專利名稱：：來(lái)自actinomaduranamibiensis的抗菌和抗病毒肽的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及從w"/m》/es&(DSM6313)分離的新肽，其制備方法及其用于制備下述藥物的用途，所述藥物用于治療細(xì)菌感染、治療病毒感染和治療疼痛。
背景技術(shù)：
：文獻(xiàn)中已知若干種高度橋連的肽，例如從芋螺(conesnail)中分離的芋螺多肽(conopeptide，綜述見例如Terlau&Olivera，Physiol.Rev.2004，84，41-68)或來(lái)自革蘭氏陽(yáng)性菌來(lái)源的所謂的羊毛硫抗生素(Chatterjee等，Chem.Rev.2005，105，633-683)。所述肽具有多種功用。在其他功用中，羊毛硫抗生素乳鏈菌肽從許多年前已被用作食品防腐劑。所述芋螺多肽例如適用于治療疼痛、糖尿病、多發(fā)性硬化和心血管疾病，并且目前正進(jìn)行臨床前或臨床開發(fā)。芋螺多肽的實(shí)例為a-GI(序列ECCNPACGRHYSC*,*酰胺化的，連接能力(connectivity):1-3，2-4)和a-GID(序列IR/CCSNPACRVNNOHVC,連接能力l-3，2-4),其中O/Hyp是羥脯氨酸，且連接性指出涉及各特異二硫鍵的半胱氨酸的位置，例如在a-GID中為第一到第三，和第二到第四<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>j__-^_■^--.............-'—'S-S-~~-H2N-lle-Arg-Cys-CSer-Asn-PrcKAIa-Gys-Arg-WAS!>Mf>Hyp'His-His-Cys-OHL__——s—$——__J(ex-GID)。發(fā)明概述現(xiàn)在已驚人地發(fā)現(xiàn)，高度橋連的肽可從微生物菌林爿"/朋/mw^m/m附/6/e"^y(DSM6313)中分離，并適用于治療細(xì)菌感染、病毒感染和/或疼痛。發(fā)明詳述本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案是式(I)化合物，其中Rl為H、C(OHC廣C6)烷基或C(0)-0-(C廣C6)烷基；R2為OH、NH2、NH-(C廣C6)烷基、NH-(C廣C4)亞烷基-苯基或NH-(d-C4)亞烷基-吡咬基；R3和R4彼此獨(dú)立地為H或OH，或R3和R4—起為-O;且m和n7彼此獨(dú)立地為0、l或2;其為任何立體化學(xué)形式，或是任何比例的任何立體化學(xué)形式的混合物，或其生理學(xué)可耐受的鹽。在另一實(shí)施方案中，式(I)化合物是式(II)化合物，其中R1、R2、R3、R4、m和n如上文定義。R1優(yōu)選為H。R2優(yōu)選為OH。R3和R4優(yōu)選為H或OH，其中如果R3為OH則R4為H，且如果R3為H則R4為OH，或R3和R4—起為=0。更優(yōu)選R3和R4為H或OH，其中如果R3為OH則R4為H，且如果R3為H則R4為OH。優(yōu)選m和n均為0，或m和n均為2，或m為0且n為2，或m為2且n為0。更優(yōu)選m和n均為0。本發(fā)明的另一實(shí)施方案是式(I)或式(II)化合物或其生理學(xué)可耐受的鹽，其中Rl為H;R2為OH;R3和R4為H或OH,其中如果R3為OH則R4為H，且如果R3為H則R4為OH;且m和n彼jt匕獨(dú)立地為0、l或2，優(yōu)選m和n均為0，或m和n均為2，或m為0且n為2，或m為2且n為0，尤其優(yōu)選m和n均為O。最優(yōu)選式(I)化合物是式(III)化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>為了進(jìn)一步表征本發(fā)明的化合物，從核糖體肽合成將肽殘基轉(zhuǎn)化回其可能的前體。殘基l和10中的a、a-雙取代的氨基酸在文獻(xiàn)中沒有報(bào)導(dǎo)。所述氨基酸可被描述為通過(guò)亞甲基橋連并在P-位置上被取代的Ala殘基，:i口下文所示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>本發(fā)明還涉及根據(jù)本發(fā)明的式(l)、(n)和(lll)的化合物的所有明顯化學(xué)等價(jià)物。這些等價(jià)物是下述化合物，其僅顯示輕孩t的化學(xué)差異并具有相同的藥理學(xué)作用，或其在溫和條件下被轉(zhuǎn)化為根據(jù)本發(fā)明的化合物。所述等價(jià)物也包括例如式(l)、(ii)和(ni)的化合物的鹽、還原產(chǎn)物、氧化產(chǎn)物、部分水解過(guò)程的酯、醚、縮醛或酰胺，以及本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠使用標(biāo)準(zhǔn)方法制備的等價(jià)物，除此之外，還包括所有的旋光對(duì)映體和非對(duì)映異構(gòu)體和所有的立體異構(gòu)形式。除非另有說(shuō)明，式(I)化合物中的手性中心以R構(gòu)型或S構(gòu)型存在。本發(fā)明涉及光學(xué)純凈的化合物和立體異構(gòu)體混合物二者，例如對(duì)映異構(gòu)體混合物和非對(duì)映異構(gòu)體混合物。式(I)、(II)和(III)的化合物的生理學(xué)耐受的鹽理解為其有機(jī)鹽及其無(wú)機(jī)鹽，如Remington'sPharmaceuticalSciences(笫17版，第1418頁(yè)(1985))中所述。因?yàn)槠渖砗突瘜W(xué)穩(wěn)定性及其溶解度，對(duì)酸根尤其優(yōu)選鈉鹽、鉀鹽、鉤鹽和銨鹽；對(duì)堿基尤其優(yōu)選鹽酸鹽、硫酸鹽或磷酸鹽，或羧酸鹽或磺酸鹽，如乙酸鹽、檸檬酸鹽、苯曱酸鹽、馬來(lái)酸鹽、延胡索酸鹽、酒石酸鹽和對(duì)曱笨璜酸鹽。全文中本發(fā)明的化合物被稱作Labyrinthopeptin。本發(fā)明還涉及制備其中m和n彼此獨(dú)立地為0、1或2的式(I)化合物的方法，所述方法包括a)在合適的條件下，在培養(yǎng)基中發(fā)酵菌林JdVio/mw/"niwfl附幼/emis(DSM6313),或其變體和/或突變體之一，直到培養(yǎng)基中產(chǎn)生一種或多種式(I)化合物，b)從培養(yǎng)基中分離式(I)化合物，和c)適當(dāng)時(shí)將式(I)化合物衍生化，和/或適當(dāng)時(shí)將其轉(zhuǎn)化為生理學(xué)可耐受的鹽。