專利名稱：：凝血因子抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及參與凝血級(jí)聯(lián)系統(tǒng)的蛋白酶的新抑制劑，制備它們的方法，和所述抑制劑作為凝血因子例如絲氨酸蛋白酶和維生素K-依賴性多肽的穩(wěn)定劑、作為凝血因子的添加劑或凝血因子的制劑助劑的用途。尤其是，本發(fā)明涉及使因子VIIa(FactorVila)或其它因子VII(FactorVII)多肽針對(duì)化學(xué)和/或物理降解保持穩(wěn)定，尤其是在其含水液體組合物中。
背景技術(shù)：
：絲氨酸蛋白酶因子VII(FVII)是參與血液凝固過程的血漿糖蛋白。FVII主要以單鏈酶原形式存在于血漿中，并且被另一種蛋白酶(FXa)斷裂，得到它的雙鏈活化形式FVIIa。組織因子/因子VIIa(TF/FVIIa)復(fù)合物是血栓形成狀況的主要引發(fā)劑。這種復(fù)合物是血液凝固的外在途徑的一部分，并且介導(dǎo)因子IX和X的活化，最終導(dǎo)致凝血酶的產(chǎn)生。已經(jīng)證明，因子VIIa是有價(jià)值的治療劑，可以用于治療血友病和出血。人們需要適合于儲(chǔ)藏和遞送的因子VIIa的給藥形式。理想地，可以以液劑形式保存和給予藥物產(chǎn)品?；蛘撸瑢⑺幬锂a(chǎn)品冷凍干燥，即凍干，然后在患者使用之前通過加入合適稀釋劑進(jìn)行重組。需要藥物產(chǎn)品具有足夠的穩(wěn)定性，以便能夠長(zhǎng)期保存，例如，保存6個(gè)月以上。決定是否以液劑或凍干形式保持最終藥物產(chǎn)品通常取決于那些形式的蛋白藥物的穩(wěn)定性。蛋白穩(wěn)定性尤其可以受到例如凝血因子的離子強(qiáng)度、pH值、溫度、冷凍/解凍的重復(fù)周期和接觸剪切力等因素的影響。由于物理不穩(wěn)定性，例如變性和/或聚集(溶解和不能溶解的團(tuán)集體形成)，以及化學(xué)不穩(wěn)定性，包括例如，針對(duì)水解、脫酰胺和/或氧化的不穩(wěn)定性(僅舉數(shù)例)，可能損失活性蛋白。此外，在因子VIIa(其是絲氨酸蛋白酶)的情況下，可能出現(xiàn)由于自催化造成的斷裂(自身蛋白質(zhì)水解；酶催的、自催化的降解)。對(duì)于蛋白藥物的穩(wěn)定性的綜述，參見，例如Manning，等人，PharmaceuticalResearch6:903-918(1989)。盡管可能出現(xiàn)蛋白不穩(wěn)定性得到了廣泛的理解，但對(duì)于具體蛋白通常很難預(yù)計(jì)具體不穩(wěn)定性問題。任何這些不穩(wěn)定性可能導(dǎo)致具有降低活性、增高毒性和/或增高免疫原性的蛋白副產(chǎn)品或衍生物的形成。實(shí)際上，蛋白沉淀可以導(dǎo)致血栓、劑型和數(shù)量的不均勻性以及堵塞注射器。此外，后轉(zhuǎn)錄的修飾作用，例如在N-末端的某些谷氨酸殘基的Y羧化和添加碳水化合物側(cè)鏈，能夠提供對(duì)儲(chǔ)藏時(shí)的改性敏感的潛在位點(diǎn)。由此，蛋白的任何組合物的安全性和效果直接與它的穩(wěn)定性相關(guān)。與保持冷凍干燥形式的穩(wěn)定性相比，保持液態(tài)的穩(wěn)定性通常是不同的工作，這是由于高度增加了分子運(yùn)動(dòng)的可能性，并由此提高了分子間相互作用的機(jī)率。與上述相比，保持濃縮形式的穩(wěn)定性也是不同的工作，這是由于蛋白濃度增加會(huì)造成團(tuán)集體形成的傾向。因子VIIa通過一些途徑進(jìn)行降解，尤其是聚集(二聚/低聚)、氧化和自溶性裂解(肽骨架的剪除或"重鏈降解")。此外，可能出現(xiàn)沉淀。5通過從蛋白中除去水，可以顯著地減緩許多這些過程。然而，對(duì)于因子VIIa來說，形成含水組合物具有消除重組偏差的優(yōu)點(diǎn)，由此增加了給藥精確性，以及簡(jiǎn)化了產(chǎn)品臨床上的使用，由此增加了患者的依從性。理想地，因子VIIa的組合物在很寬的蛋白濃度范圍內(nèi)應(yīng)該穩(wěn)定6個(gè)月以上。這可以使給藥方法更具靈活性。通常，更高濃度形式可以允許更低體積的給藥，從患者角度來說，這是高度合乎需要的。與凍干產(chǎn)品相比，在給藥的容易程度和使用方面，液體組合物可以具有許多優(yōu)點(diǎn)。當(dāng)形成液體組合物時(shí)，可以考慮到許多因素。短期(即小于6個(gè)月)的液體穩(wěn)定性通常在于避免顯著(gross)的結(jié)構(gòu)變化，例如變性和聚集。在文獻(xiàn)中描述了許多蛋白的這些過程，并且存在許多穩(wěn)定劑的例子。大家都知道，可有效穩(wěn)定一種蛋白的試劑實(shí)際上使另一種蛋白不穩(wěn)定。一旦蛋白針對(duì)顯著(gross)結(jié)構(gòu)變化保持穩(wěn)定，形成具有長(zhǎng)期穩(wěn)定性(例如，大于6個(gè)月)的液體組合物在于進(jìn)一步使蛋白針對(duì)該蛋白的具體降解類型保持穩(wěn)定。降解的更多具體類型包括例如二硫鍵雜亂，某些殘基的氧化，脫酰胺化，環(huán)化。雖然并不總是可能精確定位個(gè)別降解物種，但還是進(jìn)行了試驗(yàn)，從而檢測(cè)微小變化，以便檢測(cè)具體賦形劑使所研究蛋白保持穩(wěn)定的獨(dú)特能力?，F(xiàn)在，唯一可商購的重組制備的FVII多肽組合物是凍干的因子FVIIa產(chǎn)品，在使用之前將其重構(gòu)；它包含相對(duì)低濃度的因子VIIa，例如大約0.6mg/mL。NovoSeven(NovoNordiskA/S，Denmark)的管瓶(1.2mg)包含l.2mg重組體人類因子Vila(rhFVIIA)，5.84mgNaCl，2.94mgCaCl2.2H20，2.64mg雙甘氨肽(GlyGly)，0.14mg聚山梨酸酯80和60.0mg甘露糖醇；通過加入2.OmL注射用水(WFI)將其重組至pH5.5。當(dāng)重組時(shí)，在室溫下，蛋白溶液可以穩(wěn)定使用24小時(shí)。由此，目前沒有可商購的因子VII的液體制品、隨時(shí)可用產(chǎn)品或濃縮制品。因此，高度需要的是(且本發(fā)明的目的是)開發(fā)出藥劑，其可以抑制液體(尤其是含水液體)或固體給藥形式的FVII多肽的降解。尤其需要的是，能夠提供因子VII多肽的含水液體藥物組合物，要求其可接受地控制化學(xué)和/或物理降解過程，例如上面列出的那些過程。國(guó)際公開W02005016365描述了液體含水藥物組合物，其包含因子VII多肽、緩沖劑和至少一種穩(wěn)定劑(iii)，穩(wěn)定劑包含_C(和胍化合物，例如精氨酸。本發(fā)明概述本發(fā)明提供了式(I)的化合物N-Z1-R1)-NH-Z2-R2基序，例如芐脒化合物其中X1表示(I)o0R1\oR1\或其中R1選自低級(jí)烷基，低級(jí)烯基，低級(jí)炔基，低級(jí)環(huán)烷基，低級(jí)環(huán)烷基烷基，芳基，芳基(低級(jí)烷基)，或雜烷基；6X2表示堿性氨基酸；X3表示酸性氨基酸；X4表示極性氨基酸或Phe或Phg;X5表示非極性氨基酸或Lys或Glu;X6表示Ala，Gly，His,Arg，HomoArg，0rn，Dab，Dap，Phe，Glu，Val，Gln，Ile，Ser，Thr，Tyr，Trp，Lys，Lys(mPeg(1-lOk)_C0)，或不存在；X7表示Ala，Gly，His,Arg，HomoArg，Orn，Dab，Dap，Phe，Glu，Val，Gln，Ile，Ser，Thr，Tyr，Trp，Lys(mPeg(l_10k)-CO)，或不存在；當(dāng)乂6或乂7之一或兩者都表示Lys(mPeg(l-10k)-C0)時(shí)，X2表示4_脒基_Phe，Arg，HomoArg，Orn，Lys，Dab或Dap;包括其任何和所有的立體異構(gòu)形式、任何比例的兩種或多種這種式I化合物的任何混合物、和其生理學(xué)允許的鹽和前體藥物。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了式(I)的化合物X^HHX7,(I)其中，X1表示低級(jí)烷氧羰基，低級(jí)鏈烯基氧基羰基，炔氧基羰基，環(huán)烷基氧基羰基，環(huán)烷基烷氧羰基，芳氧羰基，芳基烷氧羰基，或雜芳基烷氧羰基，低級(jí)烷胺基羰基，低級(jí)烯基氨基羰基，炔基氨基羰基，環(huán)烷基氨基羰基，環(huán)烷基烷基氨基羰基，芳基氨基羰基，芳烷基氨基羰基，或雜芳基烷基氨基羰基，低級(jí)烷酰基，低級(jí)烯?；?，低級(jí)鏈二烯基，炔?；?，環(huán)烷?；h(huán)烷基烷?；?，環(huán)烯基烷?；?，芳?；?，芳基烷酰基，或雜芳基烷?；?，其中所述基團(tuán)任選被下列基團(tuán)取代鹵素，羥基，低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基，低級(jí)烷硫基或氰基；X2表示Arg，HomoArg，Orn，Lys，Dab，或Dap;X3表示Glu，Asp，(a-Me)Glu，1-氨基環(huán)丁烷_反式-1，3-二羧酸，或I-氨基環(huán)丁烷_順式-1，3-二羧酸；X4表示Arg，HomoArg,Lys，His,Asn，Gln，Trp，Phe，Phg，Glu，D-Glu，Asp，D-Asp，Dab，Dap，-[脒基]-D即，或Ny_[脒基]Dab;X5表示Phg，D-Phg，Phe，Val，Ile，Leu，Lys，Ala，Glu，Gly，Aib，Trp，Abu，Alle，Cha，Hph，Nle，或Nva;X6表示Ala，Gly，His,Arg，HomoArg，Orn，Dab，Dap，Phe，Glu，Val，Gln，Ile，Ser，Thr，Tyr，Trp，Lys，Lys(mPeg(1-lOk)-CO)，或不存在；X7表示Ala，Gly，His,Arg，HomoArg，Orn，Dab，Dap，Phe，Glu，Val，Gln，Ile，Ser，Thr，Tyr，Trp，Lys(mPeg(l_10k)-CO)，或不存在；當(dāng)X6或X7之一或兩者都表示Lys(mPeg(l-10k)-C0)時(shí)，X2表示4-脒基-Phe，Arg，HomoArg，Orn，Lys，Dab或D即，包括其任何和所有的立體異構(gòu)形式、任何比例的兩種或多種這種式I化合物的任何混合物、和其生理學(xué)允許的鹽和前體藥物。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，通式(I)的化合物是參與凝血級(jí)聯(lián)系統(tǒng)的蛋白酶的抑制劑，并因此可以用作FVII多肽的制劑的穩(wěn)定添加劑，尤其是FVIIa的水溶液。當(dāng)與至少一種按照式(I)的穩(wěn)定劑一起配制為含水液體藥物組合物時(shí)，凝血因子VII或其類似物("因子VII多肽")顯示了提高的穩(wěn)定性，并由此可以在實(shí)際利用之前和/或期間延長(zhǎng)時(shí)期儲(chǔ)存。本發(fā)明進(jìn)一步提供(i)制備式(I)化合物的方法；(ii)藥物組合物，其包含F(xiàn)VII多肽例如野生型FVIIa、rhFVIIa或其類似物或衍生物，和式(I)的化合物；(iii)制備藥物組合物的方法，該藥物組合物包含F(xiàn)VII多肽例如野生型FVIIa、rhFVIIa或其類似物，和式(I)的化合物；(iv)抑制FVII多肽的方法，該FVII多肽是例如野生型FVIIa、rhFVIIa或其類似物或衍生物；(v)式(I)化合物與FVII多肽的組合用于制備藥物組合物的用途，該FVII多肽是例如野生型FVIIa、rhFVIIa或其類似物或衍生物，該藥物組合物用于治療出血、血友病或用多肽治療可獲得益處的其它疾病或癥狀。本發(fā)明的詳細(xì)說明如上所述，本發(fā)明提供了可抑制絲氨酸蛋白酶降解的新的式(I)化合物(參見上面)，例如在液體(尤其是含水液體)或固體給藥形式中的因子VII多肽。此外，本發(fā)明提供了絲氨酸蛋白酶的含水液體藥物組合物，尤其是因子VII多肽，其可接受地控制化學(xué)和/或物理降解過程，例如上面列出的那些過程。當(dāng)與至少一種式(I)化合物一起配制為含水液體藥物組合物時(shí)，因子VII或其類似物("因子VII多肽")顯示了提高的穩(wěn)定性，并由此可以在實(shí)際使用之前延長(zhǎng)時(shí)期儲(chǔ)存(例如6個(gè)月或6個(gè)月以上)。式(I)的化合物能夠可逆地抑制因子VIIa，并可以在包含因子VII多肽的制劑或組合物中用作穩(wěn)定劑，尤其是含水制劑或組合物(見下文)。在這方面，本發(fā)明的化合物在水或其它水介質(zhì)中通常呈現(xiàn)良好的溶解性。在本發(fā)明背景下，術(shù)語"烷基"表示直鏈或支鏈飽和一價(jià)烴基。術(shù)語"亞烷基"表示相應(yīng)的雙自由基。"低級(jí)烷基"是具有1至6個(gè)碳原子的烷基，也表示為Cl-6-烷基。Cl-6-烷基包括例如甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，仲丁基，異丁基，叔丁基，正戊基，2-甲基丁基，3-甲基丁基，4-甲基戊基，正己基，1，1-二甲基丙基，1，2-二甲丙基，2，2-二甲丙基(新戊基)和1，2，2-三甲基丙基。術(shù)語"烷氧基"表示其中直鏈或支鏈或環(huán)狀構(gòu)型的烷基通過醚氧連接的原子團(tuán)，并且它的自由價(jià)鍵來源于醚氧(烷基-0-)。"低級(jí)烷氧基"是其中烷基具有1至6個(gè)碳原子的烷氧基原子團(tuán)，也表示為C1-6-烷氧基。直鏈烷氧基的例子是甲氧基，乙氧基，丙氧基，丁氧基，戊氧基和己氧基。支鏈烷氧基的例子包括異丙氧基，仲丁氧基，叔丁氧基，異戊氧基和異己氧基。環(huán)狀烷氧基的例子包括環(huán)丙基氧基，環(huán)丁基氧基，環(huán)戊基氧基和環(huán)己基氧基。術(shù)語"烷氧羰基"表示包含通過醚氧連接的烷氧基的、通過羰基連接的單價(jià)取代基(烷基-0-C(=0)_);例如甲氧羰基，乙氧羰基，丙氧羰基，異丙氧羰基，正丁氧羰基，仲丁氧羰基，叔丁氧羰基，3_甲基丁氧羰基，正己氧羰基等等。"低級(jí)烷氧羰基"是其中烷基具有1至6個(gè)碳原子的烷氧羰基原子團(tuán)，也表示為C1-6-烷氧羰基。術(shù)語"烯基"表示具有2至15個(gè)碳原子和至少一個(gè)雙鍵的烯屬不飽和支鏈或直鏈基團(tuán)。這種基團(tuán)的例子包括但不局限于乙烯基，l-丙烯基，2-丙烯基，烯丙基，異丙烯基，1，3-丁二烯基，1-丁烯基，己烯基，戊烯基，等等。本文使用的術(shù)語"烷酰基"表示1至20個(gè)碳的直鏈和支鏈烷?；?。本文使用的術(shù)語"烯?；?表示包含至少一個(gè)碳_碳雙鍵的1至20個(gè)碳的直鏈和支鏈烯?；Ｐg(shù)語"鏈二烯基"表示包含2個(gè)烯鍵和至多20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烴殘基。在本發(fā)明背景下，術(shù)語"環(huán)烷基"表示環(huán)狀飽和一價(jià)烴基。"低級(jí)環(huán)烷基"是具有3至6個(gè)碳原子的環(huán)烷基，也表示為C1-6-環(huán)烷基。C1-6-環(huán)烷基包括例如環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，2-甲基-環(huán)戊基和環(huán)己基。