專利名稱：一種強殺藻活性化合物及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種殺藻化合物，特別涉及一種具有強殺藻活性的二甲基咯嗪及其制 備方法。
背景技術：
赤潮的頻繁發(fā)生在造成海洋生態(tài)系統(tǒng)巨大破壞的同時，也給各國經濟帶來了巨 大損失。由于物理和化學方法治理赤潮存在難以大面積施用及易造成二次污染等不足， 利用生物相互之間的生態(tài)作用來治理赤潮已成為當前的研究熱點(1.黃長江，董巧香，鄭 磊.1997年底中國東南沿海大規(guī)模赤潮原因生物的形態(tài)分類與生態(tài)學特征[J].海洋與 湖沼，1999. 30(6) 581-589 ；2. Skerratt, J. H. , et al. Algicidal bacteria associated with blooms of a toxic dinoflagellate in a temperate Australian estuary. Marine Ecology-Progress Series,2002. 2441-15 ；3. Su, R. Q. , et al. Isolation and characterization of a marine algicidal bacterium against the toxic dinoflagellate Alexandrium tamarense. Harmful Algae,2007. 6 (6) 799-810 ；4.俞 志明，曹西華.“九五”期間中國沿海有害赤潮災害狀況及其防治對策[J].安全與環(huán)境 學報，2002. 2(6) :15-17)。近年來，圍繞海洋細菌在赤潮發(fā)生過程中的作用，科學家做了 大量相關菌藻關系的研究。研究表明，海洋細菌同赤潮藻類之間存在錯綜復雜關系一 方面表現為互利共生，細菌吸收藻類產生的有機物質，并為藻類的生長提供營養(yǎng)鹽和必 要的生長因子，從而調節(jié)藻類的生長；另一方面表現為特異性抑制甚至殺滅，細菌可以通 過直接或間接的作用抑制藻類的生長，甚至裂解藻細胞，從而表現為殺藻效應(5. Peng， X.，et al. Relationship between bacterioplankton and phytoplankton community dynamics during late spring and early summer in Lake Taihu,China. Acta Ecologica Sinica,2007. 27(5) 1696-1702 ；6.Kaczmarska, I·，et al. Diversity and distribution of epibiotic bacteria on Pseudo-nitzschia multiseries(Bacillariophyceae) in culture，and comparison with those on diatoms in native seawater. Harmful Algae, 2005. 4 (4) :725_741 ；7. Uribe, P. R. Τ. Espe jo, Effect of associated bacteria on the growth and toxicity of Alexandrium catenella. Appl Environ Microbiol， 2003. 69 (1) :659_662 ；8.Yoshikawa, K.，et al.beta-cyanoalanine production by marine bacteria on cyanide-free medium and its specific inhibitory activity toward cyanobacteria. Applied and Environmental Microbiology,2000.66 (2) 718-722 ；9.Kato, J.，et al.Development of a genetic transformation system for an alga-lysing bacterium. Applied and Environmental Microbiology,1998.64 (6) 2061-2064)ο迄今為止，大多數篩選到的殺藻細菌是通過分泌特異的具有殺藻活性的物質 來起殺藻作用的。已經報道的殺藻活性物質包括蛋白質(含胞外酶)、多肽、氨基酸、 抗生素、含氮化合物等其他尚未定性的殺藻化合物(10.KaTOno，Y.，et al. Production