本發(fā)明優(yōu)選地涉及制備式(I)化合物的方法，其中化合物(I)是式(II)化合物，更優(yōu)選地本發(fā)明涉及制備式(I)或優(yōu)選制備(II)的化合物的方法，其中m和n均為0，或m和n均為2，或m為0且n為2，或m為2且n為0。尤其優(yōu)選的，本發(fā)明優(yōu)選地涉及制備式(I)化合物的方法，其中化合物(I)是式(III)化合物。培養(yǎng)基是營(yíng)養(yǎng)溶液或固體培養(yǎng)基，其含有至少一種慣用碳源和至少一種氮源，以及一種或多種慣用無(wú)機(jī)鹽。根據(jù)本發(fā)明的方法可用于以實(shí)驗(yàn)室規(guī)模發(fā)酵(毫升到升的規(guī)模)，和用于以工業(yè)規(guī)模發(fā)酵(立方米的規(guī)模)。用于發(fā)酵的合適碳源是可同化的糖類和糖醇，例如葡萄糖、乳糖、蔗10糖或D-甘露糖醇，以及含糖類的天然產(chǎn)物，例如麥芽提取物或酵母提取物。含氮營(yíng)養(yǎng)物的例子是氨基酸；肽和蛋白質(zhì)及其降解產(chǎn)物，例如酪蛋白、蛋白胨或胰蛋白胨；肉提取物；酵母提取物；谷蛋白；地面種子(groundseed),例如來(lái)自玉米、小麥、豆類、大豆和棉花植物；來(lái)自生產(chǎn)醇的蒸餾殘?jiān)?；肉粉；酵母提取物；銨鹽；硝酸鹽。優(yōu)選該氮源是一種或多種已通過(guò)合成或生物合成獲得的肽。無(wú)機(jī)鹽的實(shí)例是堿金屬、堿土金屬、鐵、鋅、鈷和錳的氯化物、碳酸鹽、硫酸鹽或磷酸鹽。微量元素的實(shí)例是鈷和錳。特別適用于形成本發(fā)明的Labyrinthopeptin的條件如下0.05到5%，優(yōu)選0.1到2.5%的酵母提取物；0.2到5.0%,優(yōu)選0.1到2%的酪胨；0.02到1.0%,優(yōu)選0.05到0.5%的CaCl2x2H20;0.02到1.5%,優(yōu)選0.05到0.7%的MgS04x7H20和0.00001%到0.001%的氰鈷銨素。給出的百分比數(shù)值在各情況下以總營(yíng)養(yǎng)液的重量為基礎(chǔ)。對(duì)微生物進(jìn)行需氧培養(yǎng)，即例如浸沒時(shí)在搖瓶或發(fā)酵罐中振動(dòng)或攪拌，或適當(dāng)時(shí)在固體培養(yǎng)基上時(shí)通入空氣或氧氣。微生物可在約18到35°C,優(yōu)選地約20到32。C,尤其是27到30。C的溫度范圍內(nèi)培養(yǎng)。pH范圍應(yīng)當(dāng)在4和10之間，優(yōu)選地在6.5和7.5之間。微生物通常在這些條件下培養(yǎng)2到10天，優(yōu)選72到168小時(shí)的周期。有利地以若干步驟培養(yǎng)^L生物，例如最初在液體營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中制備一種或多種初步培養(yǎng)物(preliminaryculture),然后將這些初步培養(yǎng)物例如以1:10到1:100的體積比接種進(jìn)實(shí)際的生產(chǎn)培養(yǎng)基中，即主要培養(yǎng)物。如下獲得初步培養(yǎng)物例如將營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞或孢子形式的菌抹接種進(jìn)營(yíng)養(yǎng)液中，并允許其生長(zhǎng)約20到120個(gè)小時(shí)，優(yōu)選48到96個(gè)小時(shí)?？衫缛缦芦@得營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和/或孢子允許菌林在固體或液體營(yíng)養(yǎng)底物例如酵母瓊脂上生長(zhǎng)約1到15天，優(yōu)選地生長(zhǎng)4到10天?？墒褂靡阎姆椒ú⒖紤]天然物質(zhì)的化學(xué)、物理和生物學(xué)特性，從培養(yǎng)基中分離和純化Labyrinthopeptin衍生物。使用HPLC，通過(guò)將形成的物質(zhì)的量與校準(zhǔn)液便利地比較，測(cè)試培養(yǎng)基中或各個(gè)分離步驟中Labyrinthopeptin衍生物的濃度。ii對(duì)分離而言，任選地將培養(yǎng)物發(fā)酵液或培養(yǎng)物與固體培養(yǎng)基一起凍干，并使用有機(jī)溶劑，或水和有機(jī)溶劑的混合物從凍干物中提取Labyrinthopeptin衍生物，所述混合物優(yōu)選地含有50-卯％的有機(jī)溶劑。有機(jī)溶劑的實(shí)例為曱醇和2-丙醇。有機(jī)溶劑相含有根據(jù)本發(fā)明的天然物質(zhì)；適當(dāng)時(shí)將其真空濃縮并進(jìn)行進(jìn)一步純化。根據(jù)本發(fā)明的一種或多種化合物的進(jìn)一步純化在合適材料上通過(guò)層析進(jìn)行，優(yōu)選地例如在分子篩上、在硅膠上、在氧化鋁上、在離子交換器上或在吸附樹脂上或在反相(RP)上。使用該層析分離Labyrinthopeptin衍生物。使用緩沖的、堿性或酸化的水性溶液或水性和有機(jī)溶液的混合物對(duì)Labyrinthopeptin衍生物進(jìn)行層析。水性或有機(jī)溶液的混合物理解為是所有易與水混合的有機(jī)溶劑，優(yōu)選地為曱醇、2-丙醇或乙腈，其濃度為5到99%有4幾溶劑，優(yōu)選5到50%有機(jī)溶劑，或者是易與有機(jī)溶劑混合的所有緩沖的水性溶液。有待使用的緩沖液與上文所述相同?；贚abyrinthopeptin衍生物有差異的極性，借助于反相層析對(duì)其進(jìn)行分離，所述層析例如在MCI(吸附樹脂，Mitsubishi,日本)或AmberliteXAD(TOSOHAAS)上，或在其他疏水材料例如RP-8或RP-18相上進(jìn)行。另外，分離可借助于正相層析，例如在硅膠、氧化鋁等等上進(jìn)行。緩沖的、堿性或酸化的水性溶液理解為是例如水、磷酸鹽緩沖液、乙酸銨和檸檬酸鹽緩沖液(濃度高達(dá)0.5M)，以及曱酸、乙酸、三氟乙酸、氨和三乙胺，或技術(shù)人員已知的所有可商業(yè)獲得的酸和堿(優(yōu)選地濃度高達(dá)1%)。在緩沖水性溶液的情況下，尤其優(yōu)選0.1%乙酸銨?？墒褂锰荻韧瓿蓪游?，所述梯度從100。/。水開始，以100%有機(jī)溶劑結(jié)束；優(yōu)選地用5到95%乙腈的線性梯度進(jìn)行層析?