專(zhuān)利名稱(chēng)：新的含磷前藥的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生成磷(膦)酸酯化合物的新的前藥，其為生物活性的或被進(jìn)一步磷酸化而產(chǎn)生生物活性化合物，涉及它們的制備，涉及它們的合成中間體及它們的用途。更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及取代的環(huán)狀1，3-丙酯，其中所述環(huán)部分含有至少一個(gè)連接于磷的氨基。
背景技術(shù)：
本發(fā)明背景的以下描述對(duì)理解本發(fā)明提供了幫助，而不認(rèn)為是本發(fā)明的先有技術(shù)，或描述了本發(fā)明的先有技術(shù)。所有引用的出版物全文通過(guò)引用結(jié)合到本文中。
游離磷和膦酸及其鹽在生理學(xué)pH條件下是高度帶電的，因而常常表現(xiàn)出差的生物利用度、差的細(xì)胞穿透性和有限的組織分布(如中樞神經(jīng)系統(tǒng))。此外，這些酸還通常與阻礙它們用作藥物的幾種其它性質(zhì)有關(guān)，這些性質(zhì)包括因腎的快速清除所致的短暫血漿半衰期以及毒性(如，腎、胃腸道等)(如Antimicrob Agents Chemother 1998 5月；42(5)1146-50)。磷酸酯的其它限制在于，它們?cè)谘獫{及大多數(shù)組織中不夠穩(wěn)定，因?yàn)樗鼈兪艿浇?jīng)磷酸酶(如堿性磷酸酶、核苷酸酶)作用的迅速水解。
主要尋找含磷化合物的前藥，以改進(jìn)有限的口服吸收率和差的細(xì)胞穿透性。與羧酸前酯(proesters)比較，許多膦酸酯和磷酸酯不能在體內(nèi)水解，包括簡(jiǎn)單的烷基酯在內(nèi)。最常使用的前藥類(lèi)型是酰氧基烷基酯，其由Farquhar等(J.Pharm.Sci.72(3)324(1983))首先用于磷酸酯和膦酸酯化合物。
環(huán)膦酸酯和磷酸酯也被描述用于含磷化合物。在某些情況下，已對(duì)這些化合物作為潛在的磷酸酯或膦酸酯前藥進(jìn)行了研究。Hunston等，J.Med.Chem.27440-444(1984)。這些環(huán)酯的編號(hào)如下所示 已報(bào)道環(huán)狀2’，2’-二氟-1’，3’-丙酯是水解不穩(wěn)定的，因而快速生成開(kāi)環(huán)的單酯。Starrett等，J.Med.Chem.371857-1864(1994)。
已合成araA、araC和硫代肌苷的環(huán)狀3’，5’-磷酸酯。Meier等，J.Med.Chem.22811-815(1979)。這些化合物通過(guò)磷酸二酯酶的作用而開(kāi)環(huán)，磷酸二酯酶通常需要一個(gè)負(fù)電荷。
已報(bào)道環(huán)狀1’，3’-丙基膦酸酯和磷酸酯含有稠合的芳環(huán)，即環(huán)水揚(yáng)醇酯，Meier等，Bioorg.Med.Chem.Lett.799-104(1997)。這些前藥被報(bào)道通過(guò)“根據(jù)設(shè)計(jì)的兩個(gè)偶合步驟的連續(xù)反應(yīng)，在生理學(xué)pH條件下受控制的、非酶促機(jī)制”生成磷酸酯。該策略意謂著用于傳遞d4-T一磷酸酯至CEM細(xì)胞和缺乏感染HIV-1和HIV-2的胸苷激酶的CEM細(xì)胞。
已制備5-氟-2’-脫氧尿苷(Farquhar等，J.Med.Chem.261153(1983))和ara-A(Farquhar等，J.Med.Chem.281358(1985))的一磷酸酯的未取代環(huán)狀1’，3’-丙酯，但在體內(nèi)顯示無(wú)活性。此外，對(duì)于5-氟-2’-脫氧尿苷一磷酸酯(5-FdUMP；(Freed等，Biochem.Pharmac.383193(1998))；其它人(Biller等，US 5157027)推測(cè)為潛在的有用前藥)，制備了由新戊酰氧基甲氧基于C-1’位取代的環(huán)狀1’，3’-丙酯。在細(xì)胞中，這些前藥的酰基被酯酶裂解，生成不穩(wěn)定的羥基中間體，后者經(jīng)β-消去反應(yīng)迅速分解為游離磷酸酯和丙烯醛以及甲醛和新戊酸。
還已知未取代的環(huán)狀氨基磷酸酯，即其中環(huán)氧原子中的一個(gè)被NR置換的環(huán)狀膦酸酯和磷酸酯。例如，環(huán)磷酰胺(CPA)為一類(lèi)利用這種前藥部分的芥子腫瘤溶解藥的代表。盡管CPA主要在肝中經(jīng)細(xì)胞色素P450-催化的氧化反應(yīng)激活，它的生物活性卻在肝外。CPA為有效的免疫抑制劑以及肝外癌的腫瘤溶解藥，因?yàn)镻450激活后所產(chǎn)生的一種或多種中間體代謝產(chǎn)物向肝外擴(kuò)散并進(jìn)入循環(huán)。隨著時(shí)間的推移，所述中間體進(jìn)入肝外組織并被認(rèn)為是經(jīng)歷β-消去反應(yīng)而生成丙烯醛和活性的磷酰胺芥子。據(jù)報(bào)道兩種產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞均有細(xì)胞毒性。芥子的細(xì)胞毒性因DNA(或RNA)的烷基化引起。已報(bào)道丙烯醛通過(guò)幾種機(jī)制，包括谷胱甘肽的排除、DNA和蛋白質(zhì)經(jīng)Michael反應(yīng)的烷基化，發(fā)揮其毒性作用。此外，丙烯醛產(chǎn)生其它的毒性，例如采用環(huán)磷酰胺治療常見(jiàn)的劑量-限制的膀胱毒性。由于這些藥物的毒性常常阻礙它們作為化療藥物的用途，許多對(duì)策正在研究中，以設(shè)計(jì)出增強(qiáng)P450在腫瘤中或腫瘤周邊部位活性的方法，并由此使這些藥物的激活作用和抗增生作用局限于腫瘤。一種策略是使用逆病毒或其它熟知的技術(shù)，以使基因?qū)氚薪M織中(例如Jounaidi等，Cancer Research 58，4391(1998))。其它對(duì)策包括將基因工程莢膜細(xì)胞置于腫瘤或腫瘤周邊部位以產(chǎn)生細(xì)胞色素P450s(如Lohr等，Gene Therapy 5，1070(1998))。
也制備了為潛在的前藥的核苷araA和5-氟-2’-脫氧尿苷的未取代的環(huán)狀氨基磷酸酯(Farquhar等，J.Med.Chem.28，1358 1361(1985)；J.Med.Chem.26，1153-1158(1983))。在小鼠白血病模型中對(duì)化合物進(jìn)行了研究，在該模型中假定，如果前藥的轉(zhuǎn)化類(lèi)似于環(huán)磷酰胺，則這些藥物將用于治療各種癌癥，包括白血病以及結(jié)腸癌、乳腺癌和卵巢癌。此外，由于引起腫瘤細(xì)胞藥物抗性的一些機(jī)制使用于合成一磷酸酯的酶減少，期望該策略在治療對(duì)藥物有抗性的腫瘤中可能是有效的。所述化合物在延長(zhǎng)小鼠模型的壽命中僅有“邊緣效應(yīng)”。
制備了為環(huán)磷酰胺類(lèi)似物的各種取代的1’，3’-丙基環(huán)狀氨基磷酸酯，其中1’代表相對(duì)于氮的α-碳(Zon，Progress in Med.Chem.19，1205(1982))。例如，制備了一些2’-和3’-取代的前酯，以降低經(jīng)Michael反應(yīng)的α，β-未取代的羰基副產(chǎn)物的傾向。2’-取代基包括甲基、二甲基、溴、三氟甲基、氯、羥基和甲氧基，而用于3’-位的各種基團(tuán)包括苯基、甲基、三氟甲基、乙基、丙基、異丙基和環(huán)己基。具有3’-芳基的類(lèi)似物，如反式-4-苯基環(huán)磷酰胺“在L1210試驗(yàn)系統(tǒng)中是適度有效的并在體內(nèi)未顯示出活性”(G.ZuProg.Med.Chem.19205-246(1982))。還制備了各種1’-取代的類(lèi)似物。一般來(lái)說(shuō)，這些化合物被設(shè)計(jì)為“預(yù)激活的”環(huán)磷酰胺類(lèi)似物，其通過(guò)已經(jīng)作為能產(chǎn)生終產(chǎn)物，如過(guò)氧化氫和1-硫醚的1’-取代的類(lèi)似物的存在繞過(guò)該氧化步驟。還制備了一系列的1’-芳基類(lèi)似物，以增強(qiáng)氧化力。與1’-氫過(guò)氧類(lèi)似物相反，1’-芳基化合物在體內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)抗癌篩選測(cè)試，即小鼠L1210測(cè)試中未顯示出活性或顯示出很差的活性。推測(cè)活性的缺乏因苯基的空間位阻而產(chǎn)生，因而限制了前藥的氧化。表現(xiàn)出類(lèi)似于環(huán)磷酰胺活性的無(wú)環(huán)苯基酮基類(lèi)似物的強(qiáng)效活性是對(duì)此種推測(cè)的有力支持。Luderman等，J.Med.Chem.29716(1986)。
含磷環(huán)酯化合物在化學(xué)文獻(xiàn)中有報(bào)道，然而，它們并沒(méi)有在生物學(xué)系統(tǒng)中作為前藥進(jìn)行過(guò)試驗(yàn)。這些環(huán)酯包括[1]如在Nifantyev等，磷、硫、硅及相關(guān)元素，1131(1996)；Wijnberg等，EP-180276 A1中報(bào)道的磷酸的二酯和三酯；[2]磷(III)的酸酯.Kryuchkov等，Izv.Akad，Nauk SSSR，Ser.Khim.61244(1987)。要求保護(hù)的一些化合物對(duì)L-多巴前體的不對(duì)稱(chēng)合成是有用的。Sylvain等，DE3512781 A1；[3]氨基磷酸酯.Shih等，Bull.Inst.Chem.Acad，419(1994)；Edmundson等，J.Chem.Res.Synop.5122(1989)；和[4]膦酸酯.Neidlein等，Heterocycles 351185(1993)。
已知許多含磷化合物顯示出藥理學(xué)活性，但由于上述的一種或多種限制，離最佳化還相距甚遠(yuǎn)。描述的一些活性包括用作抗高血壓藥和通過(guò)抑制NEP 24.11治療心力衰竭的膦酸，用于通過(guò)結(jié)合激感氨基酸受體(如NMDA受體)治療各種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病(中風(fēng)、癲癇、腦和脊柱損傷等)的膦酸，用于治療骨質(zhì)疏松的二膦酸，用作降脂藥(如角鯊烯合酶抑制劑)的膦酸，用于治療炎癥(如膠原酶甲制劑)的膦酸酯，用于治療糖尿病、癌癥、寄生蟲(chóng)和病毒性感染的膦酸酯和磷酸酯。
已知磷酸酯和膦酸酯特別適用于降低葡萄糖活性，因而預(yù)料可用于治療糖尿病，如在US 5658889、WO 98/39344、WO 98/39343和WO98/39342中所述，磷酸酯和膦酸酯為結(jié)合于果糖1，6-二磷酸酶(FBP酶)的AMP位的化合物。含磷藥物的其它實(shí)例包括角鯊烯合酶抑制劑(如BMS 188494)。
已知對(duì)肝炎有活性的一大類(lèi)藥物通常為核苷或核苷酸類(lèi)似物，它們?cè)诩?xì)胞內(nèi)被磷酸化而產(chǎn)生生物活性的三磷酸酯。實(shí)例包括拉米夫定(3TC)和阿糖腺苷(araA)。在每種情況下，該藥物通過(guò)三磷酸酯形式經(jīng)病毒DNA聚合酶的抑制或DNA鏈的終止干擾病毒復(fù)制。通過(guò)藥物經(jīng)病毒編碼的激酶以及經(jīng)病毒DNA聚合酶的特異性抑制的兩種優(yōu)先的磷酸化作用獲得對(duì)病毒感染細(xì)胞的某些特異性。然而，以核苷為基礎(chǔ)的許多藥物與明顯的非肝毒性有關(guān)。例如，araA常常在許多患者中產(chǎn)生神經(jīng)毒性(40％)，表現(xiàn)為肌痛或伴有疼痛和神經(jīng)傳導(dǎo)異常的感覺(jué)神經(jīng)病以及少數(shù)表現(xiàn)為震顫、構(gòu)音障礙、精神錯(cuò)亂或甚至昏迷。Lok等，J.Antimicrob.Chemotherap.1493-99(1984)。在另一些病例中，核苷的療效和/或治療指數(shù)因差的磷酸化效率而受到損害，因而降低了生物活性的三磷酸酯的水平(如Yamanaka等，Antimicrob.Agents andChemother.43，190(1999))。
膦酸也顯示出抗病毒活性。在一些情況下，化合物本身為抗病毒劑(如膦?；姿?，而在另一些情況下，它們需要磷酸化為二磷酸酯，如9-(2-膦?；籽跻一?腺嘌呤(PMEA，Adefovir)。經(jīng)常有報(bào)道，這些化合物由于相應(yīng)的核苷與病毒激酶的差的底物活性或由于需要將核苷轉(zhuǎn)化為一磷酸酯的病毒核苷激酶下調(diào)病毒的耐藥性而顯示出增強(qiáng)的活性。然而，一磷酸酯和膦酸在口服給予后，由于它們的高電荷和一磷酸酯在血漿中的不穩(wěn)定的情況下，很難傳導(dǎo)給病毒感染的細(xì)胞。另外，這些化合物由于大多數(shù)情況下的高腎清除率，常常具有短的半衰期(如PMEA，Adefovir)。在一些情況下，高的腎清除率可導(dǎo)致腎中毒性或在疾病如糖尿病(在糖尿病中腎功能往往受到損害)中成為一種主要的限制。
采用目前的療法很難治愈肝癌。一般來(lái)說(shuō)，肝腫瘤對(duì)放射治療有抗性，對(duì)化學(xué)治療反應(yīng)差并以高度的細(xì)胞異質(zhì)性為特征。腫瘤溶解的核苷如5-氟-2’-脫氧尿苷也對(duì)原發(fā)性肝癌反應(yīng)差。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及生成磷(膦)酸酯化合物的新的前藥，它們的制備，它們的合成中間體及它們的用途。在一個(gè)方面，本發(fā)明涉及提高口服藥物傳遞的前藥的用途。本發(fā)明的另一方面涉及增強(qiáng)生物活性藥物在肝中水平的前藥的用途。本發(fā)明的另一方面是前藥治療因改善藥物對(duì)肝等組織和細(xì)胞中的分布或特異性有益的疾病的用途，所述痰病包括肝炎、肝癌、肝纖維化、瘧痰、其它病毒性感染和寄生蟲(chóng)感染，以及代謝性疾病，其中肝對(duì)生化終產(chǎn)物如葡萄糖(糖尿病)、膽固醇、脂肪酸和甘油三酯(高脂血癥、動(dòng)脈粥樣硬化、肥胖)的過(guò)度產(chǎn)生負(fù)有責(zé)任。在另一方面，前藥被用于延長(zhǎng)所述藥物的藥效學(xué)半衰期。此外，本發(fā)明的前藥方法被用于獲得母體藥物的緩慢傳遞。在另一方面，前藥被用于增加藥物的治療指數(shù)。本發(fā)明的另一方面是前藥與增強(qiáng)特定組織中的P450活性的技術(shù)結(jié)合的用途。在本發(fā)明的另一方面，描述了制備這些前藥的方法。另一方面是涉及這些前藥的新中間體。在另一方面，前藥也用于將診斷造影劑傳遞給肝。
本發(fā)明的一個(gè)方面涉及在體外或體內(nèi)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的M-PO32-、MP2O63-、MP3O94-和MP(O)(NHR6)O-并且為式I的化合物及其藥學(xué)上可接受的前藥和鹽
其中V、W和W’獨(dú)立選自-H、烷基、芳烷基、脂環(huán)基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、1-鏈烯基和1-鏈炔基；或V和Z通過(guò)另外的3-5個(gè)原子連接在一起，以形成含有5-7個(gè)環(huán)原子，任選1個(gè)雜原子的環(huán)基，其由連接于碳原子的羥基、酰氧基、烷氧基羰基氧基或芳氧基羰基氧基取代，所述碳原子為來(lái)自連接于磷原子的兩個(gè)Y基團(tuán)的三個(gè)原子之一；或V和Z通過(guò)另外的3-5個(gè)原子連接在一起，以形成任選含有1個(gè)雜原子的環(huán)基，所述環(huán)基與相對(duì)于鄰近V的Y的β和γ位上的芳基稠合；V和W通過(guò)另外的3個(gè)碳原子連接在一起，以形成含有6個(gè)碳原子并由選自以下的1個(gè)取代基取代的任選取代的環(huán)基羥基、酰氧基、烷氧基羰基氧基、烷硫基羰基氧基及芳氧基羰基氧基，其連接于一個(gè)所述另外的碳原子上，該碳原子為來(lái)自連接于磷原子的Y的三個(gè)原子之一；Z和W通過(guò)另外的3-5個(gè)原子連接在一起，以形成任選含1個(gè)雜原子的環(huán)基，且V必須是芳基、取代的芳基、雜芳基或取代的雜芳基；W和W’通過(guò)另外的2-5個(gè)原子連接在一起，以形成任選含0-2個(gè)雜原子的環(huán)基，且V必須是芳基、取代的芳基、雜芳基或取代的雜芳基；Z選自-CHR2OH、-CHR2OC(O)R3、-CHR2OC(S)R3、-CHR2OC(S)OR3、-CHR2OC(O)SR3、-CHR2OCO2R3、-OR2、-SR2、-CHR2N3、-CH2芳基、-CH(芳基)OH、-CH(CH＝CR22)OH、-CH(C≡CR2)OH、-R2、-NR22、-OCCR3、-OCO2R3、-SCOR3、-SCO2R3、-NHCOR2、-NHCO2R3、-CH2NH芳基、-(CH2)p-OR12和-(CH2)p-SR12；p是2或3的整數(shù)；前提是a)V、Z、W、W’不都是-H；及b)當(dāng)Z為-R2時(shí)，則V、W和W’中的至少一個(gè)不是-H、烷基、芳烷基或脂環(huán)基；R2選自R3和-H；R3選自烷基、芳基、脂環(huán)基和芳烷基；R6選自-H、低級(jí)烷基、酰氧基烷基、烷氧基羰基氧基烷基和低級(jí)酰基；R12選自-H和低級(jí)酰基；每個(gè)Y獨(dú)立選自-O-、-NR6-，前提是至少一個(gè)Y為-NR6-；M選自連接于PO32-、P2O63-、P3O94-或P(O)(NHR6)O-的基團(tuán)，其為生物活性劑，但不是FBP酶抑制劑，并通過(guò)碳、氧、硫或氮原子連接于式I的磷原子上；前提是1)M不是-NH(低級(jí)烷基)、-N(低級(jí)烷基)2、-NH(低級(jí)烷基鹵)、-N(低級(jí)烷基鹵)2或-N(低級(jí)烷基)(低級(jí)烷基鹵)；及2)R6不是低級(jí)烷基鹵。
本發(fā)明提供幾種制備本發(fā)明的前藥的新方法。一種方法依賴(lài)于以下新的P(III)試劑的反應(yīng)
G’＝O，NRL＝離去基團(tuán)如-NR2、鹵素然后將生成的亞磷酸酯氧化為環(huán)氨基磷酸酯。
第二種方法依賴(lài)于新的P(V)試劑的反應(yīng) G’＝O，NHL’＝離去基團(tuán)如-NR2、-O-芳基、鹵素第三種方法依賴(lài)于另一種新的P(V)化合物與二胺或氨基醇的反應(yīng) 由于這些化合物具有不對(duì)稱(chēng)中心，本發(fā)明不僅涉及這些化合物的外消旋的和非對(duì)映體的混合物，而且也涉及單個(gè)的立體異構(gòu)體。本發(fā)明還包括式I化合物的藥學(xué)上可接受的和/或有用的鹽，包括酸加成鹽。本發(fā)明也包括式I化合物的前藥。
定義根據(jù)本發(fā)明及如在此所用的，下列術(shù)語(yǔ)被定義為具有以下意義，除非另外特別說(shuō)明。
術(shù)語(yǔ)“芳基”指具有5-14個(gè)環(huán)原子和至少一個(gè)具有共軛pi電子體系的環(huán)的芳族基團(tuán)，并包括碳環(huán)芳基、雜環(huán)芳基和聯(lián)芳基，所有這些基團(tuán)可任選被取代。合適的芳基包括苯基和呋喃-2，5-二基。
碳環(huán)芳基為其中芳環(huán)上的環(huán)原子為碳原子的基團(tuán)。碳環(huán)芳基包括單環(huán)碳環(huán)芳基和多環(huán)或稠合的化合物，例如任選取代的萘基。
雜環(huán)芳基或雜芳基為芳環(huán)上具有1-4個(gè)雜原子作為環(huán)原子，而其余的環(huán)原子為碳原子的基團(tuán)。合適的雜原子包括氧、硫和氮。合適的雜芳基包括呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N-低級(jí)烷基吡咯基、吡啶基-N-氧化物、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基等，所有這些基團(tuán)均是任選取代的。
術(shù)語(yǔ)“聯(lián)芳基”表示含有一個(gè)以上芳環(huán)的芳基。包括稠合的環(huán)系和有其它芳基取代的芳基。這樣的基團(tuán)可以任選被取代。合適的聯(lián)芳基包括萘基和聯(lián)苯基。
術(shù)語(yǔ)“脂環(huán)基”意指結(jié)合有脂族和環(huán)狀化合物特性的化合物。這樣的環(huán)狀化合物包括但不限于芳族、環(huán)烷基和橋接環(huán)烷基化合物。所述環(huán)狀化合物包括雜環(huán)。環(huán)己烯基乙基和環(huán)己基乙基是合適的脂環(huán)基。這樣的基團(tuán)可以任選被取代。
術(shù)語(yǔ)“任選取代的”或“取代的”包括被1-4個(gè)取代基取代的基團(tuán)，所述取代基獨(dú)立選自低級(jí)烷基、低級(jí)芳基、低級(jí)芳烷基、低級(jí)脂環(huán)基、羥基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)芳氧基、全鹵烷氧基、芳烷氧基、雜芳基、雜芳基氧基、雜芳基烷基、雜芳烷氧基、疊氮基、氨基、胍基、脒基、鹵素、低級(jí)烷硫基、氧代、酰基烷基、羧基酯、羧基、-甲酰胺基、硝基、酰氧基、氨基烷基、烷基氨基芳基、烷基芳基、烷基氨基烷基、烷氧基芳基、芳基氨基、芳烷基氨基、膦?；?、磺?；?甲酰胺基烷基芳基、甲酰胺基芳基、羥基烷基、鹵代烷基、烷基氨基烷基羧基-、氨基甲酰胺基烷基-、氰基、低級(jí)烷氧基烷基、低級(jí)全鹵烷基和芳基烷基氧基烷基?！叭〈姆蓟焙汀叭〈碾s芳基”優(yōu)選指由1-3個(gè)取代基取代的芳基和雜芳基。優(yōu)選這些取代基選自低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)全鹵烷基、鹵素、羥基和氨基。
術(shù)語(yǔ)“芳烷基”指由芳基取代的亞烷基。合適的芳烷基包括芐基、吡啶甲基等，并且可以任選被取代?！半s芳基烷基”指由雜芳基取代的亞烷基。
術(shù)語(yǔ)“-烷基芳基”指由烷基取代的芳基。
“低級(jí)烷基芳基”指這樣的基團(tuán)，其中烷基為低級(jí)烷基。
在此涉及的術(shù)語(yǔ)“低級(jí)”與有機(jī)基團(tuán)或化合物結(jié)合時(shí)，分別定義為例如最多可達(dá)10個(gè)(包括10個(gè))，優(yōu)選最多可達(dá)6個(gè)(包括6個(gè))，最好1-4碳原子。這樣的基團(tuán)可以是直鏈、支鏈或環(huán)狀。
術(shù)語(yǔ)“芳基氨基”(a)和“芳烷基氨基”(b)分別指-NRR’基團(tuán)，其中分別是，(a)R是芳基和R’是氫、烷基、芳烷基或芳基，及(b)R是芳烷基和R’是氫或芳烷基、芳基、烷基。
術(shù)語(yǔ)“?；敝?C(O)R，其中R是烷基和芳基。
術(shù)語(yǔ)“羧基酯”指-C(O)OR，其中R是烷基、芳基、芳烷基和脂環(huán)基，所有這些基團(tuán)均任選取代。
術(shù)語(yǔ)“羧基”指-C(O)OH。
術(shù)語(yǔ)“氧代”指烷基中的＝O。
術(shù)語(yǔ)“氨基”指-NRR’基團(tuán)，其中R和R’獨(dú)立選自氫、烷基、芳基、芳烷基和脂環(huán)基，除H外，所有這些基團(tuán)可任選被取代；且R和R’可形成一環(huán)系。
術(shù)語(yǔ)“-甲酰胺基”指-CONR2，其中每個(gè)R獨(dú)立為氫或烷基。
術(shù)語(yǔ)“鹵素”或“鹵基”指-F、-Cl、-Br和-I。
術(shù)語(yǔ)“烷基氨基烷基羧基”指基團(tuán)烷基-NR-alk-C(O)-O-，其中“alk”指亞烷基，R為氫或低級(jí)烷基。
術(shù)語(yǔ)“烷基”指包括直鏈、支鏈和環(huán)狀基團(tuán)的飽和脂族基團(tuán)。烷基可以是任選取代的。合適的烷基包括甲基、異丙基和環(huán)丙基。
術(shù)語(yǔ)“環(huán)狀烷基”或“環(huán)烷基”指為3-10個(gè)原子、更優(yōu)選3-6個(gè)原子的環(huán)狀烷基。合適的環(huán)狀基團(tuán)包括降冰片基和環(huán)丙基。這樣的基團(tuán)可以是取代的。
術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)基”和“雜環(huán)烷基”指3-10個(gè)原子、更優(yōu)選3-6個(gè)原子，含至少一個(gè)雜原子，優(yōu)選1-3個(gè)雜原子的環(huán)狀基團(tuán)。合適的雜原子包括氧、硫和氮。雜環(huán)基可以通過(guò)該環(huán)上的氮或碳原子連接。雜環(huán)烷基包括不飽和的環(huán)基、稠合的環(huán)基和螺環(huán)基。合適的雜環(huán)基包括吡咯烷基、嗎啉代、嗎啉代乙基和吡啶基。
術(shù)語(yǔ)“膦?；敝?PO3R2，其中R選自-H、烷基、芳基、芳烷基和脂環(huán)基。
術(shù)語(yǔ)“磺?；敝?SO3R，其中R是H、烷基、芳基、芳烷基和脂環(huán)基。
術(shù)語(yǔ)“鏈烯基”指含至少一個(gè)碳-碳雙鍵的不飽和基團(tuán)，包括直鏈、支鏈和環(huán)基。鏈烯基可以是任選取代的。合適的鏈烯基包括烯丙基?！癐-鏈烯基”指其中雙鍵在第一個(gè)和第二個(gè)碳原子之間的鏈烯基。如果所述1-鏈烯基連接于另一個(gè)基團(tuán)，例如W取代基連接于環(huán)氨基磷酸酯，則它連接于第一個(gè)碳原子。
術(shù)語(yǔ)“鏈炔基”指含至少一個(gè)碳-碳三鍵的不飽和基團(tuán)，包括直鏈、支鏈和環(huán)基。鏈炔基可以是任選取代的。合適的鏈炔基包括乙炔基?！?-鏈炔基”指其中三鍵在第一個(gè)和第二個(gè)碳原子之間的鏈炔基。如果所述1-鏈炔基連接于另一個(gè)基團(tuán)，例如W取代基連接于環(huán)氨基磷酸酯，則它連接于第一個(gè)碳原子。
術(shù)語(yǔ)“亞烷基”指二價(jià)直鏈、支鏈或環(huán)狀飽和脂族基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“酰氧基”指酯基-O-C(O)R，其中R是H、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、芳烷基或脂環(huán)基。
術(shù)語(yǔ)“氨基烷基-”指基團(tuán)NR2-alk-，其中“alk”指亞烷基，R選自氫、烷基、芳基、芳烷基和脂環(huán)基。
術(shù)語(yǔ)“烷基氨基烷基”指基團(tuán)烷基-NR-alk-，其中每個(gè)“alk”獨(dú)立選自亞烷基，R是氫或低級(jí)烷基。在“低級(jí)烷基氨基烷基”中，每個(gè)亞烷基是低級(jí)亞烷基。
術(shù)語(yǔ)“芳基氨基烷基-”指基團(tuán)芳基-NR-alk-，其中“alk”為亞烷基，R是氫、烷基、芳基、芳烷基和脂環(huán)基。在“低級(jí)芳基氨基烷基”中，所述亞烷基是低級(jí)亞烷基。
術(shù)語(yǔ)“烷基氨基芳基-”指基團(tuán)烷基-NR-芳基-，其中“芳基”是二價(jià)基團(tuán)，R是氫、烷基、芳烷基和脂環(huán)基。在“低級(jí)烷基氨基芳基”中，所述亞烷基是低級(jí)烷基。
術(shù)語(yǔ)“烷氧基芳基-”指由烷氧基取代的芳基。在“低級(jí)烷氧基芳基-”中，烷基是低級(jí)烷基。
術(shù)語(yǔ)“芳氧基烷基-”指由芳氧基取代的烷基。
術(shù)語(yǔ)“芳烷氧基烷基-”指基團(tuán)芳基-alk-O-alk-，其中“alk”為亞烷基?！暗图?jí)芳烷氧基烷基-”指這樣的基團(tuán)，其中亞烷基是低級(jí)亞烷基。
術(shù)語(yǔ)“烷氧基-”或“烷基氧基”指基團(tuán)烷基-O-。
術(shù)語(yǔ)“烷氧基烷基-”或“烷基氧基烷基-”指基團(tuán)烷基-O-alk-，其中“alk”為亞烷基。在“低級(jí)烷氧基烷基-”中，每個(gè)烷基和亞烷基是低級(jí)亞烷基。
術(shù)語(yǔ)“烷硫基-”和“烷基硫代”指基團(tuán)烷基-S-。
術(shù)語(yǔ)“烷硫基烷基-”指基團(tuán)烷基-S-alk-，其中“alk”為亞烷基。在“低級(jí)烷硫基烷基-”中，每個(gè)烷基和亞烷基是低級(jí)亞烷基。
術(shù)語(yǔ)“烷氧基羰基氧基-”指基團(tuán)烷基-O-C(O)-O-。
術(shù)語(yǔ)“芳氧基羰基氧基-”指基團(tuán)芳基-O-C(O)-O-。
術(shù)語(yǔ)“烷硫基羰基氧基-”指基團(tuán)烷基-S-C(O)-O-。
術(shù)語(yǔ)“酰胺基”或“甲酰胺基”指NR2-C(O)-和RC(O)-NR1-，其中R和R1包括H、烷基、芳基、芳烷基和脂環(huán)基。該術(shù)語(yǔ)不包括脈、-NR-C(O)-NR-。
術(shù)語(yǔ)“甲酰胺基烷基芳基”或“甲酰胺基芳基”分別指芳基-alk-NR1-C(O)或ar-NR1-(CO)-alk-，其中“ar”是芳基，“alk”是亞烷基，R1和R包括H、烷基、芳基、芳烷基和脂環(huán)基。
術(shù)語(yǔ)“羥烷基”指由一個(gè)-OH取代的烷基。
術(shù)語(yǔ)“鹵代烷基”和“烷基鹵”指由一個(gè)鹵素取代的烷基。優(yōu)選鹵原子在2-位。
術(shù)語(yǔ)“氰基”指-C≡N。
術(shù)語(yǔ)“硝基”指-NO2。
術(shù)語(yǔ)“酰基烷基”指烷基-C(O)-alk-，其中“alk”為亞烷基。
術(shù)語(yǔ)“氨基甲酰胺基烷基-”指基團(tuán)NR2-C(O)-N(R)-alk-，其中R是烷基或H，“alk”是亞烷基?！暗图?jí)氨基甲酰胺基烷基-”指這樣的基團(tuán)，其中“alk”是低級(jí)亞烷基。
術(shù)語(yǔ)“雜芳基烷基”指由雜芳基取代的烷基。
術(shù)語(yǔ)“全鹵”指其中脂族基團(tuán)或芳基上的每一個(gè)C-H鍵被C-鹵鍵置換的基團(tuán)。合適的全鹵烷基包括-CF3和-CFCl2。
術(shù)語(yǔ)“胍基”指-NR-C(NR)-NR2以及-N＝C(NR2)2，其中每一個(gè)R基團(tuán)獨(dú)立選自-H、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基和脂環(huán)基，除-H外，所有這些基團(tuán)可任選被取代。
術(shù)語(yǔ)“脒基”指-C(NR)-NR2，其中每一個(gè)R基團(tuán)獨(dú)立選自-H、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基和脂環(huán)基，除H外，所有這些基團(tuán)可任選被取代。
術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的鹽”包括式I化合物的鹽及其由本發(fā)明化合物和有機(jī)或無(wú)機(jī)酸或堿結(jié)合衍生的式I化合物的前藥。合適的酸包括鹽酸。
在此使用的術(shù)語(yǔ)“前藥”指在給予生物系統(tǒng)時(shí)，會(huì)因自發(fā)性化學(xué)反應(yīng)、酶催化的化學(xué)反應(yīng)和/或代謝性化學(xué)反應(yīng)或其每一種的組合生成生物活性化合物的任何化合物。采用連接于與藥物相連的官能度如HO-、HS-、HOOC-、R2N-的基因可形成標(biāo)準(zhǔn)前藥，所述前藥體內(nèi)可裂解。標(biāo)準(zhǔn)前藥包括(但不限于)羧酸酯，其中所述基團(tuán)為烷基、芳基、芳烷基、酰氧基烷基、烷氧基羰基氧基烷基以及作為羥基、硫羥基的酯和胺，其中連接的基團(tuán)為?；檠趸驶?、氨基羰基、磷酸酯或硫酸酯。這些說(shuō)明的基團(tuán)僅是示例性的，并不能一一列舉。本領(lǐng)域的一個(gè)技術(shù)人員可制備其它已知種類(lèi)的前藥。這樣的式I化合物的前藥均在本發(fā)明范圍內(nèi)。前藥必須經(jīng)受一些形式的化學(xué)轉(zhuǎn)變，以產(chǎn)生生物活性的化合物或?yàn)樯锘钚曰衔锏那绑w。在某些情況下，前藥是生物活性的，其活性通常低于藥物本身，并發(fā)揮通過(guò)改善口服生物利用度、藥效學(xué)半衰期等來(lái)改進(jìn)藥物效力或安全性。生物活性化合物包括，例如，抗癌藥、抗病毒劑和抗生素藥。
術(shù)語(yǔ)“二齒的”指通過(guò)末端連接于相同原子以形成環(huán)基的烷基。例如，含二齒亞丙基的亞丙基亞胺。
當(dāng)R6＝R6，V＝W，W’＝H，以及V和W或者兩者指向上方，或者兩者指向下方，下面的結(jié)構(gòu) 具有通過(guò)磷-氧雙鍵的對(duì)稱(chēng)平面。
術(shù)語(yǔ)“環(huán)狀1’，3’-丙酯”、“環(huán)狀1，3-丙酯”、“環(huán)狀1’，3’-丙基酯”和“環(huán)狀1，3-丙基酯”指下面的基團(tuán) 短語(yǔ)“V和Z通過(guò)另外的3-5個(gè)原子連接在一起，以形成含有5-7個(gè)環(huán)原子，任選1個(gè)雜原子的環(huán)基，其由連接于碳原子的羥基、酰氧基、烷氧基羰基氧基或芳氧基羰基氧基取代，所述碳原子為來(lái)自鄰近V的兩個(gè)Y基團(tuán)的三個(gè)原子之一”包括以下含義 上面(左邊)所示的結(jié)構(gòu)具有形成5元環(huán)基的另外的3個(gè)碳原子。這樣的環(huán)基必須具有所列出的待氧化的取代。
短語(yǔ)“V和Z通過(guò)另外的3-5個(gè)原子連接在一起，以形成任選含有1個(gè)雜原子的環(huán)基，所述環(huán)基與相對(duì)于鄰近V的Y的β和γ位上的芳基稠合”包括下面的結(jié)構(gòu) 短語(yǔ)“V和W通過(guò)另外的3個(gè)碳原子連接在一起，以形成含有6個(gè)碳原子并由選自以下的1個(gè)取代基取代的任選取代的環(huán)基羥基、酰氧基、烷氧基羰基氧基、烷硫基羰基氧基及芳氧基羰基氧基，其連接于一個(gè)所述另外的碳原子上，所述碳原子為來(lái)自鄰近V的Y的三個(gè)原子之一”包括下面的結(jié)構(gòu) 上面的結(jié)構(gòu)在新的6元環(huán)上具有酰氧基取代基(其為來(lái)自一個(gè)Y的3個(gè)碳原子之一)和任選的取代基-CH3。在下列位置中的每一個(gè)上具有至少一個(gè)氫連接于Z的碳；相對(duì)于標(biāo)有“3”的碳的兩個(gè)α碳；及以上連接“OC(O)CH3”的碳。
短語(yǔ)“W和W’通過(guò)另外的2-5個(gè)原子連接在一起，以形成任選含0-2個(gè)雜原子的環(huán)基，且V必須是芳基、取代的芳基、雜芳基或取代的雜芳基”包括下面的結(jié)構(gòu)
上面的結(jié)構(gòu)具有V＝芳基，及對(duì)于W和W’的螺-稠合的環(huán)丙基。
術(shù)語(yǔ)“亞磷酰胺(phosphoramidite)”指通過(guò)C、O、S或N連接于-P(YR(YR)(包括環(huán)狀形式)的磷的化合物，其中Y獨(dú)立為-O-或-NR6-，但是其中至少一個(gè)Y為-NR6-。
術(shù)語(yǔ)“氨基磷酸酯”指通過(guò)C、O、S或N連接于-P(O)(YR)(YR)(包括環(huán)狀形式)的磷的化合物，其中Y獨(dú)立為-O-或-NR6-，但是其中至少一個(gè)Y為-NR6-。
術(shù)語(yǔ)“環(huán)狀氨基磷酸酯”指氨基磷酸酯，其中-P(O)(YR)(YR)為 連接于V的碳必須具有C-H鍵。連接于Z的碳也必須具有C-H鍵。
術(shù)語(yǔ)“碳環(huán)糖”指含有代替在糖環(huán)中通常發(fā)現(xiàn)的氧的碳的糖類(lèi)似物。它包括5-元環(huán)，例如呋喃核糖基和阿拉伯呋喃糖基糖，其中環(huán)氧被碳取代。
術(shù)語(yǔ)“無(wú)環(huán)糖”指缺少環(huán)，例如呋喃核糖基環(huán)的糖。一個(gè)例子是2-羥基乙氧基甲基替代呋喃核糖基環(huán)。
術(shù)語(yǔ)“L-核苷”指天然的β-D-核苷類(lèi)似物的對(duì)映體。
術(shù)語(yǔ)“阿拉伯呋喃糖基核苷”指含阿拉伯呋喃糖基糖的核苷類(lèi)似物，即，其中呋喃核糖基糖的2’-羥基在該糖環(huán)的相對(duì)的平面上。
術(shù)語(yǔ)“二氧戊環(huán)糖”指含有代替了呋喃核糖基糖的3’-碳的氧原子的糖。
術(shù)語(yǔ)“氟化糖”指具有1-3個(gè)碳-氟原子的糖。
術(shù)語(yǔ)“P450酶”指氧化有機(jī)化合物的細(xì)胞色素酶，包括天然出現(xiàn)的P450同工酶，突變體、平截的酶、后-轉(zhuǎn)錄酶修飾的酶及其它變體。
術(shù)語(yǔ)“肝”指肝和含有發(fā)現(xiàn)可氧化本發(fā)明的氨基磷酸酯的CYP3A4同工酶或任何其它P450同工酶的類(lèi)似組織和細(xì)胞?；趯?shí)施例F，我們發(fā)現(xiàn)式VI和VIII的前藥可被細(xì)胞色素P450同工酶CYP3A4選擇性地氧化。根據(jù)DeWaziers等(J.Pharm.Exp.Ther.，253，387-394(1990))的描述，CYP3A4位于人的下列組織中(通過(guò)免疫印跡和酶法測(cè)定)組織肝活性的％肝 100十二指腸50空腸30回腸10結(jié)腸＜5(只發(fā)現(xiàn)P450同工酶)胃 ＜5食管＜5腎 未能檢測(cè)到因此，“肝更優(yōu)選”指肝、十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸、胃和食管。最優(yōu)選肝指肝器官。
術(shù)語(yǔ)“肝的”指肝器官細(xì)胞，例如，不是來(lái)自十二指腸的細(xì)胞。
術(shù)語(yǔ)“提高”指增加或改善特異性特性。這包括其中原來(lái)無(wú)活性的情況。
術(shù)語(yǔ)“肝特異性”指如用藥物或前藥治療的動(dòng)物中所測(cè)定的比率
該比率可通過(guò)測(cè)定母體藥物或藥物代謝產(chǎn)物，包括生物活性藥物代謝產(chǎn)物或兩者在特定時(shí)間的組織水平來(lái)測(cè)定，或可以代表一種基于在3個(gè)或更多的時(shí)間點(diǎn)測(cè)定的值的AUC。
術(shù)語(yǔ)“增加或提高肝特異性”指用前藥治療的動(dòng)物相對(duì)于用母體藥物治療的動(dòng)物的肝特異性比率增加。
術(shù)語(yǔ)“提高口服生物利用度”指增加自胃腸道吸收的母體藥物或前藥(非本發(fā)明的)劑量的至少50％。更優(yōu)選至少100％?？诜锢枚鹊臏y(cè)量一般指與系統(tǒng)給藥比較，口服給藥后前藥、藥物或藥物代謝產(chǎn)物在血、組織或尿中的測(cè)量。
術(shù)語(yǔ)“母體藥物”指表示氨基磷酸酯的MH，其中M通過(guò)氧、硫或氮連接于-P(O)(YR)(YR)，當(dāng)M通過(guò)碳連接于-P(O)(YR)(YR)時(shí)，則連接于M-PO32-。例如，AZT可以被認(rèn)為是一種MH形式的母體藥物。在體內(nèi)，AZT被首先磷酸化為AZT-PO32-，然后進(jìn)一步磷酸化形成AZT-三磷酸酯，其為生物活性形式。只有當(dāng)M通過(guò)N、S或O連接時(shí)，母體藥物形式MH才適用。在PMEA的情況下，母體藥物形式為M-PO32-。
術(shù)語(yǔ)“藥物代謝產(chǎn)物”指在體內(nèi)或體外由母體藥物或它的前藥產(chǎn)生的任何化合物。
術(shù)語(yǔ)“藥效學(xué)半衰期”指給予藥物或前藥后，觀察到的所測(cè)量的藥理學(xué)反應(yīng)減少一半的時(shí)間。當(dāng)半衰期增加優(yōu)選至少50％時(shí)，藥效學(xué)半衰期提高。
術(shù)語(yǔ)“藥代動(dòng)力學(xué)半衰期”指給予藥物或前藥后，觀察到的血漿或組織中藥物濃度減少一半的時(shí)間。
術(shù)語(yǔ)“治療指數(shù)”指藥物或前藥產(chǎn)生治療學(xué)上有益的反應(yīng)的劑量相對(duì)于藥物或前藥產(chǎn)生不需要的反應(yīng)如死亡(一種指示毒性和/或藥理學(xué)副作用的標(biāo)記升高)的劑量的比率。
術(shù)語(yǔ)“提高生物活性藥物的水平”指生物活性藥物在肝中的水平相對(duì)于給予母體藥物后所獲得的水平增加，其中對(duì)前藥和母體藥物采用相同的給藥方式。
術(shù)語(yǔ)“表達(dá)P450酶的癌”指具有至少5％的肝特異性活性的特異性活性的腫瘤細(xì)胞，可伴有或不伴有誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞中P450活性的藥物。
術(shù)語(yǔ)“低水平的酶”指低于必須產(chǎn)生生物活性藥物的最大應(yīng)答的水平。
術(shù)語(yǔ)“不充分的細(xì)胞產(chǎn)生”指低于必須產(chǎn)生生物活性藥物的最大應(yīng)答的水平。例如，所述反應(yīng)可以是病毒滴度。
術(shù)語(yǔ)“緩慢傳遞”指增加釋放的時(shí)期，在此期間因前藥的存在而延長(zhǎng)治療學(xué)上有效的藥物水平。
術(shù)語(yǔ)“避免藥物抗性”指因改變生物學(xué)途徑和對(duì)在體內(nèi)所需部位產(chǎn)生和維持藥物的生物活性形式有重要意義的細(xì)胞活性所致的藥物治療有效性的喪失或部分喪失(藥物抗性)，也指藥物通過(guò)替代的途徑和細(xì)胞活性避免這種抗性的能力。
術(shù)語(yǔ)“FBP酶抑制劑”指抑制人酶果糖1，6-二磷酸酶(具有至少100μM的IC50)且以100mg/kg劑量靜脈給予后降低正常禁食18小時(shí)的大鼠的葡萄糖的化合物。生物活性FBP酶抑制劑為M-PO32-，其中M通過(guò)碳連接，或當(dāng)MH為含有咪唑的核苷類(lèi)似物時(shí)，則通過(guò)氧連接。
術(shù)語(yǔ)“生物活性藥物或生物活性劑”指產(chǎn)生生物學(xué)作用的化學(xué)實(shí)體。在本發(fā)明中，生物活性藥物指M-PO32-、M-P(O-)NHR6-、MP2O63-或MP3O94-，其中M可以是在母體藥物或代謝產(chǎn)物中相同的M。
術(shù)語(yǔ)“治療有效量”指在治療疾病或病癥中具有任何有益作用的量。
術(shù)語(yǔ)“磷酸化酶的降低的活性”包括酶、導(dǎo)致降低有效性(降低Km或Vmax)或提高該酶內(nèi)源性抑制劑產(chǎn)生的突變體產(chǎn)生的降低。
術(shù)語(yǔ)“磷(膦)酸酯”指通過(guò)C、O、S或N連接于PO32-或P(O)(NHR6)O-的化合物。相反離子可以是H+或金屬陽(yáng)離子。
術(shù)語(yǔ)“核苷”指連接于糖的嘌呤或嘧啶堿，包括其類(lèi)似物，包括其雜環(huán)和碳環(huán)類(lèi)似物。
在說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求書(shū)中涉及下列熟知的藥物。還給出縮寫(xiě)和通用名。
araA；9-b-D-阿拉伯呋喃糖基腺嘌呤(阿糖腺苷)AZT；3’-疊氮基-2’，3’-雙脫氧胸苷(齊多夫定)d4I；2’，3’-雙脫氫-3’-脫氧胸苷(Stavudine)ddI；2’，3’-雙脫氧肌苷(去羥肌苷)ddA；2’，3’-雙脫氧腺苷ddC；2’，3’-雙脫氧胞苷(扎西他濱)L-ddC’L-2’，3’-雙脫氧胞苷L-FddC；L-2’，3’-雙脫氧-5-氟胞苷L-dT；b-L-胸苷(NV-02B)L-dC；b-L-2-脫氧胞苷(NV-02C)L-d4C；L-3’-脫氧-2’，3’-雙脫氫胞苷L-Fd4C；L-3’-脫氧-2’，3’-雙脫氫-5-氟胞苷3TC；(-)-2’，3’-雙脫氧-3’-硫雜胞苷(thiacytidine)；2’R，5’S(-)-1-[2-(羥甲基)氧硫雜戊環(huán)(oxathiolan)-5-基]胞嘧啶(拉米夫定)1-b-D-呋喃核糖基-1，2，4-三唑-3-甲酰胺(利巴韋林)FIAU；1-(2-脫氧-2-氟-b-D-阿拉伯呋喃糖基)-5-碘尿苷FIAC；1-(2-脫氧-2-氟-b-D-阿拉伯呋喃糖基)-5-碘胞嘧啶BHCG；(±)-(1a，2b，3a)-9-[2，3-雙(羥甲基)環(huán)丁基]鳥(niǎo)嘌呤FMAU，2’-氟-5-甲基-b-L-阿拉伯-呋喃糖基尿嘧啶BvaraU；1-b-D-阿拉伯呋喃糖基-E-5-(2-溴乙烯基)尿嘧啶(索立夫定)
