專利名稱：：一種阿霉素前體藥物的制備方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種阿霉素前體藥物和制備方法以及應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：癌癥在發(fā)達(dá)國(guó)家是導(dǎo)致死亡的第二大殺手。到目前為止，絕大多數(shù)癌癥仍然不能治愈。癌癥治療中主要困難是藥物選擇性低，在殺死癌細(xì)胞的同時(shí)，大量的正常組織和細(xì)胞也會(huì)死亡。因此尋求可以耙向性作用于腫瘤細(xì)胞的抗癌藥物成為研究的熱點(diǎn)。阿霉素(doxrubicin)屬蒽環(huán)類化合物，是最有效的抗癌藥物之一，在臨床上作為乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、肺癌等癌癥治療的首選用藥。但與其它抗癌藥物一樣，由于其易產(chǎn)生耐藥性，選擇性差，對(duì)正常組織也有細(xì)胞毒性，阿霉素的臨床應(yīng)用遭遇瓶頸。阿霉素最嚴(yán)重的毒副作用是其心臟毒性，主要表現(xiàn)為慢性心肌病變和充血性心衰，其機(jī)制可能與氧應(yīng)激反應(yīng)有關(guān)。此外，由于選擇性較低，阿霉素同時(shí)作用于其它非腫瘤細(xì)胞，引起脫發(fā)，食欲下降，口腔潰瘍，腹瀉，血細(xì)胞減少等副作用；且由于阿霉素是與藥物產(chǎn)生耐藥性有關(guān)的P糖蛋白的底物，因此極易產(chǎn)生耐藥性。鑒于以上原因，在近20年中，人們針對(duì)阿霉素進(jìn)行了大量的結(jié)構(gòu)改造，開發(fā)出了近2000種阿霉素類似物，但僅有極少數(shù)的類似物進(jìn)入了臨床研究階段或已經(jīng)上市。這說明真正意義上的更好的蒽環(huán)類抗癌藥物仍未出現(xiàn)，針對(duì)阿霉素的改造和修飾仍在繼續(xù)，以期可減少毒性，增強(qiáng)腫瘤耙向性，提高療效。其中主要策略有制成阿霉素脂質(zhì)體，制備阿霉素前體藥物以及合成類似物。前體藥物因其目的明確，易于控制成為修飾阿霉素的重要手段。目前對(duì)阿霉素前體藥物的設(shè)計(jì)主要集中在其13位的羰基和3'位的氨基，13位羰基主要改造方法為羰基成腙鍵，腙鍵在中性環(huán)境下穩(wěn)定，在偏酸的環(huán)境下裂解釋放出阿霉素，而腫瘤細(xì)胞周圍pH較正常組織偏低，因此腙鍵的形成可起到腫瘤靶向作用；而3'的氨基則可與不同的物質(zhì)相接以滿足各種需求。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，L377202可被前列腺特異性抗原(PSA)識(shí)別并水解釋放出阿霉素，因此其可耙向性作用于PSA陽性的前列腺癌細(xì)胞，活性高于阿霉素同時(shí)毒性降低。阿霉素前體藥物V在pH5.0條件下釋放阿霉素的速度較pH7.4條件顯著增加，說明其是酸敏的腫瘤靶向前體藥物。a-亞麻酸(a-LNA)為全順式9,12,15-18碳三烯酸，屬"3系列不飽和脂肪酸，是組成人體各組織生物膜結(jié)構(gòu)的具有廣泛生理活性和明顯藥理作用的人體必需脂肪酸之一。它廣泛存在于自然界中，動(dòng)物乳汁、植物的葉、根、莖和果實(shí)、苔類、蕨類等低等植物和浮游生物中均含有一定量的a-亞麻酸，其中亞麻子及蘇子中含量最高,可達(dá)50%以上。但人體內(nèi)本身并不能產(chǎn)生a-亞麻酸，只能從外源食物中攝取。a-亞麻酸具有豐富的藥理學(xué)作用，研究表明其對(duì)心血管系統(tǒng)有明顯的保健作用，可防治冠心病、腦血栓等心血管疾病，具有降血脂，降血壓，抗血栓作用。近年來研究又發(fā)現(xiàn)，a-亞麻酸還具有抗癌作用，文獻(xiàn)報(bào)道給斷乳的雌鼠喂食富含a-亞麻酸的食物后皮下接種乳腺癌細(xì)胞，結(jié)果證實(shí)a-亞麻酸對(duì)乳腺癌的生長(zhǎng)和代謝都有抑制作用。a-亞麻酸對(duì)多種類型的腫瘤都有一定的抑制作用，如乳腺癌、肝癌、前列腺癌等，其抗癌活性可能與其抑制COX-2表達(dá)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞調(diào)亡有關(guān)，且有報(bào)導(dǎo)稱一些腫瘤表面存在有與脂肪酸結(jié)合的受體，因此a-亞麻酸呈現(xiàn)一定的腫瘤靶向性及抗腫瘤活性。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明將阿霉素與a-亞麻酸結(jié)合得到一種阿霉素前體藥，可能會(huì)增強(qiáng)阿霉素的抗腫瘤作用，降低藥物毒副作用，提高靶向性，為抗腫瘤藥物的開發(fā)提供新的思路。