術(shù)語"脒基"是指-C(=NH)NH2，術(shù)語"胍基"是指-NH-C(=NH)NH2。本文使用的術(shù)語"芳基"表示具有例如6至10個(gè)成員原子的單或多環(huán)的碳環(huán)芳香環(huán)原子團(tuán)，或具有例如10至22個(gè)成員原子的芳香環(huán)系統(tǒng)原子團(tuán)。芳基還包括碳環(huán)系統(tǒng)的8部分氫化的衍生物，其中至少一個(gè)環(huán)是芳香環(huán)。這種部分氫化的衍生物的例子包括1，2，3，4-四氫萘基，荷基和1，4-二氫萘基。本文使用的術(shù)語"雜芳基"表示具有例如5至13個(gè)成員原子的單或多環(huán)雜環(huán)芳香環(huán)原子團(tuán)，或具有例如13至21個(gè)成員原子的雜環(huán)芳香環(huán)系統(tǒng)原子團(tuán)，包含一個(gè)或多個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子，其中N-氧化物和硫一氧化物和硫二氧化物是可容許的雜芳環(huán)取代，例如，呋喃基，噻吩基，噻吩(thiophenyl)基，吡咯基，噁唑基，噻唑基，咪唑基，吡唑基，異噁唑基，噁二唑基，噻二唑基，異噻唑基，1，2，3-三唑基，1，2，4-三唑基，吡喃基，吡啶基，噠嗪基，嘧啶基，吡嗪基，1，2，3-三嗪基，1，2，4-三嗪基，1，3，5-三嗪基，1，2，3-噁二唑基，1，2，4-噁二唑基，1，2，5-噁二唑基，1，3，4-噁二唑基，1，2，3-噻二唑基，1，2，4-噻二唑基，1，2，5-噻二唑基，1，3，4-噻二唑基，四唑基，噻二嗪基，噴哚基，異噴哚基，苯并呋喃基，苯并噻吩基，噴唑基，苯并咪唑基，苯并噻唑基，苯并異噻唑基，苯并噁唑基，苯并異噁唑基，嘌呤基，喹唑啉基，喹嗪基，喹啉基，異喹啉基，喹喔啉基，萘啶基，喋啶基，咔唑基，氮雜罩基，二氮雜罩基，吖啶基等等。雜芳基還包括雜環(huán)系統(tǒng)的部分氫化的衍生物，條件是，至少一個(gè)包含雜原子的環(huán)是芳香環(huán)。這種部分氫化的衍生物的例子包括2，3-二氫苯并呋喃基，吡咯啉基，妣唑啉基，二氫噴哚基，噁唑烷基，噁唑啉基和氧雜氮雜革基。"芳基"和"雜芳基"的例子包括但不局限于苯基，聯(lián)苯基，茚基，荷基，菲基，奧基，萘基(1-萘基，2-萘基)，蒽基(1-蒽基，2-蒽基，3-蒽基)，噻吩基(2-噻吩基，3-噻吩基)，呋喃基(2-呋喃基，3-呋喃基)，吲哚基，噁二唑基，異噁唑基，噻二唑基，噁三唑基，硫雜三唑基，喹唑啉，荷基，占噸基，異茚滿基，二苯甲基，吖啶基，噻唑基，吡咯基(1-吡咯基，2-吡咯基，3-吡咯基)，吡唑基(1-吡唑基，3-吡唑基，4-吡唑基，5-吡唑基)，咪唑基(1-咪唑基，2-咪唑基，4-咪唑基，5-咪唑基)，三唑基(1，2，3-三唑-l-基，1，2，3-三唑-4-基，1，2，3-三唑-5-基，1，2，4-三唑-3-基，1，2，4-三唑_5_基)，噁唑基(2-噁唑基，4-噁唑基，5-噁唑基)，異噁唑基(異噁唑-3-基，異噁唑-4-基，異噁唑-5-基)，異噻唑基(異噻唑-3-基，異噻唑-4-基，異噻唑-5-基)，噻唑基(2-噻唑基，4-噻唑基，5-噻唑基)，妣啶基(2-吡啶基，3-吡啶基，4-吡啶基)，嘧啶基(2-嘧啶基，4-嘧啶基，5-嘧啶基，6-嘧啶基)，吡嗪基，噠嗪基(3-噠嗪基，4-噠嗪基，5-噠嗪基)，喹啉基(2-喹啉基，3-喹啉基，4-喹啉基，5-喹啉基，6-喹啉基，7-喹啉基，8-喹啉基)，異喹啉基(1-異喹啉基，3-異喹啉基，4-異喹啉基，5-異喹啉基，6-異喹啉基，7-異喹啉基，8-異喹啉基)，苯并[b]呋喃基(2-苯并[b]呋喃基，3-苯并[b]呋喃基，4-苯并[b]呋喃基，5-苯并[b]呋喃基，6-苯并[b]呋喃基，7-苯并[b]呋喃基)，2，3-二氫-苯并[b]呋喃基(2-(2，3-二氫-苯并[b]呋喃基)，3-(2，3-二氫-苯并[b]呋喃基)，4-(2，3-二氫-苯并[b]呋喃基)，5-(2，3-二氫-苯并[b]呋喃基)，6-(2，3-二氫-苯并[b]呋喃基)，7-(2，3-二氫-苯并[b]呋喃基))，苯并[b]噻吩基(苯并[b]噻吩-2-基，苯并[b]噻吩-3-基，苯并[b]噻吩-4-基，苯并[b]噻吩-5-基，苯并[b]噻吩-6-基，苯并[b]噻吩-7-基)，2，3-二氫-苯并[b]噻吩基(2，3-二氫-苯并[b]噻吩-2-基，2，3-二氫-苯并[b]噻吩-3-基，2，3-二氫-苯并[b]噻吩-4-基，2，3-二氫-苯并[b]噻吩-5-基，2，3-二氫-苯并[b]噻吩-6-基，2，3_二氫_苯并[b]噻吩-7-基)，吲哚基(1-吲哚基，2-吲哚基，3-吲哚基，4-吲哚基，5-吲哚基，6-噴哚基，7-噴哚基)，噴唑(1-噴唑基，3-噴唑基，4-噴唑基，5-噴唑基，6-噴唑基，7-噴唑基)，苯并咪唑基(1-苯并咪唑基，2-苯并咪唑基，4-苯并咪唑基，5-苯并咪唑基，6_苯并咪唑基，7-苯并咪唑基，8-苯并咪唑基)，苯并噁唑基(2-苯并噁唑基，3-苯并噁唑基，4-苯并噁唑基，5-苯并噁唑基，6-苯并噁唑基，7-苯并噁唑基)，苯并噻唑基(2-苯并噻唑基，4-苯并噻唑基，5-苯并噻唑基，6-苯并噻唑基，7-苯并噻唑基)，咔唑基(1-咔唑基，2-咔唑基，3-咔唑基，4_咔唑基)，511-二苯并[b，f]氮雜萆(SH-二苯并[b，f]氮雜萆-1-基，5H-二苯并[b，f]氮雜萆-2-基，5H-二苯并[b，f]氮雜罩-3-基，5H-二苯并[b，f]氮雜罩-4-基，5H-二苯并[b，f]氮雜罩-5-基)，10，ll-二氫-5H-二苯并[b，f]氮雜罩(10，11-二氫-5H-二苯并[b，f]氮雜罩-1-基，10，11-二氫-5H-二苯并[b，f]氮雜萆-2-基，10，ll-二氫-5H-二苯并[b，f]氮雜萆-3-基，10，ll-二氫-5H-二苯并[b，f]氮雜萆-4-基，10，ll-二氫-5H-二苯并[b，f]氮雜罩-5-基)，苯并[1，3]二惡茂(2-苯并[1，3]二惡茂，4-苯并[1，3]二惡茂，5-苯并[1，3]二惡茂，6-苯并[1，3]二惡茂，7-苯并[1，3]二惡茂)和四唑基(5-四唑基，N-四唑基)。在本發(fā)明背景下，使用下列氨基酸(天然存在的以及衍生物)的縮寫表1:氨基酸的縮寫Dab2，4-二氨基丁酸D即2，3-二氨基丙酸HomoArg高精氨酸，N-e-脒基賴氨酸，H2N-CH((CH2)4-NH-C(=NH)NH2)C02HPhg(S)-苯基甘氨酸，L-苯基甘氨酸NP-[脒基]-D即2_氨基，3-脒基-丙酸NY-[脒基]Dab2-氨基，4-脒基-丁酸Aiba-氨基異丁酸Orn鳥氨酸，NH2-CH2-CH2-CH2-CH(NH2)-COOHAbua-氨基丁酸Alle別異亮氨酸，D-異亮氨酸的非對(duì)映異構(gòu)體Chae-環(huán)己基丙氨酸，(1S)-l-氨基-2-環(huán)己基丙酸10Dab2，4-二氨基丁酸Hph高苯丙氨酸Nle正亮氨酸，a-氨基己酸Nva戊氨酸，a-氨基戊酸4_脒基-Phe4-脒基苯丙氨酸Gly甘氨酸Pro脯氨酸Ala丙氨酸Val纈氨酸Leu亮氨酸lie異亮氨酸Met甲硫氨酸Cys半胱氨酸Phe苯丙氨酸Tyr酪氨酸Trp色氨酸His組氨酸Lys賴氨酸Arg精氨酸Gin谷氨酰胺Asp天冬酰胺11<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>上述縮寫包括(除非另有陳述)相關(guān)氨基酸的L-和D-形式。本文使用的術(shù)語"堿性氨基酸"包括Lys、Arg和His，以及非天然存在的氨基酸homoArg、Orn、Dap禾口Dab。本文使用的術(shù)語"酸性氨基酸"包括Asp和Glu，以及非天然存在的氨基酸(a-Me)Glu，1-氨基環(huán)丁烷_順式-1，3-二羧酸，和1-氨基環(huán)丁烷_反式-1，3-二羧酸。本文使用的術(shù)語"極性氨基酸"包括攜帶極性側(cè)基的氨基酸，例如Gly，Ser，Thr，Cys，Tyr，Asn，Gln，Arg，Lys，His,Asn，Gln，Trp，Glu，D_Glu，Asp，D-Asp，以及非天然存在的氨基酸HomoArg，Dab，D即，NP-[脒基]-D即和Ny-[脒基]Dab。術(shù)語"具有不帶電荷的側(cè)基的極性氨基酸"包括Gly，Ser，Thr，Cys，Tyr，Asn和Gln。本文使用的術(shù)語"非極性氨基酸"包括具有疏水性側(cè)基的氨基酸，例如Ala，Val，Leu;Ile，Pro,Met,Phe和Trp，以及非天然存在的氨基酸Phg，D-Phg，Gly，Aib，Abu，Alle，Cha，Hph，Nle禾卩Nva。本文使用的術(shù)語"Lys(mPeg(l_10k)-CO)"表示側(cè)鏈氨基被分子量1-lOkDa的甲氧基-聚(乙二醇)衍生的羧酸(MeO-(CH2-CH2-0)n-(CH2)m-C02H)酰化的賴氨酸，其中m和n是可變整數(shù)。n的典型值是20-200，m的典型值是1-5。借助于例如Lys(mPeg(l_10k)-CO)可以將式(I)的化合物PEG化。式(I)化合物的PEG化可以提高FVII的溶解性。當(dāng)FVII與PEG化的式(I)化合物結(jié)合時(shí)，認(rèn)為Peg鏈可以降低蛋白質(zhì)分子之間的相互作用，并由此防止它們團(tuán)聚和沉淀。本文使用的術(shù)語"前體藥物"包括生物可水解的酰胺和生物可水解的酯、縮醛、縮醛胺、氨基甲酸酯、硫氨基醇(thioaminals)、硫縮醛和腙，還包括a)其中這種前體藥物中的生物可水解的官能團(tuán)包括在按照本發(fā)明化合物中的化合物，和b)可以在給定官能團(tuán)處通過生物氧化或還原得到按照本發(fā)明的藥物物質(zhì)的化合物。這些官能團(tuán)的例子包括1，4-二氫吡啶，N-烷基羰基_1，4-二氫吡啶，1，4-環(huán)已二烯，叔丁基，等等。本發(fā)明還包括式(I)化合物的前體藥物。存在于式(I)化合物中的立構(gòu)原子可以彼此獨(dú)立地具有R構(gòu)型或S構(gòu)型。式(I)的化合物可以是純對(duì)映體或?qū)τ丑w的混合物，例如外消旋體，或純非對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體的混合物。本發(fā)明還包括式a)化合物的所有互變異構(gòu)形式。在本發(fā)明背景下，術(shù)語"藥學(xué)可允許的鹽"表示對(duì)患者無害的鹽。這種鹽包括藥學(xué)可允許的酸加成鹽、藥學(xué)可允許的金屬鹽、銨鹽和烷基化銨鹽。酸加成鹽包括無機(jī)酸以及有機(jī)酸的鹽。合適無機(jī)酸的代表性例子包括鹽酸，氫溴酸，氫碘酸，磷酸，硫酸，硝酸等等。合適有機(jī)酸的代表性的例子包括甲酸，乙酸，三氯乙酸，三氟乙酸，丙酸，苯甲酸，肉桂酸，檸檬酸，富馬酸，乙二醇酸，乳酸，馬來酸，蘋果酸，丙二酸，扁桃酸，草酸，苦味酸，焦葡萄酸，水楊酸，琥珀酸，甲磺酸，乙磺酸，酒石酸，抗壞血酸，雙羥萘酸，雙亞甲基水楊酸，乙二磺酸，葡糖酸，檸康酸，天冬氨酸，硬脂酸，棕櫚酸，EDTA，乙二醇酸，對(duì)氨基苯甲酸，谷胺酸，苯磺酸，對(duì)甲苯磺酸等等。藥學(xué)可允許的無機(jī)或有機(jī)酸加成鹽的進(jìn)一步例子包括列于J.Pharm.Sci.66，2(1977)中的藥學(xué)可允許的鹽，將其結(jié)合到本文中作為參考。金屬鹽的例子包括但不限于鋰、鈉、鉀、鎂鹽，等等。銨和烷基化銨鹽的例子包括銨、甲基銨、二甲基銨、三甲基銨、乙基銨、羥乙基銨、二乙銨、丁基銨、四甲銨鹽等等。本發(fā)明還包括式(I)化合物的藥學(xué)可允許的鹽。本文使用的術(shù)語"溶劑化物"是指由溶質(zhì)和溶劑形成的限定化學(xué)計(jì)量的復(fù)合物。溶劑可以是例如水、乙醇或乙酸。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式(I)的化合物，其中X1表示o其中R1選自低級(jí)烷基，低級(jí)烯基，低級(jí)炔基，低級(jí)環(huán)烷基，低級(jí)環(huán)烷基烷基，芳基，芳基(低級(jí)烷基)，或雜烷基；在另一個(gè)實(shí)施方案中，X1表示o其中R1選自低級(jí)烷基，低級(jí)烯基，低級(jí)炔基，低級(jí)環(huán)烷基，低級(jí)環(huán)烷基烷基，芳基，芳基(低級(jí)烷基)，或雜烷基；在又一個(gè)實(shí)施方案中，X1表示O其中R1選自低級(jí)烷基，低級(jí)烯基，低級(jí)炔基，低級(jí)環(huán)烷基，低級(jí)環(huán)烷基烷基，芳基，芳基(低級(jí)烷基)，或雜烷基；在具體實(shí)施方案中，X1表示低級(jí)烷氧羰基，低級(jí)鏈烯基氧基羰基，炔氧基羰基，環(huán)烷基氧基羰基，環(huán)烷基烷氧羰基，芳氧羰基，芳基烷氧羰基，或雜芳基烷氧羰基，低級(jí)烷胺基羰基，低級(jí)烯基氨基羰基，炔基氨基羰基，環(huán)烷基氨基羰基，環(huán)烷基烷基氨基羰基，芳基氨基羰基，芳烷基氨基羰基，或雜芳基烷基氨基羰基，低級(jí)烷?；?，低級(jí)烯?；图?jí)鏈二烯基，炔?；?，環(huán)烷?；h(huán)烷基烷?；h(huán)烯基烷?；?，芳?；?，芳基烷?；螂s芳基烷?；?，其13中所述基團(tuán)任選被下列基團(tuán)取代鹵素，羥基，低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基，低級(jí)烷硫基或氰基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，x1表示低級(jí)烷氧羰基，低級(jí)鏈烯基氧基羰基，炔氧基羰基，環(huán)烷基氧基羰基，環(huán)烷基烷氧羰基，低級(jí)烷胺基羰基，低級(jí)烯基氨基羰基，炔基氨基羰基，環(huán)烷基氨基羰基，環(huán)烷基烷基氨基羰基，低級(jí)烷?；?，低級(jí)烯?；蝉；?，環(huán)烷?；?，或環(huán)烷基烷酰基，其中所述基團(tuán)任選被下列基團(tuán)取代鹵素，低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基，或低級(jí)烷硫基。在又一個(gè)實(shí)施方案中，^表示甲氧羰基，乙氧羰基，丙氧羰基，2-(甲氧基)乙氧羰基，2-(甲硫基)乙氧羰基，異丙氧羰基，烯丙氧基羰基，2_氯代烯丙氧基羰基，炔丙基氧羰基，異丁氧羰基，環(huán)丁基氧羰基，環(huán)戊基氧羰基，環(huán)丙基甲氧基羰基，甲基氨基羰基，二甲基氨基羰基，乙基氨基羰基，二乙基氨基羰基，丙基氨基羰基，異丙基氨基羰基，烯丙基氨基羰基，環(huán)丁基氨基羰基，環(huán)戊基氨基羰基，環(huán)丙基甲基氨基羰基，乙酰基，丙?；?，丁?；?，戊酰基，3_環(huán)丙基丙?；?4-烯?；?-甲基-4-戊烯?；?，4-已烯酰基，3-環(huán)戊烯-1-?；?，4，5，5-三氟戊_4-烯酰基，或己-2，4-二烯?；?。在具體實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式(I)的化合物，其中X2表示Arg，HomoArg，0rn，Lys，Dab或Dap。在另一個(gè)實(shí)施方案中，X2表示Arg，HomoArg，Orn或Lys。在又一個(gè)實(shí)施方案中，X2表示HomoArg。在具體實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式(I)的化合物，其中^表示Glu，Asp，(a-Me)Glu，1-氨基環(huán)丁烷_反式-1，3-二羧酸，或1-氨基環(huán)丁烷_順式-1，3-二羧酸。