專利名稱：作為akt蛋白激酶抑制劑的二氫噻吩并嘧啶的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(例如，AKT和相關(guān)激酶)的抑制劑，包含該抑制劑的藥物組合物，和制備該抑制劑的方法。該抑制劑可有效用于例如治療哺乳動(dòng)物的過度增生性疾病例如癌癥和炎癥。
現(xiàn)有技術(shù)的說明 蛋白激酶(PK)是通過轉(zhuǎn)移ATP上的末端(γ)磷酸酯，催化蛋白的酪氨酸、絲氨酸和蘇氨酸殘基上羥基的磷酸化的酶。通過信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，這些酶調(diào)節(jié)細(xì)胞生長、分化和增殖，即細(xì)胞周期的幾乎所有方面均取決于PK活性(Hardie，G.和Hanks，S.(1995)The Protein Kinase Facts Book.I and II，Academic Press，San Diego，CA)。此外，PK活性異常與許多病癥有關(guān)，范圍從相對(duì)無生命危險(xiǎn)的疾病例如牛皮癬至極其致命的疾病例如惡性膠質(zhì)瘤(腦癌)。蛋白激酶是治療調(diào)節(jié)的重要靶向類別(Cohen，P.(2002)Nature Rev.DrugDiscovery 1309)。
顯著的是，非典型性蛋白磷酸化和/或表達(dá)常常報(bào)道為癌癥中的異常細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移病變和細(xì)胞存活的成因之一。多種激酶(包括Akt、VEGF、ILK、ROCK、p70S6K、Bcl、PKA、PKC、Raf、Src、PDK1、ErbB2、MEK、IKK、Cdk、EGFR、BAD、CHK1、CHK2和GSK3等)的異常調(diào)節(jié)和/或表達(dá)，特別與癌癥有關(guān)。
蛋白激酶包括兩種類型蛋白酪氨酸激酶(PTK)和絲氨酸-蘇氨酸激酶(STK)。蛋白激酶B/Akt酶是一組在多種人腫瘤中過表達(dá)的絲氨酸/蘇氨酸激酶。PI3K脂質(zhì)產(chǎn)物的一個(gè)最好表征的靶點(diǎn)是57KD絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶Akt，在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的PI3K的下游(Hemmings，B.A.(1997)Science275628；Hay N.(2005)Cancer Cell 8179-183)。Akt是急劇轉(zhuǎn)化逆轉(zhuǎn)錄病毒AKT8的人類原癌基因v-akt的同系物。由于其與激酶A和C的高序列同源性，Akt也被稱為蛋白激酶B(PKB)，并且與A和C(RAC)有關(guān)。已經(jīng)知道Akt存在三種同工型，即Akt1、Akt2和Akt3，其顯示出整個(gè)同源性的80％(Staal，S.P.(1987)Proc.Natl.Acad.Sci.845034；Nakatani，K.(1999)Biochem.Biophys.Res.Commun.257906；Li等人，(2002)Current Topics inMed.Chem.2939-971；WO 2005/113762)。Akt同工型共享由N-末端的普列克底物蛋白(pleckstrin)同源區(qū)域、激酶催化區(qū)域和C末端的短調(diào)節(jié)區(qū)組成的共同區(qū)域結(jié)構(gòu)。此外，Akt2和Akt3顯示出剪接變體。一旦通過PtdInd(3，4，5)P3對(duì)細(xì)胞膜進(jìn)行補(bǔ)充，Akt分別在T308、T309和T305處被PDK1磷酸化(活化)為異構(gòu)型Akt1(PKBα)、Akt2(PKBβ)和Akt3(PKBγ)，以及分別在S473、S474和S472處被磷酸化(活化)為同工型Akt1、Akt2和Akt3。通過至今未知的激酶(推定地命名為PDK2)發(fā)生這種磷酸化，不過已經(jīng)顯示PDK1(Balendran，A.，(1999)Curr.Biol.9393)，自身磷酸化作用(Toker，A.(2000)J.Biol.Chem.2758271)和整聯(lián)蛋白-連接的激酶(ILK)(Delcommenne，M.(1998)Proc.Natl.Acad.Sci.USA，9511211)和這種過程有關(guān)。Akt活化需要其在C端疏水性基序中的殘基Ser 473上的磷酸化(Brodbeck等人，(1999)J.Biol.Chem.2749133-9136；Coffer等人，(1991)Eur.J.Biochem.201475-481；Alessi等人，(1997)Curr.Biol.7261-269)。盡管Akt的單磷酸化可以活化激酶，但雙(磷酸化)是最大激酶活性所需要的。
認(rèn)為Akt通過抑制細(xì)胞凋亡以及增加血管生成和增殖來實(shí)現(xiàn)對(duì)癌癥的作用(Toker等人，(2006)Cancer Res.66(8)3963-3966)。Akt在許多人類癌癥類型過表達(dá)，其包括，但不限于，結(jié)腸癌(Zinda等人，(2001)Clin.Cancer Res.72475)、卵巢癌(Cheng等人，(1992)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 899267)、腦癌(Haas Kogan等人，(1998)Curr.Biol.81195)、肺癌(Brognard等人，(2001)Cancer Res.613986)、胰腺癌(Bellacosa等人，(1995)Int.J.Cancer64280-285；Cheng等人，(1996)Proc.Natl.Acad.Sci.933636-3641)、前列腺癌(Graff等人，(2000)J.Biol.Chem.27524500)和胃癌(Staal等人，(1987)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 845034-5037)。
對(duì)于靶向的小分子抑制劑治療，已經(jīng)探究了雷帕霉素(mTOR)路徑的PI3K/Akt/哺乳動(dòng)物靶點(diǎn)(Georgakis，G.和Younes，A.(2006)Expert Rev.Anticancer Ther.6(1)131-140；Granville等人，(2006)Clin.Cancer Res.12(3)679-689)。抑制PI3K/Akt信號(hào)可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并且可以抑制具有Akt水平增加的腫瘤細(xì)胞的生長(Kim等人，(2005)Current Opinion in Investig.Drugs 6(12)1250-1258；Luo等人，(2005)Molecular Cancer Ther.4(6)977-986)。
靶向異常調(diào)節(jié)途徑并最終導(dǎo)致疾病的激酶抑制劑的開發(fā)，對(duì)于醫(yī)學(xué)和藥學(xué)團(tuán)體，具有巨大的倫理和商業(yè)利益。抑制下列的化合物可以是有價(jià)值的抗癌劑(1)Akt對(duì)細(xì)胞膜的補(bǔ)充，(2)被PDK1或PDK2活化，(3)底物磷酸化，或(4)Akt的下游靶點(diǎn)之一，其既可以作為單獨(dú)療法，也可以與其它可接受方法結(jié)合使用。
美國專利申請(qǐng)2005/0130954尤其公開了作為AKT抑制劑的多種化合物。據(jù)稱這些化合物可用于治療過度增生性疾病(hyperproliferative disease)，例如癌癥。
發(fā)明概述 本發(fā)明提供了抑制AKT蛋白激酶的新的化合物。本發(fā)明的化合物可作為疾病和病癥的治療劑，所述疾病和病癥可以通過抑制AKT蛋白激酶來得到治療。
本發(fā)明包括具有通式I的化合物及其對(duì)映異構(gòu)體和鹽
其中X、A、R1、R2和R5如下面所定義。
本發(fā)明的其它方面包括具有通式Ia的化合物及其對(duì)映異構(gòu)體和鹽
其中A、R1、R2和R5如下面所定義。
本發(fā)明還提供了藥物組合物，其包含式I或Ia的化合物，或其對(duì)映異構(gòu)體或可藥用鹽。
在另一方面，本發(fā)明提供了治療哺乳動(dòng)物中AKT蛋白激酶介導(dǎo)的疾病或醫(yī)學(xué)病癥的方法，包括向所述哺乳動(dòng)物以有效治療或預(yù)防所述病癥的量給藥一種或多種式I或Ia的化合物，或其對(duì)映異構(gòu)體或可藥用鹽?？梢园凑毡景l(fā)明方法治療的AKT蛋白激酶介導(dǎo)的病癥包括，但不限于，炎性、過度增生性、心血管、神經(jīng)變性、婦科和皮膚疾病和病癥。
在另一方面，本發(fā)明提供了抑制哺乳動(dòng)物中AKT蛋白激酶產(chǎn)生的方法，該方法包括向所述哺乳動(dòng)物以有效抑制AKT蛋白激酶產(chǎn)生的量給藥一種或多種式I或Ia的化合物，或其對(duì)映異構(gòu)體或可藥用鹽。
在另一方面，本發(fā)明提供了抑制AKT蛋白激酶活性的方法，包括將所述激酶與式I或Ia的化合物接觸。
本發(fā)明的化合物可以有利地與其它已知的治療劑組合使用。因此，本發(fā)明還提供了藥物組合物，其包含式I或Ia的化合物或其對(duì)映異構(gòu)體或可藥用鹽，以及第二治療劑。
本發(fā)明還提供了式I或Ia的化合物及其對(duì)映異構(gòu)體和可藥用鹽，其在治療AKT蛋白激酶介導(dǎo)的病癥中用作藥物。
本發(fā)明的其它方面是式I或Ia的化合物或其對(duì)映異構(gòu)體或可藥用鹽在治療中的用途。在一個(gè)實(shí)施方案中，該治療包括AKT蛋白激酶介導(dǎo)的病癥的治療。
本發(fā)明還提供了試劑盒，其用于治療AKT蛋白激酶介導(dǎo)的疾病或病癥，所述試劑盒包括式I或Ia的化合物或其對(duì)映異構(gòu)體或可藥用鹽，容器和任選的包裝說明書或注明治療的標(biāo)簽。該試劑盒還可以包括第二化合物或制劑，所述第二化合物或制劑包括用于治療所述疾病或病癥的第二藥劑。
本發(fā)明還包括本發(fā)明化合物的制備方法、分離方法和純化方法。
在下列描述中部分地列出了本發(fā)明的其它優(yōu)勢和新性能，并且部分可通過閱讀本發(fā)明書對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的，或可以從本發(fā)明的操作中得知。本發(fā)明的優(yōu)勢可通過所附權(quán)利要求書中特別指出的手段、組合、組合物和方法實(shí)現(xiàn)和獲得。
發(fā)明詳述 現(xiàn)在，對(duì)于本發(fā)明的某些實(shí)施方案詳細(xì)地進(jìn)行介紹，其例子在隨附的結(jié)構(gòu)和通式中示例性地說明。盡管本發(fā)明結(jié)合所列舉的實(shí)施方案來進(jìn)行描述，但是應(yīng)當(dāng)理解，這并不意味著將本發(fā)明限制于那些實(shí)施方案。相反，本發(fā)明包括可以包含在權(quán)利要求書所定義范圍內(nèi)的所有的替換、改進(jìn)和等效內(nèi)容。本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)認(rèn)識(shí)到與本文所描述的那些相似的許多方法和物質(zhì)或等效物，其可以在本發(fā)明的實(shí)踐中使用。本發(fā)明決不限于所述的方法和物質(zhì)。如果一個(gè)或多個(gè)所引用的文獻(xiàn)和類似的材料不同于或與本申請(qǐng)相矛盾，包括但不限于所定義的術(shù)語、術(shù)語用法、所述技術(shù)等，以本申請(qǐng)為準(zhǔn)。
定義 本文使用的術(shù)語“烷基”是指1至12個(gè)碳原子的飽和直鏈或支鏈一價(jià)烴基，其中烷基可以任選被一個(gè)或多個(gè)如下所述的取代基獨(dú)立地取代。烷基的實(shí)例包括，但不限于，甲基(Me、-CH3)、乙基(Et、-CH2CH3)、1-丙基(n-Pr、正丙基、-CH2CH2CH3)、2-丙基(i-Pr、異丙基、-CH(CH3)2)、1-丁基(n-Bu、正丁基、-CH2CH2CH2CH3)、2-甲基-1-丙基(i-Bu、異丁基、-CH2CH(CH3)2)、2-丁基(s-Bu、仲丁基、-CH(CH3)CH2CH3)、2-甲基-2-丙基(t-Bu、叔丁基、-C(CH3)3)、2，2-二甲丙基(CH2C(CH3)3)、1-戊基(正戊基、-CH2CH2CH2CH2CH3)、2-戊基(-CH(CH3)CH2CH2CH3)、3-戊基(-CH(CH2CH3)2)、2-甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH2CH3)、3-甲基-2-丁基(-CH(CH3)CH(CH3)2)、3-甲基-1-丁基(-CH2CH2CH(CH3)2)、2-甲基-1-丁基(-CH2CH(CH3)CH2CH3)、1-己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH3)、2-己基(-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3)、3-己基(-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3))、2-甲基-2-戊基(-C(CH3)2CH2CH2CH3)、3-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3)、4-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH2CH(CH3)2)、3-甲基-3-戊基(-C(CH3)(CH2CH3)2)、2-甲基-3-戊基(-CH(CH2CH3)CH(CH3)2)、2，3-二甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH(CH3)2)、3，3-二甲基-2-丁基(-CH(CH3)C(CH3)3、1-庚基、1-辛基等。
本文使用的術(shù)語“亞烷基”是指1至12個(gè)碳原子的直鏈或支鏈飽和二價(jià)烴基，其中亞烷基可以任選被一個(gè)或多個(gè)本文所述的取代基獨(dú)立地取代。實(shí)例包括，但不限于，亞甲基、亞乙基、亞丙基、2-甲基亞丙基、亞戊基等。
本文使用的術(shù)語“烯基”是指2至12個(gè)碳原子、且具有至少一個(gè)不飽和位置(即碳-碳sp2雙鍵)的直鏈或支鏈一價(jià)烴基，其中烯基可以任選被一個(gè)或多個(gè)本文所述的取代基獨(dú)立地取代，并且包括具有“順式”和“反式”取向或“E”和“Z”取向的基團(tuán)。實(shí)例包括，但不限于，乙烯基(ethylenyl)或乙烯基(vinyl)(-CH＝CH2)、烯丙基(-CH2CH＝CH2)、1-丙烯基、1-丁烯-1-基、1-丁烯-2-基等。
本文使用的術(shù)語“炔基”是指2至12個(gè)碳原子、且具有至少一個(gè)不飽和位置(即碳-碳sp叁鍵)的直鏈或支鏈一價(jià)烴基，其中炔基可以任選被一個(gè)或多個(gè)本文所述的取代基獨(dú)立地取代。實(shí)例包括，但不限于，乙炔基(-C≡CH)和丙炔基(炔丙基，-CH2C≡CH)。
本文使用的術(shù)語“環(huán)烷基”、“碳環(huán)(carbocycle)”、“碳環(huán)基(carbocyclyl)”和“碳環(huán)(carbocyclic ring)”可交換使用，并且指的是具有3至12個(gè)碳原子的飽和或部分不飽和的環(huán)狀烴基。術(shù)語“環(huán)烷基”包括單環(huán)和多環(huán)(例如，雙環(huán)和三環(huán))的環(huán)烷基結(jié)構(gòu)，其中多環(huán)結(jié)構(gòu)任選包含與飽和、部分不飽和或芳香環(huán)烷基或雜環(huán)稠合的飽和或部分不飽和的環(huán)烷基環(huán)。環(huán)烷基的實(shí)例包括，但不限于，環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基等。雙環(huán)碳環(huán)包括具有7至12個(gè)環(huán)原子的那些，例如，雙環(huán)[4，5]，[5，5]，[5，6]或[6，6]體系，或橋聯(lián)體系，例如雙環(huán)[2.2.1]庚烷，雙環(huán)[2.2.2]辛烷和雙環(huán)[3.2.2]壬烷。環(huán)烷基可以任選被一個(gè)或多個(gè)本文描述的取代基獨(dú)立地取代。
本文使用的“芳基”是指6-20個(gè)碳原子的一價(jià)芳香烴基，其通過從母體芳香環(huán)體系的單一碳原子上除去一個(gè)氫原子而得到。芳基包括包含與飽和、部分不飽和的環(huán)，或芳香碳環(huán)或雜環(huán)稠合的芳環(huán)的雙環(huán)基團(tuán)。示例性的芳基包括，但不限于，衍生自下列的基團(tuán)苯、萘、蒽、聯(lián)苯、茚、茚滿、1，2-二氫萘、1，2，3，4-四氫萘等。芳基可以任選被一個(gè)或多個(gè)本文描述的取代基獨(dú)立地取代。
本文使用的術(shù)語“雜環(huán)”、“雜環(huán)基”和“雜環(huán)狀環(huán)”可交換地使用，并且指的是3至8個(gè)環(huán)原子的飽和或部分不飽和的碳環(huán)基團(tuán)，且其中至少一個(gè)環(huán)原子是獨(dú)立地選自氮、氧和硫的雜原子，剩余的環(huán)原子是C，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)原子可以任選被一個(gè)或多個(gè)如下所述取代基獨(dú)立地取代。該基團(tuán)可以是碳原子基團(tuán)或雜原子基團(tuán)。術(shù)語“雜環(huán)”包括雜環(huán)烷氧基(heterocycloalkoxy)?！半s環(huán)基”還包括其中雜環(huán)基團(tuán)與飽和、部分不飽和或芳香碳環(huán)或雜環(huán)稠合的基團(tuán)。雜環(huán)的實(shí)例包括，但不限于，吡咯烷基、四氫呋喃基、二氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫吡喃基、二氫吡喃基、四氫噻喃基、哌啶子基、嗎啉代、硫嗎啉代(thiomorpholino)、噻噁烷基、哌嗪基、高哌嗪基、氮雜環(huán)丁烷基、氧雜環(huán)丁烷基、硫雜環(huán)丁烷基、高哌啶基、氧雜環(huán)庚烷基、硫雜環(huán)庚烷基、氧雜氮雜

基、二氮雜

基、硫雜氮雜

基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、二氫吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二噁烷基、1，3-二氧雜環(huán)戊烷基、吡唑啉基、二硫雜環(huán)己烷基(dithianyl)、二硫雜環(huán)戊烷基(dithiolanyl)、二氫吡喃基、二氫噻吩基、二氫呋喃基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮雜雙環(huán)[3.1.0]己基、3-氮雜雙環(huán)[4.1.0]庚基、氮雜雙環(huán)[2.2.2]己基、3H-吲哚基、喹嗪基和N-吡啶基脲。螺部分也包括在該定義范圍內(nèi)。如果可以的話，雜環(huán)可以進(jìn)行C連接或N-連接。例如，衍生自吡咯的基團(tuán)可以是吡咯-1-基(N-連接)或吡咯-3-基(C-連接)。此外，衍生自咪唑的基團(tuán)可以是咪唑-1-基(N-連接)或咪唑-3-基(C-連接)。其中2個(gè)環(huán)碳原子被氧代(＝O)部分取代的雜環(huán)基團(tuán)的實(shí)例是異二氫吲哚-1，3-二酮基和1，1-二氧代-硫嗎啉基。本文的雜環(huán)基團(tuán)可以任選被一個(gè)或多個(gè)本文描述的取代基獨(dú)立地取代。
本文使用的術(shù)語“雜芳基”是指包含至少一個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧和硫雜原子的5-、6-或7-元環(huán)的一價(jià)芳基，并且包括5-10個(gè)原子的稠環(huán)體系(其中至少一個(gè)是芳香性的)。雜芳基的實(shí)例包括，但不限于，吡啶基、咪唑基、咪唑并吡啶基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、異噁唑基、噻唑基、噁唑基、異噻唑基、吡咯基、喹啉基、異喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、噌啉基、吲唑基、吲嗪基(indolizinyl)、酞嗪基(phthalazinyl)、噠嗪基、三嗪基、異吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噻二唑基、呋咱基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基和呋喃并吡啶基。螺環(huán)部分也包括在該定義范圍內(nèi)。雜芳基可以任選被一個(gè)或多個(gè)本文描述的取代基獨(dú)立地取代。
例如(非限制性)，碳連接的雜環(huán)和雜芳基是在吡啶的2、3、4、5或6位、噠嗪的3、4、5或6位、嘧啶的2、4、5或6位、吡嗪的2、3、5或6位、呋喃、四氫呋喃、噻吩(thiofuran)、硫茂(thiophene)、吡咯或四氫吡咯的2、3、4或5位、噁唑、咪唑或噻唑的2、4或5位、異噁唑、吡唑或異噻唑的3、4或5位、氮雜環(huán)丙烷的2或3位、氮雜環(huán)丁烷的2、3或4位、喹啉的2、3、4、5、6、7或8位，或異喹啉的1、3、4、5、6、7或8位連接。碳連接的雜環(huán)的其它實(shí)例包括2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、5-吡啶基、6-吡啶基、3-噠嗪基、4-噠嗪基、5-噠嗪基、6-噠嗪基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、6-嘧啶基、2-吡嗪基、3-吡嗪基、5-吡嗪基、6-吡嗪基、2-噻唑基、4-噻唑基或5-噻唑基。
例如(非限制性)，氮連接的雜環(huán)和雜芳基是在氮雜環(huán)丙烷、氮雜環(huán)丁烷、吡咯、吡咯烷、2-吡咯啉、3-吡咯啉、咪唑、咪唑烷、2-咪唑啉、3-咪唑啉、吡唑、二氫吡唑、2-二氫吡唑、3-二氫吡唑、哌啶、哌嗪、吲哚、二氫吲哚、1H-吲唑的1位、異吲哚或異二氫吲哚的2位、嗎啉的4位和咔唑或β-咔啉的9位連接。更加典型地，氮連接的雜環(huán)包括1-氮雜環(huán)丙烷基、1-氮雜環(huán)丁烷基、1-吡咯基、1-咪唑基、1-吡唑基和1-哌啶基。
本文使用的術(shù)語“鹵素”是指氟、氯、溴或碘。
本文使用的術(shù)語“a”是指一個(gè)或多個(gè)。
本文使用的術(shù)語“該發(fā)明的化合物”、“本發(fā)明的化合物”和“式I或Ia的化合物”包括式I或Ia的化合物及其拆分的對(duì)映異構(gòu)體、拆分的非對(duì)映異構(gòu)體、外消旋混合物和鹽(包括可藥用鹽)。
通常，式I或Ia化合物的各個(gè)部分或官能團(tuán)可以任選被一個(gè)或多個(gè)取代基取代。適于本發(fā)明目的的取代基的實(shí)例包括，但不限于，鹵素、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、OR、NO2、CN、CO2R、(C＝O)R、O(C＝O)R、SR、SOR、SO2R、芳基、雜芳基、(C＝O)NR2R3、NR2R3、NR(C＝O)R、SO2NR2R3、PO3H2和SO3H2，其中R、R2和R3是烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基。
應(yīng)當(dāng)理解，在順序使用兩個(gè)或多個(gè)基團(tuán)來定義連接結(jié)構(gòu)的取代基的情況下，認(rèn)為第一個(gè)命名的基團(tuán)是端部基團(tuán)，認(rèn)為最后命名的基團(tuán)與所述結(jié)構(gòu)相連接。由此，例如，芳烷基基團(tuán)通過烷基與所述結(jié)構(gòu)相連接。
AKT抑制劑 本發(fā)明的式I或Ia化合物可用于抑制AKT蛋白激酶。除了AKT之外，式I或Ia的化合物還可以用作酪氨酸激酶以及絲氨酸和蘇氨酸激酶的抑制劑。這種化合物用作疾病治療劑，所述疾病可以通過抑制AKT蛋白激酶信號(hào)傳導(dǎo)途徑以及酪氨酸和絲氨酸/蘇氨酸激酶受體途徑來得到治療。
通常，本發(fā)明包括式I的化合物及其對(duì)映異構(gòu)體和可藥用鹽
其中 X是S、SO或SO2； R1是H、Me、Et、CF3、CHF2或CH2F； R2是H或Me； R5是H、Me、Et或CF3； A是
G是任選被1至4個(gè)R9基團(tuán)獨(dú)立地取代的苯基； R6和R7獨(dú)立地是H、(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2)、(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2CH2)、V-(CH2)0-1(其中V是5-6元雜芳基)、W-(CH2)1-2(其中W是任選被F、Cl、Br、I、OMe、CF3或Me取代的苯基)，C3-C6-環(huán)烷基、羥基-(C3-C6-環(huán)烷基)、氟-(C3-C6-環(huán)烷基)、CH(CH3)CH(OH)苯基、4-6元雜環(huán)基，其任選被F、OH、環(huán)丙基甲基、C1-C3烷基或C(＝O)(C1-C3烷基)取代，或C1-C6-烷基，其任選被一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)所取代，該基團(tuán)獨(dú)立地選自O(shè)H、O(C1-C6-烷基)、CN、F、NH2、NH(C1-C6-烷基)、N(C1-C6-烷基)2、四氫吡喃基、四氫呋喃基、嗎啉基、氧雜環(huán)丁烷基、哌啶基和吡咯烷基， 或R6和R7與它們相連接的氮一起形成3-6元雜環(huán)，其任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、鹵素、氧代基團(tuán)、CF3、CH2CF3和(C1-C3)烷基的基團(tuán)所取代； Ra和Rb是H， 或Ra是H，且Rb和R6與它們相連的原子一起形成具有1個(gè)或2個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)； Rc和Rd是H或Me， 或Rc和Rd與它們相連的原子一起形成環(huán)丙基環(huán)； R8是H，Me或OH， 或R8和R6與它們相連的原子一起形成具有1個(gè)或2個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)； 每個(gè)R9獨(dú)立地是鹵素、C1-C6-烷基、C3-C6-環(huán)烷基、O-(C1-C6-烷基)、CF3、OCF3、S(C1-C6-烷基)、CN、OCH2-苯基、NH2、NH-(C1-C6-烷基)、N-(C1-C6-烷基)2、哌啶、吡咯烷、CH2F、CHF2、OCH2F、OCHF2、OH、SO2(C1-C6-烷基)、C(O)NH2、C(O)NH(C1-C6-烷基)和C(O)N(C1-C6-烷基)2；和 m、n和p獨(dú)立地是0或1。
在其它實(shí)施方案中，本發(fā)明包括式Ia的化合物及其對(duì)映異構(gòu)體和鹽
其中 R1是H、Me、Et、CF3、CHF2或CH2F； R2是H或Me； R5是H、Me、Et或CF3； A是
G是任選被1至4個(gè)R9基團(tuán)獨(dú)立地取代的苯基； R6和R7獨(dú)立地是H、(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2)、(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2CH2)、V-(CH2)0-1(其中V是5-6元雜芳基)、W-(CH2)1-2(其中W是任選被F、Cl或Me取代的苯基)、C3-C6-環(huán)烷基、羥基-(C3-C6-環(huán)烷基)、氟-(C3-C6-環(huán)烷基)、CH(CH3)CH(OH)苯基，或C1-C6-烷基，其任選被一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)所取代，該基團(tuán)獨(dú)立地選自O(shè)H、O(C1-C6-烷基)、CN、F、NH2、NH(C1-C6-烷基)、N(C1-C6-烷基)2、哌啶基和吡咯烷基， 或R6和R7與它們相連接的氮一起形成3-6元雜環(huán)，其任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、鹵素、氧代基團(tuán)、CF3、CH2CF3和(C1-C3)烷基的基團(tuán)所取代； Ra和Rb是H， 或Ra是H，且Rb和R6與它們相連的原子一起形成具有1個(gè)或2個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)； Rc和Rd是H或Me， 或Rc和Rd與它們相連的原子一起形成環(huán)丙基環(huán)； R8是H，Me或OH， 或R8和R6與它們相連的原子一起形成具有1個(gè)或2個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)； 每個(gè)R9獨(dú)立地是鹵素、C1-C6-烷基、C3-C6-環(huán)烷基、O-(C1-C6-烷基)、CF3、OCF3、S(C1-C6-烷基)、CN、OCH2-苯基、NH2、NH-(C1-C6-烷基)、N-(C1-C6-烷基)2、哌啶、吡咯烷、CH2F、CHF2、OCH2F、OCHF2、OH、SO2(C1-C6-烷基)、C(O)NH2、C(O)NH(C1-C6-烷基)和C(O)N(C1-C6-烷基)2；和 m、n和p獨(dú)立地是0或1。
在其它實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是H、(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2)、(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2CH2)、V-(CH2)0-1(其中V是5-6元雜芳基)、W-(CH2)1-2(其中W是任選被F、Cl或Me取代的苯基)、C3-C6-環(huán)烷基、羥基-(C3-C6-環(huán)烷基)、氟-(C3-C6-環(huán)烷基)、CH(CH3)CH(OH)苯基，或C1-C6-烷基，其任選被一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)所取代，該基團(tuán)獨(dú)立地選自O(shè)H、O(C1-C6-烷基)、CN、F、NH2、NH(C1-C6-烷基)、N(C1-C6-烷基)2、哌啶基和吡咯烷基， 或R6和R7與它們相連接的氮一起形成4-6元雜環(huán)，該雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、鹵素、氧代基團(tuán)、CF3、CH2CF3和(C1-C3)烷基的基團(tuán)所取代。
關(guān)于式I或Ia的G基團(tuán)，實(shí)例包括任選被一個(gè)或多個(gè)R9基團(tuán)所取代的苯基，R9基團(tuán)獨(dú)立地選自F、Cl、Br、CN、甲基、乙基、異丙基、OCH3、OCH2CH3、CF3、OCF3、SCH3、OCH2Ph和環(huán)丙基。示例性的實(shí)施方案包括，但不限于，苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、2-氟苯基、3-氟苯基、4-氟苯基、2-溴苯基、3-溴苯基、4-溴苯基、2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、2-乙基苯基、3-乙基苯基、4-乙基苯基、2-異丙基苯基、3-異丙基苯基、4-異丙基苯基、2-三氟甲基苯基、3-三氟甲基苯基、4-三氟甲基苯基、2-氰基苯基、3-氰基苯基、4-氰基苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2-乙氧基苯基、3-乙氧基苯基、4-乙氧基苯基、2-甲硫基苯基(2-thiomethylphenyl)、3-甲硫基苯基、4-甲硫基苯基、2-三氟甲氧基苯基、3-三氟甲氧基苯基、4-三氟甲氧基苯基、2-環(huán)丙基苯基、3-環(huán)丙基苯基、4-環(huán)丙基苯基、4-氯-3-氟苯基、3，4-二氟苯基、4-溴-3-氟苯基、3-氟-4-甲基苯基、3-氟-4-甲氧基苯基、3-氟-4-三氟甲基苯基、4-氰基-3-氟苯基、3，4-二氯苯基、2，4-二氯苯基、2，4-二氟苯基、2-氯-4-氟苯基、2-氟-4-氯苯基、3，5-二氯苯基、3，5-二氟苯基、3-氯-5-氟苯基、3-氯-4-氟苯基、3-溴-4-氟苯基、3，5-二氟-4-氯苯基、2，3-二氟-4-氯苯基、2，5-二氟-4-氯苯基、3，5-二氟-4-溴苯基、2，3-二氟-4-溴苯基、2，5-二氟-4-溴苯基和4-(OCH2Ph)-苯基。
關(guān)于式I或Ia的R6和R7基團(tuán)，術(shù)語“(C3-C6-環(huán)烷基)-(CH2)”包括環(huán)丙基-CH2、環(huán)丁基-CH2、環(huán)戊基-CH2和環(huán)己基-CH2。
關(guān)于式I或Ia的R6和R7基團(tuán)，術(shù)語“V-(CH2)0-1”包括但不限于下列結(jié)構(gòu)
關(guān)于式I或Ia的R6和R7基團(tuán)，術(shù)語“羥基-(C3-C6-環(huán)烷基)”包括但不限于下列結(jié)構(gòu)
關(guān)于式I或Ia的R6和R7基團(tuán)，短語“R6和R7與它們相連接的氮一起形成任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、鹵素、氧代基團(tuán)、CF3、CH2CF3和(C1-C3)烷基的基團(tuán)所取代的3-6元雜環(huán)”包括但不限于下列結(jié)構(gòu)