；蛘咭部赡苓M(jìn)行凝膠層析或在疏水相上層析。凝膠層析可例如在聚丙烯酰胺凝膠或共聚物(copolymer)凝膠上進(jìn)行。上述層析步驟的順序可以逆轉(zhuǎn)。在Labyrinthopeptin作為立體異構(gòu)體存在的情況下，它們可以使用已知的方法分離，例如借助于使用手性柱的分離進(jìn)行分離。OH基團(tuán)到酯或醚衍生物的衍生化使用本身已知的方法進(jìn)行(J.March,AdvancedOrganicChemistry,JohnWiley&Sons,第4版，1992),例如借助于與酸酐反應(yīng)或通過(guò)與二烷基碳酸鹽或二烷基硫酸鹽反應(yīng)進(jìn)行衍生化。COOH基團(tuán)到酯或酰胺基衍生物的衍生化使用本身已知的方法進(jìn)行(J.March,AdvancedOrganicChemistry,JohnWiley&Sons,第4版，1992)，例如借助于與氨反應(yīng)成相應(yīng)的conh2基團(tuán)，或與任選地活化的烷基化合物反應(yīng)成相應(yīng)的烷基酯進(jìn)行衍生化。-<:112-8-(:112-基團(tuán)到-ch2-s(o)-ch2-或-ch2-S(0)2-CHr基團(tuán)的氧化可以在將相應(yīng)的Labyrinthopeptin衍生物暴露于氧氣或空氣后實(shí)現(xiàn)。根據(jù)布達(dá)佩斯條約，在1991年1月23日將微生物菌林爿"Z"o/mw/"ra"ff附幼/e附^的分離菌在編號(hào)DSM6313下以識(shí)別參考(identificationreference)FH曙A1198保藏于DeutscheSammlungvonMikroorganismenundZellkulturen[德國(guó)微生物和細(xì)胞培養(yǎng)物保藏中性GmbH(DSMZ)，MascheroderWeg1B，38124Braunschweig,德國(guó)。孩t生物菌抹K/"o附ad"m艦附幼/msis由Wink等，在InternationalJournalofSystematicandEvolutionaryMicrobiology2003，53，721-724中進(jìn)一步描述。4戈替菌林J"iVw附flJwYi"附幼^附&(DSM6313)，還可能4吏用其突變體和/或變體，所述突變體或變體合成一種或多種根據(jù)本發(fā)明的化合物。突變體是下述微生物，其中基因組中的一個(gè)或多個(gè)基因已被修飾，使得負(fù)責(zé)該生物生產(chǎn)本發(fā)明化合物的能力的所述一個(gè)或多個(gè)基因維持功能并且是可遺傳的。這類突變體可以用本身已知的方式，使用物理手段或化學(xué)誘變劑制備，所述物理手段例如使用紫外線或X射線輻射，所述化學(xué)誘變劑例如乙基曱磺酸酯(EMS)、2-羥基-4-甲氧基二苯曱酮(MOB)或N-甲基-N'-亞硝基-N-亞硝基胍(MNNG)，或如Brock等，in"BiologyofMicroorganisms",PrenticeHall,第238-247頁(yè)(1984)中所述制備變體是微生物的一種表型。微生物具有適應(yīng)其環(huán)境的能力，因此顯示高度發(fā)達(dá)的生理學(xué)適應(yīng)性(flexibility)。微生物的所有細(xì)胞均涉及該表型適應(yīng)，改變的本質(zhì)不是遺傳限制的(geneticallyconditioned)，并且在改變的條件下是可逆的(H.Stolp，Microbialecology:organism,habitats,activities.CambridgeUniversityPress,Cambridge,GB，第180頁(yè)，1988)。如下完成合成一種或多種本發(fā)明化合物的突變體和/或變體的篩選任選地凍干發(fā)酵培養(yǎng)基，用如上所述的有機(jī)溶劑，或水和有機(jī)溶劑的混合物提取該凍干物或發(fā)酵液，并借助于HPLC或TLC或通過(guò)測(cè)試生物活性進(jìn)行分析。發(fā)酵條件可應(yīng)用于^4"/"o/waflf"m/jfl附^Ze附/s(DSM6313)及其突變體和/或變體。本發(fā)明的又一實(shí)施方案是上文所述式(I)化合物，優(yōu)選式(II)或(III)的化合物用于治療細(xì)菌感染，特別是革蘭氏陽(yáng)性菌引起的細(xì)菌感染，用于治療病毒感染和/或用于治療疼痛，特別是神經(jīng)性疼痛或炎癥引發(fā)的疼痛的用途。上述藥物(也稱作藥物制劑或藥物組合物)含有有效量的至少一種式(I)化合物和至少一種可藥用的載體，所述式(I)化合物是如上所述的任何立體化學(xué)形式，或任何比例的任何立體化學(xué)形式的混合物，或生理學(xué)可耐受的鹽或其化學(xué)等價(jià)物，所述可藥用的載體優(yōu)選地是一種或多種可藥用的載體物質(zhì)(或媒介物)和/或添加劑(或賦形劑)。藥物可以經(jīng)口施用，例如以丸劑、片劑、涂膜片(lacqueredtablet)、包衣片、顆粒劑、硬明膠膠嚢劑和軟明膠膠嚢劑、溶液劑、糖漿劑、乳劑、混懸劑或氣霧劑混合物的形式。然而，也可以經(jīng)直腸進(jìn)行(例如以栓劑的形式)施用，或以注射溶液或輸液劑、微嚢劑、植入物或棒(rod)的形式胃腸外地(例如靜脈內(nèi)、肌內(nèi)或皮下)進(jìn)行施用，或經(jīng)皮或局部進(jìn)行(例如以軟膏劑、溶液劑或酊劑的形式)施用，或以其他形式(例如以氣霧劑或鼻噴劑的形式)施用。根據(jù)本發(fā)明的藥物以本身已知且本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的方式制備，除14了式(I)化合物外還使用可藥用的惰性無(wú)機(jī)和/或有機(jī)載體物質(zhì)和/或添加劑，所述式(I)化合物為如上所述的任何立體化學(xué)形式，或是任何比例的任何立體化學(xué)形式的混合物，或是其生理學(xué)可耐受的鹽或化學(xué)等價(jià)物。為了生產(chǎn)丸劑、片劑、包衣片劑和硬明膠膠嚢劑，可能使用例如乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其鹽等。用于軟明膠膠嚢劑和栓劑的載體物質(zhì)為例如脂肪、蠟、半固體和固體的多羥基化合物、天然油或硬化油等。用于生產(chǎn)溶液劑(例如注射溶液)或乳劑或糖漿的合適的載體物質(zhì)為例如水、鹽水、醇、甘油、多羥基化合物、蔗糖、轉(zhuǎn)化糖、葡萄糖、植物油等。用于微嚢劑、植入物或棒的合適的載體物質(zhì)為例如羥乙酸和乳酸的共聚物。