在另一個(gè)實(shí)施方案中，X3表示Glu。在具體實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式(I)的化合物，其中^表示Arg，HomoArg，Lys，His，Asn，Gln，Trp，Phe，Phg，Glu，D-Glu，Asp，D-Asp，Dab，Dap，Ne_[月米基]-Dap或Ny-[月米基]Dab。在另一個(gè)實(shí)施方案中，乂4表示Arg，HomoArg，Lys，His，Asn，Gln，Dab或D即。在又一個(gè)實(shí)施方案中，X4表示Asn或Gln。在具體實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式(I)的化合物，其中X5表示Phg，D-Phg，Phe，Val，Ile，Leu，Lys，Ala，Glu，Gly，Aib，Trp，Abu，Alle，Cha，Hph，Nle或Nva。在另一個(gè)實(shí)施方案中，X5表示Phe，Val，Ile，Leu，Ala，Cha，Gly或Trp。在又一個(gè)實(shí)施方案中，X5表示Phe，Cha或Trp。在具體實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式(I)的化合物，其中X6表示Ala，Gly，His，Arg，HomoArg，0rn，Dab，Dap，Phe，Glu，Val，Gln，Ile，Ser，Thr，Tyr，Trp，Lys，Lys(mPeg(l-10k)-C0)，或不存在。在另一個(gè)實(shí)施方案中，乂6表示Ala，Gly，His，Arg，HomoArg，0rn，Glu，Val，Gln，Phe，Ile，Ser，Thr，Tyr，Lys(mPeg(l-10k)-C0)，或不存在。在又一個(gè)實(shí)施方案中，X6表示Ala，His，Arg，HomoArg，Glu，Gln，Thr，Tyr，Lys(mPeg(l-10k)-C0)，或不存在。在又一個(gè)實(shí)施方案中，X6不存在。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式(I)的化合物，其中X7表示Ala，Gly，His，Arg，HomoArg，0rn，Dab，Dap，Phe，Glu，Val，Gln，Ile，Ser，Thr，Tyr，Trp，Lys(mPeg(l-10k)-C0)，或不存在。在另一個(gè)實(shí)施方案中，X7表示Ala，Gly，His，Arg，HomoArg，0rn，Glu，Val，Gln，Phe，Ile，Ser，Thr，Tyr，Lys(mPeg(1-lOk)-CO)，或不存在。在又一個(gè)實(shí)施方案中，X'表示Ala，His，Arg，HomoArg，Glu，Gln，Thr，Tyr，Lys(mPeg(l-10k)-CO)，或不存在。在又一個(gè)實(shí)施方案中，X7不存在。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式(I)的化合物，其中14當(dāng)X6或X7之一或兩者都表示Lys(mPeg(l-10k)-C0)時(shí)，X2表示4_脒基-Phe。在一個(gè)實(shí)施方案中，具有式(I)的化合物選自下列丙氧羰基_HomoArg_Glu_Asn_Cha_NH2;A11oc-HomoArg_G1u_(D_Asp)_Cha_NH2;Alloc-HomoArg-Glu-Asn-Cha-NH2;Alloc-HomoArg-Glu-(D-Glu)-Cha-NH2;節(jié)氧羰基_HomoArg_Glu_Asn_Cha_NH2;Alloc_HomoArg_Glu_Dap_Cha_NH2;Alloc_HomoArg_Glu_HomoArg_Cha_NH2;Alloc_HomoArg_Glu_Asn_Cha_Arg_NH2;Alloc_HomoArg_Glu_Asn_Cha_Gly-NH2;Alloc-HomoArg-Glu-Asn-Cha-Glu-NH2;Alloc-HomoArg-Glu-Asn-Cha-Phe-NH2;Al-loc-HomoArg-Glu-Asn-Cha-HomoArg-NH2;丙基氨基羰基-HomoArg-Glu-Asn-Cha_NH2;環(huán)丙基甲氧羰基-HomoArg-Glu-Asn-Cha-NH2;Alloc-HomoArg-Glu-Asn-Cha-His-NH2;乙氧羰基-HomoArg-Glu-Asn-Cha-Phe-NH2;和2-氯代烯丙氧基羰基-HomoArg-Glu-Asn-Cha-NH2，包括其任何和所有的立體異構(gòu)形式、任何比例的兩種或多種這種式I化合物的任何混合物、和其生理學(xué)允許的鹽和前體藥物。式I的化合物是因子VII多肽的可逆性抑制劑(用它們的活化形式)。優(yōu)選，它們是因子VII多肽的特異性抑制劑。當(dāng)關(guān)于抑制因子VIIa活性來使用時(shí)，本文使用的術(shù)語特異性是指式I的化合物可以抑制因子VII活性，基本上不抑制參與血液凝固和/或纖維蛋白溶解途徑的其它具體蛋白酶的活性，例如，因子Xa，胞漿素，凝血酶，因子IXa，因子XIa，因子XIIa和組織-纖溶酶原激活物(tPA)(使用相同濃度的抑制劑)。本說明書描述了測(cè)定對(duì)因子VII多肽以及參與血液凝固和/或纖維蛋白溶解途徑的其它具體蛋白酶的抑制(inhibition)常數(shù)Og的試驗(yàn)和方法(見下文)。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，式I的化合物顯現(xiàn)了下列中的至少一種情況Ki(活化因子VII多肽)為Ki(凝血因子Xa)(使用相同濃度的抑制劑)的1/10或更小(例如1/20或更小，1/50或更小，1/100或更小，1/200或更小，1/500或更小，1/2-1/10，1/10-1/20，1/10-1/50，1/20-1/100，1/50-1/200，1/100-1/500，1/100-1/1000，1/200-1/1000);Ki(活化因子VII多肽)為Ki(胞漿素)(使用相同濃度的抑制劑)的1/10或更小(例如1/20或更小，1/50或更小，1/100或更小，1/200或更小，1/500或更小，1/2-1/10，1/10-1/20，1/10-1/50，1/20-1/100，1/50—1/200，1/100—1/500，1/100—1/1000，1/200-1/1000);&(活化因子VII多肽)為&(凝血酶)(使用相同濃度的抑制劑)的1/10或更小(例如1/20或更小，1/50或更小，1/100或更小，1/200或更小，1/500或更小，1/2-1/10，1/10-1/20，1/10-1/50，1/20-1/100，1/50—1/200，1/100—1/500，1/100—1/1000，1/200-1/1000);Ki(活化因子VII多肽)為Ki(因子IXa)(使用相同濃度的抑制劑)的1/10或更小(例如1/20或更小，1/50或更小，1/100或更小，1/200或更小，1/500或更小，1/2-1/10，1/10-1/20，1/10-1/50，1/20-1/100，1/50-1/200，1/100-1/500，1/100-1/1000，1/200-1/1000);Ki(活化因子VII多肽)為KJ因子XIa)(使用相同濃度的抑制劑)的1/10或更小(例如1/20或更小，1/50或更小，1/100或更小，1/200或更小，1/500或更小，1/2-1/10，1/10-1/20，1/10-1/50，1/20-1/100，1/50-1/200，1/100-1/500，1/100-1/1000，1/200-1/1000);Ki(活化因子VII多肽)為KJ因子XIIa)(使用相同濃度的抑制劑)的1/10或更小(例如1/20或更小，1/50或更小，1/100或更小，1/200或更小，1/500或更小，1/2-1/10，1/10-1/20，1/10-1/50，1/20-1/100，1/50—1/200，1/100—1/500，1/100—1/1000，1/200-1/1000);&(活化因子VII多肽)為&(tPA)(使用相同濃度的抑制劑)的1/10或更小(例如1/20或更小，1/50或更小，1/100或更小，1/200或更小，1/500或更小，1/2-1/10，1/10-1/20，1/10-1/50，1/20-1/100，1/50-1/200，1/100-1/500，1/100-1/1000，1/200-1/1000)。因子VII多肽本文使用的術(shù)語"因子VII多肽"或"FVII多肽"是指包含野生型人類因子Vila的氨基酸序列1-406(即，具有公開在美國(guó)專利US4，784，950中的氨基酸序列)的任何蛋白，其變體以及因子VII相關(guān)的多肽，因子VII衍生物和因子VII共軛物。這包括相對(duì)于野生型人類因子Vila呈現(xiàn)出基本相同或提高的生物活性的FVII變體，因子VII相關(guān)的多肽，因子VII衍生物和因子VII共軛物。術(shù)語"因子VII"包括其未斷裂(酶原)形式的因子VII多肽，以及經(jīng)過酶解過程得到其相應(yīng)生理活性物質(zhì)形式的那些(其可以稱為因子Vila)。典型地，因子VII在殘基152和153之間斷裂，得到因子VIIa。相對(duì)于人類因子VII，凝血因子VII的這種變體可以顯現(xiàn)不同的特性，包括穩(wěn)定性、磷脂結(jié)合、改變的特異活性，等等。上述定義中的"因子VII"或"因子Vila"還包括天然等位基因變體，其可以存在和出現(xiàn)于一個(gè)個(gè)體至另一個(gè)個(gè)體中。此外，根據(jù)所選擇的宿主細(xì)胞和宿主細(xì)胞環(huán)境的性質(zhì)，糖基化或其它轉(zhuǎn)譯后修飾的程度和位置可以變化。本文使用的"野生型人類FVIIa"是具有美國(guó)專利US4，784，950中所公開的氨基酸序列的多肽。本文使用的"因子VII相關(guān)的多肽"涵蓋多肽，包括變體，其中相對(duì)于野生型因子Vila的活性，因子Vila生物活性已經(jīng)基本上被改變，例如降低。這些多肽包括但不限于因子VII或因子VIIa(特異性氨基酸序列改變已經(jīng)被引入其中，改變或干擾了多肽的生物活性)。本文使用的術(shù)語"因子V11衍生物"稱為FV11多肽，相對(duì)于野生型因子V11，其顯現(xiàn)了基本上相同或提高的生物活性，其中母體肽的一個(gè)或多個(gè)氨基酸被已遺傳性地和/或化學(xué)和/或酶催改變，例如，通過烷基化、糖基化、PEG化、酰化、形成酯或形成酰胺等等。其包括但不局限于PEG化的人類因子VIIa，半胱氨酸-PEG化的人類因子VIIa和其變體。因子VII衍生物的非限制性例子包括GlycoPEG化的FVII衍生物(公開在WO03/31464和美國(guó)專利申請(qǐng)US20040043446、US20040063911、US20040142856、US20040137557、US20040132640、W02007022512和US20070105755(NeoseTechnologies,Inc.)中)；FVII共軛物(公開在W001/04287、美國(guó)專利申請(qǐng)20030165996、W001/58935、W003/93465(MaxygenApS)和W002/02764、美國(guó)專利申請(qǐng)20030211094(UniversityofMinnesota)中)。PEG化的人類因子Vila包括連接一個(gè)或多個(gè)PEG部分的任何因子VIIa。PEG分子可以與因子Vila多肽的任何部分連接，包括因子Vila多肽的任何氨基酸殘基或碳水化物部分。術(shù)語"半胱氨酸-PEG化的人類因子VIIa"是指具有與半胱氨酸的巰基共軛的PEG分子的因子VIIa，其中半胱氨酸被引進(jìn)到人類因子Vila中，形成因子Vila序列變體。術(shù)語"提高的生物活性"是指FVII多肽i)與重組體野生型人類因子VIIa相比，具有基本上相同或提高的解朊活性，或ii)與重組體野生型人類因子VIIa相比，是指FVII多肽具有基本上相同或提高的TF結(jié)合活性，或iii)與重組體野生型人類因子Vila相比，是指FVII多肽在血漿中具有基本上相同或提高的半衰期。與重組體野生型人類因子VIIa相比具有基本上相同或提高的解朊活性的因子VII變體的非限制性例子包括S52A-FVIIa，S60A-FVIIa(Lino等人，Arch.Biochem.Biophys.352:182-192，1998);在U.S.專利5，580，560中公開的顯現(xiàn)解朊穩(wěn)定性提高的FVIIa變體；在殘基290和291之間或在殘基315和316之間酶解斷裂的因子VIIa(Mollerup等人，Biotechnol.Bioeng.48:501-505，1995);因子Vila的氧化形式(Kornfelt等人，Arch.Biochem.Biophys.363:43-54,1999);公開在PCT/DK02/00189(相當(dāng)于W002/077218)中的FVII變體；和公開在W002/38162(ScrippsResearchlnstitute)中的顯現(xiàn)了解朊穩(wěn)定性提高的FVII變體；公開在W099/20767、美國(guó)專利US6017882和US6747003、美國(guó)專利申請(qǐng)20030100506(UniversityofMinnesota)和W000/66753、美國(guó)專利申請(qǐng)US20010018414、US2004220106和US200131005、美國(guó)專利US6762286和US6693075(UniversityofMinnesota)中的具有改變的Gla-區(qū)域并顯現(xiàn)膜結(jié)合性增加的FVII變體；和公開在W001/58935、美國(guó)專利US6806063、美國(guó)專利申請(qǐng)20030096338(MaxygenApS)、W003/93465(MaxygenApS)、W004/029091(MaxygenApS)、W004/083361(MaxygenApS)和WO04/111242(MaxygenApS)以及W004/108763(CanadianBloodServices)中的FVII變體。與野生型FVIIa相比具有提高的生物活性的FVII變體的非限制性例子包括在下列中公開的FVII變體WO01/83725，WO02/22776，W002/077218,WO03/027147，WO04/029090，WO05/075635，和歐洲專利申i青05108713.8(NovoNordiskA/S)，WO02/38162(ScrippsRe-searchInstitute);禾口在JP2001061479(Chemo-Sero-TherapeuticResInst.)中公開的具有增加活性的FVIIa變體。