3of thiotropocin by a marine bacterium， Caulobacter sp.and its antimicroalgal activities. Journal of Marine Biotechnology,1997. 5(4) :225_229 ；11.Hibayashi, R. and N. Imamura, Action mechanism of a selective anti-cyanobacterial compound, argimicin A. Journal of Antibiotics,2003. 56(2) 154-159 ； 12.Berger, P. , J. Rho, and H.Gunner, Bacterial Suppression of Chlorella by Hydroxylamine Production. Water
Research 1979. 13 :267_273.)。通過篩選高效、專一、能夠生物降解的殺藻活性物質成為開 發(fā)殺藻劑用于赤潮治理的一個新思路，然而目前國內菌藻關系的研究落后于國外，在殺藻 物質的提取、純化、鑒定等研究方面尚屬空白。

發(fā)明內容
本發(fā)明的第一個目的是提供一種強殺藻活性化合物。本發(fā)明的第二個目的是提供一種所述強殺藻活性化合物的制備方法。本發(fā)明的第三個目的是提供一種所述強殺藻活性化合物在制備殺藻劑中的應用。所述強殺藻活性化合物的生產菌株為交替假單胞菌Pseudoalteromonas sp. SP48，該菌株已于2010年08月03日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏中心保藏編 號為 CCTCC NO :M 2010194。所述強殺藻活性化合物的分子式為C12HltlN4O2，分子量為242，名稱為二甲基咯嗪， 熔點為300°C，結構式為
權利要求
一種強殺藻活性化合物，其特征在于所述強殺藻活性化合物的生產菌株為交替假單胞菌Pseudoalteromonas sp.SP48，該菌株已于2010年08月03日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏中心保藏編號為CCTCC NOM 2010194；所述強殺藻活性化合物的分子式為C12H10N4O2，分子量為242，名稱為二甲基咯嗪，熔點為300℃，結構式為FSA00000236484900011.tif
2.如權利要求1所述的強殺藻活性化合物的制備方法包括以下步驟1)將交替假單胞菌Pseudoalteromonassp. SP48于2216E平板上劃線分離，培養(yǎng)，挑取 所述2216E平板上的單菌落接種于培養(yǎng)基中發(fā)酵，得SP48發(fā)酵液；2)將步驟1)得到的SP48發(fā)酵液離心，收集上清液；3)將步驟2)得到的上清液用乙酸乙酯萃取，再減壓濃縮，干燥，得SP48乙酸乙酯粗提物；
3.如權利要求2所述的強殺藻活性化合物的制備方法，其特征在于在步驟1)中，所述 培養(yǎng)的溫度為27°C，培養(yǎng)的時間為24h。
4.如權利要求2所述的強殺藻活性化合物的制備方法，其特征在于在步驟1)中，所述 培養(yǎng)基為2216E液體培養(yǎng)基。
5.如權利要求2所述的強殺藻活性化合物的制備方法，其特征在于在步驟1)中，所述 發(fā)酵的條件為溫度27°C,180r/min,時間20 24h。
6.如權利要求2所述的強殺藻活性化合物的制備方法，其特征在于在步驟2)中，所述 離心為lOOOOg，離心的時間為IOmin0
7.如權利要求1所述的強殺藻活性化合物在制備殺藻劑中的用途。
全文摘要
一種強殺藻活性化合物及其制備方法，涉及一種殺藻化合物。提供一種強殺藻活性化合物及其制備方法，以及在制備殺藻劑中的應用。所述強殺藻活性化合物的生產菌株為交替假單胞菌Pseudoalteromonas sp.SP48，分子式為C12H10N4O2，名稱為二甲基咯嗪。制備時將SP48于平板上劃線分離培養(yǎng)，挑取單菌落接種于培養(yǎng)基中發(fā)酵，離心，收集上清液，用乙酸乙酯萃取，得乙酸乙酯粗提物，再以甲醇作為洗脫劑，將乙酸乙酯粗提物層析，依次得到3個組分E1、E2和E3，然后以丙酮為洗脫劑，將組分E3以Sephadex LH-20凝膠柱進行層析，依次得到3個組分E3-1、E3-2和E3-3，E3-3即為產物。
文檔編號C07D475/14GK101935320SQ20101025801
公開日2011年1月5日 申請日期2010年8月16日 優(yōu)先權日2010年8月16日
發(fā)明者張幫周, 楊小茹, 田蘊, 章軍, 蘇建強, 鄭天凌, 鄭小偉 申請人:廈門大學