藥物制劑通常含有按重量計(jì)約0.5到約90%的式(1)化合物和/或其生理學(xué)可接受的鹽和/或其前藥。藥物中式(I)活性成分的量(以如上所述的任何立體化學(xué)形式，或任何比例的任何立體化學(xué)形式的混合物，或其生理學(xué)可耐受的鹽或其化學(xué)等價(jià)物)通常為約0.5到約1000mg，優(yōu)選約1到約500mg。除了式(I)的活性成分(以如上所述的任何立體化學(xué)形式，或任何比例的任何立體化學(xué)形式的混合物，或其生理學(xué)可耐受的鹽或其化學(xué)等價(jià)物)和載體物質(zhì)以外，藥物制劑可含有一種或多種添加劑，例如填充劑、崩解劑、粘合劑、潤(rùn)滑劑、濕潤(rùn)劑、穩(wěn)定劑、乳化劑、防腐劑、甜味劑、著色劑、調(diào)味劑、芳香劑、增稠劑、稀釋劑、緩沖物質(zhì)、溶劑、增溶劑、用于達(dá)到保藏作用的試劑、用于改變滲透壓的鹽、包衣劑或抗氧化劑。它們也可以含有兩種或更多式(I)化合物，其為任何立體化學(xué)形式，或任何比例的任何立體化學(xué)形式的混合物，或其生理學(xué)可耐受的鹽或其化學(xué)等價(jià)物。一旦藥物制劑含有兩種或更多式(I)化合物，則個(gè)體化合物的選擇可針對(duì)藥物制劑的特異總體藥理學(xué)譜。例如，可將具有較短作用時(shí)間的高效化合物與較低效能的長(zhǎng)效化合物組合。式(I)化合物取代基的選擇所許可的適應(yīng)性允許極大控制化合物的生物特性和理化特性，因而允許選擇這類期望的化合物。另外，除了至少一種式(I)化合物外，藥物制劑也可含有一種或多種其他的治療或預(yù)防活性成分。使用式(I)化合物時(shí)，劑量可在廣泛的限度內(nèi)變化，并且如常規(guī)和醫(yī)師所知道的，有待在各個(gè)個(gè)體的案例中合適個(gè)體的條件。這取決于例如使用的特定化合物，有待治療的疾病的本質(zhì)和嚴(yán)重性，施用的模式和時(shí)間表，或取決于治療的病癥是急性或是慢性，或是否進(jìn)行預(yù)防?？墒褂冕t(yī)學(xué)領(lǐng)域公知的臨床途徑確立適當(dāng)?shù)膭┝俊Ｍǔ?，用于在體重約75kg的成人中達(dá)到預(yù)期結(jié)果的每日劑量為約0.01到約100mg/kg，優(yōu)選為約0.1到約50mg/kg，尤其是從約0.1到約10mg/kg(在各情況下以每kg體重計(jì))。每曰劑量可^L劃分為若干次(例如2、3或4次)部分施用，尤其是在施用相對(duì)大量的情況下。通常，根據(jù)個(gè)體的表現(xiàn)，可能需要向上或向下偏離指定的每日劑量。實(shí)施例1:制備j"/"0附fff/"rawtf附幼/e附/s(DSM6313)的低溫培養(yǎng)物(ciyoculture)在無(wú)菌的500ml錐形瓶中用菌抹J"/wo附m/w/Yiw"附/6/e朋/s(DSM6313)接種100ml培養(yǎng)基(1升自來(lái)水中10g淀粉、2g酵母提取物、10g葡萄糖、10g甘油、2.5g玉米桿粉、2g蛋白胨、lgNaCl、3gCaC03，滅菌前調(diào)至pH7.2)，并在搖床上于27。C和120轉(zhuǎn)/分鐘下孵育72小時(shí)。隨后將lml培養(yǎng)物與1ml無(wú)菌保藏溶液(20g甘油、10g蔗糖、70ml去離子水)混合并儲(chǔ)存于-80'C?；蛘?，將瓊脂上的小塊生長(zhǎng)良好的培養(yǎng)物用1.5ml50%無(wú)菌甘油溶液轉(zhuǎn)移至Cryotubes(VangardInternational)并在液氮中儲(chǔ)存于-196。C。實(shí)施例2:制備Labyrinthopeptin用在瓊月旨平板上生長(zhǎng)的爿"/"oimw/wflwfl柳幼/ews/s(DSM6313)培養(yǎng)物接種含有100ml實(shí)施例1中所述培養(yǎng)基的無(wú)菌500ml錐形瓶，并在搖床上于27'C和120轉(zhuǎn)/分鐘下孵育。72小時(shí)后，各用2ml該預(yù)培養(yǎng)物接種以相同量含有相同培養(yǎng)基的其他錐形瓶，并在同樣的條件下孵育168小時(shí)?；蛘哂勉輈""o附"flfwmwa附幼/ewsis(DSM6313)的培養(yǎng)物接種含有100ml實(shí)施例1中所述培養(yǎng)基的300ml錐形瓶，并在25X:和180轉(zhuǎn)/分鐘下賻育。72小時(shí)后，各用5ml該預(yù)培養(yǎng)物接種以相同量含有相同培養(yǎng)基的其他錐形瓶，并在同樣的條件下孵育168小時(shí)。實(shí)施例3:分離Labyhnthopeptins向根據(jù)實(shí)施例2的10升培養(yǎng)液中添加2%HyfloSuper-cd硅藻土(HyfloSupercell;VWR，Darmstadt,德國(guó))，并將培養(yǎng)物濾過(guò)壓濾器，從而將培養(yǎng)液與菌絲體(mycd)分離。將濾出液上樣在含1升AmberliteXAD-16樹脂(柱直徑5.5cm，柱高42cm)的柱上，并用5升去離子水和5升含20%曱醇的水。用5升含60%曱醇的水和5升含80%曱醇的水洗脫Labyrinthopeptin。通過(guò)HPLC-DAD和LC-ESI-MS鑒定含Labyrinthopeptin的級(jí)分，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上集合性濃縮直至獲得水性殘余物，隨后將其凍干。獲得300mg粗產(chǎn)物。實(shí)施例4:對(duì)Labyhnthopeptins進(jìn)行具有二極管陣列檢測(cè)的高效液相層析(HPLC-DAD)柱Nucleosil100-C18;20+125mmx4.6mm,5n(Machery-Nagel)流動(dòng)相水中0.1%H3P04(洗脫液A)和乙腈(洗脫液B)在15分鐘的時(shí)間段中洗脫液A中從0%到100。/。洗脫液B的線性梯度流速每分鐘2ml通過(guò)210、230、260、280、310、360、435和500nm處的UV/Vis吸收檢測(cè)產(chǎn)生的峰。式(II)的Labyrinthopeptin的滯留時(shí)間7.75分鐘。實(shí)施例5:對(duì)Labyrinth叩eptin進(jìn)行具有電噴射離子化質(zhì)譜的高效液相層析(HPLC-ESI-MS)柱PurospherRP-18e;125mmx4mm,5(Agilent)17流動(dòng)相Wasser中0.1%三氟乙酸(洗脫液A)和乙腈中0.1%三氟乙酸(洗脫液B)在10分鐘的時(shí)間段中洗脫液A中從5%到100%洗脫液B的線性梯度流速每分鐘1.5ml。