因子VII的變體的例子包括但不限于PIOQ-FVII，K32E-FVII,P10Q/K32E-FVI1，L305V-FVI1，L305V/M306D/D309S-FVI1，L305I-FVI1，L305T-FVI1，F(xiàn)374P-FVI1，V158T/M298Q-FVI1，V158D/E296V/M298Q-FVI1，K337A-FVI1，M298Q-FVI1，V158D/M298Q-FVI1，L305V/K337A-FVI1，V158D/E296V/M298Q/L305V-FVII，V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII，V158D/E296V/M298Q/L305V/K337A-FVI1，K157A-FVI1，E296V-FVI1，E296V/M298Q-FVI1，V158D/E296V-FVI1，V158D/M298K_FVII，andS336G-FVI1，L305V/K337A-FVII，L305V/V158D-FVI1，L305V/E296V-FVI1，L305V/M298Q-FVII，L305V/V158T-FVII，L305V/K337A/V158T-FVI1，L305V/K337A/M298Q_FVII，L305V/K337A/E296V-FVII，L305V/K337A/V158D-FVI1，L305V/V158D/M298Q_FVII，L305V/V158D/E296V-FVII，L305V/V158T/M29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iàn)374Y/V158T/K337A-FVI1，F(xiàn)374Y/V158T/E296V/M298Q/S314E-FVI1，F(xiàn)374Y/L305V/S314E-FVI1，F(xiàn)374Y/V158T/M298Q/K337A/S314E-FVI1，F(xiàn)374Y/V158T/S314E-FVI1，F(xiàn)374Y/L305V/V158T/E296V/M298Q_FVII，F(xiàn)374Y/L305V/K337A-FVI1，F(xiàn)374Y/L305V/V158T/E296V/K337A-FVI1，F(xiàn)374Y/L305V,V158D/K337A,E296V/K337A,V158D/M298Q,V158D/M298Q,E296V/M298Q/V158T/K337A/E296V/K337A,V158T/M298Q,V158T/M298Q,S314E-FVI1，F(xiàn)374Y/L305V/V158T/E296V/S314E-FVI1，F(xiàn)374Y/E296V/M298Q/K337A/V158T/S314E-FVI1，F(xiàn)374Y/V158D/E296V/M298Q/K337A/S314E-FVI1，F(xiàn)374Y/L305V/V158D/E296V/M298Q/S314E-FVII，F(xiàn)374Y/L305V/E296V/M298Q/V158T/S314E-FVII，F(xiàn)374Y/L305V/E296V/M298Q/K337A/V158T-FVI1，F(xiàn)374Y/L305V/E296V/K337A/V158T/S314E-FVI1，F(xiàn)374Y/L305V/M298Q/K337A/V158T/S314E-FVI1，F(xiàn)374Y/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVI1，F(xiàn)374Y/L305V/V158D/E296V/K337A/S314E-FVI1，F(xiàn)374Y/L305V/V158D/M298Q/K337A/S314E-FVI1，F(xiàn)374Y/L305V/E296V/M298Q/K337A/V158T/S314E-FVI1，F(xiàn)374Y/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A/S314E-FVII，S52A-FactorVII，S60A-FactorVII;R152E-FactorVII，S344A-FactorVII，T106N-FVII，K143N/N145T-FVII，V253N-FVII，R290N/A292T-FVII，G291N-FVII，R315N/V317T-FVI1，K143N/N145T/R315N/V317T-FVII;和在233Thr至240Asn的氨基酸序列中具有替代、添加或缺失的FVII;在304Arg至329Cys的氨基酸序列中具有替代、添加或缺失的FVII;和在15311e至223Arg的氨基酸序列中具有替代、添加或缺失的FVII。由此，在因子VII多肽中的替代變體包括但不限于在下列位置中的替代PIO，K32，L305，M306，D309，L305，L305，F(xiàn)374，V158，M298，V158，E296，K337，M298，M298，S336，S314，K316，K316，F(xiàn)374，S52，S60，R152，S344，T106，K143，N145，V253，R290，A292，G291，R315，V317，和在T233至N240或R304至C329的氨基酸序列中的替代、添加或缺失；或從1153至R223，或其組合，尤其是下列變體，例如P10Q，K32E，L305V，M306D，D309S，L305I,L305T，F(xiàn)374P，V158T，M298Q，V158D，E296V，K337A，M298Q，M298K，S336G，S314E，K316H，K316Q，F(xiàn)374Y，S52A，S60A，R152E，S344A，T106N，K143N，N145T，V253N，R290N，A292T，G291N，R315N，V317T，和在T233至N240，或R304至C329，或從1153至R223的氨基酸序列中的替代、添加或缺失，或其組合。因子VII(例如因子Vila)在血液凝固(clotting)過程中的生物活性來源于它的下列能力(i)與組織因子(TF)結(jié)合的能力，和(ii)催化因子IX或因子X的解朊裂解來制備活化的因子IX或X(分別為因子IXa或Xa)的能力。人類因子Vila的生物活性可以利用美國(guó)專利US5，997，864所描述的試驗(yàn)來測(cè)定使用缺乏因子VII的血漿和激酶，測(cè)定制劑促進(jìn)血液凝固(clotting)的能力。在該試驗(yàn)中，用相對(duì)于對(duì)照樣品的凝固時(shí)間減少來表示生物活性，并通過和收集的人類血清標(biāo)準(zhǔn)樣品(包含1單位/ml因子VII活性)進(jìn)行比較，并被轉(zhuǎn)變?yōu)?因子VII單位"?；蛘撸部梢允褂靡黄谀淘囼?yàn)來試驗(yàn)因子VII多肽的特異活性("凝固(clot)活性")。為了該目的，將試驗(yàn)樣品在50mMPIPES-緩沖液(pH7.5)、0.1%BSA中稀釋，并將40iil用40iil缺乏因子VII的血漿和80y1人類重組體組織因子(包含10mMCa2+和合成磷脂)進(jìn)行培養(yǎng)。測(cè)定凝結(jié)時(shí)間(凝固時(shí)間)，并與平行試驗(yàn)中使用參考標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線相比較。或者，可以通過下列方法測(cè)定因子VIIa生物活性(i)在包含TF(嵌入在類脂膜中)和凝血因子X的系統(tǒng)中，測(cè)定因子Vila產(chǎn)生因子Xa的能力(Persson等人，J.Biol.Chem.272:19919-19924，1997);(ii)在水系統(tǒng)中測(cè)定因子X的水解；(iii)使用基于表面胞質(zhì)團(tuán)共振的儀器(Persson，F(xiàn)EBSLetts.413:359-363，1997)，測(cè)定其與TF的物理結(jié)合；和(iv)測(cè)定合成底物的水解。在活化形式(FVIIa)中，具有與野生型因子VIIa基本上相同或提高的生物活性的因子VII變體包括符合下列條件的那些當(dāng)在上述凝固試驗(yàn)、解朊試驗(yàn)或TF結(jié)合試驗(yàn)的一個(gè)或多個(gè)試驗(yàn)中進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，顯示出在相同細(xì)胞類型中產(chǎn)生的因子VIIa的特異活性的至少大約10%，優(yōu)選至少大約25%，多的優(yōu)選至少大約50%，更加優(yōu)選至少大約75%，最優(yōu)選至少大約90%。在一些實(shí)施方案中，因子VII多肽是人類因子VIIa(hFVIIa)，優(yōu)選重組制備的人類因子VIIa(rhVIIa)。在其它實(shí)施方案中，因子VII多肽是因子VII序列變體。在一些實(shí)施方案中，因子VII多肽具有不同于野生型人類因子VII的糖基化作用。在一些實(shí)施方案中，因子VII多肽是因子VII衍生物，尤其是PEG化的因子VII多肽，包括glycoPEG化的因子VII多肽。在各種實(shí)施方案中，例如其中因子VII多肽是因子VII相關(guān)的多肽或因子VII序列變體的那些實(shí)施方案中，當(dāng)本說明書如所述的"體外解朊試驗(yàn)"(試驗(yàn)2)中進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，在因子VII多肽的活性和固有人類因子VIIa(野生型FVIIa)的活性之間的比例至少為大約1.25，優(yōu)選至少大約2.0或4.O，最優(yōu)選至少大約8.0。在一些實(shí)施方案中，因子VII多肽是因子VII相關(guān)的多肽，尤其是變體，當(dāng)在"體外水解試驗(yàn)"(參見下面試驗(yàn)1)中進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，其中在所述因子VII多肽的活性和固有人類因子VIIa(野生型FVIIa)的活性之間的比20例至少為大約1.25;在其它實(shí)施方案中，該比例至少為大約2.0;在進(jìn)一步實(shí)施方案中，該比率至少為大約4.0。輛日月仆洽麵燃誠(chéng)本發(fā)明的肽可以按照眾所周知的肽合成技術(shù)來合成，例如，Merrifield在J.Am.Chem.Soc.，15:2149-2154(1963)中最初描述的固相合成技術(shù)。其它肽合成技術(shù)可以在例如下面中得至lj:M.Bodanszky等人，(1976)P印tideSynthesis,JohnWiley&Sons，2dEd.;KentandClark-LewisinSyntheticPeptidesinBiologyandMedicine,p.295-358，eds.Alitalo，K.，等人SciencePublishers,(Amsterdam,1985);以及本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它參考資料。按照本發(fā)明的式(I)化合物通?？梢岳孟旅婷枋龅姆椒ㄖ苽潆暮铣墒褂肍moc策略，在AppliedBiosystems433A肽合成儀(0.25mmol規(guī)模)上，使用制造商提供的FastMocUV方案(其使用HBTU-介導(dǎo)的偶合，在NMP中，UV檢測(cè)Fmoc保護(hù)基的脫保護(hù))，在Fmoc保護(hù)的Rink酰胺樹脂(Novabiochem)(肽酰胺)或在王氏樹脂(肽酸)上合成肽。所使用的保護(hù)的氨基酸衍生物是標(biāo)準(zhǔn)Fmoc-氨基酸(Anaspec)，提供于預(yù)稱重的柱(適合于ABI433A合成器)中。對(duì)于肽氨基甲酸鹽，在固相上或在溶液中肽從載體上裂解之后，通過用醇或酚的琥珀酰亞胺基碳酸酯處理肽(通過用二琥珀酰亞胺基碳酸酯和DIPEA在MeCN中處理相應(yīng)的醇或者酚來制備)，引入氨基甲?；?Gosh等人，TetrahedronLett1992，33(20)，2781-2784)。對(duì)于肽脲，通過用異氰酸酯處理樹脂結(jié)合的肽，在固相上引入氨基羰基。就?；碾亩?，使用與?；疐moc-保護(hù)的氨基酸相同的方案，用相應(yīng)的羧酸進(jìn)行最后的酰化。借助于常規(guī)方法，例如，在室溫下與三氟乙酸、水和三異丙基硅烷(95:2.5:2.5)的混合物一起攪拌，從樹脂上將肽斷裂。使用常規(guī)方案，用制備HPLC純化所有的產(chǎn)物，并通過UV吸收或者INNMR(帶有內(nèi)標(biāo))進(jìn)行定量。因子VII多肽的藥物制劑和給藥方式通常，不管含水制劑是否開始就存在于含水液體形式中、或通過(加入水或其它水性載體或輸送劑)溶解/重組基本上為固體的制劑(例如冷凍干燥制劑)的方式產(chǎn)生，本發(fā)明的含水的、液體因子VII多肽制劑或組合物(本發(fā)明的含水藥物組合物)可以合適地通過胃腸外(即靜脈內(nèi)，皮下或肌肉內(nèi))或通過連續(xù)或脈動(dòng)輸注的方式給藥。當(dāng)用于人類患者時(shí)，對(duì)于腸胃外給藥的本發(fā)明的因子VII多肽組合物，除了合適濃度的式I化合物或其生理學(xué)可允許的鹽之外，通常包含因子VII多肽與可藥用含水載體的組合，優(yōu)選溶于可藥用含水載體中。各種含水載體可以使用，例如水、緩沖的水、0.4%鹽水、0.3%甘氨酸等等。在本發(fā)明的背景下，還可以將因子VII多肽配制為脂質(zhì)體制劑，用于遞送或靶向至創(chuàng)傷的位點(diǎn)。脂質(zhì)體制劑通常描述在例如US4，837，028、US4，501，728和US4，975，282中?？梢酝ㄟ^常規(guī)的、眾所周知的殺菌技術(shù)將組合物消毒?？梢詫⒌玫降乃芤涸瓨影b使用，或可以在無菌條件下將它們過濾并冷凍干燥，在給藥之前，將冷凍干燥制劑與無菌水或無菌水溶液(載體，賦形劑)結(jié)合。根據(jù)需要，該組合物可以進(jìn)一步包含可藥用助劑物質(zhì)，以便接近生理?xiàng)l件和/或增加組合物的化學(xué)和/或物理穩(wěn)定性。這些助劑包括pH值-調(diào)節(jié)和/或緩沖劑，例如檸檬酸鹽(鈉或鉀)，醋酸鹽(銨、鈉或鈣)，組氨酸(L-組氨酸)，蘋果酸鹽(malate)，磷酸鹽(鈉或鉀)，酒石酸，琥珀酸，MES(2_N_嗎啉代_乙磺酸)，HEPES(4-(2-羥基-乙基)-哌嗪-1-乙烷_磺酸)，咪唑，TRIS[三(羥基甲基)氨基甲烷]，乳酸鹽，和谷氨酸鹽。為了保持溶液的優(yōu)選PH值，應(yīng)該選擇緩沖液濃度范圍。緩沖劑還可以是兩種或多種緩沖劑的混合物，例如，兩種這樣的試劑的混合物，以使混合物能夠提供特定范圍的pH值。在一個(gè)實(shí)施方案中，緩沖液是檸檬酸鹽和至少一種下列緩沖液的混合物醋酸鹽(銨、鈉或鈣)，組氨酸(L-組氨酸)，蘋果酸鹽，磷酸鹽(鈉或鉀)，酒石酸，琥珀酸，MES，HEPES，咪唑，TRIS，乳酸鹽和谷氨酸鹽。緩沖劑的總濃度典型地在大約ImM至大約lOOmM范圍內(nèi)，例如大約ImM至大約50mM，常常從大約ImM至大約25mM，例如，大約2mM至大約20mM。f丐鹽組合物(無論最初是液體、凍干或重組形式)可以任選包含f丐鹽。f丐鹽可以以低濃度存在，例如，大約O.lmM至大約5mM;也可以以中等濃度存在，例如，大約5mM至大約15mM;或它可以以更高濃度存在，例如，大約15mM至大約1000mM。在一方面，f丐鹽選自氯化鈣，乙酸鈣，葡萄糖酸鈣和塊莖糖酸(laevulate)鈣，和其中兩種或多種的混合物?；蛘撸琭丐離子在組合物中的濃度可以低于0.lmM。張力-調(diào)節(jié)試劑(張力-改變物質(zhì)，其有助于制劑的滲透壓)，例如氨基酸，小的肽(具有例如2到5個(gè)氨基酸殘基)，中性鹽，單或二糖，多糖，糖醇，或至少兩種這樣的物質(zhì)的混合物。具體實(shí)例包括但不局限于氯化鈉，氯化鉀，枸櫞酸鈉，蔗糖，葡萄糖和甘露糖醇。