關(guān)于式I或Ia的R6和R7基團(tuán)，短語“任選被F、OH、環(huán)丙基甲基、C1-C3烷基或C(＝O)(C1-C3烷基)取代的4-6元雜環(huán)”包括但不限于下列結(jié)構(gòu)
關(guān)于式I或Ia的R6和R7基團(tuán)，短語“任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、OMe和CN的基團(tuán)所取代的C1-C6-烷基”包括但不限于CH2OH、CH2CH2OH、CH2CH2CH2OH、CH2CH(OH)CH2、CH2CH2CH(OH)CH3、CH2C(OH)(CH3)2、CH2OMe、CH2CH2OMe、CH2CH2CH2OMe、CH2CH(OMe)CH2、CH2CH2CH(OMe)CH3、CH2C(OMe)(CH3)2、CH2CN、CH2CH2CN、CH2CH2CH2CN、CH2CH(CN)CH2、CH2CH2CH(CN)CH3、CH2C(CN)(CH3)2等。
關(guān)于式I或Ia的R6和R7基團(tuán)，在某些實(shí)施方案中，術(shù)語“雜芳基”是指具有一個(gè)至兩個(gè)獨(dú)立地選自N、O和S雜原子的5-6元雜芳基。
在式I的某些實(shí)施方案中，X是S。在具體實(shí)施方案中，式I是式Ia
在式I的某些實(shí)施方案中，X是SO。在具體實(shí)施方案中，式I具有下列結(jié)構(gòu)
在式I的某些實(shí)施方案中，X是SO2。在具體實(shí)施方案中，式I具有下列結(jié)構(gòu)
在式I或Ia的一個(gè)實(shí)施方案中，R1是甲基，其中R1任選是(R)或(S)構(gòu)型。在式I的另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是H。
在式I或Ia的另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是乙基，其中R1任選是(R)或(S)構(gòu)型。
在式I或Ia的某些實(shí)施方案中，R2是H。
在式I或Ia的一個(gè)實(shí)施方案中，R2是H。
在式I或Ia的一個(gè)實(shí)施方案中，R5是H或甲基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R5是甲基，其中R5任選是(S)構(gòu)型。
在式I或Ia的一個(gè)實(shí)施方案中，G是任選被1至3個(gè)R9基團(tuán)所取代的苯基，R9基團(tuán)獨(dú)立地選自F、Cl、Br、CN、甲基、乙基、異丙基、CF3、OCF3、SMe、OMe和CH2OPh。實(shí)例包括但不限于苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、4-氟苯基、4-溴苯基、4-甲基苯基、4-乙基苯基、4-異丙基苯基、4-三氟甲基苯基、4-氰基苯基、4-甲氧基苯基、4-乙氧基苯基、4-甲硫基苯基、4-三氟甲氧基苯基、4-環(huán)丙基苯基、4-氯-3-氟苯基、3，4-二氟苯基、4-溴-3-氟苯基、3-氟-4-甲基苯基、3-氟-4-甲氧基苯基、3-氟-4-三氟甲基苯基、4-氰基-3-氟苯基、3，4-二氯苯基、2，4-二氯苯基、2，4-二氟苯基、2-氯-4-氟苯基、2-氟-4-氯苯基、3，5-二氯苯基、3，5-二氟苯基、3-氯-5-氟苯基、3-氯-4-氟苯基、3-溴-4-氟苯基、3，5-二氟-4-氯苯基、2，3-二氟-4-氯苯基、2，5-二氟-4-氯苯基、3，5-二氟-4-溴苯基、2，3-二氟-4-溴苯基、2，5-二氟-4-溴苯基和4-(CH2OPh)-苯基。
在具體實(shí)施方案中，G是4-氯苯基、2，4-二氯苯基、4-氯-3-氟苯基、4-氟苯基、3，4-二氟苯基、4-甲基苯基、4-甲氧基苯基或4-(CH2OPh)-苯基。
在某些實(shí)施方案中，G是9元雜芳基。在具體實(shí)施方案中，G是吲哚。
在具體實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是H。
在具體實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2)。
在具體實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2CH2)。
在具體實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是V-(CH2)0-1，其中V是5-6元雜芳基。
在具體實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是W-(CH2)1-2，其中W是任選被選自下列基團(tuán)取代的苯基F、Cl、Br、I、OMe、CF3或Me。在其它實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是W-(CH2)1-2，其中W是任選被F、Cl或Me取代的苯基。
在具體實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是C3-C6-環(huán)烷基。
在具體實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是羥基-(C3-C6-環(huán)烷基)。
在具體實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是氟-(C3-C6-環(huán)烷基)。
在具體實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是CH(CH3)CH(OH)苯基。
在具體實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是任選被F、OH、環(huán)丙基甲基、C1-C3烷基或C(＝O)(C1-C3烷基)取代的4-6元雜環(huán)。
在具體實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是C1-C6-烷基，其任選被一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)所取代，該基團(tuán)獨(dú)立地選自O(shè)H、O(C1-C6-烷基)、CN、F、NH2、NH(C1-C6-烷基)、N(C1-C6-烷基)2、四氫吡喃基、四氫呋喃基、嗎啉基、氧雜環(huán)丁烷基、哌啶基和吡咯烷基。在其它實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是C1-C6-烷基，其任選被一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)所取代，該基團(tuán)獨(dú)立地選自O(shè)H、O(C1-C6-烷基)、CN、F、NH2、NH(C1-C6-烷基)、N(C1-C6-烷基)2、哌啶基和吡咯烷基。
在具體實(shí)施方案中，R6和R7與它們相連接的氮一起形成3-6元雜環(huán)，其任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、鹵素、氧代基團(tuán)、CF3、CH2CF3和(C1-C3)烷基的基團(tuán)所取代。
在式I或Ia的一個(gè)實(shí)施方案中，m是1，n是0，p是0，從而A由式1表示
式1 其中G、R6、R7、R8、Rc和Rd如本文所定義。在某些實(shí)施方案中，A具有下列構(gòu)型
在基團(tuán)A的某些實(shí)施方案中，R8是H或OH。
在具有式1的A基團(tuán)的某些實(shí)施方案中，Rc和Rd是H。在其它實(shí)施方案中，Rc和Rd與它們相連的原子一起形成環(huán)丙基環(huán)。
在具有式1的A基團(tuán)的某些實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是H、C3-C6-環(huán)烷基、雜芳基-(CH2)、羥基-(C3-C6-環(huán)烷基)，或(C1-6)-烷基，其任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、OMe和CN的基團(tuán)所取代。在具體實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是H、甲基、乙基、異丙基、異丁基、叔丁基、3-戊基、CH(異丙基)2、CH2CH2OH、CH2CH2CH2OH、CH(CH2CH2OH)2、CH2CH2OMe、CH(CH2CH2OMe)2、CH2CH2CH2OMe、CH2CN、CH2-環(huán)丙基、CH2-環(huán)丁基、CH2-tBu、環(huán)戊基、環(huán)己基、CH2-苯基、CH2-(吡啶-2-基)、CH2-(吡啶-3-基)、CH2-(吡啶-4-基)、4-羥基環(huán)己-1-基或CH(CH3)CH(OH)苯基。
在具有式1的A基團(tuán)的具體實(shí)施方案中，選擇R6和R7，以使NR6R7是NH2、NHMe、NHEt、NHPr、NHiPr、NHtBu、NH(CH2-tBu)、NH(CH2-環(huán)丙基)、NH(CH2-環(huán)丁基)、NH(環(huán)戊基)、NH(CH2-吡啶基)、NH(環(huán)己基)、NH(3-戊基)、NHCH(異丙基)2、NH(CH2CH2OH)、NH(CH2CH2CH2OH)、NH(CH2CH2OMe)、NH(CH2CH2CH2OMe)、NH(CH2CN)、NMe2、NMeEt、NMePr、NMe(iPr)、NMe(CH2-環(huán)丙基)、NMe(CH2-環(huán)丁基)、NMe(CH2CH2OH)、NMe(CH2CH2CH2OH)、NMe(CH2CH2OMe)、NMe(CH2CH2CH2OMe)、NEt2、NEtPr、NEt(iPr)、NEt(CH2-環(huán)丙基)、NEt(CH2-環(huán)丁基)、NEt(CH2CH2OH)、NEt(CH2CH2CH2OH)、
在具有式1的A基團(tuán)的其它實(shí)施方案中，R6和R7與它們相連接的N一起形成4-6元雜環(huán)，該雜環(huán)具有環(huán)氮原子并且任選具有選自N和O的第二環(huán)雜原子，其中所述雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、鹵素、氧代基團(tuán)、CH2CF3和(C1-C3)烷基的基團(tuán)所取代。例如，在某些實(shí)施方案中，R6和R7與它們相連接的N一起形成吡咯烷基、哌啶基、氮雜環(huán)丁烷基、嗎啉基或哌嗪基環(huán)，其中所述吡咯烷基、哌啶基、氮雜環(huán)丁烷基、嗎啉基和哌嗪基環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、F、甲基、CH2CF3和氧代基團(tuán)的基團(tuán)所取代。在具有式1的A基團(tuán)的具體實(shí)施方案中，NR6R7選自下列結(jié)構(gòu)
在具有式1的A基團(tuán)的另外實(shí)施方案中，R6和R7形成具有環(huán)氮原子的3元雜環(huán)，其中所述雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、鹵素、氧代基團(tuán)、CH2CF3和(C1-C3)烷基的基團(tuán)所取代。在具有式1的A基團(tuán)的具體實(shí)施方案中，NR6R7選自下列結(jié)構(gòu)
在具有式1的A基團(tuán)的某些實(shí)施方案中，R6和R8與它們相連的原子一起形成具有1個(gè)或2個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)。在其它實(shí)施方案中，R6和R8與它們相連的原子一起形成吡咯烷基或哌啶基環(huán)。
在具體實(shí)施方案中，具有式1的A基團(tuán)選自下列通式

在另外的實(shí)施方案中，具有式1的A基團(tuán)選自下列通式
在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物由式1B代表
式1B 其中G、R6和R7如本文所定義。
在式I或Ia的另外的實(shí)施方案中，m是1，n是1，p是0，從而A由式2表示
式2 其中G、R6、R7、R8、Rc和Rd如本文所定義。在某些實(shí)施方案中，A基團(tuán)具有下列構(gòu)型
在具有式2的基團(tuán)A的某些實(shí)施方案中，R8是H。
在具有式2的基團(tuán)A的某些實(shí)施方案中，Rc和Rd是H。在其它實(shí)施方案中，Rc和Rd是甲基。在其它實(shí)施方案中，Rc和Rd與它們相連的原子一起形成環(huán)丙基環(huán)。
在具有式2的基團(tuán)A的某些實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是H、甲基、乙基、丙基、異丙基、CH2-環(huán)丙基或CH2-環(huán)丁基。在某些實(shí)施方案中，式2的NR6R7是NH2、NHCH3、NHEt、NHPr、NH(iPr)、NH(CH2-環(huán)丙基)、NH(CH2-環(huán)丁基)、NMe2、NMeEt、NMePr、NMe(iPr)、NEt2、NEtPr或NEt(iPr)。
在具有式2的基團(tuán)A的某些實(shí)施方案中，R6和R7與N一起形成具有環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)，并且任選地具有其它的環(huán)氮原子。例如，在某些實(shí)施方案中，R6和R7與N一起形成選自下列結(jié)構(gòu)的雜環(huán)
在其它實(shí)施方案中，R6和R8與它們相連的原子一起形成哌啶基或吡咯烷基環(huán)。
式2的基團(tuán)A的示例性實(shí)施方案包括下列結(jié)構(gòu)

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物由式2B代表
式2B 其中G、Rc、Rd、R6和R7如本文所定義。
在式I或Ia的其它實(shí)施方案中，m是1，n是0，且p是1，從而基團(tuán)A由式3表示
式3 其中G、R6、R7、R8、Ra、Rb、Rc和Rd如本文所定義。在某些實(shí)施方案中，基團(tuán)A具有下列構(gòu)型
在具有式3的基團(tuán)A的某些實(shí)施方案中，R8是H。
在具有式3的基團(tuán)A的某些實(shí)施方案中，Rc和Rd是H。在其它實(shí)施方案中，Rc和Rd與它們相連的原子一起形成環(huán)丙基環(huán)。
在具有式3的基團(tuán)A的某些實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是H、甲基、乙基、丙基、異丙基、叔丁基、CH2-環(huán)丙基或CH2-環(huán)丁基。
在某些實(shí)施方案中，式3的NR6R7是NH2、NHMe、NHEt、NHPr、NH(iPr)、NHtBu、NH(CH2-環(huán)丙基)或NH(CH2-環(huán)丁基)。
在具有式3的基團(tuán)A的其它實(shí)施方案中，Ra和R8是H，Rb和R6與它們相連的原子一起形成5-6元雜環(huán)，其中環(huán)原子之一是氮。在某些實(shí)施方案中，Rb和R6與它們相連的原子一起形成吡咯烷基環(huán)。在某些實(shí)施方案中，R7是H。
在具體實(shí)施方案中，式3的基團(tuán)A選自下列結(jié)構(gòu)
在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物由式3B代表
式3B 其中G、R6和R7如本文所定義。
在式I或Ia的其它實(shí)施方案中，m是0，n是0，且p是1，從而A由式4表示
式4 其中G、R6、R7和R8如本文所定義。在某些實(shí)施方案中，A具有下列構(gòu)型
在具有式4的基團(tuán)A的某些實(shí)施方案中，R8是H。
在具有式4的基團(tuán)A的某些實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是H或Me。在具體實(shí)施方案中，NR6R7是NH2或NHMe。
在具體實(shí)施方案中，A選自下列結(jié)構(gòu)
在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物由式4B代表
式4B 其中G和R5如本文所定義。
本發(fā)明的化合物可以具有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱中心；因此，這種化合物可以以其單一的(R)-或(S)-立體異構(gòu)體或混合物的形式制備。除非另外指明，否則說明書和權(quán)利要求書中的具體化合物的描述或命名包括單一的對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體，和其混合物，外消旋體。因此，本發(fā)明還包括所有的這種異構(gòu)體，包括本發(fā)明化合物的非對(duì)映異構(gòu)體的混合物，純的非對(duì)映異構(gòu)體和純的對(duì)映異構(gòu)體。術(shù)語“對(duì)映異構(gòu)體”是指不能彼此重疊的鏡像化合物的兩個(gè)立體異構(gòu)體。術(shù)語“非對(duì)映異構(gòu)體”是指彼此不是鏡象的一對(duì)旋光異構(gòu)體。非對(duì)映異構(gòu)體具有不同的物理性能，例如熔點(diǎn)、沸點(diǎn)、光譜性能和反應(yīng)性。
本發(fā)明的化合物還可以存在不同的互變異構(gòu)形式，所有的這些形式包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。術(shù)語“互變異構(gòu)體”或“互變異構(gòu)形式”是指可通過低能壘互相轉(zhuǎn)換的具有不同能量的結(jié)構(gòu)異構(gòu)體。例如，質(zhì)子互變異構(gòu)體(亦稱質(zhì)子遷移互變異構(gòu)體(prototripic tautomer))包括通過質(zhì)子的遷移而進(jìn)行的相互轉(zhuǎn)化，例如酮-烯醇和亞胺-烯胺異構(gòu)化。價(jià)鍵互變異構(gòu)體包括通過一些成鍵電子的重構(gòu)而進(jìn)行的相互轉(zhuǎn)化。
在本文顯示的結(jié)構(gòu)中，如果任何具體手性原子的立體化學(xué)沒有具體指出，那么包括所有的立體異構(gòu)體，并且被本發(fā)明的化合物所包括。如果立體化學(xué)用表示具體構(gòu)型的實(shí)體楔形或虛線來說明，那么該立體異構(gòu)體就為如此特定和定義的。
式I或Ia的化合物包括此類化合物的溶劑合物、可藥用前藥和鹽(包括可藥用鹽)。
短語“可藥用”表示物質(zhì)或組合物與構(gòu)成制劑的其它組分和/或用其治療的哺乳動(dòng)物在化學(xué)上和/或毒理學(xué)上是相容的。
“溶劑合物”是指一種或多種溶劑分子與本發(fā)明化合物的締合或復(fù)合物。形成溶劑合物的溶劑的實(shí)例包括，但不限于，水、異丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。術(shù)語“水合物”還可以指其中溶劑分子是水的復(fù)合物。
“前藥”是可以在生理?xiàng)l件下轉(zhuǎn)換為或通過溶劑分解為具體化合物或此類化合物的鹽的化合物。前藥包括其中氨基酸殘基或兩個(gè)或多個(gè)(例如2、3或4個(gè))氨基酸殘基的多肽鏈通過酰胺鍵或酯鍵與本發(fā)明化合物的游離氨基、羥基或羧基共價(jià)結(jié)合的化合物。該氨基酸殘基包括但不限于通常以三字母符號(hào)表示的20種天然存在的氨基酸，也包括磷酸絲氨酸(phosphoserine)，磷酸蘇氨酸，磷酸酪氨酸，4-羥基脯氨酸，羥基賴氨酸，demosine，isodemosine，γ-羧基谷氨酸，苯甲酰甘氨酸，八氫吲哚-2-羧酸，抑胃酶氨酸，1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸，3-巰基纈氨酸，鳥氨酸，3-甲基組氨酸，正纈氨酸，β-丙氨酸，γ-氨基丁酸，cirtulline，高半胱氨酸，高絲氨酸，甲基-丙氨酸，對(duì)苯甲?；奖彼?，苯基甘氨酸，炔丙基甘氨酸，肌氨酸，甲硫氨酸砜和叔丁基甘氨酸。
還包括其它類型的前藥。例如，式I或Ia化合物的游離羧基可以衍生為酰胺或烷基酯。作為另一個(gè)實(shí)例，通過將羥基轉(zhuǎn)化為基團(tuán)例如但不限于磷酸酯、半琥珀酸酯、二甲基氨基乙酸酯或磷酰氧基甲氧基羰基，包含游離羥基的本發(fā)明化合物可以衍生化為前藥，如Advanced Drug DeliveryReviews，1996，19，115中所列出的。羥基和氨基的氨基甲酸酯前藥還以羥基的碳酸酯前藥、磺酸酯和硫酸酯形式被包括在內(nèi)。還包括羥基衍生為(酰氧基)甲基和(酰氧基)乙醚，其中?；梢允侨芜x被(包括但不限于)醚、胺和羧酸官能團(tuán)取代的烷基酯，或其中?；侨缟纤龅陌被狨ァ＿@種類型的前藥描述在J.Med.Chem.，1996，39，10中。更具體的實(shí)例包括醇基團(tuán)的氫原子被基團(tuán)例如(C1-C6)烷?；趸谆?-((C1-C6)烷?；趸?乙基、1-甲基-1-((C1-C6)烷酰基氧基)乙基、(C1-C6)烷氧羰基氧基甲基、N-(C1-C6)烷氧羰基氨基-甲基、琥珀?；?、(C1-C6)烷?；ⅵ?氨基(C1-C4)烷?；⒎蓟；挺?氨基酰基或α-氨基?；?α-氨基酰基取代，其中每個(gè)α-氨基?；?dú)立地選自天然存在的L-氨基酸、P(O)(OH)2、-P(O)(O(C1-C6)烷基)2或糖基(由除去半縮醛式碳水化合物的羥基所產(chǎn)生的基團(tuán))。
式I或Ia化合物的游離胺還可以衍生化為酰胺、磺酰胺或磷酰胺。所有這些部分可以結(jié)合基團(tuán)(包括但不限于)醚、胺和羧酸官能團(tuán)。例如，前藥可以如下形成用基團(tuán)例如R-羰基、RO-羰基、NRR′-羰基取代氨基中的氫原子，其中R和R′各自獨(dú)立地是(C1-C10)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基或芐基，或R-羰基是天然α-氨基?；蛱烊沪?氨基?；?天然α-氨基?；?C(OH)C(O)OY(其中Y是H、(C1-C6)烷基或芐基)、C(OY0)Y1(其中Y0是(C1-C4)烷基，且Y1是(C1-C6)烷基、羧基(C1-C6)烷基、氨基(C1-C4)烷基或單-N-或二-N，N-(C1-C6)烷基氨基烷基)，或-C(Y2)Y3(其中Y2是H或甲基，Y3是單-N-或二-N，N-(C1-C6)烷基氨基、嗎啉代、哌啶-1-基或吡咯烷-1-基)。
對(duì)于前藥衍生物的其它實(shí)例，參見例如，a)Design of Prodrugs，H.Bundgaard編，(Elsevier，1985)和Methods in Enzymology，Vol.42，p.309-396，K.Widder等人編，(Academic Press，1985)；b)A Textbook of Drug Design andDevelopment，Krogsgaard-Larsen和H.Bundgaard編，第5章″Design andApplication of Prodrugs″，H.Bundgaard p.113-191(1991)；c)H.Bundgaard，Advanced Drug Delivery Reviews，81-38(1992)；d)H.Bundgaard等人，Journal of Pharmaceutical Sciences，77285(1988)；和e)N.Kakeya等人，Chem.Pharm.Bull.，32692(1984)，將其每個(gè)具體引入作為參考。
或者，本發(fā)明的化合物可以具有充分酸性的基團(tuán)、充分堿性基團(tuán)，或者兩種官能團(tuán)，并且因此與許多無機(jī)或有機(jī)堿或酸的任一項(xiàng)進(jìn)行反應(yīng)，形成鹽。鹽的實(shí)例包括通過本發(fā)明化合物與無機(jī)或有機(jī)酸或無機(jī)堿反應(yīng)所制備的鹽，這種鹽包括但不限于硫酸鹽、焦硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸一氫鹽、磷酸二氫鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸鹽、丙酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、丙烯酸鹽、甲酸鹽、異丁酸鹽、己酸鹽、庚酸鹽、丙炔酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、丁炔-1，4-二酸鹽、己炔-1，6-二酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、甲苯磺酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、磺酸鹽、二甲苯磺酸鹽、苯乙酸鹽、苯丙酸鹽、苯基丁酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、γ-羥基丁酸鹽、乙醇酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、丙磺酸鹽、萘-1-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽和扁桃酸鹽。由于本發(fā)明的單一化合物可以包含一個(gè)以上酸性或堿性部分，所以本發(fā)明的化合物可以在單一化合物中包括單、二或三-鹽。
如果本發(fā)明化合物是堿，可以通過本領(lǐng)域可利用的任一合適的方法來制備所需的鹽，例如，用酸性化合物例如無機(jī)酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等處理游離堿，或用有機(jī)酸例如乙酸、馬來酸、琥珀酸、扁桃酸、富馬酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、羥基乙酸、水楊酸、吡喃型糖苷酸(pyranosidyl)例如葡糖醛酸或半乳糖醛酸、α羥基酸例如檸檬酸或酒石酸、氨基酸例如天冬氨酸或谷氨酸、芳香酸例如苯甲酸或肉桂酸、磺酸例如對(duì)甲苯磺酸或乙磺酸等處理游離堿。
如果本發(fā)明的化合物是酸，所需的鹽可以通過任一合適的方法制備，例如，用無機(jī)或有機(jī)堿處理游離酸。合適無機(jī)鹽的實(shí)例包括與堿和堿土金屬例如鋰、鈉、鉀、鋇和鈣形成的那些鹽。合適有機(jī)堿鹽的實(shí)例包括例如銨、二芐基銨、芐基銨、2-羥基乙基銨、雙(2-羥基乙基)銨、苯基乙基芐基胺、二芐基乙二胺等鹽。酸性部分的其它鹽可以包括例如與普魯卡因、奎寧和N-甲基葡糖胺形成的那些鹽，加上與堿性氨基酸例如甘氨酸、鳥氨酸、組氨酸、苯基甘氨酸、賴氨酸和精氨酸形成的鹽。
在某些實(shí)施方案中，除非另有陳述，鹽是“可藥用鹽”，其包括保持具體化合物的相應(yīng)游離酸或堿的生物有效性的鹽，并且不是生物學(xué)或其他不合需要的鹽。
式I或Ia的化合物還包括這種化合物的其它鹽，其不一定是可藥用鹽，并且其可以用作制備和/或純化式I或Ia化合物的中間體和/或分離式I或Ia化合物的對(duì)映異構(gòu)體的中間體。
本發(fā)明還包括同位素標(biāo)記的本發(fā)明化合物，其與本文所列舉的相同，但事實(shí)是，在性質(zhì)上，一個(gè)或多個(gè)原子被具有不同于通常認(rèn)定的原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)的原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)的原子替代。所列舉的任何具體原子或元素的所有同位素均包括在本發(fā)明化合物和其用途范圍內(nèi)。可以結(jié)合進(jìn)本發(fā)明化合物的示例性的同位素包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯和碘的同位素，例如2H、3H、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、32P、33P、35S、18F、36Cl、123I和125I。某些同位素標(biāo)記的本發(fā)明化合物(例如用3H和14C標(biāo)記的)可用于化合物和/或底物組織分布測試中。由于其易于制備和檢測，氚代(即3H)和碳-14(即14C)同位素是有用的。此外，帶有較重同位素例如氘(即2H)的取代基可以提供某些治療優(yōu)勢，這是因?yàn)槠洚a(chǎn)生更大的代謝穩(wěn)定性(例如，體內(nèi)半衰期增加或劑量要求減低)，由此在一些情況下是優(yōu)選的。正電子發(fā)射同位素例如15O、13N、11C和18F可有效用于正電子發(fā)射成像術(shù)(PET)研究，以檢測底物受體占有率。同位素標(biāo)記的本發(fā)明化合物一般可以如下制備按照與反應(yīng)路線和/或本文下面實(shí)施例中所公開方法的類似方法，用同位素標(biāo)記的試劑替代無同位素標(biāo)記的試劑。
式I或Ia化合物的代謝產(chǎn)物 還屬于本發(fā)明范圍的是本文所描述的式I或Ia化合物的體內(nèi)代謝產(chǎn)物?！按x產(chǎn)物”是通過具體化合物或其鹽的體內(nèi)代謝而產(chǎn)生的藥理學(xué)活性產(chǎn)物。此類產(chǎn)物可以通過例如給藥化合物的氧化、還原、水解、酰胺化、脫酰胺、酯化、脫酯、酶催化裂解等來產(chǎn)生。因此，本發(fā)明包括式I或Ia化合物的代謝產(chǎn)物，包括通過一定方法產(chǎn)生的化合物，該方法包括將本發(fā)明的化合物與哺乳動(dòng)物接觸足以產(chǎn)生其代謝產(chǎn)物的一段時(shí)間。
代謝產(chǎn)物如下確定例如，制備放射性同位素(例如14C或3H)標(biāo)記的本發(fā)明化合物，將其以可測劑量(例如大于大約0.5mg/kg)胃腸外給藥至動(dòng)物例如大鼠、小鼠、豚鼠、猴子或人，保持足以發(fā)生代謝的時(shí)間(典型地為大約30秒鐘至30小時(shí))，從尿、血液或其它生物樣品中分離其轉(zhuǎn)化產(chǎn)物。由于這些產(chǎn)物是標(biāo)記的，所以容易分離(利用能夠結(jié)合代謝產(chǎn)物中殘存表位的抗體來分離其它產(chǎn)物)。代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)用常規(guī)方式例如MS、LC/MS或NMR分析來確定。通常，代謝產(chǎn)物的分析是用與本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)藥物代謝研究一樣的方法來進(jìn)行的。只要沒有在體內(nèi)發(fā)現(xiàn)代謝產(chǎn)物，這些代謝產(chǎn)物就可用于針對(duì)治療劑量的本發(fā)明化合物的診斷測試。
式I或Ia化合物的合成 本發(fā)明的化合物可以利用與化學(xué)領(lǐng)域中熟知的方法(尤其是按照本文所包含的描述內(nèi)容)類似的合成路線來合成。起始原料一般得自于商品渠道，例如Aldrich Chemicala(Milwaukee，WI)，或使用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法方便地制備(例如，利用描述在下列中的方法來制備Louis F.Fieser和Mary Fieser，Reagents for Organic Synthesis，v.1-19，Wiley，N.Y.(1967-1999ed.)，或Beilsteins Handbuch der organischen Chemie，4，Aufl.ed.Springer-Verlag，Berlin，包括增刊)。
可以單獨(dú)制備式I或Ia的化合物，或以包括至少2個(gè)，例如5至1,000個(gè)化合物或10至100個(gè)化合物的化合物庫形式來制備。式I或Ia化合物庫可以利用組合化學(xué)的“裂分和混合”方法或通過許多平行合成來制備，其利用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法、使用液相或固相化學(xué)過程進(jìn)行。因此，按照本發(fā)明的其它方面，提供了包括至少2個(gè)式I化合物或其鹽的化合物庫。
出于示例性的目的，反應(yīng)路線1-4和反應(yīng)路線A-K顯示了制備本發(fā)明化合物以及關(guān)鍵中間體的通用方法。為了更詳細(xì)說明單一反應(yīng)步驟，參見下面的實(shí)施例部分。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，可以使用其它合成路線來合成本發(fā)明的化合物。盡管在反應(yīng)路線中描述了具體起始原料和試劑并且在下面進(jìn)行了討論，但可以容易地替換為其它起始原料和試劑，以提供各種衍生物和/或反應(yīng)條件。此外，可以按照本公開，使用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的常規(guī)化學(xué)過程，將通過如下所述方法制備的許多化合物進(jìn)行進(jìn)一步修飾。