通過(guò)T分流器將到質(zhì)鐠儀ES界面的流速降低至每分鐘0.4ml。通過(guò)210nm處的UV吸收和其中使用離子阱作為質(zhì)量分析器的ESI-MS(陽(yáng)性模式)進(jìn)行檢測(cè)。式(III)的Labyrinthopeptin的滯留時(shí)間為5.9分4中。分子量為1922Da。實(shí)施例6:純4匕Labyrinthopeptin將根據(jù)實(shí)施例3獲得的Labyrinthopeptin粗產(chǎn)物(300mg)溶于二甲基亞砜、甲醇和水的混合物(1:3:6)中，并使用等度洗脫(水+0.1%曱^/甲醇35:65)以每分鐘20ml的流速在Nucleosil100-ds柱(顆粒尺寸10p，柱尺寸250x16mm)上通過(guò)層析分離組分。通過(guò)HPLC(比較實(shí)施例4)分析級(jí)分。獲得62mg99%純度的式(111)的Labyrinth叩eptin。實(shí)施例7:Labyrinthopeptin(III)的一般表征式(III)化合物在暴露于氧氣后被氧化為對(duì)應(yīng)的亞砜。式(III)化合物在2Asp-3Trp和llrThP-12Gly之間含有2順式-酰胺。實(shí)施例8:高分辨率ESI-FTICR-質(zhì)鐠法通過(guò)注射泵使式(III)的Labyrinthopeptin在甲醇中的溶液(c=0.2mg/ml)以2nl/分鐘的流速進(jìn)入裝備了電噴射源的BrukerApexIIIFTICRMS(7T磁鐵)。使用外部校準(zhǔn)以陽(yáng)性模式記錄波鐠。<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>C85H11()N2()024S4的理論質(zhì)量[M1922.6885分子式C85H110N20O24S4實(shí)施例9:氨基酸分析水解在氮?dú)夥罩杏?NHCl、5。/。苯酚于110。C下將Labyrinthopeptin(III)(0.05mg)水解24小時(shí)。在氮?dú)饬髦懈稍锼猱a(chǎn)物。非手性GC-MS:將水解產(chǎn)物與雙-(三曱代甲硅烷基)三氟-乙酰胺(BSTFA)/乙腈(1:1)一起在150。C加熱4小時(shí)。對(duì)GC-MS實(shí)驗(yàn)，使用DB5-融合的-二氧化硅-毛細(xì)管(I=15mx0.25nm融合的二氧化硅，涂有二甲基-(5%-苯基曱基)-聚硅氧烷，d產(chǎn)0.10ftm;溫度程序T=65。/3V6/280'C)。手性GC-MS:于110。C下用200jU2NHCl將水解產(chǎn)物在乙醇中酯化30分鐘并干燥。隨后，于110。C下在100nl二氯甲烷中用25plTFAA將混合物?；?0分鐘并干燥。對(duì)GC-MS而言，使用融合的二氧化硅毛細(xì)管(I=22mx0.25融合的二氧化珪，涂有chirasil-S-Val(Machery-Nagel)，df=0.13nm;溫度程序T=55。/3V3，2/180。C)。_<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>實(shí)施例10:NMR光i普法在裝備了5mmZ-Grad三元共振探頭的AMX600MHzNMR波譜儀(Bruker,Karlsruhe,德國(guó))和裝備了5mmZ-Grad寬鐠帶逆轉(zhuǎn)探頭的DRX500NMR波鐠儀(Bruker，Karlsruhe,德國(guó))上測(cè)量2-DNMR譜(COSY，TOCSY，NOESY，HSQC，HMBC)。下表顯示測(cè)量中獲得的信號(hào)。DMSO-d6中式(III)的Labyrinthopeptin的NMR數(shù)據(jù)0.68:0.71;0,75;0.78;1,05;1,07;1.10;1,35;1.40;1,42;1,49;1.90;1.96;2,00;2.10;2,17;2.26;2.77;2,86;2.90;2,97;3.03;3.14;3.16;3.18;3,18;3.20;3.24;3.29;3.30;3箭'3.59;3.67;3.67;3.72;3,99;4,02;4,03;4,10;4.13;4.14;4,16;4,19;4.34;4.36;4.45;4.49;4.59;6鄰；7,26;7.00;7.04;7,08;7.08;7.10:7.18:7.22;7.23;7.24;7.24;7.31:7.35;7,36;7.42;7.51;7.53;7.65;7.65;7.69;7.77;7.84;7.98;譜;8.01;8,56;濕O;10.81.19.7;21,3;21,4;22,6;23,04;23,2;23,7;26.4;26.4;27'1;33.4;35,2;35,4;36.7;38.3:40.0:40.5:40J;40.8:40,8:41.2:41.2:43.4;48.4;48.7;49.0;51.2;51.4:52.5;52.6;52.7:53,2:53,5;54.0;56.9;60.0;60.3;66.4;109.8;110.6;111,2;111,2;117,4;118,1;118.1;118,2;120.7;120.7;122.1:123.4;126,5;127.2;127.3;127.8;129.4;136.0;136,1;136.6;140.8;徹4;173眾174.3;176,9.實(shí)施例11:Labyrintopeptin(III)的X射線晶體學(xué)結(jié)晶條件將蛋白質(zhì)溶于0.02MTrispH8.2(濃度7mg/ml)中。晶體在室溫下通過(guò)蒸汽滴擴(kuò)散(vapourdropdiffusion)從該蛋白質(zhì)溶液與60%乙醇、0.75%PEG6000、0.025M乙酸鈉和0.05M氯化鈉的1:1混合物中生長(zhǎng)。晶體生長(zhǎng)約l周。測(cè)量在Bruker3-環(huán)衍射儀上用旋轉(zhuǎn)陽(yáng)極和鏡面單色CuK-a輻射(mirrormonochromatedCuK-alpharadiation)收集X-射線數(shù)據(jù)。輻射強(qiáng)度在SMART6000CCD區(qū)域監(jiān)測(cè)器上收集。