專(zhuān)利名稱：：穩(wěn)定化的液體多肽制劑的制作方法穩(wěn)定化的液體多肽制劑相關(guān)信息本申請(qǐng)要求題為"穩(wěn)定化的液體多肽制劑"的具有序列號(hào)60/648,639的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)(2005年1月28日提交)的權(quán)益。以上所提及申請(qǐng)的全部?jī)?nèi)容在本文中引用作為參考。本說(shuō)明書(shū)通篇所引用的全部其它專(zhuān)利、專(zhuān)利申請(qǐng)和參考文獻(xiàn)的內(nèi)容也因此完整地引用作為參考。
背景技術(shù)：
：為了使任意肽的藥學(xué)益處最大化，有必要獲得穩(wěn)定的、容易而可重復(fù)制造的并且為標(biāo)準(zhǔn)施用途徑設(shè)計(jì)的成品劑型。具體而言，獲得原料蛋白質(zhì)例如治療性多肽的穩(wěn)定的濃縮形式是所需要的，這種穩(wěn)定的濃縮形式適合用于進(jìn)一步制造成多肽的成品劑型，其隨后可以通過(guò)所需的施用途徑施用。在原料多肽和成品劑型中，多肽的穩(wěn)定性可以受到如下因素影響，如離子強(qiáng)度、pH、溫度、反復(fù)的凍/融循環(huán)和剪切力。活性多肽可能因包括變性和聚集(形成可溶的和不可溶的聚集物)在內(nèi)的物理不穩(wěn)定性及化學(xué)不穩(wěn)定性的結(jié)果而丟失，化學(xué)不穩(wěn)定性包括例如水解、脫跣胺作用和氧化作用，不一而足。對(duì)于蛋白質(zhì)藥物穩(wěn)定性的一般綜述，見(jiàn)例如，Manning等，PharmaceuticalResearch6:903-918(1989)。此外，需要在制劑中不包括栽體多肽時(shí)能維持穩(wěn)定性。盡管廣泛認(rèn)識(shí)到，這些可能的多肽不穩(wěn)定性可以發(fā)生，然而在多肽已經(jīng)得到研究前，不可能預(yù)測(cè)特定蛋白質(zhì)可能具有的特殊穩(wěn)定性問(wèn)題。任何此類(lèi)不穩(wěn)定性可能潛在地導(dǎo)致形成如此多肽副產(chǎn)物或衍生物，即其具有降低的活性、增加的毒性和/或增加的免疫原性。實(shí)際上，多肽沉淀可能引起凝血、劑型的非均一性和免^LA應(yīng)。因此，任何多肽藥物制劑的安全和效力直接與制劑的穩(wěn)定性相關(guān)。因而，本領(lǐng)域中一直存在對(duì)如此方法的需要，即其用于在濃縮過(guò)程期間改善蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性以及用于在缺乏其它載體蛋白質(zhì)的情況下為濃度高到足夠用于多種施用途徑的蛋白質(zhì)提供穩(wěn)定性。發(fā)明簡(jiǎn)述本發(fā)明提供設(shè)計(jì)旨在提供穩(wěn)定性并維持所加入的生物活性蛋白質(zhì)尤其是抗原結(jié)合性多肽(例如抗體或其片段)的生物學(xué)活性的制劑.本發(fā)明還提供多肽制劑，即抵抗不為所需的多肽副產(chǎn)物形成的穩(wěn)定化的液體多肽制劑。用于治療用途的抗原結(jié)合性多肽的完整性尤其重要，因?yàn)槿绻谫A存期間多肽形成副產(chǎn)物，例如聚集物或降解片段，則生物活性可能喪失，因此損害每單位劑量分子的治療活性。此外，迫切需要穩(wěn)定旨在用于特化的功能、用于在某些生物學(xué)適應(yīng)癥中送遞和使用的治療性多肽，例如治療其中多肽必須穿越血腦屏障(BBB)并結(jié)合靶抗原的神經(jīng)退化性疾病。為此用途必須加以穩(wěn)定化的示例性抗體包括如此抗體，即其適用于結(jié)合疾病靶標(biāo)，尤其是抗原性疾病把標(biāo)，例如癌抗原、自身抗原、過(guò)敏原和病原體。因此，本發(fā)明具有數(shù)個(gè)優(yōu)勢(shì)，包括但不限于-穩(wěn)定化的液體多肽制劑，其通過(guò)添加抗氧化劑穩(wěn)定化以防止多肽副產(chǎn)物形成；-適合在多種施用途徑中使用的穩(wěn)定化的液體多肽制劑；-用于將藥物用途的治療性多肽制備成穩(wěn)定化的液體多肽制劑的方法；以及-適合用于治療神經(jīng)退行性疾病的穩(wěn)定化的結(jié)合性多肽制劑。因而，在一個(gè)方面，本發(fā)明提供穩(wěn)定化的液體多肽制劑，其設(shè)計(jì)旨在提供穩(wěn)定性以及維持加入的多肽的生物學(xué)活性。仍在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供包含有治療活性的抗原結(jié)合性多肽和抗氧化劑例如甲硫氨酸或其類(lèi)似物的制劑，其中抗氧化劑處于足以減少在制劑貯存期間多肽的副產(chǎn)物形成的量。在一個(gè)實(shí)施方案中，制劑中有治療活性的抗原結(jié)合性多肽成分是抗體(例如，IgM、IgG"IgG2、IgG2、IgG3、IgG4)(例如，人IgM、IgG"IgG2、IgG2、IgG3、IgG4同種型抗體)、抗體Fv片段、抗體Fab片段、抗體Fab，(2)片段、抗體Fd片段、單鏈抗體(scFv)、單結(jié)構(gòu)域抗體片段(Dab)、包含至少一個(gè)抗體互補(bǔ)性決定區(qū)域(CDR)的/3-折疊多肽或包含至少一個(gè)抗體互補(bǔ)性決定區(qū)域(CDR)的非球狀多肽。在特定的實(shí)施方案中，將液體多肽制劑穩(wěn)定化以防止不需要的副產(chǎn)物如高分子量多肽聚集物、低分子量多肽降解產(chǎn)物或其混合物的形成。在相關(guān)實(shí)施方案中，其中治療性抗原結(jié)合性多肽是抗體，典型的高分子量的聚集物例如是抗體:抗體復(fù)合體、抗體:抗體片段復(fù)M、抗體片段抗體片段復(fù)合體或其混合物.通常，高分子量的復(fù)合體或副產(chǎn)物具有比抗原結(jié)合性多肽的單體更大的分子量，例如以IgG抗體為例，大于約150kD。在另一個(gè)相關(guān)實(shí)施方案中，當(dāng)治療性多肽是抗體時(shí)，典型的低分子量的多肽降解產(chǎn)物例如是由抗體輕鏈、抗體重鏈、抗體輕鏈與抗體重鏈的復(fù)合體或其混合物組成的復(fù)合體。通常，低分子量的復(fù)合體或副產(chǎn)物具有比抗原結(jié)合性多肽的單體更小的分子量，例如以IgG抗體為例，小于約150kD。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供穩(wěn)定化的制劑，其包含有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、甲硫氨酸(在制劑中甲硫氨酸作為抗氧化劑以足夠抑制不想要的副產(chǎn)物形成的量存在)、張力劑(例如，甘露醇)(在制劑中張力劑以足夠使制劑適合用于施用例如靜脈內(nèi)輸注的量存在)以及氨基酸(例如，組氨酸)或其衍生物(在制劑中氨基酸或其衍生物以足夠維持生理適合的pH的量存在)。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供穩(wěn)定化的制劑，其包含有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、甲硫氨酸(在制劑中甲多危氨酸作為抗氧化劑以足夠抑制不想要的副產(chǎn)物形成的量存在)、張力劑(例如，甘露醇)(在制劑中張力劑以足夠使制劑適合用于靜脈內(nèi)輸注的量存在)以及氨基酸(例如，組氨酸)或其衍生物(在制劑中氨基酸或其衍生物以足夠維持生理適合的pH的量存在)。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供包含有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、甘露醇和組氨酸的制劑。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供包含有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、甲硫氨酸、甘露醇和組氨酸的穩(wěn)定化的制劑。在某些實(shí)施方案中，有治療活性的抗原結(jié)合性多肽是這樣的抗體(或其部分或片段)，其結(jié)合選自包括例如癌抗原、自身免疫抗原、過(guò)敏原和病原體在內(nèi)的抗原'在某些實(shí)施方案中，有治療活性的抗原結(jié)合性多肽是結(jié)合性多肽，例如抗A/S抗體(或其部分或片段)。在一些制劑中，至少一種A^結(jié)合性多肽是例如特異性地結(jié)合至A(3的第1-7、1-5、3-7、3-6、13-28、15-24、16-24、16-21、19-22、33-40、33-42位殘基范圍內(nèi)表位的抗A卩抗體，或其Fab、Fab，(2)或Fv片段。示例性抗Aj3抗體特異性地結(jié)合至A卩的第1-10位殘基范圍內(nèi)，例如A卩的第l-7、1-5、3-7、或3-6位殘基范圍內(nèi)的表位。另一些示例性抗抗體特異性地結(jié)合至A卩的第13-28位殘基范圍內(nèi)，例如AP的笫16-21或19-22位瓶基范圍內(nèi)的表位。另一些示例性抗A/S抗體特異性地結(jié)合至AP的g末端表位，例如AP的33-40或33-42。在一個(gè)實(shí)施方案中，Aj3抗體是人源化抗體，例如人源化的3D6抗體、人源化的10D5抗體、人源化的12B4抗體、人源化的15C11抗體或人源化的12A11抗體。有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)可以以約0.1mg/ml至約200mg/ml(例如，在約20mg/ml或30mg/ml)存在。抗體的同種型可以是IgM、IgGl、IgG2、IgG3、IgG4或任何其它可藥用的同種型。在優(yōu)選的制劑中，同種型是人IgGl或人IgG4。在一些液體制劑中，抗A/3抗體的濃度是約0.1mg/ml至約60mg/ml、約40mg/ml至約60mg/ml、約50mg/ml、約30mg/ml、約17mg/ml至約23mg/ml、約20mg/ml、約17mg/ml、約10mg/ml、約5mg/ml、約2mg/ml或約1mg/ml、優(yōu)選地是約17mg/ml至約23mg/ml。在某些實(shí)施方案中，甘露醇以足夠維持制劑等張性的量存在。甘露醇可以以約2。/。w/v至約6。/。w/v(例如，約4Q/ow/v)存在。在前述方面的多種實(shí)施方案中，組氨酸可以以足夠維持生理適合的pH的量存在。組氨酸(例如，L-組氨酸)可以以約0.1mM至約25mM(例如，約10mM)存在。在其它實(shí)施方案中，制劑還可以包含抗氧化劑，如甲減裒酸。甲M酸可以以約0.1mM至約25mM(例如，約10mM)存在。在另一個(gè)實(shí)施方案中，制劑可以包含穩(wěn)定劑如聚山梨酯80。聚山梨酯80可以以約0.001%w/v至約0.01%w/v(例如，約0.005。/ow/v)存在。在某些實(shí)施方案中，制劑具有約5至約7(例如，約6)的pH。在某些實(shí)施方案中，制劑可以對(duì)于冷凍是穩(wěn)定的。此外，制劑可以適合于腸胃外、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、顱內(nèi)或^外施用。在多種實(shí)施方案中，制劑可以適合用于定向送遞至受試者的腦或脊液。在其它實(shí)施方案中，制劑可以基本上不含防腐劑。制劑可以穩(wěn)定至少約12個(gè)月、至少約18個(gè)月、至少約24個(gè)月或至少約30個(gè)月。在多種實(shí)施方案中，制劑在約-80。C至約40。C、在約0°C至約25°C或在約2°C至約8°C下穩(wěn)定。某些制劑穩(wěn)定至少約12個(gè)月、至少約18個(gè)月、至少約24個(gè)月或至少約30個(gè)月。某些制劑在約-80。C至約40°C、在約0°C至約25°C、在約0°C至約10°C、優(yōu)選地在約-80。C至約-50。C或在約2°C至約8°C下穩(wěn)定。某些制劑在高于冷凍至約10°C的溫度下穩(wěn)定至少約12個(gè)月并具有約5.5至約6.5至的pH。在特定的方面，本發(fā)明提供適合用于靜脈內(nèi)施用的制劑，其包含約20mg/ml的有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、約10mML-組氨酸、約10mM甲硫氨酸、約4%甘露醇并具有約6的pH。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供適合用于靜脈內(nèi)施用的制劑，其包含約20mg/ml的有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、約10mML-組氨酸、約10mM甲硫氨酸、約4%甘露醇、約0.01%聚山梨酯80并具有約6的pH。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供適合用于靜脈內(nèi)施用的制劑，其包含20mg/ml的有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、約10mML-組氨酸、約10mM甲石克氨酸、約4%甘露醇、約0.005%聚山梨酯80并具有約6的pH。一些制劑在高于冷凍至約10°C的溫度下穩(wěn)定至少約12個(gè)月并具有約5.5至約6.5的pH。此制劑包含至少一種濃度為約1mg/ml至約30mg/ml的有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、濃度為約4%w/v的甘露醇或濃度為約150mM的NaCl、濃度為約5mM至約10mM的組氨酸或琥珀酸以及10mM甲硫氨酸。一種此類(lèi)制劑具有約6.0的pH、約lmg/ml的有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、約10mM組氨酸和約4%w/v甘露醇。另一些制劑于約2°C至8°C的溫度下穩(wěn)定至少約24個(gè)月，并包含濃度為約0.001%w/v至約0.01%w/v的聚山梨酯80。一些此類(lèi)制劑具有約6.0至約6.5的pH并且包含約10mM組氨酸、約4%w/v甘露醇以及約1mg/ml、約2mg/ml或約5mg/ml有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)。其它的此類(lèi)制劑包含約10mM組氨酸、約4°/。w/v甘露醇、約0.005%w/v聚山梨酯80以及約10mg/ml、約20mg/ml或30mg/ml有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、優(yōu)選地具有約6.0至約6.2的pH。優(yōu)選的制劑在溫度約2。C至約8。C下穩(wěn)定至少約24個(gè)月，具有約5.5至約6.5的pH并包含約2mg/ml至約23mg/ml、優(yōu)選地約17mg/ml至約23mg/ml的人源化3D6抗體、約10mM組氨酸以及約10mM曱硫氨酸。優(yōu)選地，該制劑還包含約4%w/v甘露醇。制劑優(yōu)選地包含濃度為約0.001%w/v至約0.01%w/v的聚山梨酯80、更優(yōu)選地是約0.005%w/v聚山梨酯80。在此類(lèi)制劑中，人源化的3D6抗體可以以約20mg/ml至約23mg/ml的濃度存在。另一種制劑于溫度約2°C至約8°C下穩(wěn)、定至少約24個(gè)月，具有約5.5至約6.5的pH并包含約2mg/ml至約23mg/ml的有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、約10mM琥珀酸、約10mM甲硫氨酸、約4%w/v甘露醇以及約0.005%w/v聚山梨酯80。