專利名稱：細胞因子-超抗原融合蛋白在制備抗癌藥物的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種融合蛋白的用途，特別是涉及一種細胞因子-超抗原融合蛋白在 制備抗癌藥物的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
表皮生長因子(Epidermal growth factor，EGF)和血管內(nèi)皮細胞生長因子 (Vascularendothelial cell growth factor，VEGF)等的受體在各種腫瘤組織中大量 表達，例如在腸黏膜腫瘤中的EGF受體比正常組織高出300倍((Gastroenterology，98， 961-967，1990)。所以，異常高表達的EGF受體和VEGF受體成為一個引人注目的腫瘤治療 靴點(Ann Oncol, 17Suppl 7 :viil09-114, 2006 ；Clin Cancer Res，12，5018-5022，2006)。表皮生長因子連接到一種毒素蛋白或RNA水解酶上可選擇性殺傷高表達EGF受體 的腫瘤細胞(Clin Cancer Res, 11,329-334,2005 ；Protein Eng, 11,1285-1292,1998), H 樣血管內(nèi)皮細胞生長因子(Vascular endothelial cell growth factor, VEGF)也能與毒 素形成融合蛋白質(zhì)來抑制腫瘤(Proc Natl Acad Sci USA，99，7866-7871，2002)。這里的 EGF-毒素或VEGF-毒素的融合蛋白是利用EGF或VEGF與腫瘤細胞上的EGF受體(EGFR)或 VEGF受體(VEGFR)相互作用而將融合蛋白定位到腫瘤細胞上，再通過融合蛋白中的毒素蛋 白來直接殺傷腫瘤細胞。但這種方式不是依靠免疫系統(tǒng)例如淋巴細胞等攻擊腫瘤。腫瘤細胞是由正常細胞轉(zhuǎn)變而來的，腫瘤細胞的抗原是自身抗原，所以腫瘤細胞 能夠逃避免疫系統(tǒng)的監(jiān)視。人們一直在尋找新的抗腫瘤方法來提高腫瘤病人的免疫力，特 別是針對腫瘤細胞的特異性免疫力。因此，本領(lǐng)域迫切需要一種特別針對腫瘤細胞的強有 力的新的抗腫瘤藥物用于治療目的。中國專利申請?zhí)?003101098 . 7“一種可用以抗癌治療的超抗原融合蛋白質(zhì)及其 生產(chǎn)方法”公開了一種構(gòu)建細胞因子和超抗原的融合蛋白的方法以及這種融合蛋白質(zhì)在大 腸桿菌中表達和純化方法。中國專利申請?zhí)?01010118438. 1“細胞因子-超抗原融合蛋白在制備抗實體瘤藥 物的應(yīng)用”公開了細胞因子-超抗原融合蛋白可以抑制小鼠肉瘤腫瘤Sarcoma 180(S180)。上面兩個專利所使用的融合蛋白中的超抗原是金黃色葡萄球菌腸毒素 A(Staphylococcal-enterotoxin A, SEA)，并且在基因序列中顯示第227位置上有一個 將Asp改變?yōu)锳la的點突變。而專利文獻中的EGF和VEGF是根據(jù)公開文獻(EGF基因 文獻=NucleicAcids Res, 10，4467-4482，1982 ；Nature, 303，722-725，1983 ；VEGF 基因文 獻=Science,246,1306-1309，1989 ；Science,246，1309-1312，1989 ;J Biol Chem,266， 11947-11954,1991)制備的，屬于人來源的EGF和VEGF基因，從而構(gòu)建成EGF-SEA和 VEGF-SEA兩種超抗原融合蛋白。SEA不需要抗原提呈細胞的加工處理，而以完整蛋白質(zhì)形式直接與細胞膜上的主 要組織相容性抗原-II (Major histocompatibility complex class, MHC-II)類分子結(jié)合 形成復合物，識別T cell receptor(TCR)的νβ片段，激活比普通抗原多得多T細胞(包括CD4+，CD8+)，并釋放大量細胞因子，對靶細胞產(chǎn)生強而有力的細胞毒作用。