E-5-(2-溴乙烯基)-2’-脫氧尿苷TFT；三氟胸苷5-丙炔基-1-阿拉伯糖基尿嘧啶(Zonavir)CDG；碳環(huán)2’-脫氧鳥(niǎo)苷DAPD；(-)-B-D-2，6-二氨基嘌呤二氧戊環(huán)FDOC；(-)-B-D-5-氟-1-[2-(羥甲基)-1，3-二氧戊環(huán)]胞嘧啶d4C；3’-脫氧-2’，3’-雙脫氫胞苷DXG；二氧戊環(huán)鳥(niǎo)苷FEAU；2’-脫氧-2’-氟-1-b-D-阿拉伯呋喃糖基-5-乙基尿嘧啶FLG；2’，3’-雙脫氫-3’-氟鳥(niǎo)苷FLT；3’-脫氧-3’-氟胸苷FTC；(-)-順式-5-氟-1-[2-(羥甲基)-1，3-氧硫雜戊環(huán)-5-基]胞嘧啶5-基-碳環(huán)2’-脫氧鳥(niǎo)苷(BMS200，475)[1-(4’-羥基-1’，2’-丁二烯基)胞嘧啶](Cytallene)氧環(huán)烷菌素A；9-(2-脫氧-2-羥甲基-β-D-赤-oxetanosyl)腺嘌呤氧環(huán)烷菌素G；9-(2-脫氧-2-羥甲基-β-D-赤-oxetanosyl)鳥(niǎo)嘌呤ddAPR；2，6-二氨基嘌呤-2’，3’-雙脫氧核苷3TC；(-)-2’，3’-雙脫氧-3’硫雜胞苷；(2R，5S)1-[2-(羥甲基)-1，3-氧硫雜戊環(huán)-5-基]胞嘧啶(拉米夫定)Cyclobut A；(+/-)-9-[(1β，2α，3β)-2，3-雙(羥甲基)-1-環(huán)丁基]腺嘌呤Cyclobut G；(+/-)-9-[(1β，2α，3β)-2，3-雙(羥甲基)-1-環(huán)丁基]鳥(niǎo)嘌呤(Lobucavir)5-氟-2’-脫氧尿苷(氟尿苷)dFdC；2’，2’-二氟脫氧胞苷(吉西他濱)araC；阿拉伯糖基胞嘧啶(阿糖胞苷)溴脫氧尿苷IDU；5-碘-2’-脫氧尿苷(碘苷)CdA；2-氯脫氧腺苷(克拉屈濱)
F-ara-A；氟阿拉伯糖基腺苷(氟達(dá)拉濱)ACV；9-(2-羥基乙氧基甲基)鳥(niǎo)嘌呤(阿昔洛韋)GCV；9-(1，3-二羥基-2-丙氧基甲基)鳥(niǎo)嘌呤(更昔洛韋)9-(4-羥基-3-羥甲基丁-1-基)鳥(niǎo)嘌呤(噴昔洛韋)(R)-9-(3，4-二羥基丁基)鳥(niǎo)嘌呤(布昔洛韋)膦酰基甲酸(膦甲酸)PPA；膦?；宜酨MEA；9-(2-膦?；籽趸一?腺嘌呤(Adefovir)PMEDAP，9-(2-膦酰基甲氧基乙基)-2，6-二氨基嘌呤HPMPC；(S)-9-(3-羥基-2-膦酰基甲氧基丙基)胞嘧啶(Cidofovir)HPMPA；(s)-9-(3-羥基-2-膦?；籽趸?腺嘌呤FPMPA；9-(3-氟-2-膦?；籽趸?腺嘌呤PMPA；9-[2-(R)-膦?；籽趸鵠腺嘌呤(Tenofovir)araT；9-b-D-阿拉伯呋喃糖基胸苷FMdC；(E)-2’-脫氧-2’(氟亞甲基)胞苷AICAR；5-氨基咪唑-4-甲酰胺基-1-呋喃核糖基。
本發(fā)明詳述本發(fā)明涉及新的環(huán)狀氨基磷酸酯方法的應(yīng)用，該方法使化合物通過(guò)P450酶有效轉(zhuǎn)化為含磷(膦)酸酯的化合物，P450酶被發(fā)現(xiàn)大量存在于含這些特異性酶的肝和其它組織中。該方法可以應(yīng)用于各種藥物和診斷造影劑。更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及前藥的用途，該前藥經(jīng)歷非-酯酶-介導(dǎo)的水解反應(yīng)產(chǎn)生MP(O)(NHR6)O-，后者或者為生物活性的，或者可轉(zhuǎn)化為生物活性藥物M-PO32-、M-P2O63-或M-P3O94-。由于含高帶電的磷(膦)酸酯化合物在胃腸道不易吸收，該前藥方法可用于提高口服給藥后的吸收。
在本發(fā)明的另一方面，這種前藥方法也可用于延長(zhǎng)相對(duì)于母體藥物的藥效學(xué)半衰期，因?yàn)楸景l(fā)明的環(huán)狀磷(膦)酸酯可避免經(jīng)酶的代謝，該酶能代謝母體藥物。類(lèi)似地，本發(fā)明的前藥可延長(zhǎng)含磷(膦)酸酯化合物的藥效學(xué)半衰期，因?yàn)樗銮八幙杀苊庥糜趶难髦星宄龓ж?fù)電荷的化合物的清除途徑。
在本發(fā)明的另一方面，這種前藥方法也可用于獲得母體藥物的緩慢傳遞，因?yàn)樾碌那八幍难趸诟沃幸圆煌乃俾蔬M(jìn)行，因此選擇緩慢但可維持治療有效水平的合適速率氧化的前藥將產(chǎn)生持久的治療效果。
本發(fā)明的新的環(huán)狀1，3-丙酯方法也可用于增加特定藥物或造影劑在肝中的分布，在肝中含有大量的擔(dān)負(fù)氧化本發(fā)明的環(huán)狀1，3-丙酯的P450同工酶，以便最終產(chǎn)生游離的磷(膦)酸酯。因此，這種前藥技術(shù)在治療肝臟疾病或其中肝對(duì)生化終產(chǎn)物如葡萄糖、膽固醇、脂肪酸和甘油三酯的過(guò)度產(chǎn)生負(fù)有責(zé)任的疾病將證明是有用的。這樣的疾病包括病毒性感染和寄生蟲(chóng)感染、肝癌、肝纖維化、糖尿病、高脂血癥和肥胖癥。在一個(gè)方面，所述疾病最好不是糖尿病。此外，前藥的肝特異性在將診斷劑傳遞到肝的過(guò)程中也證明是有用的。在表達(dá)能裂解前藥的P450酶的組織中可獲得高水平的生物活性藥物，因?yàn)榧せ钋八幍倪@些細(xì)胞明顯滯留前藥，隨后前藥裂解中間體及生物活性藥物。此外，由于代謝或其它清除機(jī)制，當(dāng)母體藥物在組織中不能很好地磷酸化或具有相對(duì)短的藥代動(dòng)力學(xué)半衰期時(shí)，相對(duì)于給予母體藥物后所達(dá)到的水平而言，可以達(dá)到高水平的生物活性藥物。
環(huán)磷酰胺的某些前藥類(lèi)似物的用途也被設(shè)計(jì)用于治療胃腸道的癌癥(如原發(fā)性和繼發(fā)性肝癌)以及其中細(xì)胞色素P450s被人工引入(如通過(guò)逆病毒和其它熟知的基因治療方法以及通過(guò)植入表達(dá)細(xì)胞色素P450s的基因工程改造的細(xì)胞)的癌癥。
這些特異性的P450酶也在其它特定組織和細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，因此該方法也可用于增加這些藥物向那些組織的傳遞。
在本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明的大多數(shù)環(huán)狀氨基磷酸酯在肝中代謝而生成磷(膦)酸酯，這一特征可使本發(fā)明的的前藥方法用于提高各種藥物的治療指數(shù)，而這些藥物本來(lái)具有與藥物或其代謝產(chǎn)物在肝外組織分布的量有關(guān)的副作用。提高治療指數(shù)也可產(chǎn)生增加的生物活性藥物的肝水平，因而具有比在相似的劑量下給予母體藥物更大的效果。
在本發(fā)明的另一方面，前藥可被用于傳遞磷(膦)酸酯至組織，所述組織生成次優(yōu)水平的磷(膦)酸酯及其有關(guān)的較高磷酸化的代謝產(chǎn)物，這是因?yàn)槟阁w藥物的差的底物活性和/或用于使母體藥物磷酸化的酶的差的表達(dá)。磷酸化酶的差的表達(dá)是自然發(fā)生的或因長(zhǎng)期給予所述藥物或其它藥劑后磷酸化酶的下行調(diào)節(jié)引起。
在本發(fā)明的另一方面，描述了新的亞磷酰胺和氨基磷酸酯中間體。
在本發(fā)明的另一方面，描述了制備環(huán)狀氨基磷酸酯前藥的方法。
下面詳細(xì)描述這些方面。
氨基磷酸酯藥物式M-P(O)(NHR6)O-的化合物為有用的與核苷結(jié)合位點(diǎn)(如AMP-結(jié)合位點(diǎn))及某些已知識(shí)別帶負(fù)電荷的化合物(如羧酸和膦酸)的位點(diǎn)結(jié)合的化合物。催化將水加入羰基化合物，特別是肽羰基、酯、酮或醛的酶具有特別重要的意義，因?yàn)檫@些酶識(shí)別具有含帶負(fù)電荷的氧的四面體基團(tuán)的化合物。一個(gè)例子是鋅金屬蛋白酶類(lèi)的酶，此酶利用鋅助的催化機(jī)制將水加入通過(guò)肽羰基。這些酶被氨基磷酸酯抑制，例如，NEP 24.11被天然產(chǎn)物膦酰二肽抑制。前藥策略可提供一種有用的口服傳遞這些化合物，或?qū)⒛承┗衔飩鬟f給肝以獲得更大效果或更大的治療窗口的手段?？蛇m合用于作為前藥傳遞的酶抑制劑包括某些抑制NEP24.11、膠原酶、溶基質(zhì)素、明膠酶、ACE、內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶，以及涉及諸如出現(xiàn)在類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎、急性心肌梗塞的心臟，及腫瘤轉(zhuǎn)移的基質(zhì)重建中的金屬蛋白酶的氨基磷酸酯。
膦酸和磷酸式I前藥的裂解產(chǎn)生氨基磷酸酯M-P(O)(NHR)O-，其在某些情況下通過(guò)化學(xué)水解或酶催化的水解(磷酸酶，酰胺酶)被進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的M-PO32-。產(chǎn)物M-PO32-可以是藥物或者其本身可經(jīng)細(xì)胞激酶進(jìn)一步代謝產(chǎn)生高級(jí)磷酸酯，例如，M-P2O63-或M-P3O94-。在某些情況下，中間體M-P(O)(NHR)O-通過(guò)先轉(zhuǎn)化為M-H，可以轉(zhuǎn)化為高級(jí)磷酸酯。
提高口服生物利用度本發(fā)明涉及某些環(huán)狀氨基磷酸酯及其傳遞(最優(yōu)選通過(guò)口服給藥)治療有效量的相應(yīng)的磷(膦)酸酯化合物至最好是需要此治療的動(dòng)物的用途。本發(fā)明的前藥通過(guò)改變前藥部分及其取代基V、Z、W和W’而改變藥物的物理特性，提高某些藥物的口服生物利用度。活性藥物可以是M-P(O)(NHR6)O-或M-PO32-。或者，作為替代，兩者可進(jìn)一步經(jīng)受代謝，例如經(jīng)激酶磷酸化，形成為活性藥物物質(zhì)的M-P2O63-和/或M-P3O94-。
含游離膦酸或磷酸基團(tuán)的化合物一般顯示差的口服生物利用度(＜2％)，因?yàn)檫@些基團(tuán)在生理pH環(huán)境下是高度帶電的。分子量大于250道爾頓的化合物上的帶電基團(tuán)阻止穿過(guò)細(xì)胞膜的被動(dòng)擴(kuò)散以及透過(guò)腸上皮細(xì)胞層的吸收。因此，研究了這些化合物的中性前藥，因?yàn)檫@些化合物是更加親脂性的，因而更易于顯示出改善的腸通透性。雖然已報(bào)道了許多類(lèi)前藥，幾乎沒(méi)有發(fā)現(xiàn)顯示出適合藥物開(kāi)發(fā)的特性的前藥。
最常見(jiàn)的前藥類(lèi)，及幾乎只用于臨床疾病的前藥類(lèi)為酰氧烷基酯。然而這些前藥由于差的水中的穩(wěn)定性、對(duì)酸/堿pH的差的穩(wěn)定性和在胃腸道中經(jīng)酯酶的快速降解，往往只顯示出中等的口服生物利用度的改善(Shaw & Cundy，Pharm.Res.10(增刊)，S294(1993))。另一類(lèi)前藥為聯(lián)芳基前藥(例如，DeLombert等，J.Med.Chem.，37，498(1994))，其在一些個(gè)案中顯示提供好的適中的口服生物利用度的改善。這類(lèi)化合物的主要限制在于，前藥酯常常在體內(nèi)快速降解為一酸，但向母體藥物的轉(zhuǎn)化即使有的話，也只是緩慢發(fā)生的(有時(shí)需數(shù)天)。
本發(fā)明的前藥顯示出相對(duì)于母體藥物的提高的口服生物利用度的改進(jìn)特性。本發(fā)明的環(huán)狀氨基磷酸酯前藥的幾個(gè)特征可歸因于其提高口服生物利用度的能力。首先，前藥在寬范圍的pH的水溶液中顯示出好的穩(wěn)定性(實(shí)施例A)。這種pH穩(wěn)定性防止中間體在吸收前在口腔和胃腸道中的水解。這種pH穩(wěn)定性在配制產(chǎn)物期間也是有益的。
其次，前藥對(duì)胃腸道中豐富的酯酶和磷酸酶是抵抗的。由于給予的大部分劑量在胃腸道中維持完整，所述化合物比游離磷(膦)酸酯維持次高度帶電性，游離磷(膦)酸酯意味著更多的藥物可通過(guò)被動(dòng)擴(kuò)散而吸收并進(jìn)入血液(實(shí)施例B)。
最后，前藥可限制分子上其它位點(diǎn)的代謝。例如，本發(fā)明的前藥經(jīng)腺苷脫氨酶終止araA的嘌呤堿的代謝，腺苷脫氨酶在胃腸道中也是豐富的(實(shí)施例B)。正?？杀辉撁该摪被腶raA的胺可由位于5’-呋喃核糖基羥基上的環(huán)磷酸酯部分保護(hù)。該分子的其它位點(diǎn)上的還原代謝能使更多的藥物在血流中循環(huán)。盡管不是所有這些特性都能應(yīng)用于每一種藥物的每一種前藥，這些特性的每一種都能使更多的藥物在胃腸道中殘存并被吸收。
本發(fā)明的新的前藥策略對(duì)作用于肝的藥物以及某些作用于位于血管系統(tǒng)或肝外組織的靶的藥物的口服傳遞將是有用的。由于CYP3A4(該酶負(fù)責(zé)激活新的前藥)的最高濃度是在肝中，生物活性藥物在肝中，相對(duì)于在其它組織中，具有高的濃度。在一個(gè)方面，優(yōu)選作用于肝的母體藥物。
然而，一些磷(膦)酸酯通過(guò)肝中的有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白被輸出并進(jìn)入血流。在血流中的許多磷(膦)酸酯經(jīng)腎快速地清除。這樣的化合物很可能在肝外組織中將不能達(dá)到治療水平。然而，有一些磷(膦)酸酯和磷酸酯能維持在循環(huán)血液中，因?yàn)樗鼈儾荒鼙荒I快速清除(如NEP抑制劑)。這樣的化合物能在血液和肝外組織中達(dá)到治療有效水平。因此，在另一方面，優(yōu)選不能被腎清除的磷(膦)酸酯經(jīng)口服傳遞至肝外組織。因此，作用于可接近游離磷(膦)酸的位點(diǎn)如血管系統(tǒng)內(nèi)的靶，或酶或位于細(xì)胞膜上的受體靶的此類(lèi)母體藥物是優(yōu)選的，所述細(xì)胞膜與血液或細(xì)胞內(nèi)間隙中的液體接觸。適合于本發(fā)明這一方面的靶應(yīng)是這樣的靶，其中胃腸外給予(如通過(guò)靜脈注射)的膦酸產(chǎn)生期望對(duì)治療疾病有用的藥理學(xué)或生物化學(xué)應(yīng)答。
由于抑制劑顯示差的口服生物利用度(＜2％)，本發(fā)明所述的前藥類(lèi)可提高口服生物利用度，隨后前藥在肝中裂解產(chǎn)生膦酸。前藥在肝中裂解后，可望產(chǎn)生合適的循環(huán)藥物水平，因?yàn)橐阎畏置陟⑺嶂裂h(huán)中。
通過(guò)比較口服和靜脈給予前藥、母體藥物和/或代謝產(chǎn)物后在血漿、肝或其它組織或有關(guān)體液中的濃度隨時(shí)間的曲線下的面積，也可計(jì)算口服生物利用度。(實(shí)施例P)例如，對(duì)于大量從腎排泄的藥物來(lái)說(shuō)，通過(guò)將例如口服與靜脈給予前藥后，尿中排泄的母體藥物或代謝產(chǎn)物的量進(jìn)行比較，可測(cè)量口服生物利用度。通過(guò)將給予前藥(口服)與母體藥物(靜脈)后尿中排泄的母體藥物的量進(jìn)行比較，可估算口服生物利用度的下限。本發(fā)明的前藥在很大范圍的前藥中均顯示改進(jìn)的口服生物利用度，許多前藥優(yōu)選顯示1.5-10倍的口服生物利用度的增加。與母體藥物比較，更優(yōu)選口服生物利用度增加至少2倍。
在胃腸道抑制CYP3A4的藥物是已知的。例如，已知葡萄果汁假定通過(guò)葡萄果汁中的一種成分(如香檸檬亭；Chem Res Toxicol 1998，11，252-259)降低所述活性，該成分產(chǎn)生所述酶的滅活和/或下行調(diào)節(jié)。因?yàn)橹挥形改c道的CYP3A4受到影響，本發(fā)明的前藥的口服吸收應(yīng)該增加。抑制、滅活或下行調(diào)節(jié)P450s(代謝所述前藥)的藥物的組合將具有增強(qiáng)它們的吸收的作用，由此使更多的前藥可用于肝的代謝。該組合的純效果將是把更多的口服吸收后的藥物傳遞給肝。
持續(xù)傳遞在體內(nèi)經(jīng)受快速消除的藥物常常需要多次給藥。以便在一個(gè)延長(zhǎng)的時(shí)期內(nèi)獲得治療有效的血液水平。也可采用其它的方法，包括緩釋制劑和緩釋裝置。隨時(shí)間分解的前藥也能提供獲得持久的藥物水平的方法。一般來(lái)說(shuō)，已知的磷(膦)酸酯前藥不太可能具有這種特性，因?yàn)樗鼈兓蛘咴隗w內(nèi)經(jīng)受快速水解(例如酰氧基烷基酯)，或者極慢地轉(zhuǎn)化(如二芳基前藥)。
本發(fā)明的環(huán)狀氨基磷酸酯通過(guò)提供藥物隨時(shí)間的穩(wěn)定釋放，能提供持續(xù)的藥物釋放。例如，大多數(shù)的磷酸酯在系統(tǒng)給藥后幾分鐘內(nèi)在體內(nèi)通過(guò)血中存在的磷酸酶作用經(jīng)受脫磷酸化。類(lèi)似地，這些磷酸酯的酰氧基烷基酯經(jīng)受快速的酯酶-介導(dǎo)的水解而成為磷酸酯，然后這些磷酸酯被快速地脫磷酸化。本發(fā)明的一些前藥能延長(zhǎng)藥物的傳遞，因?yàn)樵S多本發(fā)明的前藥隨時(shí)間而在肝中被緩慢地氧化為磷(膦)酸酯(實(shí)施例S)。合適的定位的前藥部分可防止或減慢與母體藥物有關(guān)的系統(tǒng)代謝。
通過(guò)選擇在體內(nèi)以能在一時(shí)間段內(nèi)維持治療有效的藥物水平的速率水解的式I前藥，可獲得藥物的持續(xù)傳遞。藥物的裂解率取決于多種因素，包括P450氧化的速率，其依賴(lài)于前藥部分的取代基，這些取代基的立體化學(xué)和母體藥物。而且，緩釋藥物的生產(chǎn)取決于氧化后生成的中間體的消除速率和前藥到達(dá)肝(肝是氧化的主要部位)的速率和有效性。通過(guò)監(jiān)測(cè)在大部分參與代謝的P450酶存在下，在肝微粒體的存在下或在肝細(xì)胞存在下藥物產(chǎn)生的速率的測(cè)定中篩選前藥，容易完成具有所需特性的前藥的鑒定。這些測(cè)定分別在實(shí)施例C、D、F、G、I、J中說(shuō)明。
設(shè)計(jì)可以組合的本發(fā)明的前藥包括，例如，一種快速產(chǎn)生活性藥物以迅速獲得治療水平的前藥和另一種隨時(shí)間更緩慢地釋放活性藥物的前藥。
改進(jìn)的藥效學(xué)半衰期一種藥物的藥效學(xué)半衰期可通過(guò)新的前藥方法而延長(zhǎng)，這是因?yàn)樗诔掷m(xù)的時(shí)期內(nèi)產(chǎn)生藥物的能力和在某些情況下前藥的藥代動(dòng)力學(xué)半衰期延長(zhǎng)的緣故。兩種特性可獨(dú)立地使治療藥物水平維持一個(gè)延長(zhǎng)的時(shí)期，引起藥效學(xué)半衰期的改進(jìn)。藥效學(xué)半衰期可通過(guò)阻止母體藥物的代謝或清除途徑而延長(zhǎng)。對(duì)某些藥物，本發(fā)明的前藥能避免與母體藥物有關(guān)的代謝或消除途徑，由此作為前藥而在延長(zhǎng)的時(shí)期內(nèi)存在于動(dòng)物中。在延長(zhǎng)的時(shí)期內(nèi)的高水平前藥的存在引起母體藥物的持續(xù)產(chǎn)生，而母體藥物可引起藥效學(xué)半衰期的延長(zhǎng)。
前藥類(lèi)阻止與母體藥物有關(guān)的代謝途徑的能力的一個(gè)實(shí)例由araAMP前藥得到說(shuō)明。與araAMP相比，前藥顯示無(wú)ara-次黃嘌呤(“araH”)，其為araA口服或靜脈給予后在如血漿和胃腸道產(chǎn)生的已知代謝副產(chǎn)物。另一方面，AraAMP被快速地和幾乎完全地轉(zhuǎn)化為araH，其經(jīng)磷酸酶通過(guò)對(duì)araA第一次磷酸化作用而產(chǎn)生，接著經(jīng)腺苷脫氨酶使該堿脫氨基化。該前藥部分防止脫磷酸化作用和脫氨基作用的出現(xiàn)。
磷(膦)酸酯藥物的消除的通常途徑是通過(guò)腎和識(shí)別陰離子化合物的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。含膦酸酯和磷酸酯的藥物從血液循環(huán)中的完全消除常常只發(fā)生在給藥后幾分鐘內(nèi)。本發(fā)明的前藥通過(guò)屏蔽負(fù)電荷而減慢這些藥物的消除，直至在肝和類(lèi)似組織中氧化和水解后。
提高藥物向肝和類(lèi)似組織的選擇性傳遞以高度選擇性向肝傳遞藥物是合乎需要的，以便以最小副作用治療肝病或與異常肝特性有關(guān)的疾病(如糖尿病、高脂血癥)。
CYP3A4的組織分布的分析指明，其在肝中有大量表達(dá)(DeWaziers等，J.Pharm.Exp.Ther.，253387(1990))。而且，在前藥存在下對(duì)組織勻漿的分析指明，只有肝勻漿裂解前藥，而對(duì)來(lái)自上胃腸道、腎、腦、心、胃、脾、肌肉、肺和睪丸的較低程度的組織勻漿未見(jiàn)有明顯的前藥裂解(實(shí)施例D)。
肝特異性的證據(jù)也在口服和靜脈給予前藥后在體內(nèi)被顯示。靜脈給予araAMP前藥得到的生物活性藥物araATP的肝水乎大于等劑量的araA或araAMP獲得的水平。作為對(duì)照，前藥不能產(chǎn)生可檢測(cè)量的araA副產(chǎn)物araH，其如文獻(xiàn)所報(bào)道的，容易在給予araA或araAMP后檢測(cè)到。類(lèi)似地，前藥在口服給予后獲得高的肝水平而不產(chǎn)生代謝產(chǎn)物araH。由于前藥被肝中豐富的酶裂解，口服給藥可通過(guò)首過(guò)作用出現(xiàn)更高的肝特異性。
本發(fā)明所述的前藥可被修飾為能使消除步驟加快，因而在接近氧化位點(diǎn)處產(chǎn)生產(chǎn)物，對(duì)這些前藥來(lái)說(shuō)，所述位點(diǎn)在肝或其它表達(dá)P450的組織/細(xì)胞中。
在某些情況下，使用高反應(yīng)性的藥物的前藥，將最佳地獲得肝特異性，所述藥物在產(chǎn)生后，以比向肝外擴(kuò)散快的速率作用于局部。
誘導(dǎo)P450活性，如CYP3A4活性的藥物是已知的。例如，已知利福平、糖皮質(zhì)激素類(lèi)、苯巴比妥、紅霉素在大鼠和人肝中增強(qiáng)CYP3A4活性。P450在人體中的活性可通過(guò)非-侵襲性方法，如通過(guò)[14C]紅霉素呼吸試驗(yàn)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。這些研究用于鑒定激活人CYP3A4的藥物。因此，對(duì)于其中藥物傳遞受前藥代謝速率(如前藥的清除率相對(duì)快于前藥的裂解率)限制的前藥來(lái)說(shuō)，藥物如利福平可用于聯(lián)合用藥，或作為輔助藥物或用于前-治療，以提高肝中的CYP3A活性并由此增加肝中藥物的水平(實(shí)施例J和O)。
前藥的裂解機(jī)制本發(fā)明的前藥是簡(jiǎn)單的、低分子量修飾的藥物，它能根據(jù)其對(duì)肝中豐富的酶的敏感性促使肝-選擇性的藥物傳遞。推測(cè)前藥的裂解機(jī)制是需要基于分析反應(yīng)需要和產(chǎn)物的研究的氧化和β-消去反應(yīng)。在某些情況下，M-P(O)(NHR6)O-被進(jìn)一步代謝為M-PO32-和M-P3O94-。前藥對(duì)寬的pH范圍的水溶液是穩(wěn)定的，因此不會(huì)經(jīng)受化學(xué)裂解過(guò)程而產(chǎn)生母體藥物。此外，前藥對(duì)酯酶和血液中的蛋白質(zhì)是穩(wěn)定的。相反，所述前藥在來(lái)自大鼠(實(shí)施例C)和人(實(shí)施例D和F)的肝微粒體存在下卻迅速裂解。在新鮮分離的大鼠肝細(xì)胞中也產(chǎn)生該藥物，在肝細(xì)胞中它作為相應(yīng)的磷(膦)酸酯和/或生物活性藥物被檢測(cè)出來(lái)(實(shí)施例G和J)。而且，當(dāng)母體藥物為FBP酶抑制劑時(shí)，藥物的產(chǎn)生受到引起有效的葡糖異生抑制作用的前藥的能力的支持(實(shí)施例I)。
通過(guò)使用已知的細(xì)胞色素P450抑制劑評(píng)價(jià)參與裂解過(guò)程的可能的特異性酶(實(shí)施例E)。研究結(jié)果表明，同工酶細(xì)胞色素CYP3A4負(fù)責(zé)基于酮康唑抑制作用的藥物形成。
給予以下所示式VI-VIII藥物后，在肝中檢測(cè)生物活性藥物 下式的前藥是特別優(yōu)選的。
式VI的前藥裂解生成芳基乙烯基酮，而式VIII的前藥裂解生成苯酚(實(shí)施例L)。裂解的機(jī)制可通過(guò)下列機(jī)制實(shí)現(xiàn)，所示的化合物中，一個(gè)Y為NR6。
雖然本發(fā)明的酯不受上述機(jī)制的限制，一般來(lái)說(shuō)，每種酯含有對(duì)微粒體氧化敏感的基團(tuán)或原子(如醇、芐次甲基質(zhì)子)，其又依次生成通過(guò)M-P(O)(YH)2的β-消去反應(yīng)分解為母體藥物水溶液的中間體。該物質(zhì)或者為活性成分，或者通過(guò)化學(xué)或酶方法進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為M-PO32-、M-P2O63-或M-P3O94-。此外，盡管這些特異性前藥被CYP3A4裂解，其它前藥類(lèi)可以是其它P450s的底物。已知小的結(jié)構(gòu)變化影響底物活性和P450的選擇。根據(jù)實(shí)施例B中所述方法，實(shí)現(xiàn)激活前藥的同工酶的鑒定。
或者，環(huán)狀氨基磷酸酯可作為磷(膦)酸酯的前藥或高級(jí)磷(膦)酸酯，因?yàn)橹虚g體氨基磷酸酯可通過(guò)能產(chǎn)生MH或MPO32-的磷酸酶/酰胺酶的作用轉(zhuǎn)化為MPO32-、MP2O63-或MP3O94-，而MH或MPO32-又依次通過(guò)激酶被磷酸化為生物活性的化合物。
增加治療指數(shù)本發(fā)明的前藥可顯著增加某些藥物的治療指數(shù)(“TI”)。在許多情況下，增加的TI為高的肝特異性的結(jié)果。例如，已知araA和araAMP產(chǎn)生明顯的系統(tǒng)副作用，這些副作用與araA副產(chǎn)物araH的血液水平有關(guān)。推測(cè)這些副作用為araH或araA在肝外組織(如神經(jīng))中的毒性結(jié)果，其產(chǎn)生例如與人體中藥物有關(guān)的神經(jīng)病(＞40％的患者接受araA)。與araAMP比較，araA的前藥顯示一種肝(araATP)/尿(araH)比率的明顯漂移。
腎毒性是與膦酸有關(guān)的常見(jiàn)毒性。該毒性因帶負(fù)電荷的藥物轉(zhuǎn)運(yùn)(例如通過(guò)位于腎近端小管的基底外側(cè)膜受到有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)進(jìn)入管狀細(xì)胞而產(chǎn)生，這樣一來(lái)管狀細(xì)胞積聚了高濃度的藥物，除非藥物通過(guò)腔轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制能同樣有效地從細(xì)胞中轉(zhuǎn)運(yùn)出藥物。腎毒性的膦酸，如PMEA和HPMPA的文獻(xiàn)中已報(bào)道了許多實(shí)例-與達(dá)到可比較的肝藥物水平的劑量下的PMEA或雙PCMPMEA相比，PMEA的新的前藥只顯示在尿中存在少量的PMEA。
另一種與膦酸藥物有關(guān)的常見(jiàn)毒性是通過(guò)某些情況下的胃腸道侵蝕的胃腸道毒性。本發(fā)明的前藥可降低胃腸道毒性，特別是口服給藥后藥物對(duì)胃腸道的直接作用產(chǎn)生的毒性。與腎類(lèi)似，腸上皮細(xì)胞具有能引起高細(xì)胞內(nèi)藥物水平和細(xì)胞毒性的有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。由于帶負(fù)電荷的磷(膦)酸酯直到在肝中吸收和裂解后才顯露出來(lái)，從而本發(fā)明的前藥降低腸毒性。
幾種毒性也與幾乎所有抗癌藥有關(guān)。在降低治療原發(fā)性或繼發(fā)性肝癌期間的這些毒性的努力中，藥物有時(shí)直接給予進(jìn)入主動(dòng)脈，以增加肝藥物接觸。由于腫瘤溶解藥通常與明顯的副作用有關(guān)，局部給藥能促使更大的肝吸收，由此降低肝外毒性。為進(jìn)一步增加肝的吸收，化學(xué)栓塞有時(shí)與肝動(dòng)脈藥物輸注結(jié)合使用。本發(fā)明的前藥的高度肝特異性提示，通過(guò)新的前藥途徑，系統(tǒng)副作用將類(lèi)似地降至最小。
而且，原發(fā)性或繼發(fā)性肝癌對(duì)化學(xué)治療和放射治療是特別抵抗的。盡管對(duì)抗性的機(jī)制尚不完全明白，這可能是增加了導(dǎo)致迅速代謝和/或化學(xué)治療藥的輸出的肝基因產(chǎn)物而引起的。另外，通常與異生素代謝和細(xì)胞毒性中間體的生成有關(guān)的肝自然地具有多種保護(hù)機(jī)制，以使來(lái)自這些中間體的損害降至最小。例如，谷胱甘肽的細(xì)胞內(nèi)濃度在肝中相對(duì)于其它假定的組織是很高的，這樣就使能烷基化蛋白質(zhì)和DNA的中間體通過(guò)快速的細(xì)胞內(nèi)反應(yīng)來(lái)解毒。結(jié)果由于這些機(jī)制，肝可能對(duì)化學(xué)治療劑有抗性，因此，需要比正常濃度更高的腫瘤溶解劑以獲得成功。肝的濃度越高，所需的藥物劑量就越高，而這種高劑量常常引起肝外毒性。
本發(fā)明的前藥可有效地抑制這些癌癥，因?yàn)樗鼈兡芡ㄟ^(guò)各種機(jī)制產(chǎn)生較高水平的生物活性藥物。例如，高的肝特異性可獲得較高劑量，因?yàn)閯┝?限制的肝外副作用降低。其次，前藥的緩慢傳遞可使藥物在一個(gè)延長(zhǎng)的時(shí)期內(nèi)維持高水平。第三，在某些情況下，母體藥物在靶細(xì)胞中是很難磷酸化的。本發(fā)明的前藥可繞過(guò)該步驟并傳遞磷(膦)酸酯，在某些情況下，該磷(膦)酸酯被進(jìn)一步代謝為生物活性藥物。最后，治療指數(shù)有時(shí)可通過(guò)共同給予CYP誘導(dǎo)物(如利福平、糖皮質(zhì)激素類(lèi)、苯巴比妥、紅霉素)得到進(jìn)一步的提高，這些誘導(dǎo)物可促進(jìn)在肝中的轉(zhuǎn)化，由此在不增加劑量的情況下獲得高水平的生物活性藥物(實(shí)施例J和O)。前藥的這些優(yōu)點(diǎn)可成功地治療肝病，如原發(fā)性和繼發(fā)性肝癌以及其它肝病。
副產(chǎn)物毒性本發(fā)明的前藥也是有用的，因?yàn)槠渖蔁o(wú)毒的或可被迅速解毒的副產(chǎn)物。不認(rèn)為本發(fā)明的前藥所生成的某些副產(chǎn)物在預(yù)計(jì)臨床上使用的劑量下是高毒性的，特別是假定副產(chǎn)物在肝中生成時(shí)(如苯酚)。本發(fā)明的前藥所生成的其它副產(chǎn)物，如芳基乙烯基酮，可被認(rèn)為是烷化劑，因而可產(chǎn)生細(xì)胞毒性和基因毒性之一或兩者。然而，對(duì)在肝中激活的前藥來(lái)說(shuō)，這些毒性可以消除，因?yàn)?)在前藥激活的位點(diǎn)或位點(diǎn)附近產(chǎn)生付產(chǎn)物；及2)在副產(chǎn)物生成的位點(diǎn)存在天然防御機(jī)制，因而能對(duì)副產(chǎn)物完全解毒。其它機(jī)制也有助于副產(chǎn)物的解毒，包括導(dǎo)致付產(chǎn)物的氧化、還原或轉(zhuǎn)化(如硫酸化作用)的反應(yīng)。
期望保護(hù)細(xì)胞免遭前藥副產(chǎn)物損害的主要的防御系統(tǒng)包括天然的硫羥基谷胱甘肽和可能的催化谷胱甘肽與親電試劑的加成反應(yīng)的酶(即谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST))。谷胱甘肽和GST總是與CYPs共同表達(dá)作為天然防御機(jī)制的一部分，這種防御機(jī)制保護(hù)細(xì)胞免遭在CYP-介導(dǎo)的有機(jī)化合物的氧化期間產(chǎn)生的高反應(yīng)性的含氧物質(zhì)。CYPs在某些細(xì)胞(原代肝細(xì)胞)中表達(dá)以氧化有機(jī)化合物，因而有助于它們從體內(nèi)的清除。組織分布研究表明，CYP3A4以及大多數(shù)其它的P450s在肝中表達(dá)最高，其次在小腸中表達(dá)。所有其它組織具有＜＜2％的肝CYP3A4活性。類(lèi)似地，谷胱甘肽水平的分析指明，肝(10mM)和胃腸道具有比其它組織高幾乎1000倍的谷胱甘肽水平。甚至在有病的肝中，谷胱甘肽的這些水平仍然是高的。
谷胱甘肽與乙烯基酮和任何烷化劑迅速反應(yīng)，生成綴合物，其隨后通過(guò)膽汁或腎消除。預(yù)計(jì)細(xì)胞中的其它蛋白質(zhì)或核酸在具有谷胱甘肽的細(xì)胞中不發(fā)生烷基化，因?yàn)楣入赘孰臑楸群怂釅A基的雜原子更好的親核試劑，并且以比蛋白質(zhì)表面上的硫羥基高得多的濃度存在。
副產(chǎn)物如丙烯醛可產(chǎn)生膀胱毒性，而這些前藥可通過(guò)其在肝細(xì)胞內(nèi)生成副產(chǎn)物的能力預(yù)防這種毒性。實(shí)施例M和N用于測(cè)定副產(chǎn)物的毒性，期望該毒性不在肝中，只要肝的谷胱甘肽水平維持＞20％的正常水平。谷胱甘肽容易在肝細(xì)胞以及體內(nèi)進(jìn)行測(cè)定(實(shí)施例M和N)。細(xì)胞毒性在肝細(xì)胞中通過(guò)用錐蟲(chóng)藍(lán)測(cè)定細(xì)胞生存力和通過(guò)分析肝中酶的升高來(lái)測(cè)定。在體內(nèi)，肝毒性通過(guò)分析血漿中肝酶的升高來(lái)評(píng)價(jià)。
非致突變的前藥本發(fā)明的前藥通過(guò)涉及最初氧化，隨后β-消去反應(yīng)的推測(cè)的機(jī)制升高。在某些情況下，例如，某些式VI和式VII的前藥，反應(yīng)的付產(chǎn)物(biproduct)為α，β-不飽和的羰基化合物，如乙烯基苯基酮，對(duì)前藥而言，其中V＝Ph，Z、W和W’＝H?；衔锟梢宰鳛镸ichael受體并通過(guò)Michael加成反應(yīng)與親核試劑反應(yīng)。在某些α，β-不飽和的酮中可觀察到致突變，一些毒性產(chǎn)生于Michael加成反應(yīng)的加合物(如丙烯醛產(chǎn)生膀胱毒性)。這些活性限制式VI化合物的用途的程度取決于毒性和適應(yīng)癥的嚴(yán)重程度。
特別優(yōu)選用于治療慢性病(如糖尿病)產(chǎn)生非毒性的和非致突變的副產(chǎn)物的前藥。預(yù)測(cè)一種化合物的致突變性質(zhì)常常是困難的。例如，如通過(guò)在培養(yǎng)的L5179Y小鼠淋巴瘤細(xì)胞中增加的染色體畸變和微核頻度所指明的，已顯示一些丙烯酸酯產(chǎn)生陽(yáng)性致突變反應(yīng)(Dearfield等，Mutagenesis 4，381-393(1989))。然而，其它的丙烯酸酯在該試驗(yàn)中(J.Tox.Envir.Health，34，279-296(1991))以及在Ames試驗(yàn)和CHO測(cè)定中呈陰性，CHO測(cè)定法測(cè)定在次黃嘌呤-鳥(niǎo)嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶(hgprt)位置的新的誘導(dǎo)突變(Mutagenesis 6，77-85(1991))。苯基乙烯基酮缺乏在培養(yǎng)基中的大鼠胚胎的致畸活性提示，它不可能是致突變，也不是高毒性的(Teratology 39，31-37(1989))。
由于致突變性和毒性不是高度可預(yù)測(cè)的特性，式I的非致突變的前藥及其有關(guān)的副產(chǎn)物可以通過(guò)進(jìn)行熟知的體外和體內(nèi)測(cè)定而容易地鑒定。例如，化合物可在非哺乳動(dòng)物細(xì)胞測(cè)定法中進(jìn)行檢測(cè)，這些測(cè)定法有如Ames檢測(cè)法，在肺炎克雷伯氏菌(Kl pneumoniae)中的波動(dòng)檢測(cè)法，用鼠傷寒沙門(mén)氏菌(S.typhimurium)的正向突變測(cè)定法，在混濁釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中的染色體缺失檢測(cè)法，或在混濁釀酒酵母中的D3誘重組性檢測(cè)法。也可以在哺乳動(dòng)物細(xì)胞測(cè)定法中檢測(cè)化合物，例如，小鼠淋巴瘤細(xì)胞檢測(cè)法(L5178Y小鼠淋巴瘤細(xì)胞的TK+/-雜合子)，在中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞中的檢測(cè)(如CHO/HGPRT測(cè)定法)和在大鼠肝細(xì)胞系(如RL1或RL4)中的測(cè)定法。這些測(cè)定法中的每一種可在激活劑(如肝微粒體)存在下進(jìn)行，激活劑可能對(duì)這些前藥具有特別的重要性。例如，通過(guò)在肝微粒體存在下進(jìn)行這些測(cè)定，所述前藥產(chǎn)生產(chǎn)物，如苯酚或乙烯基酮。副產(chǎn)物的致突變性或直接測(cè)定或作為前藥測(cè)定，其中的結(jié)果與單獨(dú)的母體藥物比較。在肝細(xì)胞系中的測(cè)定是本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選方面，因?yàn)檫@些細(xì)胞具有較高的谷胱甘肽水平，其可保護(hù)細(xì)胞免受Michael受體以及用于解毒化合物的較高水平的細(xì)胞內(nèi)酶引起的損害。例如，肝含有還原酶，其與某些副產(chǎn)物可引起羰基的還原。
許多終點(diǎn)被監(jiān)測(cè)，包括細(xì)胞生長(zhǎng)、集落大小、基因突變、微核形成、有絲分裂的染色體缺失、期外DNA合成、DNA延伸、DNA斷裂、形態(tài)轉(zhuǎn)化和相對(duì)有絲分裂活性。
在體內(nèi)測(cè)定中，還已知評(píng)價(jià)化合物的致突變性和致癌性的測(cè)定法。例如，果蠅性連鎖隱性致死測(cè)定法是一種非哺乳動(dòng)物的體內(nèi)測(cè)定法。哺乳動(dòng)物的體內(nèi)測(cè)定法的實(shí)例包括大鼠骨髓細(xì)胞遺傳學(xué)測(cè)定法、大鼠胚胎測(cè)定法以及動(dòng)物畸形學(xué)和致癌性測(cè)定法。
激酶旁路核苷常常在細(xì)胞中轉(zhuǎn)化為一-、二-和三-磷酸酯，而后者通常作為生物活性物質(zhì)起作用。在某些情況下，三磷酸酯為有效的靶酶的抑制劑，但由于給予核苷不能達(dá)到生物活性的磷酸酯的足夠高水平，在體內(nèi)只獲得差至中等的效果。不能獲得磷酸酯的高水平的原因是核苷為一種催化磷酸化反應(yīng)的酶的不良底物。其它理由包括在靶細(xì)胞中的低天然水平的磷酸化酶(其可表示低天然的表達(dá)水平)或是使用引起酶下行調(diào)節(jié)的所述藥物或另一種藥物長(zhǎng)期治療的結(jié)果。在某些情況下，藥物抗性產(chǎn)生于負(fù)責(zé)一磷酸核苷的合成的酶(例如，激酶如胸苷酸激酶或在5-氟-2’-脫氧UMP的生物合成路線中的酶)的活性降低。在另一些情況下，核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白被下行調(diào)節(jié)，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)核苷藥物濃度降低，因而只有少量的核苷可用于磷酸化。類(lèi)似地，推測(cè)多藥物抗性基因產(chǎn)物的增加的表達(dá)增加核苷自癌細(xì)胞的輸出。前藥的給予通過(guò)不同的途徑(避免引起對(duì)母體藥物抗性的途徑)生成一磷酸酯。因此，本發(fā)明的前藥可在對(duì)母體藥物有抗性的細(xì)胞中獲得治療效果。作為一-或三磷酸酯類(lèi)似物的一些藥物是靶酶(如HBV聚合酶)的高度有效的抑制劑，但由于差的磷酸化作用，在細(xì)胞中或體內(nèi)只有差的效果(實(shí)施例H)。這些藥物是特別優(yōu)選的藥物，因?yàn)榍八幉呗允莻鬟f一磷酸酯。核苷的首次磷酸化往往是速率-限制的步驟，而一磷酸酯經(jīng)哺乳動(dòng)物激酶磷酸化為三磷酸酯是快速的并對(duì)結(jié)構(gòu)變化相對(duì)不敏感。
治療某些癌癥的環(huán)-取代的環(huán)磷酰胺類(lèi)似物環(huán)磷酰胺(CPA)和異環(huán)磷酰胺(IF)通常用作腫瘤溶解藥，其在肝中通過(guò)P450機(jī)制(CYP2B6和CYP3A4)經(jīng)初步激活為中間體7。該中間體與開(kāi)環(huán)類(lèi)(8)以平衡態(tài)存在，后者為各種代謝途徑，包括生成烷基化芥子9和丙烯醛的β-消去反應(yīng)的倒數(shù)第二個(gè)中間體。后一反應(yīng)順序通過(guò)非-酶促反應(yīng)發(fā)生，且認(rèn)為在中性pH下進(jìn)行t1/2≈30-40分鐘。
中間體8和9是相對(duì)親脂性的且能長(zhǎng)時(shí)間存在。結(jié)果，有明顯比例的激活的CPA從肝中“逃選”而進(jìn)入全身循環(huán)。腫瘤溶解活性和與藥物有關(guān)的副作用均因肝外分解引起。腫瘤細(xì)胞對(duì)中間體的吸收和芥子的生成引起對(duì)細(xì)胞增殖的抑制。類(lèi)似地，骨髓抑制和減少的白細(xì)胞為與CPA治療有關(guān)的副作用，該治療源于對(duì)肝外細(xì)胞增殖的抑制。
正在結(jié)合用于人工引入細(xì)胞色素P450s的方法來(lái)研究CPA和IF，例如，通過(guò)逆病毒和其它熟知的基因治療方法以及通過(guò)植入的基因工程改造的細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞色素P450s以治療癌癥。希望在于使用在腫瘤的附近表達(dá)CYP的細(xì)胞，一種更局部的，因而是潛在更有益的治療是可能的。本發(fā)明的前藥具有治療原發(fā)性和繼發(fā)性肝癌以及伴有升高的P450活性的優(yōu)點(diǎn)，因?yàn)樗鼈兏植康厣苫钚缘哪[瘤溶解藥物，即較少地從含有P450活性的組織中“逃逸”。具有更大的局部作用的理由是由于前藥裂解的中間體的不同，其包括(1)開(kāi)環(huán)反應(yīng)是快速和不可逆的；及(2)開(kāi)環(huán)產(chǎn)物，該產(chǎn)物可以是帶負(fù)電荷的(M-P(O)(NHR6)O-)，因而不能經(jīng)被動(dòng)擴(kuò)散存在。
母體藥物的類(lèi)型各種母體藥物可從本發(fā)明的前藥方法獲得益處。MH形式的母體藥物是完全適合用于本發(fā)明的前藥方法的，MH經(jīng)磷酸化變成生物活性藥物。有許多熟知的MH形式的母體藥物，它們經(jīng)磷酸化變成為生物活性的。例如，眾所周知，抗癌和抗病毒核苷類(lèi)通過(guò)磷酸化被激活。這些化合物包括LdC、LdT、araA、AZT、d4T、ddI、ddA、ddC、L-ddC、L FddC、L-d4C、L-Fd4C、3TC、利巴韋林、5-氟-2’-脫氧尿苷、FIAU、FIAC、BHCG、L FMAU、BvaraU、E-5-(2-溴乙烯基)-2’-脫氧尿苷、TFT、5-丙炔基-1-阿糖尿嘧啶、CDG、DAPD、FDOC、d4C、DXG、FEAU、FLG、FLT、FTC、5-基-碳環(huán)2’-脫氧鳥(niǎo)苷、氧環(huán)烷菌素A、氧環(huán)烷菌素G、Cyclobut A、Cyclobut G、dFdC、araC、溴代脫氧尿苷、IDU、CdA、FaraA、助間型霉素、2’-去氧助間型霉素、araT、噻唑呋林、ddAPR、9-(阿拉伯呋喃糖基)-2，6-二氨基嘌呤、9-(2’-脫氧呋喃核糖基)-2，6-二氨基嘌呤、9-(2’-脫氧2’氟呋喃核糖基)-2，6-二氨基嘌呤、9-(阿拉伯呋喃糖基)鳥(niǎo)嘌呤、9-(2’-脫氧呋喃核糖基)鳥(niǎo)嘌呤、9-(2’-脫氧2’氟代呋喃核糖基)鳥(niǎo)嘌呤、FMdC、5，6-二氫-5-氮雜胞苷、5-氮雜胞苷、5-氮雜2’脫氧胞苷、AICAR、ACV、GCV、噴昔洛韋、(R)-9-(3，4-二羥基丁基)鳥(niǎo)嘌呤、cytallene、PMEA、PMEDAP、HPMPC、HPMPA、FPMPA和PMPA。
在一個(gè)優(yōu)選的方面，式I化合物不包括其中MH為araA或5-氟-2’-脫氧尿苷的化合物。
優(yōu)選的抗病毒藥包括LdC、LdT、araA、AZT、d4T、ddI、ddA、ddC、L-ddC、L FddC、L-d4C、L-Fd4C、3TC、利巴韋林、FIAU、FLAC、BHCG、L-FMAU、BvaraU、E-5-(2-溴乙烯基)-2’-脫氧尿苷、TFT、5-丙炔基-1-阿糖尿嘧啶、CDG、DAPD、FDOC、d4C、DXG、FEAU、FLG、FLT、FTC、5-基-碳環(huán)2’-脫氧鳥(niǎo)苷、cytallene、氧環(huán)烷菌素A、氧環(huán)烷菌素G、CyclobutA、Cyclobut G、溴代脫氧尿苷、IDU、araT、噻唑呋林、ddAPR、9-(阿拉伯呋喃糖基)-2，6-二氨基嘌呤、9-(2’-脫氧呋喃核糖基)-2，6-二氨基嘌呤、9-(2’-脫氧2’氟呋喃核糖基)-2，6-二氨基嘌呤、9-(阿拉伯呋喃糖基)鳥(niǎo)嘌呤、9-(2’-脫氧呋喃核糖基)鳥(niǎo)嘌呤、9-(2’-脫氧2’氟呋喃核糖基)鳥(niǎo)嘌呤、FMdC、5，6-二氫-5-氮雜胞苷、5-氮雜胞苷、5-氮雜2’脫氧胞苷、ACV、GCV、噴昔洛韋、(R)-9-(3，4-二羥基丁基)鳥(niǎo)嘌呤、cytallene、PMEA、PMEDAP、HPMPC、HPMPA、FPMPA、PMPA、膦甲酸和膦?；姿?。
在一個(gè)優(yōu)選的方面，MH不包括araA。
更優(yōu)選的抗病毒藥包括araA、AZT、d4T、ddI、ddA、ddC、L-ddC、L FddC、L-d4C、L-Fd4C、3TC、利巴韋林、FIAU、FIAC、L-FMAU、TFT、CDG、DAPD、FDOC、d4C、DXG、FEAU、FLG、FLT、FTC、5-基-碳環(huán)2’-脫氧鳥(niǎo)苷、cytallene、氧環(huán)烷菌素A、氧環(huán)烷菌素G、Cyclobut A、Cyclobut G、araT、ACV、GCV、更昔洛韋、PMEA、PMEDAP、HPMPC、HPMPA、PMPA、膦甲酸。