反應(yīng)路線1 反應(yīng)路線1顯示了制備式I的化合物(106)的方法，其中R1和R5是H。按照反應(yīng)路線1，在堿例如乙醇鈉的存在下，用甲脒處理酮酯(101)，得到4-羥基嘧啶(102)?？梢杂名u代試劑例如POCl3處理化合物(102)，實(shí)現(xiàn)化合物(102)的羥基轉(zhuǎn)化為鹵素基團(tuán)例如Cl，得到化合物(103)。用哌嗪取代化合物(103)的氯基團(tuán)，得到中間體(104)。中間體(104)的脫保護(hù)，然后與合適的氨基酸偶合，得到化合物(106)。

反應(yīng)路線2 反應(yīng)路線2顯示了制備式I的化合物(116)和(119)的方法，其中R1是Me，R5是H。按照反應(yīng)路線2，巰基乙酸酯(thioglycolate)(107)與巴豆酸酯(108)進(jìn)行Michael加成，得到二酯(109)。在堿例如NaOEt的存在下，二酯(109)的分子內(nèi)環(huán)化，得到酮酯(110)。通過用甲脒和堿例如乙醇鈉處理酮酯(110)，可以形成嘧啶，得到化合物(111)。用鹵代試劑例如POCl3將羥基嘧啶(111)氯化，然后與保護(hù)的哌啶(112)進(jìn)行SNAr反應(yīng)，產(chǎn)生外消旋中間體(113)。通過手性HPLC可以分離對(duì)映異構(gòu)體純化合物(114)和(117)。脫保護(hù)之后，4-哌嗪基嘧啶(115)和(118)可以與合適的氨基酸偶合，分別得到化合物(116)和(119)。

反應(yīng)路線3 反應(yīng)路線3顯示了制備式I的化合物(23)的方法，其中R1和R5是Me。按照反應(yīng)路線3，在溶劑例如醇、DMF或NMP中，在高溫下，例如在大約80-180℃之間的溫度，化合物(112)(按照反應(yīng)路線2制備)與3-(S)-1-PG-哌嗪(其中PG是胺的保護(hù)基團(tuán))進(jìn)行SNAr反應(yīng)，得到中間體(120)。通過手性HPLC可以實(shí)現(xiàn)非對(duì)映異構(gòu)體(120)的手性分離。將單一非對(duì)映異構(gòu)體(121)脫保護(hù)，并與合適的氨基酸偶合，得到化合物(123)。

反應(yīng)路線4 反應(yīng)路線4顯示了制備式I的化合物(130)的方法，其中R1是乙基，R5是甲基。按照反應(yīng)路線4，硫酯(thioester)(117)與戊烯酸酯(124)進(jìn)行Michael加成，形成中間體，將中間體在堿性條件下進(jìn)行原位環(huán)化，得到酮酯(125)。在堿性條件下，用甲脒處理化合物(125)，實(shí)現(xiàn)嘧啶(126)的形成。嘧啶(126)的氯化，得到化合物(127)?；衔?127)與保護(hù)的哌嗪基團(tuán)進(jìn)行SNAr反應(yīng)，得到化合物(128)?；衔?128)脫保護(hù)之后，將得到的化合物(129)與合適的氨基酸偶合，得到化合物(130)。
因此，本發(fā)明的另一個(gè)方面提供了制備式I化合物的方法，包括 將具有下式的化合物
其中R1、R2、R5和X如本文所定義，與具有下式的化合物進(jìn)行反應(yīng)，
其中R6、R7、R8、Ra、Rb、Rc、Rd、G、n、m和p如本文所定義。
相應(yīng)地，本發(fā)明的另一個(gè)方面提供了制備式Ia化合物的方法，包括 將具有下式的化合物
其中R1、R2和R5如本文所定義，與具有下式的化合物進(jìn)行反應(yīng)，
其中R6、R7、R8、Ra、Rb、Rc、Rd、G、n、m和p如本文所定義。
在式I化合物的合成(如反應(yīng)路線1-4所示例)中使用的氨基酸可以商購得到，或可以按照本文公開的方法制備。例如，在某些實(shí)施方案中，用于制備式I化合物的氨基酸包括具有式1A的β-苯基甘氨酸氨基酸，具有式2A的γ-苯基甘氨酸氨基酸，具有式3A的β-苯丙氨酸氨基酸，和具有式4A的γ-苯丙氨酸氨基酸。

制備通式1A-4A的氨基酸的方法示于反應(yīng)路線A-K中。

反應(yīng)路線A 反應(yīng)路線A示例性地顯示出了制備任選取代的式1的β-苯基甘氨酸氨基酸25和26的方法，其中R8是H，且R6、R9和t如本文所定義，R7是H或胺的保護(hù)基團(tuán)。按照反應(yīng)路線A，酸20通過下列條件轉(zhuǎn)變?yōu)轷?1(其中R′是烷基)在催化量的酸例如濃H2SO4或偶合劑例如DCC/DMAP的存在下，使用標(biāo)準(zhǔn)條件，例如用合適的醇(例如MeOH)處理；或者，在堿例如NEt3/DMAP的存在下，在合適的溫度(例如-20℃至100℃)，用合適的親電試劑(例如MeI，EtBr，BnBr)處理。酯的合適選擇是由合成最后的酸重新形成所需的條件來確定的，使用許多列于下面的實(shí)例和條件‘ProtectiveGroups in Organic Synthesis’，Greene和Wuts，Wiley-Interscience，第三版，第5章。引入羥甲基提供化合物22可以通過在堿例如NaOEt的存在下，在合適的溫度(例如-20℃至室溫)下，用合適的醛(例如甲醛)處理來實(shí)現(xiàn)?；衔?2的醇基團(tuán)的活化形成離去基團(tuán)(例如甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、鹵化物)可以通過在過量的堿例如NEt3、DIPEA或DBU的存在下，在合適的溫度(例如-20℃至室溫)下，用例如甲磺?；忍幚韥韺?shí)現(xiàn)。在很多情況下，可以直接由此方法分離烯烴24，在其它情況下，可能需要加熱(30℃至100℃)或額外的堿(例如在鹵素情況下需要DBU)，以完成消除反應(yīng)，提供化合物24。在合適溶劑例如THF中，在合適的溫度(例如-20℃至回流)下，可以用所需的伯胺(例如乙胺)處理活化的烯烴24，產(chǎn)生氨基酯中間體。在化合物24具有富電子芳香環(huán)或缺電子的/體積大的伯胺的情況下，可能需要加熱(例如30-240℃，在密封管中)或微波化學(xué)。在標(biāo)準(zhǔn)條件下，使用Boc2O，可以實(shí)現(xiàn)氨基的保護(hù)(例如Boc-基團(tuán)形式)，提供化合物23，其中Pg是保護(hù)基?？梢允褂闷渌Ｗo(hù)基，許多合適的實(shí)例列于‘Protective Groups in OrganicSynthesis’，Greene和Wuts，Wiley-Interscience，第三版，第7章。酯23皂化形成保護(hù)的氨基酸25可以使用適合于酯的條件實(shí)現(xiàn)(例如，對(duì)于甲基酯，使用LiOH水溶液，對(duì)于芐基酯，進(jìn)行氫化，對(duì)于叔丁基酯，使用酸)。
或者，在合適溶劑例如THF中，在合適的溫度(例如-20℃至回流)下，可以用仲胺(例如二乙胺)處理活化的烯烴24，產(chǎn)生氨基酯中間體(未顯示出來)。在化合物24具有富電子芳香環(huán)或缺電子的/體積大的仲胺的情況下，可能需要加熱(例如30-240℃，在密封管中)或微波化學(xué)過程。酯的皂化形成氨基酸26可以使用適合于酯的條件實(shí)現(xiàn)(例如，對(duì)于甲基酯，使用LiOH水溶液，對(duì)于芐基酯，進(jìn)行氫化，對(duì)于叔丁基酯，使用酸等)。

反應(yīng)路線B 反應(yīng)路線B顯示出了制備任選取代的式1的β-苯基甘氨酸氨基酸30和31的方法，其中R8是OH，Rc和Rd是H，R6、R9和t如本文所定義，R7如本文所定義或是胺的保護(hù)基團(tuán)。使用標(biāo)準(zhǔn)氧化劑例如MCPBA，在合適的溫度(室溫至回流)下，將不飽和酯24(按照反應(yīng)路線A制備)氧化，其中t是0-4，R′是烷基，提供環(huán)氧化物中間體28。典型地在高溫下(例如50-300℃)和高壓(例如，在密封管或高壓容器中)下，可以用合適的胺處理中間體28，得到氨基醇29或30。如果使用仲胺(例如在化合物30的制備中)，那么可以使用列于‘Protective Groups in Organic Synthesis’，Greene和Wuts，Wiley-Interscience，第三版，第5章中的條件將酯脫保護(hù)(例如，對(duì)于甲基酯，使用LiOH，對(duì)于芐基酯，進(jìn)行氫化等)。當(dāng)使用伯胺時(shí)(例如在化合物29的制備中)，將胺進(jìn)行保護(hù)(例如，使用Boc酸酐作為Boc-基團(tuán)形式)，然后進(jìn)行酯的脫保護(hù)(使用上述條件)，提供羥基化的氨基酸31。

反應(yīng)路線C 反應(yīng)路線C顯示出了制備任選取代的式1的β-苯基甘氨酸氨基酸36的方法，其中R8是甲基，Rc和Rd是H，R6是H，R7是H或胺的保護(hù)基團(tuán)，R9和t如本文所定義。在合適的溫度(例如0℃至回流)下，可以用堿(例如NaOtBu)處理酯32(其中R′″是烷基)，形成陰離子，然后在合適的溫度(例如78℃至室溫)下，加入親電試劑(例如2-溴乙酸叔丁基酯)，得到同系化的酯33。使用合適的酸例如TFA或HCl，在合適的溫度(例如0℃至回流)下，化合物33的叔丁基酯進(jìn)行皂化反應(yīng)，提供化合物34。在弱堿例如NEt3的存在下，在合適的溫度(例如0℃至回流)下，使用例如DPPA進(jìn)行化合物34的Curtius重排，然后任選在路易斯酸(例如SnCl2)的存在下，在高溫(例如40-200℃)下，用醇(例如tBuOH)處理活化的中間體，提供化合物35，其中Pg是胺保護(hù)基。用于制備化合物35所選擇的醇決定了胺的保護(hù)基團(tuán)(例如tBuOH，提供Boc-胺)。使用標(biāo)準(zhǔn)條件(例如，當(dāng)保護(hù)基是甲基酯時(shí)，用LiOH，對(duì)于芐基酯，進(jìn)行氫化等)，將化合物35的酯基進(jìn)行脫保護(hù)，得到酸化合物36。

反應(yīng)路線D 反應(yīng)路線D顯示出了制備任選取代的式2的γ-苯基甘氨酸氨基酸40的方法，其中Rc、Rd、R9和t如本文所定義，R6是H，R7是胺的保護(hù)基團(tuán)，例如Boc。按照反應(yīng)路線A制備的起始不飽和酯24，可以在堿例如DBU的存在下，在合適的溫度(例如0℃至室溫)下，用取代的硝基甲烷衍生物(例如硝基乙烷)處理，得到同系化加成物37。使用標(biāo)準(zhǔn)條件(例如氫化，Zn/酸等)，在合適的溫度(例如室溫至回流)下，可以將化合物37的硝基還原，并且可以將得到的中間體環(huán)化，得到內(nèi)酰胺中間體38。在標(biāo)準(zhǔn)條件下，使用Boc2O，可以實(shí)現(xiàn)氨基的保護(hù)(例如用Boc-基團(tuán))，提供化合物39?？梢允褂闷渌Ｗo(hù)基，許多合適的實(shí)例列于‘Protective Groups in Organic Synthesis’，Greene和Wuts，Wiley-Interscience，第三版，第7章。在合適的溫度(例如0至100℃)下，用堿水溶液例如LiOH或KOH水溶液處理化合物39，實(shí)現(xiàn)內(nèi)酰胺的開環(huán)，得到適當(dāng)取代的保護(hù)氨基酸化合物40。

反應(yīng)路線E 反應(yīng)路線E顯示出了制備任選取代的式2的γ-苯基甘氨酸氨基酸44的方法，其中R8是甲基，Rc和Rd是H，R6是H，R7是胺的保護(hù)基團(tuán)，R9和t如本文所定義。在合適的溫度(例如0℃至回流)下，可以用合適堿例如KOtBu處理酯32(其中R′″是烷基，t是0-4)，形成陰離子，然后在-78℃至室溫的溫度范圍下，加入丙烯酸酯單元(例如丙烯酸叔丁基酯)，得到同系化的酯41。在合適溫度(例如0℃至回流)下，使用合適酸例如TFA或HCl處理，將化合物41的叔丁基酯進(jìn)行皂化，提供化合物42。在弱堿例如NEt3的存在下，在合適的溫度(例如0℃至回流)下，使用例如DPPA進(jìn)行化合物42的Curtius重排，然后任選在路易斯酸(例如SnCl2)的存在下，在高溫(例如40-200℃)下，用合適的醇(例如tBuOH)處理活化的中間體，提供化合物43。所選擇的醇決定了化合物43的胺的保護(hù)基團(tuán)(例如tBuOH，提供Boc-胺)。在標(biāo)準(zhǔn)條件下(例如，對(duì)于甲基酯，用LiOH，對(duì)于芐基酯，進(jìn)行氫化等)，將化合物43的酯基進(jìn)行脫保護(hù)，得到酸化合物44。
在反應(yīng)路線E的替代性反應(yīng)路線中，R8可以是氫。

反應(yīng)路線F 反應(yīng)路線F顯示出了制備任選取代的式3的β-苯丙氨酸氨基酸48、49和50的方法，其中R6是H，R7是胺的保護(hù)基團(tuán)，Rc和Rd是H，R9和t如本文所定義。在合適的堿例如哌啶的存在下，在合適的溫度(例如室溫至回流)下，可以用式CN-CH2CO2R′″(其中R′″是烷基)的氰基乙酸酯(例如2-氰基乙酸乙酯)處理適當(dāng)取代的醛45，得到不飽和的酯46。可以用許多方式實(shí)現(xiàn)烯烴和化合物46的氰基的還原，提供化合物47。例如，可以用任何已知的試劑例如NaBH4來還原烯烴，實(shí)現(xiàn)1，4-還原。在路易斯酸例如BF3.OEt2或TFA的存在下，使用試劑例如LiA1H4或NaBH4，可以還原腈?？梢允褂迷S多其它還原劑，例如列于下列中的那些‘Reductions in Organic Chemistry’，Hudlicky，ACS monograph，第二版，第18章。如果需要的話，使用標(biāo)準(zhǔn)條件(例如，使用合適的醛、路易斯酸和還原劑進(jìn)行還原胺化)，可以在此步驟中將伯胺47單烷基化或雙烷基化，提供可形成化合物48和49的中間體(未顯示出來)。為了制備伯和仲胺，可以使用許多保護(hù)基(例如‘Protective Groups inOrganic synthesis’，Greene和Wuts，Wiley-Interscience，第三版，第7章)實(shí)現(xiàn)保護(hù)，例如在0℃至室溫，使用Boc酸酐形成Boc-基團(tuán)?？梢允褂脡A例如LiOH或KOH水溶液或列于上述‘Protective Groups’文本中的任何其它試劑(例如，對(duì)于芐基酯，進(jìn)行氫化)，實(shí)現(xiàn)酯基裂解形成氨基酸48、49或50。

反應(yīng)路線G 反應(yīng)路線G顯示出了制備任選取代的式4的α-苯丙氨酸氨基酸54的方法，其中R6是H，R7是胺的保護(hù)基團(tuán)，R9和t如本文所定義。在室溫至回流的溫度范圍下，使用例如LiAlH4，可以將適當(dāng)取代的酸51還原成苯甲醇52。使用例如PBr3、MsCl/NEt3等，可以將化合物52的醇基團(tuán)活化為離去基團(tuán)(例如鹵化物、甲磺酸酯等)。在強(qiáng)堿例如LDA、nBuLi的存在下，使用保護(hù)的甘氨酸衍生物例如2-(二苯亞甲基氨基)乙酸乙酯，將該離去基團(tuán)進(jìn)行置換，提供氨基酯中間體53，其中R1是烷基，Pg是保護(hù)基。合適的保護(hù)基列于‘Protective Groups in Organic Synthesis’，Greene和Wuts，Wiley-Interscience)。在此步驟中，可以改變胺的保護(hù)基團(tuán)，例如引入Boc-基團(tuán)。隨后，在合適的溫度(例如0℃至回流)下，將酯53進(jìn)行脫保護(hù)(例如對(duì)于芐基酯，使用3N HCl，LiOH，氫化等)，提供所需的N-保護(hù)的氨基酸54。

反應(yīng)路線H 反應(yīng)路線H顯示出了制備任選取代的式2的γ-苯基甘氨酸氨基酸56的方法，Rc和Rd是H，R6和R8與它們相連的原子一起形成螺環(huán)雜環(huán)，R7是胺的保護(hù)基團(tuán)，R9和t如本文所定義。按照反應(yīng)路線H，在無水條件(例如，加入分子篩)下，在合適的溫度(例如室溫至回流)下，可以用合適保護(hù)的甘氨酸衍生物(例如芐基甘氨酸)和甲醛處理不飽和酯24，產(chǎn)生化合物55。使用標(biāo)準(zhǔn)條件(例如，通過氫化，1-氯乙基甲酸酯等)，將芐基裂解，然后加入胺的保護(hù)基團(tuán)例如Boc-基團(tuán)，并在標(biāo)準(zhǔn)條件下(例如對(duì)于甲基酯，用LiOH，對(duì)于叔丁基酯，用酸等，在0℃至回流)將酯裂解，提供N-保護(hù)的氨基酸56。

反應(yīng)路線I 反應(yīng)路線I顯示出了制備任選取代的式3的β-苯丙氨酸氨基酸61和62的方法，其中Rc和Rd是H，R6和Rb與它們相連的原子一起形成雜環(huán)，R7、R9和t如本文所定義。酸57通過以下條件轉(zhuǎn)變?yōu)轷?8在催化劑酸(例如濃H2SO4或TMSCl)或偶合劑(例如DCC/DMAP)的存在下，使用標(biāo)準(zhǔn)條件例如用合適的醇(例如MeOH)處理；或者在合適堿例如NEt3/DMAP的存在下，在合適的溫度(例如-20℃至100℃)下，用合適的親電試劑(例如MeI，EtBr，BnBr)處理。酯的合適選擇是由合成最后中酸的重新形成所需的條件確定的，例如描述在下列中的條件‘Protective Groups in Organic Synthesis’，Greene和Wuts，Wiley-Interscience，第三版，第5章。在TFA的存在下，使用例如N-(甲氧基甲基)(苯基)-N-((三甲基甲硅基)甲基)甲胺，實(shí)現(xiàn)化合物58的環(huán)化，提供化合物59。這組具體試劑產(chǎn)生了芐胺，在標(biāo)準(zhǔn)條件(例如氫化，在-20℃至50℃)或任何其它標(biāo)準(zhǔn)條件例如列于下列中的那些條件下，可以將其裂解，提供化合物60‘Protective Groups in Organic Synthesis’，Greene和Wuts，Wiley-Interscience，第三版，第7章。使用列于上述的試劑例如Boc-酸酐，用其它保護(hù)基(例如Boc)保護(hù)化合物60的游離胺，然后使用適合于酯的標(biāo)準(zhǔn)條件(例如對(duì)于甲基酯，使用LiOH水溶液，對(duì)于芐基酯，使用氫化，對(duì)于叔丁基酯，使用酸)，將酯裂解，提供酸化合物61。或者，可以將游離胺進(jìn)一步官能團(tuán)化(例如使用烷基化、還原胺化或酰化條件)，然后進(jìn)行酯裂解，產(chǎn)生叔氨基酸化合物62。

反應(yīng)路線J 使用例如反應(yīng)路線J中所示的方法，制備β-氨基酸的任何一個(gè)對(duì)映異構(gòu)體。可以用亞胺或亞銨離子合成子處理2-苯乙酸酯，其中亞胺或亞銨離子合成子通過例如在-100℃至50℃，在路易斯酸(例如TiCl4)和適當(dāng)取代的烷氧基甲胺或N-(烷氧基甲基)酰胺/氨基甲酸酯的存在下原位制備，且其中2-苯乙酸酯與具有合適立體化學(xué)的合適的手性助劑(R*)(例如Evans′助劑或磺內(nèi)酰胺)偶合，其用于在氨基酸的β位產(chǎn)生所需的化學(xué)現(xiàn)象。不對(duì)稱加成可能需要存在Lewis酸(例如TiCl4)、胺堿(例如Hunig′s堿)和低溫(例如-100℃至0℃)，以產(chǎn)生最好水平的立體化學(xué)誘導(dǎo)作用。如果非對(duì)映選擇性比需要的低，可以在此步驟中通過(例如)色譜或結(jié)晶來分離單獨(dú)的非對(duì)映異構(gòu)體。使用裂解所選擇助劑的已知方法(例如對(duì)于Evans助劑，LiOH/H2O2，在-50℃至50℃)，將手性助劑裂解，然后得到所需的N-保護(hù)的β-氨基酸，其在β位具有所需的立體化學(xué)。另外，如果R6也是保護(hù)基團(tuán)(例如2，4-二甲氧基芐基)，可以在Boc-基團(tuán)的存在下將其除去(例如氫化或DDQ等)，得到Boc-氨基酸，除去Boc-基團(tuán)，提供伯胺，通過烷基化、?；蜻€原胺化，可以將其進(jìn)一步官能團(tuán)化(在與嘧啶-哌嗪單元偶合之前或之后)。