根據(jù)制劑中所存在的其它組分，將張力調(diào)節(jié)劑的濃度調(diào)節(jié)至接近等滲性。通常，根據(jù)所存在的其它組分，以大約1至大約500mM的濃度引入張力調(diào)節(jié)劑，例如大約1至大約300mM，常常從大約10至大約200mM，例如大約20至大約150mM。可以使用中性鹽，例如氯化鈉或氯化鉀。術(shù)語"中性鹽"表示基本上既不是酸性、也不是堿性的鹽，即，當(dāng)溶解時(shí)，對(duì)制劑pH值具有很小或沒有影響。表面活性劑，典型地是非離子型表面活性劑，合適地是聚山梨酸酯或TweenTM類型(例如Polysorbate20或80，或Tween80)，或Polox謙r或Pluronic類型(例如Poloxamer188或407)。結(jié)合的表面活性劑的量典型地在大約0.005至大約1%重量/重量(w/w)的范圍，數(shù)量從大約0.005至大約0.1%w/w，例如從大約0.005到0.02%w/w的范圍通常是優(yōu)選范圍。在一些情況下，為了保持蛋白穩(wěn)定性，需要比較高的濃度，例如高達(dá)大約0.5%w/w。然而，在實(shí)際操作中所使用的表面活性劑水平通常受到臨床實(shí)踐限制。抗氧化劑，例如抗環(huán)血酸，半胱氨酸，高半胱氨酸，胱氨酸，胱硫醚，甲硫氨酸，谷胱甘肽，或包含半胱氨酸或甲硫氨酸的肽；甲硫氨酸，尤其是L-甲硫氨酸，它們典型地是非常合適的抗氧化劑。典型地以大約0.1到大約2mg/ml的濃度引入抗氧化劑。防腐劑(包括在制劑中，以阻止微生物生長(zhǎng)，由此容許例如FVII多肽的"多次使用"包裝)。防腐劑的例子包括苯酚，苯甲醇，鄰甲酚，間甲酚，對(duì)甲酚，對(duì)羥基苯甲酸甲酯，對(duì)羥苯甲酸丙酯，氯化芐烷銨，和氯化芐乙胺。根據(jù)防腐劑的PH值范圍和類型，典型地以大約0.1到大約2mg/ml的濃度引入防腐劑。在組合物中，因子VII多肽的濃度可以變化范圍很大，典型地從大約O.01%w/w至大約2%w/w(即從大約0.lmg/ml至大約20mg/ml)，例如從大約0.05%w/w至大約1.5%w/w(即從大約0.5mg/1至大約15mg/ml)，例如從大約0.05%w/w至大約1%w/w(即從大約0.5mg/ml至大約10mg/ml)，并且按照所選擇的具體給藥模式、主要基于流體體積、粘度等等進(jìn)行選擇。就因子Vila而言，濃度通常表示為mg/ml或國(guó)際單位/ml(IU/ml)。FVIIa的lmg通常與43000-56000IU或更多的IU對(duì)應(yīng)。在本發(fā)明的液體含水藥物組合物中，本發(fā)明的式I化合物的濃度典型地至少為IPM。合乎需要(或必要的)的濃度典型地取決于所選擇的化合物，更具體地說，取決于所選擇化合物對(duì)因子VII多肽的結(jié)合親合性。在各種實(shí)施方案中，式I的化合物可以以下列濃度存在至少5iiM，至少10iiM，至少20iiM，至少50iiM，至少100iiM，至少150iiM，至少250iiM，至少500iiM，至少lmM，至少2mM，至少線至少5mM，至少8mM，至少9mM，至少10mM，至少15mM，或至少20mM，例如，1-10000iiM范圍內(nèi)，10-10000iiM，20-10000iiM，50-10000iiM，10-5000iiM，10-2000iiM，20-5000iiM，20-2000iiM，50-5000iiM，0.l-100mM，0.l-75mM，0.l-50mM，0.l-10mM，0.2-75mM，0.2-50mM，0.2-20mM，0.5-75mM或0.5-50mM。在各種實(shí)施方案中，在式I化合物和FVII多肽之間的摩爾比可以是高于0.1，高于0.5，高于1，高于2，高于5，高于10，高于25，高于100，高于250，高于1000，高于2500，或高于5000，例如，在下述范圍內(nèi)0.1-10000，0.1-5000，0.1-2500，0.1-1000，0.1-250，0.I-IOO，O.1-25,0.I-IO，O.5-10000,0.5_5000，0.5_2500，0.5_1000，0.5_250，0.5—100，0.5-25,0.5-10，1-10000，1-5000，1-2500，1-1000，1-250，1-100;1-25;1-10，10-10000，10-5000，10-250，1000-10000，或1000-5000。制備胃腸外給予的組合物的方法對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是已知的或顯而易見的，并且更詳細(xì)地描述在例如下列中Remington'sPharmaceuticalSciences，18thedition,MackPublishingCompany,Easton，PA(1990)。對(duì)于與故意干預(yù)(例如手術(shù)方法)結(jié)合的治療，因子VII多肽典型地在進(jìn)行干預(yù)之前大約24小時(shí)之內(nèi)給藥，并且而后給藥7天或更多天。以凝結(jié)劑形式給藥可以利用本文所描述的各種途徑。根據(jù)患者的重量和病癥的嚴(yán)重程度，對(duì)于70kg患者，因子VII多肽(例如rhFVIIa)的劑量通常在大約0.05mg/天至500mg/天的范圍作為沖擊(loading)和保持劑量，優(yōu)選大約lmg/天至大約200mg/天，且更優(yōu)選大約10mg/天至大約175mg/天。包含因子VII多肽的組合物可以預(yù)防性和/或治療性給藥。在治療應(yīng)用中，將組合物給予患有上述病癥的患者，其數(shù)量應(yīng)足以治愈、減輕或部分地抑制病癥和它的并發(fā)癥。將足夠?qū)崿F(xiàn)該目標(biāo)的數(shù)量定義為"治療有效量"。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，有效用于該目的的數(shù)量取決于病癥或創(chuàng)傷的嚴(yán)重程度，以及取決于患者的體重和常規(guī)實(shí)際條件。必須記住，F(xiàn)VII多肽(例如rhFVIIa)的藥物組合物的使用通常與危急生命或潛在危急生命的醫(yī)學(xué)病癥或狀態(tài)有關(guān)，在這種情況下，由于與浸出物質(zhì)數(shù)量最小化有關(guān)的常規(guī)優(yōu)點(diǎn)，并且考慮到人類因子VII多肽的免疫原性的普遍缺乏，可能的和合乎需要的是，治療醫(yī)生給予基本上過量的所述因子VII多肽。在預(yù)防性應(yīng)用的情況下，為了增加患者固有的凝結(jié)能力，將包含因子VII多肽的組合物給予對(duì)疾病狀態(tài)或創(chuàng)傷敏感或處于疾病狀態(tài)或創(chuàng)傷危險(xiǎn)之中的患者。對(duì)于這種目的所使用的劑量(可以稱為"預(yù)防有效量")同樣取決于患者的體重和常規(guī)健康狀態(tài)，但對(duì)于70千克的患者，通常也在大約0.05mg/天至大約500mg/天的范圍，更通常從大約1.Omg/天至大約200mg/天。具體地，在將rhFVIIa給予人類患者的情況下，劑量水平通常每劑量是大約90-120iig/kg體重的范圍之內(nèi)。然而，當(dāng)前優(yōu)選稍微高的劑量，例如超過150iig/kg體重的劑量，且在某些情況下，選擇大約250-300iig/kg的劑量。單一或多重給予所述組合物可以使用治療醫(yī)生所選擇的劑量水平和給藥方案來進(jìn)行。對(duì)于需要每天維護(hù)水平的門診患者，可以通過連續(xù)輸注的方式給予因子VII多肽，例如使用可移動(dòng)式泵系統(tǒng)。因子VII多肽的局部給藥，例如局部應(yīng)用，可以如下進(jìn)行例如，噴霧，輸液，利用雙氣囊導(dǎo)管或支架，引入到血管移植物或支架中，以涂漬氣囊導(dǎo)管的水凝膠形式，或通過其它非常確實(shí)的方法。在任何情況下，所述藥物組合物應(yīng)該提供適于有效治療患者的因子vn多肽的數(shù)量。當(dāng)在2t:至8t:的溫度下保存時(shí)，液體藥物制劑應(yīng)該典型地穩(wěn)定至少6個(gè)月，并且優(yōu)選最高達(dá)36個(gè)月。應(yīng)該理解，優(yōu)選，液體藥物制劑在更高溫度下是穩(wěn)定的，例如環(huán)境溫度，例如2(TC至30°C，即使這常常需要更高含量的抑制劑。術(shù)語"穩(wěn)定"表示在2t:至『C儲(chǔ)存6個(gè)月之后，初始液體藥物制劑保持其初始生物活性的至少50%。優(yōu)選，在2至『C儲(chǔ)存6個(gè)月之后，該液體藥物制劑保持其初始活性的至少70%，例如至少80%，或至少85%，或至少90%，或至少95%。就因子VII多肽而言，術(shù)語"穩(wěn)定"更具體地表示(i)通過一期凝固(clot)試驗(yàn)(試驗(yàn)4)測(cè)定，在2t:至『C儲(chǔ)存6個(gè)月之后，初始液體藥物制劑保持其初始生物活性的至少50%，或(ii)在2t:至8t:儲(chǔ)存6個(gè)月之后，重鏈降解產(chǎn)物的含量是至多40%(w/w)，假定初始液體藥物制劑不包含重鏈降解產(chǎn)物(即只有因子VII多肽記入百分比的計(jì)算)。優(yōu)選，在2至8t:儲(chǔ)存6個(gè)月之后，液體藥物制劑保持其初始活性的至少70%，例如至少80%，或至少85%，或至少90%，或至少95%。還優(yōu)選，在初始液體藥物制劑中，重鏈降解產(chǎn)物的含量是至多30%(w/w)，至多25%(w/w)，至多20X(w/w)，至多15%(w/w)，至多10%(w/w)，至多5X(w/w)，或至多3X(w/w)。由此，如上面所述，"穩(wěn)定組合物"是指具有提高的物理穩(wěn)定性、提高的化學(xué)穩(wěn)定性或提高的物理和化學(xué)穩(wěn)定性的組合物。通常，在使用和儲(chǔ)存期間(遵照建議的使用和儲(chǔ)藏條件)，直到達(dá)到有效期為止。在一個(gè)實(shí)施方案中，包含F(xiàn)VII多肽和式(I)化合物的藥物組合物在2-8t:的儲(chǔ)存條件下可以穩(wěn)定6個(gè)月以上，在環(huán)境溫度下可以使用l周以上。在進(jìn)一步實(shí)施方案中，包含F(xiàn)VII多肽和式(I)化合物的藥物組合物在2-『C的儲(chǔ)存條件下可以穩(wěn)定24個(gè)月以上，在環(huán)境溫度下可以使用4周以上。在另一個(gè)進(jìn)一步實(shí)施方案中，包含F(xiàn)VII多肽和式(I)化合物的藥物組合物在2-『C的儲(chǔ)存條件下可以穩(wěn)定36個(gè)月以上，和在環(huán)境溫度下可以使用6周以上?？梢岳斫?，本文所定義的液體含水藥物組合物可以在藥物領(lǐng)域使用。由此，本發(fā)明尤其提供了用作藥物的本文所定義的液體含水藥物組合物，更尤其用作治療用所述因子VII多肽能有效抵御的病癥或障礙的藥物。因此，本發(fā)明還提供了本文所定義的液體含水藥物組合物用于制備藥物的用途，該藥物用于治療用所述因子VII多肽可有效抵御的病癥或障礙，還提供了治療用所述因子VII多肽可有效抵御的病癥或障礙的方法，該方法包括給予需要其的患者有效量的本文所定義的液體含水藥物組合物。本發(fā)明的制劑可以用來治療用所述因子VII多肽可有效抵御的任何病癥或障礙，例如但不限于出血障礙，包括凝血因子缺乏所引起的那些障礙(例如，有和沒有抑制劑的先天性血友病A，獲得性血友病A，有和沒有抑制劑的先天性血友病B，獲得性血友病B，凝固因子XI缺乏，凝固因子VII缺乏)，vonWillebrand's疾病，血小板障礙或缺乏(例如，低血小板)，或血小板減少癥。本文使用的術(shù)語"出血障礙"反映了在出血時(shí)表現(xiàn)的細(xì)胞或分子源的先天性、獲得性或誘導(dǎo)性的任何缺陷。所述因子VII多肽可有效抵御的病癥或障礙還包括受到廣泛組織損傷的患者的出血，例如，與手術(shù)或損傷有關(guān)的出血，包括但不限于與脊椎或心臟手術(shù)、矯形外科(例如臀部、肘、膝蓋矯形)、或腹腔鏡檢查手術(shù)有關(guān)的出血，剌入或鈍器損傷，頭損傷，包括外傷性腦創(chuàng)傷、腦內(nèi)出血，與誘導(dǎo)性止血缺陷有關(guān)的出血，例如與抗凝療法或抗纖維蛋白溶解治療有關(guān)的出血，和任何原因造成的無控制的和大量出血。在大范圍組織損傷的情況下，立即止血的需要可以將正常止血的機(jī)制推翻，并且盡管還有其他正常止血機(jī)制，但出血還可能進(jìn)一步發(fā)展。還包括手術(shù)止血可能受到限制的器官出血，例如腦、內(nèi)耳區(qū)域、眼、肝臟、肺、腫瘤組織和胃腸道出血以及彌漫性出血(出血性胃炎和子宮大出血)。對(duì)于所有這些情況，通常很難通過手術(shù)技術(shù)(縫合，夾鉗，等等)來止血。術(shù)語"有效量"是由有資格的醫(yī)師確定的有效量，有資格的醫(yī)師可以滴定獲得目標(biāo)反應(yīng)的劑量。所考慮的劑量因素包括效能，生物利用率，目標(biāo)藥物動(dòng)力學(xué)/藥效特性，治療的病癥，患者相關(guān)的因素(例如重量，健康，年齡，等等)，是否存在共同給予的藥物(例如，抗凝血?jiǎng)?，給藥時(shí)間，或開業(yè)醫(yī)生已知的其它因素。術(shù)語"治療"定義為為了抵御疾病、病癥或障礙而對(duì)患者(例如哺乳動(dòng)物，尤其是人)的處理和護(hù)理，并且包括給予因子VII多肽，以預(yù)防癥狀或并發(fā)癥的起始，或減輕癥狀或并發(fā)癥，或消除疾病、病癥或障礙。包含因子VII多肽的按照本發(fā)明的藥物組合物可以胃腸外給予需要這種治療的患者。腸胃外給藥可以借助于注射器通過皮下、肌注或靜脈注射進(jìn)行，任選筆類注射器。或者，腸胃外給藥可以借助于輸液泵進(jìn)行。在重要的實(shí)施方案中，按照本領(lǐng)域已知的方法，使藥物組合物適合于皮下、肌內(nèi)或靜脈注射。包含因子VII多肽和一或多種按照本發(fā)明化合物(I)的藥物組合物可以進(jìn)一步包含下列或與下列結(jié)合使用一或多種凝血因子，例如但不限于因子XIII，因子VIII，因子IX，另一種因子VII多肽或FEIBATM。本發(fā)明的進(jìn)一歩方面正如上面在某種程度上已經(jīng)表明的那樣，本發(fā)明的進(jìn)一步方面包括下列藥物組合物(例如液體含水藥物組合物)，包含一或多種按照本發(fā)明的化合物或其生理學(xué)可允許的鹽；和因子VII多肽(例如野生型人類FVIIa，例如rhFVIIa)。制備包括因子VII多肽(例如野生型人類FVIIa，例如rhFVIIa)的組合物的方法，包括將按照本發(fā)明的化合物或其生理學(xué)可允許的鹽加入到包含因子VII多肽的樣品中；或?qū)⒁蜃覸II多肽加入到包含按照本發(fā)明的化合物或其生理學(xué)可允許鹽的樣品中；在這種類型的方法中，化合物或其鹽和/或因子VII多肽可以存在于液體含水介質(zhì)中。利用按照本發(fā)明的方法制備的藥物組合物；抑制因子VII多肽(例如野生型人類FVIIa，例如rhFVIIa)的方法，包括將按照本發(fā)明的化合物或其生理學(xué)可允許的鹽加入到包含因子VII多肽的樣品中；或?qū)⒁蜃覸II多肽加入到包含按照本發(fā)明的化合物或其生理學(xué)可允許鹽的樣品中；在這種類型的方法中，化合物或其鹽和/或因子VII多肽可以存在于液體含水介質(zhì)中。按照本發(fā)明的藥物組合物用于制備藥物的用途，該藥物用于治療用所述因子VII多肽可有效抵御的病癥或障礙。