在一個(gè)優(yōu)選的方面，MH不包括araA.。
更優(yōu)選的抗病毒藥包括3TC；噴昔洛韋；FMAU；DAPD；FTC；Cyclobut G；ACV；GCV；PMEA；HPMPA；5-基-碳環(huán)2’-脫氧鳥(niǎo)苷；利巴韋林。
優(yōu)選的抗癌藥包括dFdC；2’，2’-二氟脫氧胞苷(吉西他濱)araC；阿拉伯糖基胞嘧啶(阿糖胞苷)F-ara-A；2-氟阿拉伯糖基腺苷(氟達(dá)拉濱)CdA；2-氯脫氧腺苷(克拉屈濱)2’-脫氧-5-碘尿苷助間型霉素2’-脫氧助間型霉素噻唑呋林利巴韋林5-氟-2’脫氧尿苷9-(阿拉伯呋喃糖基)-2，6-二氨基嘌呤9-(2’-脫氧呋喃核糖基)-2，6-二氨基嘌呤9-(2’-脫氧-2’-氟呋喃核糖基)-2，6-二氨基嘌呤9-(阿拉伯呋喃糖基)-鳥(niǎo)嘌呤9-(2’-脫氧呋喃核糖基)-鳥(niǎo)嘌呤9-(2’-脫氧-2’-氟呋喃核糖基)-鳥(niǎo)嘌呤在一個(gè)優(yōu)選的方面，MH不包括5-氟-2’-脫氧尿苷。
在一個(gè)方面，優(yōu)選式I化合物不用于治療糖尿病。
更優(yōu)選的抗癌藥包括dFdC；araC；FaraA；CdA；5-氟-2’脫氧尿苷GCV；5，6-二氫-5-氮雜胞苷；
5-氮雜胞苷；和5-氮雜-2’-脫氧胞苷。
在一個(gè)優(yōu)選的方面，MH不包括5-氟-2’-脫氧尿苷。
含膦酸部分(C-PO32-)的藥物也是有利地用于本發(fā)明的適合的母體藥物。這些藥物以MPO32-、MP2O63-或MP3O94-的形式存在時(shí)是生物活性的。也適合用于這種前藥傳遞策略的膦酸包括用作例如抗高血壓藥、抗癌藥或抗炎藥的蛋白酶抑制劑。這種新的前藥方法可應(yīng)用于NEP抑制劑(DeLambert等，J.Med.Chem.，37，498(1994))、ACE抑制劑、內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶抑制劑、嘌呤核苷磷酸化酶抑制劑、參與腫瘤轉(zhuǎn)移的金屬蛋白酶抑制劑和膠原酶抑制劑(Bird等，J.Med.Chem.37，158-169(1994))。而且，用作NMDA拮抗劑的膦酸對(duì)治療各種疾病，包括中風(fēng)、頭部創(chuàng)傷、疼痛和癲癇是有用的。能從前藥策略獲得益處的其它膦酸為由施貴寶(Squibb)報(bào)道的膦酸，其抑制角鯊烯合酶，由Hoechst報(bào)道的為免疫調(diào)節(jié)劑的膦酸，由Merck報(bào)道的為抗抑郁藥的膦酸，由Giba-Geigy和Marion Merrel Dow報(bào)道的免疫抑制劑(通過(guò)抑制嘌呤核苷磷酸化酶)和由Bristol-Myers Squibb，Gilead報(bào)道的為抗病毒劑的膦酸。某些抗生素可能是合適的，尤其是諸如D-丙氨酸消旋酶抑制劑和磷霉素以及有關(guān)的類(lèi)似物。
下列化合物及其類(lèi)似物可以用于本發(fā)明前藥的方法NEP抑制劑(S)-3-[N-[2-[(膦?；谆?氨基]-3-(4-聯(lián)苯基)丙?；鵠氨基]丙酸(DeLombaert等，J.Med.Chem.，1994年2月18日；37(4)498-511)膠原酶抑制劑N，[N-((R)-1-膦?；?-(S)-亮氨酰]-(S)-苯丙氨酸N-甲基酰胺(Bird等，J.Med.Chem.1994年1月7日；37(1)158-69)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑(IR)-1-(N-(N-乙?；?L-異亮氨酰)-L-酪氨酰)氨基2-(4-羥苯基)乙基-1-膦酸(Hirayama等，Int J Pept Protein Res 1991年7月；38(1)20-4)內(nèi)皮素抑制劑CGS 26303(DeLombaert等，Biochem Biophys Res Commun 1994年10月14日；204(1)407-12)(S，S)-3-環(huán)己基-2-[[5-(2，4-二氟苯基)-2-[(膦?；谆?氨基]戊-4-炔?；鵠氨基]丙酸(Wallace等，J.Med.Chem.，1998年4月23日；41(9)1513-23)(S，S)-2-[[5-(2-氟苯基)-2-[膦酰基甲基)氨基]戊-4-炔?；鵠氨基]-4-甲基戊酸(S，S)-2-[[5-(3-氟苯基)-2-[(膦?；谆?氨基]戊-4-炔?；鵠氨基]-4-甲基戊酸NMDA/AMPA拮抗劑N-膦?；榛?5-氨基甲基喹喔啉-2，3-二酮(如在Bioorg.Med.Chem.Lett.1999年1月18日；9(2)249-54中所述)3-(2-羧基哌嗪-4-基)-1-丙烯基-1-膦酸(Bespalov等，Eur J Pharmacol1998年6月26日；351(3)299-305)[2-(8，9-二氧代-2，6-二氮雜雙環(huán)[5.2.0]壬-1(7)-烯-2-基)-乙基]膦酸D，L-(E)-2-氨基-4-[3H]-丙基-5-膦?；?3-戊烯酸6，7-二氯-2(1H)-氧代喹啉-3-膦酸(Desos等，J.Med.Chem.，1996年1月5日；39(1)197-206)順式-4-(膦酰基甲基)哌啶-2-羧酸(CGS 19755)嘌呤核苷磷酸化酶抑制劑[7-(2-氨基-1，6-二氫-6-氯-9H-嘌呤-9-基)-1，1-二氟庚基]膦酸和[4-(5-氨基-6，7-二氫-7-氧代-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]-嘧啶-3-基)丁基]膦酸[[[5-(2-氨基-1，6-二氫-6-氧代-9H-嘌呤-9-基)戊基]磷酸亞基]甲基]膦酸(Kelly等，J.Med.Chem.，1995年3月17日；38(6)1005-14)
(2-[2-[(2-氨基-1，6-二氫-6-氧代-9H-嘌呤-9-基)甲基]-苯基]乙烯基)-膦酸(Weibel等，Biochem Pharmacol.1994年7月19日；48(2)245-52)9-(3，3-二甲基-5-膦?；旎?鳥(niǎo)嘌呤(Guida等，J.Med.Chem.，1994年4月15日；37(8)1109-14)丙氨酸消旋酶抑制劑DL-(1-氨基-2-丙烯基)膦酸(Vo-Quang等，J.Med.Chem.，1986年4月；29(4)579-81)角鯊烯合酶抑制劑1-羥基-3-(甲基戊基氨基)-亞丙基-1，1-雙膦酸(Amin等，Arzneimittelforschung.1996年8月；46(8)759-62)BMS188494為BMS 187745的POM前藥(Dickson等，J.Med.Chem.，1996年2月2日；39(3)661-4)癌癥的治療本發(fā)明的前藥策略包括幾個(gè)特征，這些特征有利地用于癌癥治療。許多已知的抗癌藥為核苷類(lèi)，其經(jīng)磷酸化為一磷酸酯，后者常常進(jìn)一步被轉(zhuǎn)化為三磷酸酯。這種前藥策略增加這些藥物的有效性，因?yàn)樵撉八幈桓沃胸S富的酶裂解，因而相對(duì)于肝外組織而言，在肝中獲得了高水平的活性代謝產(chǎn)物。這種單純的作用是較高的效果和/或較高的治療指數(shù)。在某些情況下，所述前藥策略也因繞過(guò)熟知的抗性機(jī)制(包括涉及吸收、活性代謝產(chǎn)物的細(xì)胞內(nèi)生物合成、一磷酸酯的輸出和代謝)而增加這些藥物的有效性。特別適合于這種策略的優(yōu)選備選藥物的實(shí)例包括，例如，dFdC、araC、F-ara、CdA和5-氟-2’-脫氧尿苷(“5-FU”)。在一個(gè)方面，MH不是5-FU。
某些前藥可在細(xì)胞內(nèi)引起一磷酸酯的某種積聚。某些一磷酸酯用于治療癌癥，例如，為胸苷酸合酶(TS)和IMP脫氫酶的有效抑制劑的一磷酸酯。有報(bào)道某些TS抑制劑在治療肝癌時(shí)是效果適中的。例如，5-FU和5-FdUMP是有效的。然而，這些藥物被藥物抗性及嚴(yán)重的副作用所困擾。為避免后者，常常通過(guò)肝門(mén)動(dòng)脈給予5-FU類(lèi)似物以獲得最高可能的肝水平。因此，5-FdUMP和相關(guān)的類(lèi)似物是前藥策略的適合的靶子。其它的核苷如利巴韋林、噻唑呋林和助間型霉素及其類(lèi)似物也是前藥策略的適合的靶子。
肝癌對(duì)放射療法也是有很強(qiáng)的抵抗性的。提高放射療法的一個(gè)方法是給予放射增敏劑。放射增敏劑如2’-脫氧-5-碘尿苷為適合于前藥技術(shù)的核苷類(lèi)，因?yàn)樵撉八帉⒅槐缓琍450的細(xì)胞裂解。裂解后，一磷酸酯可進(jìn)一步被磷酸化為三磷酸酯并積聚在細(xì)胞內(nèi)，使細(xì)胞對(duì)放射療法更敏感。
病毒性感染的治療用于治療感染肝和引起肝損害的病毒如肝炎病毒株的藥物在療效、副作用和抗性方面，顯示與抗癌核苷藥物類(lèi)似的性質(zhì)。因此，這些核苷的前藥也用于治療肝炎。在某些情況下，這些藥物是以肝炎為目標(biāo)的(如araA、3TC、L-FMAU、FTC、BMS 200，475)。這些化合物的前藥可提高效果，增加治療指數(shù)，延長(zhǎng)藥效學(xué)的半衰期和/或避免藥物抗性。用于治療病毒性感染而非肝炎的其它藥物的前藥也可通過(guò)給予本發(fā)明的前藥而變得有用，因?yàn)檫@些藥物是好的抗病毒劑(如阿昔洛韋)，但由于它們被病毒激酶磷酸化為一磷酸酯，故可用于其它病毒感染。一磷酸酯被哺乳動(dòng)物激酶轉(zhuǎn)化為生物活性的三磷酸酯。因此，使用該類(lèi)前藥傳遞一磷酸酯能夠通過(guò)正常用于治療其它病毒性感染的藥物治療肝炎。
用于診斷試劑傳遞的用途核苷診斷試劑，如具有由Tc取代的5H的尿苷類(lèi)似物作為本發(fā)明的前藥用作肝診斷試劑。這些化合物首先被轉(zhuǎn)化為一磷酸酯，然后在具有P450活性，尤其是具有CYP3A4活性的細(xì)胞中轉(zhuǎn)化為三磷酸酯。由于幾乎所有的活性均在肝中，該類(lèi)型的診斷試劑將主要在肝中代謝并在代謝前藥的細(xì)胞中積聚。因此，沒(méi)有CYP3A4活性的肝腫瘤或諸如具有約50％正常活性的肝細(xì)胞癌的腫瘤可以與正常肝組織區(qū)別開(kāi)來(lái)。
用于調(diào)節(jié)CYP活性的藥物可以使用各種方法來(lái)提高式I化合物的體內(nèi)活性。例如，已知各種藥物增強(qiáng)細(xì)胞色素P450(CYP)的活性。這種提高經(jīng)常使基因轉(zhuǎn)錄增加。四個(gè)家族的CYPs，即CYP1-4對(duì)誘導(dǎo)特別易感。誘導(dǎo)的意思是通過(guò)由各種異生素激活的受體進(jìn)行。例如，CYP1基因激活常常涉及由多環(huán)芳族烴激活A(yù)h受體。CYP2-4通過(guò)孤兒核受體被激活。數(shù)據(jù)提示核受體CAR(基本為活性受體)負(fù)責(zé)苯巴比妥CYP的激活，尤其是CYP2基因的激活。認(rèn)為孕烷核受體(PXR或PAR或SXR)激活CYP3A基因，而PPAR(過(guò)氧化物酶體增殖劑(proliferator)激活受體)與CYP4基因激活有關(guān)。所有三種異生素受體均在肝中高度表達(dá)，這解釋了P450基因誘導(dǎo)的肝特異性。
已知誘導(dǎo)CYP3基因的異生素包括苯巴比妥、各種類(lèi)固醇如地塞米松、抗生素如利福平和化合物如孕烯醇酮-16α腈、苯妥英、卡馬西平、保泰松等。已知各種方法能鑒定誘導(dǎo)P450s的異生素，包括在HepG2細(xì)胞中的報(bào)道基因測(cè)試(Ogg等，Xenobiotica 29，269-279(1999))。已知CYP3A亞家族的其它的誘導(dǎo)物通過(guò)mRNA或蛋白穩(wěn)定劑如克霉唑、TA和紅霉素以轉(zhuǎn)錄后水平起作用。已知誘導(dǎo)CYPs或在體外試驗(yàn)中鑒定的化合物隨后可用于增強(qiáng)CYP的體內(nèi)活性。例如，在用CYP調(diào)節(jié)劑預(yù)處理的大鼠中(通過(guò)例如評(píng)價(jià)一段時(shí)期的肝微粒體以確定最佳的預(yù)處理時(shí)間、劑量和給予次數(shù))監(jiān)測(cè)CYP活性。然后用式I化合物處理提高了CYP活性，尤其是負(fù)責(zé)激活前藥的CYP活性(如CYP3A4)的大鼠。提高的CYP活性又可導(dǎo)致增強(qiáng)的前藥的轉(zhuǎn)化和肝特異性。例如，用苯巴比妥預(yù)處理，發(fā)現(xiàn)強(qiáng)化環(huán)磷酰胺的代謝(Yu等，J.Pharm.Exp.Ther.288，928-937(1999))。
在某些情況下，增強(qiáng)的CYP活性可導(dǎo)致不需要的藥物代謝。例如，不參與前藥激活的增強(qiáng)的CYPs活性可引起增加的藥物代謝，因此，降低了效果。此外，在其它組織中增加CYP活性，例如在胃腸道增加CYP3A4活性，可引起前藥的吸收和肝的藥物水平的降低。已知CYP活性的抑制劑可用于最大限度的減少不需要的藥物代謝。例如，已知葡萄果汁滅活胃腸道CYP3A4并引起各種經(jīng)CYP3A4代謝的藥物的吸收增加。對(duì)許多CYP亞家族而言，還已知CYP抑制劑可用于弱化不需要的藥物代謝，同時(shí)維持對(duì)前藥裂解有重要意義的CYP活性。例如，CYP3A抑制劑TAO以降低毒性代謝產(chǎn)物形成(不歸因于其抗腫瘤活性)的方式，用于調(diào)節(jié)體內(nèi)的環(huán)磷酰胺代謝。
監(jiān)測(cè)患者P450活性的方法已知CYP活性在個(gè)體中顯示明顯的差別。CYP3A4的范圍在5-至20-倍之間，盡管大多數(shù)個(gè)體在3倍范圍內(nèi)。注意到在患有肝病的個(gè)體中有適度的降低(30-50％)或在老年患者中為25-50％。性別的差別甚至也是適度的(＜25％)。用于個(gè)體的CYP活性表型分析的方法是已知的并被用于預(yù)測(cè)何人應(yīng)接受調(diào)節(jié)CYP活性的藥物。Evasive方法包括肝活檢。已報(bào)道非-evasive方法，包括“紅霉素呼吸試驗(yàn)”，該試驗(yàn)以從放射標(biāo)記紅霉素(iv)的CYP3A-介導(dǎo)的N-去甲基化生成的14CO2的呼出為基礎(chǔ)(Watkins，Pharmacogenetics 4，171-184(1994))。
基因治療引入到編碼不能正常表達(dá)的酶的腫瘤細(xì)胞基因的方法代表一種新的增加抗癌藥化學(xué)療法的治療有效性的治療策略。總的策略賦予催化抗癌藥的前藥的分解的酶的表達(dá)，藉此使藥物定位于或接近腫瘤腫塊并限制其它部位的接觸。該策略已證實(shí)，使用特別表達(dá)于轉(zhuǎn)染細(xì)胞的胸苷酸激酶的HSV-TK基因激活更昔洛韋為一磷酸酯，然后其經(jīng)其它激酶轉(zhuǎn)化為殺死腫瘤細(xì)胞的三磷酸酯。類(lèi)似的策略使用細(xì)菌胞嘧啶脫氨酶基因使5-氟尿嘧啶轉(zhuǎn)化為5-氟胞嘧啶?？紤]的其它基因包括羧基肽酶G2、硝基還原酶、嘌呤核苷磷酸化等。此外，開(kāi)發(fā)了CYP基因轉(zhuǎn)移作為增強(qiáng)環(huán)磷酰胺和異環(huán)磷酰胺(兩種已知被CYPs激活的藥物)的化療效果。例如，通過(guò)用CYP2B1基因轉(zhuǎn)染使人乳腺癌細(xì)胞致敏(Chen等，Cancer Research，56，1331-1340(1996))。與HSV-TK基因策略有關(guān)的該策略的優(yōu)點(diǎn)在于催化氧化反應(yīng)的CYP的產(chǎn)物容易在腫瘤細(xì)胞外擴(kuò)散并進(jìn)入鄰近的細(xì)胞。與HSV-TK策略的一磷酸酯產(chǎn)物相反，該產(chǎn)物可進(jìn)入細(xì)胞(這種進(jìn)入不是細(xì)胞-細(xì)胞的接觸所致)，因而產(chǎn)生一種更廣泛的腫瘤殺傷效果(Chen和Waxman.，Cancer Research，55，581-589(1995))。
通過(guò)使用基因療法以引入編碼特異性地參與前藥裂解的CYP的基因，可以更有效地制備式I化合物。分解前藥的特異性CYP很容易采用下列步驟中的一些或全部來(lái)測(cè)定1)使用人微粒體證實(shí)前藥的裂解；2)通過(guò)與用各種亞家族特異性的誘導(dǎo)物(如用各種類(lèi)固醇如地塞米松、抗生素如利福平和化合物如孕烯醇酮-16α腈、苯妥英、卡馬西平、保泰松等誘導(dǎo)的CYP3酶)誘導(dǎo)的微粒體活性比較對(duì)亞家族分類(lèi)；3)通過(guò)使用已知的CYP亞家族特異性抑制劑(如醋竹桃霉素、紅霉素、酮康唑和孕二烯酮)和/或通過(guò)使用中和抗體鑒定負(fù)責(zé)前藥激活的CYP或CYPs；4)通過(guò)證實(shí)經(jīng)重組酶的更新確認(rèn)CYP亞家族。
使用合適的載體(如逆病毒載體、腺病毒載體)或通過(guò)直接的DNA注射將基因引入腫瘤中。使用基因工程改造的細(xì)胞表達(dá)P450s，也可將P450活性引入到腫瘤腫塊中或其鄰近部位。莢膜細(xì)胞是優(yōu)選的(如Lohr等，Gene Therapy51070(1998))。在明顯增強(qiáng)腫瘤中的CYP活性后，引入式I化合物。
特別優(yōu)選的是本發(fā)明公開(kāi)的這些前藥，它們?cè)诩?xì)胞和組織中，尤其是在肝細(xì)胞和肝中被轉(zhuǎn)化為母體磷(膦)酸酯，如采用實(shí)施例G和J中所述方法通過(guò)測(cè)定在肝細(xì)胞中的細(xì)胞內(nèi)藥物代謝產(chǎn)物所指明的那樣。
優(yōu)選的化合物本發(fā)明的化合物為由式I表示的某些磷(膦)酸酯的取代6-元環(huán)狀1，3-丙烷前藥 其中V、W和W’獨(dú)立選自-H、烷基、芳烷基、脂環(huán)基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、1-鏈烯基和1-鏈炔基；或V和Z通過(guò)另外的3-5個(gè)原子連接在一起，以形成含有5-7個(gè)環(huán)原子，任選1個(gè)雜原子的環(huán)基，其由連接于碳原子的羥基、酰氧基、烷氧基羰基氧基或芳氧基羰基氧基取代，所述碳原子為來(lái)自連接于磷原子的兩個(gè)Y基團(tuán)的三個(gè)原子之一；或V和Z通過(guò)另外的3-5個(gè)原子連接在一起，以形成任選含有1個(gè)雜原子的環(huán)基，所述環(huán)基與相對(duì)于鄰近V的Y的β和γ位上的芳基稠合；V和W通過(guò)另外的3個(gè)碳原子連接在一起，以形成含有6個(gè)碳原子并由選自以下的1個(gè)取代基取代的任選取代的環(huán)基羥基、酰氧基、烷氧基羰基氧基、烷硫基羰基氧基及芳氧基羰基氧基，其連接于一個(gè)所述另外的碳原子上，該碳原子為來(lái)自連接于磷原子的Y的三個(gè)原子之一；Z和W通過(guò)另外的3-5個(gè)原子連接在一起，以形成任選含1個(gè)雜原子的環(huán)基，且V必須是芳基、取代的芳基、雜芳基或取代的雜芳基；
W和W’通過(guò)另外的2-5個(gè)原子連接在一起，以形成任選含0-2個(gè)雜原子的環(huán)基，且V必須是芳基、取代的芳基、雜芳基或取代的雜芳基；Z選自-CHR2OH、-CHR2OC(O)R3、-CHR2OC(S)R3、-CHR2OC(S)OR3、-CHR2OC(O)SR3、-CHR2OCO2R3、-OR2、-SR2、-CHR2N3、-CH2芳基、-CH(芳基)OH、-CH(CH＝CR22)OH、-CH(C≡CR2)OH、-R2、-NR22、-OCOR3、-OCO2R3、-SCOR3、-SCO2R3、-NHCOR2、-NHCO2R3、-CH2NH芳基、-(CH2)p-OR12和-(CH2)p-SR12；p是2或3的整數(shù)；前提是a)V、Z、W、W’不都是-H；及b)當(dāng)Z為-R2時(shí)，則V、W和W’中的至少一個(gè)不是-H、烷基、芳烷基或脂環(huán)基；R2選自R3和-H；R3選自烷基、芳基、脂環(huán)基和芳烷基；R6選自-H及低級(jí)烷基、酰氧基烷基、烷氧基羰基氧基烷基和低級(jí)?；?；R12選自-H和低級(jí)?；?；每個(gè)Y獨(dú)立選自-O-、-NR6-，前提是至少一個(gè)Y為-NR6-；M選自連接于PO32-、P2O63-、P3O94-或P(O)(NHR6)O-的基團(tuán)，其為生物活性劑，但不是FBP酶抑制劑，并通過(guò)碳、氧、硫或氮原子連接于式I的磷原子上；前提是1)M不是-NH(低級(jí)烷基)、-N(低級(jí)烷基)2、-NH(低級(jí)烷基鹵)、-N(低級(jí)烷基鹵)2或-N(低級(jí)烷基)(低級(jí)烷基鹵)；及2)R6不是低級(jí)烷基鹵；及其藥學(xué)上可接受的前藥和鹽。
一般來(lái)說(shuō)，選擇式I的優(yōu)選取代基V、Z、W和W’以使它們表現(xiàn)出一種或多種下列的性質(zhì)(1)促進(jìn)氧化反應(yīng)，因?yàn)檫@種反應(yīng)可能是決定速率的步驟，因而必須與因?yàn)橄ミ^(guò)程競(jìng)爭(zhēng)；(2)增加在水溶液和在其它非-P450酶存在下的穩(wěn)定性；(3)增強(qiáng)細(xì)胞的穿透性，例如取代基是不帶電荷的或具有高分子量，因?yàn)檫@兩種性質(zhì)可限制口服生物利用度以及細(xì)胞穿透性；(4)在通過(guò)產(chǎn)生開(kāi)環(huán)產(chǎn)物的初步氧化后促進(jìn)β-消去反應(yīng)，所述開(kāi)環(huán)產(chǎn)物具有一種或多種以下的特性a)不能再環(huán)合；b)經(jīng)受有限的共價(jià)水合作用；c)通過(guò)幫助奪取質(zhì)子促進(jìn)β-消去反應(yīng)；d)阻止形成穩(wěn)定的加合物的加成反應(yīng)，例如，硫醇至初始的羥基化的產(chǎn)物或親核試劑加成到開(kāi)環(huán)后生成的羰基的加成反應(yīng)；和e)限制反應(yīng)中間體(如開(kāi)環(huán)酮)的代謝；(5)導(dǎo)致具有一種或多種以下特征的非毒性和非-致突變的副產(chǎn)物。兩種特性可通過(guò)使用限制Michael加成反應(yīng)的取代基而最小化，例如a)降低雙鍵極化的供電子Z基團(tuán)；b)空間阻止親核試劑加成到β-碳原子的W基團(tuán)；c)消去反應(yīng)后通過(guò)重新互變異構(gòu)現(xiàn)象(烯醇->酮)或水解作用(如烯胺)的消去雙鍵的Z基團(tuán)；d)含加入到α，β-不飽和酮以形成環(huán)的基團(tuán)的V基團(tuán)；e)通過(guò)Michael加成到雙鍵形成穩(wěn)定環(huán)的Z基團(tuán)；和f)通過(guò)一種或多種以下特征促使副產(chǎn)物解毒的基團(tuán)(i)局限于肝；和(ii)使對(duì)解毒反應(yīng)(如酮的還原)敏感；和(6)能夠生成藥理活性產(chǎn)物。
合適的烷基基團(tuán)包括具有1-約20個(gè)碳原子的基團(tuán)。合適的芳基包括具有1-約20個(gè)碳原子的基團(tuán)。合適的芳烷基包括具有2-約21個(gè)碳原子的基團(tuán)。合適的酰氧基包括具有1-約20個(gè)碳原子的基團(tuán)。合適的亞烷基包括具有1-約20個(gè)碳原子的基團(tuán)。合適的脂環(huán)基包括具有3-約20個(gè)碳原子的基因。合適的雜芳基包括具有1-約20個(gè)碳原子和1-4個(gè)雜原子(優(yōu)選獨(dú)立選自氮、氧和硫)的基團(tuán)。合適的雜脂環(huán)基包括具有2-約20個(gè)碳原子和1-5個(gè)雜原子(優(yōu)選獨(dú)立選自氮、氧、磷和硫)的基團(tuán)。
在式I化合物中，優(yōu)選一個(gè)Y是-O-和一個(gè)Y是-NR6。當(dāng)只有一個(gè)Y是-NR6-時(shí)，優(yōu)選該最鄰近W和W’的Y是-O-。在另一個(gè)方面，優(yōu)選最鄰近V的Y是-O-。
在另一方面，兩個(gè)Y基團(tuán)均為-NR6-。
更優(yōu)選其中一個(gè)Y為-O-的化合物，而V、W和W’獨(dú)立選自-H、烷基、芳烷基、脂環(huán)基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、1-鏈烯基和1-鏈炔基；或V和W通過(guò)另外的3個(gè)碳原子連接在一起，以形成含有6個(gè)碳原子并由選自以下的1個(gè)取代基取代的任選取代的環(huán)基羥基、酰氧基、烷氧基羰基氧基、烷硫基羰基氧基及芳氧基羰基氧基，其連接于一個(gè)所述另外的碳原子上，該碳原子為來(lái)自連接于磷原子的Y的三個(gè)原子之一。
更優(yōu)選其中V選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基的化合物。
更優(yōu)選式VI的V基團(tuán)為芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基。優(yōu)選一個(gè)Y是-O-。特別優(yōu)選的芳基和取代的芳基包括苯基和由1-3個(gè)鹵原子取代的苯基。3，5-二氯苯基、3-溴-4-氟苯基、3-氯苯基和3-溴苯基是特別優(yōu)選的。
當(dāng)V選自單環(huán)雜芳基和含至少一個(gè)氮原子的單環(huán)取代的雜芳基時(shí)，也是特別優(yōu)選的。最優(yōu)選的是這樣的雜芳基和取代的雜芳基分別是4-吡啶基和3-溴吡啶基。
在另一個(gè)特別優(yōu)選的方面，一個(gè)Y是-O-，Z、W和W’是H，且V是由1-3個(gè)鹵原子取代的苯基。3，5-二氯苯基、3-溴-4-氟苯基、3-氯苯基和3-溴苯基是特別優(yōu)選的。
當(dāng)V選自雜芳基和取代的雜芳基時(shí)，也是特別優(yōu)選的。
最優(yōu)選的是這樣的雜芳基是4-吡啶基。
在另一方面，優(yōu)選V和W通過(guò)另外的3個(gè)碳原子連接在一起，以形成含有6個(gè)碳原子并由選自以下的1個(gè)取代基一取代的任選取代的環(huán)基羥基、酰氧基、烷氧基羰基氧基、烷硫基羰基氧基及芳氧基羰基氧基，其連接于一個(gè)所述另外的碳原子上，該碳原子為來(lái)自連接于磷原子的Y的三個(gè)原子之一。在這樣的化合物中，更優(yōu)選V和W一起形成選自下列的環(huán)基-CH2-CH(OH)-CH2-、-CH2CH(OCOR3)-CH2-和-CH2CH(OCO2R3)-CH2-。
另一個(gè)優(yōu)選的V基團(tuán)是1-烯烴。已知經(jīng)P450酶的氧化是發(fā)生在芐位和烯丙位碳上。
在一個(gè)方面，優(yōu)選當(dāng)Z為-CHR2OH、-CH2OCOR3或-CH2OCO2R3時(shí)，V基團(tuán)包括-H。
在另一方面，當(dāng)V為芳基、取代的芳基、雜芳基或取代的雜芳基時(shí)，優(yōu)選Z基團(tuán)包括-OR2、-SR2、-R2、-NR22、-OCOR3、OCO2R3、-SCOR3、-SCO2R3、-NHCOR2、-NHCO2R3、-(CH2)p-OR12和-(CH2)p-SR12。更優(yōu)選Z基團(tuán)包括-OR2、-R2、-OCOR2、-OCO2R3、-NHCOR2、-NHCO2R3、-(CH2)p-OR12和-(CH2)p-SR12。最優(yōu)選Z基團(tuán)包括-OR2、-H、-OCOR3、-OCO2R3和-NHCOR2。
優(yōu)選的W和W’基團(tuán)包括H、R3、芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的芳基。優(yōu)選W和W’為相同的基團(tuán)。更優(yōu)選W和W’均為H。
在一個(gè)方面，優(yōu)選式VI的前藥，
其中V選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基。更優(yōu)選的是其中M通過(guò)氧或氮原子與磷連接的化合物。3，5-二氯苯基、3-溴-4-氟苯基、3-氯苯基、3-溴苯基是特別優(yōu)選的。優(yōu)選Y為-O-。特別優(yōu)選的芳基和取代的芳基包括苯基和取代的苯基。特別優(yōu)選的雜芳基包括單環(huán)取代的和未取代的雜芳基。4-吡啶基和3-溴吡啶基是特別優(yōu)選的。
在一個(gè)方面，式VI化合物優(yōu)選具有Z基團(tuán)，Z基團(tuán)為H、烷基、脂環(huán)基、羥基、烷氧基、OC(O)R3、OC(O)OR3或NHC(O)R2。優(yōu)選這樣的基團(tuán)，其中Z降低副產(chǎn)物乙烯基芳基酮經(jīng)Michael加成反應(yīng)的傾向。優(yōu)選Z基團(tuán)為提供電子給乙烯基的基團(tuán)，乙烯基是已知的降低α，β-不飽和的羰基化合物經(jīng)Michael加成反應(yīng)的傾向的策略。例如，在丙烯基酰胺的類(lèi)似位置上的甲基不引起突變活性，而未取代的乙烯基類(lèi)似物是高度致突變的。其它的基團(tuán)，如Z＝OR12、NHAc等可發(fā)揮類(lèi)似的功能。其它的基團(tuán)也可防止Michael加成反應(yīng)，特別是引起雙鍵完全除去的基團(tuán)，諸如Z＝-OH、-OC(O)R3、-OCO2R3和NH2，它們將在消去反應(yīng)后快速地經(jīng)受重新互變異構(gòu)現(xiàn)象。某些W和W’基團(tuán)在這種作用上也是有利的，因?yàn)樗龌鶊F(tuán)阻止對(duì)β-碳的加成反應(yīng)或使產(chǎn)物去穩(wěn)定。另一個(gè)優(yōu)選的Z基團(tuán)是含有能夠在消去反應(yīng)后加入到α，β-不飽和雙鍵的親核試劑的基團(tuán)，即(CH2)pSH或(CH2)pOH，其中p是2或3。另一個(gè)優(yōu)選的基團(tuán)是連接于V的基團(tuán)，其能在消去反應(yīng)后加入到α，β-不飽和雙鍵上
在另一方面，優(yōu)選式VII的前藥 其中Z選自-CHR2OH、-CHR2OC(O)R3、-CHR2OC(S)R3、-CHR2OCO2R3、-CHR2OC(O)SR3、-CHR2OC(S)OR3和-CH2芳基。優(yōu)選M通過(guò)氮原子與磷連接。更優(yōu)選的基團(tuán)包括-CHR2OH、-CHR2OC(O)R3和-CHR2OCO2R3。優(yōu)選R2是H。
在另一方面，優(yōu)選式VIII的前藥 其中Z’選自-OH、-OC(O)R3、-OCO2R3和-OC(O)SR3；D4和D3選自-H、烷基、-OH和-OC(O)R3；前提是D4和D3中至少一個(gè)為-H。優(yōu)選Y為-O-。一個(gè)特別優(yōu)選的Z’基團(tuán)是OH。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，W’和Z為-H，W和C二者為相同的芳基、取代的芳基、雜芳基或取代的雜芳基，兩個(gè)Y基團(tuán)為相同的-NR6-，以使膦酸酯前藥部分
具有通過(guò)磷-氧雙鍵的對(duì)稱(chēng)平面。
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，W和W’為H，V選自芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基，和Z選自-H、-OR2和-NHCOR2。更優(yōu)選其中Z為-H的化合物。優(yōu)選這樣的具有通過(guò)氧連接的M的化合物。最優(yōu)選的是這樣的化合物，其中氧是在伯羥基上。還更優(yōu)選這樣的化合物，其中V是苯基或取代的苯基。
在一個(gè)方面，通過(guò)給予選自以下的環(huán)磷酰胺類(lèi)似物及其藥學(xué)上可接受的前藥和鹽處理表達(dá)P450酶的腫瘤細(xì)胞 其中V、W和W’獨(dú)立選自-H、烷基、芳烷基、脂環(huán)基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、1-鏈烯基和1-鏈炔基；或V和Z通過(guò)另外的3-5個(gè)原子連接在一起，以形成含有5-7個(gè)環(huán)原子，任選1個(gè)雜原子的環(huán)基，其由連接于碳原子的羥基、酰氧基、烷氧基羰基氧基或芳氧基羰基氧基取代，所述碳原子為來(lái)自連接于磷原予的兩個(gè)Y基團(tuán)的三個(gè)原子之一；或V和Z通過(guò)另外的3-5個(gè)原子連接在一起，以形成任選含有1個(gè)雜原子的環(huán)基，所述環(huán)基與相對(duì)于鄰近V的Y的β和γ位上的芳基稠合；
V和W通過(guò)另外的3個(gè)碳原子連接在一起，以形成含有6個(gè)碳原予并由選自以下的1個(gè)取代基取代的任選取代的環(huán)基羥基、酰氧基、烷氧基羰基氧基、烷硫基羰基氧基及芳氧基羰基氧基，其連接于一個(gè)所述另外的碳原子上，該碳原子為來(lái)自連接于磷原子的Y的三個(gè)原予之一；Z和W通過(guò)另外的3-5個(gè)原子連接在一起，以形成任選含1個(gè)雜原子的環(huán)基，且V必須是芳基、取代的芳基、雜芳基或取代的雜芳基；W和W’通過(guò)另外的2-5個(gè)原子連接在一起，以形成任選含0-2個(gè)雜原子的環(huán)基，且V必須是芳基、取代的芳基、雜芳基或取代的雜芳基；Z選自-CHR2OH、-CHR2OC(O)R3、-CHR2OC(S)R3、-CHR2OC(S)OR3、-CHR2OC(O)SR3、-CHR2OCO2R3、-OR2、-SR2、-CHR2N3、-CH2芳基、-CH(芳基)OH、-CH(CH＝CR22)OH、-CH(C≡CR2)OH、-R2、-NR22、-OCOR3、-OCO2R3、-SCOR3、-SCO2R3、-NHCOR2、-NHCO2R3、-CH2NH芳基、-(CH2)p-OR12和-(CH2)p-SR12；p是2或3的整數(shù)；前提是a)V、Z、W、W’不都是-H；及b)當(dāng)Z為-R2時(shí)，則V、W和W’中的至少一個(gè)不是-H、烷基、芳烷基或脂環(huán)基；R2選自R3和-H；R3選自烷基、芳基、脂環(huán)基和芳烷基；R66選自-H、低級(jí)2-鹵代烷基和低級(jí)烷基；R12選自-H和低級(jí)?；籖”為低級(jí)2-鹵代烷基；R選自H、低級(jí)烷基和R”；每個(gè)Y獨(dú)立選自-O-、-NR66-，前提是至少一個(gè)Y為-NR66-。
所述腫瘤細(xì)胞最好是肝細(xì)胞癌。這些環(huán)磷酰胺類(lèi)似物也可通過(guò)增強(qiáng)氧化環(huán)磷酰胺類(lèi)似物的P450酶的活性及通過(guò)給予環(huán)磷酰胺類(lèi)似物來(lái)處理腫瘤細(xì)胞。
在另一方面，通過(guò)給予增加內(nèi)源性P450酶的量的化合物增強(qiáng)P450的活性。優(yōu)選所述增加內(nèi)源性P450酶的量的化合物選自苯巴比妥、地塞米松、利福平、苯妥英和孕烯醇酮-16α腈。
優(yōu)選環(huán)磷酰胺類(lèi)似物包括其中R”為2-氯代乙基和R選自-H和2-氯代乙基的化合物。
也優(yōu)選其中R66選自-H、甲基和2-氯代乙基的環(huán)磷酰胺類(lèi)似物。
在一個(gè)方面，通過(guò)給予增加內(nèi)源性P450酶的量的化合物增強(qiáng)P450酶的活性。
也優(yōu)選其中Z、W、W’和R66為-H，R”和R為2-氯代乙基的環(huán)磷酰胺類(lèi)似物。
優(yōu)選的環(huán)磷酰胺類(lèi)似物具有選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基的V基團(tuán)。更優(yōu)選的是這些化合物，其中Z、W、W’和R66為-H，R”和R為2-氯代乙基。還更優(yōu)選的是這些化合物，其中V選自苯基、3-氯代苯基和3-溴代苯基。也優(yōu)選其中V為4-吡啶基的那些化合物。
也更優(yōu)選的是這些化合物，其中V是含有至少一個(gè)氮原子的任選取代的單環(huán)雜芳基。優(yōu)選這樣的化合物具有通過(guò)氧連接的M。最優(yōu)選的是這樣的化合物，其中所述氧在伯羥基上。特別優(yōu)選的是這樣的化合物，其中V是4-吡啶基。
優(yōu)選口服生物利用度為至少5％。更優(yōu)選口服生物利用度為至少10％。
P450氧化對(duì)立體化學(xué)結(jié)構(gòu)可能是敏感的，這種立體化學(xué)結(jié)構(gòu)可在磷上或在攜帶芳基的碳上。本發(fā)明的前藥有兩種圍繞著磷的異構(gòu)體形式。能使氧化和消去反應(yīng)進(jìn)行的立體化學(xué)結(jié)構(gòu)是優(yōu)選的。優(yōu)選為順式立體化學(xué)結(jié)構(gòu)。作為對(duì)比，該反應(yīng)對(duì)M基團(tuán)是相對(duì)不敏感的，因?yàn)榱呀庥酶鞣N膦酸酯、磷酸酯和氨基磷酸酯進(jìn)行。在連接于磷的M上的原子可以是O、S或N?；钚运幬餅镸-PO32-、MP2O63-或MP3O94-，用于治療其中肝為靶器官的疾病，包括糖尿病、肝炎、肝癌、肝纖維化、瘧疾以及代謝性疾病，其中肝對(duì)生化終產(chǎn)物如葡萄糖(糖尿病)、膽固醇、脂肪酸和甘油三酯(動(dòng)脈粥樣硬化)的過(guò)度產(chǎn)生負(fù)有責(zé)任。而且，M-PO32-、MP2O63-或MP3O94-可用于治療靶在肝外組織或細(xì)胞(可氧化前藥)中的疾病。
其它優(yōu)選的M基團(tuán)包括用于治療糖尿病、癌、病毒性感染、肝纖維化、寄生蟲(chóng)感染、高血壓和高脂血癥的藥物。
優(yōu)選的式VIII化合物使用能經(jīng)受氧化反應(yīng)而生成不穩(wěn)定中間體的Z’基團(tuán)，該中間體經(jīng)B-消去反應(yīng)分解為相應(yīng)的M-P(O)(NHR6)2或M-P(O)(O-)(NHR6)。特別優(yōu)選的Z’基因?yàn)镺H?；鶊F(tuán)D4和D3優(yōu)選為氫、烷基、-OR2、-OCOR3，但D4或D3中至少一個(gè)必須為氫。
以下化合物及其類(lèi)似物可用于本發(fā)明的前藥方法中。
在一個(gè)優(yōu)選的方面，M通過(guò)氧原子與式I的磷連接。優(yōu)選M為核苷。優(yōu)選M通過(guò)呋喃核糖基或阿拉伯呋喃糖基上的伯羥基中的氧被連接。這樣的化合物優(yōu)選LdT、LdC、araA、AZT、d4T、ddI、ddA、ddC、L-ddC、L FddC、L-d4C、L-Fd4C、3TC、利巴韋林、5-氟-2’-脫氧尿苷、FIAU、FIAC、BHCG、L FMAU、BvaraU、E-5-(2-溴乙烯基)-2’-脫氧尿苷、TFT、5-丙炔基-1-阿糖尿嘧啶、CDG、DAPD、FDOC、d4C、DXG、FEAU、FLG、FLT、FTC、5-基-碳環(huán)2’-脫氧鳥(niǎo)苷、氧環(huán)烷菌素A、氧環(huán)烷菌素G、Cyclobut A、Cyclobut G、dFdC、araC、溴脫氧尿苷、IDU、CdA、FaraA、助間型霉素、2’-去氧助間型霉素、araT、噻唑呋林、ddAPR、9-(阿拉伯呋喃糖基)-2，6-二氨基嘌呤、9-(2’-脫氧呋喃核糖基)-2，6-二氨基嘌呤、9-(2’-脫氧2’氟呋喃核糖基)-2，6-二氨基嘌呤、9-(阿拉伯呋喃糖基)鳥(niǎo)嘌呤、9-(2’-脫氧呋喃核糖基)鳥(niǎo)嘌呤、9-(2’-脫氧2’氟呋喃核糖基)鳥(niǎo)嘌呤、FMdC、5，6-二氫-5-氮雜胞苷、5-氮雜胞苷、5-氨雜2’脫氧胞苷或AICAR。在另一方面，優(yōu)選M通過(guò)無(wú)環(huán)糖基的羥基上的氧原子被連接。優(yōu)選這樣的MH為ACV、GCV、噴昔洛韋、(R)-9-(3，4-二羥基丁基)鳥(niǎo)嘌呤或cytallene。
在一個(gè)優(yōu)選的方面，式I化合物不包括其中MH為araA或5-氟-2’-脫氧尿苷的化合物。
一般來(lái)說(shuō)，優(yōu)選M通過(guò)氧被連接，所述氧在伯羥基中。在此情況下，優(yōu)選MH為araA、AZT、d4T、ddI、ddA、ddC、L-ddC、L FddC、L-d4C、L-Fd4C、3TC、利巴韋林、5-氟-2’-脫氧尿苷、FIAU、FIAC、BHCG、L FMAU、BvaraU、E-5-(2-溴乙烯基)-2’-脫氧尿苷、TFT、5-丙炔基-1-阿糖尿嘧啶、CDG、DAPD、FDOC、d4C、DXG、FEAU、FLG、FLT、FTC、5-基-碳環(huán)2’-脫氧鳥(niǎo)苷、氧環(huán)烷菌素A、氧環(huán)烷菌素G、Cyclobut A、Cyclobut G、dFdC、araC、溴脫氧尿苷、IDU、CdA、FaraA、助間型霉素、2’-去氧助間型霉素、araT、噻唑呋林、ddAPR、9-(阿拉伯呋喃糖基)-2，6-二氨基嘌呤、9-(2’-脫氧呋喃核糖基)-2，6-二氨基嘌呤、9-(2’-脫氧2’氟呋喃核糖基)-2，6-二氨基嘌呤、9-(阿拉伯呋喃糖基)鳥(niǎo)嘌呤、9-(2’-脫氧呋喃核糖基)鳥(niǎo)嘌呤、9-(2’-脫氧2’氟呋喃核糖基)鳥(niǎo)嘌呤、FMdC、5，6-二氫-5-氮雜胞苷、5-氮雜胞苷、5-氮雜2’脫氧胞苷、AICAR、ACV、GCV、噴昔洛韋、(R)-9-(3，4-二羥基丁基)鳥(niǎo)嘌呤或cytallene。
在另一個(gè)方面，MH為araA。
在另一個(gè)方面，MH為5-氟-2’-脫氧尿苷。
在另一個(gè)方面，其中M通過(guò)碳原子連接于式I的磷的式I化合物是優(yōu)選的。在這樣的化合物中，優(yōu)選M-PO32-為膦?；姿峄蜢Ⅴ；宜帷?br> 在另一優(yōu)選的方面，MPO32-、MP2O63-或MP3O94-用于治療肝病或代謝性疾病，其中肝對(duì)生化終產(chǎn)物的過(guò)度產(chǎn)生負(fù)有責(zé)任。優(yōu)選這樣的肝病選自糖尿病、肝炎、肝癌、肝纖維化、瘧疾、膽石和慢性cholecystalithiasis。更優(yōu)選治療這樣的疾病時(shí)，MH、MPO32-、MP2O63-或MP3O94-為抗病毒劑或抗癌藥。
優(yōu)選MPO32-、MP2O63-或MP3O94-治療的代謝性疾病為糖尿病、動(dòng)脈粥樣硬化和肥胖癥。
在另一方面，優(yōu)選生化終產(chǎn)物選自葡萄糖、膽固醇、脂肪酸和甘油三酯。更優(yōu)選的是MP(O)(NHR6)O-或MPO32-為一種AMP活化的蛋白激酶激活劑。
在另一優(yōu)選的實(shí)施方案中，W’和Z為-H，W和V二者為相同的芳基、取代的芳基、雜芳基或取代的雜芳基，以使膦酸酯前藥部分 具有一對(duì)稱(chēng)平面。
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，W和W’為H，V選自芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基，和Z選自-H、-OR2和-NHCOR2。更優(yōu)選的是這樣的化合物，其中Z為-H。優(yōu)選這樣的化合物具有通過(guò)氧連接的M。最優(yōu)選其中氧在伯羥基中的此類(lèi)化合物。
也更優(yōu)選這樣的化合物，其中V是苯基或取代的苯基。最優(yōu)選的是這樣的化合物，其中所述氧在伯羥基中。
優(yōu)選這樣的化合物具有通過(guò)氧連接的M。
還更優(yōu)選這樣的化合物，其中V是含有至少一個(gè)氮原子的任選取代的單環(huán)雜芳基。優(yōu)選這樣的化合物具有通過(guò)氧連接的M。最優(yōu)選的是這樣的化合物，其中所述氧在伯羥基上。
特別優(yōu)選的是這樣的化合物，其中V選自由1-3個(gè)鹵原子取代的苯基和4-吡啶基。在這些化合物中，也優(yōu)選MH選自LdT、LdC、araA、AZT、d4T、ddI、ddA、ddC、L-ddC、L FddC、L-d4C、L-Fd4C、3TC、利巴韋林、5-氟-2’-脫氧尿苷、FIAU、FIAC、BHCG、L FMAU、BvaraU、E-5-(2-溴乙烯基)-2’-脫氧尿苷、TFT、5-丙炔基-1-阿糖尿嘧啶、CDG、DAPD、FDOC、d4C、DXG、FEAU、FLG、FLT、FTC、5-基-碳環(huán)2’-脫氧鳥(niǎo)苷、氧環(huán)烷菌素A、氧環(huán)烷菌素G、Cyclobut A、Cyclobut G、dFdC、araC、溴代脫氧尿苷、IDU、CdA、F araA、助間型霉素、2’-去氧助間型霉素、araT、噻唑呋林、ddAPR、9-(阿拉伯呋喃糖基)-2，6-二氨基嘌呤、9-(2’-脫氧呋喃核糖基)-2，6-二氨基嘌呤、9-(2’-脫氧2’氟呋喃核糖基)-2，6-二氨基嘌呤、9-(阿拉伯呋喃糖基)鳥(niǎo)嘌呤、9-(2’-脫氧呋喃核糖基)鳥(niǎo)嘌呤、9-(2’-脫氧2’氟呋喃核糖基)鳥(niǎo)嘌呤、FMdC、5，6-二氫-5-氮雜胞苷、5-氮雜胞苷、5-氮雜2’脫氧胞苷、AICAR、ACV、GCV、噴昔洛韋、(R)-9-(3，4-二羥基丁基)鳥(niǎo)嘌呤或cytallene。特別優(yōu)選的是這樣的化合物，其中V選自由1-3個(gè)鹵原子取代的苯基和4-吡啶基且MH選自araA、AZT、d4T、3TC、利巴韋林、5-氟-2’-脫氧尿苷、FMAU、DAPD、FTC、5-基-碳環(huán)2’-脫氧鳥(niǎo)苷、Cyclobut G、dFdC、araC、IDU、FaraA、ACV、GCV或噴昔洛韋。