反應(yīng)路線K 反應(yīng)路線K顯示出了形成γ氨基酸的單一對(duì)映異構(gòu)體的代表性的方法，其中Rc、Rd和R9如本文所定義，t是0至4，R6是H，R7是胺的保護(hù)基團(tuán)例如Boc。在一個(gè)合適的方法中，使用手性固定相，對(duì)外消旋氨基酸進(jìn)行手性色譜分離?；蛘?，可以制備非對(duì)映異構(gòu)體的混合物，通過常規(guī)色譜技術(shù)將其分離。例如，在堿性胺(例如Hunig′s堿)的存在下，在-20℃至50℃，外消旋氨基酸的活化(例如COCl2，堿)和手性助劑R*(例如Evans′噁唑烷酮)的引入，得到非對(duì)映異構(gòu)體的混合物。可以使用標(biāo)準(zhǔn)條件(例如柱層析，HPLC，SFC等)分離該混合物，得到單一的非對(duì)映異構(gòu)體。通過手性助劑的裂解(在Evans′助劑的情況下，使用(例如)LiOH/HOOH，在-15℃至室溫下)，這些可以轉(zhuǎn)變?yōu)樗杷?，得到?氨基酸的單一對(duì)映異構(gòu)體。需要將溫度保持很低，以便防止最新分離的手性中心的消旋。
在式I或Ia化合物的制備中，可能需要保護(hù)中間體的遠(yuǎn)端官能團(tuán)(remotefunctionalities)(例如伯胺或仲胺等)。對(duì)這種保護(hù)的需要是變化的，這取決于遠(yuǎn)端官能團(tuán)的性質(zhì)和制備方法的條件。合適的氨基-保護(hù)基(NH-Pg)包括乙?；?，三氟乙?；?，叔丁氧羰基(BOC)，芐氧羰基(CBz)和9-芴基亞甲基氧基羰基(Fmoc)。本領(lǐng)域技術(shù)人員容易確定需要的這種保護(hù)。對(duì)于保護(hù)基和其用途的概述，參見T.W.Greene，Protective Groups in Organic Synthesis，JohnWiley & Sons，New York，1991。
分離方法 在制備式I或Ia化合物的任何合成方法中，將反應(yīng)產(chǎn)物互相分離和/或從起始原料中分離是有利的。利用本領(lǐng)域普通技術(shù)，將各個(gè)步驟或系列步驟的所需產(chǎn)物分離和/或純化至目標(biāo)均勻度。典型地，這種分離包括多相萃取、從溶劑或溶劑混合物中結(jié)晶、蒸餾、升華或色譜。色譜可以包括許多方法，包括例如反相和正相色譜；體積排除色譜；離子交換色譜；高、中和低壓液相色譜法和裝置；小型分析；模擬移動(dòng)床(SMB)和制備薄層色譜法或厚層色譜法，以及小規(guī)模薄層和快速色譜技術(shù)。
另一種分離方法包括用選擇的試劑處理反應(yīng)混合物，以與目標(biāo)產(chǎn)物、未反應(yīng)的起始原料、反應(yīng)副產(chǎn)物等結(jié)合或使其分離。這種試劑包括吸附劑或吸收劑例如活性碳、分子篩、離子交換介質(zhì)等?；蛘?，在堿性材料的情況下，試劑可以是酸，在酸性物質(zhì)的情況下，可以是堿，結(jié)合試劑例如抗體、結(jié)合蛋白、選擇性的螯合劑例如冠醚、液體/液體離子萃取試劑(LIX)等。
根據(jù)所涉及物質(zhì)的性質(zhì)選擇合適的分離方法。例如，在蒸餾和升華中的沸點(diǎn)和分子量，在色譜中的存在或不存在極性官能團(tuán)，在多相萃取中的酸性和堿性介質(zhì)中的物質(zhì)穩(wěn)定性等。本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)應(yīng)用最合適的技術(shù)，以實(shí)現(xiàn)所需的分離。
基于物理化學(xué)差異，利用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法，例如色譜和/或分級(jí)結(jié)晶，可以將非對(duì)映異構(gòu)體混合物分離為其單一非對(duì)映異構(gòu)體。對(duì)映異構(gòu)體可以如下分離通過與合適的旋光性化合物(例如手性助劑，例如手性醇或Mosher′s酰氯)反應(yīng)，將對(duì)映異構(gòu)體混合物轉(zhuǎn)化為非對(duì)映異構(gòu)體混合物，分離非對(duì)映異構(gòu)體，并將單一非對(duì)映異構(gòu)體轉(zhuǎn)化(例如水解)為相應(yīng)的純對(duì)映異構(gòu)體。同樣，本發(fā)明的一些化合物可能是阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體(例如取代的聯(lián)芳基)，并且認(rèn)為其是本發(fā)明的一部分。還可以使用手性HPLC柱分離對(duì)映異構(gòu)體。
單一的立體異構(gòu)體，例如對(duì)映異構(gòu)體(基本上不含其立體異構(gòu)體)可以使用例如使用光學(xué)活性拆分試劑形成非對(duì)映異構(gòu)體的方法，通過拆分消旋混合物而獲得。(Eliel，E.和Wilen，S.″Stereochemistry of Organic Compounds，″John Wiley & Sons，Inc.，New York，1994；Lochmuller，C.H.，J.Chromatogr.，(1975)113(3)283-302)。本發(fā)明手性化合物的消旋混合物通過任一合適的方法分開和分離，其包括(1)與手性化合物形成離子、非對(duì)映異構(gòu)體鹽，通過分級(jí)結(jié)晶或其它方法進(jìn)行分離，(2)與手性衍生化試劑形成非對(duì)映異構(gòu)體化合物，分離非對(duì)映異構(gòu)體，并轉(zhuǎn)化為純的立體異構(gòu)體，和(3)在手性條件下，直接分離基本上純的或富集的立體異構(gòu)體。參見″Drug Stereochemistry，Analytical Methods and Pharmacology，″Irving W.Wainer編，Marcel Dekker，Inc.，New York(1993)。
在方法(1)中，非對(duì)映異構(gòu)體鹽可以由對(duì)映異構(gòu)體純的手性堿例如番木鱉堿、奎寧、麻黃堿、馬錢子堿、α-甲基-β-苯乙胺(苯丙胺)等與攜帶酸性官能團(tuán)例如羧酸和磺酸的不對(duì)稱化合物的反應(yīng)形成。通過分級(jí)結(jié)晶或離子色譜，可以誘導(dǎo)分離非對(duì)映異構(gòu)體鹽。對(duì)于氨基化合物的旋光異構(gòu)體的分離，加入手性羧酸或磺酸，例如樟腦磺酸、酒石酸、扁桃酸或乳酸，可以致使非對(duì)映異構(gòu)體鹽的形成。
或者，通過方法(2)，使所要拆分的底物與手性化合物的一個(gè)對(duì)映異構(gòu)體反應(yīng)，形成非對(duì)映異構(gòu)體對(duì)(E.和Wilen，S.″Stereochemistry of OrganicCompounds″，John Wiley & Sons，Inc.，1994，p.322)。非對(duì)映異構(gòu)體化合物可以由不對(duì)稱化合物與對(duì)映異構(gòu)體純的手性衍生化試劑例如薄荷基衍生物的反應(yīng)而形成，然后分離非對(duì)映異構(gòu)體，并水解，以產(chǎn)生純的或富集的對(duì)映異構(gòu)體。測定光學(xué)純度的方法包括在堿的存在下制備消旋混合物的手性酯，例如薄荷基酯，例如(-)氯甲酸薄荷基酯，或Mosher酯(-甲氧基-α-(三氟甲基)苯基乙酸酯(Jacob III.J.Org.Chem.(1982)474165)，并分析1H NMR光譜，確定兩種阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體的存在。按照分離阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體萘基-異喹啉(WO 96/15111)的方法，通過正和反向色譜法，可以分開和分離阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體化合物的穩(wěn)定非對(duì)映異構(gòu)體。通過方法(3)，可以通過使用手性固定相的色譜來分離兩個(gè)對(duì)映異構(gòu)體的消旋混合物(″ChiralLiquid Chromatography″(1989)W.J.Lough編，Chapman和Hall，New York；Okamoto，J.of Chromatogr.，(1990)513375-378)。通過辨別其它手性分子(帶有不對(duì)稱碳原子)所使用的方法(例如旋光和圓二色性)，可以區(qū)別富集的或純對(duì)映異構(gòu)體。
使用式I或Ia化合物的治療方法 本發(fā)明的化合物可以用作治療疾病或病癥的預(yù)防或治療劑，該疾病或病癥是通過調(diào)控或調(diào)節(jié)AKT蛋白激酶、酪氨酸激酶、其它絲氨酸/蘇氨酸激酶和/或雙重特異性激酶介導(dǎo)的。可以按照本發(fā)明方法治療的AKT蛋白激酶介導(dǎo)的病癥包括，但不限于，炎性(inflammatory)、過度增生性(hyperproliferative)、心血管(cardiovascular)、神經(jīng)變性(neurodegenerative)、婦科(gynecological)和皮膚(dermatological)疾病(disease)和病癥(disorder)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物組合物用于治療過度增生性病癥，包括下列類型的癌癥(1)心臟肉瘤(血管肉瘤、纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤、脂肉瘤)、粘液瘤、橫紋肌瘤、纖維瘤、脂肪瘤和畸胎瘤；(2)肺支氣管癌(鱗狀細(xì)胞癌、未分化的小細(xì)胞癌、未分化的大分子細(xì)胞癌、腺癌)、蜂窩狀(細(xì)支氣管)癌、支氣管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、軟骨瘤的錯(cuò)構(gòu)瘤、間皮瘤、非小細(xì)胞肺癌、小細(xì)胞肺癌；(3)胃腸食道(鱗狀細(xì)胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)、胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)、胰腺(管道(ductal)腺癌、胰島瘤、胰升血糖素瘤、胃泌素瘤、類癌瘤、舒血管腸肽瘤)、小腸(腺癌、淋巴瘤、類癌瘤、卡波斯肉瘤(Karposi′s sarcoma)、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、纖維神經(jīng)瘤、纖維瘤)、大腸(腺癌、管狀腺瘤、絨毛狀腺瘤、錯(cuò)構(gòu)瘤、平滑肌瘤)；(4)泌尿生殖道腎臟(腺癌、胚胎性癌肉瘤[韋母氏瘤]、淋巴瘤、白血病)、膀胱和尿道(鱗狀細(xì)胞癌、轉(zhuǎn)移細(xì)胞癌、腺癌)、前列腺(腺癌、肉瘤)、睪丸(精原細(xì)胞瘤、畸胎瘤、胚胎性癌、畸胎癌、絨膜癌、肉瘤、間質(zhì)細(xì)胞癌、纖維瘤、纖維腺瘤、腺瘤樣瘤、脂肪瘤)；(5)肝臟肝癌(肝細(xì)胞癌)、肝膽管型肝癌、肝胚細(xì)胞瘤、血管肉瘤、肝細(xì)胞性的腺瘤、血管瘤；(6)骨骼骨原性肉瘤(骨肉瘤)、纖維肉瘤、惡性的纖維組織細(xì)胞瘤、軟骨肉瘤、尤因氏肉瘤、惡性淋巴瘤(網(wǎng)狀細(xì)胞肉瘤)、多重骨髓癌、惡性的巨細(xì)胞瘤脊索瘤、骨軟骨瘤(骨軟骨性外生骨疣)、良性軟骨瘤、成軟骨細(xì)胞瘤、軟骨黏液樣纖維瘤、骨樣骨瘤和巨細(xì)胞瘤；(7)神經(jīng)體系頭骨(骨瘤、血管瘤、肉芽瘤、黃瘤、畸形性骨炎)、腦膜(腦膜瘤、腦膜肉瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤病)、腦(星形細(xì)胞瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、室管膜瘤、胚組織瘤[松果體瘤]、多形性惡性膠質(zhì)瘤、寡枝神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤、神經(jīng)鞘瘤、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、先天性腫瘤)、脊髓纖維神經(jīng)瘤、腦膜瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、肉瘤)；(8)婦科疾病子宮(子宮內(nèi)膜癌)、宮頸(宮頸癌、腫瘤前子宮頸非典型增生)、卵巢(卵巢癌[漿液性囊腺癌、粘液性囊腺癌、無類別的癌]、粒膜-膜的細(xì)胞腫瘤、卵巢塞萊二氏細(xì)胞瘤、無性細(xì)胞瘤、卵巢未成熟畸胎瘤)、外陰(鱗狀細(xì)胞癌、上皮內(nèi)癌、腺癌、纖維肉瘤、黑素瘤)、陰道(明細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、葡萄樣肉瘤(胚胎性橫紋肌肉瘤)、輸卵管(癌)；(9)血液血液(骨髓性白血病[急性和慢性]、急性淋巴母細(xì)胞性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、骨髓及外骨髓增殖疾病、多重骨髓癌、脊髓發(fā)育不良綜合癥)、淋巴肉芽腫病、非Hodgkin′s淋巴瘤[惡性淋巴瘤]；(10)皮膚發(fā)展性黑素瘤、惡性黑色素瘤、皮膚基底細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、卡波斯肉瘤、鼴鼠混合體型痣(moles dysplasticnevi)、脂肪瘤、血管瘤、皮膚纖維瘤、瘢痕瘤、牛皮癬；(11)腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤；(12)乳房轉(zhuǎn)移性的乳房癌；乳房腺癌；(13)結(jié)腸；(14)口腔；(15)毛細(xì)胞白血??；(16)頭和頸；(17)及其它、包括難治療的轉(zhuǎn)移性疾??；卡波濟(jì)氏肉瘤；Bannayan-Zonana綜合癥；和考登病(Cowden disease)或Lhermitte-Duclos病，及其它種類的過度增生性疾病。
本發(fā)明的化合物和方法也可以用于治療下列疾病和病癥例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、節(jié)段性回腸炎(Chron′s disease)、血管纖維瘤、眼睛疾病(例如視網(wǎng)膜血管再生、糖尿病性視網(wǎng)膜病、年齡相關(guān)的黃斑變性、黃斑變性等)、多發(fā)性腦硬化、肥胖癥、阿爾海默氏疾病、再狹窄、自身免疫疾病、過敏、哮喘、子宮內(nèi)膜異位、動(dòng)脈粥樣硬化、靜脈移植狹窄、迫位吻合修復(fù)移植狹窄、前列腺增生、慢性阻塞性肺病、牛皮癬、由于組織修復(fù)而造成的神經(jīng)損傷抑制、瘢痕組織形成(可以幫助創(chuàng)傷愈合)、多發(fā)性腦硬化、炎性疾病腸病、感染、尤其是細(xì)菌、病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒或寄生蟲感染(通過增加細(xì)胞程序死亡)、肺病、瘤、帕金森氏癥、移植排斥(免疫抑制劑)、膿毒性休克等。
因此，本發(fā)明的另一個(gè)方面提供了治療哺乳動(dòng)物中AKT蛋白激酶介導(dǎo)的疾病或醫(yī)學(xué)病癥的方法，包括向所述哺乳動(dòng)物給藥有效治療或預(yù)防所述病癥量的一種或多種式I或Ia的化合物或其可藥用鹽或前藥。
短語“有效量”是指當(dāng)給藥至有此治療需要的哺乳動(dòng)物時(shí)，足以產(chǎn)生下列效果的化合物的量(i)治療或預(yù)防具體一種或多種AKT蛋白激酶、酪氨酸激酶、其它絲氨酸/蘇氨酸激酶和/或雙重特異性激酶介導(dǎo)的疾病、病癥或障礙，(ii)減弱、改善或消除具體疾病、病癥或障礙的一或多種癥狀，或(iii)預(yù)防或延遲本文所述的具體疾病、病癥或障礙的一種或多種癥狀的發(fā)作。在癌的情況下，有效量的藥物可以減少癌細(xì)胞數(shù)目；降低腫瘤大??；抑制(即在某種程度上減緩，優(yōu)選終止)癌細(xì)胞浸透到周圍器官中；抑制(即在某種程度上減緩，優(yōu)選終止)腫瘤轉(zhuǎn)移；在某種程度上抑制腫瘤生長；和/或在某種程度上減輕與癌相關(guān)的一種或多種癥狀。為了達(dá)到藥物可以預(yù)防所存在癌細(xì)胞的生長和/或?qū)⑵錃⑺赖某潭?，其可以是?xì)胞生長抑制劑和/或細(xì)胞毒素。對(duì)于癌癥治療，可以例如通過評(píng)價(jià)疾病進(jìn)展的時(shí)間(TTP)和/或測定反應(yīng)率(RR)來測定其效果。
式I或Ia化合物的量會(huì)根據(jù)許多因素而變化，例如具體化合物、疾病和其嚴(yán)重程度、需要治療的哺乳動(dòng)物的特性(例如體重)，然而，通?？梢杂杀绢I(lǐng)域技術(shù)人員來確定。
“治療”是指至少將由一種或多種AKT蛋白激酶、酪氨酸激酶、其它絲氨酸/蘇氨酸激酶和/或雙重特異性激酶的活性所影響的(至少在某種程度上)的哺乳動(dòng)物例如人的疾病減輕。術(shù)語“治療”和“醫(yī)治”指的是治療性治療以及預(yù)防或阻止性措施，其中目的是預(yù)防或延遲(衰減)不希望的生理變化或異常。對(duì)本發(fā)明來說，有利的或目標(biāo)臨床效果包括，但不限于，癥狀減輕，疾病程度降低，疾病狀態(tài)穩(wěn)定化(即未惡化)，延遲或減緩疾病發(fā)展，改善或減緩疾病狀態(tài)，和癥狀緩解(不論是部分的或全部的)，不論是否是可檢測或不可檢測的。“治療”還可以是指與不得到醫(yī)治而期望的存活相比，可以延長存活。需要治療的那些包括患有病癥或障礙的那些，以及發(fā)現(xiàn)傾向于患有疾病但還沒有診斷患有疾病的那些；需要調(diào)節(jié)和/或抑制疾病的那些。術(shù)語“治療”包括預(yù)防措施(preventative)，即預(yù)防性的(prophiactic)，和減輕療法。
本文使用的術(shù)語“哺乳動(dòng)物”是指具有或處于本文所述疾病的發(fā)展危險(xiǎn)之中的溫血?jiǎng)游?，包括但不限于豚鼠，狗，貓，大鼠，小鼠，倉鼠和靈長類，包括人。
本發(fā)明也提供了式I或Ia化合物，其用于治療AKT蛋白激酶介導(dǎo)的病癥。
本發(fā)明的其它方面是式I或Ia化合物在制備用于治療(例如治療或預(yù)防AKT蛋白激酶介導(dǎo)的)病癥的藥物中的用途。
組合治療 本發(fā)明的化合物可以與一種或多種其它藥物(例如如下所述的藥物)組合使用。根據(jù)臨床使用劑量，可以適當(dāng)?shù)剡x擇第二種藥物的劑量。本發(fā)明化合物和第二種藥物的比例可以恰當(dāng)?shù)匕凑战o藥患者、給藥途徑、靶向疾病、臨床病癥、組合及其它因素來確定。如果給藥患者是人，例如，第二種藥物可以使用的量是每重量份數(shù)的本發(fā)明化合物的0.01至100重量份數(shù)。
優(yōu)選地，藥物組合制劑或劑量方案的第二種化合物對(duì)本發(fā)明的化合物具有輔助活性，以使它們不會(huì)相互不利地影響。這種藥物可以以有效用于所需目的的量合適地存在于組合中。因此，本發(fā)明的另一個(gè)方面提供了組合物，其包含本發(fā)明的化合物以及(例如本文所述的)第二種藥物。
可以在單元藥物組合物中一起給藥本發(fā)明的化合物和其它藥學(xué)活性藥物，或單獨(dú)給藥，并且當(dāng)單獨(dú)給藥時(shí)，其可以以任何順序同時(shí)或順序地給藥。這種順序給藥可以在時(shí)間上是接近的，或在時(shí)間上間隔很長?？梢赃x擇本發(fā)明化合物和第二種藥物的量以及給藥的相對(duì)時(shí)機(jī)，以便實(shí)現(xiàn)所需的組合的治療效果。
組合治療(combination therapy)可以提供“協(xié)同作用”，并且證明是“協(xié)同的”，即，一起使用活性組分時(shí)獲得的效果大于由單獨(dú)使用化合物所產(chǎn)生效果的和。當(dāng)活性組分是下列時(shí)，可以獲得協(xié)同效應(yīng)(1)在組合的單元?jiǎng)┝恐苿┲泄餐渲坪屯瑫r(shí)給藥或遞送的；(2)以獨(dú)立制劑形式交替或平行遞送；或(3)通過其它方案。當(dāng)在交替性治療中遞送時(shí)，可以獲得協(xié)同效應(yīng)，此時(shí)化合物是順序給藥或遞送的，例如，通過獨(dú)立注射器中的不同注射液。通常，在交替治療期間，順序地給藥各個(gè)活性組分的有效劑量，即連續(xù)給藥，而在組合治療中，一起給藥兩種或多種活性組分的有效劑量。
“化學(xué)治療劑(chemotherapeutic agent)”是用于治療癌癥的化合物，與作用機(jī)理無關(guān)?；瘜W(xué)治療劑包括用于“靶向治療”和常規(guī)化學(xué)治療中的化合物。
化學(xué)治療劑的實(shí)例包括埃洛替尼(

Genentech/OSIPharm.)、硼替佐米(Bortezomib)(

Millennium Pharm.)、Fulvestrant(

AstraZeneca)、舒尼替尼(sutent)(SU11248，Pfizer)、來曲唑(

Novartis)、伊馬替尼甲磺酸鹽(

Novartis)、PTK787/ZK 222584(Novartis)、奧沙利鉑(

Sanofi)、5-FU(5-氟尿嘧啶)、亞葉酸、雷帕霉素(Sirolimus，

Wyeth)、拉帕替尼(lapatinib)(

GSK572016，Glaxo Smith Kline)、洛那法尼(lonafarnib)(SCH66336)、索拉非尼(sorafenib)(BAY43-9006，Bayer Labs)、依立替康(

Pfizer)和吉非替尼(

AstraZeneca)、AG1478、AG1571(SU 5271；Sugen)、烷基化劑，例如硫替派和

環(huán)磷酰胺；烷基磺酸鹽，例如白消安、英丙舒凡(Improsulfan)和保釋芬；氮丙啶例如苯佐替派、卡波醌、美妥替派和烏瑞替派；氮丙啶和甲基蜜胺包括六甲蜜胺、曲他胺、三亞乙基磷酰胺、三乙撐硫代磷酰胺和三甲基蜜胺；多聚乙酰(尤其是布拉他辛(bullatacin)和布拉它辛酮(bullatacinone))；喜樹堿(包括合成類似物托泊替康)；苔蘚抑素；callystatin；CC-1065(包括其阿多來新，卡折來新和比折來新合成類似物)；自念珠藻環(huán)肽(尤其是自念珠藻環(huán)肽1和自念珠藻環(huán)肽8)；多拉司他汀(dolastatin)；duocarmycin(包括其合成類似物，KW-2189和CB1-TM1)；艾榴塞洛素；水鬼蕉堿(pancratistatin)；sarcodictyin；spongistatin；氮芥例如苯丁酸氮芥，萘氮芥，氯磷酰胺，雌莫司汀，異環(huán)磷酰胺，二氯甲二乙胺，鹽酸二氯甲二乙胺氧化物，苯丙氨酸氮芥，新氮芥，膽甾醇苯乙酸氮芥，松龍苯芥，氯乙環(huán)磷酰胺，尿嘧啶氮芥；亞硝基脲例如卡莫司汀，吡葡亞硝脲，福莫司汀，環(huán)己亞硝脲，嘧啶亞硝脲，和雷莫司??；抗生素例如烯二炔抗生素(例如，刺孢霉素，尤其是刺孢霉素gammalI和刺孢霉素omegaI1(Angew Chem.Intl.Ed.Engl.(1994)33183-186)；蒽環(huán)類抗生素，包括蒽環(huán)類抗生素A；雙磷酸鹽類，例如氯膦酸鹽；埃斯培拉霉素(esperamicin)；以及新制癌菌素發(fā)色團(tuán)和相關(guān)色蛋白烯二炔抗生素發(fā)色團(tuán))，阿克拉霉素，放線菌素，authramycin，偶氮絲氨酸，博來霉素，放線菌素C，去甲柔紅霉素，洋紅霉素，嗜癌霉素，色霉素(chromomycinis)，放線菌素，柔紅霉素，地托比星，6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸，

(多柔比星)，嗎啉基-多柔比星，氰基嗎啉代-多柔比星，2-吡咯啉基-多柔比星和去氧多柔比星)，表柔比星，依索比星，伊達(dá)比星，麻西羅霉素，絲裂霉素例如絲裂霉素C，霉酚酸，諾加霉素，橄欖霉素，硫酸培洛霉素，波福霉素，嘌呤霉素，三鐵阿霉素，羅多比星，鏈黑菌素，鏈脲霉素，殺結(jié)核菌素，烏苯美司，新制癌菌素，佐柔比星；抗代謝產(chǎn)物例如氨甲喋呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；葉酸類似物例如二甲葉酸，氨甲喋呤，蝶羅呤，三甲曲沙；嘌呤類似物例如氟達(dá)拉濱，6-巰基嘌呤，硫咪嘌呤，硫鳥嘌呤；嘧啶類似物例如安西他濱，阿扎胞苷，6-氮尿苷，卡莫氟，阿糖胞苷，二脫氧尿苷，去氧氟尿苷，依諾他濱，氮尿苷；雄激素例如卡普睪酮，屈他雄酮丙酸鹽，環(huán)硫雄醇，美雄烷，睪內(nèi)酯；抗腎上腺藥例如氨魯米特，米托坦，曲洛司坦；葉酸補(bǔ)充劑例如亞葉酸；醋葡醛內(nèi)酯；醛磷酰胺糖苷；氨基乙酰丙酸；恩尿嘧啶；安吖啶；bestrabucil；比生群(bisantrene)；依達(dá)曲沙；defofamine；秋水仙胺；地吖醌；依氟鳥氨酸(elfornithine)；依利醋銨；埃坡霉素；依托格魯；硝酸鎵；羥基脲；蘑菇多糖；lonidainine；美登素類例如美登素和美登木素；丙脒腙；米托蒽醌；莫哌達(dá)醇；二胺硝吖啶(nitraerine)；噴司他丁；蛋氨氮芥；吡柔比星；洛索蒽醌；鬼臼酸；2-乙基異煙酰肼；普魯芐肼；

多糖復(fù)合物(JHS Natural Products，Eugene，OR)；丙亞胺；利索新；西佐喃；鍺螺胺；細(xì)交鏈孢菌酮酸；三乙撐亞胺苯醌；2，2′，2″-三氯三乙胺；單端孢霉烯族毒素類(尤其是T-2毒素，疣孢菌素(verracurin)A，桿孢菌素A和蛇形菌素)；尿烷；去乙酰長春酰胺；達(dá)卡巴嗪；甘露醇氮芥；二溴甘露醇；二溴衛(wèi)矛醇；雙溴丙基哌嗪；gacytosine；阿拉伯糖苷(“Ara-C”)；環(huán)磷酰胺；硫替派；紫杉類藥物，例如，

(太平洋紫杉醇；Bristol-Myers Squibb Oncology，Princeton，N.J.)、ABRAXANETM(不含Cremophor)、太平洋紫杉醇的白蛋白-工程化的納米顆粒制劑(AmericanPharmaceutical Partners，Schaumberg，Illinois)，和

(多西他賽(doxetaxel)；

-Poulenc Rorer，Antony，F(xiàn)rance)；氯氨布西；

(吉西他濱)；6-硫代鳥嘌呤；巰基嘌呤；氨甲喋呤；鉑類似物例如順鉑和卡鉑；長春花堿；依托泊苷(VP-16)；異環(huán)磷酰胺；米托蒽醌；長春花新堿；

(長春瑞賓)；諾安托；表鬼臼毒噻吩糖苷；依達(dá)曲沙；柔毛霉素；氨基蝶呤；卡培他濱(

)；依班膦酸鹽；CPT 11；局部異構(gòu)酶抑制劑RFS2000；二氟甲基鳥氨酸DMFO)；類視黃醇例如視黃酸；和上述任一項(xiàng)的可藥用鹽、酸和衍生物。
也包括在“化學(xué)治療劑”的定義中的是(i)起調(diào)節(jié)或抑制激素對(duì)腫瘤的作用的抗激素試劑例如抗雌激素劑和選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERMs)，包括，例如，它莫西芬(包括

檸檬酸它莫西芬)、雷諾昔酚、屈洛昔芬、4-羥基它莫西芬、曲沃昔芬、雷洛西芬(keoxifene)、LY117018、奧那司酮，和

(檸檬酸托瑞米芬)；(ii)抑制芳香酶的芳香酶抑制劑，其調(diào)節(jié)腎上腺中雌激素的產(chǎn)生，例如，4(5)-咪唑、氨魯米特、

(甲地孕酮)、

(依西美坦；輝瑞)、福美坦、法倔唑、

(伏氯唑)、

(來曲唑；Novartis)和

(阿那曲唑；AstraZeneca)；(iii)抗雄激素，例如氟他胺、尼魯米特、比卡魯胺、亮丙瑞林和戈舍瑞林；以及曲沙他濱(1，3-二氧戊烷核苷胞嘧啶類似物)；(iv)蛋白激酶抑制劑；(v)脂質(zhì)激酶抑制劑；(vi)反義寡核苷酸，尤其是抑制和異常細(xì)胞增殖有關(guān)的信號(hào)路徑中的基因表達(dá)的那些，例如，PKC-α、Ralf和H-Ras；(vii)核糖酶，例如VEGF表達(dá)抑制劑(例如

)和HER2表達(dá)抑制劑；(viii)疫苗，例如基因治療疫苗，例如，

和

rIL-2；局部異構(gòu)酶1抑制劑例如


rmRH；(ix)抗生成血管試劑，例如阿瓦斯丁(

Genentech)；和(x)上述任一項(xiàng)的可藥用鹽、酸和衍生物。
還包括在“化學(xué)治療劑”的定義中的是治療抗體，例如阿侖單抗(Campath)，阿瓦斯丁(