瑞典的一個 小組的抗體超抗原融合蛋白對于B16黑色素瘤的肺轉(zhuǎn)移進行了很多研究(Proc Natl Acad Sci USA，92，9791-9795，1995 ；Eur Surg Res，35，457-463，2003)。為 了減輕 SEA 的副作用， 在它的第227位置上引入了一個點突變，將Asp改變?yōu)锳la (Proc Natl Acad Sci USA, 94, 2489-2494，1997)。中國專利申請?zhí)?01010118438. 1 “細胞因子-超抗原融合蛋白在制備抗實體 瘤藥物的應(yīng)用”公開了 EGF-SEA和VEGF-SEA可誘導動物體內(nèi)由T細胞分泌的細胞因子 例如月中瘤壞死因子一a (Tumor necrosis factor, TNF-α )、干擾素一γ (Interferon—γ , IFN- γ )和白細胞介素-2(Interleukin-2，IL_2)，還可以誘導T細胞分泌分泌穿孔素和顆 粒酶，細胞因子TNF-α和IFN-Y可以誘導腫瘤細胞凋亡，而穿孔素和顆粒酶可直接殺傷腫 瘤細胞(Immunol Today 16，194-201，1995 ；Immunol Today 16,202-206,1995 ；Cell Mol Immunol，6，15-25，2009)，專利的融合蛋白中的超抗原SEA含有D227A的點突變。這些由T 細胞產(chǎn)生的殺傷腫瘤細胞的作用被稱是細胞毒作用(Cytotoxicity)。所以這里所描述的EGF-SEA和VEGF-SEA融合蛋白的作用方式與抗體是不同的， 而且與很復雜的抗體人源化的基因工程操作以及高成本的動物細胞培養(yǎng)體系來比較， EGF-SEA和VEGF-SEA是很方便的抗癌手段。根據(jù)大量文獻報道，大多數(shù)實體腫瘤的癌細胞有大量EGFR和VEGFR表達(Nat Rev ClinOncol，6，569-579，2009)，特別是乳腺癌(Oncologist,14，378-390，2009 ； Breast Cancer，14，132-149，2007)、結(jié)腸癌(Cl in Transl Oncol,10,6-13,2008 ； Adv Exp Med Biol，587，251-275，2006)、胃癌(Jpn J Clin Oncol，39，543-551，2009 ； J Cancer Res Clin Oncol,135,855-866, 2009 ；Cancer Treat Rev,30，451-459，2004)、 肝癌(Histol Histopathol，24，493-502，2009 ;H印atology，48，1312-1327,2008 ;Curr Pharm Des，13，3301-3304，2007)和肺癌(Clin Lung Cancer, 11，82-90，2010 ；Expert Opin Pharmacother, 11,2363-2389,2010 ；Curr Med Chem，14，3157-3165，2007)等，這些腫瘤上 的EGFR和VEGFR就成為抗癌藥物的靶點。因為乳腺癌、結(jié)腸癌、胃癌、肝癌和肺癌腫瘤細胞表達大量EGFR和VEGFR，就可用 EGF-SEA和VEGF-SEA誘導和刺激T淋巴細胞來殺傷乳腺癌、結(jié)腸癌、胃癌、肝癌和肺癌。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種細胞因子-超抗原融合蛋白在 制備抗癌藥物的應(yīng)用。本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下細胞因子-超抗原融合蛋白在制備抗癌藥物的應(yīng)用，所述細胞因子為表皮生長因 子或血管內(nèi)皮細胞生長因子，所述超抗原為金黃色葡萄球菌腸毒素A的超抗原。所述細胞因子-超抗原融合蛋白能夠動員人T淋巴細胞，并將所述T淋巴細胞靶 向性地定位到腫瘤細胞周圍，所述人T淋巴細胞具有CD4+或CD8+特征。所述細胞因子-超抗原融合蛋白能誘導人T淋巴細胞分泌細胞因子白細胞介 素_2、干擾素-Y和腫瘤壞死因子-α。所述癌為乳腺癌、結(jié)腸癌、胃癌、肝癌或肺癌。