當(dāng)MH選自ACV、GCV、噴昔洛韋、(R)-9-(3，4-二羥基丁基)鳥(niǎo)嘌呤、cytallene時(shí)也是優(yōu)選的。
當(dāng)W’和W為H，V是芳基、取代的芳基、雜芳基或取代的雜芳基，且Z是H、OR2和-NHCOR2時(shí)，也優(yōu)選M通過(guò)碳原子連接于磷。優(yōu)選的是這樣的化合物，其中MPO32-選自膦?；姿峄蜢Ⅴ；宜?。也優(yōu)選MH 選自PMEA、PMEDAP、HPMPC、HPMPA、FPMPA和PMPA。
優(yōu)選口服生物利用度為至少5％。更優(yōu)選口服生物利用度為至少10％。
P450氧化對(duì)立體化學(xué)結(jié)構(gòu)可能是敏感的，這種立體化學(xué)結(jié)構(gòu)可在磷上或在攜帶芳基的碳上。本發(fā)明的前藥有兩種圍繞著磷的異構(gòu)體形式。能使氧化和消去反應(yīng)進(jìn)行的立體化學(xué)結(jié)構(gòu)是優(yōu)選的。優(yōu)選為順式立體化學(xué)結(jié)構(gòu)。作為對(duì)比，該反應(yīng)對(duì)M基團(tuán)是相對(duì)不敏感的，因?yàn)榱呀庥酶鞣N膦酸酯、磷酸酯和氨基磷酸酯進(jìn)行。因此，基團(tuán)M表示作為式I化合物的一部分的基團(tuán)，該基團(tuán)能夠在體內(nèi)通過(guò)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的M-PO32-生成生物活性化合物。在M中的連接于磷的原子可以是O、S、C或N?；钚运幬锟梢詾镸-PO32-或M-PO32-的代謝產(chǎn)物，如用于治療其中肝為靶器官的疾病的三磷酸酯，所述疾病包括糖尿病、肝炎、肝癌、肝纖維化、瘧疾以及代謝性疾病，其中肝對(duì)生化終產(chǎn)物如葡萄糖(糖尿病)、膽固醇、脂肪酸和甘油三酯(動(dòng)脈粥樣硬化)的過(guò)度產(chǎn)生負(fù)有責(zé)任。而且，M-PO32-和MP(O)(NHR6)O-可用于治療其中靶在肝外但易受磷(膦)酸酯影響的疾病。優(yōu)選的M基團(tuán)為其中M為核苷的基團(tuán)，磷酸酯與羥基，最好是糖或糖類(lèi)似物上的伯羥基連接。更優(yōu)選M基團(tuán)包括LdC、LdT、araA、AZT、d4T、ddI、ddA、ddC、L-ddC、LFddC、L-d4C、L-Fd4C、3TC、利巴韋林、5-氟-2’-脫氧尿苷、FIAU、FIAC、BHCG、LFMAU、BvaraU、E-5-(2-溴乙烯基)-2’-脫氧尿苷、TFT、5-丙炔基-1-阿糖尿嘧啶、CDG、DAPD、FDOC、d4C、DXG、FEAU、FLG、FLT、FTC、5-基-碳環(huán)2’-脫氧鳥(niǎo)苷、氧環(huán)烷菌素A、氧環(huán)烷菌素G、CyclobutA、Cyclobut G、dFdC、araC、溴代脫氧尿苷、IDU、CdA、FaraA、助間型霉素、2’-去氧助間型霉素、araT、噻唑呋林、ddAPR、9-(阿拉伯呋喃糖基)-2，6-二氨基嘌呤、9-(2’-脫氧呋喃核糖基)-2，6-二氨基嘌呤、9-(2’-脫氧2’氟呋喃核糖基)-2，6-二氨基嘌呤、9-(阿拉伯呋喃糖基)鳥(niǎo)嘌呤、9-(2’-脫氧呋喃核糖基)鳥(niǎo)嘌呤、9-(2’-脫氧2’氟呋喃核糖基)鳥(niǎo)嘌呤、FMdC、5，6-二氫-5-氮雜胞苷、5-氮雜胞苷、5-氮雜2’脫氧胞苷、AICAR、ACV、GCV、噴昔洛韋、(R)-9-(3，4-二羥基丁基)鳥(niǎo)嘌呤或cytallene。特別優(yōu)選的是lobucavir、FTC、3TC、BMS 200，475、DAPD、DXG、L-FMAU、LdC、LdT、利巴韋林、F-ara-A、araC、CdA、dFdC、5-氟-2’-脫氧尿苷、ACV、GCV和噴昔洛韋。
優(yōu)選的M基團(tuán)包括用于治療病毒性感染的膦酸。這樣優(yōu)選的抗病毒劑包括PMEA、PMEDAP、HPMPC、HPMPA、FPMPA、PMPA、膦甲酸和膦?；姿?。更優(yōu)選的是PMEA、PMPA、HPMPC和HPMPA。特別優(yōu)選的是PMEA和PMPA。
其它優(yōu)選的M基團(tuán)包括用于治療下列疾病的膦酸糖尿病、肝纖維化(例如，如Bird等(J.Med.Chem.37，158-169(1994))報(bào)道的膠原酶抑制劑)、寄生蟲(chóng)感染、對(duì)金屬蛋白酶抑制作用有反應(yīng)的疾病(如高血壓、肝癌)和高脂血癥。
在另一方面，優(yōu)選的MH基團(tuán)包括L-核苷。優(yōu)選的L-核苷包括FTC、3TC、L-FMAU、LdC和LdT。
在一個(gè)方面，優(yōu)選的MH基因包括包括無(wú)環(huán)核苷。優(yōu)選的無(wú)環(huán)核苷包括ACV、GCU、噴昔洛韋、(R)-9-(3，4-二羥基丁基)鳥(niǎo)嘌呤和cytallene。更優(yōu)選為ACV、GCV和噴昔洛韋。
在另一方面，優(yōu)選的MH基團(tuán)包括雙脫氧核苷。優(yōu)選的雙脫氧核苷包括AZT、d4T、ddI、ddA、ddC、L-ddC、L-FddC、Ld4C、L-Fd4C、d4C和ddAPR。更優(yōu)選AZT、d4T、ddI和ddC。
在另一方面，優(yōu)選的MH基團(tuán)包括阿拉伯呋喃糖基核苷。優(yōu)選的有araA、araT、5-丙炔基-1-阿糖尿嘧啶、araC、FaraA、9-(阿拉伯呋喃糖基)-2，6-二氨基嘌呤和9-(阿拉伯呋喃糖基)鳥(niǎo)嘌呤。更優(yōu)選為araA、araC和FaraA。
在另一方面，優(yōu)選的MH基團(tuán)包括碳環(huán)核苷。優(yōu)選的有5-基-碳環(huán)2’-脫氧鳥(niǎo)苷、CDG、CyclobutA、Cyclobut G和BHCG。更優(yōu)選5-基-碳環(huán)2’-脫氧鳥(niǎo)苷和Cyclobut G。
在另一方面，優(yōu)選的MH基團(tuán)包括核苷上的氟化糖。優(yōu)選的氟化糖包括FLT、FLG、FIAC。FIAU、FMAU、FEAU、dFdC、9-(2’-脫氧-2’氟代呋喃核糖基)-2，6-二氨基嘌呤和9-(2’-脫氧2’氟呋喃核糖基)鳥(niǎo)嘌呤。更優(yōu)選L-FMAU和dFdC。
在另一方面，優(yōu)選的MH基團(tuán)包括二氧戊環(huán)核苷。優(yōu)選的二氧戊環(huán)核苷包括DAPD、DXG和FDOC。更優(yōu)選DAPD和DXG。
在另一方面，優(yōu)選的治療病毒性感染的MH和MPO32-包括lobucavir、FTC、3TC、BMS 200，475、DAPD、DXG、L-FMAU、LdC、LdT、利巴韋林、ACV、GCV、噴昔洛韋、PMEA和PMPA。
在另一方面，優(yōu)選的治療癌癥的MH基團(tuán)包括F-ara-A、araC、CdA、dFdc和5-氟-2’-脫氧尿苷。
以下的前藥是優(yōu)選的本發(fā)明化合物。由于這些化合物作為非對(duì)映體混合物或作為單一的立體異構(gòu)體是生物活性的，顯示這些化合物而未有立體化學(xué)方面的描述。表1中命名的化合物采用下面的慣例，通過(guò)指派給式VIa的變量的數(shù)字來(lái)指定M1.V.L1.L2(其中Y為NH和Y’為氧；M1為變量)表示具有特定羥基的式M-H化合物，該羥基可用基團(tuán)P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)磷酸化以制備式VIa化合物或M1為表示式M-PO32-的膦酸的變量，其通過(guò)用Y-CH(V)CH2CH2-Y’取代PO32-中的兩個(gè)氧被轉(zhuǎn)化為式VIa化合物。V為在指定位置具有2個(gè)取代基L1和L2的芳基或雜芳基。
變量M1被分為具有指定給下列各組的結(jié)構(gòu)的3個(gè)組 變量M1M11組1)3TC其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
2)(-)FTC其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
3)L-FMAU其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
4)噴昔洛韋其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基，其在細(xì)胞中被磷酸化。
5)BMS 200，475其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
6)L(-)Fd4C其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
7)Lobucavir其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基，其在細(xì)胞中被磷酸化。
8)DXG其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
9)LdC其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
變量M1M12組
1)ddI其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
2)LdT其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
3)ddC其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
4)AZT其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
5)d4T其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
6)DAPD其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
7)L-FddC其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
8)利巴韋林其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
9)CdA其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
變量M1M13組1)更昔洛韋其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基，其在細(xì)胞中被磷酸化。
2)阿昔洛韋其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
3)阿糖胞苷其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
4)吉西他濱其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
5)氟達(dá)拉濱其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
6)氟尿苷其中-P(O)CY-CH(V)CH2CH2-Y’)連接于伯羥基。
7)HPMPC其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)取代PO3＝基團(tuán)。
8)PMEA其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)取代PO3＝基因。
9)PMPA其中-P(O)(Y-CH(V)CH2CH2-Y’)取代PO3＝基團(tuán)。
變量VV1組1)2-(L1)-3(L2)苯基2)2-(L1)-4(L2)苯基3)2-(L1)-5(L2)苯基4)2-(L1)-6(L2)苯基5)3-(L1)-4(L2)苯基6)3-(L1)-5(L2)苯基7)3-(L1)-6(L2)苯基
8)2-(L1)-6(L2)-4-氯苯基9)3-(L1)-5(L2)-4-氯苯基變量VV2組1)2-(L1)-3(L2)4-吡啶基2)2-(L1)-5(L2)4-吡啶基3)2-(L1)-6(L2)4-吡啶基4)3-(L1)-5(L2)4-吡啶基5)3-(L1)-6(L2)4-吡啶基6)2-(L1)-4(L2)3-吡啶基7)2-(L1)-5(L2)3-吡啶基8)2-(L1)-6(L2)3-吡啶基9)4-(L1)-5(L2)3-吡啶基變量VV3組1)4-(L1)-6(L2)3-吡啶基2)5-(L1)-6(L2)3-吡啶基3)3-(L1)-4(L2)2-吡啶基4)3-(L1)-5(L2)2-吡啶基5)3-(L1)-6(L2)2-吡啶基6)4-(L1)-5(L2)2-吡啶基7)4-(L1)-6(L2)2-吡啶基8)3-(L1)-4(L2)2-噻吩基9)2-(L1)-5(L2)3-呋喃基變量L11)氫2)氯3)溴4)氟5)甲基
6)異丙基7)甲氧基8)二甲基氨基9)酰氧基變量L21)氫2)氯3)溴4)氟5)甲基6)異丙基7)甲氧基8)二甲基氨基9)酰氧基優(yōu)選的化合物為使用M11組和V1組的列于表1中的化合物。例如，化合物1.3.6.7表示M11組的結(jié)構(gòu)1，即3TC；V1組的結(jié)構(gòu)3，即2-(L1)-5(L2)苯基；變量L1的結(jié)構(gòu)6，即異丙基；及變量L2的結(jié)構(gòu)7，即甲氧基。因此，化合物1.3.6.7.為具有連接于伯羥基的P(O)(Y-CH(V)CH2CH2Y’)的(為{[1-(2-I-丙基-5-甲氧基苯基)-1，3-丙基]膦?；鶀)的3TC。
優(yōu)選的化合物也是使用M11組和V2組的列于表1中的化合物。
優(yōu)選的化合物也是使用M11組和V3組的列于表1中的化合物。
優(yōu)選的化合物也是使用M12組和V1組的列于表1中的化合物。
優(yōu)選的化合物也是使用M12組和V2組的列于表1中的化合物。
優(yōu)選的化合物也是使用M12組和V3組的列于表1中的化合物。
優(yōu)選的化合物也是使用M13組和V1組的列于表1中的化合物。
優(yōu)選的化合物也是使用M13組和V2組的列于表1中的化合物。
優(yōu)選的化合物也是使用M13組和V3組的列于表1中的化合物。
優(yōu)選的化合物由所有以上命名的化合物表示，但Y是氧和Y’是NH的化合物除外。
優(yōu)選的化合物由所有以上命名的化合物表示，但Y和Y’是NH的化合物除外。
優(yōu)選的化合物由所有以上命名的化合物表示，但Y是NCH3和Y’是氧的化合物除外。
優(yōu)選的化合物由所有以上命名的化合物表示，但Y是氧和Y’是NCH3的化合物除外。
表11.1.1.1 1.1.1.2 1.1.1.3 1.1.1.4 1.1.1.5 1.1.1.6 1.1.1.7 1.1.1.8 1.1.1.9 1.1.2.11.1.2.2 1.1.2.3 1.1.2.4 1.1.2.5 1.1.2.6 1.1.2.7 1.1.2.8 1.1.2.9 1.1.3.1 1.1.3.21.1.3.3 1.1.3.4 1.1.3.5 1.1.3.6 1.1.3.7 1.1.3.8 1.1.3.9 1.1.4.1 1.1.4.2 1.1.4.31.1.4.4 1.1.4.5 1.1.4.6 1.1.4.7 1.1.4.8 1.1.4.9 1.1.5.1 1.1.5.2 1.1.5.3 1.1.5.41.1.5.5 1.1.5.6 1.1.5.7 1.1.5.8 1.1.5.9 1.1.6.1 1.1.6.2 1.1.6.3 1.1.6.4 1.1.6.51.1.6.6 1.1.6.7 1.1.6.8 1.1.6.9 1.1.7.1 1.1.7.2 1.1.7.3 1.1.7.4 1.1.7.5 1.1.7.61.1.7.7 1.1.7.8 1.1.7.9 1.1.8.1 1.1.8.2 1.1.8.3. 1.1.8.4 1.1.8.5 1.1.8.6 1.1.8.71.1.8.8 1.1.8.9 1.1.9.1 1.1.9.2 1.1.9.3 1.1.9.4 1.1.9.5 1.1.9.6 1.1.9.7 1.1.9.81.1.9.9 1.2.1.1 1.2.1.2 1.2.1.3 1.2.1.4 1.2.1.5 1.2.1.6 1.2.1.7 1.2.1.8 1.2.1.91.2.2.1 1.2.2.2 1.2.2.3 1.2.2.4 1.2.2.5 1.2.2.6 1.2.2.7 1.2.2.8 1.2.2.9 1.2.3.11.2.3.2 1.2.3.3 1.2.3.4 1.2.3.5 1.2.3.6 1.2.3.7 1.2.3.8 1.2.3.9 1.2.4.1 1.2.4.21.2.4.3 1.2.4.4 1.2.4.5 1.2.4.6 1.2.4.7 1.2.4.8 1.2.4.9 1.2.5.1 1.2.5.2 1.2.5.31.2.5.4 1.2.5.5 1.2.5.6 1.2.5.7 1.2.5.8 1.2.5.9 1.2.6.1 1.2.6.2 1.2.6.3 1.2.6.41.2.6.5 1.2.6.6 1.2.6.7 1.2.6.8 1.2.6.9 1.2.7.1 1.2.7.2 1.2.7.3 1.2.7.4 1.2.7.51.2.7.6 1.2.7.7 1.2.7.8 1.2.7.9 1.2.8.1 1.2.8.2 1.2.8.3 1.2.8.4 1.2.8.5 1.2.8.61.2.8.7 1.2.8.8 1.2.8.9 1.2.9.1 1.2.9.2 1.2.9.3 1.2.9.4 1.2.9.5 1.2.9.6 1.2.9 71.2.9.8 1.2.9.9 1.3.1.1 1.3.1.2 1.3.1.3 1.3.1.4 1.3.1.5 1.3.1.6 1.3.1.7 1.3.1.81.3.1.9 1.3.2.1 1.3.2.2 1.3.2.3 1.3.2.4 1.3.2.5 1.3.2.6 1.3.2.7 1.3.2.8 1.3.2.91.3.3.1 1.3.3.2 1.3.3.3 1.3.3.4 1.3.3.5 1.3.3.6 1.3.1.7 1.3.3.8 1.3.3.9 1.3.4.11.3.4.2 1.3.4.3 1.3.4.4 1.3.4.5 1.3.4.6 1.3.4.7 1.3.4.8 1.3.4.9 1.3.5.1 1.3.5.21.3.5.3 1.3.5.4 1.3.5.5 1.3.5.6 1.3.5.7 1.3.5.8 1.3.5.9 1.3.6.1 1.3.6.2 1.3.6.31.3.6.4 1.3.6.5 1.3.6.6 1.3.6.7 1.3.6.8 1.3.6.9 1.3.7.1 1.3.7.2 1.3.7.3 1.3.7.41.3.7.5 1.3.7.6 1.3.7.7 1.3.7.8 1.3.7.9 1.3.8.1 1.3.8.2 1.3.8.3 1.3.8.4 1.3.8.51.3.8.6 1.3.8.7 1.3.8.8 1.3.8.9 1.3.9.1 1.3.9.2 1.3.9.3 1.3.9.4 1.3.9.5 1.3.9.61.3.9.7 1.3.9.8 1.3.9.9 1.4.1.1 1.4.1.2 1.4.1.3 1.4.1.4 1.4.1.5 1.4.1.6 1.4.1.71.4.1.8 1.4.1.9 1.4.2.1 1.4.2.2 1.4.2.3 1.4.2.4 1.4.2.5 1.4.2.6 1.4.2.7 1.4.2.81.4.2.9 1.4.3.1 1.4.3.2 1.4.3.3 1.4.3.4 1.4.3.5 1.4.3.6 1.4.3.7 1.4.3.8 1.4.3.91.4.4.1 1.4.4.2 1.4.4.3 1.4.4.4 1.4.4.5 1.4.4.6 1.4.4.7 1.4.4.8 1.4.4.9 1.4.5.11.4.5.2 1.4.5.3 1.4.5.4 1.4.5.5 1.4.5.6 1.4.5.7 1.4.5.8 1.4.5.9 1.4.6.1 1.4.6.21.4.6.3 1.4.6.4 1.4.6.5 1.4.6.6 1.4.6.7 1.4.6.8 1.4.6.9 1.4.7.1 1.4.7.2 1.4.7.31.4.7.4 1.4.7.5 1.4.7.6 1.4.7.7 1.4.7.8 1.4.7.9 1.4.8.1 1.4.8.2 1.4.8.3 1.4.8.41.4.8.5 1.4.8.6 1.4.8.7 1.4.8.8 1.4.8.9 1.4.9.1 1.4.9.2 1.4.9.3 1.4.9.4 1.4.9.51.4.9.6 1.4.9.7 1.4.9.8 1.4.9.9 1.5.1.1 1.5.1.2 1.5.1.3 1.5.1.4 1.5.1.5 1.5.1.61.5.1.7 1.5.1.8 1.5.1.9 1.5.2.1 1.5.2.2 1.5.2.3 1.5.2.4 1.5.2.5 1.5.2.6 1.5.2.71.5.2.8 1.5.2.9 1.5.3.1 1.5.3.2 1.5.3.3 1.5.3.4 1.5.3.5 1.5.3.6 1.5.3.7 1.5.3.81.5.3.9 1.5.4.1 1.5.4.2 1.5.4.3 1.5.4.4 1.5.4.5 1.5.4.6 1.5.4.7 1.5.4.8 1.5.4.91.5.5.1 1.5.5.2 1.5.5.3 1.5.5.4 1.5.5.5 1.5.5.6 1.5.5.7 1.5.5.8 1.5.5.9 1.5.6.11.5.6.2 1.5.6.3 1.5.6.4 1.5.6.5 1.5.6.6 1.5.6.7 1.5.6.8 1.5.6.9 1.5.7.1 1.5.7.21.5.7.3 1.5.7.4 1.5.7.5 1.5.7.6 1.5.7.7 1.5.7.8 1.5.7.9 1.5.8.1 1.5.8.2 1.5.8.31.5.8.4 1.5.8.5 1.5.8.6 1.5.8.7 1.5.8.8 1.5.8.9 1.5.9.1 1.5.9.2 1.5.9.3 1.5.9.41.5.9.5 1.5.9.6 1.5.9.7 1.5.9.8 1.5.9.9 1.6.1.1 1.6.1.2 1.6.1.3 1.6.1.4 1.6.1.51.6.1.6 1.6.1.7 1.6.1.8 1.6.1.9 1.6.2.1 1.6.2.2 1.6.2.3 1.6.2.4 1.6.2.5 1.6.2.61.6.2.7 1.6.2.8 1.6.2.9 1.6.3.1 1.6.3.2 1.6.3.3 1.6.3.4 1.6.3.5 1.6.3.6 1.6.3.71.6.3.8 1.6.3.9 1.6.4.1 1.6.4.2 1.6.4.3 1.6.4.4 1.6.4.5 1.6.4.6 1.6.4.7 1.6.4.81.6.4.9 1.6.5.1 1.6.5.2 1.6.5.3 1.6.5.4 1.6.5.5 1.6.5.6 1.6.5.7 1.6.5.8 1.6.5.91.6.6.1 1.6.6.2 1.6.6.3 1.6.6.4 1.6.6.5 1.6.6.6 1.6.6.7 1.6.6.8 1.6.6.9 1.6.7.11.6.7.2 1.6.7.3 1.6.7.4 1.6.7.5 1.6.7.6 1.6.7.7 1.6.7.8 1.6.7.9 1.6.8.1 1.6.8.21.6.8.3 1.6.8.4 1.6.8.5 1.6.8.6 1.6.8.7 1.6.8.8 1.6.8.9 1.6.9.1 1.6.9.2 1.6.9.31.6.9.4 1.6.9.5 1.6.9.6 1.6.9.7 1.6.9.8 1.6.9.9 1.7.1.1 1.7.1.2 1.7.1.3 1.7.1.41.7.1.5 1.7.1.6 1.7.1.7 1.7.1.8 1.7.1.9 1.7.2.1 1.7.2.2 1.7.2.3 1.7.2.4 1.7.2.51.7.2.6 1.7.2.7 1.7.2.8 1.7.2.9 1.7.3.1 1.7.3.2 1.7.3.3 1.7.3.4 1.7.3.5 1.7.3.6
表1續(xù)1.7.3.7 1.7.3.8 1.7.3.9 1.7.4.1 1.7.4.2 1.7.4.3 1.7.4.4 1.7.4.5 1.7.4.6 1.7.4.71.7.4.8 1.7.4.9 1.7.5.1 1.7.5.2 1.7.5.3 1.7.5.4 1.7.5.5 1.7.5.6 1.7.5.7 1.7.5.81.7.5.9 1.7.6.1 1.7.6.2 1.7.6.3 1.7.6.4 1.2.6.5 1.7.6.6 1.7.6.7 1.7.6.8 1.7.6.91.7.7.1 1.7.7.2 1.7.7.3 1.7.7.4 1.7.7.5 1.7.7.6 1.7.7.7 1.7.7.8 1.7.7.9 1.7.8.11.7.8.2 1.7.8.3 1.7.8.4 1.7.8.5 1.7.8.6 1.7.8.7 1.7.8.8 1.7.8.9 1.7.9.1 1.7.9.21.7.9.3 1.7.9.4 1.7.9.5 1.7.9.6 1.7.9.7 1.7.9.8 1.7.9.9 1.8.1.1 1.8.1.2 1.8.1.31.8.1.4 1.8.1.5 1.8.1.6 1.8.1.7 1.8.1.8 1.8.1.9 1.8.2.1 1.8.2.2 1.8.2.3 1.8.2.41.8.2.5 1.8.2.6 1.8.2.7 1.8.2.8 1.8.2.9 1.8.3.1 1.8.3.2 1.8.3.3 1.8.3.4 1.8.3.51.8.3.6 1.8.3.7 1.8.3.8 1.8.3.9 1.8.4.1 1.8.4.2 1.8.4.3 1.8.4.4 1.8.4.5 1.8.4.61.8.4.7 1.8.4.8 1.8.4.9 1.8.5.1 1.8.5.2 1.8.5.3 1.8.5.4 1.8.5.5 1.8.5.6 1.8.5.71.8.5.8 1.8.5.9 1.8.6.1 1.8.6.2 1.8.6.3 1.8.6.4 1.8.6.5 1.8.6.6 1.8.6.7 1.8.6.81.8.6.9 1.8.7.1 1.8.7.2 1.8.7.3 1.8.7.4 1.8.7.5 1.8.7.6 1.8.7.7 1.8.7.8 1.8.7.91.8.8.1 1.8.8.2 1.8.8.3 1.8.8.4 1.8.8.5 1.8.8.6 1.8.8.7 1.8.8.8 1.8.8.9 1.8.9.11.8.9.2 1.8.9.3 1.8.9.4 1.8.9.5 1.8.9.6 1.8.9.7 1.8.9.8 1.8.9.9 1.9.1.1 1.9.1.21.9.1.3 1.9.1.4 1.9.1.5 1.9.1.6 1.9.1.7 1.9.1.8 1.9.1.9 1.9.2.1 1.9.2.2 1.9.2.31.9.2.4 1.9.2.5 1.9.2.6 1.9.2.7 1.9.2.8 1.9.2.9 1.9.3.1 1.9.3.2 1.9.3.3 1.9.3.41.9.3.5 1.9.3.6 1.9.3.7 1.9.3.8 1.9.3.9 1.9.4.1 1.9.4.2 1.9.4.3 1.9.4.4 1.9.4.51.9.4.6 1.9.4.7 1.9.4.8 1.9.4.9 1.9.5.1 1.9.5.2 1.9.5.3 1.9.5.4 1.9.5.5 1.9.5.61.9.5.7 1.9.5.8 1.9.5.9 1.9.6.1 1.9.6.2 1.9.6.3 1.9.6.4 1.9.6.5 1.9.6.6 1.9.6.71.9.6.8 1.9.6.9 1.9.7.1 1.9.7.2 1.9.7.3 1.9.7.4 1.9.7.5 1.9.7.6 1.9.7.7 1.9.7.81.9.7.9 1.9.8.1 1.9.8.2 1.9.8.3 1.9.8.4 1.9.8.5 1.9.8.6 1.9.8.7 1.9.8.8 1.9.8.91.9.9.1 1.9.9.2 1.9.9.3 1.9.9.4 1.9.9.5 1.9.9.6 1.9.9.7 1.9.9.8 1.9.9.9 2.1.1.12.1.1.2 2.1.1.3 2.1.1.4 2.1.1.5 2.1.1.6 2.1.1.7 2.1.1.8 2.1.1.9 2.1.2.1 2.1.2.22.1.2.3 2.1.2.4 2.1.2.5 2.1.2.6 2.1.2.7 2.1.2.8 2.1.2.9 2.1.3.1 2.1.3.2 2.1.3.32.1.3.4 2.1.3.5 2.1.3.6 2.1.3.7 2.1.3.8 2.1.3.9 2.1.4.1 2.1.4.2 2.1.4.3 2.1.4.42.1.4.5 2.1.4.6 2.1.4.7 2.1.4.8 2.1.4.9 2.1.5.1 2.1.5.2 2.1.5.3 2.1.5.4 2.1.5.52.1.5.6 2.1.5.7 2.1.5.8 2.1.5.9 2.1.6.1 2.1.6.2 2.1.6.3 2.1.6.4 2.1.6.5 2.1.6.62.1.6.7 2.1.6.8 2.1.6.9 2.1.7.1 2.1.7.2 2.1.7.3 2.1.7.4 2.1.7.5 2.1.7.6 2.1.7.72.1.7.8 2.1.7.9 2.1.8.1 2.1.8.2 2.1.8.3 2.1.8.4 2.1.8.5 2.1.8.6 2.1.8.7 2.1.8.82.1.8.9 2.1.9.1 2.1.9.2 2.1.9.3 2.1.9.4 2.1.9.5 2.1.9.6 2.1.9.7 2.1.9.8 2.1.9.92.2.1.1 2.2.1.2 2.2.1.3 2.2.1.4 2.2.1.5 2.2.1.6 2.2.1.7 2.2.1.8 2.2.1.9 2.2.2.12.2.2.2 2.2.2.3 2.2.2.4 2.2.2.5 2.2.2.6 2.2.2.7 2.2.2.8 2.2.2.9 2.2.3.1 2.2.3.22.2.3.3 2.2.3.4 2.2.3.5 2.2.3.6 2.2.3.7 2.2.3.8 2.2.3.9 2.2.4.1 2.2.4.2 2.2.4.32.2.4.4 2.2.4.5 2.2.4.6 2.2.4.7 2.2.4.8 2.2.4.9 2.2.5.1 2.2.5.2 2.2.5.3 2.2.5.42.2.5.5 2.2.5.6 2.2.5.7 2.2.5.8 2.2.5.9 2.2.6.1 2.2.6.2 2.2.6.3 2.2.6.4 2.2.6.52.2.6.6 2.2.6.7 2.2.6.8 2.2.6.9 2.2.7.1 2.2.7.2 2.2.7.3 2.2.7.4 2.2.7.5 2.2.7.62.2.7.7 2.2.7.8 2.2.7.9 2.2.8.1 2.2.8.2 2.2.8.3 2.2.8.4 2.2.8.5 2.2.8.6 2.2.8.72.2.8.8 2.2.8.9 2.2.9.1 2.2.9.2 2.2.9.3 2.2.9.4 2.2.9.5 2.2.9.6 2.2.9.7 2.2.9.82.2.9.9 2.3.1.1 2.3.1.2 2.3.1.3 2.3.1.4 2.3.1.5 2.3.1.6 2.3.1.7 2.3.1.8 2.3.1.92.3.2.1 2.3.2.2 2.3.2.3 2.3.2.4 2.3.2.5 2.3.2.6 2.3.2.7 2.3.2.8 2.3.2.9 2.3.3.12.3.3.2 2.3.3.3 2.3.3.4 2.3.3.5 2.3.3.6 2.3.3.7 2.3.3.8 2.3.3.9 2.3.4.1 2.3.4.22.3.4.3 2.3.4.4 2.3.4.5 2.3.4.6 2.3.4.7 2.3.4.8 2.3.4.9 2.3.5.1 2.3.5.2 2.3.5.32.3.5.4 2.3.5.5 2.3.5.6 2.3.5.7 2.3.5.8 2.3.5.9 2.3.6.1 2.3.6.2 2.3.6.3 2.3.6.42.3.6.5 2.3.6.6 2.3.6.7 2.3.6.8 2.3.6.9 2.3.7.1 2.3.7.2 2.3.7.3 2.3.7.4 2.3.7.52.3.7.6 2.3.7.7 2.3.7.8 2.3.7.9 2.3.8.1 2.3.8.2 2.3.8.3 2.3.8.4 2.3.8.5 2.3.8.62.3.8.7 2.3.8.8 2.3.8.9 2.3.9.1 2.3.9.2 2.3.9.3 2.3.9.4 2.3.9.5 2.3.9.6 2.3.9.72.3.9.8 2.3.9.9 2.4.1.1 2.4.1.2 2.4.1.3 2.4.1.4 2.4.1.5 2.4.1.6 2.4.1.7 2.4.1.82.4.1.9 2.4.2.1 2.4.2.2 2.4.2.3 2.4.2.4 2.4.2.5 2.4.2.6 2.4.2.7 2.4.2.8 2.4.2.92.4.3.1 2.4.3.2 2.4.3.3 2.4.3.4 2.4.3.5 2.4.3.6 2.4.3.7 2.4.3.8 2.4.3.9 2.4.4.12.4.4.2 2.4.4.3 2.4.4.4 2.4.4.5 2.4.4.6 2.4.4.7 2.4.4.8 2.4.4.9 2.4.5.1 2.4.5.22.4.5.3 2.4.5.4 2.4.5.5 2.4.5.6 2.4.5.7 2.4.5.8 2.4.5.9 2.4.6.1 2.4.6.2 2.4.6.32.4.6.4 2.4.6.5 2.4.6.6 2.4.6.7 2.4.6.8 2.4.6.9 2.4.7.1 2.4.7.2 2.4.7.3 2.4.7.4
表1續(xù)2.4.7.5 2.4.7.6 2.4.7.7 2.4.7.8 2.4.7.9 2.4.8.1 2.4.8.2 2.4.8.3 2.4.8.4 2.4.8 52.4.8.6 2.4.8.7 2.4.8.8 2.4.8.9 2.4.9.1 2.4.9.2 2.4.9.3 2.4.9.4 2.4.9.5 2.4.9.62.4.9.7 2.4.9.8 2.4.9.9 2.5.1.1 2.5.1.2 2.5.1.3 2.5.1.4 2.5.1.5 2.5.1.6 2.5.1.72.5.1.8 2.5.1.9 2.5.2.1 2.5.2.2 2.5.2.3 2.5.2.4 2.5.2.5 2.5.2.6 2.5.2.7 2.5.2.82.5.2.9 2.5.3.1 2.5.3.2 2.5.3.3 2.5.3.4 2.5.3.5 2.5.3.6 2.5.3.7 2.5.3.8 2.5.3.92.5.4.1 2.5.4.2 2.5.4.3 2.5.4.4 2.5.4.5 2.5.4.6 2.5.4.7 2.5.4.8 2.5.4.9 2.5.5.12.5.5.2 2.5.5.3 2.5.5.4 2.5.5.5 2.5.5.6 2.5.5.7 2.5.5.8 2.5.5.9 2.5.6.1 2.5.6.22.5.6.3 2.5.6.4 2.5.6.5 2.5.6.6 2.5.6.7 2.5.6.8 2.5.6.9 2.5.7.1 2.5.7.2 2.5.7.32.5.7.4 2.5.7.5 2.5.7.6 2.5.7.7 2.5.7.8 2.5.7.9 2.5.8.1 2.5.8.2 2.5.8.3 2.5.8.42.5.8.5 2.5.8.6 2.5.8.7 2.5.8.8 2.5.8.9 2.5.9.1 2.5.9.2 2.5.9.3 2.5.9.4 2.5.9.52.5.9.6 2.5.9.7 2.5.9.8 2.5.9.9 2.6.1.1 2.6.1.2 2.6.1.3 2.6.1.4 2.6.1.5 2.6.1.62.6.1.7 2.6.1.8 2.6.1.9 2.6.2.1 2.6.2.2 2.6.2.3 2.6.2.4 2.6.2.5 2.6.2.6 2.6.2.72.6.2.8 2.6.2.9 2.6.3.1 2.6.3.2 2.6.3.3 2.6.3.4 2.6.3.5 2.6.3.6 2.6.3.7 2.6.3.82.6.3.9 2.6.4.1 2.6.4.2 2.6.4.3 2.6.4.4 2.6.4.5 2.6.4.6 2.6.4.7 2.6.4.8 2.6.4.92.6.5.1 2.6.5.2 2.6.5.3 2.6.5.4 2.6.5.5 2.6.5.6 2.6.5.7 2.6.5.8 2.6.5.9 2.6.6.12.6.6.2 2.6.6.3 2.6.6.4 2.6.6.5 2.6.6.6 2.6.6.7 2.6.6.8 2.6.6.9 2.6.7.1 2.6.7.22.6.7.3 2.6.7.4 2.6.7.5 2.6.7.6 2.6.7.7 2.6.7.8 2.6.7.9 2.6.8.1 2.6.8.2 2.6.8.32.6.8.4 2.6.8.5 2.6.8.6 2.6.8.7 2.6.8.8 2.6.8.9 2.6.9.1 2.6.9.2 2.6.9.3 2.6.9.42.6.9.5 2.6.9.6 2.6.9.7 2.6.9.8 2.6.9.9 2.7.1.1 2.7.1.2 2.7.1.3 2.7.1.4 2.7.1.52.7.1.6 2.7.1.7 2.7.1.8 2.7.1.9 2.7.2.1 2.7.2.2 2.7.2.3 2.7.2.4 2.7.2.5 2.7.2.62.7.2.7 2.7.2.8 2.7.2.9 2.7.3.1 2.7.3.2 2.7.3.3 2.7.3.4 2.7.3.5 2.7.3.6 2.7.3.72.7.3.8 2.7.3.9 2.7.4.1 2.7.4.2 2.7.4.3 2.7.4.4 2.7.4.5 2.7.4.6 2.7.4.7 2.7.4.82.7.4.9 2.7.5.1 2.7.5.2 2.7.5.3 2.7.5.4 2.7.5.5 2.7.5.6 2.7.5.7 2.7.5.8 2.7.5.92.7.6.1 2.7.6.2 2.7.6.3 2.7.6.4 2.7.6.5 2.7.6.6 2.7.6.7 2.7.6.8 2.7.6.9 2.7.7.12.7.7.2 2.7.7.3 2.7.7.4 2.7.7.5 2.7.7.6 2.7.7.7 2.7.7.8 2.7.7.9 2.7.8.1 2.7.8.22.7.8.3 2.7.8.4 2.7.8.5 2.7.8.6 2.7.8.7 2.7.8.8 2.7.8.9 2.7.9.1 2.7.9.2 2.7.9.32.7.9.4 2.7.9.5 2.7.9.6 2.7.9.7 2.7.9.8 2.7.9.9 2.8.1.1 2.8.1.2 2.8.1.3 2.8.1.42.8.1.5 2.8.1.6 2.8.1.7 2.8.1.8 2.8.1.9 2.8.2.1 2.8.2.2 2.8.2.3 2.8.2.4 2.8.2.52.8.2.6 2.8.2.7 2.8.2.8 2.8.2.9 2.8.3.1 2.8.3.2 2.8.3.3 2.8.3.4 2.8.3.5 2.8.3.62.8.3.7 2.8.3.8 2.8.3.9 2.8.4.1 2.8.4.2 2.8.4.3 2.8.4.4 2.8.4.5 2.8.4.6 2.8.4.72.8.4.8 2.8.4.9 2.8.5.1 2.8.5.2 2.8.5.3 2.8.5.4 2.8.5.5 2.8.5.6 2.8.5.7 2.8.5.82.8.5.9 2.8.6.1 2.8.6.2 2.8.6.3 2.8.6.4 2.8.6.5 2.8.6.6 2.8.6.7 2.8.6.8 2.8.6.92.8.7.1 2.8.7.2 2.8.7.3 2.8.7.4 2.8.7.5 2.8.7.6 2.8.7.7 2.8.7.8 2.8.7.9 2.8.8.12.8.8.2 2.8.8.3 2.8.8.4 2.8.8.5 2.8.8.6 2.8.8.7 2.8.8.8 2.8.8.9 2.8.9.1 2.8.9.22.8.9.3 2.8.9.4 2.8.9.5 2.8.9.6 2.8.9.7 2.8.9.8 2.8.9.9 2.9.1.1 2.9.1.2 2.9.1.32.9.1.4 2.9.1.5 2.9.1.6 2.9.1.7 2.9.1.8 2.9.1.9 2.9.2.1 2.9.2.2 2.9.2.3 2.9.2.42.9.2.5 2.9.2.6 2.9.2.7 2.9.2.8 2.9.2.9 2.9.3.1 2.9.3.2 2.9.3.3 2.9.3.4 2.9.3.52.9.3.6 2.9.3.7 2.9.3.8 2.9.3.9 2.9.4.1 2.9.4.2 2.9.4.3 2.9.4.4 2.9.4.5 2.9.4.62.9.4.7 2.9.4.8 2.9.4.9 2.9.5.1 2.9.5.2 2.9.5.3 2.9.5.4 2.9.5.5 2.9.5.6 2.9.5.72.9.5.8 2.9.5.9 2.9.6.1 2.9.6.2 2.9.6.3 2.9.6.4 2.9.6.5 2.9.6.6 2.9.6.7 2.9.6.82.9.6.9 2.9.9.1 2.9.7.2 2.9.7.3 2.9.7.4 2.9.7.5 2.9.7.6 2.9.7.7 2.9.7.8 2.9.7.92.9.8.1 2.9.8.2 2.9.8.3 2.9.8.4 2.9.8.5 2.9.8.6 2.9.8.7 2.9.8.8 2.9.8.9 2.9.9.12.9.9.2 2.9.9.3 2.9.9.4 2.9.9.5 2.9.9.6 2.9.9.7 2.9.9.8 2.9.9.9 3.1.1.1 3.1.1.23.1.1.3 3.1.1.4 3.1.1.5 3.1.1.6 3.1.1.7 3.1.1.8 3.1.1.9 3.1.2.1 3.1.2.2 3.1.2.33.1.2.4 3.1.2.5 3.1.2.6 3.1.2.7 3.1.2.8 3.1.2.9 3.1.3.1 3.1.3.2 3.1.3.3 3.1.3.43.1.3.5 3.1.3.6 3.1.3.7 3.1.3.8 3.1.3.9 3.1.4.1 3.1.4.2 3.1.4.3 3.1.4.4 3.1.4.53.1.4.6 3.1.4.7 3.1.4.8 3.1.4.9 3.1.5.1 3.1.5.2 3.1.5.3 3.1.5.4 3.1.5.5 3.1.5.63.1.5.7 3.1.5.8 3.1.5.9 3.1.6.1 3.1.6.2 3.1.6.3 3.1.6.4 3.1.6.5 3.1.6.6 3.1.6.73.1.6.8 3.1.6.9 3.1.7.1 3.1.7.2 3.1.7.3 3.1.7.4 3.1.7.5 3.1.7.6 3.1.7.7 3.1.7.83.1.7.9 3.1.8.1 3.1.8.2 3.1.8.3 3.1.8.4 3.1.8.5 3.1.8.6 3.1.8.7 3.1.8.8 3.1.8.93.1.9.1 3.1.9.2 3.1.9.3 3.1.9.4 3.1.9.5 3.1.9.6 3.1.9.7 3.1.9.8 3.1.9.9 3.2.1.13.2.1.2 3.2.1.3 3.2.1.4 3.2.1.5 3.2.1.6 3.2.1.7 3.2.1.8 3.2.1.9 3.2.2.1 3.2.2.2