晶體數(shù)據(jù):式NaN20C85S4048NaC85N20024S4式重量2220.291834.82結(jié)晶體系正交晶空間群(spacegroup)P21212(第18號(hào))晶胞維度(unitcelldimension)a=41.136()Ab=12.885()A20<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>實(shí)施例12:氧化Labyrinthopeptin(III)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage25</formula>在室溫下4奪50mgLabyrinthopeptin(III)(0.026mmol)溶于1mlDMSO中并與11mgl-羥基-l-氧化物-l，2-苯碘酰-3(1H)-酮(l國(guó)Hydroxy-l-oxide-l，2-Benziodoxol-3(1H)-one，IBX，0.039mmol)混合。將混合物在40。C攪拌6小時(shí)，在室溫下再攪拌12小時(shí)，然后在帶有XTerraPr印MSC1810jim前置柱(Waters,尺寸19x10mm)的PhenomenexLunaAxia5C18(2)柱(尺寸100mmx30mm)上通過(guò)反相HPLC純化。在30分鐘內(nèi)使用含5%到95%乙腈的水(含0.1%乙酸銨，pH7.0)的梯度作為洗脫液。將柱流出液(60ml/分鐘)分級(jí)并通過(guò)UV檢測(cè)。級(jí)分7到ll含有期望的化合物。所述級(jí)分在凍干后產(chǎn)生25mg(50%)。通過(guò)質(zhì)^普法(BrukerDaltonicsMicroTof)表征產(chǎn)物。UV:222sh，278nmESI-MS:MW=1920.66518(單MW)分子式C85H108N20O24S4分子量(MW)=1922.2實(shí)施例13:Labyrinthopeptin(III)C-末端的肽合成將40mgLabyrinthopeptin(III)(0.021mmol)溶于2ml無(wú)水二曱基曱酰胺中并用10mg(0.045mmol)二-叔-丁基-重碳酸鹽(Boc20)和7mg(0.054mmol)二異丙基乙胺在室溫下處理1小時(shí)。然后添加6.8mg(0.063mmol)節(jié)胺和丙基磷酸酐在DMF中的50%溶液50nl(0.072mmol)。在含有XBridgeShieldC1810前置柱(Waters,尺寸19x10mm)的WatersXBridgeShield5,C18Saule(尺寸100mmx30mm)上通過(guò)反相HPLC純化反應(yīng)混合物。在30分鐘內(nèi)使用含5%到95%乙腈的水(含0.1%乙酸銨，pH7.0)的梯度作為洗脫液。將柱流出液(60ml/分鐘)分級(jí)并通過(guò)UV檢測(cè)。將級(jí)分30到31合并并產(chǎn)生9.6mg(22。/。)期望的化合物。通26過(guò)質(zhì)譜法(BmkerDaltonicsMicroTof)表征產(chǎn)物。UV:222sh,276nmESI-MS:MW=2U1.7卯18(單MW)分子式C97H125N21025S4分子量(MW)=2113.5實(shí)施例14:Labyrinthopeptin(III)N-末端的肽合成<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>將5mg(0.028mmol)2-氯誦4,6-二甲氧基畫l，3，5-三噪(triazin)(CDMT)溶于2ml無(wú)水二曱基曱酰胺中，并與8.6mg(0.085mmol)N-曱基嗎啉(NMM)混合。將混合物在室溫下攪拌l小時(shí)。添加3.3mg(0.028mmol)正己酸并將混合物在室溫下再攪拌30分鐘。隨后添加40mg(0.021mmol)Labyrinthopeptin(III)，并將得到的混合物在室溫下再攪拌2小時(shí)。在帶有XBridgeShieldC1810前置柱(Waters,尺寸19x10mm)的WatersXbridgeShield5jimC18Saule(尺寸100mmx30mm)上通過(guò)反相HPLC純化反應(yīng)混合物。在30分鐘內(nèi)使用含5%到95%乙腈的水(含0.1%曱酸，pH2.0)的梯度作為洗脫液。將柱流出液(60ml/分鐘)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>分級(jí)并通過(guò)UV檢測(cè)。將級(jí)分38到40合并并產(chǎn)生11.0mg(26。/。)期望的化合物。通過(guò)質(zhì)鐠法(BrukerDaltonicsMicroTof)表征產(chǎn)物。UV:220sh,278應(yīng)ESI-MS:MW=2020.75738(單MW)分子式C91H120N20O25S4分子量(MW)(MW)=2022.3實(shí)施例15:抗菌活性將生物在液體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(beefextractbroth)中培養(yǎng)后，通過(guò)用新鮮的培養(yǎng)基稀釋，將細(xì)菌懸浮液調(diào)節(jié)至確定的密度(5-105生物/1111)。將Labyrinthopeptin(III)溶解并用水以幾何稀釋系列(因數(shù)2)稀釋。將各個(gè)稀釋步驟中1.5ml溶液與13.5ml液體瓊脂(Mtiller-Hinton瓊脂)在約45。C下混合。培養(yǎng)皿中最大的化合物濃度通常為100mg/l。使用無(wú)化合物的瓊脂平板作為對(duì)照。培養(yǎng)基冷卻并固化后，使用每個(gè)接種點(diǎn)遞送5-104個(gè)菌落形成單位(cfu)的多點(diǎn)接種器(MultipointInoculator)同時(shí)用20種不同的細(xì)菌菌林接種瓊脂平板，然后在有氧條件下于37。C孵育17小時(shí)。醉育后，肉眼檢查平板得到細(xì)菌生長(zhǎng)不再是可見的最低化合物濃度。忽略接種點(diǎn)處的單個(gè)菌落或混濁(haze)生長(zhǎng)?？咕饔帽辉u(píng)價(jià)為測(cè)試化合物的最小抑制濃度(MIC:細(xì)菌生長(zhǎng)不再是肉眼可見的最低化合物濃度)測(cè)^式生物MIC金黃色葡萄球菌(S鄉(xiāng)/r盧cocc"51SG51112.5mg/1金黃色葡萄球菌28512.5mg/1金黃色葡萄球菌5033.13mg/1酉良膿鏈3求菌(5^e/;tococcMS308A3.13mg/1釀膿鏈J求菌77A3.13mg/128尿鏈球菌(5^/;tococc附/flec/"附)D6.25mg/1實(shí)施例16:抗病毒活性病毒只能在活細(xì)胞中繁殖。