在一些此類(lèi)制劑中，有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)以約17mg/ml至約23mg/ml的濃度存在。本發(fā)明還提供制劑，其在從約-50°C至約-80。C融化時(shí)穩(wěn)定，具有約6.0的pH并包含約40至約60mg/ml的有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、約1.0mg/ml至約2.0mg/ml組氨酸、約1.0mg/ml至2.0mg/ml曱硫氨酸以及約0.05mg/ml聚山梨酯80。優(yōu)選地，不包M露醇。本發(fā)明還提供包含了有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、甘露醇和組氨酸的液體制劑。在一些此類(lèi)制劑中，有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)以約lmg/ml至約30mg/ml存在。優(yōu)選地，甘露醇以足夠維持制劑等張性的量存在。優(yōu)選地，組氨酸以足夠維持生理適合的pH的量存在。一種此類(lèi)制劑包含約20mg/ml有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、約10mML-組氨酸、約10mM甲琉氤酸、約4%甘露醇并具有約6的pH。另一種此類(lèi)制劑包含約30mg/ml有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、約10mM琥珀酸、約10mM甲硫氨酸、約6%甘露醇并具有約6.2的pH。又一種此類(lèi)制劑包含約20mg/ml有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、約10mML-組氨酸、約10mM甲石克氨酸、約4%甘露醇、約0.005%聚山梨酯80并具有約6的pH。另一種此類(lèi)制劑包含約IOmg/ml有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、約IOmM琥珀酸、約IOmM甲硫氨酸、約10%甘露醇、約0.005%聚山梨酯80并具有約6.5的卩11。又一種此類(lèi)制劑包含約5mg/ml至約20mg/ml有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、約5mM至約10mML-組氨酸、約10mM甲硫氨酸、約4%甘露醇、約0.005%聚山梨酯80并具有約6.0至約6.5的pH。又一種此類(lèi)制劑包含約5mg/ml至約20mg/ml有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、約5mM至約10mML-組氨酸、約10mM甲石危氨酸、約150mMNaCl、約0.005%聚山梨酯80并具有約6.0至約6.5的pH。本發(fā)明還提供適合用于靜脈內(nèi)施用的制劑，其包含約20mg/ml的有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、約10mML-組氨酸、約10mM甲減裒酸、約4%甘露醇并具有約6的pH。優(yōu)選地，此制劑包含約0.005%聚山梨酯80。本發(fā)明提供用于增加液體藥物制劑中抗原結(jié)合性多肽例如抗體穩(wěn)定性的方法，否則在液體制劑貯存期間多肽將形成副產(chǎn)物。因此，該方法包括將抗氧化劑例如甲硫氨酸或其類(lèi)似物以足夠減少副產(chǎn)物形成數(shù)量的量加入制劑中。本發(fā)明還提供方法，其用于維持待貯存在溫度約-50。C至約"80。C、隨后]i&存在溫度約2°C至約8°C的有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)制劑的穩(wěn)定性，包括(i)將約40mg/ml至約60mg/ml有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、約1mg/ml至約2mg/mlL-組氨酸、約1mg/ml至約2mg/ml甲減氨酸以及約0.05mg/ml聚山梨酯80組合；(ii)調(diào)節(jié)pH至約6.0;(iii)過(guò)濾至冷凍容器中并冷凍；(iv)融化；(v)添加其量足以產(chǎn)生約4%終濃度的甘露醇或約150mMNaCl、約2mg/ml至約20mg/ml有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)的甘露醇或NaCl以及稀釋劑；約5mM至約10mM組氨酸；約10mM甲硫氨酸以及約0.005%聚山梨酯80;(vi)過(guò)濾；(vii)轉(zhuǎn)移至玻璃小瓶并密封；和(viii)貯存在約2°C至約8°C的溫度下。本發(fā)明還提供試劑盒，其包含具有本文中所述制劑的容器和用途說(shuō)明書(shū)。本發(fā)明還提供包含如此制劑的藥物單位劑型，所述制劑包含約IOmg至約250mg的有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、約4%甘露醇或約150mMNaCl、約5mM至約10mM組氨酸或琥珀酸以及約10mM甲硫氨酸，一些此類(lèi)藥物單位劑型包含約0.001%至約0.1%的聚山梨酯80。一些此類(lèi)藥物單位劑型包含約40mg至約60mg、約60mg至約80mg、約80mg至約120mg、約120mg至約160mg或約160mg至約240mg的有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)。一些此類(lèi)制劑可以在施用至患者前在玻璃小瓶?jī)?nèi)于約2°C至約8°C的溫度下維持。此外，本發(fā)明提供包括包含如下制劑的玻璃小瓶的治療產(chǎn)品，所述制劑包含約10mg至約250mg有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、約4%甘露醇或約150mMNaCl、約5mM至約10mM組氨酸以及約10mM甲硫氨酸的制劑。一些此類(lèi)治療產(chǎn)品還包括如此用途標(biāo)簽，其包括在患者中實(shí)現(xiàn)約0.15mg/kg至約5mg/kg劑量所需務(wù)使用的適宜體積的說(shuō)明書(shū)。一般地，小fcilml、2ml、5ml、10ml、25ml或50ml的小瓶。一些此類(lèi)治療產(chǎn)品的劑量是約0.5mg/kg至約3mg/kg、優(yōu)選地是約1mg/kg至約2mg/kg。在一些此類(lèi)治療產(chǎn)品中，有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)的濃度是約10mg/ml至約60mg/ml、優(yōu)選地是約20mg/ml。治療產(chǎn)品優(yōu)選地包含約0.005%聚山梨酯80。一些此類(lèi)治療產(chǎn)品的制劑用于皮下施用或靜脈內(nèi)施用。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供用于增加液體藥物制劑中抗原結(jié)合性多肽例如抗體穩(wěn)定性的方法，否則多肽將于液體制劑貯存期間形成副產(chǎn)物。因此，該方法包括將抗氧化劑例如甲硫氨酸或其類(lèi)似物以足夠減少副產(chǎn)物形成數(shù)量的量加入制劑。在又一個(gè)方面，本發(fā)明提供試劑盒，其包含具有本文中所述制劑的容器和用途說(shuō)明書(shū)。從如下的詳細(xì)描述和權(quán)利要求書(shū)中本發(fā)明的其它特征和優(yōu)勢(shì)將顯而易見(jiàn)。附圖簡(jiǎn)述圖l描述IgG抗體的預(yù)測(cè)結(jié)構(gòu)以及鏈內(nèi)和鏈間二硫鍵、糖基化作用位點(diǎn)(六角形符號(hào))、互補(bǔ)性決定區(qū)域(CDR)、框架區(qū)(陰影標(biāo)注)和恒定區(qū)的大致位置的示意圖。圖2鑒定了人源化3D6第2版(hu3D6.v2)抗Aj8抗體輕鏈和重鏈(分別為SEQIDNO:l和SEQIDNO:2)的完整M酸序列。輕鏈互補(bǔ)性決定區(qū)域(CDR)，即CDR1、CDR2、和CDR3分別在^l^位置24-39、55-61和94-102處(上半部分)。重鏈互補(bǔ)性決定區(qū)域(CDR),即CDR1、CDR2、和CDR3分別在殘基位置40-44、50-65和99-108處(下半部分)。預(yù)測(cè)的分子內(nèi)二硫鍵由所涉及的半胱氨酸殘基的連接顯示。在預(yù)測(cè)形成分子內(nèi)二硫鍵的半胱氨酸下劃線并且標(biāo)出連接?？贵w重鏈的N-連接糖基化作用共有位點(diǎn)以粗體斜體在殘基位置299-301處標(biāo)出(下半部分)。預(yù)測(cè)的重鏈g末端賴氨酸在括號(hào)內(nèi)顯示。圖3以圖形方式描述根據(jù)本發(fā)明制造并在5。C貯存的抗體制劑(含或不含聚山梨酯80(PS80))的貯藏壽命預(yù)測(cè)。圖4以圖形方式描述根據(jù)本發(fā)明制造并在25°C貯存的抗體制劑(含或不含PS80))的貯藏壽命預(yù)測(cè)。圖5以圖形方式描述根據(jù)本發(fā)明制造并在40°C貯存的抗體制劑(含或不含PS80))的貯藏壽命預(yù)測(cè)。圖6以圖形方式描述根據(jù)本發(fā)明制造并在5。C貯存的含PS80的制劑的降解預(yù)測(cè)。圖7以圖形方式描述根據(jù)本發(fā)明制造、在5。C貯存并再次加工以使分析變異最小化的含PS80的制劑的大小排阻層析(SEC)分析。圖8以圖形方式描述根據(jù)本發(fā)明制造并在5°C貯存的不含PS80的制劑的降解預(yù)測(cè)。圖9描述的層析表明PS80的存在使穩(wěn)定化的多肽制劑中存在的副產(chǎn)物從高分子量種類(lèi)遷移為低分子量種類(lèi)，而未改變單體抗體特性曲線。圖10以圖形方式描述在包含IgG4的多肽制劑中在添加抗氧化劑如游離曱硫氨酸后抑制了不想要的副產(chǎn)物、尤其高分子量多肽聚集物的形成。圖11以圖形方式描述在包含IgG2的多肽制劑中在添加抗氧化劑如游離甲石克氨酸后抑制了不想要的副產(chǎn)物，尤其高分子量多肽聚集物的形成。發(fā)明詳述為了提供對(duì)說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求書(shū)的清晰理解，以下定義方便地提供如下。如本文中所用，術(shù)語(yǔ)"抗原結(jié)合性多肽"包括能夠特異性地結(jié)合至耙分子例如抗原，例如A^肽，或結(jié)合至所述A/3肽內(nèi)表位的多肽。一般地，抗(例如，受體)，其包含賦予此多肽特異性結(jié)合特征的一個(gè)或多個(gè)可變區(qū)或互補(bǔ)性決定區(qū)域(CDR)。優(yōu)選的抗原結(jié)合性多肽包括抗體，例如IgM、IgGl、IgG2、IgG3或IgG4。術(shù)語(yǔ)"抗體"包括單克隆抗體(包括全長(zhǎng)的單克隆抗體)、多克隆抗體、多特異性抗體(例如，雙特異性抗體)、嵌合抗體、CDR-移植抗體、人源化抗體、人抗體和單鏈抗體(scFvs)。術(shù)語(yǔ)"單鏈抗體，，指具有由重鏈和輕鏈組成的雙多肽鏈結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，該蛋白質(zhì)具有特異性地結(jié)合抗原的能力，所述的鏈例如通過(guò)鏈間肽連M加以穩(wěn)定化。術(shù)語(yǔ)"抗體片段"包括F(ab，)2片段、Fab片段、Fd片段、Fv片段和單結(jié)構(gòu)域抗體片段(DAb)。術(shù)語(yǔ)"結(jié)構(gòu)域"指重鏈或輕鏈多肽的包含免疫球蛋白折疊的球狀區(qū)域。免疫球蛋白折疊由^-折疊二級(jí)結(jié)構(gòu)組成并包括二硫鍵。結(jié)構(gòu)域在本文中又稱作為"恒定的，，或"可變的"，在"恒定，，結(jié)構(gòu)域的情況下，其以多個(gè)類(lèi)別成員的結(jié)構(gòu)域內(nèi)相對(duì)缺乏序列變異為基礎(chǔ)，在"可變，，結(jié)構(gòu)域的情況下，以多個(gè)類(lèi)別成員的結(jié)構(gòu)域內(nèi)的顯著變異為^。抗體或多肽"結(jié)構(gòu)域"常在本領(lǐng)域內(nèi)可互換地稱作抗體或多肽"區(qū)域"?？贵w輕鏈的"恒定，，結(jié)構(gòu)域可互換地稱作"輕鏈恒定區(qū)"、"輕鏈恒定結(jié)構(gòu)域"、"CL"區(qū)域或"CL，，結(jié)構(gòu)域?？贵w重鏈的"恒定，，結(jié)構(gòu)域可互換地稱作"重鏈恒定區(qū)"、"重鏈恒定結(jié)構(gòu)域"、"CH"區(qū)域或"CH"結(jié)構(gòu)域?？贵w輕鏈的"可變，，結(jié)構(gòu)域可互換地稱作"輕鏈可變區(qū)"、"輕鏈可變結(jié)構(gòu)域"、"VL"區(qū)域或"VL，，結(jié)構(gòu)域?？贵w重鏈的"可變"結(jié)構(gòu)域可互換地稱作"重鏈可變區(qū)"、"重鏈可變結(jié)構(gòu)域"、"VH"區(qū)域或"VH"結(jié)構(gòu)域。術(shù)語(yǔ)"區(qū)域，，還可以指抗體鏈或抗體鏈結(jié)構(gòu)域的部分(如文中所定義例如，重鏈或輕鏈的部分或者恒定結(jié)構(gòu)域或可變結(jié)構(gòu)域的部分)，以及所述鏈或結(jié)構(gòu)域的更加不連續(xù)的部分。如本文中所定義，例如，輕鏈和重鏈或者輕鏈可變結(jié)構(gòu)域和重鏈可變結(jié)構(gòu)域包括在"框架區(qū)，，或"FR，，間散布的"互補(bǔ)性決定區(qū)域"或"CDR"。術(shù)語(yǔ)"抗抗體"包括能夠結(jié)合A-的表位的抗體(及其片段)?？箍贵w包括例如在美國(guó)專(zhuān)利公布號(hào)20030165496A1,美國(guó)專(zhuān)利公布號(hào)20040087777Al，國(guó)際專(zhuān)利公布號(hào)WO02/46237A3，和國(guó)際專(zhuān)利公布號(hào)WO04/080419A2中描述的那些抗體。其它抗Aj8抗體描述于例如題目均為"HumannizedAntibodiesthatRecognizeBetaAmyliodPeptide，，的國(guó)際專(zhuān)利第WO03/077858A2和WO04/108895A2、題為"Anti-A/SAntibodies，，的國(guó)際專(zhuān)利公布號(hào)WO03/016466A2、題為"HumannizedAntibodiesthatSequesterAmyliodBetaP印tide"的國(guó)際專(zhuān)利/〉布號(hào)WO0162801A2和題為"HumannizedAntibodies，，的國(guó)際專(zhuān)利公布號(hào)WO02/088306A2中。術(shù)語(yǔ)"片段"指抗體或抗體鏈的部分，其包含比完整或完全的抗體或抗體鏈更少的氨基酸殘基。片段可以通過(guò)化學(xué)處理或酶處理完整或完全的抗體或抗體鏈得到。片段還可以通過(guò)重組方法得到。示例性片段包括Fab、Fab，、F(ab，)2和/或Fv片段。術(shù)語(yǔ)"抗原結(jié)合片段"指免疫球蛋白或抗體的多肽片段，其與抗原結(jié)合或與完整抗體(即，衍生它們的完整抗體)竟?fàn)幙乖Y(jié)合(即，特異性結(jié)合)。