表1續(xù)3.2.2.3 3.2.2.4 3.2.2.5 3.2.2.6 3.2.2.7 3.2.2.8 3.2.2.9 3.2.3.1 3.2.3.2 3.2.3.33.2.3.4 3.2.3.5 3.2.3.6 3.2.3.7 3.2.3.8 3.2.3.9 3.2.4.1 3.2.4.2 3.2.4.3 3.2.4.43.2.4.5 3.2.4.6 3.2.4.7 3.2.4.8 3.2.4.9 3.2.5.1 3.2.5.2 3.2.5.3 3.2.5.4 3.2.5.53.2.5.6 3.2.5.7 3.2.5.8 3.2.5.9 3.2.6.1 3.2.6.2 3.2.6.3 3.2.6.4 3.2.6.5 3.2.6.63.2.6.7 3.2.6.8 3.2.6.9 3.2.7.1 3.2.7.2 3.2.7.3 3.2.7.4 3.2.7.5 3.2.7.6 3.2.7.73.2.7.8 3.2.7.9 3.2.8.1 3.2.8.2 3.2.8.3 3.2.8.4 3.2.8.5 3.2.8.6 3.2.8.7 3.2.8.83.2.8.9 3.2.9.1 3.2.9.2 3.2.9.3 3.2.9.4 3.2.9.5 3.2.9.6 3.2.9.7 3.2.9.8 3.2.9.93.3.1.1 3.3.1.2 3.3.1.3 3.3.1.4 3.3.1.5 3.3.1.6 3.3.1.7 3.3.1.8 3.3.1.9 3.3.2.13.3.2.2 3.3.2.3 3.3.2.4 3.3.2.5 3.3.2.6 3.3.2.7 3.3.2.8 3.3.2.9 3.3.3.1 3.3.3.23.3.3.3 3.3.3.4 3.3.3.5 3.3.3.6 3.3.3.7 3.3.3.8 3.3.3.9 3.3.4.1 3.3.4.2 3.3.4.33.3.4.4 3.3.4.5 3.3.4.6 3.3.4.7 3.3.4.8 3.3.4.9 3.3.5.1 3.3.5.2 3.3.5.3 3.3.5.43.3.5.5 3.3.5.6 3.3.5.7 3.3.5.8 3.3.5.9 3.3.6.1 3.3.6.2 3.3.6.3 3.3.6.4 3.3.6.53.3.6.6 3.3.6.7 3.3.6.8 3.3.6.9 3.3.7.1 3.3.7.2 3.3.7.3 3.3.7.4 3.3.7.5 3.3.7.63.3.7.7 3.3.7.8 3.3.7.9 3.3.8.1 3.3.8.2 3.3.8.3 3.3.8.4 3.3.8.5 3.3.8.6 3.3.8.73.3.8.8 3.3.8.9 3.3.9.1 3.3.9.2 3.3.9.3 3.3.9.4 3.3.9.5 3.3.9.6 3.3.9.7 3.3.9.83.3.9.9 3.4.1.1 3.4.1.2 3.4.1.3 3.4.1.4 3.4.1.5 3.4.1.6 3.4.1.7 3.4.1.8 3.4.1.93.4.2.1 3.4.2.2 3.4.2.3 3.4.2.4 3.4.2.5 3.4.2.6 3.4.2.7 3.4.2.8 3.4.2.9 3.4.3.13.4.3.2 3.4.3.3 3.4.3.4 3.4.3.5 3.4.3.6 3.4.3.7 3.4.3.8 3.4.3.9 3.4.4.1 3.4.4.23.4.4.3 3.4.4.4 3.4.4.5 3.4.4.6 3.4.4.7 3.4.4.8 3.4.4.9 3.4.5.1 3.4.5.2 3.4.5.33.4.5.4 3.4.5.5 3.4.5.6 3.4.5.7 3.4.5.8 3.4.5.9 3.4.6.1 3.4.6.2 3.4.6.3 3.4.6.43.4.6.5 3.4.6.6 3.4.6.7 3.4.6.8 3.4.6.9 3.4.7.1 3.4.7.2 3.4.7.3 3.4.7.4 3.4.7.53.4.7.6 3.4.7.7 3.4.7.8 3.4.7.9 3.4.8.1 3.4.8.2 3.4.8.3 3.4.8.4 3.4.8.5 3.4.8.63.4.8.7 3.4.8.8 3.4.8.9 3.4.9.1 3.4.9.2 3.4.9.3 3.4.9.4 3.4.9.5 3.4.9.6 3.4.9.73.4.9.8 3.4.9.9 3.5.1.1 3.5.1.2 3.5.1.3 3.5.1.4 3.5.1.5 3.5.1.6 3.5.1.7 3.5.1.83.5.1.9 3.5.2.1 3.5.2.2 3.5.2.3 3.5.2.4 3.5.2.5 3.5.2.6 3.5.2.7 3.5.2.8 3.5.2.93.5.3.1 3.5.3.2 3.5.3.3 3.5.3.4 3.5.3.5 3.5.3.6 3.5.3.7 3.5.3.8 3.5.3.9 3.5.4.13.5.4.2 3.5.4.3 3.5.4.4 3.5.4.5 3.5.4.6 3.5.4.7 3.5.4.8 3.5.4.9 3.5.5.1 3.5.5.23.5.5.3 3.5.5.4 3.5.5.5 3.5.5.6 3.5.5.7 3.5.5.8 3.5.5.9 3.5.6.1 3.5.6.2 3.5.6.33.5.6.4 3.5.6.5 3.5.6.6 3.5.6.7 3.5.6.8 3.5.6.9 3.5.7.1 3.5.7.2 3.5.7.3 3.5.7.43.5.7.5 3.5.7.6 3.5.7.7 3.5.7.8 3.5.7.9 3.5.8.1 3.5.8.2 3.5.8.3 3.5.8.4 3.5.8.53.5.8.6 3.5.8.7 3.5.8.8 3.5.8.9 3.5.9.1 3.5.9.2 3.5.9.3 3.5.9.4 3.5.9.5 3.5.9.63.5.9.7 3.5.9.8 3.5.9.9 3.6.1.1 3.6.1.2 3.6.1.3 3.6.1.4 3.6.1.5 3.6.1.6 3.6.1.73.6.1.8 3.6.1.9 3.6.2.1 3.6.2.2 3.6.2.3 3.6.2.4 3.6 2.5 3.6.2.6 3.6.2.7 3.6.2.83.6.2.9 3.6.3.1 3.6.3.2 3.6.3.3 3.6.3.4 3.6.3.5 3.6.3.6 3.6.3.7 3.6.3.8 3.6.3.93.6.4.1 3.6.4.2 3.6.4.3 3.6.4.4 3.6.4.5 3.6.4.6 3.6.4.7 3.6.4.8 3.6.4.9 3.6.5.13.6.5.2 3.6.5.3 3.6.5.4 3.6.5.5 3.6.5.6 3.6.5.7 3.6.5.8 3.6.5.9 3.6.6.1 3.6.6.23.6.6.3 3.6.6.4 3.6.6.5 3.6.6.6 3.6.6.7 3.6.6.8 3.6.6.9 3.6.7.1 3.6.7.2 3.6.7.33.6.7.4 3.6.7.5 3.6.7.6 3.6.7.7 3.6.7.8 3.6.7.9 3.6.8.1 3.6.8.2 3.6.8.3 3.6.8.43.6.8.5 3.6.8.6 3.6.8.7 3.6.8.8 3.6.8.9 3.6.9.1 3.6.9.2 3.6.9.3 3.6.9.4 3.6.9.53.6.9.6 3.6.9.7 3.6.9.8 3.6.9.9 3.7.1.1 3.7.1.2 3.7.1.3 3.7.1.4 3.7.1.5 3.7.1.63.7.1.7 3.7.1.8 3.7.1.9 3.7.2.1 3.7.2.2 3.7.2.3 3.7.2.4 3.7.2.5 3.7.2.6 3.7.2.73.7.3.8 3.7.2.9 3.7.3.1 3.7.3.2 3.7.3.3 3.7.3.4 3.7.3.5 3.7.3.6 3.7.3.7 3.7.3.83.7.3.9 3.7.4.1 3.7.4.2 3.7.4.3 3.7.4.4 3.7.4.5 3.7.4.6 3.7.4.7 3.7.4.8 3.7.4.93.7.5.1 3.7.5.2 3.7.5.3 3.7.5.4 3.7.5.5 3.7.5.6 3.7.5.7 3.7.5.8 3.7.5.9 3.7.6.13.7.6.2 3.7.6.3 3.7.6.4 3.7.6.5 3.7.6.6 3.7.6.7 3.7.6.8 3.7.6.9 3.7.7.1 3.7.7.23.7.7.3 3.7.7.4 3.7.7.5 3.7.7.6 3.7.7.7 3.7.7.8 3.7.7.9 3.7.8.1 3.7.8.2 3.7.8.33.7.8.4 3.7.8.5 3.7.8.6 3.7.8.7 3.7.8.8 3.7.8.9 3.7.9.1 3.7.9.2 3.7.9.3 3.7.9.43.7.9.5 3.7.9.6 3.7.9.7 3.7.9.8 3.7.9.9 3.8.1.1 3.8.1.2 3.8.1.3 3.8.1.4 3.8.1.53.8.1.6 3.8.1.7 3.8.1.8 3.8.1.9 3.8.2.1 3.8.2.2 3.8.2.3 3.8.2.4 3.8.2.5 3.8.2.63.8.2.7 3.8.2.8 3.8.2.9 3.8.3.1 3.8.3.2 3.8.3.3 3.8.3.4 3.8.3.5 3.8.3.6 3.8.3.73.8.3.8 3.8.3.9 3.8.4.1 3.8.4.2 3.8.4.3 3.8.4.4 3.8.4.5 3.8.4.6 3.8.4.7 3.8.4.83.8.4.9 3.8.5.1 3.8.5.2 3.8.5.3 3.8.5.4 3.8.5.5 3.8.5.6 3.8.5.7 3.8.5.8 3.8.5.9
表1續(xù)3.8.6.1 3.8.6.2 3.8.6.3 3.8.6.4 3.8.6.5 3.8.6.6 3.8.6.7 3.8.6.8 3.8.6.9 3.8.7.13.8.7.2 3.8.7.3 3.8.7.4 3.8.7.5 3.8.7.6 3.8.7.7 3.8.7.8 3.8.7.9 3.8.8.1 3.8.8.23.8.8.3 3.8.8.4 3.8.8.5 3.8.8.6 3.8.8.7 3.8.8.8 3.8.8.9 3.8.9.1 3.8.9.2 3.8.9.33.8.9.4 3.8.9.5 3.8.9.6 3.8.9.7 3.8.9.8 3.8.9.9 3.9.1.1 3.9.1.2 3.9.1.3 3.9.1.43.9.1.5 3.9.1.6 3.9.1.7 3.9.1.8 3.9.1.9 3.9.2.1 3.9.2.2 3.9.2.3 3.9.2.4 3.9.2.53.9.2.6 3.9.2.7 3.9.2.8 3.9.2.9 3.9.3.1 3.9.3.2 3.9.3.3 3.9.3.4 3.9.3.5 3.9.3.63.9.3.7 3.9.3.8 3.9.3.9 3.9.4.1 3.9.4.2 3.9.4.3 3.9.4.4 3.9.4.5 3.9.4.6 3.9.4.73.9.4.8 3.9.4.9 3.9.5.1 3.9.5.2 3.9.5.3 3.9.5.4 3.9.5.5 3.9.5.6 3.9.5.7 3.9.5.83.9.5.9 3.9.6.1 3.9.6.2 3.9.6.3 3.9.6.4 3.9.6.5 3.9.6.6 3.9.6.7 3.9.6.8 3.9.6.93.9.7.1 3.9.7.2 3.9.7.3 3.9.7.4 3.9.7.5 3.9.7.6 3.9.7.7 3.9.7.8 3.9.7.9 3.9.8.13.9.8.2 3.9.8.3 3.9.8.4 3.9.8.5 3.9.8.6 3.9.8.7 3.9.8.8 3.9.8.9 3.9.9.1 3.9.9.23.9.9.3 3.9.9.4 3.9.9.5 3.9.9.6 3.9.9.7 3.9.9.8 3.9.9.9 4.1.1.1 4.1.1.2 4.1.1.34.1.1.4 4.1.1.5 4.1.1.6 4.1.1.7 4.1.1.8 4.1.1.9 4.1.2.1 4.1.2.2 4.1.2.3 4.1.2.44.1.2.5 4.1.2.6 4.1.2.7 4.1.2.8 4.1.2.9 4.1.3.1 4.1.3.2 4.1.3.3 4.1.3.4 4.1.3.54.1.3.6 4.1.3.7 4.1.3.8 4.1.3.9 4.1.4.1 4.1.4.2 4.1.4.3 4.1.4.4 4.1.4.5 4.1.4.64.1.4.7 4.1.4.8 4.1.4.9 4.1.5.1 4.1.5.2 4.1.5.3 4.1.5.4 4.1.5.5 4.1.5.6 4.1.5.74.1.5.8 4.1.5.9 4.1.6.1 4.1.6.2 4.1.6.3 4.1.6.4 4.1.6.5 4.1.6.6 4.1.6.7 4.1.6.84.1.6.9 4.1.7.1 4.1.7.2 4.1.7.3 4.1.7.4 4.1.7.5 4.1.7.6 4.1.7.7 4.1.7.8 4.1.7.94.1.8.1 4.1.8.2 4.1.8.3 4.1.8.4 4.1.8.5 4.1.8.6 4.1.8.7 4.1.8.8 4.1.8.9 4.1.9.14.1.9.2 4.1.9.3 4.1.9.4 4.1.9.5 4.1.9.6 4.1.9.7 4.1.9.8 4.1.9.9 4.2.1.1 4.2.1.24.2.1.3 4.2.1.4 4.2.1.5 4.2.1.6 4.2.1.7 4.2.1.8 4.2.1.9 4.2.2.1 4.2.2.2 4.2.2.34.2.2.4 4.2.2.5 4.2.2.6 4.2.2.7 4.2.2.8 4.2.2.9 4.2.3.1 4.2.3.2 4.2.3.3 4.2.3.44.2.3.5 4.2.3.6 4.2.3.7 4.2.3.8 4.2.3.9 4.2.4.1 4.2.4.2 4.2.4.3 4.2.4.4 4.2.4.54.2.4.6 4.2.4.7 4.2.4.8 4.2.4.9 4.2.5.1 4.2.5.2 4.2.5.3 4.2.5.4 4.2.5.5 4.2.5.64.2.5.7 4.2.5.8 4.2.5.9 4.2.6.1 4.2.6.2 4.2.6.3 4.2.6.4 4.2.6.5 4.2.6.6 4.2.6.74.2.6.8 4.2.6.9 4.2.7.1 4.2.7.2 4.2.7.3 4.2.7.4 4.2.7.5 4.2.7.6 4.2.7.7 4.2.7.84.2.7.9 4.2.8.1 4.2.8.2 4.2.8.3 4.2.8.4 4.2.8.5 4.2.8.6 4.2.8.7 4.2.8.8 4.2.8.94.2.9.1 4.2.9.2 4.2.9.3 4.2.9.4 4.2.9.5 4.2.9.6 4.2.9.7 4.2.9.8 4.2.9.9 4.3.1.14.3.1.2 4.3.1.3 4.3.1.4 4.3.1.5 4.3.1.6 4.3.1.7 4.3.1.8 4.3.1.9 4.3.2.1 4.3.2.24.3.2.3 4.3.2.4 4.3.2.5 4.3.2.6 4.3.2.7 4.3.2.8 4.3.2.9 4.3.3.1 4.3.3.2 4.3.3.34.3.3.4 4.3.3.5 4.3.3.6 4.3.3.7 4.3.3.8 4.3.3.9 4.3.4.1 4.3.4.2 4.3.4.3 4.3.4.44.3.4.5 4.3.4.6 4.3.4.7 4.3.4.8 4.3.4.9 4.3.5.1 4.3.5.2 4.3.5.3 4.3.5.4 4.3.5.54.3.5.6 4.3.5.7 4.3.5.8 4.3.5.9 4.3.6.1 4.3.6.2 4.3.6.3 4.3.6.4 4.3.6.5 4.3.6.64.3.6.7 4.3.6.8 4.3.6.9 4.3.7.1 4.3.7.2 4.3.7.3 4.3.7.4 4.3.7.5 4.3.7.6 4.3.7.74.3.7.8 4.3.7.9 4.3.8.1 4.3.8.2 4.3.8.3 4.3.8.4 4.3.8.5 4.3.8.6 4.3.8.7 4.3.8.84.3.8.9 4.3.9.1 4.3.9.2 4.3.9.3 4.3.9.4 4.3.9.5 4.3.9.6 4.3.9.7 4.3.9.8 4.3.9.94.4.1.1 4.4.1.2 4.4.1.3 4.4.1.4 4.4.1.5 4.4.1.6 4.4.1.7 4.4.1.8 4.4.1.9 4.4.2.14.4.2.2 4.4.2.3 4.4.2.4 4.4.2.5 4.4.2.6 4.4.2.7 4.4.2.8 4.4.2.9 4.4.3.1 4.4.3.24.4.3.3 4.4.3.4 4.4.3.5 4.4.3.6 4.4.3.7 4.4.3.8 4.4.3.9 4.4.4.1 4.4.4.2 4.4.4.34.4.4.4 4.4.4.5 4.4.4.6 4.4.4.7 4.4.4.8 4.4.4.9 4.4.5.1 4.4.5.2 4.4.5.3 4.4.5.44.4.5.5 4.4.5.6 4.4.5.7 4.4.5.8 4.4.5.9 4.4.6.1 4.4.6.2 4.4.6.3 4.4.6.4 4.4.6.54.4.6.6 4.4.6.7 4.4.6.8 4.4.6.9 4.4.7.1 4.4.7.2 4.4.7.3 4.4.7.4 4.4.7.5 4.4.7.64.4.7.7 4.4.7.8 4.4.7.9 4.4.8.1 4.4.8.2 4.4.8.3 4.4.8.4 4.4.8.5 4.4.8.6 4.4.8.74.4.8.8 4.4.8.9 4.4.9.1 4.4.9.2 4.4.9.3 4.4.9.4 4.4.9.5 4.4.9.6 4.4.9.7 4.4.9.84.4.9.9 4.5.1.1 4.5.1.2 4.5.1.3 4.5.1.4 4.5.1.5 4.5.1.6 4.5.1.7 4.5.1.8 4.5.1.94.5.2.1 4.5.2.2 4.5.2.3 4.5.2.4 4.5.2.5 4.5.2.6 4.5.2.7 4.5.2.8 4.5.2.9 4.5.3.14.5.3.2 4.5.3.3 4.5.3.4 4.5.3.5 4.5.3.6 4.5.3.7 4.5.3.8 4.5.3.9 4.5.4.1 4.5.4.24.5.4.3 4.5.4.4 4.5.4.5 4.5.4.6 4.5.4.7 4.5.4.8 4.5.4.9 4.5.5.1 4.5.5.2 4.5.5.34.5.5.4 4.5.5.5 4.5.5.6 4.5.5.7 4.5.5.8 4.5.5.9 4.5.6.1 4.5.6.2 4.5.6.3 4.5.6.44.5.6.5 4.5.6.6 4.5.6.7 4.5.6.8 4.5.6.9 4.5.7.1 4.5.7.2 4.5.7.3 4.5.7.4 4.5.7.54.5.7.6 4.5.7.7 4.5.7.8 4.5.7.9 4.5.8.1 4.5.8.2 4.5.8.3 4.5.8.4 4.5.8.5 4.5.8.64.5.8.7 4.5.8.8 4.5.8.9 4.5.9.1 4.5.9.2 4.5.9.3 4.5.9.4 4.5.9.5 4.5.9.6 4.5.9.7
表1續(xù)4.5.9.8 4.5.9.9 4.6.1.1 4.6.1.2 4.6.1.3 4.6.1.4 4.6.1.5 4.6.1.6 4.6.1.7 4.6.1.84.6.1.9 4.6.2.1 4.6.2.2 4.6.2.3 4.6.2.4 4.6.2.5 4.6.2.6 4.6.2.7 4.6.2.8 4.6.2.94.6.3.1 4.6.3.2 4.6.3.3 4.6.3.4 4.6.3.5 4.6.3.6 4.6.3.7 4.6.3.8 4.6.3.9 4.6.4.14.6.4.2 4.6.4.3 4.6.4.4 4.6.4.5 4.6.4.6 4.6.4.7 4.6.4.8 4.6.4.9 4.6.5.1 4.6.5.24.6.5.3 4.6.5.4 4.6.5.5 4.6.5.6 4.6.5.7 4.6.5.8 4.6.5.9 4.6.6.1 4.6.6.2 4.6.6.34.6.6.4 4.6.6.5 4.6.6.6 4.6.6.7 4.6.6.8 4.6.6.9 4.6.7.1 4.6.7.2 4.6.7.3 4.6.7.44.6.7.5 4.6.7.6 4.6.7.7 4.6.7.8 4.6.7.9 4.6.8.1 4.6.8.2 4.6.8.3 4.6.8.4 4.6.8.54.6.8.6 4.6.8.7 4.6.8.8 4.6.8.9 4.6.9.1 4.6.9.2 4.6.9.3 4.6.9.4 4.6.9.5 4.6.9.64.6.9.7 4.6.9.8 4.6.9.9 4.7.1.1 4.7.1.2 4.7.1.3 4.7.1.4 4.7.1.5 4.7.1.6 4.7.1.74.7.1.8 4.7.1.9 4.7.2.1 4.7.2.2 4.7.2.3 4.7.2.4 4.7.2.5 4.7.2.6 4.7.2.7 4.7.2.84.7.2.9 4.7.3.1 4.7.3.2 4.7.3.3 4.7.3.4 4.7.3.5 4.7.3.6 4.7.3.7 4.7.3.8 4.7.3.94.7.4.1 4.7.4.2 4.7.4.3 4.7.4.4 4.7.4.5 4.7.4.6 4.7.4.7 4.7.4.8 4.7.4.9 4.7.5.14.7.5.2 4.7.5.3 4.7.5.4 4.7.5.5 4.7.5.6 4.7.5.7 4.7.5.8 4.7.5.9 4.7.6.1 4.7.6.24.7.6.3 4.7.6.4 4.7.6.5 4.7.6.6 4.7.6.7 4.7.6.8 4.7.6.9 4.7.7.1 4.7.7.2 4.7.7.34.7.7.4 4.7.7.5 4.7.7.6 4.7.7.7 4.7.7.8 4.7.7.9 4.7.8.1 4.7.8.2 4.7.8.3 4.7.8.44.7.8.5 4.7.8.6 4.7.8.7 4.7.8.8 4.7.8.9 4.7.9.1 4.7.9.2 4.7.9.3 4.7.9.4 4.7.9.54.7.9.6 4.7.9.7 4.7.9.8 4.7.9.9 4.8.1.1 4.8.1.2 4.8.1.3 4.8.1.4 4.8.1.5 4.8.1.64.8.1.7 4.8.1.8 4.8.1.9 4.8.2.1 4.8.2.2 4.8.2.3 4.8.2.4 4.8.2.5 4.8.2.6 4.8.2.74.8.2.8 4.8.2.9 4.8.3.1 4.8.3.2 4.8.3.3 4.8.3.4 4.8.3.5 4.8.3.6 4.8.3.7 4.8.3.84.8.3.9 4.8.4.1 4.8.4.2 4.8.4.3 4.8.4.4 4.8.4.5 4.8.4.6 4.8.4.7 4.8.4.8 4.8.4.94.8.5.1 4.8.5.2 4.8.5.3 4.8.5.4 4.8.5.5 4.8.5.6 4.8.5.7 4.8.5.8 4.8.5.9 4.8.6.14.8.6.2 4.8.6.3 4.8.6.4 4.8.6.5 4.8.6.6 4.8.6.7 4.8.6.8 4.8.6.9 4.8.7.1 4.8.7.24.8.7.3 4.8.7.4 4.8.7.5 4.8.7.6 4.8.7.7 4.8.7.8 4.8.7.9 4.8.8.1 4.8.8.2 4.8.8.34.8.8.4 4.8.8.5 4.8.8.6 4.8.8.7 4.8.8.8 4.8.8.9 4.8.9.1 4.8.9.2 4.8.9.3 4.8.9.44.8.9.5 4.8.9.6 4.8.9.7 4.8.9.8 4.8.9.9 4.9.1.1 4.9.1.2 4.9.1.3 4.9.1.4 4.9.1.54.9.1.6 4.9.1.7 4.9.1.8 4.9.1.9 4.9.2.1 4.9.2.2 4.9.2.3 4.9.2.4 4.9.2.5 4.9.2.64.9.2.7 4.9.2.8 4.9.2.9 4.9.3.1 4.9.3.2 4.9.3.3 4.9.3.4 4.9.3.5 4.9.3.6 4.9.3.74.9.3.8 4.9.3.9 4.9.4.1 4.9.4.2 4.9.4.3 4.9.4.4 4.9.4.5 4.9.4.6 4.9.4.7 4.9.4.84.9.4.9 4.9.5.1 4.9.5.2 4.9.5.3 4.9.5.4 4.9.5.5 4.9.5.6 4.9.5.7 4.9.5.8 4.9.5.94.9.6.1 4.9.6.2 4.9.6.3 4.9.6.4 4.9.6.5 4.9.6.6 4.9.6.7 4.9.6.8 4.9.6.9 4.9.7.14.9.7.2 4.9.7.3 4.9.7.4 4.9.7.5 4.9.7.6 4.9.7.7 4.9.7.8 4.9.7.9 4.9.8.1 4.9.8.24.9.8.3 4.9.8.4 4.9.8.5 4.9.8.6 4.9.8.7 4.9.8.8 4.9.8.9 4.9.9.1 4.9.9.2 4.9.9.34.9.9.4 4.9.9.5 4.9.9.6 4.9.9.7 4.9.9.8 4.9.9.9 5.1.1.1 5.1.1.2 5.1.1.3 5.1.1.45.1.1.5 5.1.1.6 5.1.1.7 5.1.1.8 5.1.1.9 5.1.2.1 5.1.2.2 5.1.2.3 5.1.2.4 5.1.2.55.1.2.6 5.1.2.7 5.1.2.8 5.1.2.9 5.1.3.1 5.1.3.2 5.1.3.3 5.1.3.4 5.1.3.5 5.1.3.65.1.3.7 5.1.3.8 5.1.3.9 5.1.4.1 5.1.4.2 5.1.4.3 5.1.4.4 5.1.4.5 5.1.4.6 5.1.4.75.1.4.8 5.1.4.9 5.1.5.1 5.1.5.2 5.1.5.3 5.1.5.4 5.1.5.5 5.1.5.6 5.1.5.7 5.1.5.85.1.5.9 5.1.6.1 5.1.6.2 5.1.6.3 5.1.6.4 5.1.6.5 5.1.6.6 5.1.6.7 5.1.6.8 5.1.6.95.1.7.1 5.1.7.2 5.1.7.3 5.1.7.4 5.1.7.5 5.1.7.6 5.1.7.7 5.1.7.8 5.1.7.9 5.1.8.15.1.8.2 5.1.8.3 5.1.8.4 5.1.8.5 5.1.8.6 5.1.8.7 5.1.8.8 5.1.8.9 5.1.9.1 5.1.9.25.1.9.3 5.1.9.4 5.1.9.5 5.1.9.6 5.1.9.7 5.1.9.8 5.1.9.9 5.2.1.1 5.2.1.2 5.2.1.35.2.1.4 5.2.1.5 5.2.1.6 5.2.1.7 5.2.1.8 5.2.1.9 5.2.2.1 5.2.2.2 5.2.2.3 5.2.2.45.2.2.5 5.2.2.6 5.2.2.7 5.2.2.8 5.2.2.9 5.2.3.1 5.2.3.2 5.2.3.3 5.2.3.4 5.2.3.55.2.3.6 5.2.3.7 5.2.3.8 5.2.3.9 5.2.4.1 5.2.4.2 5.2.4.3 5.2.4.4 5.2.4.5 5.2.4.65.2.4.7 5.2.4.8 5.2.4.9 5.2.5.1 5.2.5.2 5.2.5.3 5.2.5.4 5.2.5.5 5.2.5.6 5.2.5.75.2.5.8 5.2.5.9 5.2.6.1 5.2.6.2 5.2.6.3 5.2.6.4 5.2.6.5 5.2.6.6 5.2.6.7 5.2.6.85.2.6.9 5.2.7.1 5.2.7.2 5.2.7.3 5.2.7.4 5.2.7.5 5.2.7.6 5.2.7.7 5.2.7.8 5.2.7.95.2.8.1 5.2.8.2 5.2.8.3 5.2.8.4 5.2.8.5 5.2.8.6 5.2.8.7 5.2.8.8 5.2.8.9 5.2.9.15.2.9.2 5.2.9.3 5.2.9.4 5.2.9.5 5.2.9.6 5.2.9.7 5.2.9.8 5.2.9.9 5.3.1.1 5.3.1.25.3.1.3 5.3.1.4 5.3.1.5 5.3.1.6 5.3.1.7 5.3.1.8 5.3.1.9 5.3.2.1 5.3.2.2 5.3.2.35.3.2.4 5.3.2.5 5.3.2.6 5.3.2.7 5.3.2.8 5.3.2.9 5.3.3.1 5.3.3.2 5.3.3.3 5.3.3.45.3.3.5 5.3.3.6 5.3.3.7 5.3.3.8 5.3.3.9 5.3.4.1 5.3.4.2 5.3.4.3 5.3.4.4 5.3.4.5
表1續(xù)5.3.4.6 5.3.4.7 5.3.4.8 5.3.4.9 5.3.5.1 5.3.5.2 5.3.5.3 5.3.5.4 5.3.5.5 5.3.5.65.3.5.7 5.3.5.8 5.3.5.9 5.3.6.1 5.3.6.2 5.3.6.3 5.3.6.4 5.3.6.5 5.3.6.6 5.3.6.75.3.6.8 5.3.6.9 5.3.7.1 5.3.7.2 5.3.7.3 5.3.7.4 5.3.7.5 5.3.7.6 5.3.7.7 5.3.7.85.3.7.9 5.3.8.1 5.3.8.2 5.3.8.3 5.3.8.4 5.3.8.5 5.3.8.6 5.3.8.7 5.3.8.8 5.3.8.95.3.9.1 5.3.9.2 5.3.9.3 5.3.9.4 5.3.9.5 5.3.9.6 5.3.9.7 5.3.9.8 5.3.9.9 5.4.1.15.4.1.2 5.4.1.3 5.4.1.4 5.4.1.5 5.4.1.6 5.4.1.7 5.4.1.8 5.4.1.9 5.4.2.1 5.4.2.25.4.2.3 5.4.2.4 5.4.2.5 5.4.2.6 5.4.2.7 5.4.2.8 5.4.2.9 5.4.3.1 5.4.3.2 5.4.3.35.4.3.4 5.4.3.5 5.4.3.6 5.4.3.7 5.4.3.8 5.4.3.9 5.4.4.1 5.4.4.2 5.4.4.3 5.4.4.45.4.4.5 5.4.4.6 5.4.4.7 5.4.4.8 5.4.4.9 5.4.5.1 5.4.5.2 5.4.5.3 5.4.5.4 5.4.5.55.4.5.6 5.4.5.7 5.4.5.8 5.4.5.9 5.4.6.1 5.4.6.2 5.4.6.3 5.4.6.4 5.4.6.5 5.4.6.65.4.6.7 5.4.6.8 5.4.6.9 5.4.7.1 5.4.7.2 5.4.7.3 5.4.7.4 5.4.7.5 5.4.7.6 5.4.7.75.4.7.8 5.4.7.9 5.4.8.1 5.4.8.2 5.4.8.3 5.4.8.4 5.4.8.5 5.4.8.6 5.4.8.7 5.4.8.85.4.8.9 5.4.9.1 5.4.9.2 5.4.9.3 5.4.9.4 5.4.9.5 5.4.9.6 5.4.9.7 5.4.9.8 5.4.9.95.5.1.1 5.5.1.2 5.5.1.3 5.5.1.4 5.5.1.5 5.5.1.6 5.5.1.7 5.5.1.8 5.5.1.9 5.5.2.15.5.2.2 5.5.2.3 5.5.2.4 5.5.2.5 5.5.2.6 5.5.2.7 5.5.2.8 5.5.2.9 5.5.3.1 5.5.3.25.5.3.3 5.5.3.4 5.5.3.5 5.5.3.6 5.5.3.7 5.5.3.8 5.5.3.9 5.5.4.1 5.5.4.2 5.5.4.35.5.4.4 5.5.4.5 5.5.4.6 5.5.4.7 5.5.4.8 5.5.4.9 5.5.5.1 5.5.5.2 5.5.5.3 5.5.5.45.5.5.5 5.5.5.6 5.5.5.7 5.5.5.8 5.5.5.9 5.5.6.1 5.5.6.2 5.5.6.3 5.5.6.4 5.5.6.55.5.6.6 5.5.6.7 5.5.6.8 5.5.6.9 5.5.7.1 5.5.7.2 5.5.7.3 5.5.7.4 5.5.7.5 5.5.7.65.5.7.7 5.5.7.8 5.5.7.9 5.5.8.1 5.5.8.2 5.5.8.3 5.5.8.4 5.5.8.5 5.5.8.6 5.5.8.75.5.8.8 5.5.8.9 5.5.9.1 5.5.9.2 5.5.9.3 5.5.9.4 5.5.9.5 5.5.9.6 5.5.9.7 5.5.9.85.5.9.9 5.6.1.1 5.6.1.2 5.6.1.3 5.6.1.4 5.6.1.5 5.6.1.6 5.6.1.7 5.6.1.8 5.6.1.95.6.2.1 5.6.2.2 5.6.2.3 5.6.2.4 5.6.2.5 5.6.2.6 5.6.2.7 5.6.2.8 5.6.2.9 5.6.3.15.6.3.2 5.6.3.3 5.6.3.4 5.6.3.5 5.6.3.6 5.6.3.7 5.6.3.8 5.6.3.9 5.6.4.1 5.6.4.25.6.4.3 5.6.4.4 5.6.4.5 5.6.4.6 5.6.4.7 5.6.4.8 5.6.4.9 5.6.5.1 5.6.5.2 5.6.5.35.6.5.4 5.6.5.5 5.6.5.6 5.6.5.7 5.6.5.8 5.6.5.9 5.6.6.1 5.6.6.2 5.6.6.3 5.6.6.45.6.6.5 5.6.6.6 5.6.6.7 5.6.6.8 5.6.6.9 5.6.7.1 5.6.7.2 5.6.7.3 5.6.7.4 5.6.7.55.6.7.6 5.6.7.7 5.6.7.8 5.6.7.9 5.6.8.1 5.6.8.2 5.6.8.8 5.6.8.4 5.6.8.5 5.6.8.65.6.8.7 5.6.8.8 5.6.8.9 5.6.9.1 5.6.9.2 5.6.9.3 5.6.9.4 5.6.9.5 5.6.9.6 5.6.9.75.6.9.8 5.6.9.9 5.7.1.1 5.7.1.2 5.7.1.3 5.7.1.4 5.7.1.5 5.7.1.6 5.7.1.7 5.7.1.85.7.1.9 5.7.2.1 5.7.2.2 5.7.2.3 5.7.2.4 5.7.2.5 5.7.2.6 5.7.2.7 5.7.2.8 5.7.2.95.7.3.1 5.7.3.2 5.7.3.3 5.7.3.4 5.7.3.5 5.7.3.6 5.7.3.7 5.7.3.8 5.7.3.9 5.7.4.15.7.4.2 5.7.4.3 5.7.4.4 5.7.4.5 5.7.4.6 5.7.4.7 5.7.4.8 5.7.4.9 5.7.5.1 5.7.5.25.7.5.3 5.7.5.4 5.7.5.5 5.7.5.6 5.7.5.7 5.7.5.8 5.7.5.9 5.7.6.1 5.7.6.2 5.7.6.35.7.6.4 5.7.6.5 5.7.6.6 5.7.6.7 5.7.6.8 5.7.6.9 5.7.7.1 5.7.7.2 5.7.7.3 5.7.7.45.7.7.5 5.7.7.6 5.7.7.7 5.7.7.8 5.7.7.9 5.7.8.1 5.7.8.2 5.7.8.3 5.7.8.4 5.7.8.55.7.8.6 5.7.8.7 5.7.8.8 5.7.8.9 5.7.9.1 5.7.9.2 5.7.9.3 5.7.9.4 5.7.9.5 5.7.9.65.7.9.7 5.7.9.8 5.7.9.9 5.8.1.1 5.8.1.2 5.8.1.3 5.8.1.4 5.8.1.5 5.8.1.6 5.8.1.75.8.1.8 5.8.1.9 5.8.2.1 5.8.2.2 5.8.2.3 5.8.2.4 5.8.2.5 5.8.2.6 5.8.2.7 5.8.2.85.8.2.9 5.8.3.1 5.8.3.2 5.8.3.3 5.8.3.4 5.8.3.5 5.8.3.6 5.8.3.7 5.8.3.8 5.8.3.95.8.4.1 5.8.4.2 5.8.4.3 5.8.4.4 5.8.4.5 5.8.4.6 5.8.4.7 5.8.4.8 5.8.4.9 5.8.5.15.8.5.2 5.8.5.3 5.8.5.4 5.8.5.5 5.8.5.6 5.8.5.7 5.8.5.8 5.8.5.9 5.8.6.1 5.8.6.25.8.6.3 5.8.6.4 5.8.6.5 5.8.6.6 5.8.6.7 5.8.6.8 5.8.6.9 5.8.7.1 5.8.7.2 5.8.7.35.8.7.4 5.8.7.5 5.8.7.6 5.8.7.7 5.8.7.8 5.8.7.9 5.8.8.1 5.8.8.2 5.8.8.3 5.8.8.45.8.8.5 5.8.8.6 5.8.8.7 5.8.8.8 5.8.8.9 5.8.9.1 5.8.9.2 5.8.9.3 5.8.9.4 5.8.9.55.8.9.6 5.8.9.7 5.8.9.8 5.8.9.9 5.9.1.1 5.9.1.2 5.9.1.3 5.9.1.4 5.9.1.5 5.9.1.65.9.1.7 5.9.1.8 5.9.1.9 5.9.2.1 5.9.2.2 5.9.2.3 5.9.2.4 5.9.2.5 5.9.2.6 5.9.2.75.9.2.8 5.9.2.9 5.9.3.1 5.9.3.2 5.9.3.3 5.9.3.4 5.9.3.5 5.9.3.6 5.9.3.7 5.9.3.85.9.3.9 5.9.4.1 5.9.4.2 5.9.4.3 5.9.4.4 5.9.4.5 5.9.4.6 5.9.4.7 5.9.4.8 5.9.4.95.9.5.1 5.9.5.2 5.9.5.3 5.9.5.4 5.9.5.5 5.9.5.6 5.9.5.7 5.9.5.8 5.9.5.9 5.9.6.15.9.6.2 5.9.6.3 5.9.6.4 5.9.6.5 5.9.6.6 5.9.6.7 5.9.6.8 5.9.6.9 5.9.7.1 5.9.7.25.9.7.3 5.9.7.4 5.9.7.5 5.9.7.6 5.9.7.7 5.9.7.8 5.9.7.9 5.9.8.1 5.9.8.2 5.9.8.3
表1續(xù)5.9.8.4 5.9.8.5 5.9.8.6 5.9.8.7 5.9.8.8 5.9.8.9 5.9.9.1 5.9.9.2 5.9.9.3 5.9.9.45.9.9.5 5.9.9.6 5.9.9.7 5.9.9.8 5.9.9.9 6.1.1.1 6.1.1.2 6.1.1.6 6.1.1.4 6.1.1.56.1.1.6 6.1.1.7 6.1.1.8 6.1.1.9 6.1.2.1 6.1.2.2 6.1.2.3 6.1.2.4 6.1.2.5 6.1.2.66.1.2.7 6.1.2.8 6.1.2.9 6.1.3.1 6.1.3.2 6.1.3.3 6.1.3.4 6.1.3.5 6.1.3.6 6.1.3.76.1.3.8 6.1.3.9 6.1.4.1 6.1.4.2 6.1.4.3 6.1.4.4 6.1.4.5 6.1.4.6 6.1.4.7 6.1.4.86.1.4.9 6.1.5.1 6.1.5.2 6.1.5.3 6.1.5.4 6.1.5.5 6.1.5.6 6.1.5.7 6.1.5.8 6.1.5.96.1.6.1 6.1.6.2 6.1.6.3 6.1.6.4 6.1.6.5 6.1.6.6 6.1.6.7 6.1.6.8 6.1.6.9 6.1.7.16.1.7.2 6.1.7.3 6.1.7.4 6.1.7.5 6.1.7.6 6.1.7.7 6.1.7.8 6.1.7.9 6.1.8.1 6.1.8.26.1.8.3 6.1.8.4 6.1.8.5 6.1.8.6 6.1.8.7 6.1.8.8 6.1.8.9 6.1.9.1 6.1.9.2 6.1.9.36.1.9.4 6.1.9.5 6.1.9.6 6.1.9.7 6.1.9.8 6.1.9.9 6.2.1.1 6.2.1.2 6.2.1.3 6.2.1.46.2.1.5 6.2.1.6 6.2.1.7 6.2.1.8 6.2.1.9 6.2.2.1 6.2.2.2 6.2.2.3 6.2.2.4 6.2.2.56.2.2.6 6.2.2.7 6.2.2.8 6.2.2.9 6.2.3.1 6.2.3.2 6.2.3.3 6.2.3.4 6.2.3.5 6.2.3.66.2.3.7 6.2.3.8 6.2.3.9 6.2.4.1 6.2.4.2 6.2.4.3 6.2.4.4 6.2.4.5 6.2.4.6 6.2.4.76.2.4.8 6.2.4.9 6.2.5.1 6.2.5.2 6.2.5.3 6.2.5.4 6.2.5.5 6.2.5.6 6.2.5.7 6.2.5.86.2.5.9 6.2.6.1 6.2.6.2 6.2.6.3 6.2.6.4 6.2.6.5 6.2.6.6 6.2.6.7 6.2.6.8 6.2.6.96.2.7.1 6.2.7.2 6.2.7.3 6.2.7.4 6.2.7.5 6.2.7.6 6.2.7.7 6.2.7.8 6.2.7.9 6.2.8.16.2.8.2 6.2.8.3 6.2.8.4 6.2.8.5 6.2.8.6 6.2.8.7 6.2.8.8 6.2.8.9 6.2.9.1 6.2.9.26.2.9.3 6.2.9.4 6.2.9.5 6.2.9.6 6.2.9.7 6.2.9.8 6.2.9.9 6.3.1.1 6.3.1.2 6.3.1.36.3.1.4 6.3.1.5 6.3.1.6 6.3.1.7 6.3.1.8 6.3.1.9 6.3.2.1 6.3.2.2 6.3.2.3 6.3.2.46.3.2.5 6.3.2.6 6.3.2.7 6.3.2.8 6.3.2.9 6.3.3.1 6.3.3.2 6.3.3.3 6.3.3.4 6.3.3.56.3.3.6 6.3.3.7 6.3.3.8 6.3.3.9 6.3.4.1 6.3.4.2 6.3.4.3 6.3.4.4 6.3.4.5 6.3.4.66.3.4.7 6.3.4.8 6.3.4.9 6.3.5.1 6.3.5.2 6.3.5.3 6.3.5.4 6.3.5.5 6.3.5.6 6.3.5.76.3.5.8 6.3.5.9 6.3.6.1 6.3.6.2 6.3.6.3 6.3.6.4 6.3.6.5 6.3.6.6 6.3.6.7 6.3.6.86.3.6.9 6.3.7.1 6.3.7.2 6.3.7.3 6.3.7.4 6.3.7.5 6.3.7.6 6.3.7.7 6.3.7.8 6.3.7.96.3.8.1 6.3.8.2 6.3.8.3 6.3.8.4 6.3.8.5 6.3.8.6 6.3.8.7 6.3.8.8 6.3.8.9 6.3.9.16.3.9.2 6.3.9.3 6.3.9.4 6.3.9.5 6.3.9.6 6.3.9.7 6.3.9.8 6.3.9.9 6.4.1.1 6.4.1.26.4.1.3 6.4.1.4 6.4.1.5 6.4.1.6 6.4.1.7 6.4.1.8 6.4.1.9 6.4.2.1 6.4.2.2 6.4.2.36.4.2.4 6.4.2.5 6.4.2.6 6.4.2.7 6.4.2.8 6.4.2.9 6.4.3.1 6.4.3.2 6.4.3.3 6.4.3.46.4.3.5 6.4.3.6 6.4.3.7 6.4.3.8 6.4.3.9 6.4.4.1 6.4.4.2 6.4.4.3 6.4.4.4 6.4.4.56.4.4.6 6.4.4.7 6.4.4.8 6.4.4.9 6.4.5.1 6.4.5.2 6.4.5.3 6.4.5.4 6.4.5.5 6.4.5.66.4.5.7 6.4.5.8 6.4.5.9 6.4.6.1 6.4.6.2 6.4.6.3 6.4.6.4 6.4.6.5 6.4.6.6 6.4.6.76.4.6.8 6.4.6.9 6.4.7.1 6.4.7.2 6.4.7.3 6.4.7.4 6.4.7.5 6.4.7.6 6.4.7.7 6.4.7.86.4.7.9 6.4.8.1 6.4.8.2 6.4.8.3 6.4.8.4 6.4.8.5 6.4.8.6 6.4.8.7 6.4.8.8 6.4.8.96.4.9.1 6.4.9.2 6.4.9.3 6.4.9.4 6.4.9.5 6.4.9.6 6.4.9.7 6.4.9.8 6.4.9.9 6.5.1.16.5.1.2 6.5.1.3 6.5.1.4 6.5.1.5 6.5.1.6 6.5.1.7 6.5.1.8 6.5.1.9 6.5.2.1 6.5.2.26.5.2.3 6.5.2.4 6.5.2.5 6.5.2.6 6.5.2.7 6.5.2.8 6.5.2.9 6.5.3.1 6.5.3.2 6.5.3.36.5.3.4 6.5.3.5 6.5.3.6 6.5.3.7 6.5.3.8 6.5.3.9 6.5.4.1 6.5.4.2 6.5.4.3 6.5.4.46.5.4.5 6.5.4.6 6.5.4.7 6.5.4.8 6.5.4.9 6.5.5.1 6.5.5.2 6.5.5.3 6.5.5.4 6.5.5.56.5.5.6 6.5.5.7 6.5.5.8 6.5.5.9 6.5.6.1 6.5.6.2 6.5.6.3 6.5.6.4 6.5.6.5 6.5.6.66.5.6.7 6.5.6.8 6.5.6.9 6.5.7.1 6.5.7.2 6.5.7.3 6.5.7.4 6.5.7.5 6.5.7.6 6.5.7.76.5.7.8 6.5.7.9 6.5.8.1 6.5.8.2 6.5.8.3 6.5.8.4 6.5.8.5 6.5.8.6 6.5.8.7 6.5.8.86.5.8.9 6.5.9.1 6.5.9.2 6.5.9.3 6.5.9.4 6.5.9.5 6.5.9.6 6.5.9.7 6.5.9.8 6.5.9.96.6.1.1 6.6.1.2 6.6.1.3 6.6.1.4 6.6.1.5 6.6.1.6 6.6.1.7 6.6.1.8 6.6.1.9 6.6.2.16.6.2.2 6.6.2.3 6.6.2.4 6.6.2.5 6.6.2.6 6.6.2.7 6.6.2.8 6.6.2.9 6.6.3.1 6.6.3.26.6.3.3 6.6.3.4 6.6.3.5 6.6.3.6 6.6.3.7 6.6.3.8 6.6.3.9 6.6.4.1 6.6.4.2 6.6.4.36.6.4.4 6.6.4.5 6.6.4.6 6.6.4.7 6.6.4.8 6.6.4.9 6.6.5.1 6.6.5.2 6.6.5.3 6.6.5.46.6.5.5 6.6.5.6 6.6.5.7 6.6.5.8 6.6.5.9 6.6.6.1 6.6.6.2 6.6.6.3 6.6.6.4 6.6.6.56.6.6.6 6.6.6.7 6.6.6.8 6.6.6.9 6.6.7.1 6.6.7.2 6.6.7.3 6.6.7.4 6.6.7.5 6.6.7.66.6.7.7 6.6.7.8 6.6.7.9 6.6.8.1 6.6.8.2 6.6.8.3 6.6.8.4 6.6.8.5 6.6.8.6 6.6.8.76.6.8.8 6.6.8.9 6.6.9.1 6.6.9.2 6.6.9.3 6.6.9.4 6.6.9.5 6.6.9.6 6.6.9.7 6.6.9.86.6.9.9 6.7.1.1 6.7.1.2 6.7.1.3 6.7.1.4 6.7.1.5 6.7.1.6 6.7.1.7 6.7.1.8 6.7.1.96.7.2.1 6.7.2.2 6.7.2.3 6.7.2.4 6.7.2.5 6.7.2.6 6.7.2.7 6.7.2.8 6.7.2.9 6.7.3.1
