劑進行6-8級逆流萃取，合并乙酸乙酯層， 減壓回收乙醇并濃縮，通過大孔吸附樹脂吸附，70-80%乙醇洗脫，收集3-8倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，加入丙酮結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥，即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種瀉鼠李皮苷B的制備方法，其特征在于所述微波萃取用乙醇的濃度為60%，用量為原料質(zhì)量的10倍量體積。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種瀉鼠李皮苷B的制備方法，其特征在于所述微波萃取功率 500W，萃取2次，每次8分鐘。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種瀉鼠李皮苷B的制備方法，其特征在于所述逆流萃取的級數(shù)為7級。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種瀉鼠李皮苷B的制備方法，其特征在于所述大孔吸附樹脂選自AB-8型、HPD-700型、H-50型大孔吸附樹脂中的一種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種瀉鼠李皮苷B的制備方法，其特征在于所述大孔吸附樹脂洗脫用乙醇的濃度為75%。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種瀉鼠李皮苷B的制備方法，其特征在于所述大孔吸附樹脂洗脫用乙醇的收集量為5倍量柱體積。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種操作簡便、污染小、能耗少的瀉鼠李皮苷B的制備方法。工藝步驟為取歐鼠李樹皮，粉碎，加入乙醇，投入微波萃取裝置中進行微波萃取，合并萃取液，濾過，減壓回收乙醇并濃縮，以比例為3:1的乙酸乙酯-水混合溶劑進行6-8級逆流萃取，合并乙酸乙酯層，減壓回收乙醇并濃縮，通過大孔吸附樹脂吸附,乙醇洗脫，加入丙酮結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥，即得。采用本發(fā)明制備瀉鼠李皮苷B，產(chǎn)品純度高，易于實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化放大。
文檔編號C07H1/08GK102250169SQ20111015060
公開日2011年11月23日 申請日期2011年6月7日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月7日
發(fā)明者張發(fā)成, 王峰, 王琳 申請人:蘇州派騰生物醫(yī)藥科技有限公司