Genentech)；西妥昔單抗(

Imclone)；帕尼單抗(panitumumab)(

Amgen)、美羅華(

Genentech/Biogen Idec)、帕妥珠單抗(Pertuzumab)(

2C4，Genentech)、曲妥單抗(

Genentech)、托西莫單抗(Bexxar，Corixia)和抗體藥物共軛物，吉妥珠單抗奧唑米星(gemtuzumab ozogamicin)(

Wyeth)。
在與本發(fā)明的PI3K抑制劑的組合中，具有作為化學(xué)治療劑的治療潛力的人源化單克隆抗體包括阿侖單抗、阿泊珠單抗(apolizumab)、阿塞珠單抗(aselizumab)、atlizumab、bapineuzumab、貝伐單抗、比伐單抗mertansine、cantuzumab mertansine、西利珠單抗、塞妥珠單抗(certolizumab pegol)、cidfusituzumab、cidtuzumab、達(dá)(克)珠單抗、依庫珠單抗(eculizumab)、依法利珠(efalizumab)、依帕珠單抗、厄利珠單抗(erlizumab)、非維珠單抗、芳妥珠單抗(fontolizumab)、吉妥珠單抗奧佐米星(gemtuzumab ozogamicin)、inotuzumab奧佐米星、ipilimumab、拉貝珠單抗(labetuzumab)、林妥珠單抗、馬妥珠單抗(matuzumab)、美泊珠單抗、motavizumab、motovizumab、那他珠單抗(natalizumab)、尼妥珠單抗(nimotuzumab)、nolovizumab、numavizumab、ocrelizumab、奧馬珠單抗、帕利珠單抗、帕考珠單抗(pascolizumab)、pecfusituzumab、pectuzumab、帕妥珠單抗(Pertuzumab)、pexelizumab、ralivizumab、ranibizumab、reslivizumab、瑞利珠單抗(reslizumab)、resyvizumab、羅維珠單抗(rovelizumab)、盧利珠單抗(ruplizumab)、西羅珠單抗、希普利珠單抗(siplizumab)、索土珠單抗(sontuzumab)、tacatuzumab tetraxetan、tadocizumab、他利珠單抗(talizumab)、tefibazumab、托珠單抗(tocilizumab)、托利珠單抗(toralizumab)、曲妥珠單抗、tucotuzumab西莫白介素、tucusituzumab、umavizumab、烏珠單抗(urtoxazumab)，和維西珠單抗(visilizumab)。
給藥途徑 本發(fā)明的化合物可以通過任何適合于所治療病癥的途徑給藥。合適的途徑包括口服、腸胃外(包括皮下、肌注、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈注射、真皮內(nèi)、鞘內(nèi)和硬膜外)、透皮、直腸、經(jīng)鼻、局部(包括面頰和舌下)、陰道、腹腔內(nèi)、肺內(nèi)和鼻內(nèi)給藥。應(yīng)當(dāng)理解，優(yōu)選途徑可以隨例如受試者的病癥而變化。如果化合物是口服給藥的，可以將其與可藥用載體或賦形劑配制為丸劑、膠囊、片劑等。如果化合物是胃腸外給藥的，可以將其與可藥用腸胃外載體一起配制，并且以下面詳述的單位劑量可注射形式。
藥物制劑 為了使用本發(fā)明化合物治療(包括預(yù)防性治療)哺乳動(dòng)物(包括人)，通常按照標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)實(shí)踐將其配制為藥物組合物。按照本發(fā)明的該方面，提供了包含本發(fā)明化合物的藥物組合物。在某些實(shí)施方案中，藥物組合物包含式I或Ia化合物以及可藥用稀釋劑或載體。
本發(fā)明的藥物組合物以一定方式進(jìn)行配制、劑量化和給藥，即數(shù)量、濃度、進(jìn)度、歷程、載體和給藥途徑均符合良好的醫(yī)療實(shí)踐。在本文中考慮的因素包括所治療的具體病癥、所治療的具體哺乳動(dòng)物、個(gè)體患者的臨床病癥、病癥的病因、藥劑的遞送位點(diǎn)、給藥方法、給藥的日程表，和醫(yī)學(xué)專業(yè)人員已知的其它因素。所給藥的化合物的治療有效量取決于這種考慮，并且是預(yù)防、改善或治療病癥需要的最低量。本發(fā)明的化合物通常配制為藥物劑型，以提供容易控制的藥物劑量，并且能夠使患者適應(yīng)預(yù)定方案。
優(yōu)選地，本文使用的組合物是無菌的。尤其是，用于體內(nèi)給藥的制劑必須是無菌的。這種殺菌很容易實(shí)現(xiàn)，例如，通過無菌過濾膜進(jìn)行過濾。化合物通?？梢砸怨腆w組合物、冷凍干燥制劑或水溶液的形式儲(chǔ)藏。
可以制備本發(fā)明化合物的藥物制劑，用于各種給藥途徑和類型。例如，具有所需純度的本發(fā)明化合物可以任選與可藥用稀釋劑、載體、賦形劑或穩(wěn)定劑混合(Remington′s Pharmaceutical ScienceS(1980)第16版，Osol，A.Ed)，以冷凍干燥制劑、碾碎粉末或水溶液形式。可以通過在環(huán)境溫度，在合適的pH值下，和在所需純度下，與生理學(xué)可接受的載體(即在使用劑量和濃度下對(duì)于受試者是無毒的)一起混合進(jìn)行配制。制劑的pH值主要取決于化合物的具體用途和濃度，但可以在大約3至大約8的范圍。在pH值5的乙鹽酸緩沖液中進(jìn)行配制是合適的實(shí)施方案?？梢允褂贸Ｒ?guī)溶解和混合方法來制備制劑。例如，在一種或多種賦形劑的存在下，將本體藥物物質(zhì)(即本發(fā)明的化合物或化合物的穩(wěn)定化形式(例如，與環(huán)糊精衍生物或其它已知的絡(luò)合試劑的復(fù)合物))溶于合適溶劑中。
所使用的具體載體、稀釋劑或賦形劑取決于本發(fā)明化合物的應(yīng)用方法和目的。溶劑的選擇一般基于本領(lǐng)域技術(shù)人員認(rèn)為可安全(GRAS)給藥至哺乳動(dòng)物的溶劑。通常，安全溶劑是無毒的含水溶劑，例如水，以及其它可在水中溶解或互溶的無毒溶劑。合適的含水溶劑包括水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(例如PEG 400，PEG 300)等，和其混合物?？山邮艿南♂寗⑤d體、賦形劑和穩(wěn)定劑在使用劑量和濃度下對(duì)于受試者是無毒性的，并且包括緩沖液，例如磷酸鹽、檸檬酸鹽及其它有機(jī)酸；抗氧化劑，包括抗環(huán)血酸和甲硫氨酸；防腐劑(例如十八烷基二甲基芐基氯化銨；氯化六烴季銨；苯扎氯銨，芐索氯銨；酚，丁基或苯甲醇；對(duì)羥基苯甲酸烷基酯例如對(duì)羥基苯甲酸甲基酯或?qū)αu苯甲酸丙酯；兒茶酚；間苯二酚；環(huán)己醇；3-戊醇；和間甲酚)；低分子量(小于大約10個(gè)殘基)多肽；蛋白，例如血清清蛋白，凝膠，或免疫球蛋白；親水性聚合物例如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸例如甘氨酸，谷酰胺，天冬酰胺酸，組氨酸，精氨酸，或賴氨酸；單糖、二糖及其它碳水化合物，包括葡糖，甘露糖，或糊精；螯合劑例如EDTA；糖例如蔗糖，甘露糖醇，海藻糖或山梨糖醇；形成鹽的反離子，例如鈉；金屬配合物(例如，Zn-蛋白配合物)；和/或非離子型表面活性劑例如TWEENTM，PLURONICSTM或聚乙二醇(PEG)。制劑還可以包含一種或多種穩(wěn)定劑，表面活性劑，濕潤劑，潤滑劑，乳劑，懸浮劑，防腐劑，抗氧化劑，遮光劑，助流劑，加工助劑，色素，甜味劑，香料，調(diào)味劑及其它已知的添加劑，以提供具有精美外觀的藥物(即本發(fā)明的化合物或其藥物組合物)或幫助制備藥學(xué)產(chǎn)品(即藥物)?；钚运帉W(xué)組分還可以收集在微膠囊中，微膠囊是例如利用凝聚技術(shù)或利用界面聚合來制備的，例如羥甲基纖維素或凝膠-微膠囊和聚(甲基丙烯酸甲基酯)微膠囊，分別在膠體的給藥體系(例如脂質(zhì)體、白蛋白微球體、微乳狀液、納米顆粒和毫微囊劑)或在乳狀液中。這種技術(shù)是公開在Remington′s Pharmaceutical Sciences第16版，Osol，A.Ed.(1980)?！爸|(zhì)體”是由各種型式脂質(zhì)、磷脂和/或表面活性劑組成的小囊泡，其可給哺乳動(dòng)物有效遞送藥物(例如式I的化合物和任選其它的治療劑)。脂質(zhì)體的組分通常以雙層形式配置，與生物膜的脂質(zhì)結(jié)構(gòu)相似。
可以制備本發(fā)明化合物的緩釋制劑。緩釋制劑的合適例子包括含有式I或Ia化合物的固體疏水性聚合物的半滲透性基質(zhì)，該基質(zhì)是成形物品形式，例如膜或微膠囊。緩釋基質(zhì)的實(shí)例包括聚酯、水凝膠(例如聚(2-羥基乙基-甲基丙烯酸酯)或聚(乙烯醇))、聚交酯(美國專利3,773,919)、L-谷氨酸和γ-乙基-L-谷氨酸酯的共聚物、不可降解的亞乙基-乙烯基乙酸酯、可降解的乳酸-羥基乙酸共聚物例如LUPRON DEPOT((由乳酸-羥基乙酸共聚物和亮丙瑞林乙酸鹽組成的可注射的微球體)和聚D-(-)-3-羥丁酸。
本發(fā)明化合物的藥物組合物可以是無菌注射制劑形式，例如無菌可注射的含水或含油懸浮液。可以按照本領(lǐng)域已知的方法配制這種懸浮液，使用上述那些合適的分散或濕潤劑和懸浮劑。無菌注射制劑還可以是在無毒胃腸外可接受稀釋劑或溶劑中的無菌注射溶液或懸浮液，例如在1，3-丁二醇中的溶液，或制備成冷凍干燥粉末形式。在可接受的載體和溶劑之中，可以使用的是水、林格溶液和等滲氯化鈉溶液。此外，可以傳統(tǒng)地使用無菌的不揮發(fā)油作為溶劑或懸浮介質(zhì)。對(duì)于這種目的，可以使用任何柔和的不揮發(fā)油，包括合成的單或二甘油脂。此外，也可以在注射制劑中使用脂肪酸例如油酸。
適于腸胃外給藥的制劑包括含水和無水無菌注射液，其可以含有抗氧化劑、緩沖液、抑菌劑和溶質(zhì)，使制劑與預(yù)定受試者的血液等滲；和可以包含懸浮劑和增稠劑的含水和非水無菌的懸浮液。
本發(fā)明的組合物還可以是適于口服使用的形式(例如片劑、錠劑、硬或軟膠囊、水性或油性懸浮液、乳液、可分散性粉劑或顆粒、漿液或酏劑)，局部使用形式(例如乳膏、油膏、凝膠劑或水性或油性溶液或懸浮液)，吸入給藥形式(例如細(xì)分散的粉末或液體氣霧劑)，吹入給藥形式(例如細(xì)分散的粉末)。
片劑制劑的合適的可藥用賦形劑包括例如惰性稀釋劑，例如乳糖、碳酸鈉、磷酸鈣或碳酸鈣，造粒劑和崩解劑例如玉米淀粉或海藻酸；粘結(jié)劑例如淀粉；潤滑劑例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石粉；防腐劑例如對(duì)羥基苯甲酸乙基酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯，和抗氧化劑，例如抗環(huán)血酸。片劑制劑可以是無涂層的或涂層的，以改良它們的崩解作用和活性組分在胃腸道內(nèi)的隨后吸收，或改善它們的穩(wěn)定性和/或外觀，在兩種情況下都使用本領(lǐng)域熟知的常規(guī)包衣劑和方法。
口服使用的組合物可以是硬膠囊形式，在硬膠囊中，活性組分與惰性固體稀釋劑例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土混合，或軟膠囊形式，在其中，活性組分與水或油例如花生油、液體石蠟或橄欖油混合。
水性懸浮液一般含有細(xì)粉狀形式的活性組分以及一種或多種懸浮劑，例如羧甲基纖維素鈉，甲基纖維素，羥丙基甲基纖維素，海藻酸鈉，聚乙烯-吡咯烷酮，黃蓍膠和阿拉伯膠；分散劑或濕潤劑，例如卵磷脂或氧化烯烴與脂肪酸的縮合產(chǎn)物(例如硬脂酸聚氧乙烯酯)，或氧化乙烯與長鏈脂族醇的縮合產(chǎn)物，例如十七烷環(huán)氧丙烷鯨蠟醇，或氧化乙烯與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙烯山梨糖醇一油酸酯，或氧化乙烯與衍生自脂肪酸和己糖醇酸酐的偏酯的縮合產(chǎn)物，例如聚乙烯山梨糖醇酐單油酸酯。水性懸浮液還可以含有一種或多種防腐劑(例如對(duì)羥基苯甲酸乙基酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯)，抗氧化劑(例如抗環(huán)血酸)，著色劑，調(diào)味劑，和/或甜味劑(例如蔗糖、糖精或阿斯巴甜)。
通過將活性組分懸浮在植物油(例如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)或礦物油(例如液體石蠟)中，可以配制油性懸浮液。油性懸浮液還可以含有增稠劑，例如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇?？梢约尤胩鹞秳├缟厦媪谐龅哪切┖驼{(diào)味劑，以提供適口的口服制劑。通過加入抗氧化劑例如抗環(huán)血酸，可以保存這些組合物。
適于制備水懸浮液的可分散性粉劑和顆粒(通過加入水)一般含有活性組分以及分散劑或潤濕劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑。通過上述那些可以舉例說明合適的分散劑或濕潤劑和懸浮劑。還可以存在其它的賦形劑，例如甜味劑、調(diào)味劑和著色劑。
本發(fā)明的藥物組合物還可以是水包油乳劑形式。油相可以是植物油，例如橄欖油或花生油，或礦物油，例如液體石蠟或這些的混合物。合適的乳劑可以是例如天然存在的樹膠，例如阿拉伯膠或黃蓍膠，天然存在的磷脂，例如大豆，卵磷脂，衍生自脂肪酸和己糖醇酸酐的酯或偏酯(例如山梨糖醇酐單油酸酯)和所述偏酯與氧化乙烯的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯。乳液還可以含有甜味劑、調(diào)味劑和防腐劑。
漿液和酏劑可以與甜味劑例如丙三醇、丙二醇、山梨糖醇、阿斯巴甜或蔗糖一起配制，并且還可以含有緩和劑、防腐劑、調(diào)味劑和/或著色劑。
栓劑可以通過將活性組分與合適的無刺激性賦形劑(其在常溫下是固體，但在直腸溫度下是液體，因此在直腸中溶解，以釋放藥物)混合來制備。合適的賦形劑包括例如可可脂和聚乙二醇。適于陰道給藥的制劑可以以陰道栓、塞、乳膏、凝膠劑、軟膏、泡沫膠或噴霧劑的形式提供，除了含有活性組分之外，還含有本領(lǐng)域已知的合適載體。
局部制劑例如乳膏、油膏、凝膠劑和水性或油性溶液或懸浮液，一般可以使用本領(lǐng)域熟知的常規(guī)方法，通過將活性組分與常規(guī)的局部可接受的載體或稀釋劑一起配制來獲得。
透皮給藥的組合物可以是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的那些透皮皮膚貼劑的形式。
適于肺內(nèi)或經(jīng)鼻給藥的制劑具有例如0.1至500微米范圍內(nèi)的粒徑(包括介于0.1和500微米范圍中間的粒徑，增量微米為例如0.5、1、30微米、35微米等)，通過使其快速吸入鼻腔來給藥，或通過吸入口腔來給藥，以便達(dá)到肺泡囊中。合適的制劑包括活性組分的水性或油性溶液。適于氣霧劑或干粉給藥的制劑可以按照常規(guī)方法制備，并且可以與其它治療劑例如迄今用于治療或預(yù)防如下所述病癥的化合物一起遞送。
本申請(qǐng)的藥物組合物(或制劑)可以以各種方式包裝，這取決于給藥藥物所使用的方法。例如，用于分配的物品可以包括容器，在其中，藥物制劑以合適的形式放置。合適的容器對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是熟知的，并且包括材料例如瓶(塑料和玻璃)、小袋、安瓿、塑料袋、金屬筒等。容器還可以包括防干擾體系，以防止不慎重使用包裝的內(nèi)含物。此外，容器具有設(shè)置在其上的標(biāo)簽，標(biāo)簽描述容器的內(nèi)含物。標(biāo)簽還可以包括合適的警告。制劑還可以包裝在單劑量或多劑量容器中，例如密封的安瓿和小瓶，并且可以保存在冷凍干燥(凍干)條件下，在使用之前，只需要加入無菌的液體載體，例如水，用于立刻注射。臨時(shí)的注射液和懸浮液是用先前描述的種類的無菌粉末、顆粒和片劑制備的。優(yōu)選的單位劑量制劑是含有本文上面列舉的活性組分的日劑量或單位日亞劑量、或其合適部分的那些制劑。
本發(fā)明還提供了獸用組合物，其包含至少一種如上所定義的活性組分以及獸用載體。獸用載體是可用于給藥組合物目的的材料，并且可以是固體、液體或氣態(tài)物質(zhì)，其是惰性的或在獸醫(yī)領(lǐng)域是可接受的，并且與活性組分相容。這些獸用組合物可以胃腸外、口服給藥，或通過任何其它所需途徑給藥。
與一種或多種賦形劑組合來制備單一劑型的本發(fā)明化合物的量必定是變化的，這取決于治療的患者、病癥或癥狀的嚴(yán)重程度、給藥速率、化合物的配置和處方醫(yī)師的判斷。在一個(gè)實(shí)施方案中，向需要的哺乳動(dòng)物給藥合適數(shù)量的本發(fā)明化合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，給藥數(shù)量在每天大約0.001mg/kg體重至大約60mg/kg體重之間。在另一個(gè)實(shí)施方案中，給藥數(shù)量在每天0.5mg/kg體重至大約40mg/kg體重之間。在有些情況下，低于上述范圍下限的劑量水平可以可能是更合適的，而在其它情況下，可能使用大劑量，不會(huì)引起任何不良副作用，條件是，首先將這種大劑量分成幾個(gè)小劑量，用于全天給藥。對(duì)于給藥途徑和劑量方式的更加詳盡的資料，參見Comprehensive Medicinal Chemistry(Corwin Hansch；Chairman of EditorialBoard)，第5卷，第25.3章，Pergamon Press 1990，將其具體引入作為參考。
制品 在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，提供了含有可用于治療如上所述病癥的物質(zhì)的制品或“試劑盒”。在一個(gè)實(shí)施方案中，試劑盒包含容器，該容器包含本發(fā)明的化合物。合適的容器包括例如瓶、小瓶、注射器、泡罩包裝等。容器可以由各種材料例如玻璃或塑料形成。容器可以容納有效治療病癥的量的本發(fā)明化合物或其制劑，并且可以具有無菌的入口(例如，容器可以是靜脈內(nèi)溶液袋或具有塞子的小瓶，可以用皮下注射針刺穿)。
試劑盒可以在容器上或與容器相關(guān)地進(jìn)一步包括標(biāo)簽或包裝說明書。術(shù)語“包裝說明書”指的是通常包括在治療產(chǎn)品的商業(yè)包裝中的說明，其包括這種治療產(chǎn)品的有關(guān)指標(biāo)、用途、劑量、給藥、禁忌癥和/或涉及使用的警告的介紹。在一個(gè)實(shí)施方案中，標(biāo)簽或包裝說明書注明包含本發(fā)明化合物的組合物可用于治療例如AKT激酶介導(dǎo)的病癥。標(biāo)簽或包裝說明書還可以注明組合物可用于治療其它病癥。
在某些實(shí)施方案中，試劑盒適合于遞送固體口服形式的本發(fā)明化合物，例如片劑或膠囊。優(yōu)選，這種試劑盒包含許多單位劑量。這種試劑盒可以包含卡片，其上面表明了與它們所需的用途有關(guān)的劑量。這種試劑盒的實(shí)例是“泡罩包裝”。起泡填充物在包裝工業(yè)中為大家所熟知，并且廣泛地用于包裝藥物單位劑型。如果需要的話，可以提供記憶輔助工具，例如，以數(shù)目、字母或其它標(biāo)志形式，或用日程表，在可以給藥劑量的治療日程中標(biāo)明天數(shù)。
按照另一個(gè)實(shí)施方案，試劑盒可以包括(a)第一容器，具有含有在其中的本發(fā)明的化合物；和(b)第二容器，具有含有在其中的第二藥物制劑，其中第二種藥物制劑包括可用于治療AKT激酶介導(dǎo)病癥的第二化合物?；蛘撸噭┖锌梢赃M(jìn)一步包含第三容器，其包含可藥用的緩沖液例如抑菌注射用水(BWFI)、磷酸緩沖鹽水、林格溶液和葡萄糖溶液。其可以進(jìn)一步包含其它合乎需要的材料(從商品和使用者觀點(diǎn)來說)，包含其它緩沖液、稀釋劑、過濾器、針和注射器。
試劑盒可以進(jìn)一步包含給藥本發(fā)明化合物和第二藥物制劑(如果存在的話)和指示。例如，如果試劑盒包含第一組合物(包含本發(fā)明化合物和第二藥物制劑)，試劑盒可以進(jìn)一步包含同時(shí)、順序或單獨(dú)給藥需要的患者第一和第二藥物組合物的指示。
在其中試劑盒包含本發(fā)明的組合物和第二治療劑的某些其它實(shí)施方案中，試劑盒可以包含容器，其用于容納單獨(dú)的組合物，例如分開的瓶或分開的薄箔包裝，然而，單獨(dú)的組合物還可以包含在單個(gè)未分開的容器之內(nèi)。在某些實(shí)施方案中，試劑盒包含給藥單獨(dú)組分的用法說明書。當(dāng)優(yōu)選以不同劑型(例如口服和腸胃外)給藥的分開的組分時(shí)，是以不同的劑量間隔給藥的，或當(dāng)處方醫(yī)師想要確定聯(lián)用藥的單一組分的劑量時(shí)，試劑盒形式是特別有利的。
相應(yīng)地，本發(fā)明的其它方面提供了用于治療Akt激酶介導(dǎo)的病癥或疾病的試劑盒，其中所述試劑盒包含a)第一藥物組合物，其包含本發(fā)明的化合物或其可藥用鹽；和b)使用說明書。
在某些實(shí)施方案中，試劑盒還包含(c)第二藥物組合物，其中第二藥物組合物包含適于治療Akt激酶介導(dǎo)的病癥或疾病的第二化合物。在包含第二藥物組合物的某些實(shí)施方案中，試劑盒進(jìn)一步包含說明書，用于說明同時(shí)、順序或單獨(dú)給藥需要的患者所述第一和第二藥物組合物。在某些實(shí)施方案中，所述第一和第二藥物組合物包含在單獨(dú)的容器中。在其它實(shí)施方案中，所述第一和第二藥物組合物包含在相同容器中。
盡管式I或Ia化合物作為哺乳動(dòng)物的治療劑基本上是有價(jià)值的，但它們還可用于(根據(jù)需要)控制AKT蛋白激酶、酪氨酸激酶、其它絲氨酸/蘇氨酸激酶和/或雙重特異性激酶。因此，它們可用作藥理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)樣品，用于開發(fā)新的生物試驗(yàn)和尋找新的藥理學(xué)試劑。
本發(fā)明化合物可在體外、體內(nèi)或在細(xì)胞系中測試對(duì)于AKT蛋白激酶、酪氨酸激酶、其它絲氨酸/蘇氨酸激酶和/或雙重特異性激酶的活性。體外測試包括測定抑制激酶活性的測試。交替性體外測試可定量抑制劑與激酶結(jié)合的能力，并且可以通過在結(jié)合之前放射性標(biāo)記抑制劑、分離抑制劑/激酶復(fù)合物以及測定放射性同位素結(jié)合的量來測量，或通過運(yùn)行競爭性實(shí)驗(yàn)(其中用已知的放射性配體培養(yǎng)新的抑制劑)來測量。這些以及其它用于體外和細(xì)胞培養(yǎng)的測試對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是眾所周知的。
盡管已經(jīng)在某種程度上詳細(xì)地描述和說明了本發(fā)明，但應(yīng)當(dāng)理解，僅僅通過舉例完成了本公開，在不背離下文所要求的本發(fā)明的精神和范圍的條件下，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借助于各個(gè)部分的組合和排列進(jìn)行許多變化。
生物學(xué)實(shí)施例 AKT-1激酶測試 本發(fā)明所述化合物的活性可以通過下列激酶測試測定，該測試通過全長人重組體活性AKT-1(使用可商購IMAP試劑盒進(jìn)行熒光偏振)，測定熒光標(biāo)記的肽的磷酸化。
測試材料得自于IMAP AKT Assay Bulk Kit(產(chǎn)品#R8059)，MolecularDevices，Sunnyvale，CA。試劑盒材料包括IMAP反應(yīng)緩沖液(5x)。稀釋的1x IMAP反應(yīng)緩沖液包含10mM Tris-HCl(pH 7.2)、10mM MgCl2、0.1％BSA、0.05％NaN3。通常在使用之前即刻將DTT加至1mM的最終濃度。還包含IMAP結(jié)合緩沖液(5x)和IMAP結(jié)合試劑。將IMAP結(jié)合試劑按照1∶400稀釋到1x IMAP結(jié)合緩沖液中，由此制備結(jié)合溶液。
熒光素標(biāo)記的AKT底物(Crosstide)具有序列(F1)-GRPRTSSFAEG。在1xIMAP反應(yīng)緩沖液中配制20μM的儲(chǔ)備溶液。
使用的板包括Costar 3657(382孔，由聚丙烯制成，具有白色V形底)，用于化合物稀釋和制備化合物-ATP混合物。該測試板為PackardProxyPlateTM-384 F。
使用的AKT-1由使用PDK1和MAP激酶2活化的全長人重組體AKT-1制得。
為了進(jìn)行測試，在DMSO中制備10mM的化合物儲(chǔ)備溶液。將儲(chǔ)備溶液和對(duì)照化合物連續(xù)稀釋(1∶2，9次)到DMSO(10μL化合物+10μL DMSO)中，得到超過所需劑量范圍的50x稀釋液系列。接下來，將2.1-μL等份化合物(在DMSO中)轉(zhuǎn)移至Costar 3657板中，該板包含50μL的10.4μM ATP(在含有1mM DTT的1x IMAP反應(yīng)緩沖液中)。徹底混合之后，將2.5-μL等分樣品轉(zhuǎn)移至ProxyPlateTM-384 F板中。
測試通過加入2.5-μL等份溶液(含有200nM熒光標(biāo)記的肽底物和4nMAKT-1)來引發(fā)。將板在1000g下離心1分鐘，并在環(huán)境溫度下培養(yǎng)60分鐘。然后，通過加入15μL結(jié)合溶液來猝滅反應(yīng)，再次離心，在環(huán)境溫度下再培養(yǎng)30分鐘，然后在裝配的Victor 1420 Multilabel HTS Counter上讀數(shù)，測量熒光偏振。
在上述測試中，對(duì)實(shí)施例1-74的化合物進(jìn)行測試，發(fā)現(xiàn)具有小于10μM的IC50值。
制備實(shí)施例 為了示例性地說明本發(fā)明，包括下列實(shí)施例。然而，應(yīng)當(dāng)理解，這些實(shí)施例不是限制本發(fā)明的，而僅僅提出實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的方法。本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)認(rèn)識(shí)到，可以容易地修改所描述的化學(xué)反應(yīng)，以制備本發(fā)明的許多其它化合物，并且認(rèn)為制備本發(fā)明化合物的其它方法也包括在本發(fā)明范圍之內(nèi)。例如，利用對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的改進(jìn)，可以成功地進(jìn)行未舉例說明的按照本發(fā)明化合物的合成，例如，通過恰當(dāng)?shù)乇Ｗo(hù)干擾基團(tuán)，通過使用本領(lǐng)域已知的其它合適試劑(不是所描述的那些試劑)，和/或通過進(jìn)行反應(yīng)條件的常規(guī)改進(jìn)?；蛘撸J(rèn)為本文公開的或本領(lǐng)域已知的其它反應(yīng)用于制備本發(fā)明的其它化合物具有可應(yīng)用性。
在如下所述實(shí)施例中，除非另有陳述，所有的溫度以攝氏溫度列出。試劑是從商品供應(yīng)商例如Aldrich Chemical Company，Lancaster，TCI或Maybridge購買的，并且不用進(jìn)一步純化就可以使用，除非另有陳述。四氫呋喃(THF)、二氯甲烷(DCM)、甲苯和二噁烷是從Aldrich購買的，在可靠的密封瓶中，并且可以原樣使用。
下面列出的反應(yīng)一般在氮?dú)饣驓鍤獾恼龎合逻M(jìn)行，或用干燥管(除非另有說明)，在無水溶劑中，反應(yīng)燒瓶典型地配備橡膠隔塞，用于通過注射器引入底物和試劑。玻璃器皿是烘干的和/或加熱干燥的。
1H NMR波譜是在Varian儀器(在400MHz下操作)上記錄的。1H-NMR波譜是以CDCl3、CD3OD、D2O或d6-DMSO溶液獲得的(以ppm記錄)，使用四甲基硅烷(0.00ppm)或殘余溶劑(CDCl37.25ppm；CD3OD3.31ppm；D2O4.79ppm；d6-DMSO2.50ppm)作為參考標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)報(bào)道峰值多重性時(shí)，使用下列縮寫s(單峰)，d(雙峰)，t(三重峰)，m(多重峰)，br(寬峰)，dd(雙二重峰)，dt(雙三重峰)。偶合常數(shù)(當(dāng)給出時(shí))是以赫茲(Hz)報(bào)道。
實(shí)施例1
(R)-2-氨基-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽的制備 步驟1在0℃下，向巰基甘醇酸甲基酯(methyl thioglycolate)(45mL，503.2mmol)和哌啶(0.8mL)的混合物中緩慢地加入巴豆酸甲基酯(67mL，631.7mmol)。在十分鐘和二十分鐘之后，分兩部分再加入哌啶(0.8mL)。攪拌15小時(shí)之后，混合物通過真空蒸餾純化。在110-112℃下收集餾份，得到3-(2-甲氧基-2-氧代乙硫基)丁酸甲基酯(92g，89％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.75(s，3H)，3.70(s，3H)，3.38-3.44(m，3H)，2.71-2.46(m，2H)，1.36(d，J＝6.8Hz，3H)。
步驟2在三頸燒瓶中裝入NaOEt(21％，200mL，537mmol)的乙醇溶液。真空除去溶劑，向殘余物中加入甲苯(500mL)。將混合物加熱至回流，滴加3-(2-甲氧基-2-氧代乙硫基)丁酸甲基酯(92g，446mmol)。添加結(jié)束之后，將混合物回流4小時(shí)。冷卻后，將混合物倒入乙酸(200g)和碎冰(200g)的混合物中。將該混合物攪拌過夜，然后用乙酸乙酯(500mL)稀釋。分離有機(jī)相，用飽和Na2CO3和鹽水洗滌，然后干燥。將溶劑除去，得到粗品2-甲基-4-氧代-四氫噻吩-3-羧酸甲基酯(77.7g，99％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ11.23-11.15(d，1H)，7.27-7.16(m，2H)，4.33-4.12(m，2H)，3.95-3.68(m，2H)，3.60-3.15(m，1H)，2.60-2.20(m，1H)。
步驟3向甲脒HCl鹽(37.3g，463mmol)于乙醇(300mL)中的溶液中緩慢地加入NaOEt(21％，169mL，453mmol)。將該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，然后過濾。向該濾液中加入2-甲基-4-氧代-四氫噻吩-3-羧酸甲基酯(79g，453mmol)。將該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，然后回流過夜。冷卻后，除去溶劑，殘余物通過硅膠層析純化，用己烷/乙酸乙酯(2∶1-0∶1)-DCM/MeOH(20∶1)洗脫，得到5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-醇(36g，47％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ12.83(s，1H)，4.68(m，1H)，4.32-4.08(m，2H)，1.66(m，3H)。MS(APCI+)M+H]+169。
步驟4將于POCl3(100mL)中的5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-醇(10g，59.54mmol)加熱回流15分鐘。冷卻后，真空下除去過量POCl3。在0℃下，將殘余物溶于CH2Cl2(100mL)中，并加入飽和NaHCO3(400mL)。將該反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)。水相用DCM(3x250mL)萃取。合并有機(jī)相，干燥，并濃縮。殘余物通過硅膠層析純化，用己烷/乙酸乙酯(4∶1)洗脫，得到4-氯-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶(6g，54％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.80(s，1H)，4.68(m，1H)，4.44(m，1H)，4.13(d，J＝16.8Hz，2H)，1.68(d，J＝7.2Hz，3H)。
步驟5將4-氯-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶(4g，21mmol)和1-Boc-哌嗪(8.5g，46mmol)于NMP(20mL)中的溶液加熱至120℃過夜。冷卻后，混合物用乙酸乙酯(500mL)稀釋，用水(6x300mL)洗滌。干燥有機(jī)相，濃縮。殘余物通過硅膠層析純化，用己烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脫，得到4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(5g，69％)。粗產(chǎn)物通過在手性HPLC(ODH，250x20mm，100％乙腈，15mL/分鐘)上手性分離純化，得到(R)-4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(保留時(shí)間4.016分鐘)和(S)-4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(保留時(shí)間4.551分鐘)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.53(s，1H)，4.83(m，1H)，4.18(m，2H)，3.73-3.56(m，4H)，3.51-3.43(m，4H)，1.50(m，9H)。MS(APCI+)M+H]+337。
步驟6向(S)-4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(1.89g，5.62mmol)于DCM(40mL)中的溶液中加入HCl(4M的二噁烷溶液，8mL)。將該混合物在室溫下攪拌過夜。除去溶劑，得到(S)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶HCl鹽。MS(APCI+)M+H]+ 237。
步驟7將1，1，3，3-四甲基胍(2.11mL，16.8mmol)加入到0℃的2-(叔丁氧羰基)-2-(二甲氧基磷酰基)-乙酸甲基酯(5.00g，16.8mmol)于DCM(70mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌30分鐘，然后用注射器加入4-氯-3-氟苯甲醛(2.67g，16.8mmol)于DCM(10mL)中的溶液。將該反應(yīng)混合物攪拌10分鐘。然后將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，攪?小時(shí)。然后加入水，混合物用DCM萃取。將合并的萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，并濃縮。得到的固體從IPA中重結(jié)晶，得到(Z)-2-(叔丁氧羰基)-3-(4-氯-3-氟苯基)丙烯酸甲基酯(3.76g，67.8％產(chǎn)率)，為白色粉末(2批)。LCMS(APCI-)m/z328[M-H]-。
步驟8在8個(gè)Argonaut EndeavorTM反應(yīng)管的每一個(gè)中，將(Z)-2-(叔丁氧羰基)-3-(4-氯-3-氟苯基)丙烯酸甲基酯(200mg)和Rh-(R，R)-[Et-DuPhoS(COD)]OTF(大約4mg)溶于1∶1MeOH∶EtOAc(3mL；在使用前，用氮?dú)饷摎?小時(shí))中。在40psi H2下，將反應(yīng)混合物放在EndeavorTM上，在室溫下攪拌12小時(shí)。然后合并所有的反應(yīng)混合物，濃縮，得到(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-(4-氯-3-氟苯基)丙酸甲基酯(1.52g，94.4％產(chǎn)率)，為淺黃色固體，其不用進(jìn)一步純化就可在下一步中使用。
步驟9將LiOH-H2O(0.6246g，14.88mmol)加入到(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-(4-氯-3-氟苯基)丙酸甲基酯(1.646g，4.961mmol)于1∶1THF∶H2O(26mL)中的溶液中。將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，然后將其用水稀釋，用EtOAc洗滌。然后水層用固體KHSO4酸化，用DCM萃取。將合并的萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，濃縮，然后用DCM/己烷再濃縮，得到(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-(4-氯-3-氟苯基)丙酸(1.31g，83.10％產(chǎn)率)，為白色粉末。LCMS(APCI-)m/z 316[M-H]-。
步驟10向(S)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶二鹽酸鹽(50mg，0.16mmol)和(R)-2-(叔丁氧羰基)-3-(4-氯-3-氟苯基)丙酸(51mg，0.16mmol)于DCM(10mL)和三乙胺(2mL)中的溶液中加入HBTU(61mg，0.16mmol)。將該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。除去溶劑，并將殘余物溶于乙酸乙酯(100mL)中，用水(5x50mL)洗滌。將有機(jī)相干燥并濃縮，殘余物通過硅膠層析純化，用DCM/MeOH(50∶1)洗脫，得到(R)-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(86mg，85％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.55(s，1H)，7.30(m，2H)，7.01(d，J＝10Hz，1H)，6.94(d，J＝8Hz)，5.38(d，J＝8.8Hz，1H)，4.84-4.76(m，2H)，4.25-4.15(m，2H)，3.81(m，1H)，3.73(m，1H)，3.51(m，2H)，3.42(m，2H)，3.02-2.90(m，4H)，1.48(d，J＝6.8Hz)，1.42(d，J＝4Hz，9H)。MS(APCI+)M+H]+536。
步驟8在DCM(5mL)中，將(R)-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯用HCl(4M的二噁烷溶液，2mL)處理6小時(shí)，除去溶劑之后，得到(R)-2-氨基-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽。MS(APCI+)M+H]+ 436。
實(shí)施例2