將本文中引用的所有參考文獻(xiàn)(包括出版物、專利申請(qǐng)和專利)引入本文作為參考，其程度如同每個(gè)參考文獻(xiàn)是單獨(dú)和具體地注明引入作為參考那樣，并且每個(gè)都以其整體列出。本文使用的所有標(biāo)題和副標(biāo)題都僅為方便起見，并且不應(yīng)該將其理解為以任何方式對(duì)本發(fā)明進(jìn)行限制。本發(fā)明包括上述要素(在其所有可能的變體中)的任何組合，除非本文另有陳述，或明顯同上下文相矛盾。在描述本發(fā)明的上下文中使用的術(shù)語"一個(gè)"和"一種"和"該"以及類似的參照包括單數(shù)和復(fù)數(shù)，除非本文另有陳述，或明顯地同上下文相矛盾。本文列舉的數(shù)值范圍僅僅作為簡(jiǎn)寫方法，其各別地指的是落入該范圍之內(nèi)的每個(gè)單獨(dú)值，除非本文另有陳述，并且將每個(gè)單獨(dú)數(shù)值結(jié)合進(jìn)說明書中，好象本文將其獨(dú)立地列舉一樣。除非另有說明，本文提供的所有精確值代表相應(yīng)的近似值(例如，可以認(rèn)為相對(duì)于具體因素或測(cè)定提供的所有確切的示范性數(shù)值還可提供相應(yīng)的近似測(cè)定，如果合適的話，用"大約"修飾)。本文所描述的所有方法可以以任何合適順序進(jìn)行，除非本文另有陳述，或明顯地同上下文相矛盾。本文提供的任何和所有實(shí)施例或示范性術(shù)語("例如(forinstance)"，"例如(suchas)")的應(yīng)用僅僅是為了更好地說明本發(fā)明，不造成對(duì)本發(fā)明范圍的限制，除非另有陳述。在說明書中沒有文辭將被視為指示任何要素對(duì)本發(fā)明的實(shí)踐是必需的，除非非常明確地陳述。本文引用和引入的專利文件僅僅為方便起見，并不反映這種專利文件的有效性、專利性和/或可實(shí)施性的任何觀點(diǎn)。本文對(duì)于本發(fā)明的任何方面或?qū)嵤┓桨傅恼f明，當(dāng)相對(duì)于一個(gè)或多個(gè)要素使用術(shù)語例如"包含"、"具有"、"包括"或"含有"時(shí)，是想為本發(fā)明的類似方面或?qū)嵤┓桨钢械?包含"、"基本上由...組成"，或"基本上地包含"那些具體要素或多個(gè)要素提供支持，除非另有說明或明顯地同上下文相矛盾。(例如，當(dāng)本文所描述組合物包含某具體要素時(shí)，應(yīng)該將其理解為其還描述了由該要素組成的組合物，除非另有說明或明顯地同上下文相矛盾)。本發(fā)明包括本文在方面或權(quán)利要求中所列舉主題的所有變體和等效內(nèi)容，達(dá)到所適用法律最大允許的程度。本發(fā)明的具體實(shí)施方案如下實(shí)施方案1.通式(I)的化合物X^HHX7,(I)其中，X1表示低級(jí)烷氧羰基，低級(jí)鏈烯基氧基羰基，炔氧基羰基，環(huán)烷基氧基羰基，環(huán)烷基烷氧羰基，芳氧羰基，芳基烷氧羰基，或雜芳基烷氧羰基，低級(jí)烷胺基羰基，低級(jí)烯基氨基26羰基，炔基氨基羰基，環(huán)烷基氨基羰基，環(huán)烷基烷基氨基羰基，芳基氨基羰基，芳烷基氨基羰基，或雜芳基烷基氨基羰基，低級(jí)烷?；?，低級(jí)烯酰基，低級(jí)鏈二烯基，炔?；h(huán)烷?；?，環(huán)烷基烷?；?，環(huán)烯基烷酰基，芳?；?，芳基烷酰基，或雜芳基烷?；?，其中所述基團(tuán)任選被下列基團(tuán)取代鹵素，羥基，低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基，低級(jí)烷硫基或氰基；X2表示Arg，HomoArg，0rn，Lys，Dab，或Dap;f表示Glu，Asp，(a-Me)Glu，l-氨基環(huán)丁烷-反式-l，3-二羧酸，或1-氨基環(huán)丁烷-順式-l，3-二羧酸；X4表示Arg，HomoArg，Lys，His，Asn，Gln，Trp，Phe，Phg，Glu，D-Glu，Asp，D-Asp，Dab，Dap，NP-[脒基]-D即或Ny-[脒基]Dab;X5表示Phg，D-Phg，Phe，Val，Ile，Leu，Lys，Ala，Glu，Gly，Aib，Trp，Abu，Alle，Cha，Hph，Nle或Nva;X6表示Ala，Gly，His，Arg，HomoArg，Orn，Dab，Dap，Phe，Glu，Val，Gln，Ile，Ser，Thr，Tyr，Trp，Lys，Lys(mPeg(HOk)-CO)，或不存在；X7表示Ala，Gly，His，Arg，HomoArg，Orn，Dab，Dap，Phe，Glu，Val，Gln，Ile，Ser，Thr，Tyr，Trp，Lys(mPeg(1-lOk)-CO)，或不存在；禾口當(dāng)X6或X7之一或兩者都表示Lys(mPeg(l-10k)-C0)時(shí)，X2表示4_脒基-Phe，Arg，HomoArg，Orn，Lys，Dab或Dap，包括其任何和所有的立體異構(gòu)形式、任何比例的兩種或多種這種式I化合物的任何混合物、和其生理學(xué)允許的鹽和前體藥物。實(shí)施方案2.按照實(shí)施方案1的化合物，其中X1表示低級(jí)烷氧羰基，低級(jí)鏈烯基氧基羰基，炔氧基羰基，環(huán)烷基氧基羰基，環(huán)烷基烷氧羰基，低級(jí)烷胺基羰基，低級(jí)烯基氨基羰基，炔基氨基羰基，環(huán)烷基氨基羰基，環(huán)烷基烷基氨基羰基，低級(jí)烷?；?，低級(jí)烯?；?，炔?；h(huán)烷?；颦h(huán)烷基烷?；?，和其中所述基團(tuán)任選被下列基團(tuán)取代鹵素，低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基，或低級(jí)烷硫基。實(shí)施方案3.按照實(shí)施方案2的化合物，其中f表示甲氧羰基，乙氧羰基，丙氧羰基，2-(甲氧基)乙氧羰基，2-(甲硫基)乙氧羰基，異丙氧羰基，烯丙氧基羰基，2-氯代烯丙氧基羰基，炔丙基氧羰基，異丁氧羰基，環(huán)丁基氧羰基，環(huán)戊基氧羰基，環(huán)丙基甲氧基羰基，甲基氨基羰基，二甲基氨基羰基，乙基氨基羰基，二乙基氨基羰基，丙基氨基羰基，異丙基氨基羰基，烯丙基氨基羰基，環(huán)丁基氨基羰基，環(huán)戊基氨基羰基，環(huán)丙基甲基氨基羰基，乙?；；□；?，戊?；?-環(huán)丙基丙?；?4-烯?；?，2-甲基-4-戊烯?；?，4-己烯?；?，3-環(huán)戊烯-1-?；?，4，5，5-三氟戊-4-烯?；蚣?2，4-二烯酰基。實(shí)施方案4.按照前述任一項(xiàng)的實(shí)施方案的化合物，其中^表示Arg、HomoArg、Orn或Lys。實(shí)施方案5.按照實(shí)施方案4的化合物，其中X2表示HomoArg。實(shí)施方案6.按照前述任一項(xiàng)的實(shí)施方案的化合物，其中X3表示Glu。實(shí)施方案7.按照前述任一項(xiàng)的實(shí)施方案的化合物，其中f表示Arg、HomoArg、Lys、His、Asn、Gln、Dab或Dap。實(shí)施方案8.按照實(shí)施方案7的化合物，其中f表示Asn或Gln。實(shí)施方案9.按照前述任一項(xiàng)的實(shí)施方案的化合物，其中XS表示Phe、Val、Ile、27Leu、Ala、Cha、Gly或Trp。實(shí)施方案10.按照實(shí)施方案9的化合物，其中X5表示Phe、Cha或Trp。實(shí)施方案11.按照前述任一項(xiàng)的實(shí)施方案的化合物，其中f表示Ala，Gly，His，Arg，HomoArg，0rn，Glu，Val，Gln，Phe，Ile，Ser，Thr，Tyr，Lys(mPeg(1-lOk)-CO)，或不存在。實(shí)施方案12.按照實(shí)施方案11的化合物，其中X6表示Ala，His,Arg，HomoArg,Glu，Gln，Thr，Tyr，Lys(mPeg(l-10k)-CO)，或不存在。實(shí)施方案13.按照前述任一項(xiàng)的實(shí)施方案的化合物，其中f表示Ala，Gly，His，Arg，HomoArg，Orn，Glu，Val，Gln，Phe，Ile，Ser，Thr，Tyr，Lys(mPeg(1-lOk)-CO)，或不存在。實(shí)施方案14.按照實(shí)施方案13的化合物，其中f表示Ala，His，Arg，HomoArg，Glu，Gln，Thr，Tyr，Lys(mPeg(l-10k)-CO)，或不存在。實(shí)施方案15.按照實(shí)施方案12的化合物，其中X6不存在。實(shí)施方案16.按照實(shí)施方案14的化合物，其中X7不存在。實(shí)施方案17.按照實(shí)施方案1-16的任一項(xiàng)的化合物，其中化合物選自下列丙氧羰基-HomoArg-Glu-Asn-Cha_NH2;Alloc_HomoArg_Glu_(D-Asp)_Cha_NH2;Alloc_HomoArg_Glu_Asn_Cha_NH2;Alloc-HomoArg-Glu-(D-Glu)-Cha_NH2;節(jié)氧羰基-HomoArg-Glu-Asn-Cha-NH2;Alloc_HomoArg_Glu_Dap_Cha_NH2;Alloc_HomoArg_Glu_HomoArg_Cha_NH2;Alloc_HomoArg_Glu_Asn_Cha_Arg_NH2;Alloc_HomoArg_Glu_Asn_Cha_Gly_NH2;Alloc_HomoArg_Glu_Asn_Cha_Glu_NH2;Alloc_HomoArg_Glu_Asn_Cha_Phe_NH2;Alloc_HomoArg_Glu_Asn_Cha_HomoArg_NH2;丙基氨基羰基_HomoArg-Glu-Asn-Cha-NH2;環(huán)丙基甲氧羰基-HomoArg-Glu-Asn-Cha-NH2;Alloc_HomoArg_Glu_Asn_Cha_His_NH2;乙氧羰基-HomoArg-Glu-Asn-Cha-Phe-NH2;禾口2-氯代烯丙基氧羰基-HomoArg-Glu-Asn-Cha-NH2，包括其任何和所有的立體異構(gòu)形式、任何比例的兩種或多種這種式I化合物的任何混合物、和其生理學(xué)允許的鹽和前體藥物。實(shí)施方案18.藥物組合物，其包含按照實(shí)施方案1-17的任一項(xiàng)的化合物或其生理學(xué)可允許的鹽和因子VII多肽。實(shí)施方案19.按照實(shí)施方案18的藥物組合物，其中所述因子VII多肽選自野生型人類因子Vila;因子VII變體；和因子VII衍生物。實(shí)施方案20.按照實(shí)施方案19的藥物組合物，其中所述因子VII變體是PEG化的28因子VII。實(shí)施方案21.按照實(shí)施方案18-20的任一項(xiàng)的藥物組合物，其進(jìn)一步包含藥學(xué)可允許的載體或稀釋劑。實(shí)施方案22.按照實(shí)施方案18-21的任一項(xiàng)的藥物組合物，其是液體含水組合物。實(shí)施方案23.制備包含因子VII多肽的組合物的方法，包括將按照實(shí)施方案1-17的任一項(xiàng)的化合物或其生理學(xué)可允許的鹽加入到含有所述因子VII多肽的樣品中；或?qū)⑺鲆蜃覸II多肽加入到含有按照實(shí)施方案1-17的任一項(xiàng)的化合物或其生理學(xué)可允許鹽的樣品中。實(shí)施方案24.按照實(shí)施方案23的方法，其中所述因子VII多肽選自野生型人類因子Vila;因子VII變體；和因子VII衍生物。實(shí)施方案25.按照實(shí)施方案24的方法，其中所述因子VII變體是PEG化的因子VII。實(shí)施方案26.按照實(shí)施方案23-25的任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物或其鹽和/或所述因子VII多肽存在于液體含水介質(zhì)中。實(shí)施方案27.利用按照實(shí)施方案23-26的任一項(xiàng)的方法制備的藥物組合物。實(shí)施方案28.抑制因子VII多肽的方法，包括將按照實(shí)施方案1-17的任一項(xiàng)的化合物或其生理學(xué)可允許的鹽加入到含有所述因子VII多肽的樣品中；或?qū)⑺鲆蜃覸II多肽加入到含有按照實(shí)施方案1-17的任一項(xiàng)的化合物或其生理學(xué)可允許鹽的樣品中。實(shí)施方案29.按照實(shí)施方案28的方法，其中所述因子VII多肽選自野生型人類因子Vila;因子VII變體；和因子VII衍生物。實(shí)施方案30.按照實(shí)施方案29的方法，其中所述凝血因子VII變體是PEG化的因子VII。實(shí)施方案31.按照實(shí)施方案28-30的任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物或其鹽和/或所述因子VII多肽存在于液體含水介質(zhì)中。實(shí)施方案32.按照實(shí)施方案18-22或27的藥物組合物用于制備藥物的用途，該藥物用于治療用所述因子VII多肽可有效抵御的病癥或障礙。實(shí)施方案33.按照實(shí)施方案1-17的任一項(xiàng)的化合物與因子VII多肽的組合用于制備藥物的用途，該藥物用于治療用所述因子VII多肽可有效抵御的病癥或障礙。實(shí)施方案34.按照實(shí)施方案32或33的用途，其中病癥或障礙選自出血障礙；受到大范圍組織損傷的患者的出血；和手術(shù)止血的可能性受到限制的器官的出血。實(shí)施方案35.按照實(shí)施方案34的用途，其中出血障礙選自凝血因子缺乏，有和沒有抑制劑的先天性血友病A，獲得性血友病A，有和沒有抑制劑的先天性血友病B，獲得性血友病B，凝固因子XI缺乏，凝固因子VII缺乏，vonWillebrand's疾病，血小板障礙或缺乏和血小板減少癥。實(shí)施方案36.按照實(shí)施方案34的用途，其中受到大范圍組織損傷的患者的出血選自與手術(shù)或損傷有關(guān)的出血，與脊椎或心臟手術(shù)、矯形外科或腹腔鏡檢查手術(shù)有關(guān)的出血，剌入或鈍器損傷，頭損傷，腦內(nèi)出血，與誘導(dǎo)的止血缺陷有關(guān)的出血，與抗凝療法或抗纖維蛋白溶解治療有關(guān)的出血，和任何原因造成的無控制的和大量出血。實(shí)施方案37.按照實(shí)施方案34的用途，其中手術(shù)止血的可能性受到限制的器官出血選自腦出血、內(nèi)耳區(qū)域出血、眼出血、肝臟出血、肺出血、腫瘤組織出血和胃腸道出血以及彌漫性出血(出血性胃炎和子宮大出血)。實(shí)施方案38.按照實(shí)施方案1-17的任一項(xiàng)的化合物用于穩(wěn)定因子VII多肽的用途。實(shí)施例使用下列縮寫Abu:Ac:AibAlleAlloc4_脒基-PheBoc:t-BuChaDCM:DIPEA或DIEADMF:DMSO:EDAC:ELS:Et:PmocHBTUHOBt:HomoArg:Hph:Me:Nle證NvaHP1X:1XMS:Lys(mPeg(HOk).乙?；鵤-氨基異丁酸4-脒基-苯丙氨酸，H2N-CH(CH2-C6H4-C(=NH)NH2)_C02H叔丁氧羰基叔丁基P-環(huán)己基丙氨酸，(1S)-l-氨基-2-環(huán)己基丙酸二氯甲烷，亞甲基氯化物二異丙基乙胺N，N-二甲基甲酰胺二甲亞砜N-乙基-N'_(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸^!.