術(shù)語(yǔ)"構(gòu)象"指蛋白質(zhì)或多肽(例如，抗體、抗體鏈、結(jié)構(gòu)域或其區(qū)域)的三級(jí)結(jié)構(gòu)。例如，短語(yǔ)"輕(或重)鏈構(gòu)象"指輕(或重)鏈可變區(qū)的三級(jí)結(jié)構(gòu)，并且短語(yǔ)"抗體構(gòu)象"或"抗體片段構(gòu)象，，指抗體或其片段的三級(jí)結(jié)構(gòu)，抗體的"特異性結(jié)合"意指抗體對(duì)特定抗原或表位表現(xiàn)出可察覺(jué)的親和力，并且通常不表現(xiàn)明顯的交叉反應(yīng)性。在示例性實(shí)施方案中，抗體不表現(xiàn)交叉反應(yīng)性(例如，不與非A]3肽或與間接表位(remoteepitope)例如Aj8上的非連續(xù)表位發(fā)生交叉反應(yīng))。"可覺(jué)察的，，或優(yōu)選的結(jié)合包括具有至少106、107、108、1()9M"或10"M"親和力的結(jié)合。更優(yōu)選親和力比io7]vr1更大，優(yōu)選地比10SM"更大。本文中所述親和力的中間值也旨在包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)并且優(yōu)選的結(jié)合親和力可以表示為親和力的范圍，例如io6至101GM-1、優(yōu)選地107至101GM-1、更優(yōu)選地108至101()M_1。"不表現(xiàn)顯著交叉反應(yīng)性"的抗體是將不明顯可覺(jué)察地結(jié)合至不想要的實(shí)體(例如，不想要的蛋白質(zhì)、多肽或肽)的抗體。例如，特異性結(jié)合至A卩的抗體將明顯可覺(jué)察地結(jié)合AP但不顯著地與非A/J的蛋白質(zhì)或肽(例如，斑內(nèi)所包含的非的蛋白質(zhì)或肽)>^應(yīng)，對(duì)特定表位特異的抗體例如將不顯著地與同一蛋白質(zhì)或肽上的間接表位發(fā)生交叉反應(yīng)。特異性結(jié)合可以根據(jù)本領(lǐng)域已確認(rèn)的用于測(cè)定此結(jié)合的任何方法測(cè)定。優(yōu)選地，特異性結(jié)合根據(jù)斯卡查德(Scatchard)分析法和/或竟?fàn)幮越Y(jié)合測(cè)定法加以測(cè)定。結(jié)合性片段可以通過(guò)重組DNA技術(shù)或通過(guò)化學(xué)處理或酶處理完整免疫球蛋白產(chǎn)生。結(jié)合性片段包括Fab、Fab，、F(ab，)2、Fv、單鏈和單鏈抗體。將免疫球蛋白或抗體理解為它的每一結(jié)合位點(diǎn)是相同的，"雙特異性"或"雙功能"免疫球蛋白或抗體除外。"雙特異性抗體"或"雙功能抗體"是具有兩條不同的重M/輕^t及兩個(gè)不同的結(jié)合位點(diǎn)的Ait雜合抗體。雙特異性抗體可以通過(guò)多種方法產(chǎn)生，包括雜交瘤融合或Fab'片段連接。見(jiàn)例如Songsivilai和Lachmann，Clin.Exp.Immunol.79:315-321(1990);Kostelny等，J.Immunol.148,1547-1553(1992)。"抗原"是含有抗體特異性結(jié)合的抗原決定蔟的分子(例如，蛋白質(zhì)、多肽、肽或糖)。術(shù)語(yǔ)"表位，，或"抗原決定簇"指抗原上免疫球蛋白或抗體(或其抗原結(jié)合片段)與其特異性結(jié)合的的位點(diǎn)。表位可以從連續(xù)的氨基酸中或通過(guò)蛋白質(zhì)三級(jí)折疊拉近的非連續(xù)氨基酸中形成。從連續(xù)的氨基酸中形成的表位與變性溶劑接觸時(shí)通常得以維持，而由三級(jí)折疊形成的表位以變性溶劑處理時(shí)通常喪失。表位通常包含處于獨(dú)特空間構(gòu)象的至少3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15個(gè)氨基酸。測(cè)定表位空間構(gòu)象的方法包括例如X-射線晶體分析法和二維核磁共振法。見(jiàn)例如EpitopeMappingProtocolsinMethodsinMolecularBiology,第66巻，G.E.Morris編輯(1996)。術(shù)語(yǔ)"穩(wěn)定化的制劑"或"穩(wěn)定化的液體多肽制劑"包括其中多貼貯存時(shí)基本上保持其物理和化學(xué)同一性和完整性的制劑。用于測(cè)量蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的多種分析技術(shù)在本領(lǐng)域內(nèi)可獲得并在本文中描述(綜述見(jiàn)，PeptideandProteinDrugDelivery,247-301,VincentLee編輯,MarcelDekker，Inc.,NewYorkjN.Y.，Pubs,(1991)和Jones,A.Adv.DrugDeliveryRev.10:29-卯(1993))?？梢栽谶x擇的時(shí)間長(zhǎng)度在選擇的溫度上測(cè)量穩(wěn)定性.對(duì)于快速測(cè)試，可以將制劑在較高的或"加速，，的溫度上例如40。C保持2周至1個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間，在該溫度上測(cè)量時(shí)間穩(wěn)定性。在示例性實(shí)施方案中，制劑不易形成成分多肽的副產(chǎn)物，例如高分子量聚集產(chǎn)物、低分子量降解或片段化產(chǎn)物或其混合物。術(shù)語(yǔ)"副產(chǎn)物"包括不想要的產(chǎn)物，其減損或減少了特定制劑中的治療性多肽的比例。典型的副產(chǎn)物包括治療性多肽的聚集物、治療性多肽的片段(例如，通過(guò)脫酰胺作用或水解作用降解多肽所產(chǎn)生)或其混合物.術(shù)語(yǔ)"高分子量多肽聚集物，，包括隨后聚集的治療性多肽的聚集物、治療性多肽的片段(例如，通過(guò)水解作用降解多肽所產(chǎn)生)或其混合物。一般地，高分子量聚集物是具有比治療性單體多肽更大分子量的復(fù)合體。在抗體例如IgG抗體的例子中，此類(lèi)聚集物比約150kD更大。然而，在其它治療性多肽例如通常具有分子量25kD的單鏈抗體的例子中，此類(lèi)聚集物將具有比約25kD更大的分子量。術(shù)語(yǔ)"低分子量多肽降解產(chǎn)物"包括例如治療性多肽的片段，其例如由脫酰胺作用或水解作用產(chǎn)生。一般地，低分子量降解作用產(chǎn)物是具有比治療性單體多肽更小分子量的復(fù)合體。在抗體例如IgG抗體的例子中，此類(lèi)降解作用產(chǎn)物比約150kD更小。然而，在其它治療性多肽例如通常具有分子量25kD的單鏈抗體的例子中，此類(lèi)降解作用產(chǎn)物將具有比約25kD更小的分子量。術(shù)語(yǔ)"施用途徑"包括本領(lǐng)域已確認(rèn)的用于送遞治療性多肽的施用途徑，例如腸胃外、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、顱內(nèi)或硬膜外。為施用用于治療神經(jīng)退行性疾病的治療性多肽，可能需要靜脈內(nèi)、硬膜外或顱內(nèi)途徑。術(shù)語(yǔ)"淀粉狀蛋白生成性疾病"包括與不可溶性淀粉狀蛋白原纖維形成或沉積有關(guān)(或由其所致)的任何疾病。示例性淀粉狀蛋白生成性疾病包括但不限于全身性淀粉樣變、阿爾茨海默病、成年型糖尿病、帕金森氏病、亨廷頓氏病、額顳葉癡呆和朊蛋白相關(guān)的傳染性海綿狀腦病(在人類(lèi)中M魯病和Creutzfeldt-Jacob病，在綿羊和牛中是癢病和海綿狀腦病(BSE))。4j&。例如在患阿爾茨海默病的受試者或患者中，P-淀粉樣蛋白(例如，野生型、變異的或截短的P-淀粉樣蛋白)是淀粉樣蛋白沉積物的特征性多肽成分。因此，阿爾茨海默病是例如受試者或患者腦內(nèi)"由A卩沉積物^^征的疾病，，或"與AP沉積物有關(guān)的疾病"的實(shí)例.術(shù)語(yǔ)"P-淀粉樣蛋白"、"p-淀粉樣肽"、"P-淀粉狀蛋白"、"AP"和"AP肽，，在本文中可互換地使用。術(shù)語(yǔ)"治療"如本文中所用定義為向患有疾病，具有疾病的癥狀或發(fā)病素質(zhì)的患者，或向分離自患者的組織或細(xì)胞系應(yīng)用或施用治療劑，目的是治愈、康復(fù)、緩和、延緩、減輕、改變、糾正、改良、改善或影響疾病、疾病的癥狀或發(fā)病素質(zhì)。術(shù)語(yǔ)"有效劑量"或"有效的劑量"定義為足夠?qū)崿F(xiàn)或至少部分實(shí)現(xiàn)所需要的效果的量。術(shù)語(yǔ)"治療有效劑量，，定義為足夠治愈或至少部分阻滯已患有該疾病的患者中疾病及疾病并發(fā)癥的量.對(duì)此用途有效的量將取決于感染的嚴(yán)重性和患者自身免疫系統(tǒng)的總體狀態(tài)。術(shù)語(yǔ)"患者，，包括接受預(yù)防性治療或治療性治療的人類(lèi)受試者和其它哺乳動(dòng)物受試者。術(shù)語(yǔ)"劑量單位形式，，(或"單位劑型，，)如本文中所用指物理上獨(dú)立的適合作為單位劑量用于待治療患者的單元，每一單元含有與所需要的藥物載體、稀釋劑或賦形劑結(jié)合的活性化合物的預(yù)定量，其經(jīng)過(guò)計(jì)算以產(chǎn)生所需要的治療效果。用于本發(fā)明劑量單位形式的說(shuō)明由活性化合物的獨(dú)特特征和待實(shí)現(xiàn)的具體治療效果以及為治療患者而復(fù)合該活性化合物的本領(lǐng)域內(nèi)已知參數(shù)決定，并直接取決于它們。本發(fā)明制劑中活性成分(例如A/3多肽)的實(shí)際劑量水平可以變動(dòng)以致于得到以下量的活性成分，即其有效實(shí)現(xiàn)對(duì)于特定患者、組合物和施用模式所需要的治療反應(yīng)，而對(duì)患者無(wú)毒性。所選擇的劑量水平將取決于多種藥物代謝動(dòng)力學(xué)因素，包括所采用的本發(fā)明特定組合物的活性、施用的途徑、施用的時(shí)間、當(dāng)前釆用的特定化合物的排泄率、治療的持續(xù)期、與所采用的特定組合物組合使用的其它藥物、化合物和或材料、正在治療的患者的年齡、性別、體重、體況、一般健康和先前醫(yī)療史及醫(yī)藥領(lǐng)域內(nèi)眾所周知的類(lèi)似因素。術(shù)語(yǔ)"稀釋劑"如本文中所用指適合用于改變或?qū)崿F(xiàn)示例性濃度或適宜濃度或如本文中所述的濃度的溶液。概述本發(fā)明提供用于抗原結(jié)合性多肽，尤其是抗體以及其部分和/或片段的制劑。在某些方面，本發(fā)明提供用于治療用途的穩(wěn)定化的液體多肽制劑。具體而言，本發(fā)明為治療疾病和/或病癥中的用途提供抗原結(jié)合性多肽例如抗體和其抗原結(jié)合片段的穩(wěn)定化。尤其，本發(fā)明提供經(jīng)過(guò)穩(wěn)定化以致于活性治療性多肽經(jīng)it^長(zhǎng)的時(shí)間段后仍穩(wěn)定的并且可以經(jīng)過(guò)多種施用途徑施用的制劑。這對(duì)于預(yù)定用于治療某些疾病和/或病癥例如神經(jīng)病學(xué)疾病或病癥的那些抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體)特別重要。在其它方面，本發(fā)明提供格外穩(wěn)定的抗體制劑，其例如對(duì)多種脅迫如冷凍、凍干、加熱和/或重構(gòu)穩(wěn)定。此外，本發(fā)明的示例性制劑能夠經(jīng)過(guò)延長(zhǎng)的時(shí)間段并且甚至在不合適的溫度(例如，貯存制劑的一年期間)下維持抗體的穩(wěn)定性、生物學(xué)活性、純度和質(zhì)量。此外，本發(fā)明的示例性制劑適用于向受試者或患者(例如，向受試者或患者靜脈內(nèi)施用)，例如患有或預(yù)計(jì)患有神經(jīng)病學(xué)疾病或病癥例如涉及淀粉樣A|3多肽的淀粉狀蛋白生成性疾病的人施用。制劑在一個(gè)方面，本發(fā)明提供制劑，其包含有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、張力劑(例如，甘露醇)(其中張力劑以足夠使制劑適合用于靜脈內(nèi)輸注的量存在)和IL^酸(例如，組氨酸)或其衍生物(其中M酸或其衍生物以足夠維持生理適合的pH的量存在)。在示例性實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含有治療活性的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)、甘露醇和組氨酸的制劑。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供包含有治療活性的抗原結(jié)合性多肽的穩(wěn)定化,劑。適用于在本發(fā)明制劑中加以穩(wěn)定化的抗原結(jié)合性多肽包括抗體及其片段，并且尤其包括能夠結(jié)合疾病或病癥中所涉及的治療性乾標(biāo)的抗體。因此，治療性多肽根據(jù)本發(fā)明通過(guò)添加抗氧化劑加以穩(wěn)定化以避免形成副產(chǎn)物，其通常是高分子量聚集物、低分子量降解片段或其混合物，其中抗氧化劑的量足以致抑制此類(lèi)副產(chǎn)物形成?？寡趸瘎┌ㄈ绱藵舛鹊募琢虬彼岷推漕?lèi)似物，如下討論，該濃d以實(shí)現(xiàn)所需要的對(duì)不想要副產(chǎn)物的抑制。任選地，本發(fā)明的穩(wěn)定化多肽制劑還包含張力劑(例如，甘露醇)(其在)以及氨基酸(例如，組氨酸)或其衍生物(其中氨基酸或其衍生物以足夠維持生理適合的pH的量存在)*在示例性實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含有治療活性的抗原結(jié)合性多肽、甲硫氨酸、甘露醇和組氨酸的制劑。用于本發(fā)明制劑中的多肽如本文中所述，待根據(jù)本發(fā)明配制的多肽使用本領(lǐng)域內(nèi)充分建立的并包括例如合成技術(shù)(如重組技術(shù)和肽合成技術(shù)或這些技術(shù)的組合)進(jìn)行制備，或可以從該多肽的內(nèi)在來(lái)源中分離。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，選擇的多肽是抗原結(jié)合性多肽，更優(yōu)選地是抗體并且尤其是抗抗體。用于產(chǎn)生抗原結(jié)合性多肽并且尤其是抗體的技術(shù)如下描述。抗體術(shù)語(yǔ)"抗體"如本文中所用指免疫球蛋白分子和免疫球蛋白分子的免疫學(xué)活性部分，即^^有特異性地結(jié)合(識(shí)別)抗原的抗原結(jié)合位點(diǎn)的分子。免疫球蛋白分子的免疫學(xué)活性部分的實(shí)例包括可以通過(guò)用酶如胃蛋白酶處理生成或通過(guò)本領(lǐng)域已確認(rèn)的重組工程技術(shù)產(chǎn)生的F(ab)和F(ab，)2片段。本發(fā)明的實(shí)施方案涉及結(jié)合抗原例如治療性靶抗原如AP的抗體，例如多克隆抗體和單克隆抗體的穩(wěn)定化。術(shù)語(yǔ)"單克隆抗體，，或"單克隆抗體制劑"如本文中所用指含有僅一種抗原結(jié)合位點(diǎn)的抗體分子群體，其能夠識(shí)別和結(jié)合乾抗原的特定表位，例如A0的表位。單克隆抗體制劑因此通常表現(xiàn)出對(duì)與其發(fā)生免疫反應(yīng)的特定靶抗原的單一結(jié)合特異性和親和力。多克隆抗體多克隆抗體可如上所述通過(guò)用免疫原免疫合適的受試者制備。