2-(4-氯苯基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(吡咯烷-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽的制備 步驟1在0℃下，將2-(4-氯苯基)丙烯酸甲基酯(500mg，2.54mmol)在THF(6.0mL)中稀釋，并用吡咯烷(233uL，2.80mmol)處理。1小時(shí)之后，粗品LCMS表示反應(yīng)完成(LCMS(APCI+)M+H]+268.1；Rf2.13分鐘)。該溶液分別用水(2.0mL)和LiOH-H2O(320mg，7.63mmol)處理，將反應(yīng)攪拌過夜至LCMS分析指示反應(yīng)完成。將混合物分配在水和乙酸乙酯之間。將水溶液再次用乙酸乙酯洗滌，將有機(jī)物除去。水溶液用過量的3N HCl溶液(3.82mL)處理，用乙酸乙酯洗滌。真空下濃縮分離的水溶液，得到2-(4-氯苯基)-3-(吡咯烷-1-基)丙酸-HCl-3LiCl鹽，為白色固體(1.15g)。MS(APCI+)M+H]+ 254.1；Rf1.30分鐘。
步驟2向(S)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶二鹽酸鹽(1g，3.23mmol)和2-(4-氯苯基)-3-(吡咯烷-1-基)丙酸(2g，7.88mmol)于DCM(40mL)中的溶液中加入HBTU(1.5g，3.96mmol)和三乙胺(2.75mL，19.8mmol)。將該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。除去溶劑，并將殘余物溶于乙酸乙酯(200mL)中，用鹽水(5x100mL)和水(3x100mL)洗滌。干燥有機(jī)相，濃縮。殘余物通過硅膠層析純化，用乙酸乙酯-DCM/MeOH(20∶1)洗脫，得到2-(4-氯苯基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(吡咯烷-1-基)丙-1-酮(0.713g，46.7％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.47(s，1H)，7.38-7.28(m，4H)，4.75(m，1H)，4.54(m，1H)，4.17(m，2H)，3.88-3.25(m，14H)，2.12(m，4H)，1.43(m，3H)。MS(APCI+)M+H]+ 473。
步驟3在DCM(20mL)中，將2-(4-氯苯基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(吡咯烷-1-基)丙-1-酮用HCl(4M的二噁烷溶液，5mL)處理，得到2-(4-氯苯基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(吡咯烷-1-基)丙-1-酮HCl鹽。MS(APCI+)M+H]+473。
實(shí)施例3
2-(4-氯苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽的制備 步驟1向(S)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶二鹽酸鹽(0.5g，1.62mmol)和3-(叔丁氧羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.7g，2.05mmol)于DCM(40mL)中的溶液中加入HBTU(1.0g，2.64mmol)和三乙胺(1.38mL，9.88mL)。將該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。除去溶劑，并將殘余物溶于乙酸乙酯(200mL)中，用鹽水(5x100mL)和水(3x100mL)洗滌。干燥有機(jī)相，濃縮。殘余物通過硅膠層析純化，用己烷/乙酸乙酯(2∶1-0∶1)洗脫，得到2-(4-氯苯基)-3-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.63g，70％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.50(d，J＝5.6Hz，1H)，7.31-7.23(m，4H)，4.76(m，1H)，4.18(m，3H)，4.92-3.25(m，10H)，1.48(m，12H)，0.99(m，3H)，0.69(m，3H)。MS(APCI+)M+H]+561。
步驟2在DCM(20mL)中，將2-(4-氯苯基)-3-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯用HCl(4M的二噁烷溶液，6mL)處理6小時(shí)，得到2-(4-氯苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽。MS(APCI+)M+H]+461。
實(shí)施例4
4-氨基-2-(4-氯苯基)-4-甲基-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮二鹽酸鹽的制備 步驟1在0℃下，在氮?dú)庀?，?，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(33.68mL，225.2mmol)加入到2-(4-氯苯基)丙烯酸甲基酯(36.9g，187.7mmol)和2-硝基丙烷(20.23mL，225.2mmol)于CH3CN(500mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，并攪拌過夜。將該真空下濃縮，并進(jìn)行柱層析(20％EtOAc/己烷)，得到2-(4-氯苯基)-4-甲基-4-硝基戊酸甲基酯(52.9g，98.66％產(chǎn)率)，為無色油狀物。在40℃下，經(jīng)2分鐘將濃HCl(10mL)滴加到2-(4-氯苯基)-4-甲基-4-硝基戊酸甲基酯(10g，35.0mmol)和鋅(6.41mL，700mmol)于EtOH(250mL)中的懸浮液中。將該懸浮液在40℃下攪拌過夜。LCMS顯示所需產(chǎn)物和還原(但非環(huán)化)產(chǎn)物。將溫度升至50℃，保持8小時(shí)。通過LCMS發(fā)現(xiàn)沒有變化，因此用EtOAc(200mL)稀釋反應(yīng)混合物，過濾。真空下濃縮濾液，溶于EtOAc/EtOH(500mL，9∶1)中，用碳酸氫鹽溶液洗滌，用Na2SO4干燥，真空下濃縮。粗品含有2-3個(gè)化合物，然而，3-(4-氯苯基)-5，5-二甲基吡咯烷-2-酮(6.7g，產(chǎn)率85.6％)為主要產(chǎn)物。在下一步中原樣使用。LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+224.1；Rt2.90分鐘。
步驟2在-78℃下，在氮?dú)庀?，將雙(三甲基甲硅基)胺基鋰(36mL，36mmol)加入到3-(4-氯苯基)-5，5-二甲基吡咯烷-2-酮(6.7g，30mmol)于THF(200mL)中的攪拌溶液中。將溶液在-78℃下攪拌30分鐘。然后一次性加入焦碳酸二叔丁基酯(7.6mL，33mmol)于THF(30mL)中的溶液。將該溶液溫?zé)嶂潦覝?，攪拌過夜。將反應(yīng)物倒入0.5M HCl溶液中，用乙酸乙酯萃取兩次。將合并的有機(jī)部分用水洗滌，分離，用MgSO4干燥，過濾，并真空下濃縮，得到接近純的產(chǎn)物(過量Boc2O)，為無色油狀物。利用柱層析(20％EtOAc/己烷)，得到純的4-(4-氯苯基)-2，2-二甲基-5-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯。LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+224.1；Rt3.68分鐘。
步驟3在室溫下，將氫氧化鋰水合物(6.44mL，232mmol)加入到4-(4-氯苯基)-2，2-二甲基-5-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(7.5g，23.2mmol)于THF/MeOH/H2O(30mL/30mL/30mL)中的攪拌溶液中。將該反應(yīng)混合物攪拌過夜，然后真空下濃縮。將反應(yīng)混合物溶于水(200mL)中，用EtOAc(100mL)洗滌，用濃HCl酸化，并萃取到EtOAc(2X200mL)中。將產(chǎn)物用Na2SO4干燥，真空下濃縮。從甲苯中蒸發(fā)除去殘余的HCl，得到4-(叔丁氧羰基氨基)-2-(4-氯苯基)-4-甲基戊酸(5.0g，產(chǎn)率63.2％)，為白色固體。LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+242.0；Rt2.8分鐘。
步驟4向(S)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶二鹽酸鹽(0.22g，0.71mmol)和4-(叔丁氧羰基)-2-(4-氯苯基)-4-甲基戊酸(0.24g，0.71mmol)于DCM(20mL)中的溶液中加入HBTU(0.40g，1.10mmol)和三乙胺(1mL，7.1mmol)。將該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。除去溶劑，并將殘余物溶于乙酸乙酯(200mL)中，用鹽水(5x100mL)和水(3x100mL)洗滌。干燥有機(jī)相，濃縮。殘余物通過硅膠層析純化，用己烷/乙酸乙酯(2∶1-0∶1)洗脫，得到4-(4-氯苯基)-2-甲基-5-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-5-氧代戊-2-基氨基甲酸叔丁基酯(0.23g，58％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.51(d，J＝5.6Hz，1H)，7.29-7.20(m，4H)，4.75(m，1H)，4.67(s，1H)，4.24-4.09(m，2H)，4.02(m，1H)，3.80-3.30(m，7H)，2.68(m，1H)，1.97(m，1H)，1.48(d，J＝6.4Hz，3H)，1.42(s，9H)，1.29-1.21(m，6H)。MS(APCI+)M+H]+561。
步驟5在DCM(10mL)中，將4-(4-氯苯基)-2-甲基-5-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-5-氧代戊-2-基氨基甲酸叔丁基酯用HCl(4M的二噁烷溶液，4mL)處理6小時(shí)，得到4-氨基-2-(4-氯苯基)-4-甲基-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮二鹽酸鹽。MS(APCI+)M+H]+461。
實(shí)施例5
(R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽的制備 步驟1向4-氯-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶(5g，27mmol)和2-(S)-甲基-4-Boc-哌嗪(5.4g，27mmol)于NMP(20mL)中的溶液中加入DIEA(5mL，29mmol)。將混合物加熱至120℃，保持24小時(shí)。冷卻后，混合物用乙酸乙酯(500mL)稀釋，用水(6x200mL)洗滌。干燥有機(jī)相，得到(3S)-3-甲基-4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(6g，64％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.55(s，1H)，4.81(m，1H)，4.45(m，1H).4.18(m，3H)，3.90(m，1H)，3.75(m，1H)，3.44-3.29(m，2H)，2.96(m，1H)，1.52(m，12H)，1.14(d，J＝6.4Hz，3H)。MS(APCI+)M+H]+351。殘余物通過手性HPLC(OD 250X20mm；乙腈，2mL/分鐘)分離來純化。第一個(gè)峰(Rt＝3.93分鐘)是(S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯，第二個(gè)峰(Rt＝4.26分鐘)是(S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯。
步驟2向(S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(2g，5.71mmol)于DCM(20mL)中的溶液中加入HCl(4M的二噁烷溶液，6mL)。將該混合物在室溫下攪拌過夜。除去溶劑，得到(S)-5-甲基-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶(2.0g，99％)。MS(APCI+)M+H]+251。
步驟3向(S)-5-甲基-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶(0.5g，1.5mmol)和(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-(4-氯苯基)丙酸(0.46g，1.5mmol)于DCM(30mL)和三乙胺(5mL)中的溶液中加入HBTU(0.59g，1.5mmol)。將該混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。除去溶劑，并將殘余物溶于乙酸乙酯(200mL)中，用水(6x100mL)洗滌。干燥有機(jī)相，濃縮。殘余物通過硅膠層析純化，用DCM/MeOH(20∶1)洗脫，得到(R)-3-(4-氯苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(0.48g，70％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.52(s，1H)，7.28-7.09(m，4H)，5.43-5.18(m，1H)，4.86-4.71(m，2H)，4.41-4.33(m，1H)，4.26-4.10(m，2H)，3.95-3.74(m，1H)，3.25-2.65(m，2H)，1.46(m，12H)，1.25(m，3H)。MS(APCI+)[M+H]+532。
步驟4在DCM中，將(R)-3-(4-氯苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯用HCl(4M的二噁烷溶液，4mL)處理，得到(R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽。MS(APCI+)M+H]+432。
實(shí)施例6
(R)-2-氨基-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽的制備 步驟1向(S)-5-甲基-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶(0.5g，1.5mmol)和(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-(4-氯-3-氟苯基)丙酸(0.49g，1.5mmol)于DCM(30mL)和三乙胺(5mL)中的溶液中加入HBTU(0.59g，1.5mmol)。將該混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。除去溶劑，并將殘余物溶于乙酸乙酯(200mL)中，用水(6x100mL)洗滌。干燥有機(jī)相，濃縮。殘余物通過硅膠層析純化，用DCM/MeOH(20∶1)洗脫，得到(R)-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(0.5g，70％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.53(s，1H)，7.32-7.27(m，2H)，6.98(d，J＝9.6Hz，1H)，6.90(d，J＝8.4Hz，1H)，5.44-5.20(m，1H)，4.75-4.70(m，2H)，4.40-3.80(m，6H)，3.40-2.82(m，2H)，1.50-1.00(m，15H)。MS(APCI+)M+H]+550。
步驟2在DCM中，將(R)-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯用HCl(4M的二噁烷溶液，4mL)處理，得到(R)-2-氨基-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽。MS(APCI+)M+H]+450。
實(shí)施例7
(R)-2-氨基-3-(4-氟苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽的制備 步驟1向(S)-5-甲基-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶二鹽酸鹽(30mg，0.093mmol)和(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-(4-氟苯基)丙酸(26mg，0.093mmol)于DCM(6mL)和三乙胺(1mL)中的溶液中加入HBTU(35mg，0.093mmol)。將該混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。除去溶劑，殘余物通過硅膠層析純化，用己烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脫，得到(R)-3-(4-氟苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(26mg，52％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.51(s，1H)，7.30-6.90(m，5H)，5.37-5.13(m，1H)，4.90-4.60(m，2H)，4.40-4.02(m，4H)，4.00-3.70(m，2H)，3.40-2.60(m，2H)，1.45-1.00(m，15H)。MS(APCI+)M+H]+515。
步驟2在DCM(5mL)中，將(R)-3-(4-氟苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯用HCl(4M的二噁烷溶液，2mL)處理，得到(R)-2-氨基-3-(4-氟苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽(20mg，52％)。MS(APCI+)M+H]+415。
實(shí)施例8
(R)-2-氨基-3-(3，4-二氟苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽的制備 步驟1向(S)-5-甲基-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶二鹽酸鹽(30mg，0.093mmol)和(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-(3，4-二氟苯基)丙酸(28mg，0.093mmol)于DCM(6mL)和三乙胺(1mL)中的溶液中加入HBTU(35mg，0.093mmol)。將該混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。除去溶劑，殘余物通過硅膠層析純化，用己烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脫，得到(R)-3-(3，4-二氟苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(24mg，45％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.53(s，1H)，7.08-6.82(m，3H)，5.40-5.00(m，1H)，4.90-4.64(m，2H)，4.42-3.65(m，6H)，3.44-2.65(m，4H)，1.60-0.80(m，15H)。MS(APCI+)M+H]+534。
步驟2在DCM(5mL)中，將(R)-3-(3，4-二氟苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯用HCl(4M的二噁烷溶液，2mL)處理，得到(R)-2-氨基-3-(3，4-二氟苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽(18mg，45％)。MS(APCI+)M+H]+434。
實(shí)施例9
(2R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5-乙基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽的制備 步驟1在0℃下，向巰基甘醇酸甲基酯(10mL，106mmol)和2-戊烯酸甲基酯(12g，106mmol)于THF(200mL)中的溶液中分批加入NaH(60％，4.2g，106mmol)。將該混合物在室溫下攪拌6小時(shí)，然后用飽和NH4Cl(50mL)終止。水相用乙醚(3X100mL)萃取，將合并的有機(jī)相干燥，濃縮，得到2-乙基-4-氧代-四氫噻吩-3-羧酸甲基酯和5-乙基-3-氧代-四氫噻吩-2-羧酸甲基酯的混合物(20g，50％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ4.20(m，1H)，3.75(m，2H)，3.45-3.20(m，1H)，3.20-2.80(m，1H)，2.62-2.22(m，1H)，1.90-1.60(m，2H)，1.05-0.80(m，6H)。
步驟2向甲脒HCl鹽(10g，124mmol)于乙醇(100mL)中的溶液中緩慢地加入NaOEt(21％，46mL)。添加結(jié)束之后，將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘，然后過濾。將濾液加入到2-乙基-4-氧代-四氫噻吩-3-羧酸甲基酯和5-乙基-3-氧代-四氫噻吩-2-羧酸甲基酯(20g，106mmol)于乙醇(100mL)中的混合物中。將混合物回流過夜。除去溶劑，殘余物通過硅膠層析純化，用乙酸乙酯-DCM/MeOH(20∶1)洗脫，得到5-乙基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-醇和6-乙基-6，7-二氫噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-醇的混合物(4.5g，46％)。MS(APCI+)M+H]+183。
步驟3向5-乙基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-醇和6-乙基-6，7-二氫噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-醇(2.32g，12.8mmol)的混合物于1，2-二氯乙烷(50mL)和二異丙基乙胺(4mL)中的溶液中加入POCl3(4mL)，并將混合物回流過夜。除去溶劑，殘余物通過硅膠層析純化，用己烷/乙酸乙酯(9∶1-4∶1)洗脫，得到4-氯-5-乙基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶(0.49g，28％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.73(s，1H)，4.44(m，1H)，4.32-4.00(m，2H)，2.08(m，1H)，1.75(m，1H)，0.93(m，3H)。
步驟4向4-氯-5-乙基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶(0.3g，1.5mmol)于n-BuOH(30mL)中的溶液中加入1-Boc-哌嗪(0.8g，4.3mmol)，并將混合物回流30小時(shí)。除去溶劑，殘余物通過硅膠層析純化，用己烷/乙酸乙酯(4∶1-1∶1)洗脫，得到4-(5-乙基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(0.23g，44％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.54(s，1H)，4.61(d，J＝8.8Hz，1H)，4.10(m，2H)，3.80-3.60(m，8H)，2.02(m，1H)，1.60(m，1H)，1.49(s，9H)，0.95(m，3H)。MS(APCI+)[M+H]+351。
步驟5在DCM(10mL)中，將4-(5-乙基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯用HCl(4M的二噁烷溶液，3mL)處理，得到5-乙基-4-(哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶二鹽酸鹽(0.21g，99％)。MS(APCI+)[M+H]+251。
步驟6向5-乙基-4-(哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶二鹽酸鹽(50mg，0.15mmol)和(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-(4-氯苯基)丙酸(46mg，0.15mmol)于DCM(10mL)和三乙胺(1mL)中的溶液中加入HBTU(59mg，0.15mmol)。將該混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。除去溶劑，殘余物通過硅膠層析純化，用DCM/乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到(R)-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5-乙基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(50mg，60％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.53(s，1H)，7.26-7.14(m，4H)，5.36(m，1H)，4.82(m，1H)，4.62(m，1H)，4.14(m，1H)，3.80-2.90(m，8H)，1.94(m，1H)，1.68(m，1H)，1.54(m，1H)，1.42(s，9H)，0.94(m，3H)。MS(APCI+)M+H]+533。
步驟7在DCM(3mL)中，將(R)-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5-乙基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯用HCl(4M的二噁烷溶液，2mL)處理，得到(2R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5-乙基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽。MS(APCI+)[M+H]+433。
實(shí)施例10
(2R)-2-氨基-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-(5-乙基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽的制備 步驟1向5-乙基-4-(哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶二鹽酸鹽(50mg，0.15mmol)和(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-(4-氯-3-氟苯基)丙酸(49mg，0.15mmol)于DCM(10mL)和三乙胺(1mL)中的溶液中加入HBTU(59mg，0.15mmol)。將該混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。除去溶劑，殘余物通過硅膠層析純化，用DCM/乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到(R)-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-(5-乙基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(80mg，90％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.54(s，1H)，7.40-6.90(m，3H)，5.36(m，1H)，4.82(m，1H)，4.65(m，1H)，4.12(m，1H)，3.90-3.18(m，8H)，3.04-2.89(m，2H)，1.95(m，1H)，1.57(m，1H)，1.42(s，9H)，0.94(m，3H)。MS(APCI+)M+H]+551。
步驟2在DCM(3mL)中，將(R)-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-(5-乙基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯用HCl(4M的二噁烷溶液，2mL)處理，得到(2R)-2-氨基-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-(5-乙基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽。MS(APCI+)M+H]+451。
實(shí)施例11
(R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽的制備 步驟1向甲脒HCl鹽(3.70g，46.0mmol)于乙醇(200mL)中的溶液中加入NaOEt的乙醇溶液(21％重量，17.2mL，46.0mmol)。將該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。加入4-氧代四氫噻吩-3-羧酸乙基酯(8.0g，46.0mmol)。將該混合物在室溫下攪拌4小時(shí)，然后回流過夜。冷卻后，除去溶劑，殘余物用少量的水和CH2Cl2洗滌，得到5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-醇，為淺棕色固體(2.5g，35％)。1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ12.59(s，1H)，8.13(s，1H)，4.12(s，2H)，3.96(s，2H)。MS(APCI+)M+H]+155。
步驟2向5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-醇(0.50g，3.2mmol)于DCE(50mL)溶液中加入DIEA(0.42g，3.2mmol)和POCl3(1.5g，9.8mmol)。將混合物回流過夜。冷卻后，除去溶劑，對(duì)殘余物進(jìn)行硅膠層析，用己烷/乙酸乙酯(4∶1)洗脫，得到4-氯-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶(0.45g，80％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.84(s，1H)，4.37(s，2H)，4.27(s，2H)。
步驟3將4-氯-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶(2.0g，11.6mmol)和1-Boc-哌嗪(5.0g，26.8mmol)于異丙醇(50mL)中的混合物回流12小時(shí)。除去溶劑，對(duì)殘余物進(jìn)行硅膠層析，用己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到4-(5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(3.3g，89％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.49(s，1H)，4.68(m，1H)，4.25(s，2H)，4.16(s，2H)，1.49(s，9H)。MS(APCI+)M+H]+323。
步驟4向4-(5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(0.41g，1.3mmol)于CH2Cl2(20mL)中的溶液中加入HCl(4M的二噁烷溶液，5mL)。將該混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。除去溶劑，得到4-(哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶HCl鹽(0.28g，99％)。MS(APCI+)M+H]+223。
步驟5向4-(哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶(0.28g，1.3mmol)于CH2Cl2(20mL)中的溶液中加入三乙胺(5mL)和(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-(4-氯苯基)丙酸(0.38g，1.3mmol)。攪拌30分鐘之后，加入HBTU(0.57g，1.5mmol)。將該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。除去溶劑，對(duì)殘余物進(jìn)行硅膠層析，用己烷/乙酸乙酯(1∶1)，得到(R)-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(0.62g，98％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.49(s，1H)，5.38-5.35(m，1H)，3.70-3.50(m，6H)，3.27-3.13(m，2H)，2.98-2.92(m，2H)，1.42(s，9H)。MS(APCI+)M+H]+505。
步驟6向(R)-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(30mg，0.06mmol)于CH2Cl2(10mL)中的溶液中加入HCl(4M的二噁烷溶液，2mL)。將該混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。除去溶劑，得到(R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽(30mg，99％)。MS(APCI+)M+H]+405。
實(shí)施例12
(R)-2-氨基-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽的制備 步驟1向(R)-4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(按照實(shí)施例1步驟1-5制備)(1.05g，3.12mmol)于CH2Cl2(20mL)中的溶液中加入HCl(4M的二噁烷溶液，4mL)。將該混合物在室溫下攪拌過夜。除去溶劑，得到(R)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶HCl鹽(0.74g，99％)。MS(APCI+)M+H]+237。
步驟2向(R)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶二鹽酸鹽(30mg，0.097mmol)和(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-(4-氯-3-氟苯基)丙酸(31mg，0.097mmol)于CH2Cl2(5mL)和三乙胺(1mL)中的溶液中加入HBTU(37mg，0.097mmol)。將該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。除去溶劑，并將殘余物溶于乙酸乙酯(100mL)中，用水(5x50mL)洗滌。干燥有機(jī)相，濃縮。殘余物進(jìn)行硅膠層析，用CH2Cl2/MeOH(50∶1)洗脫，得到(R)-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(44mg，85％)。MS(APCI+)M+H]+536。
步驟3在CH2Cl2(5mL)中，將(R)-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯用HCl(4M的二噁烷溶液，2mL)處理6小時(shí)，除去溶劑之后，得到(R)-2-氨基-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽。MS(APCI+)M+H]+436。
實(shí)施例13
2-(4-氟苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽的制備 步驟1將2-(4-氟苯基)乙酸甲基酯(5.0g，29.73mmol)、NaOMe(0.08031g，1.487mmol)和多聚甲醛(paraformaldehyde)(0.9374g，31.22mmol)溶于/懸浮在200mL DMSO中，并在環(huán)境溫度下攪拌過夜。反應(yīng)通過添加1000mL冰冷卻的水終止。反應(yīng)用HCl溶液中和，水層用乙酸乙酯萃取。將合并的有機(jī)層用水洗滌兩次，用鹽水洗滌一次，分離，用MgSO4干燥，過濾，真空下濃縮，得到粗產(chǎn)物，為黃色油狀物。利用硅膠柱層析，用25∶75己烷∶乙酸乙酯洗脫，得到2-(4-氟苯基)-3-羥基丙酸甲基酯(3.0g，產(chǎn)率50.91％)，為無色油狀物。
步驟2在0℃下，在氮?dú)庀?，將甲磺酰?1.230mL，15.89mmol)和TEA(4.642mL，33.30mmol)加入到2-(4-氟苯基)-3-羥基丙酸甲基酯(3g，15.14mmol)于THF(150mL)中的攪拌溶液中。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，并在室溫下攪?天。將得到的懸浮液用Et2O(200mL)稀釋，過濾，真空下濃縮，得到含有中間體化合物2-(4-氟苯基)丙烯酸甲基酯的無色油狀物。1H NMR(CDCl3，400MHz)7.39(dd，J 8.4和5.4Hz，2H)，7.04(app.t，J 8.6Hz，2H)，6.36(s，1H)，5.87(s，1H)，3.83(s，1H.)。將2-(4-氟苯基)丙烯酸甲基酯溶于THF(150mL)中，用異丙胺(6.446mL，75.68mmol)處理。將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，用EtOAc(200mL)稀釋，用飽和碳酸氫鹽水溶液(100mL)洗滌，用Na2SO4干燥，真空下濃縮，得到純的2-(4-氟苯基)-3-(異丙基氨基)丙酸甲基酯(3.6g，產(chǎn)率99.39％)。LCMS(APCI+)M+H]+240。