表1續(xù)6.7.3.2 6.7.3.3 6.7.3.4 6.7.3.5 6.7.3.6 6.7.3.7 6.7.3.8 6.7.3.9 6.7.4.1 6.7.4.26.7.4.3 6.7.4.4 6.7.4.5 6.7.4.6 6.7.4.7 6.7.4.8 6.7.4.9 6.7.5.1 6.7.5.2 6.7.5.36.7.5.4 6.7.5.5 6.7.5.6 6.7.5.7 6.7.5.8 6.7.5.9 6.7.6.1 6.7.6.2 6.7.6.3 6.7.6.46.7.6.5 6.7.6.6 6.7.6.7 6.7.6.8 6.7.6.9 6.7.7.1 6.7.7.2 6.7.7.3 6.7.7.4 6.7.7.56.7.7.6 6.7.7.7 6.7.7.8 6.7.7.9 6.7.8.1 6.7.8.2 6.7.8.3 6.7.8.4 6.7.8.5 6.7.8.66.7.8.7 6.7.8.8 6.7.8.9 6.7.9.1 6.7.9.2 6.7.9.3 6.7.9.4 6.7.9.5 6.7.9.6 6.7.9.76.7.9.8 6.7.9.9 6.8.1.1 6.8.1.2 6.8.1.3 6.8.1.4 6.8.1.5 6.8.1.6 6.8.1.7 6.8.1.86.8.1.9 6.8.2.1 6.8.2.2 6.8.2.3 6.8.2.4 6.8.2.5 6.8.2.6 6.8.2.7 6.8.2.8 6.8.2.96.8.3.1 6.8.3.2 6.8.3.3 6.8.3.4 6.8.3.5 6.8.3.6 6.8.3.7 6.8.3.8 6.8.3.9 6.8.4.16.8.4.2 6.8.4.3 6.8.4.4 6.8.4.5 6.8.4.6 6.8.4.7 6.8.4.8 6.8.4.9 6.8.5.1 6.8.5.26.8.5.3 6.8.5.4 6.8.5.5 6.8.5.6 6.8.5.7 6.8.5.8 6.8.5.9 6.8.6.1 6.8.6.2 6.8.6.36.8.6.4 6.8.6.5 6.8.6.6 6.8.6.7 6.8.6.8 6.8.6.9 6.8.7.1 5.8.7.2 6.8.7.3 6.8.7.46.8.7.5 6.8.7.6 6.8.7.7 6.8.7.8 6.8.7.9 6.8.8.1 6.8.8.2 6.8.8.3 6.8.8.4 6.8.8.56.8.8.6 6.8.8.7 6.8.8.8 6.8.8.9 6.8.9.1 6.8.9.2 6.8.9.3 6.8.9.4 6.8.9.5 6.8.9.66.8.9.7 6.8.9.8 6.8.9.9 6.9.1.1 6.9.1.2 6.9.1.3 6.9.1.4 6.9.1.5 6.9.1.6 6.9.1.76.9.1.8 6.9.1.9 6.9.2.1 6.9.2.2 6.9.2.3 6.9.2.4 6.9.2.5 6.9.2.6 6.9.2.7 6.9.2.86.9.2.9 6.9.3.1 6.9.3.2 6.9.3.3 6.9.3.4 6.9.3.5 6.9.3.6 6.9.3.7 6.9.3.8 6.9.3.96.9.4.1 6.9.4.2 6.9.4.3 6.9.4.4 6.9.4.5 6.9.4.6 6.9.4.7 6.9.4.8 6.9.4.9 6.9.5.16.9.5.2 6.9.5.3 6.9.5.4 6.9.5.5 6.9.5.6 6.9.5.7 6.9.5.8 6.9.5.9 6.9.6.1 6.9.6.26.9.6.3 6.9.6.4 6.9.6.5 6.9.6.6 6.9.6.7 6.9.6.8 6.9.6.9 6.9.7.1 6.9.7.2 6.9.7.36.9.7.4 6.9.7.5 6.9.7.6 6.9.7.7 6.9.7.8 6.9.7.9 6.9.8.1 6.9.8.2 6.9.8.3 6.9.8.46.9.8.5 6.9.8.6 6.9.8.7 6.9.8.8 6.9.8.9 6.9.9.1 6.9.9.2 6.9.9.3 6.9.9.4 6.9.9.56.9.9.6 6.9.9.7 6.9.9.8 6.9.9.9 7.1.1.1 7.1.1.2 7.1.1.3 7.1.1.4 7.1.1.5 7.1.1.67.1.1.7 7.1.1.8 7.1.1.9 7.1.2.1 7.1.2.2 7.1.2.3 7.1.2.4 7.1.2.5 7.1.2.6 7.1.2.77.1.2.8 7.1.2.9 7.1.3.1 7.1.3.2 7.1.3.3 7.1.3.4 7.1.3.5 7.1.3.6 7.1.3.7 7.1.3.87.1.3.9 7.1.4.1 7.1.4.2 7.1.4.3 7.1.4.4 7.1.4.5 7.1.4.6 7.1.4.7 7.1.4.8 7.1.4.97.1.5.1 7.1.5.2 7.1.5.3 7.1.5.4 7.1.5.5 7.1.5.6 7.1.5.7 7.1.5.8 7.1.5.9 7.1.6.17.1.6.2 7.1.6.3 7.1.6.4 7.1.6.5 7.1.6.6 7.1.6.7 7.1.6.8 7.1.6.9 7.1.7.1 7.1.7.27.1.7.3 7.1.7.4 7.1.7.5 7.1.7.6 7.1.7.7 7.1.7.8 7.1.7.9 7.1.8.1 7.1.8.2 7.1.8.37.1.8.4 7.1.8.5 7.1.8.6 7.1.8.7 7.1.8.8 7.1.8.9 7.1.9.1 7.1.9.2 7.1.9.3 7.1.9.47.1.9.5 7.1.9.6 7.1.9.7 7.1.9.8 7.1.9.9 7.2.1.1 7.2.1.2 7.2.1.3 7.2.1.4 7.2.1.57.2.1.6 7.2.1.7 7.2.1.8 7.2.1.9 7.2.2.1 7.2.2.2 7.2.2.3 7.2.2.4 7.2.2.5 7.2.2.67.2.2.7 7.2.2.8 7.2.2.9 7.2.3.1 7.2.3.2 7.2.3.3 7.2.3.4 7.2.3.5 7.2.3.6 7.2.3.77.2.3.8 7.2.3.9 7.2.4.1 7.2.4.2 7.2.4.3 7.2.4.4 7.2.4.5 7.2.4.6 7.2.4.7 7.2.4.87.2.4.9 7.2.5.1 7.2.5.2 7.2.5.3 7.2.5.4 7.2.5.5 7.2.5.6 7.2.5.7 7.2.5.8 7.2.5.97.2.6.1 7.2.6.2 7.2.6.3 7.2.6.4 7.2.6.5 7.2.6.6 7.2.6.7 7.2.6.8 7.2.6.9 7.2.7.17.2.7.2 7.2.7.3 7.2.7.4 7.2.7.5 7.2.7.6 7.2.7.7 7.2.7.8 7.2.7.9 7.2.8.1 7.2.8.27.2.8.3 7.2.8.4 7.2.8.5 7.2.8.6 7.2.8.7 7.2.8.8 7.2.8.9 7.2.9.1 7.2.9.2 7.2.9.37.2.9.4 7.2.9.5 7.2.9.6 7.2.9.7 7.2.9.8 7.2.9.9 7.3.1.1 7.3.1.2 7.3.1.3 7.3.1.47.3.1.5 7.3.1.6 7.3.1.7 7.3.1.8 7.3.1.9 7.3.2.1 7.3.2.2 7.3.2.3 7.3.1.4 7.3.2.57.3.2.6 7.3.2.7 7.3.2.8 7.3.2.9 7.3.3.1 7.3.3.2 7.3.3.3 7.3.3.4 7.3.3.5 7.3.3.67.3.3.7 7.3.3.8 7.3.3.9 7.3.4.1 7.3.4.2 7.3.4.3 7.3.4.4 7.3.4.5 7.3.4.6 7.3.4.77.3.4.8 7.3.4.9 7.3.5.1 7.3.5.2 7.3.5.3 7.3.5.4 7.3.5.5 7.3.5.6 7.3.5.7 7.3.5.87.3.5.9 7.3.6.1 7.3.6.2 7.3.6.3 7.3.6.4 7.3.6.5 7.3.6.6 7.3.6.7 7.3.6.8 7.3.6.97.3.7.1 7.3.7.2 7.3.7.3 7.3.7.4 7.3.7.5 7.3.7.6 7.3.7.7 7.3.7.8 7.3.7.9 7.3.8.17.3.8.2 7.3.8.3 7.3.8.4 7.3.8.5 7.3.8.6 7.3.8.7 7.3.8.8 7.3.8.9 7.3.9.1 7.3.9.27.3.9.3 7.3.9.4 7.3.9.9 7.3.9.6 7.3.9.7 7.3.9.8 7.3.9.9 7.4.1.1 7.4.1.2 7.4.1.37.4.1.4 7.4.1.5 7.4.1.6 7.4.1.7 7.4.1.8 7.4.1.9 7.4.2.1 7.4.2.2 7.4.2.3 7.4.2.47.4.2.5 7.4.2.6 7.4.2.7 7.4.2.8 7.4.2.9 7.4.3.1 7.4.3.2 7.4.3.3 7.4.3.4 7.4.3.57.4.3.6 7.4.3.7 7.4.3.8 7.4.3.9 7.4.4.1 7.4.4.2 7.4.4.3 7.4.4.4 7.4.4.5 7.4.4.67.4.4.7 7.4.4.8 7.4.4.9 7.4.5.1 7.4.5.2 7.4.5.3 7.4.5.4 7.4.5.5 7.4.5.6 7.4.5.77.4.5.8 7.4.5.9 7.4.6.1 7.4.6.2 7.4.6.3 7.4.6.4 7.4.6.5 7.4.6.6 7.4.6.7 7.4.6.8
表1續(xù)7.4.6.9 7.4.7.1 7.4.7.2 7.4.7.3 7.4.7.4 7.4.7.5 7.4.7.6 7.4.7.7 7.4.7.8 7.4.7.97.4.8.1 7.4.8.2 7.4.8.3 7.4.8.4 7.4.8.5 7.4.8.6 7.4.8.7 7.4.8.8 7.4.8.9 7.4.9.17.4.9.2 7.4.9.3 7.4.9.4 7.4.9.5 7.4.9.6 7.4.9.7 7.4.9.8 7.4.9.9 7.5.1.1 7.5.1.27.5.1.3 7.5.1.4 7.5.1.5 7.5.1.6 7.5.1.7 7.5.1.8 7.5.1.9 7.5.2.1 7.5.2.2 7.5.2.37.5.2.4 7.5.2.5 7.5.2.6 7.5.2.7 7.5.2.8 7.5.2.9 7.5.3.1 7.5.3.2 7.5.3.3 7.5.3.47.5.3.5 7.5.3.6 7.5.3.7 7.5.3.8 7.5.3.9 7.5.4.1 7.5.4.2 7.5.4.3 7.5.4.4 7.5.4.57.5.4.6 7.5.4.7 7.5.4.8 7.5.4.9 7.5.5.1 7.5.5.2 7.5.5.3 7.5.5.4 7.5.5.5 7.5.5.67.5.5.7 7.5.5.8 7.5.5.9 7.5.6.1 7.5.6.2 7.5.6.3 7.5.6.4 7.5.6.5 7.5.6.6 7.5.6.77.5.6.8 7.5.6.9 7.5.7.1 7.5.7.2 7.5.7.3 7.5.7.4 7.5.7.5 7.5.7.6 7.5.7.7 7.5.7.87.5.7.9 7.5.8.1 7.5.8.2 7.5.8.3 7.5.8.4 7.5.8.5 7.5.8.6 7.5.8.7 7.5.8.8 7.5.8.97.5.9.1 7.5.9.2 7.5.9.3 7.5.9.4 7.5.9.5 7.5.9.6 7.5.9.7 7.5.9.8 7.5.9.9 7.6.1.17.6.1.2 7.6.1.3 7.6.1.4 7.6.1.5 7.6.1.6 7.6.1.7 7.6.1.8 7.6.1.9 7.6.2.1 7.6.2.27.6.2.3 7.6.2.4 7.6.2.5 7.6.2.6 7.6.2.7 7.6.2.8 7.6.2.9 7.6.3.1 7.6.3.2 7.6.3.37.6.3.4 7.6.3.5 7.6.3.6 7.6.3.7 7.6.3.8 7.6.3.9 7.6.4.1 7.6.4.2 7.6.4.3 7.6.4 47.6.4.5 7.6.4.6 7.6.4.7 7.6.4.8 7.6.4.9 7.6.5.1 7.6.5.2 7.6.5.3 7.6.5.4 7.6.5.57.6.5.6 7.6.5.7 7.6.5.8 7.6.5.9 7.6.6.1 7.6.6.2 7.6.6.3 7.6.6.4 7.6.6.5 7.6.6.67.6.6.7 7.6.6.8 7.6.6.9 7.6.7.1 7.6.7.2 7.6.7.3 7.6.7.4 7.6.7.5 7.6.7.6 7.6.7.77.6.7.8 7.6.7.9 7.6.8.1 7.6.8.2 7.6.8.3 7.6.8.4 7.6.8.5 7.6.8.6 7.6.8.7 7.6.8.87.6.8.9 7.6.9.1 7.6.9.2 7.6.9.3 7.6.9.4 7.6.9.5 7.6.9.6 7.6.9.7 7.6.9.8 7.6.9.97.7.1.1 7.7.1.2 7.7.1.3 7.7.1.4 7.7.1.5 7.7.1.6 7.7.1.7 7.7.1.8 7.7.1.9 7.7.2.17.7.2.2 7.7.2.3 7.7.2.4 7.7.2.5 7.7.2.6 7.7.2.7 7.7.2.B 7.7.2.9 7.7.3.1 7.7.3.27.7.3.3 7.7.3.4 7.7.3.5 7.7.3.6 7.7.3.7 7.7.3.8 7.7.3.9 7.7.4.1 7.7.4.2 7.7.4.37.7.4.4 7.7.4.5 7.7.4.6 7.7.4.7 7.7.4.8 7.7.4.9 7.7.5.1 7.7.5.2 7.7.5.3 7.7.5.47.7.5.5 7.7.5.6 7.7.5.7 7.7.5.8 7.7.5.9 7.7.6.1 7.7.6.2 7.7.6.3 7.7.6.4 7.7.6.57.7.6.6 7.7.6.7 7.7.6.8 7.7.6.9 7.7.7.1 7.7.7.2 7.7.7.3 7.7.7.4 7.7.7.5 7.7.7.67.7.7.7 7.7.7.8 7.7.7.9 7.7.8.1 7.7.8.2 7.7.8.3 7.7.8.4 7.7.8.5 7.7.8.6 7.7.8.77.7.8.8 7.7.8.9 7.7.9.1 7.7.9.2 7.7.9.3 7.7.9.4 7.7.9.5 7.7.9.6 7.7.9.7 7.7.9.87.7.9.9 7.8.1.1 7.8.1.2 7.8.1.3 7.8.1.4 7.8.1.5 7.8.1.6 7.8.1.7 7.8.1.8 7.8.1.97.8.2.1 7.8.2.2 7.8.2.3 7.8.2.4 7.8.2.5 7.8.2.6 7.8.2.7 7.8.2.8 7.8.2.9 7.8.3.17.8.3.2 7.8.3.3 7.8.3.4 7.8.3.5 7.8.3.6 7.8.3.7 7.8.3.8 7.8.3.9 7.8.4.1 7.8.4.27.8.4.3 7.8.4.4 7.8.4.5 7.8.4.6 7.8.4.7 7.8.4.8 7.8.4.9 7.8.5.1 7.8.5.2 7.8.5.37.8.5.4 7.8.5.5 7.8.5.6 7.8.5.7 7.8.5.8 7.8.5.9 7.8.6.1 7.8.6.2 7.8.6.3 7.8.6.47.8.6.5 7.8.6.6 7.8.6.7 7.8.6.8 7.8.6.9 7.8.7.1 7.8.7.2 7.8.7.3 7.8.7.4 7.8.7.57.8.7.6 7.8.7.7 7.8.7.8 7.8.7.9 7.8.8.1 7.8.8.2 7.8.8.3 7.8.8.4 7.8.8.5 7.8.8.67.8.8.7 7.8.8.8 7.8.8.9 7.8.9.1 7.8.9.2 7.8.9.3 7.8.9.4 7.8.9.5 7.8.9.6 7.8.9.77.8.9.8 7.8.9.9 7.9.1.1 7.9.1.2 7.9.1.3 7.9.1.4 7.9.1.5 7.9.1.6 7.9.1.7 7.9.1.87.9.1.9 7.9.2.1 7.9.2.2 7.9.2.3 7.9.2.4 7.9.2.5 7.9.2.6 7.9.2.7 7.9.2.8 7.9.2.97.9.3.1 7.9.3.2 7.9.3.3 7.9.3.4 7.9.3.5 7.9.3.6 7.9.3.7 7.9.3.8 7.9.3.9 7.9.4.17.9.4.2 7.9.4.3 7.9.4.4 7.9.4.5 7.9.4.6 7.9.4.7 7.9.4.8 7.9.4.9 7.9.5.1 7.9.5.27.9.5.3 7.9.5.4 7.9.5.5 7.9.5.6 7.9.5.7 7.9.5.8 7.9.5.9 7.9.6.1 7.9.6.2 7.9.6.37.9.6.4 7.9.6.5 7.9.6.6 7.9.6.7 7.9.6.8 7.9.6.9 7.9.7.1 7.9.7.2 7.9.7.3 7.9.7.47.9.7.5 7.9.7.6 7.9.7.7 7.9.7.8 7.9.7.9 7.9.8.1 7.9.8.2 7.9.8.3 7.9.8.4 7.9.8.57.9.8.6 7.9.8.7 7.9.8.8 7.9.8.9 7.9.9.1 7.9.9.2 7.9.9.3 7.9.9.4 7.9.9.5 7.9.9.67.9.9.7 7.9.9.8 7.9.9.9 8.1.1.1 8.1.1.2 8.1.1.3 8.1.1.4 8.1.1.5 8.1.1.6 8.1.1.78.1.1.8 8.1.1.9 8.1.2.1 8.1.2.2 8.1.2.3 8.1.2.4 8.1.2.5 8.1.2.6 8.1.2.7 8.1.2.88.1.2.9 8.1.3.1 8.1.3.2 8.1.3.3 8.1.3.4 8.1.3.5 8.1.3.6 8.1.3.7 8.1.3.8 8.1.3.98.1.4.1 8.1.4.2 8.1.4.3 8.1.4.4 8.1.4.5 8.1.4.6 8.1.4.7 8.1.4.8 8.1.4.9 8.1.5.18.1.5.2 8.1.5.3 8.1.5.4 8.1.5.5 8.1.5.6 8.1.5.7 8.1.5.8 8.1.5.9 8.1.6.1 8.1.6.28.1.6.3 8.1.6.4 8.1.6.5 8.1.6.6 8.1.6.7 8.1.6.8 8.1.6.9 8.1.7.1 8.1.7.2 8.1.7.38.1.7.4 8.1.7.5 8.1.7.6 8.1.7.7 8.1.7.8 8.1.7.9 8.1.8.1 8.1.8.2 8.1.8.3 8.1.8.48.1.8.5 8.1.8.6 8.1.8.7 8.1.8.8 8.1.8.9 8.1.9.1 8.1.9.2 8.1.9.3 8.1.9.4 8.1.9.58.1.9.6 8.1.9.7 8.1.9.8 8.1.9.9 8.2.1.1 8.2.1.2 8.2.1.3 8.2.1.4 8.2.1.5 8.2.1.6
表1續(xù)8.2.1.7 8.2.1.8 8.2.1.9 8.2.2.1 8.2.2.2 8.2.2.3 8.2.2.4 8.2.2.5 8.2.2.6 8.2.2.78.2.2.8 8.2.2.9 8.2.3.1 8.2.3.2 8.2.3.3 8.2.3.4 8.2.3.5 8.2.3.6 8.2.3.7 8.2.3.88.2.3.9 8.2.4.1 8.2.4.2 8.2.4.3 8.2.4.4 8.2.4.5 8.2.4.6 8.2.4.7 8.2.4.8 8.2.4.98.2.5.1 8.2.5.2 8.2.5.3 8.2.5.4 8.2.5.5 8.2.5.6 8.2.5.7 8.2.5.8 8.2.5.9 8.2.6.18.2.6.2 8.2.6.3 8.2.6.4 8.2.6.5 8.2.6.6 8.2.6.7 8.2.6.8 8.2.6.9 8.2.7.1 8.2.7.28.2.7.3 8.2.7.4 8.2.7.5 8.2.7.6 8.2.7.7 8.2.7.8 8.2.7.9 8.2.8.1 8.2.8.2 8.2.8.38.2.8.4 8.2.8.5 8.2.8.6 8.2.8.7 8.2.8.8 8.2.8.9 8.2.9.1 8.2.9.2 8.2.9.3 3.2.9.48.2.9.5 8.2.9.6 8.2.9.7 8.2.9.8 8.2.9.9 8.3.1.1 8.3.1.2 8.3.1.3 8.3.1.4 8.3.1.58.3.1.6 8.3.1.7 8.3.1.8 8.3.1.9 8.3.2.1 8.3.2.2 8.3.2.3 8.3.2.4 8.3.2.5 8.3.2.68.3.2.7 8.3.2.8 8.3.2.9 8.3.3.1 8.3.3.2 8.3.3.3 8.3.3.4 8.3.3.5 8.3.3.6 8.3.3.78.3.3.8 8.3.3.9 8.3.4.1 8.3.4.2 8.3.4.3 8.3.4.4 8.3.4.5 8.3.4.6 8.3.4.7 8.3.4.88.3.4.9 8.3.5.1 8.3.5.2 8.3.5.3 8.3.5.4 8.3.5.5 8.3.5.6 8.3.5.7 8.3.5.8 8.3.5.98.3.6.1 8.3.6.2 8.3.6.3 8.3.6.4 8.3.6.5 8.3.5.6 8.3.6.7 8.3.6.8 8.3.6.9 8.3.7.18.3.7.2 8.3.7.3 8.3.7.4 8.3.7.5 8.3.7.6 8.3.7.7 8.3.7.8 8.3.7.9 8.3.8.1 8.3.8.28.3.8.3 8.3.8.4 8.3.8.5 8.3.8.6 8.3.8.7 8.3.8.8 8.3.8.9 8.3.9.1 8.3.9.2 8.3.9.38.3.9.4 8.3.9.5 8.3.9.6 8.3.9.7 8.3.9.8 8.3.9.9 8.4.1.1 8.4.1.2 8.4.1.3 8.4.1.48.4.1.5 8.4.1.6 8.4.1.7 8.4.1.8 8.4.1.9 8.4.2.1 8.4.2.2 8.4.2.3 8.4.2.4 8.4.2.58.4.2.6 8.4.2.7 8.4.2.8 8.4.2.9 8.4.3.1 8.4.3.2 8.4.3.3 8.4.3.4 8.4.3.5 8.4.3.68.4.3.7 8.4.3.8 8.4.3.9 8.4.4.1 8.4.4.2 8.4.4.3 8.4.4.4 8.4.4.5 8.4.4.6 8.4.4.78.4.4.8 8.4.4.9 8.4.5.1 8.4.5.2 8.4.5.3 8.4.5.4 8.4.5.5 8.4.5.6 8.4.5.7 8.4.5.88.4.5.9 8.4.6.1 8.4.6.2 8.4.6.3 8.4.6.4 8.4.6.5 8.4.6.6 8.4.6.7 8.4.6.8 8.4.6.98.4.7.1 8.4.7.2 8.4.7.3 8.4.7.4 8.4.7.5 8.4.7.6 8.4.7.7 8.4.7.8 8.4.7.9 8.4.8.18.4.8.2 8.4.8.3 8.4.8.4 8.4.8.5 8.4.8.6 8.4.8.7 8.4.8.8 8.4.8.9 8.4.9.1 8.4.9.28.4.9.3 8.4.9.4 8.4.9.5 8.4.9.6 8.4.9.7 8.4.9.8 8.4.9.9 8.5.1.1 8.5.1.2 8.5.1.38.5.1.4 8.5.1.5 8.5.1.6 8.5.1.7 8.5.1.8 8.5.1.9 8.5.2.1 8.5.2.2 8.5.2.3 8.5.2.48.5.2.5 8.5.2.6 8.5.2.7 8.5.2.8 8.5.2.9 8.5.3.1 8.5.3.2 8.5.3.3 8.5.3.4 8.5.3.58.5.3.6 8.5.3.7 8.5.3.8 8.5.3.9 8.5.4.1 8.5.4.2 8.5.4.3 8.5.4.4 8.5.4.5 8.5.4.68.5.4.7 8.5.4.8 8.5.4.9 8.5.5.1 8.5.5.2 8.5.5.3 8.5.5.4 8.5.5.5 8.5.5.6 8.5.5.78.5.5.8 8.5.5.9 8.5.6.1 8.5.6.2 8.5.6.3 8.5.6.4 8.5.6.5 8.5.6.6 8.5.6.7 8.5.6.88.5.6.9 8.5.7.1 8.5.7.2 8.5.7.3 8.5.7.4 8.5.7.5 8.5.7.6 8.5.7.7 8.5.7.8 8.5.7.98.5.8.1 8.5.8.2 8.5.8.3 8.5.8.4 8.5.8.5 8.5.8.6 8.5.8.7 8.5.8.8 8.5.8.9 8.5.9.18.5.9.2 8.5.9.3 8.5.9.4 8.5.9.5 8.5.9.6 8.5.9.7 8.5.9.8 8.5.9.9 8.6.1.1 8.6.1.28.6.1.3 8.6.1.4 8.6.1.5 8.6.1.6 8.6.1.7 8.6.1.8 8.6.1.9 8.6.2.1 8.6.2.2 8.6.2.38.6.2.4 8.6.2.5 8.6.2.6 8.6.2.7 8.6.2.8 8.6.2.9 8.6.3.1 8.6.3.2 8.6.3.3 8.6.3.48.6.3.5 8.6.3.6 8.6.3.7 8.6.3.8 8.6.3.9 8.6.4.1 8.6.4.2 8.6.4.3 8.6.4.4 8.6.4.58.6.4.6 8.6.4.7 8.6.4.8 8.6.4.9 8.6.5.1 8.6.5.2 8.6.5.3 8.6.5.4 8.6.5.5 8.6.5.68.6.5.7 8.6.5.8 8.6.5.9 8.6.6.1 8.6.6.2 8.6.6.3 8.6.6.4 8.6.6.5 8.6.6.6 8.6.6.78.6.6.8 8.6.6.9 8.6.7.1 8.6.7.2 8.6.7.3 8.6.7.4 8.6.7.5 8.6.7.6 8.6.7.7 8.6.7.88.6.7.9 8.6.8.1 8.6.8.2 8.6.8.3 8.6.8.4 8.6.8.5 8.6.8.6 8.6.8.7 8.6.8.8 8.6.8.98.6.9.1 8.6.9.2 8.6.5.3 8.6.9.4 8.6.9.5 8.6.9.6 8.6.9.7 8.6.9.8 8.6.9.9 8.7.1.18.7.1.2 8.7.1.3 8.7.1.4 8.7.1.5 8.7.1.6 8.7.1.7 8.7.1.8 8.7.1.9 8.7.2.1 8.7.2.28.7.2.3 8.7.2.4 8.7.2.5 8.7.2.6 8.7.2.7 8.7.2.8 8.7.2.9 8.7.3.1 8.7.3.2 8.7.3.38.7.3.4 8.7.3.5 8.7.3.6 8.7.3.7 8.7.3.8 8.7.3.9 8.7.4.1 8.7.4.2 8.7.4.3 8.7.4.48.7.4.5 8.7.4.6 8.7.4.7 8.7.4.8 8.7.4.9 8.7.5.1 8.7.5.2 8.7.5.3 8.7.5.4 8.7.5.58.7.5.6 8.7.5.7 8.7.5.8 8.7.5.9 8.7.6.1 8.7.6.2 8.7.6.3 8.7.6.4 8.7.6.5 8.7.6.68.7.6.7 8.7.6.8 8.7.6.9 8.7.7.1 8.7.7.2 8.7.7.3 8.7.7.4 8.7.7.5 8.7.7.6 8.7.7.78.7.7.8 8.7.7.9 8.7.8.1 8.7.8.2 8.7.8.3 8.7.8.4 8.7.8.5 8.7.8.6 8.7.8.7 8.7.8.88.7.8.9 8.7.9.1 8.7.9.2 8.7.9.3 8.7.9.4 8.7.9.5 8.7.9.6 8.7.9.7 8.7.9.8 8.7.9.98.8.1.1 8.8.1.2 8.8.1.3 8.8.1.4 8.8.1.5 8.8.1.6 8.8.1.7 8.8.1.8 8.8.1.9 8.8.2.18.8.2.2 8.8.2.3 8.8.2.4 8.8.2.5 8.8.2.6 8.8.2.7 8.8.2.8 8.8.2.9 8.8.3.1 8.8.3.28.8.3.3 8.8.3.4 8.8.3.5 8.8.3.6 8.8.3.7 8.8.3.8 8.8.3.9 8.8.4.1 8.8.4.2 8.8.4.38.8.4.4 8.8.4.5 8.8.4.6 8.8.4.7 8.8.4.8 8.8.4.9 8.8.5.1 8.8.5.2 8.8.5.3 8.8.5.4
表1續(xù)8.8.5.5 8.8.5.6 8.8.5.7 8.8.5.8 8.8.5.9 8.8.6.1 8.8.6.2 8.8.6.3 8.8.6.4 8.8.6.58.8.6.6 8.8.6.7 8.8.6.8 8.8.6.9 8.8.7.1 8.8.7.2 8.8.7.3 8.8.7.4 8.8.7.5 8.8.7.68.8.7.7 8.8.7.8 8.8.7.9 8.8.8.1 8.8.8.2 8.8.8.3 8.8.8.4 8.8.8.5 8.8.8.6 8.8.8.78.8.8.8 8.8.8.9 8.8.9.1 8.8.9.2 8.8.9.3 8.8.9.4 8.8.9.5 8.8.9.6 8.8.9.7 8.8.9.88.8.9.9 8.9.1.1 8.9.1.2 8.9.1.3 8.9.1.4 8.9.1.5 8.9.1.6 8.9.1.7 8.9.1.8 8.9.1.98.9.2.1 8.9.2.2 8.9.2.3 8.9.2.4 8.9.2.5 8.9.2.6 8.9.2.7 8.9.2.8 8.9.2.9 8.9.3.18.9.3.2 8.9.3.3 8.9.3.4 8.9.3.5 8.9.3.6 8.9.3.7 8.9.3.8 8.9.3.9 8.9.4.1 8.9.4.28.9.4.3 8.9.4.4 8.9.4.5 8.9.4.6 8.9.4.7 8.9.4.8 8.9.4.9 8.9.5.1 8.9.5.2 8.9.5.38.9.5.4 8.9.5.5 8.9.5.6 8.9.5.7 8.9.5.8 8.9.5.9 8.9.6.1 8.9.6.2 8.9.6.3 8.9.6.48.9.6.5 8.9.6.6 8.9.6.7 8.9.6.8 8.9.6.9 8.9.7.1 8.9.7.2 8.9.7.3 8.9.7.4 8.9.7.58.9.7.6 8.9.7.7 8.9.7.8 8.9.7.9 8.9.8.1 8.9.8.2 8.9.8.3 8.9.8.4 8.9.8.5 8.9.8.68.9.8.7 8.9.8.8 8.9.8.9 8.9.9.1 8.9.9.2 8.9.9.3 8.9.9.4 8.9.9.5 8.9.9.6 8.9.9.78.9.9.8 8.9.9.9 9.1.1.1 9.1.1.2 9.1.1.3 9.1.1.4 9.1.1.5 9.1.1.6 9.1.1.7 9.1.1.89.1.1.9 9.1.2.1 9.1.2.2 9.1.2.3 9.1.2.4 9.1.2.5 9.1.2.6 9.1.2.7 9.1.2.8 9.1.2.99.1.3.1 9.1.3.2 9.1.3.3 9.1.3.4 9.1.3.5 9.1.3.6 9.1.3.7 9.1.3.8 9.1.3.9 9.1.4.19.1.4.2 9.1.4.3 9.1.4.4 9.1.4.5 9.1.4.6 9.1.4.7 9.1.4.8 9.1.4.9 9.1.5.1 9.1.5.29.1.5.3 9.1.5.4 9.1.5.5 9.1.5.6 9.1.5.7 9.1.5.8 9.1.5.9 9.1.6.1 9.1.6.2 9.1.6.39.1.6.4 9.1.6.5 9.1.6.6 9.1.6.7 9.1.6.8 9.1.6.9 9.1.7.1 9.1.7.2 9.1.7.3 9.1.7.49.1.7.5 9.1.7.6 9.1.7.7 9.1.7.8 9.1.7.9 9.1.8.1 9.1.8.2 9.1.8.3 9.1.8.4 9.1.8.59.1.8.6 9.1.8.7 9.1.8.8 9.1.8.9 9.1.9.1 9.1.9.2 9.1.9.3 9.1.9.4 9.1.9.5 9.1.9.69.1.9.7 9.1.9.8 9.1.9.9 9.2.1.1 9.2.1.2 9.2.1.3 9.2.1.4 9.2.1.5 9.2.1.6 9.2.1.79.2.1.8 9.2.1.9 9.2.2.1 9.2.2.2 9.2.2.3 9.2.2.4 9.2.2.5 9.2.2.6 9.2.2.7 9.2.2.89.2.2.9 9.2.3.1 9.2.3.2 9.2.3.3 9.2.3.4 9.2.3.5 9.3.3.6 9.2.3.7 9.2.3.8 9.2.3.99.2.4.1 9.2.4.2 9.2.4.3 9.2.4.4 9.2.4.5 9.2.4.6 9.2.4.7 9.2.4.8 9.2.4.9 9.2.5.19.2.5.2 9.2.5.3 9.2.5.4 9.2.5.5 9.2.5.6 9.2.5.7 9.2.5.8 9.2.5.9 9.2.6.1 9.2.6.29.2.6.3 9.2.6.4 9.2.6.5 9.2.6.6 9.2.6.7 9.2.6.8 9.2.6.9 9.2.7.1 9.2.7.2 9.2.7.39.2.7.4 9.2.7.5 9.2.7.6 9.2.7.7 9.2.7.8 9.2.7.9 9.2.8.1 9.2.8.2 9.2.8.3 9.2.8.49.2.8.5 9.2.8.6 9.2.8.7 9.2.8.8 9.2.8.9 9.2.9.1 9.2.9.2 9.2.9.3 9.2.9.4 9.2.9.59.2.9.6 9.2.9.7 9.2.9.8 9.2.9.9 9.3.1.1 9.3.1.2 9.3.1.3 9.3.1.4 9.3.1.5 9.3.1.69.3.1.7 9.3.1.8 9.3.1.9 9.3.2.1 9.3.2.2 9.3.2.3 9.3.2.4 9.3.2.5 9.3.2.6 9.3.2.79.3.2.8 9.3.2.9 9.3.3.1 9.3.3.2 9.3.3.3 9.3.3.4 9.3.3.5 9.3.3.6 9.3.3.7 9.3.3.89.3.3.9 9.3.4.1 9.3.4.2 9.3.4.3 9.3.4.4 9.3.4.5 9.3.4.6 9.3.4.7 9.3.4.8 9.3.4.99.3.5.1 9.3.5.2 9.3.5.3 9.3.5.4 9.3.5.5 9.3.5.6 9.3.5.7 9.3.5.8 9.3.5.9 9.3.6.19.3.6.2 9.3.6.3 9.3.6.4 9.3.6.5 9.3.6.6 9.3.6.7 9.3.6.8 9.3.6.9 9.3.7.1 9.3.7.29.3.7.3 9.3.7.4 9.3.7.5 9.3.7.6 9.3.7.7 9.3.7.8 9.3.7.9 9.3.8.1 9.3.8.2 9.3.8.39.3.8.4 9.3.8.5 9.3.8.6 9.3.8.7 9.3.8.8 9.3.8.9 9.3.9.1 9.3.9.2 9.3.9.3 9.3.9.49.3.9.5 9.3.9.6 9.3.9.7 9.3.9.8 9.3.9.9 9.4.1.1 9.4.1.2 9.4.1.3 9.4.1.4 9.4.1.59.4.1.6 9.4.1.7 9.4.1.8 9.4.1.9 9.4.2.1 9.4.2.2 9.4.2.3 9.4.2.4 9.4.2.5 9.4.2.69.4.2.7 9.4.2.8 9.4.2.9 9.4.3.1 9.4.3.2 9.4.3.3 9.4.3.4 9.4.3.5 9.4.3.6 9.4.3.79.4.3.8 9.4.3.9 9.4.4.1 9.4.4.2 9.4.4.3 9.4.4.4 9.4.4.5 9.4.4.6 9.4.4.7 9.4.4.89.4.4.9 9.4.5.1 9.4.5.2 9.4.5.3 9.4.5.4 9.4.5.5 9.4.5.6 9.4.5.7 9.4.5.8 9.4.5.99.4.6.1 9.4.6.2 9.4.6.3 9.4.6.4 9.4.6.5 9.4.6.6 9.4.6.7 9.4.6.8 9.4.6.9 9.4.7.19.4.7.2 9.4.7.3 9.4.7.4 9.4.7.5 9.4.7.6 9.4.7.7 9.4.7.8 9.4.7.9 9.4.8.1 9.4.8.29.4.8.3 9.4.8.4 9.4.8.5 9.4.8.6 9.4.8.7 9.4.8.8 9.4.8.9 9.4.9.1 9.4.9.2 9.4.9.39.4.9.4 9.4.9.5 9.4.9.6 9.4.9.7 9.4.9.8 9.4.9.9 9.5.1.1 9.5.1.2 9.5.1.3 9.5.1.49.5.1.5 9.5.1.6 9.5.1.7 9.5.1.8 9.5.1.9 9.5.2.1 9.5.2.2 9.5.2.3 9.5.2.4 9.5.2.59.5.2.6 9.5.2.7 9.5.2.8 9.5.2.9 9.5.3.1 9.5.3.2 9.5.3.3 9.5.3.4 9.5.3.5 9.5.3.69.5.3.7 9.5.3.8 9.5.3.9 9.5.4.1 9.5.4.2 9.5.4.3 9.5.4.4 9.5.4.5 9.5.4.6 9.5.4.79.5.4.8 9.5.4.9 9.5.5.1 9.5.5.2 9.5.5.3 9.5.5.4 9.5.5.5 9.5.5.6 9.5.5.7 9.5.5.89.5.5.9 9.5.6.1 9.5.6.2 9.5.6.3 9.5.6.4 9.5.6.5 9.5.6.6 9.5.6.7 9.5.6.8 9.5.6.99.5.7.1 9.5.7.2 9.5.7.3 9.5.7.4 9.5.7.5 9.5.7.6 9.5.7.7 9.5.7.8 9.5.7.9 9.5.8.19.5.8.2 9.5.8.3 9.5.8.4 9.5.8.5 9.5.8.6 9.5.8.7 9.5.8.8 9.5.8.9 9.5.9.1 9.5.9.2
表1續(xù)9.5.9.3 9.5.9.4 9.5.9.5 9.5.9.6 9.5.9.7 9.5.9.8 9.5.9.9 9.6.1.1 9.6.1.2 9.6.1.39.6.1.4 9.6.1.5 9.6.1.6 9.6.1.7 9.6.1.8 9.6.1.9 9.6.2.1 9.6.2.2 9.6.2.3 9.6.2.49.6.2.5 9.6.2.6 9.6.2.7 9.6.2.8 9.6.2.9 9.6.3.1 9.6.3.2 9.6.3.3 9.6.3.4 9.6.3.59.6.3.6 9.6.3.7 9.6.3.8 9.6.3.9 9.6.4.1 9.6.4.2 9.6.4.3 9.6.4.4 9.6.4.5 9.6.4 69.6.4.7 9.6.4.8 9.6.4.9 9.6.5.1 9.6.5.2 9.6.5.3 9.6.5.4 9.6.5.5 9.6.5.6 9.6.5.79.6.5.8 9.6.5.9 9.6.6.1 9.6.6.2 9.6.6.3 9.6.6.4 9.6.6.5 9.6.6.6 9.6.6.7 9.6.6.89.6.6.9 9.6.7.1 9.6.7.2 9.6.7.3 9.6.7.4 9.6.7.5 9.6.7.6 9.6.7.7 9.6.7.8 9.6.7.99.6.8.1 9.6.8.2 9.6.8.3 9.6.8.4 9.6.8.5 9.6.8.6 9.6.8.7 9.6.8.8 9.6.8.9 9.6.9.19.6.9.2 9.6.9.3 9.6.9.4 9.6.9.5 9.6.9.6 9.6.9.7 9.6.9.8 9.6.9.9 9.7.1.1 9.7.1.29.7.1.3 9.7.1.4 9.7.1.5 9.7.1.6 9.7.1.7 9.7.1.8 9.7.1.9 9.7.2.1 9.7.2.2 9.7.2.39.7.2.4 9.7.2.5 9.7.2.6 9.7.2.7 9.7.2.8 9.7.2.9 9.7.3.1 9.7.3.2 9.7.3.3 9.7.3.49.7.3.5 9.7.3.6 9.7.3.7 9.7.3.8 9.7.3.9 9.7.4.1 9.7.4.2 9.7.4.3 9.7.4.4 9.7.4.59.7.4.6 9.7.4.7 9.7.4.8 9.7.4.9 9.7.5.1 9.7.5.2 9.7.5.3 9.7.5.4 9.7.5.5 9.7.5.69.7.5.7 9.7.5.8 9.7.5.9 9.7.6.1 9.7.6.2 9.7.6.3 9.7.6.4 9.7.6.5 9.7.6.6 9.7.6.79.7.6.8 9.7.6.9 9.7.7.1 9.7.7.2 9.7.7.3 9.7.7.4 9.7.7.5 9.7.7.6 9.7.7.7 9.7.7.89.7.7.9 9.7.8.1 9.7.8.2 9.7.8.3 9.7.8.4 9.7.8.5 9.7.8.6 9.7.8.7 9.7.8.8 9.7.8.99.7.9.1 9.7.9.2 9.7.9.3 9.7.9.4 9.7.9.5 9.7.9.6 9.7.9.7 9.7.9.8 9.7.9.9 9.8.1.19.8.1.2 9.8.1.3 9.8.1.4 9.8.1.5 9.8.1.6 9.8.1.7 9.8.1.8 9.8.1.9 9.8.2.1 9.8.2.29.8.2.3 9.8.2.4 9.8.2.5 9.8.2.6 9.8.2.7 9.8.2.8 9.8.2.9 9.8.3.1 9.8.3.2 9.8.3.39.8.3.4 9.8.3.5 9.8.3.6 9.8.3.7 9.8.3.8 9.8.3.9 9.8.4.1 9.8.4.2 9.8.4.3 9.8.4.49.8.4.5 9.8.4.6 9.8.4.7 9.8.4.8 9.8.4.9 9.8.5.1 9.8.5.2 9.8.5.3 9.8.5.4 9.8.5.59.8.5.6 9.8.5.7 9.8.5.8 9.8.5.9 9.8.6.1 9.8.6.2 9.8.6.3 9.8.6.4 9.8.6.5 9.8.6.69.8.6.7 9.8.6.8 9.8.6.9 9.8.7.1 9.8.7.2 9.8.7.3 9.8.7.4 9.8.7.5 9.8.7.6 9.8.7.79.8.7.8 9.8.7.9 9.8.8.1 9.8.8.2 9.8.8.3 9.8.8.4 9.8.8.5 9.8.8.6 9.8.8.7 9.8.8.89.8.8.9 9.8.9.1 9.8.9.2 9.8.9.3 9.8.9.4 9.8.9.5 9.8.9.6 9.8.9.7 9.8.9.8 9.8.9.99.9.1.1 9.9.1.2 9.9.1.3 9.9.1.4 9.9.1.5 9.9.1.6 9.9.1.7 9.9.1.8 9.9.1.9 9.9.2.19.9.2.2 9.9.2.3 9.9.2.4 9.9.2.5 9.9.2.6 9.9.2.7 9.9.2.8 9.9.2.9 9.9.3.1 9.9.3.29.9.3.3 9.9.3.4 9.9.3.5 9.9.3.6 9.9.3.7 9.9.3.8 9.9.3.9 9.9.4.1 9.9.4.2 9.9.4.39.9.4.4 9.9.4.5 9.9.4.6 9.9.4.7 9.9.4.8 9.9.4.9 9.9.5.1 9.9.5.2 9.9.5.3 9.9.5.49.9.5.5 9.9.5.6 9.9.5.7 9.9.5.8 9.9.5.9 9.9.6.1 9.9.6.2 9.9.6.3 9.9.6.4 9.9.6.59.9.6.6 9.9.6.7 9.9.6.8 9.9.6.9 9.9.7.1 9.9.7.2 9.9.7.3 9.9.7.4 9.9.7.5 9.9.7.69.9.7.7 9.9.7.8 9.9.7.9 9.9.8.1 9.9.8.2 9.9.8.3 9.9.8.4 9.9.8.5 9.9.8.6 9.9.8.79.9.8.8 9.9.8.9 9.9.9.1 9.9.9.2 9.9.9.3 9.9.9.4 9.9.9.5 9.9.9.6 9.9.9.7 9.9.9.89.9.9.9
另一組優(yōu)選的化合物在表2中命名并采用下面的慣例，通過(guò)指派給式I的變量的數(shù)字來(lái)指定M1.Y/Y’.V/Z/W。由于這些化合物作為非對(duì)映體混合物或作為單一的立體異構(gòu)體是生物活性的，顯示這些化合物而未有立體化學(xué)方面的描述。M1為變量，其表示具有特定羥基的式M-H化合物，該羥基可用基團(tuán)P(O)[Y-CH(V)CH(Z)CH(W)-Y’]磷酸化制備式I化合物或M1為表示式M-PO3＝的膦酸的變量，M-PO3＝通過(guò)用Y-CH(V)CH(Z)CH(W)-Y’取代PO3＝的兩個(gè)氧被轉(zhuǎn)化為式I化合物。
變量M1的結(jié)構(gòu)與上述相同。
變重Y/Y’1)Y＝NH；Y’＝氧2)Y＝氧；Y’＝NH3)Y＝NH；Y’＝NH4)Y＝N-CH3；Y’＝氧5)Y＝氧；Y’＝NCH36)Y＝N-CH2CH3；Y’＝氧7)Y＝N-苯基；Y’＝氧8)Y＝N-異丙基；Y’＝氧9)Y＝氧；Y’＝N-CH2CH3變量V/Z/WV/Z/W1組1)V＝苯基；Z＝甲基；W＝氫2)V＝3，5-二氯苯基；Z＝甲基；W＝氫3)V＝4-吡啶基；Z＝甲基；W＝氫
4)V＝苯基；Z＝甲氧基；W＝氫5)V＝3，5-二氯苯基；Z＝甲氧基；W＝氫6)V＝4-吡啶基；Z＝甲氧基；W＝氫7)V＝苯基；Z＝氫；W＝苯基8)V＝3，5-二氯苯基；Z＝氫；W＝3，5-二氯苯基9)V＝4-吡啶基；Z＝氫；W＝4-吡啶基變量V/Z/WV/Z/W2組1)V＝苯基；Z＝NHAc；W＝氫2)V＝3，5-二氯苯基；Z＝NHAc；W＝氫3)V＝4-吡啶基；Z＝NHAc；W＝氫4)V＝苯基；Z＝氫；W＝甲基5)V＝3，5-二氯苯基；Z＝氫；W＝甲基6)V＝4-吡啶基；Z＝氫；W＝甲基7)V＝苯基；Z＝羥基；W＝氫8)V＝3，5-二氯苯基；Z＝羥基；W＝氫9)V＝4-吡啶基；Z＝羥基；W＝氫變量V/Z/WV/Z/W3組1)V＝氫；Z＝CH2OH；W＝氫2)V＝氫；Z＝CH2OC(O)CH3；W＝氫3)V＝氫；Z＝CH2OC(O)OCH3；W＝氫4)V＝甲基；Z＝CH2OH；W＝氫5)V＝甲基；Z＝CH2OC(O)CH3；W＝氫6)V＝甲基；Z＝CH2OC(O)OCH3；W＝氫7)Z＝氫；V和W＝-CH2-CH(OH)CH2-8)Z＝氫；V和W＝-CH2-CH(OAc)CH2-9)Z＝氫；V和W＝-CH2-CH(OCO2CH2CH3)CH2-優(yōu)選的化合物為使用M11組和V/Z/W1組列于表2中的化合物。例如，化合物1.1.3表示M11組的結(jié)構(gòu)1，即3TC；變量Y/Y’的結(jié)構(gòu)1，即Y＝NH和Y’＝氧；V/Z/W1組的結(jié)構(gòu)3，即V＝4-吡啶基；Z＝甲基和W＝氫。因此，化合物1.1.3為具有連接于伯羥基的P(O)(N(H)-CH(4-吡啶基)CH(CH3)CH2O)的3TC。
優(yōu)選的化合物也為使用M11組和V/Z/W2組列于表2中的化合物。優(yōu)選的化合物也為使用M11組和V/Z/W3組列于表2中的化合物。優(yōu)選的化合物也為使用M12組和V/Z/W1組列于表2中的化合物。優(yōu)選的化合物也為使用M12組和V/Z/W2組列于表2中的化合物。優(yōu)選的化合物也為使用M12組和V/Z/W3組列于表2中的化合物。優(yōu)選的化合物也為使用M13組和V/Z/W1組列于表2中的化合物。優(yōu)選的化合物也為使用M13組和V/Z/W2組列于表2中的化合物。優(yōu)選的化合物也為使用M13組和V/Z/W3組列于表2中的化合物。