免疫的受試者中的抗體滴度可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)隨時(shí)間監(jiān)測(cè)，例如使用固定化乾抗原的酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)。根據(jù)需要，抗靶抗原的抗體分子可以自哺乳動(dòng)物(例如M液)分離并通過(guò)眾所周知的技術(shù)如蛋白A瓊脂糖TM層析純化以得到抗體，如IgG級(jí)分。在免疫后的適合時(shí)間，例如當(dāng)抗-抗原抗體的滴度最高時(shí)，可以從受試者中得到抗體生成細(xì)胞并且用于通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)如最初由Kohler和Milstem(1975)Nature256:495-497)(還見(jiàn)Brown等(1981)J.Immunol.127:539-46;Brown等(1980)J.Biol.Chem.255:4980-83;Yeh等(1976)Proc.Natl.Acad.Sci.USA76:2927-31;和Yeh等(1982)Int.J.Cancer29:269-75)描述的雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體。對(duì)于嵌合多克隆抗體的制備，見(jiàn)Buechler美國(guó)專(zhuān)利號(hào)6,420,113。單克隆抗體用于融合淋巴細(xì)胞和永生化細(xì)胞系的任意多種眾所周知方案可以用于產(chǎn)生單克隆抗體(見(jiàn)例如G.Galfre等(1977)Nature266:55052;以上所引用的Gefter等SomaticCellGenet.;以上所引用的Lerner，YaleJ.Biol.Med.;以上所引用的Kenneth,MonoclonalAntibodies)。此外，普通技術(shù)人員將意識(shí)到，存在同樣有用的此類(lèi)方法的眾多變體.通常，永生細(xì)胞系(例如，骨髓瘤細(xì)胞系)作為淋巴細(xì)胞衍生自同一哺乳動(dòng)物物種。例如，小鼠淋巴瘤可以通過(guò)來(lái)自經(jīng)本發(fā)明的免疫原性制劑免疫的小鼠的淋巴細(xì)胞與永生化小鼠細(xì)胞系融合產(chǎn)生。優(yōu)選的永生細(xì)胞系是對(duì)含有次黃嘌呤、JLS^呤和胸苷的培養(yǎng)基("HAT培養(yǎng)基")敏感的小鼠骨髓瘤細(xì)胞系。任何眾多骨髓瘤細(xì)胞系可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)作為融合伴侶使用，例如P3-NSl/l-Ag4-l、P3-x63-Ag8.653或Sp2/0-Agl4骨髄瘤系。這些骨髄瘤系可從ATCC獲得。通常，使用聚乙二醇("PEG")將HAT敏感的小鼠骨髄瘤細(xì)胞與小鼠脾細(xì)胞融合。隨后，自融合得到的雜交瘤細(xì)胞使用HAT培養(yǎng)基加以選擇，其未得到轉(zhuǎn)化在數(shù)天后死亡)。產(chǎn)生本發(fā)明單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞通過(guò)檢測(cè),重組抗體作為對(duì)制M泌單克隆抗體的雜交瘤的備選方法，單克隆抗體可以通過(guò)用乾抗原篩選重組免疫球蛋白組合文庫(kù)(例如，抗體噬菌體展示文庫(kù))因而分離結(jié)合耙抗原的免疫球蛋白文庫(kù)成員進(jìn)行鑒定和分離。用于生成和篩選噬菌體展示文庫(kù)的試劑盒可商業(yè)獲得(例如，PharmaciaRecombinantPhageAntibodySystem,目錄號(hào)27-9400-01;和StratageneSurfZAPTM嗟菌體展示試劑盒，目錄號(hào)240612)。此外，特別適合用于生成和篩選抗體展示文庫(kù)的方法和試劑的實(shí)例可以例如在Ladner等美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,223,409;Kang等PCT國(guó)際專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)WO92/18619;Dower等PCT國(guó)際專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)WO91/17271;Winter等PCT國(guó)際專(zhuān)利公開(kāi)WO92/20791;Markland等PCT國(guó)際專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)WO92/15679;Breitling等PCT國(guó)際專(zhuān)利公開(kāi)WO93/01288;McCafferty等PCT國(guó)際專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)WO92/01047;Garrard等PCT國(guó)際專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)WO92/096卯;Ladner等PCT國(guó)際專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)WO謂2809;Fuchs等(1991)Bio/Technology9:1370-1372;Hay等(l992)Hum.Antibod.Hybridomas3:81-85;Huse等(1989)Science246:1275-1281;Griffiths等(1993)EMBOJ12:725-734;Hawkins等(1992)J.Mol.Biol.226:889-896;Clarkson等(1991)Nature352:624-628;Gram等(1992)Proc.Natl.Acad.Sci.USA89:3576-3580;Garrad等(1991)Bio/Technology9:1373-1377;Hoogenboom等(1991)Nuc.AcidRes.19:4133-4137;Barbas等(1991)Proc.Natl.Acad.Sci.USA88:7978-7982;和McCafferty等Nature(19卯)348:552-554中找到。嵌合抗體和人源化抗體此外，可以使用標(biāo)準(zhǔn)重組DNA技術(shù)產(chǎn)生的包含人部分和非人部分的重組抗體,如嵌合抗體和人源化的單克隆抗體處于本發(fā)明的范圍內(nèi).術(shù)語(yǔ)"人源化免疫球蛋白"或"人源化抗體"指包括至少一條人源化的免疫球蛋白鏈或抗體鏈(即至少一條人源化的輕鏈或重鏈)的免疫球蛋白或抗體。術(shù)語(yǔ)"人源化免疫球蛋白鏈"或"人源化抗體鏈"(即，"人源化的免疫球蛋白輕鏈"或"人源化的免疫球蛋白重鏈")指具有如此的可變區(qū)的免疫球蛋白鏈或抗體鏈(即分別為輕鏈或重鏈)，該可變區(qū)包括基本來(lái)自人免疫球蛋白或抗體的可變框架區(qū)以;s^本來(lái)自非人的免疫球蛋白或抗體的互補(bǔ)性決定區(qū)域(CDR)(例如，至少一個(gè)CDR、優(yōu)選地兩個(gè)CDR、更優(yōu)選地三個(gè)CDR)并且還包括恒定區(qū)(例如以輕鏈為例，至少一個(gè)恒定區(qū)或其部分，以重鏈為例，優(yōu)選地是三個(gè)恒定區(qū))。術(shù)語(yǔ)"人源化的可變區(qū)"(例如，"人源化輕鏈可變區(qū)，，或"人源化重鏈可變區(qū)，，)指包括基本來(lái)自人免疫球蛋白或抗體的可變框架區(qū)以及基本來(lái)自非人的免疫球蛋白或抗體的互補(bǔ)性決定區(qū)域(CDR)的可變區(qū)。短語(yǔ)"基本來(lái)自人免疫球蛋白或抗體，，或"基本來(lái)自人，，意指，當(dāng)為比較目的與人免疫球蛋白或抗體的JL^酸序列比對(duì)時(shí)，此區(qū)域與人的框架區(qū)或恒定區(qū)的序列具有至少80-90%、卯-95%或95-99%同一性(即局部序列同一性)，允許例如保守性替換、共有序列替換、種系替換、回復(fù)突變等等。常常稱導(dǎo)入保守性替換、共有序列替換、種系替換、回復(fù)突變等為人源化抗體或抗體鏈的最優(yōu)化。短語(yǔ)"基本來(lái)自非人的免疫球蛋白或抗體"或"基本來(lái)自非人類(lèi)，，意指具有這樣的免疫球蛋白或抗體序列，其與非人的生物例如非人的哺乳動(dòng)物的免疫球蛋白或抗體序列至少80-95%、優(yōu)選地至少90-95%、更優(yōu)選地96%、97%、98%或99%相同。因此，除CDR之外，人源化免疫球蛋白或抗體或者人源化免疫球蛋白鏈或抗體鏈的全部區(qū)域或殘基與一個(gè)或多個(gè)天然的人免疫球蛋白序列的對(duì)應(yīng)區(qū)域或?qū)?yīng)殘基基^目同。術(shù)語(yǔ)"對(duì)應(yīng)區(qū)域"或"對(duì)應(yīng)殘基"指當(dāng)?shù)谝恍蛄泻偷诙蛄袨楸容^目的進(jìn)行最優(yōu)比對(duì)時(shí)，占據(jù)如第一M酸序列或核苷酸序列上的區(qū)域或殘勤目同(等同)位置的第二M酸序列或核苷酸序列上的區(qū)域或殘基。術(shù)語(yǔ)"顯著相同，，意指，當(dāng)例如通過(guò)使用默認(rèn)空位加權(quán)值的程序GAP或BESTFIT進(jìn)行最優(yōu)比對(duì)時(shí)，兩種多肽序列共有至少50-60%序列同一性、優(yōu)選地至少60-70%序列同一性、更優(yōu)選地至少70-80%序列同一性、更優(yōu)選地至少80-90%同一性、甚至更優(yōu)選地至少卯-95%序列同一性以及甚至更優(yōu)選地至少95%或更高的序列同一性(例如，99%或更高的序列同一性)。術(shù)語(yǔ)"基本相同"意指，當(dāng)例如通過(guò)使用默認(rèn)空位加權(quán)值的程序GAP或BESTFIT進(jìn)行最優(yōu)比對(duì)時(shí)，兩種多肽序列共有至少80-90%序列同一性、優(yōu)選地至少90-95%的序列同一性以及更優(yōu)選地至少95%或更高的序列同一性(例如，99%或更高的序列同一性)。為了比較序列，通常一個(gè)序列充當(dāng)參考序列，測(cè)^列與之進(jìn)行比較。當(dāng)使用序列比較算法時(shí)，將測(cè)*列和參考序列輸入計(jì)算機(jī)，根據(jù)需要指定次級(jí)序列坐標(biāo)，并且指M列算法程序的^lt。隨后序列比對(duì)算法基于指定的程序M計(jì)算測(cè)試序列相對(duì)于參考序列的序列同一性百分?jǐn)?shù)。用于比較的序列最優(yōu)比對(duì)可以例如通過(guò)Smith和Waterman,Adv.Appl.Math.2:482(1981)的局部同源性算法、通過(guò)Needleman和Wunsch，J.Moi.Biol.48:443(1970)的同源性比對(duì)算法、通過(guò)Pearson和Lipman，Proc.Nat，l.Acad.Sci.USA85:2444(1988)的相似性搜索方法、通過(guò)這些算法的計(jì)算機(jī)化執(zhí)行(威斯康辛遺傳軟件包中的GAP、BESTFIT、FASA和TFASTA,GeneticsComputerGroup,575ScienceDr.，Madison,WI)或通過(guò)目M見(jiàn)檢查(通常見(jiàn)Ausubel等，CurrentProtocolsinMolecularBiology)開(kāi)展。適用于確定序列同一性和序列相似性百分?jǐn)?shù)的算法的實(shí)例是由Altschul等，J.Mol.Biol.215:403(1990)描述的BLAST算法。用于開(kāi)展BLAST分析的軟件可通過(guò)國(guó)立生物技術(shù)信息中心公開(kāi)地獲得(通過(guò)國(guó)立健康研究院的NCBI互聯(lián)網(wǎng)服務(wù)器可公開(kāi)獲取)。通常，默認(rèn)的程序^lfc可以用于開(kāi)展序列比較，盡管也可以使用自定義參數(shù)。對(duì)于氨基酸序列，BLASTP程序默認(rèn)使用字長(zhǎng)度(W)3，預(yù)期(E)10以及BLOSUM62記分矩陣(scoringmatrix)(見(jiàn)Henikoff和Henikoff，Proc.Natl.Acad.Sci.USA89:10915(1989)).優(yōu)選地，不相同的殘^^位置通過(guò)保守性ll&酸替換相區(qū)別。為將M酸替換劃分為保守性替換或非保守性替換的目的，M酸作如下分組組I(疏水性側(cè)鏈)leu、met、ala、val、leu、ile;組II(中性親水性側(cè)鏈)cys、ser、thr;組III(酸性側(cè)^):asp、glu;組IV(堿性側(cè)鏈)asn、gln、his、lys、arg;組V(影響側(cè)鏈方向的^J0:gly、pro和組VI(芳香族側(cè)鏈)trp、tyr、phe。保守性替換涉幼同組中#^酸之間的替換，非保守性替換由一個(gè)組中的成員與另一組成員的交換構(gòu)成。優(yōu)選地，人源化免疫球蛋白或抗體以相應(yīng)非人源化抗體的親和力的三、四或五倍范圍內(nèi)的親和力結(jié)合抗原。例如，若非人源化抗體具有109M-1的結(jié)合親和力，人源化抗體將具有至少3x109M"、4x109M"或5x109M"1的結(jié)合親和力。當(dāng)描述免疫球蛋白或抗體鏈的結(jié)合特性時(shí)，鏈可以基于其"指導(dǎo)抗原(例如，AP)結(jié)合"的能力加以描述。當(dāng)鏈對(duì)完整免疫球蛋白或抗體(或其抗原結(jié)合片段)賦予特異性的結(jié)合特性和結(jié)合親和力時(shí)，則稱其為"指導(dǎo)抗原結(jié)合"。如果與包含缺少該突變的等效鏈的抗體(或其抗原結(jié)合片段)結(jié)合親和力相比，突變(例如，回復(fù)突變)影響(例如，減少)包含所述鏈的完整免疫球蛋白或抗體(或其抗原結(jié)合片段)的結(jié)合親和力達(dá)至少一個(gè)數(shù)量級(jí)，則突變顯著地影響重鏈或輕鏈指導(dǎo)抗原結(jié)合的能力。當(dāng)突變影響(例如，減少)包含所述鏈的完整免疫球蛋白或抗體(或其抗原結(jié)合片段)的結(jié)合親和力僅為包含缺少該突變的等效鏈的抗體(或其抗原結(jié)合片段)結(jié)合親和力的二、三或四倍時(shí)，突變"沒(méi)有顯著地影響鏈指導(dǎo)抗原結(jié)合的能力"。術(shù)語(yǔ)"嵌合的免疫球蛋白"或抗體指其可變區(qū)衍生自第一物種并且其恒定區(qū)衍生自第二物種的免疫球蛋白或抗體。嵌合的免疫球蛋白或抗體可以例如通過(guò)遺傳工程從屬于不同物種的免疫球蛋白基因片段構(gòu)建。術(shù)語(yǔ)"人源化免疫球蛋白"或"人源化抗體，，不旨在包含如下所述的嵌合免疫球蛋白或嵌合抗體。雖然，人源化的免疫球蛋白或抗體在其結(jié)構(gòu)上是嵌合的(即包含來(lái)自多于一個(gè)物種的蛋白質(zhì)的區(qū)域)，如本文中所定義，它們包括不存在于嵌合的免疫球蛋白或抗體中的額外特征(即，包含供體CDR殘基和受體框架區(qū)殘基的可變區(qū))。此類(lèi)嵌合的和人源化的單克隆抗體可以例如使用在Robinson等InternationalApplicationNo.PCT/US86/02269;Akira等歐洲專(zhuān)利申請(qǐng)184,187;Taniguchi，M.