步驟3在室溫下，將粗品2-(4-氟苯基)-3-(異丙基氨基)丙酸甲基酯(3.6g，15.04mmol)溶于100mL DCM中，并用Boc2O(4.148mL，18.05mmol)處理。溶液劇烈鼓泡5分鐘，攪拌過夜至TLC分析反應(yīng)完成。將溶液真空下濃縮至油狀物，然后再溶于50mL THF中。將溶液用水(20mL)和LiOH-H2O(3.157g，75.22mmol)處理，得到不透明溶液。將該混合物在室溫下攪拌過夜。真空下濃縮反應(yīng)混合物，用水(100mL)稀釋，用乙醚(2X100mL)洗滌。水溶液用1M HCl溶液處理，直到pH值2-3為止，然后用乙酸乙酯(3X100mL)萃取。合并有機(jī)層，用Na2SO4干燥，過濾，真空下濃縮，得到3-(叔丁氧羰基)-2-(4-氟苯基)丙酸(4.8g，產(chǎn)率98.06％)。LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+226。
步驟4在室溫下，將DIPEA(0.089mL，0.51mmol)加入到(S)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶二鹽酸鹽(40mg，0.13mmol)，3-(叔丁氧羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氟苯基)丙酸(50mg，0.15mmol)和O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽(58mg，0.15mmol)于DCM(10mL)中的攪拌懸浮液中。將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4小時(shí)，用EtOAc稀釋，用飽和碳酸氫鹽水溶液、然后1N HCl洗滌。用Na2SO4干燥合并的有機(jī)層，真空下濃縮。殘余物通過硅膠層析(75％EtOAc/己烷)純化，得到2-(4-氟苯基)-3-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯(50mg，產(chǎn)率72％)，為2個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體的混合物。LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+444。
步驟5在室溫下，將HCl(4N的二噁烷溶液)加入到2-(4-氟苯基)-3-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯(50mg，0.092mmol)于Et2O(4mL)和DCM(0.5mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。將反應(yīng)混合物真空下濃縮。將殘余物溶于DCM(1mL)中，用Et2O(15mL)沉淀，在氮?dú)庀逻^濾固體，得到2-(4-氟苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽(30mg，產(chǎn)率63％)，為2個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體的混合物。LCMS(APCI+)M+H]+444。
實(shí)施例14
2-(3，4-二氟苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽的制備 步驟1按照實(shí)施例13的步驟1-3的方法，從2-(4-氟苯基)乙酸甲基酯起始，制備3-(叔丁氧羰基(異丙基)氨基)-2-(3，4-二氟苯基)丙酸。LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+244。
步驟2在室溫下，將DIPEA(0.14mL，0.81mmol)加入到(S)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶二鹽酸鹽(50mg，0.16mmol)，3-(叔丁氧羰基(異丙基)氨基)-2-(3，4-二氟苯基)丙酸(111mg，0.32mmol)和O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽(74mg，0.19mmol)于DCM(10mL)中的攪拌懸浮液中。將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4小時(shí)，用EtOAc稀釋，用飽和碳酸氫鹽水溶液、然后1N HCl洗滌。用Na2SO4干燥合并的有機(jī)層，真空下濃縮。殘余物通過硅膠層析(75％EtOAc/己烷)純化，得到2-(3，4-二氟苯基)-3-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯(50mg，產(chǎn)率55％)，為2個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體的混合物。LCMS(APCI+)M+H]+562。
步驟3在室溫下，將HCl(4N的二噁烷溶液，5mL)加入到2-(3，4-二氟苯基)-3-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯(50mg，0.089mmol)于Et2O(4mL)和DCM(1mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。將反應(yīng)混合物真空下濃縮。將殘余物溶于DCM(1mL)中，用Et2O沉淀，在氮?dú)庀逻^濾，得到2-(3，4-二氟苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽(38mg，產(chǎn)率80％)，為2個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體的混合物。LCMS(APCI+)M+H]+462。
實(shí)施例15
(S)-2-(4-氯苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽和(R)-2-(4-氯苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽的制備 步驟1將2-(4-氯苯基)-3-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯(按照實(shí)施例3的步驟1制備)在Chiralcel OD柱(Chiral Technologies，West Chester，PA)上分離，使用10％EtOH/己烷作為流動(dòng)相。第一個(gè)洗脫的峰是(R)-2-(4-氯苯基)-3-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯；第二個(gè)洗脫的峰是(S)-2-(4-氯苯基)-3-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯。
步驟2向(S)-2-(4-氯苯基)-3-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯(93mg，0.17mmol)于DCM(10mL)中的溶液中加入HCl(4M，2mL)。將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌6小時(shí)，然后除去溶劑，得到(S)-2-(4-氯苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽(76mg，100％)。LCMS(APCI+)M+H]+460和462。
步驟3向(R)-2-(4-氯苯基)-3-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯(11mg，0.020mmol)于DCM(10mL)中的溶液中加入HCl(4M，2mL)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌6小時(shí)。除去溶劑，得到(S)-2-(4-氯苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽(9mg，100％)。LCMS(APCI+)M+H]+460和462。
1H NMR(CDCl3)8.51(1H，s)，7.31(2H，d，J 8.1Hz)，7.22(2H，d，J 8.2Hz)，4.77-4.72(1H，m)，4.17(2H，app q，J 14.1Hz)，4.00-3.94(2H，m)，3.69-3.64(1H，m)，3.59-3.45(4H，m)，3.36-3.24(2H，m)，2.89-2.76(2H，m)，2.70(1H，dd，J 11.3和5.1Hz)，2.17(1H，s)，1.46(3H，d，J 7.0Hz)，1.07(3H，d，J 6.3Hz)，1.03(3H，d，J 6.3Hz)。
實(shí)施例16
(2R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS418.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例17
2-(4-氯苯基)-1-(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(吡咯烷-1-基)丙-1-酮 LCMS472.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例18
(2R)-2-氨基-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS436.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例19
2-(4-氯苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS460.2[M+H+](APCI+)。
LCMS423.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例20
3-(1-氨基環(huán)丙基)-2-(4-氯苯基)-1-(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 步驟1在-78℃下，在氮?dú)庀?，將LHMDS(1.0M的THF溶液，13.1mL，13.1mmol)滴加到2-(4-氯苯基)乙酸甲基酯(2.20g，11.9mmol)于THF(40mL)中的攪拌溶液中。將得到的溶液在-78℃下攪拌1小時(shí)。滴加2-溴乙腈(2.50g，20.9mmol)于THF(16mL)中的溶液。將反應(yīng)在-78℃下攪拌1小時(shí)。然后將反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝?，并攪拌過夜。然后用1N HCl終止反應(yīng)。用EtOAc萃取混合物。用鹽水洗滌合并的有機(jī)層，干燥，濃縮。殘余物通過柱層析(己烷∶EtOAc，4∶1)純化，得到2-(4-氯苯基)-3-氰基丙酸甲基酯(2.60g，98％)，為白色固體。在室溫下，將EtMgBr于THF中的溶液(1.0M，8.0mL，8.0mmol)滴加到2-(4-氯苯基)-3-氰基丙酸甲基酯(0.894g，4.00mmol)和Ti(i-PrO)4(1.30mL，4.40mmol)于Et2O(20mL)中的攪拌溶液中。將該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)之后，加入水(4mL)，然后加入DCM(100mL)。將得到的沉淀過濾，用DCM洗滌。合并濾液，干燥，濃縮。殘余物通過柱層析(己烷∶EtOAc，1∶1)純化，得到6-(4-氯苯基)-4-氮雜螺[2.4]庚烷-5-酮(0.330g，37％)，為白色固體。LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+222.2；Rf2.44分鐘。
步驟2在-78℃下，在氮?dú)庀?，將LHMDS(1.0M的THF溶液，2.21mL，2.21mmol)滴加到6-(4-氯苯基)-4-氮雜螺[2.4]庚烷-5-酮(0.409g，1.84mmol)于THF(20mL)中的攪拌溶液中。將得到的溶液在-78℃下攪拌30分鐘。立刻全部加入Boc2O(0.443g，2.03mmol)于THF(5mL)中的溶液。將反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝?，并攪?小時(shí)。然后用1N HCl終止反應(yīng)，用EtOAc萃取。用鹽水洗滌合并的有機(jī)層，干燥，濃縮。殘余物通過柱層析(己烷∶EtOAc，4∶1)純化，得到6-(4-氯苯基)-5-氧代-4-氮雜螺[2.4]庚烷-4-羧酸叔丁基酯(0.470g，79％)。
步驟3將LiOH水合物(0.24g，5.7mmol)于水(2mL)中的溶液加入到6-(4-氯苯基)-5-氧代-4-氮雜螺[2.4]庚烷-4-羧酸叔丁基酯(0.46g，1.4mmol)于MeOH(2mL)和THF(2mL)中的攪拌溶液中。將反應(yīng)在室溫下攪拌過夜。真空下蒸發(fā)溶劑。將殘余物溶于水中，用乙醚(2X)萃取。水相用2N HCl酸化，并用EtOAc萃取。用鹽水洗滌合并的有機(jī)相，干燥，濃縮，得到3-(1-(叔丁氧羰基氨基)環(huán)丙基)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.41g，84％)，為白色固體。LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+240.0；Rf2.38分鐘。
步驟4將HBTU(0.031g，0.081mmol)加入到5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶二鹽酸鹽(0.025g，0.081mmol)和3-(1-(叔丁氧羰基)環(huán)丙基)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.027g，0.081mmol)于DCM(5mL)和TEA(1mL)中的溶液中。將該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。除去溶劑，殘余物進(jìn)行柱層析，用DCM/MeOH(50∶1)洗脫，得到3-(1-氨基環(huán)丙基)-2-(4-氯苯基)-1-(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮(30mg，81％)。LCMS(APCI+)[M+H]+558.1；Rf3.35分鐘。
步驟5將HCl的二噁烷溶液(4M，1mL)加入到1-(2-(4-氯苯基)-3-(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基)環(huán)丙基氨基甲酸叔丁基酯(10mg，0.018mmol)于DCM(3mL)中的溶液中。將該混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。除去溶劑，得到3-(1-氨基環(huán)丙基)-2-(4-氯苯基)-1-(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮的二HCl鹽(8.2mg，100％)。
LCMS458.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例21
4-氨基-2-(4-氯苯基)-4-甲基-1-(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮 LCMS460.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例22
2-(1-氨基環(huán)丙基)-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 步驟1將3-(4-氯苯基)-2-氰基丙烯酸乙基酯(6.2g，26mmol)于2-丙醇(80mL)中的溶液滴加到NaBH4(2.8g，74mmol)于2-丙醇(20mL)中的攪拌懸浮液中。將該混合物在室溫下攪拌過夜。用飽和NH4Cl除去過量NaBH4，真空除去大部分2-丙醇。將殘余物分配在EtOAc和水之間。水層用EtOAc萃取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥，濃縮。不用純化就可以使用粗品2-(4-氯芐基)-3-羥基丙腈。在0℃下，在氮?dú)庀拢瑢BS-Cl(2.77g，18.4mmol)于無水DMF(15mL)中的溶液加入到粗品2-(4-氯芐基)-3-羥基丙腈(3.00g，15.3mmol)和咪唑(4.18g，61.3mmol)于DMF(25mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝兀嚢柽^夜。將反應(yīng)混合物分配在醚和水之間。有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥，濃縮。殘余物通過柱(己烷∶EtOAc，30∶1)純化，得到3-(叔丁基二甲基硅氧基)-2-(4-氯芐基)丙腈(3.70g，78％)，為無色油狀物。
步驟2在室溫下，將EtMgBr的THF溶液(3.0M，8.0mL，24mmol)滴加到3-(叔丁基二甲基硅氧基)-2-(4-氯芐基)丙腈(3.7g，12mmol)和Ti(i-PrO)4(3.9mL，13mmol)于Et2O(50mL)中的攪拌溶液中。將該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)之后，立刻加入BF3OEt(3.0mL，24mmol)。將混合物再攪拌1小時(shí)。加入10％NaOH溶液(10mL)，然后加入DCM(300mL)。將得到的沉淀過濾，用DCM洗滌。合并濾液，干燥，濃縮。殘余物通過柱層析(30∶1 DCM∶MeOH)純化，得到1-(1-(叔丁基二甲基硅氧基)-3-(4-氯苯基)丙烷-2-基)環(huán)丙烷胺(2.6g，64％)，為無色油狀物。LCMS340.2(M+H)+(APCI+)；Rf3.17分鐘。
步驟3將1-(1-(叔丁基二甲基硅氧基)-3-(4-氯苯基)丙烷-2-基)環(huán)丙烷胺(2.6g，7.6mmol)溶于THF(60mL)中。加入Boc2O(2.0g，9.2mmol)，DMAP(93mg，0.76mmol)和三乙胺(1.6mL，12mmol)。將該混合物在室溫下攪拌過夜。蒸發(fā)溶劑，并將殘余物分配在EtOAc和水之間。分離有機(jī)相，用鹽水洗滌，干燥，濃縮。殘余物通過柱層析(己烷∶EtOAc，6∶1)純化，得到1-(1-(叔丁基二甲基硅氧基)-3-(4-氯苯基)丙烷-2-基)環(huán)丙基氨基甲酸叔丁基酯(2.0g，59％)。
步驟4將TBAF(2.80g，8.86mmol)加入到1-(1-(叔丁基二甲基硅氧基)-3-(4-氯苯基)丙烷-2-基)環(huán)丙基氨基甲酸叔丁基酯(1.95g，4.43mmol)于THF(80mL)中的攪拌溶液中。將該混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。將飽和NH4Cl溶液加入到反應(yīng)中。用乙醚萃取混合物。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥，濃縮。殘余物通過柱(己烷∶EtOAc，20∶1至4∶1)純化，得到1-(1-(4-氯苯基)-3-羥基丙烷-2-基)環(huán)丙基氨基甲酸叔丁基酯(1.25g，87％)，為白色固體。LCMS325.9[M+H+](APCI+)；Rf3.75分鐘。
步驟5在-15℃下，將三乙胺(2.14mL，15.4mmol)加入到1-(1-(4-氯苯基)-3-羥基丙烷-2-基)環(huán)丙基氨基甲酸叔丁基酯(1.00g，3.07mmol)于DCM(15mL)中的攪拌溶液中。將吡啶-三氧化硫絡(luò)合物(2.44g，15.4mmol)于DMSO(15mL)中的溶液一次性加入到上述溶液中。將該混合物在相同溫度下攪拌10分鐘，然后溫?zé)嶂?℃。在0℃下攪拌1小時(shí)之后，將混合物倒入冷鹽水溶液中，用乙醚萃取。合并的有機(jī)萃取物用10％檸檬酸和鹽水洗滌，干燥，濃縮。粗品1-(1-(4-氯苯基)-3-氧代丙-2-基)環(huán)丙基氨基甲酸叔丁基酯不用純化就可以在下一步中使用。LCMS323.7[M+H+](APCI+)；Rf3.77分鐘。
步驟6將1-(1-(4-氯苯基)-3-氧代丙-2-基)環(huán)丙基氨基甲酸叔丁基酯(3.06mmol)，2-甲基-2-丁烯(7.6mL，2.0M的THF溶液，15.3mmol)和KH2PO4(0.416g，3.06mmol)溶于t-BuOH(100mL)-水(30mL)中。在0℃下分批加入亞氯酸鈉(0.830g，9.17mmol)。將該混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，然后用10％檸檬酸酸化。用EtOAc萃取反應(yīng)。用鹽水洗滌合并的有機(jī)層，干燥，濃縮，得到2-(1-(叔丁氧羰基氨基)環(huán)丙基)-3-(4-氯苯基)丙酸，為白色固體。LCMS339.9[M+H+](APCI+)。
步驟7將HBTU(0.031g，0.081mmol)加入到5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶二鹽酸鹽(0.025g，0.081mmol)和氨基酸(0.027g，0.081mmol)于DCM(5mL)和TEA(1mL)中的溶液中。將該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。除去溶劑，殘余物進(jìn)行柱層析，用DCM/MeOH(50∶1)洗脫。將得到的產(chǎn)物在DCM(5mL)中用HCl(4M，2mL)處理6小時(shí)。除去溶劑，得到2-(1-氨基環(huán)丙基)-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮的二HCl鹽。
LCMS458.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例23
(2R)-2-氨基-3-(4-氟苯基)-1-(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS402.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例24
(2R)-2-氨基-3-(3，4-二氟苯基)-1-(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS420.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例25
2-(4-氯苯基)-3-(1-(二甲基氨基)環(huán)丙基)-1-(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS486.3[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例26
(4-(3-氯苯基)哌啶-4-基)(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)甲酮 步驟1將60％NaH(2.31g，57.7mmol)分2批加入到2-(3-氯苯基)乙腈(3.50g，23.1mmol)和15-冠-5(0.509g，2.31mmol)于DMF(80mL)中的0℃溶液中。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，同時(shí)攪拌35分鐘，然后冷卻至0℃。加入NaI(3.46g，23.1mmol)，然后用注射器加入現(xiàn)制的雙(2-氯乙基)氨基甲酸叔丁基酯(5.59g，23.1mmol)于DMF(10mL)中的溶液。將反應(yīng)混合物溫?zé)岬绞覝?，并攪拌過夜(16小時(shí))。將反應(yīng)混合物倒入冰飽和的NH4Cl中，用EtOAc萃取。將萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，濃縮。將粗品在硅膠上快速柱層析(Biotage 401，9∶1己烷∶EA，直到產(chǎn)物為止，然后用4∶1己烷∶EtOAc梯度洗脫)，得到4-(3-氯苯基)-4-氰基哌啶-1-羧酸叔丁基酯(5.91g，產(chǎn)率79.8％)，為黃色泡沫。LC/MS(APCI+)m/z 221[M-Boc+H]+。
步驟2將4-(3-氯苯基)-4-氰基哌啶-1-羧酸叔丁基酯(5.91g，18.42mmol)溶于濃HCl(153.5mL，1842mmol)中。將反應(yīng)混合物在回流下攪拌過周末。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并用乙醚洗滌。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮水溶液部分，在高真空管中干燥固體。將固體溶于水(35mL)，10％NaOH(29.47g，73.69mmol)和二噁烷(30mL)中。加入固體Boc2O(4.222g，19.34mmol)，將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜(14小時(shí))。將反應(yīng)混合物用水稀釋，用乙醚洗滌。水溶液部分用固體KHSO4酸化，然后用DCM萃取。將合并的萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，濃縮，得到1-(叔丁氧羰基)-4-(3-氯苯基)哌啶-4-羧酸(4.73g，產(chǎn)率75.56％)，為白色粉末。HPLC＞98％。LC/MS(APCI-)m/z 338[M-H]-。
步驟3將HBTU(0.07726g，0.2037mmol)加入到(R)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶二鹽酸鹽(0.030g，0.09701mmol)，1-(叔丁氧羰基)-4-(3-氯苯基)哌啶-4-羧酸(0.06593g，0.1940mmol)和DIEA(0.06759mL，0.3880mmol)于DCM(2.5mL)中的溶液中。將該反應(yīng)混合物攪拌過夜(18小時(shí))，然后加入飽和NaHCO3。用DCM萃取混合物，干燥(Na2SO4)萃取物，過濾，濃縮。將粗品在Biotage 12M上快速柱層析(用DCM除去DIEA，然后用2∶1至1∶1 DCM∶EA；快速洗脫頂部點(diǎn)[副產(chǎn)物]，然后第二點(diǎn)[產(chǎn)物])，得到(R)-4-(3-氯苯基)-4-(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯。將其溶于二噁烷(2mL)中，加入4M HCl/二噁烷(0.7275mL，2.910mmol)，引起緩慢的沉淀。將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜(18小時(shí))，然后濃縮至干。將固體溶于最小量的MeOH中，然后通過加入乙醚來研磨產(chǎn)物。得到的固體通過中等砂芯漏斗過濾來進(jìn)行分離(用氮?dú)鈮毫?，用乙醚沖洗，真空干燥，得到(R)-(4-(3-氯苯基)哌啶-4-基)(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)甲酮二鹽酸鹽(0.029g，產(chǎn)率56.31％)，為淺黃色粉末。
LCMS458.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例27
(R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS418.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例28
(R)-2-氨基-3-(4-氟苯基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS402.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例29
(R)-2-氨基-3-(3，4-二氟苯基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS420.2[M+H+](APCI+)。
LCMS423.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例30
2-(1-氨基環(huán)丙基)-2-(4-氯苯基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)乙酮 步驟1在0℃下，在氮?dú)庀?，將TBS-Cl(2.29g，15.2mmol)于無水DMF(12mL)中的溶液加入到2-(4-氯苯基)-3-羥基丙腈(2.30g，12.7mmol)和咪唑(3.45g，50.7mmol)于DMF(20mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，并攪拌過夜。將反應(yīng)混合物分配在乙醚和水之間。有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥，濃縮。殘余物通過柱(己烷∶EtOAc，30∶1)純化，得到3-(叔丁基二甲基硅氧基)-2-(4-氯苯基)丙腈(3.40g，91％)，為無色油狀物。在室溫下，將EtMgBr的THF溶液(3.0M，7.0mL，21mmol)滴加到3-(叔丁基二甲基硅氧基)-2-(4-氯苯基)丙腈(3.1g，10mmol)和Ti(i-PrO)4(3.4mL，11mmol)于Et2O(60mL)中的攪拌溶液中。將該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)之后，立刻加入BF3OEt(2.7mL，21mmol)。將混合物再攪拌1小時(shí)。加入10％NaOH溶液(10mL)，然后加入DCM(300mL)。將得到的沉淀過濾，用DCM洗滌。合并濾液，干燥，濃縮。殘余物通過柱層析(30∶1 DCM∶MeOH)純化，得到1-(2-(叔丁基二甲基硅氧基)-1-(4-氯苯基)乙基)環(huán)丙烷胺(2.3g，67％)，為無色油狀物。LCMS326.1[M+H+](APCI+)；Rf3.04分鐘。
步驟2將Boc2O(1.8g，8.5mmol)、三乙胺(1.5mL，11mmol)和DMAP(86mg，0.71mmol)加入到1-(2-(叔丁基二甲基硅氧基)-1-(4-氯苯基)乙基)環(huán)丙烷胺(2.3g，7.1mmol)于THF(50mL)中的攪拌溶液中。將該混合物在室溫下攪拌過夜。蒸發(fā)溶劑，并將殘余物分配在EtOAc和水之間。分離有機(jī)相，用鹽水洗滌，干燥，濃縮。殘余物通過柱層析(己烷∶EtOAc，6∶1)純化，得到1-(2-(叔丁基二甲基硅氧基)-1-(4-氯苯基)乙基)環(huán)丙基氨基甲酸叔丁基酯(2.1g，70％)。LCMS326.5[M-Boc+H+](APCI+)；Rf3.07分鐘。
步驟3將TBAF(2.8g，8.9mmol)加入到1-(2-(叔丁基二甲基硅氧基)-1-(4-氯苯基)乙基)環(huán)丙基氨基甲酸叔丁基酯(1.9g，4.5mmol)于THF(80mL)中的攪拌溶液中。將該混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。將飽和NH4Cl溶液加入到反應(yīng)中。用乙醚萃取混合物。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥，濃縮。殘余物通過柱(己烷∶EtOAc，20∶1至4∶1)純化，得到1-(1-(4-氯苯基)-2-羥基乙基)環(huán)丙基氨基甲酸叔丁基酯(1.1g，79％)，為白色固體。LCMS311.8[M+H+](APCI+)；Rf3.47分鐘。
步驟4在-15℃下，將三乙胺(0.45mL，3.2mmol)加入到1-(1-(4-氯苯基)-2-羥基乙基)環(huán)丙基氨基甲酸叔丁基酯(0.200g，0.641mmol)于DCM(3mL)中的攪拌溶液中。將吡啶-三氧化硫絡(luò)合物(0.510g，3.21mmol)于DMSO(3mL)中的溶液一次性加入到上述溶液中。將該混合物在相同溫度下攪拌10分鐘，然后加熱至0℃。在0℃下攪拌1小時(shí)之后，將混合物倒入冷鹽水溶液中，用乙醚萃取。合并的有機(jī)萃取物用10％檸檬酸和鹽水洗滌，干燥，濃縮。粗品1-(1-(4-氯苯基)-2-氧代乙基)環(huán)丙基氨基甲酸叔丁基酯不用純化就可以在下一步中使用。LCMS309.8[M+H+](APCI+)；Rf3.62分鐘。
步驟5將1-(1-(4-氯苯基)-2-氧代乙基)環(huán)丙基氨基甲酸叔丁基酯(0.64mmol)，2-甲基-2-丁烯(1.6mL，2.0M的THF溶液，3.2mmol)和KH2PO4(0.087g，0.64mmol)溶于t-BuOH(20mL)-水(6mL)中。在0℃下分批加入亞氯酸鈉(0.174g，1.93mmol)。將該混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，然后用10％檸檬酸酸化。用EtOAc萃取反應(yīng)。將合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥，濃縮，得到2-(1-(叔丁氧羰基氨基)環(huán)丙基)-2-(4-氯苯基)乙酸(0.19g，91％)，為無色漿液，其不用進(jìn)一步純化就可以用于酰胺偶合。LCMS325.8[M+H+](APCI+)；Rf3.31分鐘。
步驟6將HBTU(0.097mmol，47mg)加入到(S)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶二鹽酸鹽(30mg，0.097mmol)和2-(1-(叔丁氧羰基氨基)環(huán)丙基)-2-(4-氯苯基)乙酸(0.097mmol)于DCM(5mL)和TEA(5mL)中的溶液中。將該混合物在室溫下攪拌6小時(shí)。除去溶劑，殘余物進(jìn)行柱層析，用DCM/MeOH(50∶1)洗脫，得到1-(1-(4-氯苯基)-2-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-2-氧代乙基)環(huán)丙基氨基甲酸叔丁基酯。LCMS544.0[M-Boc+H+](APCI+)；Rf3.49分鐘。使用先前描述的方法，將1-(1-(4-氯苯基)-2-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-2-氧代乙基)環(huán)丙基氨基甲酸叔丁基酯脫保護(hù)，得到2-(1-氨基環(huán)丙基)-2-(4-氯苯基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)乙酮。Rf2.24分鐘。
LCMS444[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例31
2-(1-氨基環(huán)丙基)-3-(4-氯苯基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS458.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例32
3-(1-氨基環(huán)丙基)-2-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS476.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例33
4-氨基-2-(4-氟苯基)-4-甲基-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮 LCMS444.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例34
4-氨基-2-(4-氯-3-氟苯基)-4-甲基-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮 LCMS478.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例35
4-氨基-2-(3，4-二氟苯基)-4-甲基-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮 LCMS462.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例36
(R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS418.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例37
(R)-2-氨基-3-(4-氟苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS402.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例38
(R)-2-氨基-3-(3，4-二氟苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS420.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例39
2-(4-氯苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS460.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例40
2-(4-氯苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(吡咯烷-1-基)丙-1-酮 LCMS472.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例41
2-(1-氨基環(huán)丙基)-2-(4-氯苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)乙酮 LCMS444[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例42
2-(1-氨基環(huán)丙基)-3-(4-氯苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS458.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例43
3-(1-氨基環(huán)丙基)-2-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS476.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例44
4-氨基-2-(4-氯苯基)-4-甲基-1-(4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮 LCMS460.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例45