蒸發(fā)光散射乙基9H-芴-9-基甲氧羰基2_(1H-苯并三唑-1-基-)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸鹽N-羥基苯并三唑，1-羥基苯并三唑高精氨酸，N-e-脒基賴氨酸，H2N-CH((CH2)4-NH-C(=NH)NH2)C02H-CO)正(nor)亮氨酸，a-N-甲基吡咯烷酮戊氨酸，a-氨基戊翻高壓液相色譜液相色譜_質(zhì)譜聯(lián)用在側(cè)鏈氨基被甲氧基聚(乙二醇)-衍生的羧酸?；馁嚢彼?MeO-(CH2-CH2-0)n-(CH2)m_C02H)證N-甲基-2-吡咯烷酮Phg(S)-苯基甘氨酸，L-苯基甘氨酸Pmc:2，2，5，7，8-五甲基色滿-6-磺酰基r.t.室溫Su:琥珀酰亞胺基TFA:三氟乙酸TIS:三異丙基硅烷Trt:三苯甲基方法(1)酶抑制-常規(guī)方法通過測(cè)定抑制所述酶活性的50%的式(I)化合物濃度(即ICs。值，其涉及抑制常數(shù)Ki)，評(píng)價(jià)式(I)化合物抑制FVIIa或其它酶/凝血因子(例如凝血因子Xa，凝血酶，胞漿素或胰蛋白酶)的能力。借助于合適顯色底物來測(cè)定該1(:5。值，并在繪制水解的相對(duì)速率(與非抑制性對(duì)照物相比)對(duì)式(I)化合物濃度的log的圖之后，通過線性回歸來進(jìn)行計(jì)算。為了計(jì)算抑制常數(shù)Ki，通過使用下式考慮與底物競(jìng)爭(zhēng)的ICs。值的校正Ki=IC5。/{l+(底物濃度/Km)}，其中Km是米-曼氏常數(shù)[ChenandPrusoff，Biochem.Pharmacol.22(1973)，3099-3108;I.H.Segal，EnzymeKinetics,1975，JohnWiley&Sons，NewYork,100-125;將兩者以其整體結(jié)合到本文中作為參考]。(l)a因子VIIa(FVHa)試驗(yàn)式I化合物針對(duì)因子VIIa/組織因子活性的抑制活性[表示為抑制常數(shù)Ki(FVIIa)]可以使用基本上與先前所描述試驗(yàn)一樣的顯色試驗(yàn)來測(cè)定[J.A.Ostrem等人，Biochemistry37(1998)1053-1059，本文以其全部將其引入作為參考)。在半量微孔板(CostarCorp.，Cambridge,Mass.)中，在25°C，使用動(dòng)力學(xué)平皿讀數(shù)器(MolecularDevicesSpectramax250)，進(jìn)行動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)。在典型的試驗(yàn)中，將25rhFVIIa和TF(最后濃度分別為5nM和10nM)與40抑制劑稀釋物(在10%DMSO/TBS-PEG緩沖液(50mMTris，15mMNaCl，5mMCaCl2，0.05%PEG8000，pH8.15)中)混合。預(yù)先培養(yǎng)15分鐘之后，通過加入35ii1顯色底物S-2288(D-Ile-Pro-Arg-對(duì)硝基苯胺，PharmaciaH印arInc.，500iiM最后濃度)來引發(fā)試驗(yàn)。本發(fā)明的化合物可以抑制FVIIa/TF，具有3mM至〈1yM的ICs。值?？梢允褂孟铝性囼?yàn)(l)b-e和(2)a-c來研究式I化合物對(duì)某些其它凝固酶及其它絲氨酸蛋白酶的抑制可能性，并由此測(cè)定式I化合物的特異性。(l)b因子Xa試驗(yàn)組合物50mMTris-Cl(pH7.8)、200mMNaCl、0.05%(w/v)PEG-8000、0.02%(w/v)NaN3的TBS-PEG緩沖液用于該試驗(yàn)。在Costar半-區(qū)域微量滴定板的合適孔中，通過將下列混合來測(cè)定IC50值25u1人類因子Xa(EnzymeResearchLaboratories,Inc.;SouthBend，Ind.)(在TBS-PEG緩沖液中)；40ii110%(v/v)DMS0(在TBS-PEG緩沖液31中)(非抑制對(duì)照物)，或各種濃度的試驗(yàn)化合物(在10%(v/v)DMS0/TBS-PEG中稀釋)；和底物S-2765[N(a)-節(jié)氧羰基-D-Arg-Gly-L-Arg-對(duì)硝基苯胺；KabiPharmacia,Inc.;Franklin,Ohio](在TBS-PEG中)。通過將式I化合物+酶預(yù)先培養(yǎng)10分鐘來進(jìn)行試驗(yàn)。然后通過加入底物(獲得100的最終容積)來引發(fā)試驗(yàn)。在25t:，在時(shí)間過程的線型部分期間(通常在加入底物之后的1.5分鐘)，使用Bio-tekInstruments動(dòng)力學(xué)平皿讀數(shù)器(CeresUV900HDi)，通過在405nm處的吸光度的變化，測(cè)定顯色底物水解的初始速率。酶濃度是0.5nM，和底物濃度是140iiM。(l)c凝血酶試驗(yàn)在該試驗(yàn)中也使用TBS-PEG緩沖液。按照上面因子Xa試驗(yàn)來測(cè)定IC5。值，只不過所使用的底物是S-2366(L-PyroGlu-L-Pro-L-Arg-對(duì)硝基苯胺；Kabi)，酶是人凝血酶(EnzymeResearchLaboratories,Inc.;SouthBend，Ind.)。酶濃度是175iiM。(l)d胞漿素試驗(yàn)在該試驗(yàn)中也使用TBS-PEG緩沖液。按照上述因子Xa試驗(yàn)來測(cè)定IC5。值，只不過所使用的底物是S-2251(D-Val-L-Leu-L-Lys-對(duì)硝基苯胺；Kabi)，酶是人胞漿素(Kabi)。酶濃度是5nM，底物濃度是300iiM。(l)e胰蛋白酶試驗(yàn)含有10mMCaCl2的TBS-PEG緩沖液用于該試驗(yàn)。按照上述因子Xa試驗(yàn)來測(cè)定IC5。值，只不過所使用的底物是BAPNA(苯甲?；?L-Arg-對(duì)硝基苯胺；SigmaChemicalCo.;St.Louis，Mo)，酶是牛胰腺胰蛋白酶(XIII型，TPCK處理;Sig腿)。酶濃度是50nM，底物濃度是300iiM。(2)aFIXa和tPA的酰胺化試驗(yàn)酶禾口底物得自于AmericanDiagnostica;FIXa(catno449b)，F(xiàn)IXa底物(catno299F)，tPA(catno170)禾PtPA底物(catno444LF)。用Spectramax熒光計(jì)(360nm激發(fā)，440nm發(fā)射)鑒別底物299F和444LF的水解。用Spectramax分光光度計(jì)(在405nm處)鑒別底物251和S-2288的水解。在包含50mMH印es(pH7.4)、100mMNaCl、5mMCaCl2、0.01%Tween80的緩沖液中進(jìn)行所有的試驗(yàn)。抑制劑的使用濃度是10、20、50、100、200iiM。使用100yM底物進(jìn)行FIXa試驗(yàn)，使用10iiM底物進(jìn)行tPA試驗(yàn)。(2)bFXIa和FXIIa的酰胺化試驗(yàn)酶FXIa和FXIIa得自于AmericanDiagnostica;FXIa(catno4011a)、FXIIa(catno412HA)和胰蛋白酶(catno20465)得自于LifeTechnology。對(duì)于FXIa，使用的顯色底物(Chromogenix)是2288，對(duì)于FXIIa，使用的是2765。用Spectramax分光光度計(jì)(在405nm處)鑒測(cè)顯色底物水解10-20分鐘，具有5_20秒的間隔(取決于酶)。在包含50mMH印es(pH7.4)、100mMNaCl、5mMCaCl2、0.01%BSA的緩沖液中進(jìn)行所有的試驗(yàn)。例外是，對(duì)于FIXa試驗(yàn)，將乙二醇進(jìn)一步加入至40X的最后濃度。在該試驗(yàn)中，對(duì)于每個(gè)抑制劑濃度25、50、100、500iiM，使用50、100、200、500、1000yM的底物濃度。(2)c數(shù)據(jù)分析對(duì)于在單一底物濃度下的試驗(yàn)操作，通過在若干不同抑制劑濃度下所測(cè)定數(shù)值的線性擬合，使用式V0/VI=l+I/KI(對(duì)S<<Km適用)測(cè)定KI。VO是不存在抑制劑時(shí)的水解速率，VI是在抑制劑存在下的水解速率，I是抑制劑濃度。由每個(gè)抑制劑濃度的1/V對(duì)1/s的雙倒數(shù)圖，測(cè)定斜率(Km(即p)/V)。而后進(jìn)行Km(即p)/V對(duì)抑制劑濃度的制圖。根據(jù)直線在i軸的截距來測(cè)定Ki。式(I)化合物對(duì)FVIIa的穩(wěn)定效果為了測(cè)定式(I)化合物對(duì)FVIIa的穩(wěn)定效果，可以使用一期凝固試驗(yàn)來測(cè)定FVII多肽例如FVIIa的生物活性。為了該目的，將試驗(yàn)樣品在50mMPIPES-緩沖液(pH7.5)、0.1%BSA中稀釋，并將40ii1此溶液用40ii1缺乏FVII的血槳和80y1人類重組體TF(包含10mMCa2+和合成磷脂)進(jìn)行培養(yǎng)。測(cè)定凝結(jié)時(shí)間，并與平行試驗(yàn)中使用參考標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線相比較。適合于測(cè)定因子VII多肽的生物活性的試驗(yàn)可以通過合適試驗(yàn)(其可以按照簡(jiǎn)單的初級(jí)體外試驗(yàn)來進(jìn)行)來選擇按照本發(fā)明可以使用的因子VII多肽。由此，對(duì)于因子VII多肽的活性，本說明書公開了簡(jiǎn)單的試驗(yàn)(稱作"體外水解試驗(yàn)")。第一階段凝固試驗(yàn)可以使用基本上如WO92/15686或US5，997，864所述的一期凝固試驗(yàn)來測(cè)定因子VII多肽的活性。簡(jiǎn)要地說，將試驗(yàn)樣品在50mMTris(pH7.5)、0.1%BSA中稀釋，并將100iiL用100iiL缺乏因子VII的血槳和200iiL凝血激酶C(包含10mMCa2+)進(jìn)行培養(yǎng)。測(cè)定凝結(jié)時(shí)間，并與使用參考標(biāo)準(zhǔn)或枸櫞酸鹽化的正常人血漿(連續(xù)稀釋)池的標(biāo)準(zhǔn)曲線相比較。體外水解試驗(yàn)(試驗(yàn)1)可以試驗(yàn)天然(野生型)因子Vila和因子VII多肽(兩者以下簡(jiǎn)稱"因子VIIa")的特異活性。為了直接比較它們的特異活性，還可以平行試驗(yàn)它們。在微滴定板(MaxiSorp，Nunc,Denmark)中進(jìn)行該試驗(yàn)。將顯色底物D-Ile-Pro-Arg-對(duì)硝基苯胺(S-2288,Chromogenix,Sweden)(最后濃度ImM)加入到因子VIIa(最后濃度100nM)(在含有0.1MNaCl、5mMCaCl2禾PImg/mL牛血清白蛋白的50mMHEPES中，pH7.4)中。用SpectraMax340平皿讀數(shù)器(MolecularDevices,USA)連續(xù)地測(cè)定吸光度(在405nm處)。在20分鐘培養(yǎng)期間形成的吸光度，扣除不包含酶的空白孔的吸光度之后，用于計(jì)算因子VII多肽和野生型因子VIIa的活性之間的比例比例=(A405nm因子VI1多肽)/(A405nm因子VIIa野生型)。基于上面，可以確定比天然因子Vila的活性低、與其類似或比其高的因子VII多肽，例如，因子VII多肽，其中在因子VII多肽的活性和天然因子VII(野生型FVII)的活性之間的比例大約為1.0及高于1.0。還可以使用生理學(xué)底物例如因子X("體外解朊試驗(yàn)")(合適濃度為100-1000nM)測(cè)定因子VII多肽的活性，其中在加入合適顯色底物(例如S-2765)之后測(cè)定產(chǎn)生的因子Xa。另外，可以在生理溫度下進(jìn)行該活性試驗(yàn)。[O314]體外解朊試驗(yàn)(試驗(yàn)2)為了直接比較特異活性，可以平行試驗(yàn)天然(野生型)因子VIIa和因子VII多肽(兩者以下簡(jiǎn)稱"因子VIIa")。在微滴定板(MaxiSorp，Nunc,Denmark)中進(jìn)行該試驗(yàn)。將因子VIIa(10nM)和因子X(0.8iiM)(在含有0.1MNaCl、5mMCaCl2和Img/mL牛血清白蛋白的100iiL50薩EPES中，pH7.4)培養(yǎng)15分鐘。然后通過加入50iiL50mMHEPES(pH7.4，含有O.1MNaCl、20mMEDTA和Img/mL牛血清白蛋白)來中止因子X裂解。通過加入顯色底物Z-D-Arg-Gly-Arg-對(duì)硝基苯胺(S-2765,Chromogenix，Sweden)(最后濃度0.5mM)來測(cè)定產(chǎn)生的因子Xa的量。用SpectraMax340平皿讀數(shù)器(MolecularDevices,USA)連續(xù)地測(cè)定吸光度(在405nm處)。在10分鐘培養(yǎng)期間形成的吸光度，扣除不包含F(xiàn)VIIa的空白孔的吸光度之后，用于計(jì)算因子VII多肽和野生型因子VIIa的解朊活性之間的比例比例=(A405nm因子VI1多肽)/(A405nm因子VIIa野生型)?；谏厦?，可以確定比天然因子Vila的活性低、與其類似或比其高的因子VII多肽，例如，因子VII多肽，其中在凝血因子VII多肽的活性和天然凝血因子VII(野生型FVII)的活性之間的比例大約為1.0及高于1.0。凝血酶產(chǎn)生試驗(yàn)(試驗(yàn)3)可以用包含所有相關(guān)凝血因子和生理濃度的抑制劑(當(dāng)模擬甲型血友病時(shí)，減去因子VIII)和活化血小板的試驗(yàn)(試驗(yàn)3)來測(cè)定因子VII多肽產(chǎn)生凝血酶的能力(如Monroe等人(1997)在Brit.J.Haematol.99,542-547的543頁中所述，本文將其引入作為參考)?！谀淘?凝結(jié)試驗(yàn))(試驗(yàn)4)也可以使用一期凝固試驗(yàn)(試驗(yàn)4)來試驗(yàn)因子VII多肽的特異活性("凝結(jié)活性")。為了該目的，將試驗(yàn)樣品在50mMPIPES-緩沖液(pH7.2)、0.1%BSA中稀釋，并將40iil用40iil缺乏因子VII的血漿和80ii1人類重組體組織因子(包含10mMCa2+和合成磷脂)進(jìn)行培養(yǎng)。測(cè)定凝結(jié)時(shí)間(凝固時(shí)間)，并與平行試驗(yàn)中使用參考標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線相比較。重鏈降解產(chǎn)物、氧化形式和團(tuán)聚體的含量利用如下所述的RP-HPLC來測(cè)定氧化形式和重鏈降解產(chǎn)物的含量在專用的4.5x250mm丁基-鍵合硅膠柱(具有5ym的粒徑，孔徑300人)上操作反相HPLC。柱溫70°C。A-緩沖液0.1%v/v三氟醋酸。B-緩沖液0.09%v/v三氟醋酸，80Xv/v乙腈。用X至(X+13)%B的線性梯度洗脫柱(30分鐘)。調(diào)節(jié)X，以便FVIIa洗脫物具有大約26分鐘的保留時(shí)間。流速1.OmL/min.檢測(cè)214nM。裝載:25ygFVIIa。