因此，病毒研究在細(xì)胞培養(yǎng)物中進(jìn)行。選擇病毒是因?yàn)樗鼈冏鳛閭魅疚锏闹匾曰蚱涞湫偷纳锘瘜W(xué)或形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)。在96-孔微量滴定板中制備Labyhnthopeptin(III)的稀釋系列。根據(jù)感染性病毒添加Hela或Vero細(xì)胞，在24小時(shí)的孵育內(nèi)得到匯合的單層。孵育3小時(shí)后，以下述濃度向細(xì)胞添加各病毒，所述濃度預(yù)期在2天內(nèi)完全破壞細(xì)胞單層。將培養(yǎng)物在充氣的孵育箱(空氣中5%<:02)中于37。C下孵育。24小時(shí)后，通過(guò)顯微鏡檢查評(píng)價(jià)細(xì)胞培養(yǎng)物中測(cè)試化合物的最大耐受劑量(MTD)。將結(jié)果與非感染的組織對(duì)照和相應(yīng)的感染對(duì)照比較編號(hào)宿主生物測(cè)試生物抑制[mg/lj1Vero細(xì)胞真菌病毒(RNA/流感A/Aichi)44.442Hela細(xì)胞單純皰瘆(DNA)，1(型)133.333Vero細(xì)胞單純皰瘆(DNA),2(型)VR73444.444Hela細(xì)胞腺病毒(DNA)，5"133.33實(shí)施例17:神經(jīng)性疼痛活性在神經(jīng)性疼痛的周圍神經(jīng)損傷(sparednerveinjury,SNI)小鼠模型中研究Labyrinth叩eptin(III),從而證實(shí)對(duì)觸覺異常性疼痛的活性。在全身麻醉下，將成年雄性C57B6小鼠(22.7g士0.26SEM)中坐骨神經(jīng)的兩個(gè)主要分支結(jié)扎并橫切，保持腓腸神經(jīng)完整。用自動(dòng)的vonFrey檢驗(yàn)測(cè)定觸覺異常性疼痛使用清除穿刺針(dumpneedlestick)將后爪的跖部皮膚暴露于強(qiáng)度遞增至5g的壓力刺激。動(dòng)物用縮回后爪來(lái)應(yīng)答的力(以克計(jì))用作觸覺異常性疼痛的讀數(shù)(read-out)。該研究在神經(jīng)損傷后7天進(jìn)行6個(gè)小時(shí)，并在24小時(shí)后額外測(cè)量。在神經(jīng)^f黃切后兩天內(nèi)，觸覺異常性疼痛發(fā)展完全并且在至少兩周內(nèi)維持穩(wěn)定。作為單次應(yīng)用(3mg/kg)靜脈施用化合物。選29擇l:1:18(乙醇Solutol:躊酸鹽緩沖的鹽水)的媒介物作為靜脈應(yīng)用的媒介物。爪縮回閾值(PWT)測(cè)量已用于計(jì)算顯著的處理效應(yīng)，并用于參考時(shí)間段(6小時(shí))內(nèi)的AUC計(jì)算和隨后的。/。益處計(jì)算。對(duì)統(tǒng)計(jì)分析而言，以兩種方式使用同側(cè)后爪的PWT值第一種基于特定時(shí)間(在24小時(shí)的周期內(nèi))的PWT值進(jìn)行兩因素ANOVA,第二種對(duì)未轉(zhuǎn)化的5AUC值IAUCl-6小時(shí)|進(jìn)行單因素ANOVA。下述實(shí)驗(yàn)揭示了靜脈應(yīng)用各化合物后1到6小時(shí)，與媒介物組的高度顯著的差異使用重復(fù)測(cè)量的兩因素方差分析(重復(fù)因子TIME,分析變量PWT)，隨后進(jìn)行補(bǔ)償分析(因子GROUP對(duì)因子TIME各水平的效應(yīng)(Winer分析)，分析變量PWT)，隨后進(jìn)行因子TREATMENT對(duì)因子TIME各水平的鄧奈特檢驗(yàn)(Dunnett'stest)(雙側(cè)比較vs水平VEHICLE)。該效應(yīng)在應(yīng)用后24小時(shí)消失。使用S|AUCl-6小時(shí)|值的單因素ANOVA分析揭示了p<0.0001的p值。鄧奈特分析對(duì)兩種化合物均給出顯著的處理效應(yīng)。使用同側(cè)媒介物組(0%益處)的IAUCl-6小時(shí)|值和所有三組對(duì)側(cè)的所有IAUCl-6小時(shí)|值評(píng)價(jià)處理的益處百分比(100%益處=最大可能效應(yīng))。與這些界限相比，Labyrinthopeptin(ni)達(dá)到了97%的益處?？偠灾谏窠?jīng)性疼痛的SNI小鼠模型中，該化合物顯著地減輕了觸覺異常疼痛。實(shí)施例18:炎癥引發(fā)的疼痛活性在小鼠中角叉菜膠(CAR)誘導(dǎo)的后爪炎癥模型中研究Labyrinthopeptin(III)，從而驗(yàn)證對(duì)熱痛覺過(guò)敏(thermalhyperalgesia)的活性，所述熱痛覺過(guò)敏是炎癥引發(fā)的疼痛的一種典型讀數(shù)。誘導(dǎo)后爪炎癥在輕微的全身異氟烷麻醉下，將20nl鹽水中的2。/oCAR(Sigma,Deisenhofen,德國(guó))注射進(jìn)雄性C57B6小鼠兩個(gè)后爪的跖面中。使用安裝了小型照相機(jī)的市售設(shè)備(PlantarTestUgoBasileBiologicalResearchApparatus,Comerio,Italy)將爪暴露于確定的溫度刺激下，測(cè)定爪縮回潛伏期(PWL)，所述照相機(jī)確保將紅外線熱準(zhǔn)確置于目的后爪下。整個(gè)研究周期(6小時(shí))內(nèi)將小鼠保持在測(cè)試籠中。熱痛覺過(guò)敏的測(cè)量如果動(dòng)物搖動(dòng)其受影響的后爪，則測(cè)量后爪反射紅外光的持續(xù)時(shí)間的計(jì)時(shí)器由研究者開始和終止。設(shè)定16秒的斷開，以防止組織損傷。在CAR注射之前進(jìn)行研究，并在注射之后進(jìn)行6小時(shí)。以秒計(jì)的爪縮回潛伏期用作讀數(shù)，用于進(jìn)一步的分析。選擇l:1:18(乙醇Solutol:磷酸鹽緩沖的鹽水)的媒介物用作靜脈應(yīng)用的J某介物。爪縮回潛伏期(PWL)測(cè)量已用于計(jì)算顯著的處理效應(yīng)，并用于參考時(shí)間段(6小時(shí))內(nèi)的AUC計(jì)算和隨后的。/。益處計(jì)算。對(duì)統(tǒng)計(jì)分析而言，以兩種方式使用兩只后爪的PWL值第一種基于特定時(shí)間(在6小時(shí)的周期內(nèi))的PWL值進(jìn)行兩因素變量分析(ANOVA),第二種對(duì)未轉(zhuǎn)化的5AUC值IAUCl-6小時(shí)l進(jìn)行單因素ANOVA。