表21.1.1 1.1.2 1.1.3 1.1.4 1.1.5 1.1.6 1.1.7 1.1.8 1.1.9 1.2.1 1.2.2 1.2.31.2.4 1.2.5 1.2.6 1.2.7 1.2.8 1.2.9 1.3.1 1.3.2 1.3.3 1.3.4 1.3.5 1.3.61.3.7 1.3.8 1.3.9 1.4.1 1.4.2 1.4.3 1.4.4 1.4.5 1.4.6 1.4.7 1.4.8 1.4.91.5.1 1.5.2 1.5.3 1.5.4 1.5.5 1.5.6 1.5.7 1.5.8 1.5.9 1.6.1 1.6.2 1.6.31.6.4 1.6.5 1.6.6 1.6.7 1.6.8 1.6.9 1.7.1 1.7.2 1.7.3 1.7.4 1.7.5 1.7.61.7.7 1.7.8 1.7.9 1.8.1 1.8.2 1.8.3 1.8.4 1.8.5 1.8.6 1.8.7 1.8.8 1.8.91.9.1 1.9.2 1.9.3 1.9.4 1.9.5 1.9.6 1.9.7 1.9.8 1.9.9 2.1.1 2.1.2 2.1.32.1.4 2.1.5 2.1.6 2.1.7 2.1.8 2.1.9 2.2.1 2.2.2 2.2.3 2.2.4 2.2.5 2.2.62.2.7 2.2.8 2.2.9 2.3.1 2.3.2 2.3.3 2.3.4 2.3.5 2.3.6 2.3.7 2.3.8 2.3.92.4.1 2.4.2 2.4.3 2.4.4 2.4.5 2.4.6 2.4.7 2.4.8 2.4.9 2.5.1 2.5.2 2.5.32.5.4 2.5.5 2.5.6 2.5.7 2.5.8 2.5.9 2.6.1 2.6.2 2.6.3 2.6.4 2.6.5 2.6.62.6.7 2.6.8 2.6.9 2.7.1 2.7.2 2.7.3 2.7.4 2.7.5 2.7.6 2.7.7 2.7.8 2.7.92.8.1 2.8.2 2.8.3 2.8.4 2.8.5 2.8.6 2.8.7 2.8.8 2.8.9 2.9.1 2.9.2 2.9.32.9.4 2.9.5 2.9.6 2.9.7 2.9.8 2.9.9 3.1.1 3.1.2 3.1.3 3.1.4 3.1.5 3.1.63.1.7 3.1.8 3.1.9 3.2.1 3.2.2 3.2.3 3.2.4 3.2.5 3.2.6 3.2.7 3.2.8 3.2.93.3.1 3.3.2 3.3.3 3.3.4 3.3.5 3.3.6 3.3.7 3.3.8 3.3.9 3.4.1 3.4.2 3.4.33.4.4 3.4.5 3.4.6 3.4.7 3.4.8 3.4.9 3.5.1 3.5.2 3.5.3 3.5.4 3.5.5 3.5.63.5.7 3.5.8 3.5.9 3.6.1 3.6.2 3.6.3 3.6.4 3.6.5 3.6.6 3.6.7 3.6.8 3.6.93.7.1 3.7.2 3.7.3 3.7.4 3.7.5 3.7.6 3.7.7 3.7.8 3.7.9 3.8.1 3.8.2 3.8.33.8.4 3.8.5 3.8.6 3.8.7 3.8.8 3.8.9 3.9.1 3.9.2 3.9.3 3.9.4 3.9.5 3.9.63.9.7 3.9.8 3.9.9 4.1.1 4.1.2 4.1.3 4.1.4 4.1.5 4.1.6 4.1.7 4.1.8 4.1.94.2.1 4.2.2 4.2.3 4.2.4 4.2.5 4.2.6 4.2.7 4.2.8 4.2.9 4.3.1 4.3.2 4.3.34.3.4 4.3.5 4.3.6 4.3.7 4.3.8 4.3.9 4.4.1 4.4.2 4.4.3 4.4.4 4.4.5 4.4.64.4.7 4.4.8 4.4.9 4.5.1 4.5.2 4.5.3 4.5.4 4.5.5 4.5.6 4.5.7 4.5.8 4.5.94.6.1 4.6.2 4.6.3 4.6.4 4.6.5 4.6.6 4.6.7 4.6.8 4.6.9 4.7.1 4.7.2 4.7.34.7.4 4.7.5 4.7.6 4.7.7 4.7.8 4.7.9 4.8.1 4.8.2 4.8.3 4.8.4 4.8.5 4.8.64.8.7 4.8.8 4.8.9 4.9.1 4.9.2 4.9.3 4.9.4 4.9.5 4.9.6 4.9.7 4.9.8 4.9.95.1.1 5.1.2 5.1.3 5.1.4 5.1.5 5.1.6 5.1.7 5.1.8 5.1.9 5.2.1 5.2.2 5.2.35.2.4 5.2.5 5.2.6 5.2.7 5.2.8 5.2.9 5.3.1 5.3.2 5.3.3 5.3.4 5.3.5 5.3.65.3.7 5.3.8 5.3.9 5.4.1 5.4.2 5.4.3 5.4.4 5.4.5 5.4.6 5.4.7 5.4.8 5.4.95.5.1 5.5.2 5.5.3 5.5.4 5.5.5 5.5.6 5.5.7 5.5.8 5.5.9 5.6.1 5.6.2 5.6.35.6.4 5.6.5 5.6.6 5.6.7 5.6.8 5.6.9 5.7.1 5.7.2 5.7.3 5.7.4 5.7.5 5.7.65.7.7 5.7.8 5.7.9 5.8.1 5.8.2 5.8.3 5.8.4 5.8.5 5.8.6 5.8.7 5.8.8 5.8.95.9.1 5.9.2 5.9.3 5.9.4 5.9.5 5.9.6 5.9.7 5.9.8 5.9.9 6.1.1 6.1.2 6.1.36.1.4 6.1.5 6.1.6 6.1.7 6.1.8 6.1.9 6.2.1 6.2.2 6.2.3 6.2.4 6.2.5 6.2.66.2.7 6.2.8 6.2.9 6.3.1 6.3.2 6.3.3 6.3.4 6.3.5 6.3.6 6.3.7 6.3.8 6.3.96.4.1 6.4.2 6.4.3 6.4.4 6.4.5 6.4.6 6.4.7 6.4.8 6.4.9 6.5.1 6.5.2 6.5.36.5.4 6.5.5 6.5.6 6.5.7 6.5.8 6.5.9 6.6.1 6.6.2 6.6.3 6.6.4 6.6.5 6.6.66.6.7 6.6.8 6.6.9 6.7.1 6.7.2 6.7.3 6.7.4 6.7.5 6.7.6 6.7.7 6.7.8 6.7.96.8.1 6.8.2 6.8.3 6.8.4 6.8.5 6.8.6 6.8.7 6.8.8 6.8.9 6.9.1 6.9.2 6.9.36.9.4 6.9.5 6.9.6 6.9.7 6.9.8 6.9.9 7.1.1 7.1.2 7.1.3 7.1.4 7.1.5 7.1.67.1.7 7.1.8 7.1.9 7.2.1 7.2.3 7.2.3 7.2.4 7.2.5 7.2.6 7.2.7 7.2.8 7.2.97.3.1 7.3.2 7.3.3 7.3.4 7.3.5 7.3.6 7.3.7 7.3.8 7.3.9 7.4.1 7.4.2 7.4.37.4.4 7.4.5 7.4.6 7.4.7 7.4.8 7.4.9 7.5.1 7.5.2 7.5.3 7.5.4 7.5.5 7.5.67.5.7 7.5.8 7.5.9 7.6.1 7.6.2 7.6.3 7.6.4 7.6.5 7.6.6 7.6.7 7.6.8 7.6.97.7.1 7.7.2 7.7.3 7.7.4 7.7.5 7.7.6 7.7.7 7.7.8 7.7.9 7.8.1 7.8.2 7.8.3
表2續(xù)7.8.4 7.8.5 7.8.6 7.8.7 7.8.8 7.8.9 7.9.1 7.9.2 7.9.3 7.9.4 7.9.5 7.9.67.9.7 7.9.8 7.9.9 8.1.1 8.1.2 8.1.3 8.1.4 8.1.5 8.1.6 8.1.7 8.1.8 8.1.98.2.1 8.2.2 8.2.3 8.2.4 8.2.5 8.2.6 8.2.7 8.2.8 8.2.9 8.3.1 8.3.2 8.3.38.3.4 8.3.5 8.3.6 8.3.7 8.3.8 8.3.9 8.4.1 8.4.2 8.4.3 8.4.4 8.4.5 8.4.68.4.7 8.4.8 8.4.9 8.5.1 8.5.2 8.5.3 8.5.4 8.5.5 8.5.6 8.5.7 8.5.8 8.5.98.6.1 8.6.2 8.6.3 8.6.4 8.6.5 8.6.6 8.6.7 8.6.8 8.6.9 8.7.1 8.7.2 8.7.38.7.4 8.7.5 8.7.6 8.7.7 8.7.8 8.7.9 8.8.1 8.8.2 8.8.3 8.8.4 8.8.5 8.8.68.8.7 8.8.8 8.8.9 8.9.1 8.9.2 8.9.3 8.9.4 8.9.5 8.9.6 8.9.7 8.9.8 8.9.99.1.1 9.1.2 9.1.3 9.1.4 9.1.5 9.1.6 9.1.7 9.1.8 9.1.9 9.2.1 9.2.2 9.2.39.2.4 9.2.5 9.2.6 9.2.7 9.2.8 9.2.9 9.3.1 9.3.2 9.3.3 9.3.4 9.3.5 9.3.69.3.7 9.3.8 9.3.9 9.4.1 9.4.2 9.4.3 9.4.4 9.4.5 9.4.6 9.4.7 9.4.8 9.4.99.5.1 9.5.2 9.5.3 9.5.4 9.5.5 9.5.6 9.5.7 9.5.8 9.5.9 9.6.1 9.6.2 9.6.39.6.4 9.6.5 9.6.6 9.6.7 9.6.8 9.6.9 9.7.1 9.7.2 9.7.3 9.7.4 9.7.5 9.7.69.7.7 9.7.8 9.7.9 9.8.1 9.8.2 9.8.3 9.8.4 9.8.5 9.8.6 9.8.7 9.8.8 9.8.99.9.1 9.9.2 9.9.3 9.9.4 9.9.5 9.9.6 9.9.7 9.9.8 9.9.9
式I化合物的合成本發(fā)明包括的化合物的合成包括I)前藥的合成；和II)取代的1，3-羥基胺和1，3-二胺的合成1)前藥的合成以下關(guān)于制備前藥的方法闡明用于制備本發(fā)明前藥的通法，該方法適用于所有含有磷酸酯、膦酸酯和氨基磷酸酯的藥物。在藥物的不同合成階段能夠引入前藥。因?yàn)檫@些基團(tuán)對(duì)多種反應(yīng)條件具有共同的敏感性，最經(jīng)常在稍后的階段制備它們。通過(guò)柱層析和/或結(jié)晶的聯(lián)合分離非對(duì)映體，或通過(guò)手性的活性磷酰胺中間體的對(duì)映選擇性合成，能夠制備在磷中心含有單一異構(gòu)體的光學(xué)純前藥。
前藥的制備另外構(gòu)成1)借助活性P(V)中間體合成；2)借助活性P(III)中間體合成；3)借助膦酸酯二酸的合成和4)其它多種方法。在此描述的一些合成通法用于合成磷酸酯和膦酸酯。然而，當(dāng)適宜保護(hù)和/或取代前藥部分中的氮時(shí)，在氨基磷酸酯情況下這些方法也可同樣應(yīng)用。
I.1借助活性P(V)中間體合成 I.1.a.活性P(V)中間體的合成氨基磷酸酯核苷酸前藥的最優(yōu)選合成為在強(qiáng)堿例如氫化鈉或氫化鋰存下，MH羥基與4-硝基苯基氨基磷酸酯(其中L為硝基苯基)的反應(yīng)。通過(guò)市場(chǎng)上可得到的4-硝基苯基氯代磷酸酯(phosphorochloridate)與取代的1，3-氨基醇或1，3-二胺反應(yīng)，制備活性前體。通過(guò)使醇與相應(yīng)的活性氨基磷酸酯前體偶合，一般可完成氨基磷酸酯前藥的合成，例如，氯代氨基磷酸酯(L＝氯)加成到核苷的5’-羥基上是制備氨基磷酸酯熟知的方法(Stepanov等，Tetrahedron Lett.，1989，30，5125)。通過(guò)幾種熟知的方法能夠制備活性前體。從取代的1，3-丙二胺或1，3-氨基醇能夠制備用于合成前藥的氯代氨基磷酸酯(Kisten等，J.Org.Chem.，1997，62，6882)。通過(guò)氧化相應(yīng)的P(III)中間體，也可制備氯代氨基磷酸酯(Ozaki等，Bull.Chem.Soc.Jpn.，1989，62，3869)，其可通過(guò)適當(dāng)保護(hù)和/或取代的1，3-氨基醇或1，3-二胺與三氯化磷反應(yīng)得到。或者通過(guò)用三氨氧化磷處理取代的1，3-氨基醇或1，3-二胺，制備氯代氨基磷酸酯藥物(Welch等，J.Org.Chem.，1990，55，5991)。從相應(yīng)的亞磷酸酯也可就地生成氯代氨基磷酸酯類(lèi)(Jung等，Nucleosides and Nucleotides，1994，13，1597)。從氨基磷酸制備的氟代磷酸酯中間體也可用作制備環(huán)狀前藥的前體(Watanabe等，Tetrahedron Lett.，1988，29，5763)。
在氨基磷酸酯前藥的情況下，氨基磷酸酯(L＝NRR’)也能夠用作合成磷酸酯的中間體，其中氮被取代或以保護(hù)形式存在。單烷基或二烷基氨基磷酸酯(Watanabe等，Chem.Pharm.Bull.，1990，38，562)、三唑基氨基磷酸酯(Yamakage等，Tetrahedron，1989，45，5459)和吡咯烷基氨基磷酸酯(Nakayama等，J.Am.Chem.Soc.，1990，1126936)為一些已知用于制備磷酸酯的中間體。另一種有效的磷酸化方法是金屬催化下2-唑酮的環(huán)狀氯代氨基磷酸酯加合物的加成.在仲羥基存在下，這種類(lèi)型中間體在伯羥基上的磷酸化達(dá)到高選擇性(Nagamatsu等，Tetrahedron Lett.，1987，28，2375).通過(guò)氯代氨基磷酸酯與所述胺反應(yīng)或通過(guò)形成相應(yīng)的亞磷酰胺隨后氧化，得到這些藥物。
I.1.b.手性的活性氨基磷酸酯的合成用例如市場(chǎng)上可得到的二氯代磷酸酯R-OP(O)Cl2，其中RO為離去基團(tuán)，優(yōu)選為吸電基團(tuán)取代的芳基例如硝基或氯，將對(duì)映體純的取代1，3-氨基醇或1，3-二胺磷酸化，產(chǎn)生兩種非對(duì)映體中間體，它們能夠通過(guò)柱層析法和/或結(jié)晶法的聯(lián)合分離。這樣的方法也可用于制備手性氯代氨基磷酸酯。通過(guò)使用光學(xué)純的胺作為手性助劑，能夠得到手性氨基磷酸酯中間體。已知在磷酸酯形成過(guò)程中，該類(lèi)型中間體經(jīng)歷立體特異性取代(Nakayama等，J.Am.Chem.Soc.，1990，112，6936)。通過(guò)比較31P NMR譜，能夠測(cè)定磷原子的相對(duì)構(gòu)型。平伏的磷酰氧基部分(反式異構(gòu)體)的化學(xué)位移總是比直立的異構(gòu)體(順式-異構(gòu)體)中的一部分在更高的磁場(chǎng)(Verkade等，J.Org.Chem.，1977，42，1549)。
順式 反式I.1.c.使用活性氨基磷酸酯的前藥的合成在有機(jī)堿的存在下，實(shí)現(xiàn)活性氨基磷酸酯與醇(MH)的偶合。例如，在堿如吡啶或N-甲基咪唑存在下，如在先前部分中描述的那樣合成的氯代氨基磷酸酯與醇反應(yīng)。在一些情況中，通過(guò)從氯代就地生成碘代氨基磷酸酯增強(qiáng)磷酸化(Stomberg等，Nucleosides & Nucleotides.，1987，5815)。在堿如CsF或n-BuLi存在下，氟代磷酸酯中間體也用于磷酸化反應(yīng)來(lái)生成環(huán)狀前藥(Watanabe等，Tetrahedron Lett.，1988，29，5763)。經(jīng)過(guò)渡金屬催化，氨基磷酸酯中間體顯示偶合反應(yīng)(Nagamatsu等，Tetrahedron Lett.，1987，28，2375)。
在酸存在下，氨基磷酸酯中間體的光學(xué)純非對(duì)映體與藥物的羥基反應(yīng)，經(jīng)直接SN2(P)反應(yīng)產(chǎn)生光學(xué)純磷酸酯前藥(Nakayama等，J.Am.Chem.Soc.，1990，112，6936)?；蛘?，光學(xué)純氨基磷酸酯前體與氟源，優(yōu)選為氟化銫或四丁基氟化銨反應(yīng)，產(chǎn)生更具活性的氟代磷酸酯，它與藥物的羥基反應(yīng)，得到在磷原子具有光學(xué)純的前藥構(gòu)型(Ogilvie等，J.Am.Chem.Soc.，1977，99，1277)。
I.2.借助亞磷酰胺中間體合成 I.2.a.活性P(III)中間體的合成使用環(huán)狀磷酸化試劑完成羥基和氨基的磷酸化，其中該試劑處于P(III)氧化態(tài)。一個(gè)優(yōu)選的磷酸化試劑為氯代亞磷酰胺(L’氯代)。在溫和的條件下，通過(guò)三氯化磷與取代1，3-氨基醇或1，3-二胺反應(yīng)，制備環(huán)狀氯代亞磷酰胺(Wada等，Tetrahedron Lett.，1990，31，6363)?；蛘邅喠柞０纺軌蛴米髁姿峄噭?Beaucage等，Tetrahedron，1993，49，6123)。通過(guò)使環(huán)狀氯代亞磷酰胺與N，N-二烷基胺反應(yīng)(Perich等，Aust.J.Chem.，1990，43，1623；Perich等，Synthesis，1988，2，142)或通過(guò)市場(chǎng)上可得到的氯代二烷基氨基磷酸酯與取代丙基-1，3-氨基醇或1，3-二胺反應(yīng)，能夠制備適宜取代的亞磷酰胺。
I.2.b.手性的活性P(III)中間體的合成在使用不對(duì)稱(chēng)1，3-氨基醇或1，3-二胺的情況中，人們期待環(huán)狀亞磷酰胺形成手性異構(gòu)體的混合物。當(dāng)使用光學(xué)活性純氨基醇或二胺時(shí)，人們期待在磷原子上具有直立和平伏的離去基團(tuán)(NRR’)的兩種穩(wěn)定的非對(duì)映體的可層析分離的混合物(Brown等，Tet.，1990，46，4877)。通過(guò)層析分離，一般能夠得到純的非對(duì)映體。通過(guò)經(jīng)光學(xué)活性胺手性誘導(dǎo)，也可制備這些中間體。
I.2.c.使用活性亞磷酰胺合成前藥在有機(jī)堿(例如三乙胺、吡啶等)存在下，適宜取代的氯代亞磷酰胺用于核苷上醇的磷酸化?；蛘撸谂己洗龠M(jìn)劑例如四唑或三氟乙酸苯并咪唑存在下，通過(guò)使核苷與氨基磷酸酯偶合，能夠得到亞磷酰胺(Hayakawa等，J.Org.Chem.，1996，61，7996)。因?yàn)榇寂c氯代亞磷酰胺或亞磷酰胺的縮合為SN2(P)反應(yīng)，期待產(chǎn)物具有轉(zhuǎn)化了的構(gòu)型。這使之用于環(huán)狀亞磷酰胺前藥的立體選擇合成。磷酸化反應(yīng)的異構(gòu)體混合物也能夠平衡(例如熱力學(xué)平衡)于熱力學(xué)更穩(wěn)定的異構(gòu)體。
使用氧化劑例如分子氧或叔丁基過(guò)氧化氫，將生成的亞磷酰胺前藥接著氧化為相應(yīng)的氨基磷酸酯前藥(Ozaki等，Tetrahedron Lett.，1989，30，5899)。人們期待光學(xué)純P(III)中間體的氧化以便立體選擇地提供光學(xué)活性前藥(Mikolajczyk等，J.Org.Chem.，1978，43，2132.Cullis，P.M.J.Chem.Soc.Chem.Commun.，1984，1510，Verfurth等，Chem.Ber.，1991，129，1627)。
I.3.借助二酸合成氨基磷酸酯前藥 通過(guò)使相應(yīng)的二氯代磷酸酯與1，3-氨基醇或1，3-二胺反應(yīng)，合成式I前藥(Khamnei等，J.Med.Chem.，1996，394109)。例如，在堿(例如吡啶、三乙胺等)存在下，二氯代磷酸酯與取代1，3-氨基醇或二胺反應(yīng)，得到式I化合物。這些條件也適用于合成環(huán)磷酰胺類(lèi)似物，其中市場(chǎng)上可得到的雙(2-氯代乙基)氨基磷酸二氯化物與相應(yīng)的取代1，3-氨基醇或1，3-二胺偶合。
從相應(yīng)的酸和氯化劑例如亞硫酰氯(Starrett等，J.Med.Chem.，1994，1857)、草酰氯(Stowell等，Tetrahedron Lett.，1990，31，3261)和五氯化磷(Quast等，Synthesis，1974，490)，能夠制備這樣的活性二氯化物中間體?；蛘撸瑥亩坠柰榛?Bhongle等，Synth.Commun.，1987，171071)和二烷基酯(Still等，Tetrahedron Lett.，1983，24，4405；Patois等，Bull.Soc.Chim.Fr.，1993，130485)也能夠生成這些二氯代磷酸酯。
或者，包括(但不局限于)碳二亞胺(Alexander等，Collect.Czech.Chem.Commun.，1994，591853；Casara等，Bioorg.Med.Chem.Lett.，1992，2，145；Ohashi等，Tetrahedron Lett.，1989，291189；Hoffman，M.，Synthesis，1988，62)和苯并三唑氧基三(二甲基氨基)鹽(Campagne等，Tetrahedron Lett.，1993，34，6743)在內(nèi)的酸偶合試劑也用于從磷酸酯或膦酸酯二酸開(kāi)始式I化合物的合成。
通過(guò)拆分(Pogatnic等，Tetrahedron Lett.，1997，38，3495)或通過(guò)手性導(dǎo)入(Taapken等，Tetrahedron Lett.，1995，36，6659；J.Org.Chem.，1998，63，8284)，能夠合成手性氨基磷酸酯前藥。
I.4.其它的方法使用環(huán)狀1’，3’-丙基氨基磷酸在三苯基膦和偶氮二羧酸二乙酯存在下，在Mitsunobu反應(yīng)條件下，也可以完成醇的磷酸化(Kimura等，Bull.Chem.Soc.Jpn.，1979，52，1191)。此外，通過(guò)在亞磷酸三乙酯存在下用磷酰氯把核苷轉(zhuǎn)化為二氯代物中間體，并用取代-1，3-氨基醇猝滅，能夠制備磷酸酯前藥(Farquhar等，J.Org.Chem.，1983，26，1153)。
通過(guò)制備氨基磷酸的環(huán)狀二酯與磺酰氯(優(yōu)選為8-喹啉磺酰氯)的混合酸酐且在堿(優(yōu)選為甲基咪唑)存在下使藥物的羥基反應(yīng)，也能夠?qū)崿F(xiàn)磷酸化(Takaku等，J.Org.Chem.，1982，47，4937)。另外，從通過(guò)手性拆分(Wynberg等，J.Org.Chem.，1985，50，4508)得到的手性環(huán)狀氨基磷酸起始，也是手性氨基磷酸酯前藥的一個(gè)來(lái)源。
III.取代1，3-羥基胺和1，3-二胺的合成由于天然來(lái)源化合物中這些官能團(tuán)的普遍存在的性質(zhì)，大量合成方法可用于制備取代1，3-羥基胺和1，3-二胺。以下是這些方法當(dāng)中的一些方法，它們由以下方法構(gòu)成1.取代1，3-羥基胺的合成；2.取代1，3-二胺的合成和3.手性取代1，3-羥基胺和1，3-二胺的合成。
III.1.取代1，3-羥基胺的合成3-芳基-3-羥基-丙-1-胺類(lèi)型前藥部分的合成通法包括芳基酯與烷基腈的羥醛縮合，隨后還原生成的取代苯甲酰基乙腈(Shih等，Heterocycles，1986，24，1599)。該方法也能夠適用于通過(guò)使用取代烷基腈形成2-取代氨基丙醇。在另一個(gè)方法中，通過(guò)在乙酸銨存在下丙二酸縮合，隨后還原生成的取代b-氨基酸，從芳醛合成3-芳基-3-氨基-丙-1-醇類(lèi)型前藥基團(tuán)。這兩種方法使得可引入多種的芳基取代(Shih等，Heterocycles，1978，9，1277)。在另一個(gè)方法中，從苯乙烯類(lèi)型化合物生成的1-氨基-1-芳基乙基二陰離子的-取代有機(jī)鋰化合物經(jīng)歷與羰基化合物的加成，通過(guò)羰基化合物的變體得到多種W、W’取代物(Barluenga等，J.Org.Chem.，1979，44，4798)。
已知大量合成方法用于制備外消旋或手性1，3-二醇。這些方法可用于通過(guò)轉(zhuǎn)化羥基官能團(tuán)成為離去基團(tuán)并用無(wú)水氨或需要的伯胺或仲胺處理，合成相應(yīng)的取代1，3-氨基醇或1，3-二胺(Corey等，TetrahedronLett.，1989，30，5207；Gao等，J.Org.Chem.，1988，53，4081)。在Mitsunobu類(lèi)型反應(yīng)條件下，從醇也可直接實(shí)現(xiàn)相似的轉(zhuǎn)化(Hughes，D.L.，Org.React.，1992，42)。
已知有多種合成方法用于制備以它們的外消旋或手性形式存在的以下類(lèi)型的1，3-二醇a)1-取代；b)2-取代和c)1，2-或1，3-成環(huán)。氨基醇合成期間或前藥合成后，式I的V、W、Z基團(tuán)的取代能夠被導(dǎo)入或修飾。
III.1a).1-取代1，3-二醇.
通過(guò)文獻(xiàn)中幾種熟知的方法，能夠合成1，3-二羥基化合物。1-羥基丙-3-醛的芳基Grignard加成得到1-芳基-取代丙-1，3-二醇。這個(gè)方法將使多種取代芳基鹵化物轉(zhuǎn)化為1-芳基取代-1，3-丙二醇成為可能(Coppi等，J.Org Chem.，1988，53，911)。通過(guò)1，3-二-4-烯的Heck偶合隨后還原并水解，芳基鹵化物能夠用于合成1-取代丙二醇(Sakamoto等，Tetrahedron Lett.，1992，33，6845)。通過(guò)對(duì)映選擇還原乙烯基酮和硼氫化或通過(guò)烯丙基醇的動(dòng)力學(xué)拆分，能夠生成取代1，3-二醇。通過(guò)乙烯基Grignard加成隨后硼氫化，多種芳醛能夠轉(zhuǎn)化為1-取代-1，3-二醇。通過(guò)叔丁基乙酸鋰加成隨后酯還原也能夠使用取代芳醛(Turner等，J.Org.Chem.，1990，55，4744)。在另一方法中，在催化不對(duì)稱(chēng)環(huán)氧化條件下，市場(chǎng)上可得到的肉桂醇能夠轉(zhuǎn)化為環(huán)氧醇。通過(guò)Red-Al還原這些環(huán)氧醇，得到對(duì)映體純的1，3-二醇(Gao等，J.Org.Chem.，1980，53，4081)。或者，通過(guò)手性硼烷還原羥基乙基芳基酮衍生物，能夠得到對(duì)映體純的1，3-二醇(Ramachandran等，Tetrahedron Lett.，1997，38，761)。通過(guò)形成N-氧化物隨后在乙酸酐條件下重排，能夠?qū)⑦拎せ?、喹啉、異喹啉?3-醇衍生物氧化為1-取代-1，3-二醇(Yamamoto等，Tetrahedron，1981，37，1871)。羥醛縮合為另一種充分描述的用于合成1，3-氧化的官能團(tuán)的方法(Mukaiyama，Org.React.，1982，28，203)。通過(guò)對(duì)映選擇還原羰基化合物、通過(guò)手性羥醛縮合或通過(guò)酶促動(dòng)力學(xué)拆分，也能夠制備手性取代二醇。
III.1b).2-取代1，3-二醇從市場(chǎng)上可得到的2-(羥基甲基)-1，3-丙二醇，能夠制備多種2-取代-1，3-二醇。借助二酸的脫羧隨后還原，季戊四醇能夠轉(zhuǎn)化為三醇(Werle等，Liebigs.Ann.Chem.，1986，944)，或者通過(guò)在已知條件下脫羧也能夠得到二醇-單羧酸衍生物(Iwata等，Tetrahedron Lett.，1987，28，3131).也已知硝基三醇經(jīng)還原消除，也可得到三醇(Latour等，Synthesis，1987，8，742)。通過(guò)單乙?；蛲ㄟ^(guò)用鏈烷酰氯或氯代甲酸烷基酯處理形成碳酸酯，能夠使三醇衍生化(Greene和Wuts，有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán)，John Wiley，紐約，1990)。通過(guò)氧化為醛和芳基Grignard加成能夠影響芳基取代。通過(guò)還原胺化反應(yīng)，也能夠把醛轉(zhuǎn)化為取代的胺。
III.1c).環(huán)狀-1，3-二醇從環(huán)己烷衍生物制備其中V-Z或V-W被四個(gè)碳稠合的式I化合物。市場(chǎng)上可得到的順，順-1，3，5-環(huán)己三醇能夠被直接使用或如在2-取代丙-1，3-二醇情況中描述的那樣被修飾，得到多種類(lèi)似物。能夠在酯形成前或酯形成后制備這些修飾物。使用吡喃酮作為二烯，通過(guò)Diels-Alder方法能夠制備多種1，3-環(huán)己二醇(Posner等，TetrahedronLett.，1991，32，5295)。通過(guò)氧化腈-烯烴加成，也可制備環(huán)己基二醇衍生物(Curran等，J.Am.Chem.Soc.，1985，107，6023)。或者，從市場(chǎng)上可得到的奎尼酸，也可制備環(huán)己基前體(Rao等，Tetrahedron Lett.，1991，32，547)。
III.2.取代1，3-二胺的合成從多種底物開(kāi)始合成取代1，3-二胺。通過(guò)水解為酰胺和Hoffman重排條件能夠?qū)⒎蓟於孓D(zhuǎn)化為1-取代二胺(Bertochio等，Bull.Soc.Chim.Fr，1962，1809)。然而，通過(guò)親電試劑導(dǎo)入隨后氫化物還原為相應(yīng)的二胺，丙二腈取代物將使多種Z取代成為可能。在另一方法中，肉桂醛與肼或取代肼反應(yīng)，得到相應(yīng)的吡唑啉，在催化氫化下后者生成取代1，3-二胺(Weinhardt等，J.Med.Chem.，1985，28，694)。通過(guò)吡唑啉上芳基Grignard加成隨后還原，也能得到高反式非對(duì)映選擇性的1，3-取代物(Alexakis等，J.Org.Chem.，1992，576，4563)。通過(guò)乙硼烷還原3-氨基-3-芳基丙烯腈，其依次從腈取代芳族化合物制備，也制備1-芳基-1，3-二氨基丙烷(Dornow等，Chem.Ber.，1949，82，254)。從相應(yīng)的1，3-羰基化合物得到的1，3-二亞胺的還原為1，3-二胺前藥部分的另一種來(lái)源，其使多種活性基團(tuán)V和/或Z成為可能(Barluenga等，J.Org.Chem.，1983，48，2225)。
III.3.手性取代1，3-羥基胺或1，3-二胺的合成經(jīng)β-氯代苯基乙基甲酮的CBS對(duì)映選擇催化反應(yīng)隨后經(jīng)鹵代基團(tuán)的二取代制備所需要的仲胺或伯胺(Corey等，Tetrahedron Lett.，1989，30，5207)，合成對(duì)映體純的3-芳基-3-羥基丙-1-胺。通過(guò)手性純的烯烴和芳醛的取代硝酮1，3-偶極加成，隨后還原生成的異唑烷(Koizumi等，J.Org.Chem.，1982，47，4005)，可得到手性3-芳基-3-氨基丙-1-醇類(lèi)型的前藥部分。通過(guò)手性膦鈀復(fù)合物導(dǎo)致對(duì)映選擇性形成δ-氨基醇，也可達(dá)到1，3-偶極加成中的手性導(dǎo)入以形成取代的異唑烷(Hori等，J.Org.Chem.，1999，64，5017)?；蛘?，通過(guò)相應(yīng)手性環(huán)氧醇與要求的胺選擇開(kāi)環(huán)(Canas等，Tetrahedron Lett.，1991，32，6931)，得到光學(xué)純1-芳基取代的氨基醇。
已知有幾種方法用于1，3-二取代氨基醇的非對(duì)映選擇合成。例如，用次氯酸處理(E)-N-肉桂基三氯乙酰胺生成反式-二氫嗪，后者易于水解為高非對(duì)映選擇性的赤型-β-氯-α-羥基-δ-苯基丙胺(Commercon等，Tetrahedron Lett.，1990，31，3871)。通過(guò)光學(xué)純3-羥基酮的還原胺化，也可非對(duì)映選擇性形成1，3-氨基醇(Hadded等，Tetrahedron Lett.，1997，38，5981)。在另一方法中，通過(guò)選擇氫化物還原，將3-氨基酮高立體選擇性轉(zhuǎn)化為1，3-二取代氨基醇(Barluenga等，J.Org.Chem.，1992，57，1219)。
所有以上提及的方法也能夠應(yīng)用于制備相應(yīng)的V-Z或V-W成環(huán)手性氨基醇。另外，這樣的光學(xué)純氨基醇也是通過(guò)本部分先前描述的方法得到光學(xué)純二胺的來(lái)源。
制劑本發(fā)明化合物以大約0.1mg/kg/劑量至大約100mg/kg/劑量的總每天劑量口服給藥，優(yōu)選為大約0.3mg/kg/劑量至大約30mg/kg/劑量。最優(yōu)選的劑量介于0.5至10mg/kg(大約1至20nmoles/kg/劑量)范圍內(nèi)?？刂苹钚猿煞轴尫潘俾实亩〞r(shí)釋放制劑的應(yīng)用可為優(yōu)選。便利地可以許多分開(kāi)的劑量給予所述劑量。當(dāng)使用其它的方法(例如靜脈給藥)時(shí)，在0.3至300nmol/kg/min的速率下將化合物給予受影響的組織，優(yōu)選為3至100nmol/kg/min。如以下討論那樣，當(dāng)靜脈給予這些化合物時(shí)，易于維持這樣的速率。
就本發(fā)明的目的而言，以含有藥學(xué)上可接受的載體、佐劑和溶媒的制劑，可以多種方法給予化合物，包括口服、非腸道、吸入噴霧、局部或直腸。在此使用的術(shù)語(yǔ)非腸道包括用多種輸注技術(shù)的皮下、靜脈、肌內(nèi)和動(dòng)脈內(nèi)注射。在此使用的動(dòng)脈內(nèi)和靜脈內(nèi)注射包括經(jīng)導(dǎo)管給藥。口服給藥一般為優(yōu)選。
包含活性成分的藥用組合物可以為適于打算的給藥的方法的任何形式。當(dāng)用于口服用途時(shí)，可制備例如片劑、糖錠劑、錠劑、水或油混懸劑、可分散粉劑或顆粒劑、乳劑、硬或軟膠囊劑、糖漿劑或酏劑。按照任何本領(lǐng)域用于制備藥用組合物的已知方法，可制備打算用于口服用途的組合物且這樣的組合物可包含一或多種試劑，包括甜味劑、矯味劑、著色劑和防腐劑，以提供可口的制劑。包含與適宜于制備片劑的非毒性、藥學(xué)上可接受的賦形劑混合的活性成分的片劑是可接受的。這些賦形劑可為，例如，惰性稀釋劑如碳酸鈣或碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉，制粒劑和崩解劑如玉米淀粉或藻酸，粘合劑如淀粉、明膠或阿拉伯膠和潤(rùn)滑劑如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石粉。片劑可為未包衣的或可用已知技術(shù)包衣，包括微囊化以在胃腸道中延遲崩解和吸收，從而在更長(zhǎng)的期間內(nèi)提供持續(xù)的作用。例如，可使用單獨(dú)的或與蠟一起的定時(shí)延遲材料如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。
用于口服用途的制劑也可作為硬明膠膠囊劑的形式呈現(xiàn)，其中活性成分與惰性固體稀釋劑例如磷酸鈣或高嶺土混合，或作為軟明膠膠囊劑的形式呈現(xiàn)，其中活性成分與水或油介質(zhì)例如花生油、液體石蠟或橄欖油混合。
本發(fā)明水混懸劑包含與適合于制備水混懸劑的賦形劑混合的活性物質(zhì)。這樣的賦形劑包括懸浮劑例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥基丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍膠和阿拉伯膠、和分散劑或潤(rùn)濕劑例如天然來(lái)源的磷脂(例如卵磷脂)、環(huán)氧烷與脂肪酸的縮合產(chǎn)物(例如多氧乙烯硬脂酸酯)、環(huán)氧乙烷與長(zhǎng)鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物(例如十七乙烯氧基鯨蠟醇)、環(huán)氧乙烷與衍生于脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合產(chǎn)物(例如多氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯)。水混懸劑也可包含一或多種防腐劑例如對(duì)羥基苯甲酸乙酯或?qū)αu基苯甲酸正丙酯、一或多種著色劑、一或多種矯味劑和一或多種甜味劑，例如蔗糖或糖精。
通過(guò)將活性成分懸浮于植物油例如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油、或在礦物油例如液體石蠟中，可配制油混懸劑?？诜鞈覄┛砂龀韯├绶湎?、硬石蠟或鯨蠟醇?？杉尤胩鹞秳├缫陨详U述的那些物質(zhì)和矯味劑以提供可口的口服制劑。可通過(guò)加入抗氧化劑例如抗壞血酸，使這些組合物防腐。
適合于制備水混懸劑的本發(fā)明可分散粉劑和顆粒劑經(jīng)加入水提供與分散劑或潤(rùn)濕劑、懸浮劑和一或多種防腐劑混合的活性成分。適宜的分散劑或潤(rùn)濕劑和懸浮劑通過(guò)以上公開(kāi)的內(nèi)容舉例說(shuō)明。也可存在另外的賦形劑，例如甜味劑、矯味劑和著色劑。
本發(fā)明藥用組合物也可以水包油乳劑的形式存在。油相可為植物油例如橄欖油或花生油、礦物油例如液體石蠟、或這些物質(zhì)的混合物。適宜的乳化劑包括天然來(lái)源的膠類(lèi)例如阿拉伯膠和黃蓍膠、天然來(lái)源的磷脂類(lèi)例如大豆卵磷脂、衍生于脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯例如脫水山梨醇單油酸酯和這些偏酯與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物例如多氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯。乳劑也可包含甜味劑和矯味劑。
用甜味劑例如甘油、山梨醇或蔗糖可配制糖漿劑和酏劑。這樣的制劑也可包含潤(rùn)藥、防腐劑、矯味劑或著色劑。
本發(fā)明藥用組合物可以滅菌注射制劑例如滅菌注射水或油混懸劑的形式存在。按照已知技術(shù)，使用以上已提及的那些適宜的分散劑或潤(rùn)濕劑和懸浮劑，可配制這種混懸劑。滅菌注射制劑也可為在非毒性的非腸道可接受的稀釋劑或溶劑例如在1，3-丁二醇中的滅菌注射溶液劑或混懸劑或作為冷凍干燥粉末制備。在可接受的溶媒和溶劑中，可使用的有水、林格氏溶液和等滲氯化鈉溶液。另外，滅菌固定油可作為溶劑或懸浮介質(zhì)常規(guī)使用。為此目的，可使用包括合成的單-或二甘油酯在內(nèi)的任何溫和的固定油。另外，脂肪酸例如油酸可同樣用于制備注射劑。
可與載體材料混合以產(chǎn)生單一劑型的活性成分的量將依受治療的宿主和具體的給藥方式而定。例如，打算用于口服給予人的定時(shí)-釋放制劑可包含與適宜的和便利的量的載體材料混合的20至2000μmol(大約10至1000mg)的活性物質(zhì)，載體材料可在總組合物的大約5至大約95％之間變化。制備其提供易于測(cè)量給藥量的藥用組合物為優(yōu)選。例如，為能夠在大約30mL/hr的速率下輸注適宜的體積，打算用于靜脈輸注的水溶液的每毫升溶液應(yīng)包含大約0.05至大約50μmol(大約0.025至25mg)的活性成分。
如以上提到的那樣，適宜于口服給藥的本發(fā)明制劑可作為獨(dú)立的單位例如膠囊劑、扁囊劑或片劑，每劑包含預(yù)先確定量的活性成分，作為粉劑或顆粒劑，作為在水或非水液體中的溶液劑或混懸劑，或作為水包油液體乳劑或油包水液體乳劑的形式呈現(xiàn)。活性成分也可作為大丸劑、藥糖劑或糊劑給藥。
通過(guò)任選與一或多種輔助成分壓制或模壓可制備片劑。通過(guò)在適宜的機(jī)械中壓制任選與粘合劑(例如聚乙烯吡咯烷酮、明膠、羥基丙基甲基纖維素)、潤(rùn)滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、崩解劑(例如羥基乙酸淀粉鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉)、表面活性劑或分散劑混合的自由流動(dòng)形式如粉末或顆粒的活性成分，可制備壓制片劑。通過(guò)在適宜的機(jī)械中模壓用惰性液體稀釋劑潤(rùn)濕的粉末狀化合物的混合物，可制備模壓片劑。片劑可任選包衣或刻痕且可配制以便提供活性成分緩釋或控釋?zhuān)渲欣缫宰兓壤褂昧u基丙基甲基纖維素以提供要求的釋放模式。片劑可任選與腸包衣一起提供，以在腸道部分而不是胃中提供釋放。當(dāng)式I化合物對(duì)酸水解敏感時(shí)，這對(duì)于其是特別有利的。
適宜于口腔局部給藥的制劑包括在以下矯味基質(zhì)中含有活性成分的糖錠劑，基質(zhì)通常為蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠；在惰性基質(zhì)例如明膠和甘油、或蔗糖和阿拉伯膠中含有活性成分的軟錠劑和在適宜的液體載體中含有活性成分的漱口劑。
用于直腸給藥的制劑可作為含有例如可可脂或水楊酸酯的適宜的基質(zhì)的栓劑呈現(xiàn)。
適宜于陰道給藥的制劑可作為陰道栓劑、塞子、霜?jiǎng)?、凝膠劑、糊劑、泡沫劑或噴霧劑的形式呈現(xiàn)，適當(dāng)時(shí)該制劑除包含活性成分外還包含如本領(lǐng)域已知的載體。
適宜于非腸道給藥的制劑包括水和非水等滲滅菌注射溶液劑，其可含有抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑及提供與打算給予的接受者的血液等滲的制劑的溶質(zhì)；以及可包含懸浮劑和增稠劑的水或非水滅菌混懸劑。制劑可以單位劑量或多劑量密封容器的形式呈現(xiàn)，例如安瓿和管形瓶，且可在僅需要臨用前僅加入滅菌液體載體例如注射用水的冷凍干燥(凍干)條件下貯存?？捎上惹懊枋龅姆N類(lèi)的滅菌粉末、顆粒和片劑，制備注射溶液劑和混懸劑。
優(yōu)選的單位劑型為那些包含每天劑量或單位，每天亞劑量或它們的合適的部分的藥物。
然而，可以理解，如由本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的那樣，任何具體患者的具體劑量水平將依以下多種因素而定，包括所使用具體化合物的活性；受治療個(gè)體的年齡、體重、一般健康狀況、性別和飲食；給藥時(shí)間和途徑；排泄率；已先前給予的其它藥物及經(jīng)受治療的具體疾病的嚴(yán)重性。
實(shí)施例通過(guò)闡明制備所述化合物一些方法的實(shí)施例，能夠進(jìn)一步理解本發(fā)明前藥化合物、它們的中間體和它們的制備。然而，這些實(shí)施例應(yīng)不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的具體限制且認(rèn)為所述化合物的變體，無(wú)論是現(xiàn)在已知的或以后開(kāi)發(fā)的，均包括在如在其后提出權(quán)利要求的本發(fā)明范圍內(nèi)。
使用以下實(shí)施例中詳細(xì)描述的方法，制備式I化合物。
實(shí)施例1用于含有膦酸的藥物的氨基磷酸酯前藥的一般方法在回流溫度下，將5-異丁基-2-甲基-4-(2-(5-膦?；?呋喃基)噻唑(200mg，0.6mmol)在2.5mL亞硫酰氯中的懸浮液加熱4小時(shí)。把反應(yīng)混合物冷卻并蒸發(fā)至干，隨后與甲苯共沸。向生成的殘余物在4ml二氯甲烷中的溶液中加入氨基乙醇(82mg，0.54mmol)和吡啶(0.5ml，6mmol)在1mL二氯甲烷中的溶液。
在25℃下攪拌4小時(shí)后，將反應(yīng)物蒸發(fā)并與甲苯共蒸發(fā)。把粗品產(chǎn)物層析化，用10％甲醇-二氯甲烷洗脫，得到52mg(20.8％)的低極性異構(gòu)體和48mg(19.2％)的高極性異構(gòu)體。
用該方法制備以下化合物1.15-異丁基-2-甲基-4-{2-[5-(1-苯基-1，3-丙基)膦酰亞氨基]呋喃基}噻唑，低極性異構(gòu)體。Rf＝0.76，在10％MeOH/CH2Cl2中。C21H25N2O3PS+0.25 H2O+0.1 HCl的理論值C59.40；H6.08；N6.60。實(shí)測(cè)值C59.42；H5.72；N6.44。
1.25-異丁基-2-甲基-4-{2-[5-(1-苯基-1，3-丙基)膦酰亞氨基]呋喃基}噻唑，高極性異構(gòu)體。Rf＝0.7，在MeOH/CH2Cl2中。C21H25N2O3PS+0.25 H2O的理論值C59.91；H6.1；N6.65。實(shí)測(cè)值C60.17；H5.81；N6.52。
1.32-氨基-5-異丁基-4-{2-[5-(1-苯基-1，3-丙基)磷酰氨基]呋喃基}噻唑。Rf＝0.53(二氧化硅，9∶1 CH2Cl2/MeOH)。C20H24N3O3PS+0.2CH2Cl2+0.25 H2O的理論值C55.27；H5.72；N9.57。實(shí)測(cè)值C55.03；H5.42；N9.37。
1.42-氨基-5-異丁基-4-{2-[5-(1-苯基-1，3-丙基)磷酰氨基]呋喃基}噻唑，低極性異構(gòu)體。Rf＝0.57(二氧化硅，9∶1 CH2Cl2/MeOH)。C20H24N3O3PS+0.15 CH2Cl2的理論值C56.26；H5.69；N9.77。實(shí)測(cè)值C56.36；H5.46；N9.59.
1.52-氨基-5-甲硫基-4-{2-[5-(1-苯基-1，3-丙基)磷酰氨基]呋喃基}噻唑，低極性異構(gòu)體。Rf＝0.59(二氧化硅，9∶1 CH2Cl2/MeOH)。C17H18N3O3PS2+0.4 HCl的理論值C48.38；H4.39；N9.96。實(shí)測(cè)值C48.47；H4.21；N9.96.
1.62-氨基-5-甲硫基-4-{2-[5-(1-苯基-1，3-丙基)磷酰氨基]呋喃基}噻唑，高極性異構(gòu)體。Rf＝0.56(二氧化硅，9∶1 CH2Cl2/MeOH).C17H18N3O3PS2的理論值C50.11；H4.45；N10.31。實(shí)測(cè)值C49.84；H4.19；N10.13。
1.72-氨基-5-甲硫基-4-{2-[5-(N-甲基-1-苯基-1，3-丙基)磷酰氨基]呋喃基}噻唑。Rf＝0.56(二氧化硅，9∶1 CH2Cl2/MeOH)。C18H20N3O3PS2+.25 HCl的理論值C50.21；H4.74；N9.76。實(shí)測(cè)值C50.31；H4.46；N9.79。
1.82-氨基-5-異丁基-4-{2-[5-(1-苯基-1，3-丙基)-N-乙?；柞０被鵠呋喃基}噻唑。Rf＝0.62(二氧化硅，9∶1 CH2Cl2/MeOH).C22H26N3O4PS+1.25 H2O的理論值C54.82；H5.96；N8.72。實(shí)測(cè)值C55.09；H5.99；N8.39。
1.92-氨基-5-異丁基-4-{2-[5-(1-[2，4-二氯苯基]-丙-1，3-基)磷酰氨基]呋喃基}噻唑。mp 235-237℃(分解)。Rf＝0.35(二氧化硅，3∶2EtOAc/CH2Cl2)。C20H22Cl2N3O3PS的理論值C49.39；H4.56；N8.64。實(shí)測(cè)值C49.04；H4.51；N8.37。
1.10188-189 9-{2-[1-苯基-1-氮雜-3-氧雜-2-磷雜環(huán)己烷-2-甲基氧基]乙基}腺嘌呤。mp 188-189℃。Rf＝0.25(二氧化硅，9∶1 CH2Cl2/MeOH)。C17H21N6O3P+0.5 H2O的理論值C51.38；H5.58；N21.15。實(shí)測(cè)值C51.05；H5.28；N20.77.