，歐洲專(zhuān)利申請(qǐng)171,496;Morrison等歐洲專(zhuān)利申請(qǐng)173,494;Neuberger等PCT國(guó)際專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)WO86/01533;Cabilly等美國(guó)專(zhuān)利號(hào)4,816,567;Cabilly等歐洲專(zhuān)利申請(qǐng)125,023;Better等(1988)Science240:1041-1043;Liu等(1987)Proc.Natl.Acad.Sci.USA84:3439-3443;Liu等(1987)J.Immunol.139:3521-3526;Sun等(1987)Proc.Natl.Acad.Sci.USA84:214-218;Nishimura等(1987)Cane.Res.47:999-1005;Wood等(1985)Nature314:446-449;和Shaw等(1988)J.Natl.CancerInst.80:1553-1559;Morrison,S.L.(1985)Science229:1202-1207;Oi等(1986)BioTechniques4:214;Winter美國(guó)專(zhuān)利5,225,539;Jones等(1986)Nature321:552-525;Verhoeyan等(1988)Science239:1534;和Beidler等(1988)J.Immunol.141:4053-4060中描述的方法，通過(guò)本領(lǐng)域已知的重組DNA沖支術(shù)產(chǎn)生。來(lái)自轉(zhuǎn)基因動(dòng)物和噬菌體展示的人抗體備選地，現(xiàn)在有可能產(chǎn)生這樣的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物(例如，小鼠)，其一經(jīng)免疫就能夠在不產(chǎn)生內(nèi)源性免疫球蛋白時(shí)產(chǎn)生完整的人抗體庫(kù)。例如，已描述，在嵌合小鼠和種系突變小鼠中抗體重鏈連接區(qū)(JH)基因的純*失導(dǎo)致完全抑制內(nèi)源性抗體的產(chǎn)生。在此類(lèi)種系突變小鼠中轉(zhuǎn)入人的種系免疫球蛋白基因陣列引起在抗原攻擊時(shí)產(chǎn)生人抗體。見(jiàn)例如美國(guó)專(zhuān)利號(hào)6,150,584;6,114,598和5，770，429。完全的人抗體還可以衍生自噬菌體展示文庫(kù)(Hoogenboom等，J.Mol.Biol"227:381(1991);Marks等，J.Mol.Biol"222:581-597(1991)),雙特異性抗體、抗體融合多肽和單鏈抗體雙特異性抗體(BsAb)是具有對(duì)至少兩種不同表位的結(jié)合特異性的抗體。此類(lèi)抗體可以衍生自全長(zhǎng)抗體或抗體片段(例如F(ab)，2雙特異性抗體)。用于產(chǎn)生雙特異性抗體的方法在本領(lǐng)域是已知的。全長(zhǎng)雙特異性抗體的常規(guī)產(chǎn)生基于兩條免疫球蛋白重鏈-輕^t的共表達(dá)，其中兩M具有不同的特異性(MHlstein等，Nature,305:537-539(1983))。由于免疫球蛋白重鏈和輕鏈的隨機(jī)組合，這些雜交瘤(四體雜交瘤)產(chǎn)生不同抗體分子的潛在混合物(見(jiàn)WO93/08829和在Traunecker等，EMBOJ.，10:3655-3659(1991)內(nèi))。雙特異性抗體還包括交聯(lián)的或"異源綴合"的抗體，例如，異源綴合物內(nèi)的一種抗體可以與親和素偶聯(lián)，另一種抗體可與生物素或其它有效荷栽偶聯(lián)。異源綴合抗體可使用任何便利的交聯(lián)方法產(chǎn)生，合適的交聯(lián)劑在本領(lǐng)域眾所周知并且在美國(guó)專(zhuān)利號(hào)4,676,980中隨同眾多交聯(lián)技術(shù)一起公開(kāi)。仍在另一個(gè)實(shí)施方案中，抗體可以與有效荷載結(jié)構(gòu)域如反應(yīng)性部分、可檢測(cè)部分或功能性部分，例如免疫毒素化學(xué)性或遺傳性融合，以產(chǎn)生抗體融合多肽.此類(lèi)有效荷栽包括例如免疫毒素、化學(xué)治療劑和放射性同位素，這些有效荷載均在本領(lǐng)域是眾所周知的。穩(wěn)定化。該片段包含以連接體與輕鏈可變結(jié)構(gòu)域(VL)連接的重鏈可變結(jié)構(gòu)域(VH)，所述連接體允許每一可變區(qū)彼此對(duì)接并再生出衍生VL和VH區(qū)的親代抗體的抗原結(jié)合袋。見(jiàn)Gmber等，J.Immunol"152:5368(1994)。應(yīng)當(dāng)理解，單獨(dú)或組合的前述任意多肽分子適合用于制備成本發(fā)明穩(wěn)定化的制劑。治療性抗原結(jié)合性多肽眾多的治療性抗原結(jié)合性多肽適合才娥本發(fā)明的穩(wěn)定化M進(jìn)行配制。通常，抗原結(jié)合性多肽是抗M其片段(見(jiàn)如上)，其包含抗體可變區(qū)和/或抗體Fc區(qū)或至少部分免疫球蛋白、免疫球蛋白超家族蛋白質(zhì)或受M受M結(jié)構(gòu)域，其可以與乾抗原或免疫系統(tǒng)的分子例如Fc受糾目互作用。為方便起見(jiàn)，:下。此類(lèi)^R4性^^結(jié)合性多^^合至包括例如癌^^、自身免疫抗原、過(guò)敏原和病原體的抗原類(lèi)別。結(jié)合癌抗原的治療性抗原結(jié)合性多肽在某些實(shí)施方案中，接受本發(fā)明方法和組合物處理的抗原結(jié)合性多肽可以結(jié)合肺瘤細(xì)胞特異性分子，例如腫瘤特異性抗原。此類(lèi)腫瘤特異性抗原包括例如大皰性類(lèi)天皰瘡抗原2、前列腺粘蛋白抗原(PMA)、腫瘤相關(guān)Thomsen-Friedenreich抗原、前列腺特異性抗原(PSA)、乳腺癌和膀胱移行性細(xì)胞癌(TCC)的腔上皮抗原(LEA135)、癌相關(guān)血清抗原(CASA)和癌抗原125(CA125)、上皮糖蛋白40(EGP40)、鱗狀細(xì)胞癌抗原(SCC)、組織蛋白酶E、黑素瘤內(nèi)的酪氨酸酶、大腦海綿狀瘤的細(xì)胞核抗原(PCNA)、DF3/MUC1乳腺癌抗原、癌胚抗原、腫瘤相關(guān)抗原CA19-9、人黑素瘤抗原MART誦I/Melan-A27-35和gplOO、T和Tnpancarcinoma(ca)糖jM^位、乳頭狀曱狀腺癌中的35kD腫瘤相關(guān)自身抗原、KH-1腺癌抗原、A60分4支桿菌抗原、熱休克蛋白(HSP)、突變的癌基因產(chǎn)物例如p53、ras和HER-2/neu。結(jié)合炎癥和自身免疫性疾病的分子的治療性抗原結(jié)合性多肽在某些實(shí)施方案中，接受本發(fā)明方法和組合物處理的抗原結(jié)合性多肽可以結(jié)合導(dǎo)致炎癥或自身免疫性疾病或病癥的分子。此類(lèi)抗原結(jié)合性多肽可以結(jié)合與類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、SLE、糖尿病、重癥肌無(wú)力、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、多發(fā)性硬化、IBD、銀屑病、胰腺炎和多種免疫缺陷有關(guān)的分子。其它靶抗原包括2-GPI、50kDa糖蛋白、Ku(p70/p80)自身抗原或其80-kd亞基蛋白、核自身抗原La(SS-B)和Ro(SS-A)、硬皮病抗原Rpp30、Rpp38或Scl-70、中心體自身抗原PCM-1、多肌炎-硬皮病自身抗原(PM-Scl)、硬皮病(和其它全身性自身免疫疾病)自身抗原CENP-A、U5、小核內(nèi)核糖核蛋白(snRNP)、PM-Scl自身抗原的100-kd蛋白質(zhì)、核仁的U3-和Th(7-2)核糖核蛋白、核糖體蛋白L7、來(lái)自核M抗原的36-kd蛋白質(zhì)、胰島素、胰島素原、GAD65和GAD67、熱休克蛋白65(hsp65)和胰島細(xì)胞抗原69(ICA69)、胰島細(xì)胞抗原相關(guān)性蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)、GMH神經(jīng)節(jié)苷脂、谷氨酸脫羧酶(GAD)、胰烏細(xì)胞抗原(ICA69)、T印69、由來(lái)自糖尿病患者的T細(xì)胞識(shí)別的單個(gè)T細(xì)胞表位、ICA512、I型糖尿病的自身抗原、I型糖尿病中的胰島細(xì)胞蛋白酪氨酸磷酸酶和由其衍生的37-kDa自身抗原(包括IA-2、IA-2)、來(lái)自In-lll細(xì)胞或人甲狀腺濾泡細(xì)胞的64kD蛋白質(zhì)(其與來(lái)自具有胰島細(xì)JJ^面抗體(ICSA)的患者的血清發(fā)生免疫沉淀)。具體而言，類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎抗原包括45kDaDEK核抗原、尤其是幼年特發(fā)性類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和虹膜睫狀體炎、人軟骨糖蛋白-39、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中的自身抗原、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中的68kd自身抗原、膠原、II型膠原、軟骨連接蛋白、埃茲蛋白、根蛋白和膜突蛋白、分枝桿菌熱休克蛋白65、甲狀腺過(guò)氧化物酶和促甲狀腺激素受體、來(lái)自人Graves甲狀腺組織的甲狀腺過(guò)氧化物酶、與甲狀腺相關(guān)性眼病有關(guān)的64-kDa抗原、人TSH受體和來(lái)自In-lll細(xì)胞或人甲狀腺濾泡細(xì)胞的64kD蛋白質(zhì)(其與來(lái)自具有胰島細(xì)胞表面抗體的患者血清發(fā)生免疫沉淀)。絲合過(guò)敏原的治療性抗原結(jié)合性多肽在某些實(shí)施方案中，接受本發(fā)明方法和組合物處理的抗原結(jié)合性多肽可以結(jié)合導(dǎo)致過(guò)敏性疾病或病癥的過(guò)敏原或分子。此類(lèi)抗原結(jié)合性多肽可以結(jié)合至IgE、IgE受體、T細(xì)胞受體(TCR)、細(xì)胞因子或過(guò)敏原，例如來(lái)自室內(nèi)塵螨、草花粉、樺樹(shù)花粉、M花粉、榛花粉、蟑螂、稻、￡樹(shù)花粉、真菌、蘑菇、蜂毒、動(dòng)物過(guò)敏原例如來(lái)自馬、狗和貓等，過(guò)敏原還包括乳膠過(guò)敏原。結(jié)合病原體和相關(guān)毒素的治療性抗原結(jié)合性多肽在某些實(shí)施方案中，接受本發(fā)明方法和組合物處理的抗原結(jié)合性多肽可以結(jié)合病原體，例如細(xì)菌性、真菌性或病毒性病原體，或者例如其毒素。此類(lèi)抗原結(jié)合性多肽結(jié)合至病原體(或其毒素)，包括耶爾森氏菌(Yersinia)例如鼠疫病原體鼠疫耶爾森氏菌(Yersiniapestis)，尤其是V抗原；炭疽病原體炭疽芽孢桿菌(Bacillusanthracis)，尤其是炭疽保護(hù)性抗原(PA)或致死因子(LF);葡萄球菌(Staphylococcus)例如金黃色葡萄球菌(S.aureus)和表皮葡萄球菌(S.epidermidis);和鏈球菌(Streptococcus)和/或它們相的關(guān)毒素；大腸桿菌(E.coli)，例如引起食源性疾病的0-157:H7林；霍亂菌(Cholerabacterium)例如霍亂弧菌(Vibriocholerae)或其腸毒素；幽門(mén)螺桿菌(Helicobacterpylori)，例如抗原CagA和VacA;衣原體(Chlamydia);淋病奈瑟氏菌(Neisseriagonorrhoeae);和腦膜炎奈瑟、菌(Neisseriameningitidis);百日咳桿菌(Bordetellapertussis);';充產(chǎn)布魯氏菌(Brucellaabortus);腦膜炎球菌抗原；肺炎球菌抗原；單核細(xì)胞增生李斯特菌(Listeriamonocytogenes);沙門(mén)氏菌(Salmonella);志賀菌屬(Shigella)和結(jié)核分枝桿菌(Mycobacteriumtuberculosis);病毒性病原體，例如漢坦病毒、黃病毒、流感病毒；HIV例如抗原Gag、Pol、Vif和Nef;輪狀病毒；單純皰滲病毒I/II型；A、B、C或G型肝炎；狂犬病毒；乳頭瘤病毒；Epstem-Barr病毒(EBV);麻滲病毒；CMV和寄生蟲(chóng)。通常，本發(fā)明的制劑包含用于通過(guò)耙向A/J肽治療淀粉狀蛋白生成性疾病、尤其是阿爾茨海默病的多種抗體。術(shù)語(yǔ)"Aj8抗體"、"抗Aj8抗體，，和"抗A/3，，在本文中可互換地使用以指與人淀粉樣前體蛋白(APP)、蛋白或兩者的一個(gè)或多個(gè)表位或抗原決定簇結(jié)合的抗體。示例性表位或抗原決定蔟可以存在于APP內(nèi)，但是優(yōu)選地存在于APP的AP肽內(nèi)。存在APP的多個(gè)同種型，例如APP695、APP751和APP770。APP內(nèi)的4^酸根據(jù)APP770同種型的序列(見(jiàn)例如GenBank登錄號(hào)P05067)賦予編號(hào)。目前已知存在于人中的APP的特定同種型的實(shí)例是由Kang等(1987)Nature325:733-736描述的指定為"正常，，APP的695個(gè)氨基酸多肽；由Ponte等(1988)Nature331:525-527(1988)和Tanzi等(1988)Nature331:528-530描述的751個(gè)氨基酸多肽和由Kitaguchi等(1988)Nature331:530-532描述的770個(gè)氨基酸多肽。作為APP受不同分泌酶在體內(nèi)(invivo)或原位(insitu)的蛋白水解加工的結(jié)果，A卩以40個(gè)M酸長(zhǎng)度的"短形式"和范圍是42-43個(gè)絲酸長(zhǎng)度的"長(zhǎng)形式"存在，短形式的A|34()由APP的第672-711位殘基組成。長(zhǎng)形式例如A^2或A^3分別由第672-713或672-714位g組成。APP疏水性結(jié)構(gòu)域的部分存在于Aj5的氛基端，并且具有A/S聚集的能力，尤其^l^在長(zhǎng)形式的情況下。Ap肽可以存在于人和其它哺乳動(dòng)物，包括正常個(gè)體和患有淀粉狀蛋白生成性疾病個(gè)體的體液例如腦脊液內(nèi)，或從其中純化。術(shù)語(yǔ)"P-淀粉樣蛋白"、'，淀粉樣肽"、"p-淀粉狀蛋白"、"AP"和"Aj3肽，，在本文中可互換地使用。A卩肽(例如AP39、AP40、Ap41、A|342和A(343)是APP的39-43個(gè)^J^酸的約4-kDa內(nèi)部片段。例如，A&40由APP第672-711殘基組成并且AP42由APP第672-713位^JiBL成。A/S肽包括源自分泌酶切割A(yù)PP所產(chǎn)生的肽和具有與切割產(chǎn)物的相同或基;M目同序列的合成肽.Aj3肽可以衍生自多種來(lái)源，例如組織、細(xì)胞系或體液(例如血清或腦脊液)。例如，如在Walsh等(2002)，Nature,416，第535-539頁(yè)所述，A3肽可以衍生自表達(dá)APP的細(xì)胞，如以APP717V—F穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO)細(xì)胞。