利用非變性排阻HPLC測(cè)定團(tuán)聚體含量在WatersProteinPak300SW柱(7，5x300mm)上操作非變性排阻色譜，使用0.2M硫酸銨、5%2-丙醇(pH7.0)作為流動(dòng)相。流速0.5mL/min.檢測(cè)215nM。裝載25ygFVIIa。NMR分析NMR譜是在Bruker300MHz和400MHz儀器上記錄的。在PerkinElmer儀器(API100)上進(jìn)行HPLC-MS。HPLC分析使用Merck-Hitachi(HibarRT250-4，LichrosorbRP18，5.0iim，4.0x250mm，梯度洗脫，20%至80%乙腈/水，在30分鐘之內(nèi)，1.Oml/min，在254nm處檢測(cè))和Waters(Symmetry,C18，3.5iim，3.0xl50mm，梯度洗脫，5%至90%乙腈/水，在15分鐘之34內(nèi)，1.0ml/min，在214nm處檢測(cè))的HPLC-系統(tǒng)。肽合成使用Fmoc策略，在AppliedBiosystems433A肽合成儀(0.25mmol規(guī)模)上，使用制造商提供的FastMocUV方案(其使用HBTU-介導(dǎo)的偶合，在NMP中，UV檢測(cè)Fmoc保護(hù)基的脫保護(hù))，在Fmoc保護(hù)的Rink酰胺樹脂(Novabiochem)(肽酰胺)或在王氏樹脂(肽酸)上合成肽。所使用的保護(hù)的氨基酸衍生物是標(biāo)準(zhǔn)Fmoc-氨基酸(Anaspec)，提供于預(yù)稱重的柱(適合于ABI433A合成器)中。對(duì)于肽氨基甲酸鹽，在固相上或在溶液中肽從載體上裂解之后，通過用醇或酚的琥珀酰亞胺基碳酸酯(通過用二琥珀酰亞胺基碳酸酯和DIPEA在MeCN中處理相應(yīng)的醇或者酚來制備)處理，引入氨基甲酰基(Gosh等人，TetrahedronLett1992，33(20)，2781-2784)。對(duì)于肽脲，通過用異氰酸酯處理樹脂結(jié)合的肽，在固相上引入氨基羰基。就?；碾亩?，使用與?；疐moc-保護(hù)的氨基酸相同的方案，用相應(yīng)的羧酸進(jìn)行最后的?；?。從樹脂上將肽斷裂的方法在室溫下，通過與三氟乙酸、水和三異丙基硅烷(95:2.5:2.5)的混合物一起攪拌180分鐘，從樹脂上將肽斷裂。將裂解的混合物過濾，并用氮?dú)饬鳚饪s過濾物，得到油。將粗品肽用二乙醚(45ml)從該油中沉淀，并用二乙醚洗滌三次(每次45ml)。純化用半制備HPLC(填裝C-18硅膠的20mmx250mm柱)純化粗品肽。根據(jù)肽，使用一或兩個(gè)下列純化系統(tǒng)。TFA:干燥之后，將粗品肽溶于5ml50%乙酸/H20中，并用H20稀釋至20ml，注入，用40-60%CH3CN(在0.1%TFA中)的梯度進(jìn)行洗脫，10ml/min，在50分鐘期間，在40°C。收集含有肽的餾份。用水稀釋洗脫物之后，將純化的肽冷凍干燥。硫酸銨將柱用40%CH3CN(在0.05M(NH4)2S04中)(用濃H2S04將其調(diào)節(jié)至pH2.5)平衡。干燥之后，將粗品肽溶于5ml50%乙酸/H20中，并用H20稀釋至20ml，注入，用40-60%CH3CN(在0.05M(NH4)2S04中)(pH2.5)的梯度進(jìn)行洗脫，10ml/min，在50分鐘期間，在40°C。收集含有肽的餾份，用水稀釋，并通過Sep-Pak⑧C18柱(Waterspart.#:51910)(其已經(jīng)用0.1%TFA進(jìn)行了平衡)。然后將其用含有0.1%TFA的70%CH3CN洗脫，用水稀釋洗脫物之后，將純化的肽通過冷凍干燥進(jìn)行分離。利用分析RP-HPLC(保留時(shí)間)和LCMS來表征所獲得的最終產(chǎn)物。使用UV檢測(cè)(在214nm處)和Vydac218TP544.6麗250mmC-18硅膠柱(TheS印arationsGroup,Hesperia，USA)(在42°C以lml/min的速率洗脫)進(jìn)行RP-HPLC分析。使用兩種不同的洗脫條件Al:在包含0.1M(NH4)2S04的緩沖液(將其用濃H2S04調(diào)節(jié)至pH2.5)中將柱平衡，用0%至60%CH3CN(在相同緩沖液中)的梯度進(jìn)行洗脫，在50分鐘期間。Bl:用0.1%TFA/H20將柱平衡，用0%CH3CN/0.1%TFA/H20至60%CH3CN/0.1%TFA/H20的梯度進(jìn)行洗脫，在50分鐘期間。B6:用0.1%TFA/H20將柱平衡，用0%CH3CN/0.1%TFA/H20至90%CH3CN/0.1%TFA/H20的梯度進(jìn)行洗脫，在50分鐘期間。在由HewlettPackard系列1100G1312A二元泵、HewlettPackard系列1100柱室、HewlettPackard系列1100G1315ADAD二極管陣列檢測(cè)器、HewlettPackard系列l(wèi)lOOMSD和Sedere75蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(用HPChemstation軟件控制)組成的裝置上進(jìn)行LCMS。HPLC泵與含有下列的兩個(gè)洗脫液儲(chǔ)池連接A:10mMNH4OH/水B:10mMNH40H/90%乙腈在23°C，將合適體積的樣品(優(yōu)選20y1)注入到柱(用A和B的梯度洗脫)上，進(jìn)行分析。工作實(shí)施例實(shí)施例1丙氧羰基-HomoArg-Glu-Asn-Cha-NH2LCMS:MH+=670.99%純度，利用ELS。實(shí)施例2Alloc-HomoArg-Glu-(D-Asp)--Cha--NH2LCMS:MH+=669.58%純度，利用ELS。實(shí)施例3A1loc_HomoArg_Glu_Asn_Cha--NH2LCMS:MH+=668.78%純度，利用ELS。實(shí)施例4Alloc-HomoArg-Glu-(D-Glu)--Cha--NH2LCMS:MH+=683.60%純度，利用ELS。實(shí)施例5芐氧羰基-HomoArg-Glu-Asn--Cha--NH2LCMS:MH+=718.76%純度，利用ELS。實(shí)施例6A1loc_HomoArg_Glu_Asn_Cha--Arg--NH2LCMS:M(TFA)=938.95%純度，利用ELS。實(shí)施例7A1loc-HomoArg-Glu-Asn-Cha-Gly--NH2LCMS:MH+=725.99%純度，利用ELS。實(shí)施例8A1loc_HomoArg_Glu_Asn_Cha--Glu--NH2LCMS:MH+=797.97%純度，利用ELS。實(shí)施例9A1loc_HomoArg_Glu_Asn_Cha--Phe--NH2LCMS:MH+=816.98%純度，利用ELS。實(shí)施例10A1loc_HomoArg_Glu_Asn_Cha_HomoArg_NH2LCMS:MH+=839.96%純度，利用ELS。實(shí)施例11環(huán)丙基甲氧基羰基-HomoArg-Glu-Asn-Cha-NH:LCMS:MH+=682.實(shí)施例12Alloc-HomoArg-Glu-Asn-Cha-His_NH2LCMS:MH+806.實(shí)施例13乙氧羰基-HomoArg-Glu-Asn-Cha-Phe-NH2LCMS:MH+=803.權(quán)利要求通式(I)的化合物X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-NH2(I)其中X1表示其中R1選自低級(jí)烷基，低級(jí)烯基，低級(jí)炔基，低級(jí)環(huán)烷基，低級(jí)環(huán)烷基烷基，芳基，芳基(低級(jí)烷基)，或雜烷基；X2表示堿性氨基酸；X3表示酸性氨基酸；X4表示極性氨基酸或Phe或Phg；X5表示非極性氨基酸或Lys或Glu；X6表示Ala，Gly，His，Arg，HomoArg，Orn，Dab，Dap，Phe，Glu，Val，Gln，Ile，Ser，Thr，Tyr，Trp，Lys，Lys(mPeg(1-10k)-CO)，或不存在；X7表示Ala，Gly，His，Arg，HomoArg，Orn，Dab，Dap，Phe，Glu，Val，Gln，Ile，Ser，Thr，Tyr，Trp，Lys(mPeg(1-10k)-CO)，或不存在；當(dāng)X6或X7之一或兩者都表示Lys(mPeg(1-10k)-CO)時(shí)，X2表示4-脒基-Phe，Arg，HomoArg，Orn，Lys，Dab或Dap；包括其任何和所有的立體異構(gòu)形式、任何比例的兩種或多種這種式I化合物的任何混合物、和其生理學(xué)允許的鹽和前體藥物。FPA00001032710300011.tif2.按照權(quán)利要求1的化合物，其中，X2表不Arg，HomoArg，Orn，Lys，Dab，或Dap;X3表示Glu，Asp，(a-Me)Glu，1_氨基環(huán)丁烷_反式_1，3_二羧酸，或1_氨基環(huán)丁烷_順式-l，3-二羧酸；X4表示Arg，HomoArg，Lys，His,Asn，Gln，Trp，Phe，Phg，Glu，D_Glu，Asp，D_Asp，Dab，Dap，NP-[脒基]-Dap，或Ny-[脒基]Dab;X5表示Phg，D-Phg，Phe，Val，Ile，Leu，Lys，Ala，Glu，Gly，Aib，Trp，Abu，Alle，Cha，Hph，Nle或Nva;X6表示Ala，Gly，His，Arg，HomoArg，Orn，Dab，Dap，Phe，Glu，Val，Gln，Ile，Ser，Thr，Tyr，Trp，Lys，Lys(mPeg(1-lOk)_C0)，或不存在；X7表示Ala，Gly，His，Arg，HomoArg，Orn，Dab，Dap，Phe，Glu，Val，Gln，Ile，Ser，Thr，Tyr，Trp，Lys(mPeg(l_10k)-CO)，或不存在；禾口當(dāng)X6或X7之一或兩者都表示Lys(mPeg(l-10k)-C0)時(shí)，X2表示4-脒基-Phe，Arg，HomoArg，Orn，Lys，Dab或Dap;包括其任何和所有的立體異構(gòu)形式、任何比例的兩種或多種這種式I化合物的任何混合物、和其生理學(xué)允許的鹽和前體藥物。3.按照權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的化合物，其中X1表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中R1選自低級(jí)烷基，低級(jí)烯基，低級(jí)炔基，低級(jí)環(huán)烷基，低級(jí)環(huán)烷基烷基，芳基，芳基(低級(jí)烷基)，或雜烷基。4.按照前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的化合物，其中X2表示Arg，HomoArg，0rn或Lys。5.按照權(quán)利要求4的化合物，其中X2表示HomoArg。6.按照前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的化合物，其中X3表示Glu。7.按照前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的化合物，其中X"表示Arg，HomoArg，Lys，His,Asn，Gln，Dab或D即。8.按照權(quán)利要求7的化合物，其中X4表示Asn或Gln。9.按照前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的化合物，其中XS表示Phe，Val，Ile，Leu，Ala，Cha，Gly或Trp。10.按照權(quán)利要求9的化合物，其中X5表示Phe、Cha或Trp。11.按照前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的化合物，其中Xe表示Ala，Gly，His,Arg，HomoArg,Orn，Glu，Val，Gln，Phe，Ile，Ser，Thr，Tyr，Lys(mPeg(l_10k)-CO)，或不存在。12.按照權(quán)利要求11的化合物，其中乂6表示Ala，His,Arg，HomoArg，Glu，Gln，Thr，Tyr，Lys(mPeg(l-10k)-CO)，或不存在。13.按照前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的化合物，其中^表示Ala，Gly，His,Arg，HomoArg，Orn，Glu，Val，Gln，Phe，Ile，Ser，Thr，Tyr，Lys(mPeg(l_10k)-CO)，或不存在。14.按照權(quán)利要求13的化合物，其中X'表示Ala，His,Arg，HomoArg，Glu，Gln，Thr，Tyr，Lys(mPeg(l-10k)-CO)，或不存在。15.按照權(quán)利要求12的化合物，其中xe不存在。16.按照權(quán)利要求14的化合物，其中f不存在。17.按照權(quán)利要求1-16的任一項(xiàng)的化合物，其中化合物選自下列丙氧羰基-HomoArg-Glu-Asn-Cha-NH2;Alloc-HomoArg-Glu-(D-Asp)-Cha_NH2;Alloc_HomoArg_Glu_Asn_Cha_NH2;Alloc-HomoArg-Glu-(D-Glu)-Cha_NH2;芐氧羰基-HomoArg-Glu-Asn-Cha-NH2;Alloc_HomoArg_Glu_Dap_Cha_NH2;Alloc_HomoArg_Glu_HomoArg_Cha_NH2;Alloc_HomoArg_Glu_Asn_Cha_Arg_NH2;Alloc-HomoArg-Glu-Asn-Cha-Gly-NH2;Alloc-HomoArg-Glu-Asn-Cha-Glu-NH2;Alloc_HomoArg_Glu_Asn_Cha_Phe_NH2;Alloc_HomoArg_Glu_Asn_Cha_HomoArg_NH2;丙基氨基羰基_HomoArg-Glu-Asn-Cha-NH2;環(huán)丙基甲氧幾基—HomoArg—Glu—Asn—Gha—NH2;Alloc_HomoArg_Glu_Asn_Cha_His_NH2;乙氧羰基-HomoArg-Glu-Asn-Cha-Phe-NH2;和2_氯代烯丙基氧羰基-HomoArg-Glu-Asn-Cha-NH2，包括其任何和所有的立體異構(gòu)形式、任何比例的兩種或多種這種式I化合物的任何混合物、和其生理學(xué)允許的鹽和前體藥物。18.藥物組合物，其包含按照權(quán)利要求1-17的任一項(xiàng)的化合物或其生理學(xué)可允許的鹽；和因子VII多肽。19.按照權(quán)利要求1-17的任一項(xiàng)的化合物與因子VII多肽的組合用于制備藥物的用途，該藥物用于治療用所述因子VII多肽可有效抵御的病癥或障礙。全文摘要本發(fā)明涉及新的式(I)化合物，其用作凝血因子抑制劑?；衔?I)可以用于治療血栓形成病癥，或作為凝血因子的液體制劑的穩(wěn)定劑，尤其是FVIIa，因子VII變體或因子VII衍生物的液體制劑的穩(wěn)定劑。文檔編號(hào)C07K7/06GK101784560SQ200880104045公開日2010年7月21日申請(qǐng)日期2008年8月19日優(yōu)先權(quán)日2007年8月23日發(fā)明者C·里謝爾,F·Z·多沃爾德,O·H·奧爾森申請(qǐng)人:諾沃-諾迪斯克保健股份有限公司