所述乳腺癌為人乳腺癌。所述結(jié)腸癌為人結(jié)腸癌。所述胃癌為人胃癌。所述肝癌為人肝癌。所述肺癌為人肺癌。本發(fā)明的優(yōu)點EGF-SEA和VEGF-SEA融合蛋白雖然與EGF-毒素或VEGF-毒素融合蛋白同樣利 用EGF或VEGF與EGF受體或VEGF受體相互作用而達到腫瘤細胞定位目的，但EGF-SEA和 VEGF-SEA是利用T淋巴細胞來殺傷腫瘤的，這與EGF-毒素或VEGF-毒素融合蛋白的抑制腫 瘤的作用原理不同。細胞因子-超抗原融合蛋白實際上是代替現(xiàn)有技術(shù)的抗體的，也具有 靶向作用，是區(qū)別于抗體的新的可期待的抗腫瘤藥物，實驗證明，它可以制備抗人乳腺癌、 人結(jié)腸癌、人胃癌、人肝癌和人肺癌腫瘤細胞的藥物。所述細胞因子-超抗原融合蛋白能夠動員和激活T淋巴細胞，所述T淋巴細胞具 有CD4+或CD8+特征，并將T淋巴細胞靶向性地定位到腫瘤細胞周圍。所述細胞因子-超抗原融合蛋白誘導T細胞分泌白細胞介素_2、干擾素-Y和腫 瘤壞死因子-α。所述細胞因子-超抗原融合蛋白能將T淋巴細胞集結(jié)到人乳腺癌腫瘤細胞周圍并 誘導和激活T淋巴細胞殺傷人乳腺癌腫瘤細胞。所述細胞因子-超抗原融合蛋白能將T淋巴細胞集結(jié)到人結(jié)腸癌腫瘤細胞周圍并 誘導和激活T淋巴細胞殺傷人結(jié)腸癌腫瘤細胞。所述細胞因子-超抗原融合蛋白能將T淋巴細胞集結(jié)到人胃癌腫瘤細胞周圍并誘 導和激活T淋巴細胞殺傷人胃癌腫瘤細胞。 所述細胞因子-超抗原融合蛋白能將T淋巴細胞集結(jié)到人肝癌腫瘤細胞周圍并誘 導和激活T淋巴細胞殺傷人肝癌腫瘤細胞。所述細胞因子-超抗原融合蛋白能將T淋巴細胞集結(jié)到人肺癌腫瘤細胞周圍并誘 導和激活T淋巴細胞殺傷人肺癌腫瘤細胞。


圖1為被LSS670蛋白染料標記的EGF-SEA和VEGF-SEA分別與T淋巴細胞結(jié)合的 流式細胞實驗的細胞分布。(圖中1-1為不加蛋白，1-2為EGF-SEA，1-3為VEGF-SEA)圖2為SEA、EGF-SEA和VEGF-SEA誘導T淋巴細胞分泌細胞因子IL_2、IFN_ γ和 TNF- α 0圖3為被LSS670蛋白染料標記的EGF-SEA和VEGF-SEA分別與MCF-7乳腺癌腫 瘤細胞結(jié)合的流式細胞實驗的細胞分布。(圖中3-1為不加蛋白，3-2為EGF-SEA，3-3為 VEGF-SEA)圖4為根據(jù)流式細胞實驗所得到的MCF-7乳腺癌、Caco-2結(jié)腸癌、NCI-N87胃癌、 H印G2肝癌和A549肺癌人腫瘤細胞分別與被標記的EGF-SEA或VEGF-SEA結(jié)合的百分比數(shù)。圖5為在不加蛋白、分別加SEA、EGF-SEA或VEGF-SEA情況下，腫瘤細胞周圍的T 細胞數(shù)量分布。
圖6為顯微鏡觀察MCF-7腫瘤細胞。(圖中6_1為EGF-SEA組，6-2為VEGF-SEA 組)圖7為顯微鏡觀察Caco-2腫瘤細胞。(圖中7_1為不加蛋白的對照組，7_2為SEA 組，7-3 為 EGF-SEA 組，7-4 為 VEGF-SEA 組)圖8為T細胞對5種腫瘤細胞殺傷的細胞毒作用。圖9為單克隆MCF-7腫瘤細胞表達EGF-SEA和VEGF-SEA。(圖中9_1和9-2為 表達EGF-SEA，9-3和9_4表達VEGF-SEA，9-1和9_3為普通顯微鏡觀察，9_2和9_4為熒光 顯微鏡觀察)圖10為單克隆Caco-2腫瘤細胞表達EGF-SEA和VEGF-SEA。(圖中10-1和10-2 為表達EGF-SEA，10-3和10_4表達VEGF-SEA，10-1和10_3為普通顯微鏡觀察，10-2和10_4 為熒光顯微鏡觀察)圖11為單克隆NCI-N87腫瘤細胞表達EGF-SEA和VEGF-SEA。