Ai3肽制劑可以使用如前所述的方法衍生自組織來(lái)源(見(jiàn)例如Johnson-Wood等，(1997)，Proc.Natl.Acad.Sci.USA94:1550)。備選地，A/3肽可以使用本領(lǐng)域眾所周知的方法合成。見(jiàn)例如，F(xiàn)ields等，SyntheticPeptieds:AUser'sGuide,Grant編輯，W.H.Freeman&Co.,NewYork，NY，1992，第77頁(yè)。因此，肽可以利用采用t-Boc或F-moc化學(xué)保護(hù)a-氨基團(tuán)和側(cè)鏈?zhǔn)鼙Ｗo(hù)的氨基酸的自動(dòng)化的Merrifield固相合成技術(shù)在例如AppliedBiosystems肽合成儀430A或431型上合成。較長(zhǎng)的肽抗原可以4吏用眾所周知的重組DNA技術(shù)合成。例如，可以合成或分子克隆編碼肽或融合肽的多核苷酸并插入合適的表達(dá)載體，用于轉(zhuǎn)染合適的宿主細(xì)胞并異源表達(dá)。AP肽還指由正?；虻腁P區(qū)內(nèi)的突變產(chǎn)生的相關(guān)AP序列.術(shù)語(yǔ)"表位"或"抗原決定簇"指抗原上與免疫球蛋白或抗體(或其抗原結(jié)合片段)特異性結(jié)合的位點(diǎn)。與A^抗體結(jié)合的示例性表位或抗原決^H可以存在于人淀粉樣前體蛋白(APP)，但優(yōu)選地存在于APP的AP肽內(nèi)。A|3內(nèi)的示例性表位或抗原決定簇可以位于A|3的JUl末端、中央?yún)^(qū)或g末端。"^J^末端表位"是位于AP肽的^J^末端內(nèi)的表位或抗原決^JL示例性氨基末端表位包括AP的第1-10或1-12位氨基酸內(nèi)的瓶基，優(yōu)選地來(lái)自A卩42的第l-3、1-4、1-5、1-6、1-7、2-6、2-7、3-6或3-7位殘基。其它示例性M末端表位從的第1-3位^JJt開(kāi)始并在第7-11位殘基處結(jié)束。額外的示例性M末端表位包括A卩的第24、5、6、7或8位戎基，A卩的第3-5、6、7、8或9位殘基或A卩42的第4-7、8、9或10位瓶基。"中央"表位是包含位于肽的中央或中間部分的瓶基的表位或抗原決定簇，示例性中央表位包括A^的第13-28位氨基酸內(nèi)的殘基，優(yōu)選地來(lái)自A0的第14-27、15-26、16-25、17-24、18-23或19-22位殘基,其它示例性中央表位包括A(3的第16-24、16-23、16-22、16-21、18-21、19-21、19-22、19-23或19-24位氨基酸內(nèi)的殘基，"g末端"表位或抗原決;UI位于Ap肽的g末端內(nèi)并包括Ap的第33-40、33-41或33-42位M酸內(nèi)的殘基。額外的示例性氯基末端表位或抗原決定簇包括A3的第33-40位殘基。當(dāng)稱抗體結(jié)合至所指定殘基例如AP第3-7位內(nèi)的表位時(shí)，其所指的是抗體特異性地結(jié)合至含有指定殘基(即本實(shí)例中的A(3第3-7位)的多肽。此抗體實(shí)際并沒(méi)有接觸A卩第3-7位內(nèi)的每一殘基。AP第3-7位內(nèi)的每一單獨(dú)氨基酸替換或缺失實(shí)際也不顯著地影響結(jié)合親和力。在多種實(shí)施方案中，AP抗體是末端特異性的。如本文中所用，術(shù)語(yǔ)"末端特異性"指這樣的抗體，其特異性結(jié)合至AP肽的^末端^J^J^末端殘基，但不識(shí)別存在于包含該g的較長(zhǎng)AP種類(lèi)或在APP中的相同殘基。在多種實(shí)施方案中，AP抗體是"g末端特異性的"。如本文中所用，術(shù)語(yǔ)"絲末端特異性"意指抗體特異性地識(shí)別AP肽的游離絲末端。g末端特異性Ap抗體的實(shí)例包括這些Ap抗體:識(shí)別在第40位殘基處結(jié)束的AP肽但不識(shí)別在第41、42和/或43位泉基處結(jié)束的AP肽；識(shí)別在第42位殘基處結(jié)束的Aj3肽而不識(shí)別在第40、41和/或43位殘基處結(jié)束的AP肽等。在一個(gè)實(shí)施方案中，Aj8抗體可以是3D6抗體或其變體，或10D5抗體或其變體，兩種抗體均在美國(guó)專(zhuān)利公布號(hào)20030165496Al、美國(guó)專(zhuān)利公布號(hào)20040087777Al、國(guó)際專(zhuān)利>^布號(hào)WO02/46237A3和國(guó)際專(zhuān)利7〉布號(hào)WO04/080419A2中描述。對(duì)3D6和10D5抗體的描i^可以在例如國(guó)際專(zhuān)利公布號(hào)WO02/088306A2和國(guó)際專(zhuān)利公布號(hào)WO02/088307A2中找到。額外的3D6抗體在美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?1/303,478和國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)朠CT/US05/45614中描述。3D6是特異性地結(jié)合至位于人0-淀粉樣肽內(nèi)的M末端表位、尤其是第1-5位殘基的單克隆抗體(mAb)。作為比較，10D5是特異性結(jié)合至位于人i8-淀粉樣肽內(nèi)的Jl^末端表位、尤其是第3-6位殘基的mAb.在另一個(gè)實(shí)施方案，抗體可以是如美國(guó)專(zhuān)利公布號(hào)20040082762Al和國(guó)際專(zhuān)利公布號(hào)WO03/077858A2中所述的12B4抗體或其變體。12B4是特異性地結(jié)合至位于人^淀粉樣肽內(nèi)的ILi末端表位、尤其是第3-7位殘基的mAb。仍在另一個(gè)實(shí)施方案，抗體可以是如美國(guó)專(zhuān)利公布號(hào)20050118651Al和國(guó)際專(zhuān)利公布號(hào)WO04/10885A2中所述的12A11抗體或其變體。12A11是特異性地結(jié)合至位于人/3-淀粉樣肽內(nèi)的M末端表位、尤其是第3-7位殘基的mAb。仍在另一個(gè)實(shí)施方案中，抗體可以是例如題為"HumanizedAntibodiesthatRecognizeBetaMmyloidPeptide."的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?1/304,986和國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)朠CT/US05/45515中所述的15C11抗體或其變體。15C11是特異性結(jié)合至位于人/3-淀粉樣肽內(nèi)的中央表位、尤其是第19-22位殘基的mAb。仍在另一個(gè)實(shí)施方案中，抗體可以是如美國(guó)專(zhuān)利乂〉布號(hào)20050249725A1和國(guó)際專(zhuān)利7>布號(hào)WO01/62801A2中所述的266抗體。用于本發(fā)明中的設(shè)計(jì)旨在特異性結(jié)合至位于人^-淀粉樣肽內(nèi)的^&末端表位的抗體包括但不限于如美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5，786，160中所述的369.2B。本發(fā)明內(nèi)所用的抗體可以重組產(chǎn)生或合成產(chǎn)生。例如，抗體可以通過(guò)重組中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO)細(xì)胞培養(yǎng)方法產(chǎn)生。此外，本發(fā)明考慮了具有較小修飾的保留了結(jié)合性Aj8肽主要功能性特性的抗體。在特定的實(shí)施方案中，抗體是選擇性地結(jié)合肽的人源化抗A/3肽3D6抗體。更具體地，將人源化的抗肽3D6抗體設(shè)計(jì)成特異性地結(jié)合至位于在(例如在患有的阿爾茨海默病的患者)腦內(nèi)蝕斑沉積物中存在的人0-淀粉狀蛋白1-40或1-42肽的氨基末端表位。圖1提供了稱作h3D6v2的示例性人源化抗A/S肽3D6抗體的結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)示意圖.^目應(yīng)表達(dá)載體的DNA序列中預(yù)測(cè)的h3D6v2輕鏈和重鏈的完整M酸序列示于圖2(其中以輕鏈和重鏈的M末端作為瓶基編號(hào)1開(kāi)始對(duì)殘基編號(hào))。重鏈DNA序列所編碼的最末氨基酸^J^Lys449未在h3D6v2成熟的分泌形式中觀察到，并且不希望受到任何特定理論束縛，估計(jì)該氨基酸殘基可能在細(xì)胞內(nèi)加工期間由CHO的細(xì)胞蛋白酶除去。因此，h3D6v2重鏈的g末端任選地是Gly448。g末端賴氨酸的加工已經(jīng)在重組抗體和質(zhì)粒衍生抗體內(nèi)觀察到并且似乎不影響它們的功能(Harris(1995)J.Chromatogr.A.705:129-134)。純化的h3D6v2通過(guò)將N連接的葡聚糖添加至已知含有單個(gè)N糖基化作用共有位點(diǎn)的重鏈Fc部分進(jìn)行翻譯后修飾。N-糖基化作用共有位點(diǎn)顯示具有在哺乳動(dòng)物IgG蛋白質(zhì)的類(lèi)似N糖基化作用位點(diǎn)上常見(jiàn)的三種主要的二天線復(fù)雜型中性寡糖結(jié)構(gòu)。另一個(gè)示例性人源化抗A/3肽抗體是具有圖2中所述的序列但在輕鏈的位置1處存在D—Y替換的人源化3D6版本1(hu3D6vl)。在本發(fā)明的多種實(shí)施方案中，抗A/3抗體(例如，人源化抗A/3肽3D6抗體)以約o.lmg/ml至約100mg/ml、以約0.1mg/ml至約75mg/ml、以約0.1mg/ml至約50mg/ml、以約0.1mg/ml至約60mg/ml、以約0.1mg/ml至約40mg/ml、以約0.1mg/ml至約30mg/ml、以約10mg/ml至約20mg/ml、以約20mg/mlto30mg/ml或更高濃度存在，例如，高至約100mg/ml、約200mg/ml、約500mg/ml或約1000mg/ml或更高濃度。在多種實(shí)施方案中，抗A0抗體以約15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25mg/ml存在。在特定的實(shí)施方案中，抗體(例如，人源化抗Aj8肽3D6抗體)以約17mg/ml存在。在另一個(gè)特定的實(shí)施方案中，抗體(例如，人源化抗A/S肽3D6抗體)以約20mg/ml存在。在另一個(gè)特定的實(shí)施方案中，抗體(例如，人源化抗Aj8肽3D6抗體)以約30mg/ml存在。在以上所引用的濃度之間的范圍，例如約12mg/ml至約17mg/ml也是本發(fā)明的部分。例如，包括使用任意如上所引用的值的組合作為上限和/或下限的值范圍。賦形劑在多種實(shí)施方案中，本發(fā)明提供可以包括多種賦形劑的制劑，賦形劑包括但不限于緩沖劑、抗氧化劑、張力劑和穩(wěn)定劑。此外，制劑可以^^有pH調(diào)節(jié)劑(例如HC1)和稀釋劑(例如7JC)。賦形劑部分地起到維持抗體的穩(wěn)定性和生物學(xué)活性的作用(例如，通過(guò)維持蛋白質(zhì)的正確構(gòu)象)和/或維持pH。緩沖劑在本發(fā)明的多個(gè)方面，制劑包括緩沖劑.緩沖劑可以起到增強(qiáng)制劑的等張性和化學(xué)穩(wěn)定性的作用。此外，緩沖劑起到維持生理適合的pH(例如，約pH6.0)的作用。通常，制劑應(yīng)當(dāng)具有生理適合的pH。在本發(fā)明的多種實(shí)施方案中，制劑應(yīng)當(dāng)具有約5至約7至或從約5.5至約6.5的？11。在特定的實(shí)施方案中，制劑具有約6的pH。在以上所引用的pH水平之間的范圍，例如約pH5.2至約pH6.3(例如，pH6.2)也是本發(fā)明的部分。例如，包括4吏用任意如上所引用的值的組合作為上限和/或下限的值范圍。pH可以在需要時(shí)通過(guò)本領(lǐng)域已知的技術(shù)調(diào)節(jié)。例如，可以根據(jù)需要添加HC1以pH至所需要的水平。緩沖劑可以包括但不限于琥珀酸(鈉或磷酸鹽)、組氨酸、磷酸(鈉或鉀)、Tris(三(羥甲基)氨基甲烷)、二乙醇胺、檸檬酸、其它有機(jī)酸及其混合物。在特定的實(shí)施方案中，緩沖劑是組氨酸(例如，L-組氨酸)。在另一個(gè)特定的實(shí)施方案中，緩沖劑是琥珀酸。在另一個(gè)實(shí)施方案中，制劑包括以足夠維持制劑處于生理適合的pH的量存在的氨基酸，如組氨酸。組氨M在生理pH范圍內(nèi)具有緩沖能力的示例性氨基酸。組氨酸的緩沖能力源自它的咪哇基團(tuán)。在一個(gè)示例性實(shí)施方案中，緩沖劑是L-組氨酸(堿)(例如C6H9N302，F(xiàn)W:155.15)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，緩沖劑是單鹽酸一水L-組氨酸(例如C6H9N302.HC1.H20，F(xiàn)W:209.63)。在另一個(gè)示例性實(shí)施方案中，緩沖劑是L-組氨酸(堿)和單鹽酸一水L-組氨酸的混合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，緩沖劑(例如，L-組氨酸或琥珀酸)以約0.1mM至約50mM、以約O.lmM至約40mM、以約0.1mM至約25mM、以約0.1mM至約30mM、以約0.1mM至約20mM或以約5mM至約15mM、優(yōu)選地約5mM或lOmM存在。在多種實(shí)施方案中，緩沖劑可以以約5mM、6mM、7mM、8mM、9mM、10mM、11mM、12mM、13mM、14mM、或15mM存在。在特定的實(shí)施方案中，緩沖劑以約10mM存在。在以上所引用的濃度之間的范圍，例如約12mM至約17mM，也是本發(fā)明的部分。例如，包括使用任意如上所引用的值的組合作為上限和/或下限的值范圍。在某些實(shí)施方案中，緩沖劑以足夠維持生理適合的pH的量存在，張力劑在本發(fā)明的多個(gè)方面，制劑包括張力劑。張力劑部分地助于維持制劑的等張性及維持蛋白質(zhì)水平。張力劑部分地助于保持制劑中存在的有治療活性的多肽的水平、比率或比例。如本文中所用，術(shù)語(yǔ)"張力"指流體環(huán)境或溶液中生物成分的特性。等張溶液具有與血漿相同的滲透壓，并且因此可以靜脈內(nèi)輸注至受試者而不改變受試者的血漿滲透壓。因此，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，張力劑以足夠使制劑適合用于靜脈內(nèi)輸注的量存在。張力劑常常也起到填充劑的功能。因此，張力劑可以允許蛋白質(zhì)經(jīng)受多種脅迫如冷凍和剪切。張力劑可以包括但不限于CaCh、NaCl、MgCl2.乳糖、山梨醇、蔗糖、甘露醇、海藻糖、棉子糖、聚乙二醇、羥乙基淀粉、甘氨酸及其混合物。在特定的實(shí)施方案中，張力劑是甘露醇(例如D-甘露醇，例如C6H1406，F(xiàn)W:182.17)。在一個(gè)實(shí)施方案中，張力劑(例如，甘露醇)以約2%至約6。/。w/v或約3%至約5。/。w/v存在。在另一個(gè)實(shí)施方案中，張力劑以約3.5%至約4.5%w/v存在。在另一個(gè)實(shí)施方案中，張力劑以約20mg/ml至約60mg/ml、約30mg/ml至約50mg/ml、或約35mg/ml至約45mg/ml存在。