本發(fā)明的前體藥是阿霉素與a-亞麻酸結(jié)合得到的阿霉素前體藥。阿霉素的結(jié)構(gòu)式如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>a-亞麻酸結(jié)構(gòu)式如下H3C—(CH2)7-(CH=CHCH2)^COOH將阿霉素和a-亞麻酸在室溫條件下，加入DCC,DMAP催化合成阿霉素前體藥。該前藥可降低阿霉素的給藥劑量，提高療效，并具有一定的靶向性。圖l是游離阿霉素和阿霉素一a亞麻酸連接物對(duì)MCF-7乳腺癌細(xì)胞的細(xì)胞毒性研究曲線圖。圖2是游離阿霉素和阿霉素一a亞麻酸連接物對(duì)MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞的細(xì)胞毒性研究曲線圖。具體實(shí)施方式阿霉素-亞麻酸的合成路線<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>a:室溫，DCC,DMAP催化阿霉素前體藥物的體外抗腫瘤活性研究1目的通過IC5Q值的比較，以阿霉素為陽性對(duì)照，評(píng)價(jià)前藥抗腫瘤的活性。2研究方法將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)人乳腺癌細(xì)胞(MCF-7)、(MB-MDR-231)加入96孔培養(yǎng)板中，以阿霉素為對(duì)照，實(shí)驗(yàn)孔加入不同濃度的前藥，培養(yǎng)48h后，每孔加入四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)20pl(5mg/ml)，溫浴4h，離心棄上清，每孔加入DMSO150pl使結(jié)晶完全溶解，作用30min并微振搖后，酶標(biāo)儀490nm處檢測(cè)吸收度(OD)值，按公式計(jì)算細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率。細(xì)胞存活率對(duì)劑量對(duì)數(shù)線性回歸計(jì)算IC50值。3實(shí)驗(yàn)結(jié)果細(xì)胞接種于96孔板中，接種密度為5X103，48h后將不同濃度的藥物加于細(xì)胞中孵育48h，加入MTT，4h后檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果見表l。細(xì)胞接種于96孔板中，接種密度為5X103，48h后將不同濃度的藥物加于細(xì)胞中孵育48h，加入MTT，4h后檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果見表2。表1游離阿霉素和阿霉素一a亞麻酸連接物對(duì)MCF-7乳腺癌細(xì)胞的IC50<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>表2游離阿霉素和阿霉素一a亞麻酸連接物對(duì)MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞的IC50<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>4結(jié)論由以上細(xì)胞結(jié)果可見，阿霉素一a亞麻酸連接物與游離阿霉素相比對(duì)兩株乳腺癌細(xì)胞的細(xì)胞毒性更強(qiáng)，且ICw值小于游離阿霉素，說明該前藥可降低阿霉素的給藥劑量，提高療效，并具有一定的靶向性，有很好的開發(fā)前景。權(quán)利要求1、一種阿霉素前體藥物的制備方法，其特征是阿霉素和α-亞麻酸在室溫條件下，加入DCC，DMAP催化合成阿霉素前體藥。2、阿霉素前體藥在治療癌癥中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明提供一種阿霉素前體藥物的制備方法及其應(yīng)用，將阿霉素與α-亞麻酸在室溫條件下，加入DCC，DMAP催化合成阿霉素前體藥，該前藥可能會(huì)增強(qiáng)阿霉素的抗腫瘤作用，降低藥物毒副作用，提高靶向性，為抗腫瘤藥物的開發(fā)提供新的思路。文檔編號(hào)C07H15/00GK101353361SQ20081015056公開日2009年1月28日申請(qǐng)日期2008年8月8日優(yōu)先權(quán)日2008年8月8日發(fā)明者周四元,宦夢(mèng)蕾,張邦樂,梅其炳,滕增輝申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)