(圖中11-1和11-2 為表達EGF-SEA，11-3和11-4表達VEGF-SEA，11-1和11-3為普通顯微鏡觀察，11-2和11-4 為熒光顯微鏡觀察)圖12為單克隆Hep G2腫瘤細胞表達EGF-SEA和VEGF-SEA。(圖中12-1和12-2 為表達EGF-SEA，12-3和12-4表達VEGF-SEA，12-1和12-3為普通顯微鏡觀察，12-2和12-4 為熒光顯微鏡觀察)圖13為單克隆A549腫瘤細胞表達EGF-SEA和VEGF-SEA。(圖中13_1和13-2為 表達EGF-SEA，13-3和13-4表達VEGF-SEA，13-1和13-3為普通顯微鏡觀察，13-2和13-4 為熒光顯微鏡觀察)圖14為T細胞攻擊表達EGF-SEA或VEGF-SEA的單克隆MCF-7腫瘤細胞。(圖中 14-1和14-2為表達EGF-SEA組，14-3和14-4為表達VEGF-SEA組，14-1和14-3為普通顯 微鏡觀察，14-2和14-4為熒光顯微鏡觀察)圖15為T細胞攻擊表達EGF-SEA或VEGF-SEA的單克隆Caco_2腫瘤細胞。(圖 中15-1和15-2為表達EGF-SEA組，15-3和15-4為表達VEGF-SEA組，15-1和15-3為普 通顯微鏡觀察，15-2和15-4為熒光顯微鏡觀察)圖16為T細胞攻擊表達EGF-SEA或VEGF-SEA的單克隆NCI-N87腫瘤細胞。(圖 中16-1和16-2為表達EGF-SEA組，16-3和16-4為表達VEGF-SEA組，16-1和16-3為普 通顯微鏡觀察，16-2和16-4為熒光顯微鏡觀察)圖17為T細胞攻擊表達EGF-SEA或VEGF-SEA的單克隆H印G2腫瘤細胞。(圖 中17-1和17-2為表達EGF-SEA組，17-3和17-4為表達VEGF-SEA組，17-1和17-3為普 通顯微鏡觀察，17-2和17-4為熒光顯微鏡觀察)圖18為T細胞攻擊表達EGF-SEA或VEGF-SEA的單克隆A549腫瘤細胞。(圖中 18-1和18-2為表達EGF-SEA組，18-3和18-4為表達VEGF-SEA組，18-1和18-3為普通顯 微鏡觀察，18-2和18-4為熒光顯微鏡觀察)
具體實施例方式本發(fā)明利用細胞因子-超抗原融合蛋白質(zhì)，其中的促進癌細胞生長的細胞因子可 以將融合蛋白質(zhì)定位到腫瘤細胞上，而超抗原則在腫瘤細胞周圍引起抗癌的免疫反應(yīng)，即超抗原依賴的細胞介導的細胞毒作用(Superantigen-d印endent-cellular-cytotoxicit y，SDCC)。利用此方法就可以將這種類型的融合蛋白質(zhì)特異地定位到腫瘤細胞上并在腫瘤 細胞周圍引起抗癌的細胞毒免疫反應(yīng)。下面通過具體實施例對本發(fā)明作進一步的說明。實施例1融合蛋白誘導T淋巴細胞活性外周血細胞購自天津血液中心以及從健康人獲得，用Ficoll密度離心和尼龍 毛柱方法法取得T淋巴細胞(J Clin hvest^l，1490-1498，1993)，以后再用利用試劑 盒 Human CD4+T Cell Enrichment Column 禾口 Human CD8+T Cell Enrichment Column(R&D Systems公司)分離純化⑶4和⑶8陽性T淋巴細胞，將⑶4和⑶8細胞分別計數(shù)并等量混
口 O利用已申請專利(中國專利申請?zhí)?00310109829. 7“一種可用以抗癌治療的超抗 原融合蛋白質(zhì)及其生產(chǎn)方法”和中國專利申請?zhí)?01010118438. 1 “細胞因子-超抗原融合 蛋白在制備抗實體瘤藥物的應(yīng)用”)中的SEA、EGF-SEA和VEGF-SEA來誘導這些T細胞分泌 細胞因子IL-2、IFN-y和TNF-α。這里的超抗原SEA含有D227A的點突變，融合蛋白中的 EGF和VEGF都是人的EGF和VEGF的基因，而且蛋白都經(jīng)過變復性以及純化等操作。為了分析EGF-SEA和VEGF-SEA與T細胞相互作用，用流式細胞方法。按照LSS670 蛋白染料(Kodak公司)說明書的方法將染料分別標記到EGF-SEA和VEGF-SEA，1500rpm 離心收集腫瘤細胞，PBS重懸浮。