在特定的實(shí)施方案中，張力劑以約4。/。w/v或約40mg/ml存在。在另一個(gè)特定實(shí)施方案中，張力劑以約6%w/v存在。仍在另一個(gè)特定實(shí)施方案中，張力劑以約10。/。w/v存在。在以上所引用的濃度之間的范圍，例如約3.2%至約4.3%w/v或約32mg/ml至約43mg/ml，也是本發(fā)明的部分。例如，包括使用任意如上所引用的值的組*為上限和/或下限的值范圍。張力劑應(yīng)當(dāng)以足夠的量存在于以致維持制劑的張力。抗氧化劑在本發(fā)明的多個(gè)方面，制劑包括抗氧化劑以致于部分地保存制劑(例如，通過(guò)防止氧化作用)?？寡趸瘎┛梢园ǖ幌抻贕LACy-亞麻酸)-硫辛酸、DHA(二十二碳六烯酸)-硫辛酸、GLA-生育酚、二-GLA-3，3，-硫代二丙酸以及例如任意的與任何天然或合成抗氧化劑化學(xué)連接的GLA、DGLA(二高y亞麻酸)、AA(花生四烯酸)、SA(7JC楊酸)、EPA(二十碳五烯酸)或DHA(二十二碳六烯酸)。這些抗氧化劑包括酚類(lèi)抗氧化劑(例如，丁子香酚、鼠尾草酸、咖啡酸、BHT(丁基化羥基苯甲醚)、沒(méi)食子酸、生育酚、生育三烯酚和黃酮類(lèi)抗氧化劑(如楊梅黃酮和漆黃素))、多烯(例如，視黃酸)、不飽和固醇(例如，As-avenosteroI)、有積J?；衔?例如，蒜素)、薛烯(例如，香葉醇、樅酸)和M酸抗氧化劑(例如、曱硫氨酸、半胱氨酸、肌肽)。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗氧化劑是抗壞血酸。在特定的實(shí)施方案中，抗氧化劑是甲硫氨酸或其類(lèi)似物，例如硒代甲減表酸、羥甲基丁烯酸、乙疏氨酸、或三氟曱減裒酸。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗氧化劑(例如，甲疏氨酸如L-甲硫氨酸，例如CH3SCH2CH2CH(NH2)C02H,FW-149,21)以約0.1mM至約50mM、以約0.1mM至約40mM、以約0.1mM至約30mM、以約0.1mM至約20mM、或以約5mM至約15mM存在，在多種實(shí)施方案中，抗氧化劑可以約5mM、6mM、7mM、8mM、9mM、10mM、11mM、12mM、13mM、14mM、或15mM存在。在特定的實(shí)施方案中，抗氧化劑以10mM存在。在另一個(gè)特定的實(shí)施方案中，抗氧化劑以15mM存在。在以上所引用的濃度之間的范圍，例如約12mM至約17mM,也是本發(fā)明的部分。例如，包括4吏用任意如上所引用的值的組合作為上限和/或下限的值范圍。在某些實(shí)施方案中，抗氧化劑應(yīng)當(dāng)以足夠的量存在以致于部分地通過(guò)預(yù)防氧化作用而保存制劑。穩(wěn)定劑在本發(fā)明的多個(gè)方面，制劑包M定劑，也稱作表面活性劑.穩(wěn)定劑是相互作用并穩(wěn)定制劑中的生物分子和/或常見(jiàn)藥物賦形劑的特定化學(xué)化合物。在某些實(shí)施方案中，穩(wěn)定劑可以與較低溫度貯藏聯(lián)合使用。穩(wěn)定劑通常保護(hù)蛋白質(zhì)免受常常導(dǎo)致蛋白質(zhì)聚集的空氣/溶液界面誘導(dǎo)的張力和溶'^/表面誘導(dǎo)的張力影響。穩(wěn)定劑可以包括但不限于甘油、聚山梨酯如聚山梨酯80、二羧酸、草酸、琥珀酸、已二酸、延胡索酸、苯二甲酸及其組合。在特定的實(shí)施方案，穩(wěn)定劑是聚山梨酯80。在一個(gè)實(shí)施方案中，穩(wěn)定劑(例如，聚山梨酯80)以約0.00"/。w/v至約0.01%w/v間、約0.001%w/v至約0.009%w/v間、或約0.003%w/v至約0.007。/。w/v存在。在特定的實(shí)施方案中，穩(wěn)定劑以占制劑的約0.005°/ow/v存在。在另一個(gè)特定的實(shí)施方案中，穩(wěn)定劑以約0.01。/ow/v存在。在以上所引用的濃度之間的范圍，例如約0.002%w/v至約0.006%w/v，也是本發(fā)明的部分。例如，包括使用任意如上所引用的值的組合作為上限和/或下限的值范圍。穩(wěn)定劑應(yīng)當(dāng)以足夠量存在以致于穩(wěn)定A)S結(jié)合性多肽(例如，抗抗體)。其它可藥用的栽體、賦形劑或穩(wěn)定劑，如在Osol,A編輯的Remington'sPharmaceuticalSciences第16版(1980)中所述的栽體、賦形劑或穩(wěn)定劑，可以包括在制劑內(nèi)，只要它們沒(méi)有不利地影響制劑所需要的特性即可。在特定的實(shí)施方案中，制劑基本上無(wú)防腐劑，雖然在替代實(shí)施方案中，可以根據(jù)需要包括防腐劑，例如，當(dāng)將制劑凍干時(shí)可以包括冷凍保護(hù)劑或凍干保護(hù)劑。在本發(fā)明的多個(gè)方面，制劑任選地包括一些類(lèi)別或所有類(lèi)別的如上所述的賦形劑，在一個(gè)方面。本發(fā)明的制劑包括抗原結(jié)合性多肽(例如，抗AiS抗體)、甘露醇和組氨酸。在特定的實(shí)施方案中，制劑可以包括抗ll/化劑如甲名危氨酸和/或穩(wěn)定劑如聚山梨酯80。在某些實(shí)施方案中，制劑具有約6的pH。在另一個(gè)方面，制劑包括抗原結(jié)合性多肽(例如，抗A^抗體)、甘露醇、組氨酸和甲硫氨酸。仍在另一個(gè)方面，制劑包括A^結(jié)合性多肽(例如，抗A/S抗體)、甘露醇、組氨酸、甲硫氨酸和聚山梨酯80。在本發(fā)明的特定方面，制劑包括約20mg/ml的AjS結(jié)合性多肽(例如，抗Aj8抗體)、10mM組氨酸、10mM甲硫氨酸、4%甘露醇并具有約6的pH。在本發(fā)明的另一個(gè)方面，制劑包括約20mg/ml的A/3結(jié)合性多肽(例如，抗Aj3抗體)、10mM組氨酸、10mM甲硫氨酸、4。/。w/v甘露醇、0.01V。w/v聚山梨酯80并具有約6的pH。在本發(fā)明的另一個(gè)方面，制劑包括約20mg/ml的Aj8結(jié)合性多肽(例如，抗A/3抗體)、10mM組氨酸、10mM甲硫氨酸、4%w/v甘露醇、0.005%w/v聚山梨酯80并具有約6的pH。本發(fā)明的示例性實(shí)施方案提供常常用作原料藥物產(chǎn)物的抗原結(jié)合性多肽(例如，抗Aj8抗體)的濃縮制品。此外，本發(fā)明的示例性實(shí)施方案對(duì)冷凍、凍干和/或重構(gòu)穩(wěn)定。此外，本發(fā)明的示例性實(shí)施方案經(jīng)歷延長(zhǎng)的時(shí)間期限后穩(wěn)定.例如，本發(fā)明的制劑穩(wěn)定至少約6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30個(gè)月。在特定的實(shí)施方案中，本發(fā)明的制劑穩(wěn)定至少約12個(gè)月、至少約18個(gè)月、至少約24個(gè)月、或至少約30個(gè)月。根據(jù)本發(fā)明，制劑可以在約-80。C至約40°C、約0°C至約25。C、約0°C至約15°C、或約0°C至約10。C、優(yōu)選地約2。C至約8°C的溫度下貯存。在多種實(shí)施方案中，制劑可以在約0。C、1。C、2。C、3。C、4。C、5。C、6。C、7°C、8°C、9。C或10。貯存。在特定的實(shí)施方案中，制劑在約5。C貯存。通常，制劑在這些溫度范圍內(nèi)穩(wěn)定并且保留生物學(xué)活性。在以上所引用的溫度之間的范圍，例如約2°<:至約17°0:，也是本發(fā)明的部分。例如，包括使用任意如上所引用的值的組合作為上限和/或下限的值范圍。本發(fā)明的制劑適合于通過(guò)多種技術(shù)送遞。在某些實(shí)施方案中，制劑經(jīng)腸胃外如靜脈內(nèi)或肌內(nèi)施用。額外地，人們可以將制劑向腦(例如，以便抗體可以穿過(guò)血腦屏障)或脊液耙向遞送。在特定的實(shí)施方案中，制劑經(jīng)靜脈內(nèi)施用。本發(fā)明制劑的有效劑量根據(jù)眾多不同因素變動(dòng)，包括施用手段、把位點(diǎn)、患者生理狀態(tài)、患者是人還是動(dòng)物、所施用的其它藥物、以及治療是預(yù)防性的還是治療性的。通常，患者是人，但&可以治療包括轉(zhuǎn)基因哺乳動(dòng)物在內(nèi)的非人哺乳動(dòng)物。治療劑量需要滴定以最優(yōu)化安全性和效力。對(duì)于用抗體的被動(dòng)免疫，示例性劑量范圍為占宿主體重的約0.0001mg/kg至100mg/kg、并且更通常約O.Olmg/kg至約5mg/kg、約0.15mg/kg至約3mg/kg、約0.5mg/kg至約2mg/kg、優(yōu)選地約1mg/kg至約2mg/kg。例如劑量可以是1mg/kg體重或20mg/kg體重或在1-20mg/kg的范圍內(nèi)，優(yōu)選地約1mg/kg、約2mg/kg、約5mg/kg、約10mg/kg或約15mg/kg。在其它的示例性實(shí)施方案中，劑量可以是至少0.5mg/kg(例如0.5、0.6、0.7、0.75、0.8、0.9、1.0、1.2、1.25、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.75、1.8、1.9、或2.0mg/kg)、至少0.75mg/kg、至少1.25mg/kg、至少1.5mg/kg、至少1.75mg/kg或至少2mg/kg。受試者可以每日、隔日、每周或根據(jù)經(jīng)驗(yàn)性分析所確定的任何其它方案施用此劑量.示例性治療使得以多次劑量在延長(zhǎng)的時(shí)間例如至少6個(gè)月內(nèi)施用成為可能。其它示例性治療方案使得每?jī)芍芤淮?、每月一次或?至6個(gè)月一次施用成為可能。示例性劑量方案包括在連續(xù)日內(nèi)施用1-10mg/kg或15mg/kg、隔日施用30mg/kg或每周施用60mg/kg。在一些方法中，同時(shí)施用具有不同結(jié)合特異性的兩種或多種單克隆抗體，在此情況下所施用的每一抗體的劑量處于所標(biāo)注的范圍內(nèi)?？贵w通常多次施用。單次劑量間的間隔期可以是每周、每月或每年。間隔期還可以是不規(guī)則的，如測(cè)量患者中抗AP抗體的血液水平所指示。在一些方法中，調(diào)整劑量以實(shí)現(xiàn)1-1000ng/ml的血漿抗體濃度并且在某些方法中，實(shí)現(xiàn)25-300jig/ml的血漿抗體濃度。備選地，抗體可以作為緩釋制劑施用，在此情況下需要較少頻率的施用。劑量和頻率根據(jù)患者中抗體的半壽期變動(dòng)。通常，人抗體顯示具有最長(zhǎng)的半壽期，1^是人源化抗體、嵌合抗體和非人類(lèi)抗體。施用的劑量和頻率根據(jù)治療是預(yù)防性還是治療性而變動(dòng)。在預(yù)防性應(yīng)用時(shí)，將含有本抗體或其混合物的制劑施用至已經(jīng)不處于疾病狀態(tài)的患者以增強(qiáng)患者的抵抗力。將此量定義為"預(yù)防有效量"。在該用途中，精確的劑量再次取決于患者的健康和總體免疫狀態(tài)，但是通常范圍在每劑量0.1至25mg,特別是每劑量0.5至2.5mg。將相對(duì)低劑量以相對(duì)不頻繁的間隔期長(zhǎng)時(shí)間施用。一些患者在余生持續(xù)接受治療。在治療性應(yīng)用下，有時(shí)候需要在相對(duì)短的間隔期內(nèi)施用相對(duì)高的劑量(例如，每劑量從約0.5或l至約200mg/kg(例如0.5、1、1.5、2、5、10、20、25、50、或100mg/kg)的抗體，更常用從5至25mg/kg的劑量)直至疾病進(jìn)程被控制或終止，并且優(yōu)選地直至患者表現(xiàn)出疾病癥狀得到部分或完全改善。此后，對(duì)患者可以執(zhí)行預(yù)防性方案。為了易于施用和劑量的均一性，提供劑量單位形式的本發(fā)明制劑是有用的。本發(fā)明的制劑可以存在于膠囊、安瓿或在多劑量容器內(nèi)。單位劑型可以包含本文中所描述的任意制劑，其包括活性組分的混懸劑、溶液劑或乳劑以及配制劑如混懸劑、穩(wěn)定劑和/或^t劑。在示例性實(shí)施方案中，藥物劑量單位形式可以在例如通過(guò)靜脈內(nèi)輸注向患者施用之前添加至具有合適的稀釋劑例如無(wú)菌無(wú)熱源7jc或生理鹽水的靜脈內(nèi)滴注袋(例如50ml、100ml、或250ml、或500ml滴注袋)或在其中重構(gòu)。一些藥物單位劑型可能需要在添加至靜脈內(nèi)滴注袋之前以合適的稀釋劑重構(gòu)，特別是凍干形式的藥物單位劑型，在示例性的實(shí)施方案中，藥物單位劑型是含有本文中所述制劑的容器。術(shù)語(yǔ)"容器"指為貯存可以將物體或流體在其中放置或容納的某物，例如儲(chǔ)蓄器、接受器或貯器。例如，容器可以是IOml玻璃I型管狀小瓶。通常，容器應(yīng)當(dāng)保持制劑的無(wú)菌性和穩(wěn)定性。例如，小瓶可以用血清瓶塞密封。此外在多種實(shí)施方案中，應(yīng)當(dāng)如此設(shè)計(jì)容器以便允許抽取100mg制劑或活性成分(例如，用于單次使用)。備選地，容器可以適用于大量的制劑或活性成分，例如從約10mg至約5000mg、從約100mg至約1000mg并且從約100mg至約500mg、從約40mg至約250mg、從約60mg至約80mg、從約80mg至約120mg、從約120mg至約160mg、或其范圍或間隔、例如從約100mg至約200mg。在以上所引用的量之間的范圍，例如例如從約25mg至約195mg，也是本發(fā)明的部分。例如，包括使用任意如上所引用的值的組合作為上限和/或下限的值范圍，在特定的實(shí)施方案中，常常提供作為單位劑型的液體制劑.在另一個(gè)方面、本發(fā)明提供試劑盒，其包括藥物劑量單位形式(例如，具有本文中公開(kāi)的制劑的容器)和用途說(shuō)明書(shū)。因此，容器和試劑盒可以設(shè)計(jì)成能提供足夠制劑用于多種用途。在多種實(shí)施方案中，試劑盒還可以包括稀釋劑。稀釋劑可以包括獨(dú)立的或組合的賦形劑。例如，稀釋劑可以包括張力調(diào)節(jié)劑如甘露醇、緩沖劑如組氨酸、穩(wěn)定劑如聚山梨酯80、抗氧化劑如甲硫氨酸和/或其組合。稀釋劑可以含有如本領(lǐng)域技術(shù)人員認(rèn)為必要的其它賦形劑，例如凍干保護(hù)劑.本發(fā)明其它的有用實(shí)施方案在本申請(qǐng)中題為"發(fā)明簡(jiǎn)述"的部分中陳述。本發(fā)明進(jìn)一步由如下實(shí)施例說(shuō)明，實(shí)施例不應(yīng)當(dāng)解釋為是限制性的。本申請(qǐng)通篇所引用的全部參考文獻(xiàn)、專(zhuān)利和公開(kāi)的專(zhuān)利申請(qǐng)的內(nèi)容，以及附圖引入本文作為參考。實(shí)施例在全部實(shí)施例中，使用如下材料和方法，除非另外說(shuō)明。材料和方法通常，除非另外說(shuō)明，本發(fā)明的實(shí)施采用了化學(xué)、分子生物學(xué)、重組DNA技術(shù)、免疫學(xué)(尤其是例如抗體技術(shù))中的常規(guī)技術(shù)和多肽制備的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。見(jiàn)例如Sambrook;Fritsch和Maniatis，MolecularCloning:ColdSpringHarborLaboratoryPress(1989);AntibaodyEngineeringProtocols(MethodsinMolecularBiology),510，Paul,S.