4-氨基-2-(4-氟苯基)-4-甲基-1-(4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮 LCMS444.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例46
4-氨基-2-(4-氯-3-氟苯基)-4-甲基-1-(4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮 LCMS478.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例47
4-氨基-2-(3，4-二氟苯基)-4-甲基-1-(4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮 LCMS462.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例48
(4-(4-氯苯基)-1-甲基哌啶-4-基)(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)甲酮 LCMS472.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例49
(S)-(4-(3-氯苯基)哌啶-4-基)(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)甲酮 LCMS458.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例50
(S)-(4-(4-氯苯基)哌啶-4-基)(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)甲酮 LCMS458.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例51
(R)-(4-(3-氯苯基)哌啶-4-基)(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)甲酮 LCMS458.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例52
(R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS432.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例53
2-(4-氯苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(吡咯烷-1-基)丙-1-酮 LCMS486.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例54
2-(4-氯苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(吡咯烷-1-基)丙-1-酮 LCMS486.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例55
2-(4-氯苯基)-3-(異丙基氨基)-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS474.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例56
4-氨基-2-(4-氯苯基)-4-甲基-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮 LCMS474.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例57
4-氨基-2-(4-氯-3-氟苯基)-4-甲基-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮 LCMS492.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例58
4-氨基-2-(4-氯-3-氟苯基)-4-甲基-1-((S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮 LCMS450.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例59
2-(4-氯苯基)-3-(異丙基氨基)-1-((S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS474.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例60
4-氨基-2-(4-氯苯基)-4-甲基-1-((S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮 LCMS474.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例61
4-氨基-2-(4-氯-3-氟苯基)-4-甲基-1-((S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮 LCMS492.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例62
(R)-3-(4-(芐氧基)苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-2-(甲基氨基)丙-1-酮 LCMS486.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例63
(S)-4-氨基-2-(4-氯苯基)-4-甲基-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮 LCMS460.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例64
(R)-4-氨基-2-(4-氯苯基)-4-甲基-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮 LCMS460.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例65
2-(4-氯-3-氟苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS478.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例66
3-(異丙基氨基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-2-對(duì)甲苯基丙-1-酮 LCMS440.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例67
(R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-(4-(6，6-二氧代-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 步驟1將m-CPBA(0.10g，0.60mmol)加入到(R)-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(200mg，0.40mmol)于CH2Cl2(20mL)中的溶液中。將該混合物在室溫下攪拌2小時(shí)?；旌衔镉蔑柡蚇aHCO3溶液洗滌，除去溶劑，得到亞砜和砜的混合物，將其通過柱層析(20∶1 CH2Cl2∶甲醇)分離，得到(R)-3-(4-氯苯基)-1-(4-(6，6-二氧代-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(80mg，38％)和(R)-3-(4-氯苯基)-1-(4-(6-氧代-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(80mg，39％)。
步驟2將HCl的二噁烷溶液(4M，2mL)加入到3-(4-氯苯基)-1-(4-(6，6-二氧代-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸酯(58mg，0.11mmol)于DCM(10mL)中的溶液中。將該混合物在室溫下攪拌4小時(shí)，除去溶劑，得到(R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-(4-(6，6-二氧代-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽(47mg，100％)。LCMS436.0[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例68
(R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-(4-(6-氧代-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 將m-CPBA(77％，67mg，0.30mmol)加入到(R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮(120mg，0.30mmol)于DCM(10mL)和MeOH(1mL)中的溶液中。將該混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。除去溶劑，殘余物進(jìn)行柱層析，用DCM/MeOH(4∶1-1∶1)洗脫，得到(R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-(4-(6-氧代-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮(21mg，17％)，為游離胺。LCMS420.2[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例69
(2R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5-甲基-6，6-二氧代-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 步驟1將m-CPBA(0.15g，0.67mmol，77wt％)加入到(2R)-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(213mg，0.41mmol)于CH2Cl2(20mL)中的溶液中。將該混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。除去溶劑，得到亞砜和砜的混合物，將其通過柱層析(20∶1 CH2Cl2∶甲醇)分離，得到(2R)-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5-甲基-6，6-二氧代-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(100mg)和(2R)-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5-甲基-6-氧代-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(50mg)。
步驟2將HCl(4M，1mL)加入到(2R)-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5-甲基-6，6-二氧代-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(0.10g，0.18mmol)于DCM(5mL)和MeOH(1mL)中的溶液中。將該混合物在室溫下攪拌6小時(shí)。除去溶劑，得到(2R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5-甲基-6，6-二氧代-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽。LCMS450.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例70
(2R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5-甲基-6-氧代-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 將HCl(4M，1mL)加入到3-(4-氯苯基)-1-(4-(5-甲基-6-氧代-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸酯(0.050g，0.091mmol)于DCM(4mL)和MeOH(1mL)中的溶液中。將該混合物在室溫下攪拌6小時(shí)。除去溶劑，得到(2R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5-甲基-6-氧代-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽(0.40g)。LCMS450.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例71
(2R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-(4-(5-乙基-6，6-二氧代-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 LCMS464.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例72
(2R)-2-氨基-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-(5-乙基-6，6-二氧代-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 步驟1將m-CPBA(0.1g，0.45mmol)加入到(2R)-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-(5-乙基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(50mg，0.09mmol)于DCM(10mL)中的溶液中。將該混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。除去溶劑，殘余物進(jìn)行柱層析，用乙酸乙酯洗脫，得到(2R)-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-(5-乙基-6，6-二氧代-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(5mg)。LCMS582.0[M+H+](APCI+)。
步驟2將HCl的二噁烷溶液(4M，2mL)加入到(2R)-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-(5-乙基-6，6-二氧代-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(0.005g，0.009mmol)于DCM(2mL)和MeOH(1mL)中的溶液中。將該混合物在室溫下攪拌5小時(shí)。除去溶劑，得到(2R)-2-氨基-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-(5-乙基-6，6-二氧代-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮HCl鹽(4mg，97％)。LCMS482.1[M+H+](APCI+)。
實(shí)施例73
(4-(4-氯苯基)哌啶-4-基)(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)甲酮 將HBTU(0.03066g，0.08084mmol)加入到5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶二鹽酸鹽(0.025g，0.08084mmol)，1-(叔丁氧羰基)-4-(4-氯苯基)哌啶-4-羧酸(0.02747g，0.08084mmol)和DIEA(0.05632mL，0.3234mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。將該反應(yīng)混合物搖動(dòng)4小時(shí)，然后將其用乙酸乙酯和水稀釋。用乙酸乙酯萃取混合物，合并的萃取物用水、飽和NaHCO3洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾，濃縮。將粗品在Biotage 12M上快速柱層析(用4∶1 DCM∶EA洗脫DIEA，然后用1∶3 DCM∶EA洗脫產(chǎn)物)，得到Boc中間體。然后將Boc中間體溶于二噁烷(1mL)中，加入4M HCl/二噁烷(0.6063mL，2.425mmol)，引起緩慢的沉淀。將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜(16小時(shí))，然后濃縮至干。將固體溶于最小量的MeOH中，然后通過加入乙醚來研制產(chǎn)物。固體通過中等砂芯漏斗過濾來進(jìn)行收集(用氮?dú)鈮毫?，用乙醚沖洗，真空干燥，得到(4-(4-氯苯基)哌啶-4-基)(4-(5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)甲酮二鹽酸鹽(0.030g，產(chǎn)率69.90％)，為淺黃色粉末。HPLC～94％純度。LC/MS(APCI+)m/z 458。
實(shí)施例74
2-(4-氯苯基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(2-甲基氮雜環(huán)丙烷-1-基)丙-1-酮 將HBTU(37mg，0.097mmol)加入到(S)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶二鹽酸鹽(30mg，0.097mmol)和2-(4-氯苯基)-3-(2-甲基氮雜環(huán)丙烷-1-基)丙酸(47mg，0.097mmol)于DCM(5mL)和TEA(1mL)中的溶液中。將該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。除去溶劑，殘余物進(jìn)行柱層析，用EA-DCM/MeOH(20∶1-10∶1)洗脫。產(chǎn)物用HCl(4M，2mL)處理，得到2-(4-氯苯基)-1-(4-((S)-5-甲基-5，7-二氫噻吩并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(2-甲基氮雜環(huán)丙烷-1-基)丙-1-酮HCl鹽(1mg，2％)。LC/MS(APCI+)m/z 458.1。
應(yīng)當(dāng)認(rèn)為先前的描述僅僅為示例性說明本發(fā)明的原理。此外，由于許多改進(jìn)和變化對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的，所以不希望本發(fā)明被上述顯示的精確構(gòu)成和方法所限制。因此，所有合適的改進(jìn)和等效內(nèi)容可認(rèn)為落入下述權(quán)利要求書所定義的本發(fā)明范圍之內(nèi)。
當(dāng)在說明書和下面的權(quán)利要求中使用時(shí)，單詞″包含″、″包括″意欲具體說明所敘述的性能、整體、組分或步驟的存在，但不排除存在或增加一種或多種其它性能、整體、組分、步驟或基團(tuán)。
權(quán)利要求
1.下式的化合物及其對(duì)映異構(gòu)體和鹽，
其中
X是S、SO或SO2；
R1是H、Me、Et、CF3、CHF2或CH2F；
R2是H或Me；
R5是H、Me、Et或CF3；
A是
其中
G是任選被1至4個(gè)R9基團(tuán)獨(dú)立地取代的苯基；
R6和R7獨(dú)立地是H；(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2)；(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2CH2)；V-(CH2)0-1，其中V是5-6元雜芳基；W-(CH2)1-2，其中W是任選被F、Cl、Br、I、OMe、CF3或Me取代的苯基；C3-C6-環(huán)烷基；羥基-(C3-C6-環(huán)烷基)；氟-(C3-C6-環(huán)烷基)；CH(CH3)CH(OH)苯基；4-6元雜環(huán)，其任選被F、OH、環(huán)丙基甲基、C1-C3烷基或C(＝O)(C1-C3烷基)取代；或C1-C6-烷基，其任選被一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)所取代，所述基團(tuán)獨(dú)立地選自O(shè)H、O(C1-C6-烷基)、CN、F、NH2、NH(C1-C6-烷基)、N(C1-C6-烷基)2、四氫吡喃基、四氫呋喃基、嗎啉基、氧雜環(huán)丁烷基、哌啶基和吡咯烷基，
或R6和R7與它們相連的氮一起形成3-6元雜環(huán)，其任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、鹵素、氧代基團(tuán)、CF3、CH2CF3和(C1-C3)烷基的基團(tuán)所取代；
Ra和Rb是H，
或Ra是H，且Rb和R6與它們相連的原子一起形成具有1個(gè)或2個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)；
Rc和Rd是H或Me，
或Rc和Rd與它們相連的原子一起形成環(huán)丙基環(huán)；
R8是H、Me或OH，
或R8和R6與它們相連的原子一起形成具有1個(gè)或2個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)；
每個(gè)R9獨(dú)立地是鹵素、C1-C6-烷基、C3-C6-環(huán)烷基、O-(C1-C6-烷基)、CF3、OCF3、S(C1-C6-烷基)、CN、OCH2-苯基、NH2、NH-(C1-C6-烷基)、N-(C1-C6-烷基)2、哌啶、吡咯烷、CH2F、CHF2、OCH2F、OCHF2、OH、SO2(C1-C6-烷基)、C(O)NH2、C(O)NH(C1-C6-烷基)和C(O)N(C1-C6-烷基)2；和
m、n和p獨(dú)立地是0或1。
2.權(quán)利要求1所述的化合物及其對(duì)映異構(gòu)體和鹽，所述化合物具有下式
其中
R1是H、Me、Et、CF3、CHF2或CH2F；
R2是H或Me；
R5是H、Me、Et或CF3；
A是
其中
G是任選被1至4個(gè)R9基團(tuán)獨(dú)立地取代的苯基；
R6和R7獨(dú)立地是H；(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2)；(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2CH2)；V-(CH2)0-1，其中V是5-6元雜芳基；W-(CH2)1-2，其中W是任選被F、Cl或Me取代的苯基；C3-C6-環(huán)烷基；羥基-(C3-C6-環(huán)烷基)；氟-(C3-C6-環(huán)烷基)；CH(CH3)CH(OH)苯基；或C1-C6-烷基，其任選被一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)所取代，所述基團(tuán)獨(dú)立地選自O(shè)H、O(C1-C6-烷基)、CN、F、NH2、NH(C1-C6-烷基)、N(C1-C6-烷基)2、哌啶基和吡咯烷基，
或R6和R7與它們相連接的氮一起形成4-6元雜環(huán)，其任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、鹵素、氧代基團(tuán)、CF3、CH2CF3和(C1-C3)烷基的基團(tuán)所取代；
Ra和Rb是H，
或Ra是H，且Rb和R6與它們相連的原子一起形成具有1個(gè)或2個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)；
Rc和Rd是H或Me，
或Rc和Rd與它們相連的原子一起形成環(huán)丙基環(huán)；
R8是H、Me或OH，
或R8和R6與它們相連的原子一起形成具有1個(gè)或2個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)；
每個(gè)R9獨(dú)立地是鹵素、C1-C6-烷基、C3-C6-環(huán)烷基、O-(C1-C6-烷基)、CF3、OCF3、S(C1-C6-烷基)、CN、OCH2-苯基、NH2、NH-(C1-C6-烷基)、N-(C1-C6-烷基)2、哌啶、吡咯烷、CH2F、CHF2、OCH2F、OCHF2、OH、SO2(C1-C6-烷基)、C(O)NH2、C(O)NH(C1-C6-烷基)和C(O)N(C1-C6-烷基)2；和
m、n和p獨(dú)立地是0或1。
3.權(quán)利要求1或2所述的化合物，其中R2是H。
4.權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R5是H或甲基。
5.權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R5是甲基。
6.權(quán)利要求5所述的化合物，其中R5是(S)構(gòu)型。
7.權(quán)利要求1或2所述的化合物，其中R5是乙基。
8.權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R1是甲基。
9.權(quán)利要求8所述的化合物，其中R1是(R)構(gòu)型。
10.權(quán)利要求8所述的化合物，其中R1是(S)構(gòu)型。
11.權(quán)利要求1至10中任一項(xiàng)所述的化合物，其中G是任選被1至3個(gè)R9基團(tuán)所取代的苯基，R9基團(tuán)獨(dú)立地選自F、Cl、Br、CN、甲基、乙基、異丙基、OCH3、OCH2CH3、CF3、OCF3、SCH3、環(huán)丙基和OCH2Ph。
12.權(quán)利要求1至11中任一項(xiàng)所述的化合物，其中G是苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、4-氟苯基、4-溴苯基、4-甲基苯基、4-乙基苯基、4-異丙基苯基、4-三氟甲基苯基、4-氰基苯基、4-甲氧基苯基、4-乙氧基苯基、4-甲硫基苯基、4-三氟甲氧基苯基、4-環(huán)丙基苯基、4-氯-3-氟苯基、3，4-二氟苯基、4-溴-3-氟苯基、3-氟-4-甲基苯基、3-氟-4-甲氧基苯基、3-氟-4-三氟甲基苯基、4-氰基-3-氟苯基、3，4-二氯苯基、2，4-二氯苯基、2，4-二氟苯基、2-氯-4-氟苯基、2-氟-4-氯苯基、3，5-二氯苯基、3，5-二氟苯基、3-氯-5-氟苯基、3-氯-4-氟苯基、3-溴-4-氟苯基、3，5-二氟-4-氯苯基、2，3-二氟-4-氯苯基、2，5-二氟-4-氯苯基、3，5-二氟-4-溴苯基、2，3-二氟-4-溴苯基、2，5-二氟-4-溴苯基或4-(OCH2Ph)-苯基。
13.權(quán)利要求1至12中任一項(xiàng)所述的化合物，其中G是苯基、4-氯苯基、2，4-二氯苯基、4-氯-3-氟苯基、4-氟苯基、3，4-二氟苯基、4-甲基苯基、4-甲氧基苯基或4-(OCH2Ph)-苯基。
14.權(quán)利要求1至13中任一項(xiàng)所述的化合物，其中m是0，n是1，且p是0，從而A由下式表示
15.權(quán)利要求14所述的化合物，其中A具有下列構(gòu)型
16.權(quán)利要求14或15所述的化合物，其中R8是H。
17.權(quán)利要求14至16中任一項(xiàng)所述的化合物，其中Rc和Rd是H。
18.權(quán)利要求14至16中任一項(xiàng)所述的化合物，其中Rc和Rd與它們相連的原子一起形成環(huán)丙基環(huán)。
19.權(quán)利要求15至18中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R6和R7獨(dú)立地是H、C3-C6-環(huán)烷基、雜芳基-(CH2)、羥基-(C3-C6-環(huán)烷基)，或(C1-6)-烷基，其任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、OMe和CN的基團(tuán)所取代。
20.權(quán)利要求14至19中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R6和R7獨(dú)立地是H、甲基、乙基、異丙基、異丁基、叔丁基、3-戊基、CH(異丙基)2、CH2CH2OH、CH2CH2CH2OH、CH(CH2CH2OH)2、CH2CH2OMe、CH(CH2CH2OMe)2、CH2CH2CH2OMe、CH2CN、CH2-環(huán)丙基、CH2-環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、CH2-苯基、CH2-(吡啶-2-基)、CH2-(吡啶-3-基)、CH2-(吡啶-4-基)、4-羥基環(huán)己-1-基或CH(CH3)CH(OH)苯基。
21.權(quán)利要求14至20中任-項(xiàng)所述的化合物，其中NR6R7是NH2、NHMe、NHEt、NHPr、NHiPr、NHtBu、NH(CH2-環(huán)丙基)、NH(CH2-環(huán)丁基)、NH(環(huán)戊基)、NH(CH2-吡啶基)、NH(環(huán)己基)、NH(3-戊基)、NHCH(異丙基)2、NH(CH2CH2OH)、NH(CH2CH2CH2OH)、NH(CH2CH2OMe)、NH(CH2CH2CH2OMe)、NH(CH2CN)、NMe2、NMeEt、NMePr、NMe(iPr)、NMe(CH2-環(huán)丙基)、NMe(CH2-環(huán)丁基)、NMe(CH2CH2OH)、NMe(CH2CH2CH2OH)、NMe(CH2CH2OMe)、NMe(CH2CH2CH2OMe)、NEt2、NEtPr、NEt(iPr)、NEt(CH2-環(huán)丙基)、NEt(CH2-環(huán)丁基)、NEt(CH2CH2OH)、NEt(CH2CH2CH2OH)、
22.權(quán)利要求14至18中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R6和R7與它們相連接的N一起形成具有1個(gè)或2個(gè)環(huán)氮原子的4-6元雜環(huán)，其中所述雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、F、甲基、CH2CF3和氧代基團(tuán)的基團(tuán)所取代。
23.權(quán)利要求14至18或22中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R6和R7與它們相連接的N一起形成吡咯烷基、哌啶基、氮雜環(huán)丁烷基、嗎啉基或哌嗪基環(huán)，其中所述吡咯烷基、哌啶基、氮雜環(huán)丁烷基、嗎啉基和哌嗪基環(huán)任選被1個(gè)或2個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、F、甲基、CH2CF3和氧代基團(tuán)的基團(tuán)所取代。
24.權(quán)利要求14至18、22或23中任一項(xiàng)所述的化合物，其中NR6R7選自下列結(jié)構(gòu)
25.權(quán)利要求14至18中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R6和R8與它們相連的原子一起形成具有1個(gè)或2個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)。
26.權(quán)利要求25所述的化合物，其中R6和R8與它們相連的原子一起形成吡咯烷基或哌啶基環(huán)。
27.權(quán)利要求14所述的化合物，其中A選自
28.權(quán)利要求1至13中任一項(xiàng)所述的化合物，其中m是1，n是1，且p是0，從而A由下式表示
29.權(quán)利要求28所述的化合物，其中A具有下列構(gòu)型
30.權(quán)利要求28或29所述的化合物，其中R8是H。
31.權(quán)利要求28至30中任一項(xiàng)所述的化合物，其中Rc和Rd是H。
32.權(quán)利要求28至30中任一項(xiàng)所述的化合物，其中Rc和Rd是Me。
33.權(quán)利要求28至30中任一項(xiàng)所述的化合物，其中Rc和Rd與它們相連的原子一起形成環(huán)丙基環(huán)。
34.權(quán)利要求28至32中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R6和R7獨(dú)立地是H、甲基、乙基、丙基、異丙基、CH2-環(huán)丙基或CH2-環(huán)丁基，
或R6和R7與N一起形成吡咯烷基、哌啶基或氮雜環(huán)丁烷基環(huán)，
或R6和R8與它們相連的原子一起形成哌啶基或吡咯烷基環(huán)。
35.權(quán)利要求29至34中任一項(xiàng)所述的化合物，其中NR6R7是NH2、NHMe、NHEt、NHPr、NH(iPr)、NH(CH2-環(huán)丙基)、NH(CH2-環(huán)丁基)、NMe2、NMeEt、NMePr、NME(iPr)、NEt2、NEtPr或NEt(iPr)。
36.權(quán)利要求29至34中任一項(xiàng)所述的化合物，其中NR6R7選自下列結(jié)構(gòu)
37.權(quán)利要求28至34中任一項(xiàng)所述的化合物，其中NR6R7是NH2。
38.權(quán)利要求28所述的化合物，其中A選自
39.權(quán)利要求1至13中任一項(xiàng)所述的化合物，其中m是1，n是1，且p是0，從而A由下式表示
40.權(quán)利要求39所述的化合物，其中A具有下列構(gòu)型
41.權(quán)利要求39或40所述的化合物，其中R8是H。
42.權(quán)利要求39至41中任一項(xiàng)所述的化合物，其中Rc和Rd是H。
43.權(quán)利要求39至41中任一項(xiàng)所述的化合物，其中Rc和Rd與它們相連的原子一起形成環(huán)丙基環(huán)。
44.權(quán)利要求39至43中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R6和R7獨(dú)立地是H、甲基、乙基、丙基、異丙基、叔丁基、CH2-環(huán)丙基或CH2-環(huán)丁基。
45.權(quán)利要求39至44中任一項(xiàng)所述的化合物，其中NR6R7是NH2、NHMe、NHEt、NHPr、NH(iPr)、NHtBu、NH(CH2-環(huán)丙基)或NH(CH2-環(huán)丁基)。
46.權(quán)利要求39所述的化合物，其中A選自下列結(jié)構(gòu)
47.權(quán)利要求39所述的化合物，其中Ra和R8是H，Rb和R6與它們相連的原子一起形成5-6元雜環(huán)，其中環(huán)原子之一是氮。
48.權(quán)利要求47所述的化合物，其中Rb和R6與它們相連的原子一起形成吡咯烷基環(huán)。
49.權(quán)利要求47或48所述的化合物，其中R7是H。
50.權(quán)利要求49所述的化合物，其中A選自
51.權(quán)利要求1至13中任一項(xiàng)所述的化合物，其中m是0，n是0，且p是1，從而A由下式表示
52.權(quán)利要求51所述的化合物，其中A具有下列構(gòu)型
53.權(quán)利要求51或52所述的化合物，其中R8是H。
54.權(quán)利要求52或53所述的化合物，其中R6和R7是H或Me。
55.權(quán)利要求51所述的化合物，其中A選自
56.權(quán)利要求1所述的化合物，其中NR6R7是下列結(jié)構(gòu)
57.權(quán)利要求1所述的化合物，其中X是SO。
58.權(quán)利要求1或57所述的化合物，其中R1是H或甲基。
59.權(quán)利要求1、57或58中任一項(xiàng)所述的化合物，其中A是下列結(jié)構(gòu)
60.權(quán)利要求1所述的化合物，其中X是SO2。
61.權(quán)利要求1或60所述的化合物，其中，R1是H、甲基或乙基。
62.權(quán)利要求1、60或61中任一項(xiàng)所述的化合物，其中A選自下列結(jié)構(gòu)
63.權(quán)利要求1或2所定義的和實(shí)施例1-74中所命名的化合物。
64.藥物組合物，其包含權(quán)利要求1-63中任一項(xiàng)所述的化合物。
65.一種治療哺乳動(dòng)物中AKT介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，該方法包括向所述哺乳動(dòng)物給藥有效量的權(quán)利要求1-63中任一項(xiàng)所述的化合物。
66.權(quán)利要求65的方法，其中所述疾病或病癥是炎性疾病、過度增生性疾病、心血管疾病、神經(jīng)變性疾病、婦科疾病或皮膚病。
67.一種抑制哺乳動(dòng)物中AKT蛋白激酶產(chǎn)生的方法，該方法包括向所述哺乳動(dòng)物給藥有效量的權(quán)利要求1-63中任一項(xiàng)所述的化合物。
68.權(quán)利要求1-63中任一項(xiàng)所述的化合物，其在治療AKT蛋白激酶介導(dǎo)的病癥中用作藥物。
69.權(quán)利要求1-63中任一項(xiàng)所述化合物在制備用于治療AKT蛋白激酶介導(dǎo)的病癥的藥物中的用途。
70.試劑盒，其用于治療AKT蛋白激酶介導(dǎo)的病癥，其中所述試劑盒包括
a)第一藥物組合物，其包含權(quán)利要求1-63中任一項(xiàng)所述的化合物；和
b)使用說明書。
71.權(quán)利要求70所述的試劑盒，還包括(c)第二藥物組合物，其中第二藥物組合物包含為AKT蛋白激酶抑制劑的第二化合物。
72.一種制備權(quán)利要求1所述的化合物的方法，該方法包括
下式的化合物
與下式的化合物進(jìn)行反應(yīng)
73.一種制備權(quán)利要求2所述的化合物的方法，該方法包括
下式的化合物
與下式的化合物進(jìn)行反應(yīng)
全文摘要
本發(fā)明提供了式(I)的化合物，包括其拆分的對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體、溶劑合物和可藥用鹽。也提供了使用本發(fā)明化合物用作AKT蛋白激酶抑制劑以及用于治療過度增生性疾病如癌癥的方法。
文檔編號(hào)C07D495/04GK101516891SQ200780033058
公開日2009年8月26日 申請(qǐng)日期2007年7月5日 優(yōu)先權(quán)日2006年7月6日
發(fā)明者伊恩·S·米切爾, 詹姆斯·F·布萊克, 睿 徐, 尼古拉斯·C·卡蘭, 校登明, 基思·L·斯潘塞, 約瑟夫·R·本克西克 申請(qǐng)人:陣列生物制藥公司