⑶4和⑶8細胞等量混合T細胞Qx IO6)分別用50pmol 的LSS670染料標記的EGF-SEA或VEGF-SEA蛋白4°C孵育30分鐘，然后用冷PBS洗3次。 通過流式細胞儀BD FACS Calibur分析EGF-SEA和VEGF-SEA結(jié)合T細胞能力。圖1表明 90-95%以上的T細胞能與被標記的EGF-SEA(圖1_2)或VEGF_SEA(圖1_3)結(jié)合，而圖1_1 是不加蛋白僅僅是T細胞的對照樣品。同時對于SEA進行了同樣的操作，發(fā)現(xiàn)90%以上T 細胞也能與SEA結(jié)合。所以EGF-SEA和VEGF-SEA與SEA —樣有著同樣的與T細胞相互作 用的功能。用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)純化后的T細胞，然后分別加入SEA、EGF-SEA和VEGF-SEA 蛋白，用ELISA試劑盒(R&D Systems公司)檢測培養(yǎng)基中由T細胞受到SEA、EGF-SEA和 VEGF-SEA誘導后分泌的細胞因子IL-2、IFN- γ和TNF- α的量。圖2表明EGF-SEA和 VEGF-SEA能和SEA —樣誘導和刺激T細胞分泌細胞因子，也就是能夠誘導和激活T淋巴細 胞。上面的實驗說明了 EGF-SEA和VEGF-SEA通過融合蛋白中的超抗原SEA來誘導和 激活T淋巴細胞，促使被活化的T細胞分泌各種細胞因子。實施例2融合蛋白與人腫瘤細胞相互作用所有人腫瘤細胞株從美國ATCC(American Type Culture Collection)機構(gòu)和中 國科學院典型培養(yǎng)物保藏委員會細胞庫等細胞庫購得。用被LSS670染料標記的EGF-SEA 和VEGF-SEA來分析融合蛋白與腫瘤細胞的相互作用，即進行流式細胞實驗分析，各種腫瘤 細胞(hlO6)分別用50pmol的LSS670染料標記的EGF-SEA或VEGF-SEA蛋白4°C孵育30 分鐘，然后用冷PBS洗3次，通過流式細胞儀分析EGF-SEA和VEGF-SEA結(jié)合腫瘤細胞的能 力。圖3是被標記融合蛋白分別與MCF-7人乳腺癌腫瘤細胞進行流式細胞實驗的細胞 分布，顯示85%以上的腫瘤細胞能夠與標記的EGF-SEA(圖3_2)或VEGF_SEA(圖3_3)相結(jié)合，而圖3-1是不加蛋白僅是MCF-7腫瘤細胞的對照樣品。圖4是根據(jù)流式細胞實驗所得的 MCF-7人乳腺癌、Caco-2人結(jié)腸癌、NCI-N87人胃癌、Hep G2人肝癌和A549人肺癌的腫瘤 細胞分別與標記EGF-SEA或VEGF-SEA結(jié)合的百分比數(shù)，在只有標記蛋白存在的情況下，顯 示80%以上腫瘤細胞與標記融合蛋白結(jié)合，而在等量標記蛋白和未標記蛋白一起孵育即有 競爭性結(jié)合的情況下，腫瘤細胞與標記融合蛋白結(jié)合數(shù)下降到50%左右，這表明EGF-SEA 和VEGF-SEA不僅能與這些人腫瘤細胞相互作用，而且這些腫瘤細胞表面上有大量EGFR和 VEGFR存在。實施例3融合蛋白誘導T淋巴細胞集結(jié)在腫瘤細胞周圍并殺傷腫瘤細胞在6孔板上用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)人腫瘤來源的MCF-7、Caco-2、NCI-N87、H印G2 和A549腫瘤細胞，濃度為2xl05個/孔，然后加入T細胞，再分別加入SEA、EGF-SEA和 VEGF-SEA。細胞毒作用或癌細胞殺傷效果采用MTT (Methabenzthiazuron)法測定 (Immunology，82，117-125，1994)，細胞生長抑制用 100-[ (Atest-Ab) / (Ac-Ab) ] χ 100 公式計 算，Atest指的是有T細胞加入下的癌細胞生長，Ab指的是孔中只有培養(yǎng)基，Ac指的是癌細胞 生長。以后每種癌細胞殺傷實驗的次數(shù)都在20以上。