下述實(shí)驗(yàn)揭示了靜脈應(yīng)用兩種劑量后1到2小時(shí)，與媒介物組的高度顯著的差異使用重復(fù)測(cè)量的兩因素方差分析(重復(fù)因子TIME，分析變量PWL)，隨后進(jìn)行補(bǔ)償分析(因子GROUP對(duì)因子TIME各水平的效應(yīng)(Winer分才斤)，分析變量PWL)，隨后進(jìn)4亍因子DOSAGE對(duì)因子TIME各水平的鄧奈特檢驗(yàn)(雙側(cè)比較vs水平0=VEHICLE)。該效應(yīng)在應(yīng)用后4小時(shí)消失。使用8|AUCl-6小時(shí)l值的單因素ANOVA揭示了p0.0001的p值。鄧奈特分析對(duì)兩種劑量均給出顯著的處理效應(yīng)。使用媒介物組(0%益處)的IAUCl-6小時(shí)|值和注射CAR前的所有IAUCl-6小時(shí)l值評(píng)價(jià)處理的益處百分比(6小時(shí)間的理論基線=最大可能效應(yīng)=100%效應(yīng))。與這些界限相比，1mg/kg劑量組達(dá)到了37%的益處，且10mg/kg組達(dá)到了34%的益處?？偠灾?，該化合物在炎癥引發(fā)疼痛的CAR小鼠模型中顯著降低了熱痛覺過(guò)敏。3權(quán)利要求1.式(I)化合物，其中R1為H、C(O)-(C1-C6)烷基或C(O)-O-(C1-C6)烷基；R2為OH、NH2、NH-(C1-C6)烷基、NH-(C1-C4)亞烷基-苯基或NH-(C1-C4)亞烷基-吡啶基；R3和R4彼此獨(dú)立地為H或OH，或R3和R4一起為＝O；且m和n彼此獨(dú)立地為0、1或2；所述化合物為任何立體化學(xué)形式，或是任何比例的任何立體化學(xué)形式的混合物，或其生理學(xué)可耐受的鹽。2.根據(jù)權(quán)利要求l的式(I)化合物，其為式(II):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的式(I)化合物，其中Rl為H。4.根據(jù)權(quán)利要求1或3的式(I)化合物，其中R2為OH。5.根據(jù)權(quán)利要求1或4的式(I)化合物，其中R3和R4為H或OH，其中如果R3為OH則R4為H,或如果R3為H則R4為OH，或R3和R4—起為-O。6.根據(jù)權(quán)利要求1到5中任一項(xiàng)的式(I)化合物，其中R3為OH且R4為H，或如果R3為H則R4為OH。7.根據(jù)權(quán)利要求1到6中任一項(xiàng)的式(I)化合物，其中m和n均為O,或m和n均為2，或m為0且n為2，或m為2且n為0。8.根據(jù)權(quán)利要求1到7中任一項(xiàng)的式(I)化合物，其中m和n均為0。9.根據(jù)權(quán)利要求1到8中任一項(xiàng)的式(I)化合物，其中Rl為H;R2為OH;R3和R4彼此獨(dú)立地為H或OH，其中如果R3為OH則R4為H,且如果R3為H則R4為OH;且m和n彼此獨(dú)立地為0、1或2。10.根據(jù)權(quán)利要求1到9中任一項(xiàng)的式(I)化合物，其中Rl為H;R2為OH;R3和R4彼此獨(dú)立地為H或OH，其中如果R3為OH則R4為H,且如果R3為H則R4為OH;且m和n均為0，或m和n均為2，或m為0且n為2，或m為2且n為0。11.根據(jù)權(quán)利要求1到10中任一項(xiàng)的式(I)化合物，其中Rl為H;R2為OH;R3和R4彼此獨(dú)立地為H或OH，其中如果R3為OH則R4為H，且如果R3為H則R4為OH;且m和n均為0。12.根據(jù)權(quán)利要求1到11中任一項(xiàng)的式(I)化合物，其為式(III)化合物13.從J"i7io附"fiTwYi"fl附幼Ze附/s(DSM6313)分離的化合物，其特征在于單種同位素中性分子量為1922.6872Da，且分子式為C85H11()N2。024S4。14.根據(jù)權(quán)利要求1到13中任一項(xiàng)的化合物用于制備藥物的用途，所述藥物用于治療細(xì)菌感染、病毒感染和/或疼痛。15.藥物組合物，其包含至少一種根據(jù)權(quán)利要求1到13中任一項(xiàng)的式(I)化合物，和至少一種可藥用成分。16.用于制備根據(jù)權(quán)利要求1到13中任一項(xiàng)的式(I)化合物的方法，其包括a)在合適的條件下，在培養(yǎng)基中發(fā)酵菌林爿"/w0附flw"/w幼/ews^(DSM6313)，或其變體和/或突變體之一，直到培養(yǎng)基中產(chǎn)生一種或多種式(I)化合物，b)從培養(yǎng)基中分離式(I)化合物，和C)適當(dāng)時(shí)將式(I)化合物衍生化，和/或適當(dāng)時(shí)將其轉(zhuǎn)化為生理學(xué)可耐受的鹽。17.根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其中化合物(I)為式(II)化合物。18.根據(jù)權(quán)利要求16或17中任一項(xiàng)的方法，其中化合物(I)為式(III)化合物。19.根據(jù)權(quán)利要求16到18中任一項(xiàng)的方法，其中m和n均為0，或m和n均為2，或m為0且n為2，或m為2且n為0。全文摘要本發(fā)明涉及獲自Actinomaduranamibiensis(DSM6313)的式(I)化合物，其用于治療細(xì)菌感染、病毒感染和/或疼痛的用途，和包含它的藥物組合物，所述式(I)中R3和R4獨(dú)立地為H或OH，且其中m和n彼此獨(dú)立地為0、1或2。式(I)化合物已被定義為L(zhǎng)abyrinthopeptin，并由18個(gè)氨基酸的高度橋連的肽結(jié)構(gòu)組成，所述肽結(jié)構(gòu)含有羊毛硫氨酸樣殘基和α二取代的氨基酸類似物。該氨基酸序列為XDWXLWEXCXTGXLFAXC，其中兩個(gè)Cys殘基形成二硫鍵，且各X獨(dú)立地表示涉及橋連鍵的非天然氨基酸之一。文檔編號(hào)C07K14/36GK101522705SQ200780037217公開日2009年9月2日申請(qǐng)日期2007年9月25日優(yōu)先權(quán)日2006年10月6日發(fā)明者G·謝爾里克,G·賽博特,H·居林,H·霍夫曼,I·溫克勒,J·溫克,K·邁因德爾,L·托蒂,L·韋爾泰希,M·布倫斯特魯普,R·聚斯穆特申請(qǐng)人:塞諾菲-安萬(wàn)特股份有限公司