1.112-氨基-5-異丁基-4-{2-[5-(1-(3-氯代苯基)-丙-1，3-基)膦酰二氨基]呋喃基}噻唑。淡黃色固體；Rf＝0.45(二氧化硅，5∶95甲醇/二氯甲烷)；1H NMR(200MHz，DMSOd6)d 7.35(m，4H)；7.1(m，1H)，6.6(m，1H)；5.55(m，1H)，2.8(d，2H)，0.9(d，6H)。
實(shí)施例2步驟A在0℃下，于20分鐘內(nèi)將3-氨基-3-苯基-1-丙醇(1g，6.6mmol)和三乙胺(3ml，21.8mmol)在四氫呋喃(60ml)中的溶液滴加入到4-硝基苯基二氯代磷酸酯在四氫呋喃中的溶液中。白色沉淀迅速形成。在0℃下，將黃色多相混合物攪拌1小時(shí)，然后緩慢溫?zé)嶂潦覝?。在室溫下攪?0小時(shí)后，把沉淀溶解于水(40ml)中。將透明的黃色溶液濃縮至大約40ml。用飽和碳酸氫鈉水溶液稀釋生成的混合物并用乙酸乙酯提取兩次。用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌合并的有機(jī)提取液。再次提取水洗液且合并有機(jī)提取液。經(jīng)硫酸鈉干燥合并的有機(jī)提取液，濃縮且經(jīng)柱層析法(硅膠，己烷/乙酸乙酯)純化，得到快速洗脫的反式異構(gòu)體(995mg，45％)和緩慢洗脫的順式異構(gòu)體(1g，45％)。
步驟B在80℃下，將2’，3’-二脫氧-腺苷(50mg，0.21mmol)、氟化銫(323mg，2.1mmol)和快速洗脫的(4-硝基苯氧基)-4-苯基-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己烷(oxazaphosphorinan)-2-酮(142mg，0.4mmol)在叔丁醇中的混合物加熱。48小時(shí)后，加入更多的(4-硝基苯氧基)-4-苯基-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己烷-2-酮(70mg)且在80℃下繼續(xù)攪拌。5天后，用50/50甲醇/二氯甲烷稀釋冷卻的黃色多相混合物，經(jīng)硅膠墊過(guò)濾并用50/50甲醇/二氯甲烷沖洗。濃縮合并的濾液并經(jīng)柱層析法(硅膠，甲醇/二氯甲烷)純化殘余物，得到前藥，將其從二氯甲烷和己烷中重結(jié)晶42mg(47％收率)。
以這種方法制備以下化合物2.1 2’，3’-二脫氧-5’-O-(2-氧代-4-苯基-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己烷(oxazaphosphorin)-2-基)-腺苷。mp 119-122。Rf＝0.25(硅膠，1/9甲醇/二氯甲烷)。C19H23N6O4P+0.9mol二氯甲烷的理論值C47.16；H4.93；N16.58.實(shí)測(cè)值C47.03；H4.98；N16.61。
2.2 3’-疊氮基-3’-脫氧-5’-O-(4-苯基-2-氧代-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己烷-2-基)-胸苷。mp 85-105。Rf＝0.5(硅膠，1/9甲醇/二氯甲烷)。C19H23N6O6P的理論值C49.35；H5.01；N18.17.實(shí)測(cè)值C49.32；H5.17；N17.89.
實(shí)施例3步驟A與實(shí)施例2步驟A相同。
步驟B在室溫下，將氫化鋰(15mg，1.52mmol)加入到9-β-D-阿糖呋喃-腺嘌呤(100mg，0.37mmol)和快速洗脫的(4-硝基苯氧基)-4-苯基-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己烷-2-酮(250mg，0.74mmol)在二甲基甲酰胺中的溶液中。6小時(shí)后，用乙酸中和黃色多相混合物。濃縮透明的黃色溶液且經(jīng)柱層析法(硅膠，甲醇/二氯甲烷)純化殘余物。經(jīng)制備型TLC進(jìn)一步純化分離的產(chǎn)物并從乙醇中重結(jié)晶，得到前藥18mg(11％收率)。
以這種方法制備以下化合物3.1 5’-O-(2-氧代-4-苯基-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己烷-2-基)-9-β-D-阿糖呋喃腺嘌呤。mp＞250。Rf＝0.25(硅膠，2/8甲醇/二氯甲烷)。C19H23N6O6P的理論值C49.35；H5.01；N18.17。實(shí)測(cè)值C49.22；H4.89；N18.03。
以相似方法制備以下化合物，除于處理期間用1N鹽酸中和反應(yīng)物以外。
3.2 9-[(2-(4-苯基-2-氧代-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己烷-2-氧基)-乙氧基)甲基]-鳥(niǎo)嘌呤mp 151-165。Rf＝0.2(硅膠，2/8甲醇/二氯甲烷)；C17H21N6O5P+2H2O的理論值C44.74；H5.52；N18.41。實(shí)測(cè)值C44.45；H5.40；N18.14。
3.3 2’-脫氧-5-氟-5’-O-(4-苯基-2-氧代-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己烷-2-基)-尿苷mp 188-195(分解)。Rf＝0.25(硅膠，1/9甲醇/二氯甲烷)。C18H21FN3O7P+Na+的MS理論值464；實(shí)測(cè)值464。C18H21FN3O7P-H的MS理論值440；實(shí)測(cè)值440。
實(shí)施例4經(jīng)P(III)中間體形成核苷酸前藥的通法在0℃下，向1(芳基)-1-(1-烷基或?；被?丙醇(1mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中加入三氯化磷。將反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝夭⑵鋽嚢?小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物，用甲苯(×10mL)共沸并干燥。粗品氯代亞磷酰胺未經(jīng)進(jìn)一步純化即可用于下一步。
在-40℃下，向核苷(1mmol)在DMF(10mL)中的溶液中加入二異丙基乙胺(2mmol)。向該混合物中加入在2mL DMF中的粗品環(huán)氯代亞磷酰胺(1mmol)。將混合物溫?zé)嶂潦覝夭嚢?小時(shí)。將反應(yīng)物重新冷卻至-40℃并加入5-6M在癸烷(2mmol)中的叔丁基過(guò)氧化氫并室溫下放置。攪拌過(guò)夜后，濃縮反應(yīng)物并層析純化粗品混合物。
實(shí)施例5從芳醛制備3-芳基-3-氨基丙醇的通法(Shih等，Heterocycles，1978，9，1277)步驟A在80℃下，于水浴中將適宜的芳醛(10mmol)、丙二酸(10mmol)和乙酸銨(10mmol)在50mL的95％乙醇中的混合物加熱。在55℃下，二氧化碳開(kāi)始放出且在5-7小時(shí)內(nèi)反應(yīng)完全。經(jīng)抽濾收集白色固體并從乙醇水溶液中重結(jié)晶，得到3-芳基-3-氨基丙酸。
步驟B伴隨冷卻和攪拌下，向氫化鋁鋰(50mmol)在無(wú)水四氫呋喃(40mL)中的懸浮液中加入3-芳基-3-氨基丙酸(20mmol)。將混合物回流3小時(shí)，將其放置過(guò)夜，且用潮濕的乙醚處理，然后用水處理以分解過(guò)量的氫化鋁鋰。傾析有機(jī)層，且用熱的乙酸乙酯(3×50mL)提取留在瓶中的物料。合并有機(jī)溶液并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)。真空蒸餾或重結(jié)晶殘余物，得到3-芳基-3-氨基丙醇。
實(shí)施例6從環(huán)氧肉桂醇制備3-芳基-3-羥基丙胺的通法(Gao等，J.Org.Chem.，1988，53，4084)步驟A在0℃下，于氮?dú)夥罩邢蚴惺?-)-(2S，3S)-2，3-環(huán)氧肉桂醇(10.0mmol)在二甲氧基乙烷(50mL)中的溶液中滴加入3.4M的雙(2-甲氧基乙氧基)氫化鋁鈉(Red-Al)在甲苯中的溶液(10.5mmol)。在室溫下攪拌3小時(shí)后，用乙醚稀釋溶液且用5％HCl溶液猝滅。在室溫下攪拌另外30分鐘后，經(jīng)過(guò)濾除去生成的白色沉淀且用乙酸乙酯煮沸并再次過(guò)濾。用硫酸鎂干燥合并的有機(jī)層且濃縮，得到(R)-3-苯基-1，3-二羥基丙烷。
步驟B在-10℃下，于氮?dú)夥罩邢?R)-3-苯基-1，3-二羥基丙烷(17.8mmol)和三乙胺(25.6mmol)在乙醚(90mL)中的溶液中滴加入MsCl(18.7mmol)。在-10至0℃下攪拌3小時(shí)后，將混合物傾入到冰水(30mL)中，用20％H2SO4、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌有機(jī)層，且經(jīng)硫酸鎂干燥。經(jīng)硅膠柱層析法純化粗品。
步驟C在65℃下，將(R)-3-苯基-3-(羥基)-丙基甲磺酸酯(3mmol)和甲胺(10mL，40％在水中)在THF(10mL)中的溶液加熱3小時(shí)。冷卻后，用乙醚稀釋該溶液，用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，且用無(wú)水碳酸鉀干燥。濃縮提取液，得到(R)-3-苯基-3-(羥基)-丙胺。
實(shí)施例7從肉桂醛制備3-芳基-丙二胺的通法(Weinhardt等，J.Med.Chem.，1985，28，694)步驟A向肉桂醛(10mmol)在100mL的EtOH中的溶液中加入取代肼(10mmol)。在室溫下攪拌反應(yīng)物45分鐘。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上除去溶劑且把飽和NaHCO3加至殘余物中。將粗品提取到乙醚中。洗滌有機(jī)層，干燥且蒸發(fā)。層析法純化粗品得到純的吡唑啉加成物。
步驟B在常壓下，經(jīng)500mg的5％Pt/C，將3-苯基吡唑啉(10mmol)在50mL的AcOH和10mL的10％HCl中的溶液氫化。在氫氣下將反應(yīng)物攪拌6小時(shí)。經(jīng)過(guò)濾除去催化劑且濃縮濾液，經(jīng)柱純化粗品，得到純的3-芳基-丙二胺衍生物。
實(shí)施例8用于2-取代前藥的1，3-氨基醇的通法(V、W和W’＝H且Z＝-CHR2OH)步驟A.
向市場(chǎng)上可得到的2-(羥基甲基)-1，3-丙二醇(1mmol)在吡啶(5mL)中的溶液中加入甲磺酰氯(1mmol)且在室溫下攪拌直到反應(yīng)完全。將混合物濃縮，提取且經(jīng)柱層析法純化產(chǎn)物。
步驟B.
在100℃下，于密封反應(yīng)器中將2-(甲基磺酰氧基亞甲基)-1，3-丙二醇(1mmol)和氫氧化銨(10mL，30％在水中)在THF(10mL)中的溶液加熱。冷卻后，將混合物濃縮，提取且經(jīng)柱層析法純化產(chǎn)物，得到2-取代-1，3-氨基醇?？稍诓襟EB中使用合適的胺以變化-NR6取代。使用步驟A和B，用適當(dāng)化學(xué)計(jì)量的試劑從2-(羥基甲基)-1，3-丙二醇也可合成2-取代-1，3-二胺。
步驟C.
通過(guò)如在實(shí)施例1或?qū)嵤├?(步驟A和B)或?qū)嵤├?(步驟B)或?qū)嵤├?中描述的偶合方法，依母體化合物而定，合成2-取代-1，3-氨基醇或2-取代-1，3-二胺的前藥。
實(shí)施例9環(huán)狀1，3-氨基醇的通法(V和W一起被連接)步驟A.
如在實(shí)施例8步驟A中描述的那樣，將市場(chǎng)上可得到的順，順-1，3，5-環(huán)己烷三醇轉(zhuǎn)化為單甲磺酸酯。
步驟B.
如在實(shí)施例8步驟B中描述的那樣，將順，順-1-(甲基磺酰氧基)環(huán)己烷-3，5-二醇轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的氨基醇。可在步驟B中使用合適的胺以變化-NR6取代。使用步驟A和B，用適當(dāng)化學(xué)計(jì)量的試劑從順，順-1，3，5-環(huán)己烷三醇也可合成1-羥基-3，5-二氨基環(huán)己烷。
步驟C.
通過(guò)如在實(shí)施例1或?qū)嵤├?(步驟A和B)或?qū)嵤├?(步驟B)或?qū)嵤├?中描述的方法，依母體化合物而定，合成環(huán)己基-1，3-氨基醇或1，3-二胺前藥。
實(shí)施例102-取代4-[2’-(5’-膦?；?呋喃基]噻唑的制備步驟A.
在56℃下，用4-甲基戊酸(1mmole)、三氟乙酸酐(1.2mmole)和三氟化硼合乙醚(0.1mmole)處理呋喃(1.3mmole)在甲苯中的溶液3.5小時(shí)。用碳酸氫鈉(1.9mmole)水溶液猝滅冷卻的反應(yīng)混合物，經(jīng)硅藻土墊過(guò)濾。提取，蒸發(fā)和蒸餾，得到為棕色油的2-[(4-甲基-1-氧代)戊基]呋喃(bp 65-77℃，0.1mmHg)。
步驟B.
在回流下，用乙二醇(2.1mmole)和對(duì)-甲苯磺酸(0.05mmole)處理2-[(4-甲基-1-氧代)戊基]呋喃(1mmole)在苯中的溶液60小時(shí)，期間借助Dean-Stark阱除水。加入原甲酸三乙酯(0.6mmole)且在回流下將反應(yīng)混合物加熱另外一小時(shí)。提取且蒸發(fā)，得到為橙色液體的2-(2-呋喃基)-2-[(3-甲基)丁基-]-1，3-二氧戊環(huán)。
步驟C.
在-45℃下，用TMEDA(1mmole)和nBuLi(1.1mmole)處理2-(2-呋喃基)-2-[(3-甲基)丁基]-1，3-二氧戊環(huán)(1mmole)在THF中的溶液，且在-5至0℃下將生成的反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)。把生成的反應(yīng)混合物冷卻至-45℃，且于-45℃下導(dǎo)入氯代磷酸二乙酯在THF中的溶液。于1.25小時(shí)內(nèi)將反應(yīng)混合物逐漸溫?zé)嶂镰h(huán)境溫度。提取且蒸發(fā)，得到為深色油的2-[2-(5-二乙基膦?；?呋喃基]-2-[(3-甲基)丁基]-1，3-二氧戊環(huán)。
步驟D.
在60℃下，用1N鹽酸(0.2mmole)處理2-[2-(5-二乙基膦?；?呋喃基]-2-[(3-甲基)丁基]-1，3-二氧戊環(huán)(1mmole)在甲醇中的溶液18小時(shí)。提取且蒸餾，得到為淡橙色油的5-二乙基膦酰基-2-[(4-甲基-1-氧代)戊基]呋喃(bp 152-156℃，0.1mmHg)。
步驟E.
在回流下，用溴化銅(II)(2.2mmole)處理產(chǎn)生5-二乙基膦酰基-2-[(4-甲基-1-氧代)戊基]呋喃的化合物(1mmole)在乙醇中的溶液3小時(shí)。過(guò)濾冷卻的反應(yīng)混合物且將濾液蒸發(fā)至干。經(jīng)層析法純化生成的深色油，得到為橙色油的5-二乙基膦?；?2-[(2-溴-4-甲基-1-氧代)戊基]呋喃。
步驟F.
在回流下，將5-二乙基膦?；?2-[(2-溴-4-甲基-1-氧代)戊基]呋喃(1mmole)和硫脲(2mmole)在乙醇中的溶液加熱2小時(shí)。將冷卻的反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干且把生成的黃色泡沫懸浮于飽和碳酸氫鈉和水(pH＝8)中。經(jīng)過(guò)濾收集生成的黃色固體，得到2-氨基-5-異丁基-4-[2-(5-二乙基膦?；?呋喃基]噻唑。
步驟G.
在25℃下，用溴代三甲基硅烷(10mmole)處理2-氨基-5-異丁基-4-[2-(5-二乙基膦?；?呋喃基]噻唑(1mmole)在二氯甲烷中的溶液8小時(shí)。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干且把殘余物懸浮于水中。經(jīng)過(guò)濾收集生成的固體，得到為灰白色固體的2-氨基-5-異丁基-4-[2-(5-膦酰基)呋喃基]噻唑。
10.12-氨基-5-異丁基-4-[2’-(5’-膦?；?呋喃基]噻唑mp＞250℃。對(duì)C11H15N2O4PS+1.25HBr理論值C32.75；H4.06；N6.94.實(shí)測(cè)值C32.39；H4.33；N7.18。
按照相似的方法制備以下化合物10.22-甲基-5-異丁基-4-[2’-(5’-膦?；?呋喃基]噻唑。對(duì)C12H16NO4PS+HBr+0.1 CH2Cl2理論值C37.20；H4.44；N3.58。實(shí)測(cè)值C37.24；H4.56；N3.30.
10.32-氨基-5-甲硫基-4-[2’-(5’-膦?；?呋喃基]噻唑。mp 181-184℃。對(duì)C8H9N2O4PS2+0.4H2O理論值C32.08；H3.30；N9.35。
實(shí)測(cè)值C32.09；H3.31；N9.15。
實(shí)施例11環(huán)磷酰胺類(lèi)似物的合成通法(Boyd等，J.Med.Chem.1980，23，372)于室溫下，將雙(2-氯乙基)氨基磷酸二氯化物(10mmol)在乙酸乙酯(100mL)中的溶液滴加入到市售3-甲基氨基-1-苯基-1-丙醇(10mmol)和三乙胺(20mmol)在乙酸乙酯(100mL)中的溶液中。于室溫下攪拌3天后，濾除鹽并真空濃縮合并的濾液。經(jīng)硅膠柱層析法純化粗品。
實(shí)施例121-甲基氨基-1-苯基-3-丙醇的磷酰胺前藥步驟A使用如對(duì)實(shí)施例2步驟A描述的方法的相同方法，制備試劑N-甲基-2-(4-硝基苯氧基)-2-氧代-6-苯基-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己烷快速洗脫異構(gòu)體白色固體，mp 135℃；Rf＝0.4(硅膠，乙酸乙酯/己烷1/1)，緩慢洗脫異構(gòu)體白色固體，mp 128-129℃；Rf＝0.15(硅膠，乙酸乙酯/己烷1/1)。
步驟B以與對(duì)實(shí)施例3步驟B描述的方法的相似方法，除在100℃下將反應(yīng)混合物攪拌5小時(shí)以外，實(shí)現(xiàn)與核苷的偶合步驟。
步驟C以這種方法制備以下化合物12.19-[(2-(N-甲基-2-氧代-6-苯基-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己烷-2-氧基)-乙氧基)甲基]-鳥(niǎo)嘌呤；淺黃色無(wú)定形固體；Rf＝0.45(硅膠，甲醇/二氯甲烷2/8)；1H NMR(200MHz，DMSOd6)δ7.8(bs，1H)；7.3(bs，5H)，6.75(bs，2H，與D2O可交換)；5.35(bs，3H)。
以該方法制備下列化合物12.25-(N-甲基-2-氧代-6-苯基-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己烷-2-基)-9-β-D-阿糖呋喃腺嘌呤灰白色無(wú)定形固體；Rf＝0.2(硅膠，甲醇/二氯甲烷1/9)；1H NMR(200MHz，DMSOd6)δ7.4-7.1(m，5H)；5.75(S，1H)；5.25(m，1H)；4.8(m，1H)。
實(shí)施例133-氨基-1-羥基-1-苯基丙烷的磷酰胺前藥步驟A在65℃下，于高壓瓶中將甲磺酸3-苯基-3-羥基丙基酯(1.71g，Gao等，J.Org.Chem.，1988，53，4081)、四氫呋喃(10mL)和28％氫氧化銨(30mL)的混合物加熱16小時(shí)。冷卻后，除去揮發(fā)物以留下水溶液，用乙醚提取。減壓下濃縮水層，用無(wú)水乙腈共沸兩次且真空干燥，得到為白色固體的3-氨基-1-苯基-1-丙醇(1.04g)mp 92-94℃，Rf＝0.1(硅膠，甲醇/乙酸乙酯1/1)。
步驟B使用如對(duì)實(shí)施例2步驟A描述的方法的相同方法，制備試劑2-(4-硝基苯氧基)-2-氧代-6-苯基-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己烷(13.1)快速洗脫異構(gòu)體Rf＝0.6(硅膠，乙酸乙酯)，1H NMR(200MHz，DMSOd6)δ8.22(m，2H)；7.48(m，2H)，7.35(m，5H)；5.52(m，1H)。
步驟C以與對(duì)實(shí)施例3步驟B描述的方法的相似方法，實(shí)現(xiàn)與核苷的偶合步驟。
以這種方法制備以下化合物9-[(2-(N-甲基-2-氧代-6-苯基-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己烷-2-氧基)-乙氧基)甲基]-鳥(niǎo)嘌呤；5-(N-甲基-2-氧代-6-苯基-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己烷-2-基)-9-β-D-阿糖呋喃腺嘌呤。
本發(fā)明方法的應(yīng)用的實(shí)施例包括如下。人們將理解這些實(shí)施例是舉例說(shuō)明的且本發(fā)明方法并不僅局限于這些實(shí)施例。
為清楚和簡(jiǎn)化起見(jiàn)，化合物與以下生物實(shí)施例中的合成實(shí)施例號(hào)相對(duì)應(yīng)。
生物實(shí)施例實(shí)施例A抗糖尿病氨基磷酸酯前藥的化學(xué)穩(wěn)定性方法將化合物1.3在pH3和7下的磷酸鉀緩沖液(室溫)中的10μg/mL溶液的等分試樣每小時(shí)取樣達(dá)12小時(shí)。使用BeckmanUltrasphere C8柱(4.6×250mm)，經(jīng)反相HPLC分析樣品。使柱達(dá)到平衡且在1.0mL/分鐘流速下用50mM磷酸鈉(pH5.5)至80％乙腈的梯度洗脫。于254nm下檢測(cè)。在這些條件下，將化合物1.3與2-氨基-5-異丁基-4-[2-(5-膦?；鶈熙０?呋喃基]噻唑和2-氨基-5-異丁基-4-(2-呋喃基)噻唑分離(保留時(shí)間分別＝17、15.8和15.6分鐘)。
結(jié)果化合物1.3在pH3.0下的半衰期為3.8小時(shí)。在該pH下前藥分解為未鑒定的代謝物。在pH7.0下，化合物1.3充分穩(wěn)定；經(jīng)12小時(shí)保溫未見(jiàn)分解。
實(shí)施例B氨基磷酸酯前藥對(duì)酯酶、磷酸酶、腺苷脫氨酶和血漿的穩(wěn)定性方法羧酸酯酶(豬肝)和堿性磷酸酶(小牛腸粘液)購(gòu)自Sigma化學(xué)公司(St.Louis，MO)。在pH8.0下，于0.1M Tris-HCl緩沖液中測(cè)量羧酸酯酶活性。如由例如Matsushima M.等[FEBS Lett.(1991)293(1-2)37-41]描述的那樣，測(cè)量已知的底物乙酸對(duì)硝基苯基酯和陽(yáng)性對(duì)照組在反應(yīng)中的活性。在pH9.8下，于含有0.5mM MgCl2的0.1M二乙醇胺緩沖液中測(cè)量堿性磷酸酶的活性。如由[例如Brenna O.等，(1975)Biochem J.151(2)291-6]描述的那樣，測(cè)量已知的底物磷酸對(duì)硝基苯基酯和陽(yáng)性對(duì)照組在反應(yīng)中的活性。如由例如Gustin NC等[AnalBiochem.(1976)71527-532]描述的那樣，測(cè)量腺苷脫氨酶的活性。在這些反應(yīng)中，腺苷用作陽(yáng)性對(duì)照。通過(guò)從新鮮的、肝素化的大鼠或人的血離心制備血漿。在適宜的包含羧酸酯酶、堿性磷酸酶、腺苷脫氨酶或大鼠或人的血漿的反應(yīng)混合物中，以例如25μM的濃度下，溫育前藥。在酯酶、磷酸酶和腺苷脫氨酶試驗(yàn)的情況下，用已知如上描述的酶的底物進(jìn)行平行反應(yīng)。
在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)從反應(yīng)混合物中移出等分試樣且經(jīng)加甲醇至60％終止反應(yīng)。隨后離心且過(guò)濾，經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)反相、離子對(duì)或離子交換HPLC方法分析生成MPO2-(NHR6-)或其它的代謝物的甲醇中的等分試樣。
結(jié)果將前藥暴露于羧酸酯酶、堿性磷酸酶或血漿后未檢測(cè)到MPO2-(NHR6-)或其代謝物。
實(shí)施例C氨基磷酸酯前藥經(jīng)大鼠肝微粒體的活化方法由新鮮、生理鹽水灌流的大鼠肝臟制備微粒體部分。在三體積(w/v)含有2mM MgCl2和1mM EGTA的0.2M KH2PO4緩沖液(pH7.5)中，將肝組織勻化。在10,000g下，將勻漿離心1小時(shí)且回收上清液。然后在10,000g下將上清液部分再次離心以使微粒體部分沉淀。將沉淀重懸浮于勻化緩沖液中且再次離心。將該過(guò)程重復(fù)兩次以確保完全除去胞質(zhì)酶活性。最后一次離心之后，在最終蛋白質(zhì)濃度大約14mg/ml下，將微粒體沉淀再次懸浮于勻化緩沖液中。反應(yīng)混合物(0.5ml)由0.2M KH2PO4(pH 7.5)、13mM葡萄糖-6-磷酸酯、2.2mM NADP+、1單位的葡萄糖-6-磷酸酯脫氫酶、0-2.5mg/ml微粒體蛋白和100μM7.1組成。反應(yīng)在37℃下進(jìn)行。在適宜的時(shí)間點(diǎn)上從反應(yīng)混合物中移出等分試樣且用60％甲醇提取。在14,000rpm下把甲醇中的提取物離心，且過(guò)濾(0.2μm)后經(jīng)HPLC分析。使用包括反相層析法、離子對(duì)層析法或離子交換層析法在內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)HPLC技術(shù)。經(jīng)相對(duì)于已知濃度的可信標(biāo)準(zhǔn)物來(lái)定量各洗脫峰。
或者，通過(guò)反應(yīng)中必需的輔因子NADPH的減少來(lái)監(jiān)測(cè)前藥的活化。該試驗(yàn)在由0.2M KH2PO4、0.22mM NADPH、0-2.5mg/ml微粒體蛋白和100μM 28.4或30.1組成的反應(yīng)混合物中進(jìn)行。于340nm下經(jīng)分光光度法監(jiān)測(cè)反應(yīng)。吸收度的減少表明輔因子減少且因此酶促氧化前藥為MPO2-(NHR6-)。
結(jié)果在NADP+(通過(guò)存在于反應(yīng)混合物中的脫氫酶，這種輔因子經(jīng)酶促還原為NADPH)存在而不是缺乏下，前藥轉(zhuǎn)化為MPO2-(NHR6-)。這個(gè)結(jié)果表明氧化步驟參與前藥的活化。前藥活化為MPO2-(NHR6-)的速率線性依賴(lài)于微粒體蛋白濃度，證實(shí)活化經(jīng)酶-依賴(lài)機(jī)制發(fā)生。
實(shí)施例D氨基磷酸酯前藥經(jīng)人微粒體的活化和參與活化的微粒體酶的鑒定和組織分布方法分別從In Vitro Technologies和Gentest公司得到人肝微粒體和代表所有主要同種型的克隆化人P450酶。反應(yīng)混合物一般包含100mM磷酸鉀緩沖液(pH7.4)、2mM NADPH、0-2mg/ml微粒體蛋白或克隆化微粒體同工酶和例如100μM濃度下的前藥。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)反相、離子對(duì)或陰離子交換HPLC方法監(jiān)測(cè)MPO2-(NHR6-)的形成。經(jīng)uv吸收檢測(cè)MPO2(NHR6-)且相對(duì)于可信標(biāo)準(zhǔn)物來(lái)定量。為測(cè)定活化酶的組織分布，從包括肝、肺、腸、腎、心臟和骨骼肌在內(nèi)主要組織制備勻漿。如對(duì)以上微粒體反應(yīng)描述的那樣，評(píng)價(jià)在每一種勻漿中前藥轉(zhuǎn)化為MPO2-(NHR6-)的速率。或者，一旦鑒定主要的催化同種型，使用采用對(duì)抗特異性酶升高的抗體的免疫組織方法(Waziers等，1989、J.Pharm.Exp.Ther.254387)或采用PCR技術(shù)的分子生物學(xué)方法(Sumida等，2000，BBRC 267756)以測(cè)定所述活性的組織分布。
結(jié)果在易于測(cè)量的速率下，于人肝微粒體催化的反應(yīng)中前藥轉(zhuǎn)化為MPO2-(NHR6-)。在篩選克隆化微粒體同工酶中，盡管其它的同工酶對(duì)前藥也顯示一些活性，但CYP3A4同工酶在最高的速率下催化前藥的活化。組織分布研究表明在肝中的活化酶相對(duì)于其它組織具有高的活性或高度。
實(shí)施例E使用特異性酶抑制劑鑒定P450酶參與氨基磷酸酯前藥的活化在三種主要的P450同工酶的特異性抑制劑酮康唑(CYP3A4)、呋拉茶堿(CYP1A2)和磺胺苯吡唑(CYP2C9)不存在和存在下，評(píng)價(jià)前藥用于人微粒體催化轉(zhuǎn)化為MPO2-(NHR6-)。
方法反應(yīng)物(0.5ml，于37℃)由0.2M KH2PO4、13mM葡萄糖-6-磷酸酯、2.2mM NADP+、1單位的葡萄糖-6-磷酸酯脫氫酶、0-2.5mg/ml人微粒體蛋白(In Vitro Technologies公司)、250μM前藥和0-100μM P450同工酶抑制劑組成。經(jīng)加入甲醇至濃度為60％終止反應(yīng)且過(guò)濾(0.2μm濾膜)。經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)反相、離子對(duì)或離子交換HPLC方法，將MPO2-(NHR6-)定量。相對(duì)于已知濃度的可信標(biāo)準(zhǔn)物來(lái)定量各洗脫峰。
結(jié)果酮康唑呈劑量-依賴(lài)方式抑制MPO2-(NHR6-)的形成。其它抑制劑，呋拉茶堿和磺胺苯吡唑，顯示無(wú)明顯抑制作用。結(jié)果表明CYP3A4為人肝中擔(dān)負(fù)活化氨基磷酸酯前藥的主要P450同種型。
實(shí)施例F化合物1.3經(jīng)重組CYP3A4的活化在包含來(lái)自桿狀病毒感染的昆蟲(chóng)細(xì)胞共表達(dá)人重組CYP3A4和細(xì)胞色素P450還原酶(Panvera公司，Madison，WI)的微粒體的反應(yīng)中，評(píng)價(jià)1.3的活化。
方法反應(yīng)混合物組成與實(shí)施例D中描述的相似。經(jīng)加入甲醇至最終濃度為60％終止反應(yīng)且如在實(shí)施例A中描述的那樣經(jīng)HPLC分析產(chǎn)物。
結(jié)果在4.2nmoles/min./nmole CYP3A4的速率下，從1.3生成2-氨基-5-異丁基-4-[2-(5-膦?；鶈熙０?呋喃基]噻唑。
實(shí)施例G抗病毒氨基磷酸酯前藥在離體大鼠肝細(xì)胞中的活化通過(guò)監(jiān)測(cè)在大鼠肝細(xì)胞中相應(yīng)三磷酸核苷的細(xì)胞內(nèi)生成，評(píng)價(jià)3.1和3.2的活化。
方法按照如Groen(Groen，A.K.等，Eur.J.Biochem 122，87-93(1982))改進(jìn)的Berry和Friend(Berry，M.N.，F(xiàn)riend，D.S.J.Cell Biol.43，506-520(1969))的方法，從喂食、地塞米松誘導(dǎo)的Sprague-Dawley大鼠(300g)制備肝細(xì)胞。在包含10mM葡萄糖和1mg/ml BSA的2mlKrebs碳酸氫鹽緩沖液中，將肝細(xì)胞(62mg濕重/ml)溫育。于浸沒(méi)在迅速振搖的水浴(37℃)中的密閉的、50-ml Falcon管中的95％氧、5％二氧化碳?xì)夥罩?，進(jìn)行溫育。將3.1和3.2溶解于甲醇中以得到25mM儲(chǔ)備液，且然后稀釋到細(xì)胞懸浮液中，得到最終濃度為250μM。給藥后兩小時(shí)，移出細(xì)胞懸浮液的等分試樣并通過(guò)硅酮/礦物油層離心到10％高氯酸中。經(jīng)加入0.3體積的3M KOH/3M KHCO3，中和酸層中的細(xì)胞提取液，且然后把提取液離心，過(guò)濾(0.2微米)并填充到陰離子交換HPLC柱上，用70％A(10mM磷酸銨(pH3.5)，6％ETOH)和30％B(1M磷酸銨(pH3.5)，6％ETOH)平衡。于20分鐘內(nèi)用線性梯度至80％B從柱上分別洗脫AraATP和三磷酸阿昔洛韋，期待的3.1和3.2的代謝物。在254nm下經(jīng)uv吸收檢測(cè)。經(jīng)比較相對(duì)阻止進(jìn)入原始肝細(xì)胞提取液的可信標(biāo)準(zhǔn)物的峰面積，將峰面積定量。
結(jié)果在離體大鼠肝細(xì)胞中，兩種前藥分別生成它們的相應(yīng)的三磷酸酯。溫育兩小時(shí)后形成的水平總結(jié)如下化合物細(xì)胞內(nèi)濃度nmoles/g3.1 15.7±163.2 13.3±3實(shí)施例H激酶旁路在大鼠肝細(xì)胞中，比較由阿昔洛韋的氨基磷酸酯前藥(化合物3.2)和阿昔洛韋本身生成三磷酸阿昔洛韋。
方法如在實(shí)施例G中描述的那樣，于250μM下在離體大鼠肝細(xì)胞中評(píng)價(jià)3.2和阿昔洛韋。
結(jié)果溫育兩小時(shí)后，形成的三磷酸阿昔洛韋的水平總結(jié)如下化合物 細(xì)胞內(nèi)濃度nmoles/g阿昔洛韋 ＜23.213.3±3結(jié)果證實(shí)母體核苷例如阿昔洛韋的氨基磷酸酯前藥，其在細(xì)胞中被較差地磷酸化，能夠避開(kāi)核苷磷酸化步驟且因此產(chǎn)生比游離的核苷更高的細(xì)胞內(nèi)三磷酸酯水平。
實(shí)施例I在大鼠肝細(xì)胞中化合物1.3對(duì)葡萄糖產(chǎn)生的抑制作用在離體大鼠肝細(xì)胞中，試驗(yàn)化合物1.3及其磷酸母體化合物2-氨基-5-異丁基-4-(2-呋喃基)噻唑?qū)ζ咸烟钱a(chǎn)生的抑制作用。
方法如在實(shí)施例G中描述的那樣，由禁食的Sprague Dawley大鼠(250-300g)制備離體大鼠肝細(xì)胞。在包含10mM葡萄糖和1mg/mlBSA的1ml Krebs碳酸氫鹽緩沖液中，將肝細(xì)胞(75mg濕重/ml)溫育。于浸沒(méi)在迅速振搖的水浴(37℃)中的密閉的、50-ml Falcon管中的95％氧、5％二氧化碳?xì)夥罩?，進(jìn)行溫育。平衡10分鐘后，將乳酸鹽和丙酮酸鹽分別加至10mM和1mM濃度。加入這些葡糖異生的底物隨后迅速加入受試化合物至1-100μM范圍內(nèi)的濃度。1小時(shí)后，移出一等分試樣(0.25ml)并移至Eppendorf管中且離心。然后按照制造商的說(shuō)明書(shū)，使用葡萄糖氧化酶試劑盒(Sigma化學(xué)公司)，測(cè)試生成上清液(50μl)的葡萄糖含量。
結(jié)果1.3和2-氨基-5-異丁基-4-(2-呋喃基)噻唑呈劑量依賴(lài)關(guān)系抑制葡萄糖產(chǎn)生，IC50分別為8.5和2.5μM。因?yàn)?.3不是FBP酶的體外抑制劑，肝細(xì)胞中葡糖異生的抑制作用證實(shí)前藥細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)化為2-氨基-5-異丁基-4-(2-呋喃基)噻唑。1.3相對(duì)2-氨基-5-異丁基-4-(2-呋喃基)噻唑低于約3倍的效力與在細(xì)胞中前藥與母體化合物為時(shí)間-依賴(lài)性活化相一致。
實(shí)施例J抗糖尿病和抗病毒氨基磷酸酯前藥在誘導(dǎo)的大鼠肝細(xì)胞中的活化試驗(yàn)化合物1.7和12.1在由大鼠分離的肝細(xì)胞中的活化，其中經(jīng)地塞米松處理誘導(dǎo)CYP3A4表達(dá)。這種處理導(dǎo)致氨基磷酸酯前藥細(xì)胞內(nèi)更廣泛的活化。
方法如(Brain EGC等，1998，Br.J.Cancer 71768)描述的那樣，用地塞米松(50mg/kg，腹膜內(nèi))處理大鼠4天。制備離體肝細(xì)胞，且如在實(shí)施例G中描述的那樣試驗(yàn)前藥的活化。
結(jié)果溫育2小時(shí)后，1.7活化得到20.5±3nmole/g水平的2-氨基-5-甲硫基-4-[2-(5-膦?；?呋喃基]噻唑。12.1生成110±0.2nmoles/g三磷酸阿昔洛韋。
實(shí)施例K氨基磷酸酯前藥在非CYP3A4表達(dá)細(xì)胞系的細(xì)胞毒性試驗(yàn)經(jīng)限制暴露于游離MPO2-(NHR6-)和代謝物，給予以血漿-穩(wěn)定前藥形式存在的藥物能夠減少全身毒性。通過(guò)比較細(xì)胞系中前藥和相應(yīng)母體化合物的毒性分布證實(shí)前藥傳遞的潛在優(yōu)點(diǎn)，所述細(xì)胞系不表達(dá)前藥活化所需要的CYP3A4酶。
方法通過(guò)母體化合物已知的毒性分布決定細(xì)胞系的選擇。如果母體化合物的毒性分布是未知的，能夠試驗(yàn)一組不同培養(yǎng)的細(xì)胞系。使細(xì)胞暴露于一定范圍內(nèi)的前藥和母體化合物濃度數(shù)小時(shí)至數(shù)天。通過(guò)錐蟲(chóng)藍(lán)排斥、酶標(biāo)記物滲漏、標(biāo)記胸苷摻合到DNA中或其它的標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)量生存力。
結(jié)果在比相應(yīng)母體化合物更高的濃度下，氨基磷酸酯前藥為非細(xì)胞毒性或細(xì)胞毒性的。后一分布提示即使全身暴露于前藥是高的，相對(duì)于游離母體化合物它可能顯示體內(nèi)減少的外周毒性。在這種方式下受試前藥使前藥的內(nèi)在毒性評(píng)價(jià)得以進(jìn)行且能夠用于選擇具有優(yōu)良細(xì)胞安全性分布的前藥。
實(shí)施例L在催化氨基磷酸酯前藥活化的細(xì)胞系統(tǒng)中的細(xì)胞毒性試驗(yàn)在氨基磷酸酯前藥被活化的系統(tǒng)中的細(xì)胞毒性試驗(yàn)使MPO2-(NHR6-)和生成的前藥或母體化合物的其它代謝物的安全性評(píng)價(jià)得以進(jìn)行。幾種細(xì)胞系統(tǒng)用于試驗(yàn)(a)人或其它來(lái)源的肝細(xì)胞的新鮮的原代培養(yǎng)物，其中用適宜的誘導(dǎo)劑例如利福平維持CYP3A4表達(dá)，(b)其中CYP3A4和所需要的還原酶被共轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系，(c)與表達(dá)CYP3A4的原代肝細(xì)胞共溫育的細(xì)胞系，(d)與含有微粒體部分的CYP3A4或除標(biāo)準(zhǔn)NADPH再循環(huán)系統(tǒng)以外的克隆化CYP3A4制備液共溫育的細(xì)胞系。在這些系統(tǒng)中，溫育前藥數(shù)小時(shí)或數(shù)天。通過(guò)例如錐蟲(chóng)藍(lán)排斥技術(shù)、酶標(biāo)記物滲漏、標(biāo)記的前體摻合到細(xì)胞DNA中等標(biāo)準(zhǔn)方法評(píng)價(jià)細(xì)胞毒性。
實(shí)施例M副產(chǎn)物體外毒性試驗(yàn)?zāi)承┌被姿狨デ八幍幕罨?，除生成MPO2-(NHR6-)以外，也導(dǎo)致形成能夠使細(xì)胞成分烷基化的親電副產(chǎn)物。因?yàn)樗懻摰那八幹饕诟沃谢罨笫蟾渭?xì)胞，已知其包含前藥活化必需的微粒體酶以及關(guān)鍵解毒機(jī)制兩者是被選擇用來(lái)試驗(yàn)形成的副產(chǎn)物的潛在毒性的細(xì)胞類(lèi)型。
方法制備離體大鼠肝細(xì)胞且如在實(shí)施例G中描述的那樣與受試化合物一起溫育。在這些試驗(yàn)中對(duì)乙酰氨基酚(0-10mM)用作陽(yáng)性對(duì)照，因?yàn)橐惨阎谶@些細(xì)胞中其微粒體機(jī)制生成親電代謝物(SmolarekTA等1989，Metabolism and Disposition 18659)。經(jīng)加入在肝細(xì)胞中以mM濃度存在的保護(hù)性硫醇的谷胱甘肽使這種代謝物解毒。對(duì)乙酰氨基酚與氨基磷酸酯前藥一起溫育4小時(shí)。經(jīng)乳酸脫氫酶或其它的肝酶滲漏和/或經(jīng)錐蟲(chóng)藍(lán)排斥，評(píng)價(jià)細(xì)胞的生存力。如(Baker MA等1990，Anal.Biochem.190360)描述的那樣，也將細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽貯存定量。
結(jié)果在最高試驗(yàn)劑量(10mM)下，對(duì)乙酰氨基酚減少細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽水平90％但不包括經(jīng)錐蟲(chóng)藍(lán)排斥測(cè)量的細(xì)胞生存力。數(shù)據(jù)提示在肝細(xì)胞中作為對(duì)乙酰氨基酚代謝結(jié)果生成的副產(chǎn)物易于解毒，且細(xì)胞解毒能力未被超過(guò)。在這種肝細(xì)胞系統(tǒng)中，氨基磷酸酯前藥的活化不引起與副產(chǎn)物有關(guān)的毒性。
實(shí)施例N副產(chǎn)物體內(nèi)毒性試驗(yàn)在小鼠上試驗(yàn)?zāi)承┌被姿狨デ八幍奈⒘ｓw活化后生成親電體的毒性。
方法給予小鼠多個(gè)劑量的前藥和對(duì)乙酰氨基酚(陽(yáng)性對(duì)照，參見(jiàn)實(shí)施例M)并在給藥后于多個(gè)時(shí)間點(diǎn)連續(xù)處死動(dòng)物。移出肝臟且如在實(shí)施例M中描述的那樣分析谷胱甘肽，經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)反相、離子對(duì)或離子交換HPLC方法分析藥物。血漿樣品經(jīng)歷其中評(píng)價(jià)肝功能標(biāo)記物的標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)。
結(jié)果對(duì)乙酰氨基酚暴露(50，250和500mg/kg)導(dǎo)致劑量-依賴(lài)性還原肝的谷胱甘肽。以肝酶的升高和壞死斑外觀形式的肝毒性?xún)H在最高劑量下是明顯的，其將肝谷胱甘肽減少＞85％。這與文獻(xiàn)相符，即谷胱甘肽與形成的親電的對(duì)乙酰氨基酚代謝物形成加成物，且保護(hù)免于肝損傷直到達(dá)到減少的閾值水平(Mitchell JR等1973，J.Pharm.andExp.Ther 187211)。給予氨基磷酸酯前藥也導(dǎo)致谷胱甘肽減少，表明形成的副產(chǎn)物有效解毒。肝損傷僅在如上設(shè)計(jì)的人治療劑量以上的非常高的劑量下才明顯。數(shù)據(jù)也顯示給予氨基磷酸酯前藥后MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物的劑量-依賴(lài)性集聚。
實(shí)施例O藥物增強(qiáng)傳遞至預(yù)先用CYP3A誘導(dǎo)劑處理的動(dòng)物的肝通過(guò)用地塞米松或其它合適的藥物，在大鼠上誘導(dǎo)肝CYP3A酶。增強(qiáng)的CYP3A表達(dá)將導(dǎo)致較高速率的前藥活化且因此增強(qiáng)MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物對(duì)這個(gè)器官的分布。
方法如(Brain EGC等1998，Br.J.Cancer 71768)描述的那樣，用地塞米松(50mg/kg，腹膜內(nèi))處理大鼠4天。也可使用其它的CYP誘導(dǎo)劑例如苯巴比妥或利福平。然后經(jīng)口服或全身性給予誘導(dǎo)的動(dòng)物前藥并在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)上連續(xù)處死動(dòng)物。移出肝臟并在高氯酸(10％)中勻化。經(jīng)離心澄清且中和后，經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)HPLC方法定量勻漿中的MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物。在未誘導(dǎo)的動(dòng)物上進(jìn)行相似的研究。
結(jié)果所誘導(dǎo)大鼠的肝中MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物的AUC將超過(guò)未誘導(dǎo)的大鼠。人們期待從CYP3A誘導(dǎo)生成的MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物的增強(qiáng)的肝傳遞導(dǎo)致增加的效力。
實(shí)施例P氨基磷酸酯前藥的口服生物利用度通過(guò)比較口服給藥后肝中生成的與靜脈給藥后生成的MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物曲線下面積(AUC)，評(píng)價(jià)氨基磷酸酯前藥的口服生物利用度(OBAV)。或者，借助給予前藥后MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物的尿排泄試驗(yàn)，測(cè)定OBAV。
方法用在適宜溶媒中的氨基磷酸酯前藥口服及全身給予大鼠且在給予藥物后于合適的時(shí)間點(diǎn)上連續(xù)處死大鼠。得到肝和血漿樣品，處理并經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)反相、離子對(duì)或離子交換用HPLC方法分析MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物。或者，給藥后將動(dòng)物放置于代謝籠中，且收集尿24-48小時(shí)。然后經(jīng)HPLC分析測(cè)定MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物排泄在尿中的量。通過(guò)比較MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物在肝中的AUC，或口服及全身給藥后在尿中的量，計(jì)算口服生物利用度。
結(jié)果數(shù)據(jù)表明氨基磷酸酯前藥適合于口服傳遞MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物。
實(shí)施例Q給予氨基磷酸酯前藥后MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物的增強(qiáng)的肝傳遞和減少的全身暴露方法用氨基磷酸酯前藥、MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物口服或全身給予大鼠。給予藥物后，在合適的時(shí)間點(diǎn)上連續(xù)處死動(dòng)物。得到肝和血漿樣品，處理并經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)反相、離子對(duì)或離子交換HPLC分析MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物。
結(jié)果給予氨基磷酸酯前藥導(dǎo)致在肝中生成較高水平的MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物且它們?cè)谘獫{中的濃度比給予游離的MPO2-(NHR6-)時(shí)更為降低。
實(shí)施例R給予氨基磷酸酯前藥后MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物的降低的腎排泄作用方法將氨基磷酸酯前藥和相應(yīng)的MPO2-(NHR6-)全身性給予大鼠。隨后將大鼠放入代謝籠中并在24-48小時(shí)期間收集尿。借助標(biāo)準(zhǔn)反相、離子對(duì)或離子交換HPLC方法定量MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物。通過(guò)使母體化合物/代謝物尿中的排泄量與給予的劑量相關(guān)聯(lián)，計(jì)算％腎清除率。
結(jié)果給予氨基磷酸酯前藥后，MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物的腎排泄率低于給予母體化合物時(shí)的腎排泄率。這個(gè)結(jié)果表明通過(guò)給予以氨基磷酸酯前藥形式存在的化合物可避免腎暴露且因此避免與某些母體化合物和/或其代謝物有關(guān)的腎毒性。
實(shí)施例S持續(xù)的肝藥物水平方法用氨基磷酸酯前藥或相應(yīng)的MPO2-(NHR6-)口服及全身性給予大鼠且給予藥物后在合適的時(shí)間點(diǎn)上連續(xù)處死動(dòng)物。得到肝樣品，處理并經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)反相、離子對(duì)或離子交換HPLC方法分析MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物。用WinNonLin 1.1軟件(Scientific Consulting公司)輔助測(cè)定肝的半衰期。
結(jié)果給予氨基磷酸酯形式的前藥時(shí)，肝中MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物的半衰期比給予游離MPO2-(NHR6-)時(shí)的半衰期更長(zhǎng)。這個(gè)結(jié)果與前藥用作MPO2-(NHR6-)貯庫(kù)相一致，且隨著體內(nèi)半衰期延長(zhǎng)，提供持續(xù)釋放MPO2-(NHR6-)和/或其代謝物進(jìn)入肝中。
權(quán)利要求
1.根據(jù)化學(xué)式VI的化合物 其中V選自由苯基、3，5-二氯苯基、2，4-二氯苯基、3-溴-4-氟苯基、3-氯苯基、3-溴苯基、4-吡啶基和3-溴吡啶基組成的組，每個(gè)Y獨(dú)立地選自-NR6-和-O-、其中R6選自由H和低級(jí)烷基組成的組，以及M是選自以下組中的化合物的殘基9-β-D-阿糖腺苷，簡(jiǎn)稱(chēng)ara-A，阿糖胞苷，簡(jiǎn)稱(chēng)ara-C；M和V互為順式；其中所述低級(jí)烷基包括高達(dá)6個(gè)碳原子。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中至少一個(gè)Y是-NR6-。
全文摘要
本發(fā)明描述新的式(I)藥物的環(huán)狀氨基磷酸酯前藥，它們?cè)趯⑺幬飩鬟f給肝中的用途，它們?cè)谔岣呖诜锢枚戎械挠猛荆鼈兊闹苽涞姆椒ā?br> 文檔編號(hào)C07F9/6584GK101037450SQ20071009694
公開(kāi)日2007年9月19日 申請(qǐng)日期2000年3月3日 優(yōu)先權(quán)日1999年3月5日
發(fā)明者M·D·埃里安, K·R·雷迪, S·H·波耶爾 申請(qǐng)人:癥變治療公司