實驗一、在不同效靶比條件下殺傷腫瘤細胞效靶比是指T細胞與腫瘤細胞數(shù)量之比，在5 UlO 1和20 1的情況下，分 別加入IOpmol濃度的SEA、EGF-SEA和VEGF-SEA，結(jié)果在表1，隨著T細胞數(shù)量的增加，腫瘤 細胞殺傷效果也增加，在T細胞與腫瘤細胞20 1條件下，經(jīng)80小時培養(yǎng)后測定，EGF-SEA 和VEGF-SEA殺傷率或細胞毒作用達到60 )以上(表1)，而SEA的效果要比EGF-SEA和 VEGF-SEA低。另外在不加蛋白僅加T細胞的情況下，細胞毒作用發(fā)現(xiàn)在10 )以下。表1為T細胞與腫瘤細胞不同數(shù)量之比的共培養(yǎng)，在SEA、EGF-SEA或VEGF-SEA誘 導下，T細胞針對腫瘤細胞的細胞毒作用。
權(quán)利要求
1.細胞因子-超抗原融合蛋白在制備抗癌藥物的應(yīng)用，其特征是所述細胞因子為表皮 生長因子或血管內(nèi)皮細胞生長因子，所述超抗原為金黃色葡萄球菌腸毒素A的超抗原。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細胞因子-超抗原融合蛋白在制備抗癌藥物的應(yīng)用，其特征 是所述細胞因子-超抗原融合蛋白能夠動員人T淋巴細胞，并將所述T淋巴細胞靶向性地 定位到腫瘤細胞周圍，所述人T淋巴細胞具有CD4+或CD8+特征。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細胞因子-超抗原融合蛋白在制備抗癌藥物的應(yīng)用，其特征 是所述細胞因子-超抗原融合蛋白能誘導人T淋巴細胞分泌細胞因子白細胞介素_2、干擾 素-Y和腫瘤壞死因子-α。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細胞因子-超抗原融合蛋白在制備抗癌藥物的應(yīng)用，其特征 是所述癌為乳腺癌、結(jié)腸癌、胃癌、肝癌或肺癌。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的細胞因子-超抗原融合蛋白在制備抗癌藥物的應(yīng)用，其特征 是所述乳腺癌為人乳腺癌。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的細胞因子-超抗原融合蛋白在制備抗癌藥物的應(yīng)用，其特征 是所述結(jié)腸癌為人結(jié)腸癌。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的細胞因子-超抗原融合蛋白在制備抗癌藥物的應(yīng)用，其特征 是所述胃癌為人胃癌。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的細胞因子-超抗原融合蛋白在制備抗癌藥物的應(yīng)用，其特征 是所述肝癌為人肝癌。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的細胞因子-超抗原融合蛋白在制備抗癌藥物的應(yīng)用，其特征 是所述肺癌為人肺癌。
全文摘要
本發(fā)明公開了細胞因子-超抗原融合蛋白在制備抗癌藥物的應(yīng)用，所述細胞因子為表皮生長因子或血管內(nèi)皮細胞生長因子，所述超抗原為金黃色葡萄球菌腸毒素A的超抗原。所述細胞因子-超抗原融合蛋白能夠動員人T淋巴細胞，并將所述T淋巴細胞靶向性地定位到腫瘤細胞周圍，所述人T淋巴細胞具有CD4+或CD8+特征。能誘導人T淋巴細胞分泌細胞因子白細胞介素-2、干擾素-γ和腫瘤壞死因子-α。所述EGF-SEA和VEGF-SEA融合蛋白能有效抑制乳腺癌、結(jié)腸癌、胃癌、肝癌和肺癌。
文檔編號C07K19/00GK102114239SQ201010585818
公開日2011年7月6日 申請日期2010年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月14日
發(fā)明者孫嘉琳 申請人:孫嘉琳