，HumanaPr(1996);AntibaodyEngineering:APracticalApproach(PracticalApproachSeries,169)，McCafferty編輯，IrlPr(1996);Antibaody:ALaboratoryManual,Harlow等，C.S.H丄.Press,Pub.(1999);和CurrentProtocolsinMolecularBiology,編者Ausubel等，JohnWiley&Sons(1992)。實(shí)施例1:治療性多肽的克隆和表達(dá)在本實(shí)施例中，描述了治療性多肽，尤其是抗原結(jié)合性多肽(即能夠結(jié)合AP的抗體)的克隆和表達(dá)。用于才艮據(jù)本發(fā)明方法配制的示例性抗體是3D6。3D6mAb對(duì)A/3M末端具有特異性并且已經(jīng)證實(shí)介導(dǎo)淀粉樣斑的胞^(例如，誘導(dǎo)M)。3D6不識(shí)別分泌型APP或全長(zhǎng)APP，但是僅檢測(cè)具有^J^末端天冬氨酸的A/S。因此3D6是末端特異性抗體。指定為RB963D6.32.2.4的產(chǎn)生3D6抗體的細(xì)胞系具有ATCC登錄號(hào)PTA-5130，已于2003年4月8日保藏。3D6抗體的克隆、表征和人源化在美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)20030165496Al中描述。簡(jiǎn)而言之，抗AP肽小鼠單克隆抗體(稱為m3D6)的人源化如下實(shí)施，即通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)分離用于m3D6輕鏈和重鏈可變區(qū)(Vl和Vh)的DNA序列。基于已確定的m3D6W和VhDNA序列，鑒定同源的人框架區(qū)。為保iiA源化抗體保留與肽抗原相互作用的能力，在人源化的3D6序列中保留小鼠v^和vh框架關(guān)鍵殘基以在人k輕鏈和IgGl重鏈序列環(huán)境下保留恒定結(jié)構(gòu)域區(qū)(CDR)的蒼沐結(jié)構(gòu)。通過(guò)此方法鑒定的編碼人源化3D6Vl和Vh序列的DNA序列(包括5'信號(hào)肽序列和3，內(nèi)含子剪#^序列)如下產(chǎn)生，即通過(guò)使合成的重疊DNA寡核苷酸退火，隨后通過(guò)DNA聚合酶填充反應(yīng)。每一人源化可變區(qū)序列的完整性通過(guò)DNA測(cè)序發(fā)汪。圖1描述了稱作h3D6v2的示例性人源化抗Aj8肽3D6抗體的結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)示意圖。圖2確定了h3D6v2輕鏈和重鏈的完整^酸序列。人源化3D6抗體通過(guò)用編碼抗AjS抗體輕鏈和重鏈基因的表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO)宿主細(xì)胞系得到表達(dá).表達(dá)抗體的CHO細(xì)胞使用基于氨甲蝶呤的標(biāo)準(zhǔn)藥物選擇/基因擴(kuò)增方法分離。選擇顯示具有所需生產(chǎn)力和生長(zhǎng)表型的克隆性CHO細(xì)胞系并用于使用無(wú)動(dòng)物源成分或人源成分的化學(xué)限定培養(yǎng)基建立表達(dá)抗體的細(xì)胞系。實(shí)施例2:使用大恥漠生物反應(yīng)器制備治療性多肽在本實(shí)施例中，描述治療性多肽、尤其是抗A^抗體的制備。多肽制造過(guò)程從穩(wěn)定表達(dá)抗抗體的克隆性細(xì)胞的引子培養(yǎng)物的融化開(kāi)始。細(xì)胞使用不含動(dòng)物源或人源蛋白質(zhì)的化學(xué)限定培養(yǎng)基培養(yǎng)。擴(kuò)增培養(yǎng)物并用于接種種子反應(yīng)器，其隨后用于接種多個(gè)生產(chǎn)生物反應(yīng)器循環(huán)。生產(chǎn)生物反應(yīng)器在補(bǔ)料批量培養(yǎng)模式下操作，在生產(chǎn)循環(huán)結(jié)束時(shí)，通過(guò)微過(guò)濾使條件培養(yǎng)基收獲物澄清，為進(jìn)一步的下游加工做制備。純化過(guò)程由標(biāo)準(zhǔn)層析步驟及隨后的過(guò)濾組成。純化的抗體通it^濾加以濃縮并且滲濾至無(wú)聚山梨酯-80的配制緩沖液內(nèi)。任選地，將(植物衍生的)聚山梨酯80添加至超濾/滲濾滯留池，JS1^進(jìn)行滯留細(xì)菌性過(guò)濾。將藥物在-80。C冷凍貯存直至用于進(jìn)一步制造成藥物產(chǎn)物，包括本文中所述的穩(wěn)定化液體制劑。實(shí)施例3:穩(wěn)定化液體多肽制劑的制備在本實(shí)施例中，描述了穩(wěn)定化液體多肽制劑的一般組合物。制造兩個(gè)批次的抗體藥物產(chǎn)物。初始批次通過(guò)將藥物物質(zhì)配制成無(wú)動(dòng)物蛋白質(zhì)或人蛋白質(zhì)制劑，所述制劑含有每毫升20mg抗A^抗體活性物質(zhì)、10mM組氨酸、10mM甲硫氨酸、4%甘露醇、0.005%聚山梨酯-80，pH6.0。將藥物產(chǎn)物除菌并以100mg抗抗體活性物質(zhì)/瓶加至小瓶中。最終的藥物產(chǎn)物小瓶不含防腐劑并且僅用于單次使用.笫二批次藥物產(chǎn)物^吏用無(wú)聚山梨酯-80的配制緩沖液制造。實(shí)施例4:穩(wěn)定化液體多肽制劑的分析在本實(shí)施例中，描述了多種穩(wěn)定化的液體多肽制劑的分析。制劑的穩(wěn)定性以及(尤其是)物理化學(xué)完整性(如聚集和脫酰胺作用)通過(guò)以下本領(lǐng)域眾所周知的方法評(píng)估外觀；pH;蛋白濃度(A280);部分地作為生物活性測(cè)試的ELISA;部分地作為聚集測(cè)試的十二烷J^L酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE);部分地作為聚集和整體穩(wěn)定性測(cè)試的大小排阻高效液相色語(yǔ)(SEC-HPLC);部分地作為氨基化和整體穩(wěn)定性測(cè)試的陽(yáng)離子交換高效液相色鐠(CEX-HPLC)以及肽作圖。這些方法評(píng)估蛋白質(zhì)在多種溫度的測(cè)試條件下的回收率和完整性。開(kāi)展制劑的外觀分析以便確定制劑在多個(gè)溫度點(diǎn)的質(zhì)量。分析基于視觀檢查透明度、色澤以及顆粒存在開(kāi)展。例如，乳光度通過(guò)參考混懸液進(jìn)行分析。根據(jù)本發(fā)明在含聚山梨酯80和不含聚山梨酯80時(shí)所制造的制劑的外觀分析表明，兩種制劑分別在-80。C、5。C、25°C和40°C下貯存如下時(shí)間點(diǎn)起始、l個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月、9個(gè)月和12個(gè)月是可接受的，pH分析試圖確定制劑的pH是否維持于約5.5至約6.5的可接受范圍內(nèi)。根據(jù)本發(fā)明在含聚山梨酯80和不含聚山梨酯80時(shí)所制造的制劑的pH分析表明，兩種制劑分別在-80。C、5°C、25。C和40。C下貯存如下時(shí)間點(diǎn)起始、l個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月、9個(gè)月和12個(gè)月是可接受的。通常，pH從不低于5,8或高于6.2。通過(guò)A280測(cè)定蛋白質(zhì)濃度以確定制劑的蛋白質(zhì)濃^否維持于約17mg/ml至約23mg/ml的可接受范圍內(nèi)。根據(jù)本發(fā)明在含聚山梨酯80和不含聚山梨酯80時(shí)所制造的制劑的蛋白質(zhì)濃度分析表明，兩種制劑分別在-80。C、5°C、25。C和40。C下貯存如下時(shí)間點(diǎn)起始、1個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月、9個(gè)月和12個(gè)月通常是可接受的。除了在5°C、25°C和40°C下貯存3個(gè)月的無(wú)聚山梨酯80的制劑蛋白質(zhì)濃度范圍flML高于23mg/ml之外，蛋白質(zhì)濃度保持在可接受的范圍內(nèi)。因此，蛋白質(zhì)濃度分析表明沒(méi)有可檢測(cè)的蛋白質(zhì)損失發(fā)生，尤其是對(duì)于含聚山梨酯80的制劑即便在加速的條件下亦如此。此外，蛋白質(zhì)濃度通常沒(méi)有在初始時(shí)間點(diǎn)后表現(xiàn)出顯著的時(shí)間和溫度依賴性變化。生物學(xué)活性的維持通過(guò)ELISA技術(shù)部分地分析。生物學(xué)活性分析為BU/mg，可接受活性是^2500BU/mg或50%(即5000BU/mg相當(dāng)于100%)。根據(jù)本發(fā)明在含聚山梨酯80和不含聚山梨酯80時(shí)所制造的制劑的ELISA分析表明，兩種制劑分別在-80。C、5°C、25°C和40°C下貯存如下時(shí)間點(diǎn)起始、l個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月、9個(gè)月和12個(gè)月通常是可接受的。除了在40°C貯存12個(gè)月的兩種制劑的生物學(xué)活性范圍略低于50%之外，生物學(xué)活性保持在可接受的范圍內(nèi)。開(kāi)展SEC-HPLC分析作為聚集、純度和整體穩(wěn)定性的測(cè)試。SEC-HPLC在使用所指定磷酸氫二鈉緩沖液的流動(dòng)相色鐠的條件下運(yùn)行，若與高分子量產(chǎn)物和低分子量產(chǎn)物的百分?jǐn)?shù)相比，SEC-HPLC分析確定IgG單體^90。/。，則制劑是可接受的。根據(jù)本發(fā)明在含聚山梨酯80和不含聚山梨酯80時(shí)所制造的制劑的SEC-HPLC分析表明，兩種制劑分別在-80。C、5。C、25。C和40。C下貯存如下時(shí)間點(diǎn)起始、1個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月、9個(gè)月和12個(gè)月通常是可接受的。當(dāng)兩種制劑在40。C下貯存6個(gè)月以及6個(gè)月后，兩種制劑的單體百分?jǐn)?shù)范圍低于卯％(其中分析鑒定了兩種制劑在每一時(shí)間點(diǎn)低分子量產(chǎn)物大于至少10%),除此之外，單體百分?jǐn)?shù)處于可接受的范圍內(nèi)。SEC-HPLC分析通常表明，雖然含聚山梨酯和不含聚山梨酯的樣品的高分子量曲線和低分子量曲線隨時(shí)間不同，但是當(dāng)制劑在5°C貯存時(shí)，抗體的單體形式通常保持恒定，例如保持12個(gè)月恒定。開(kāi)展CEX-HPLC作為#^化和整體穩(wěn)定性的測(cè)試。CEX-HPLC在使用能產(chǎn)生優(yōu)勢(shì)峰的洗脫曲線和存留時(shí)間的NaCl緩沖液的流動(dòng)相色鐠4Hf下運(yùn)行，被分析成為與參考標(biāo)準(zhǔn)曲線可比或不可比的曲線.根據(jù)本發(fā)明在含聚山梨酯80和不含聚山梨酯80時(shí)所制造的制劑的CEX-HPLC分析表明，兩種制劑分別在-80。C、5°C、25。C和40。C下貯存如下時(shí)間點(diǎn)起始、l個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月、9個(gè)月和12個(gè)月通常是可接受的。當(dāng)在4o。c貯存三個(gè)月以及3個(gè)月后，兩種制劑的優(yōu)勢(shì)峰'^yt曲線和存留時(shí)間不可比，除此之外，優(yōu)勢(shì)峰與參考峰是可比的。通常，對(duì)5。C貯存的含聚山梨酯80的制劑的分析得出如下特別重要的結(jié)論l)乳光、pH、ELISA、CEX-HPLC、SEC誦HPLC和SDSPAGE分析均顯示，制劑經(jīng)9個(gè)月后變化極微；2)在5。C貯存的制劑似乎比經(jīng)加速的樣品更像經(jīng)貯存9個(gè)月后的參考樣品；3)肽作圖顯示，在5。C發(fā)生變化；和4)在5。C的SEC-HPLC趨勢(shì)數(shù)據(jù)預(yù)測(cè)具有至少17.2個(gè)月的穩(wěn)定性(見(jiàn)圖6)，然而，當(dāng)消除了柱、設(shè)備和緩沖液的變異之后，用該數(shù)據(jù)預(yù)測(cè)具有大于30個(gè)月的穩(wěn)定性(見(jiàn)圖7)。此外，在25°C貯存的含聚山梨酯80的加速的樣品在9個(gè)月后通過(guò)全部要求(圖4)。另夕卜，分析在5。C貯存的不含聚山梨酯80的制劑，得出如下特別重要的結(jié)論l)乳光、pH和ELISA分析均顯示，制劑經(jīng)9個(gè)月后變化極微；2)CEX-HPLC和SDSPAGE的結(jié)果顯示，與參考樣品或-80。C貯存9個(gè)月的對(duì)照是可比的；3)SEC-HPLC分析顯示，經(jīng)9個(gè)月后變化細(xì)微，而在加速的溫度下變化更顯著；和4)SEC-HPLC趨勢(shì)數(shù)據(jù)預(yù)測(cè)具有至少18個(gè)月的穩(wěn)定性，即便存在測(cè)定變異亦如此(見(jiàn)圖8)。圖3-5是對(duì)根據(jù)本發(fā)明制造并分別在5°C、25°C和40°C貯存的制劑(含和不含PS80)的貨架壽命預(yù)測(cè)的圖形描述。通常，圖3-5表明，在較高溫度貯藏本發(fā)明的制劑降低了預(yù)期的貨架壽命.圖3尤其表明，當(dāng)制劑在5。C貯藏時(shí)，制劑具有至少18個(gè)月的預(yù)期貨架壽命。圖4表明，在室溫(25。C)貯藏制劑使預(yù)期貨架壽命降低至12個(gè)月。圖5進(jìn)一步表明，在40°C貯藏制劑使預(yù)期貨架壽命降低至約4個(gè)月。圖9進(jìn)一步表明，例如在5。C貯存12個(gè)月和有PS80存在的情況下減少高分子量副產(chǎn)物例如多肽聚集物的存在。實(shí)施例5:對(duì)使用甲硫氨酸作為抗氧化劑的穩(wěn)定性研究在本實(shí)施例中，描述了用氧化劑、尤其是甲硫氨酸穩(wěn)定的多種液體多肽制劑的分析。開(kāi)展研究以確定甲硫氨酸對(duì)治療性抗體制劑中抗體的穩(wěn)定性的影響。對(duì)在多個(gè)溫度下貯存的4個(gè)抗體(抗CD22IgG4抗體)樣品開(kāi)展6個(gè)月的SEC-HPLC分析pH6.0的具有20mM琥珀酸的抗體制劑；具有20mM琥珀酸和10mM甲石克氨酸的抗體制劑；具有20mM琥珀酸和0.01%PS80的抗體制劑和具有20mM琥珀酸、10mM甲硫氨酸和0.01%PS80的抗體制劑。通常，結(jié)果表明，甲硫氨酸有利地減少高分子量(HMW)形成，例如聚集物的形成。此外，甲硫氨酸降低了HMW百分?jǐn)?shù)的溫度依賴性增加(見(jiàn)圖10)。此外，對(duì)在多個(gè)溫度(5。C和40。C)下貯存的如下4個(gè)抗體(抗B7.2IgG2抗體)樣品上開(kāi)展pH穩(wěn)定性研究(在pH5.8，6.0和6.2)6周(1)包括抗體、10mM組氨酸和150mMNaCl的樣品；(2)包括抗體、10mM組氨酸、150mMNaCI和0.01%PS80的樣品；(3)包括抗體、10mM組氨酸、150mMNaCl和10mM甲硫氨酸的樣品；和(4)包括抗體、10mM組氨酸、ISOmMNaCl、10mM曱硫氨酸和0.01。/oPS80的樣品。開(kāi)展SEC-HPLC分析。結(jié)果顯示甲石危氨酸在指定pH范圍內(nèi)降4氐副產(chǎn)物形成(例如HMW副產(chǎn)物)百分?jǐn)?shù)的溫度依賴性增加(見(jiàn)圖11)。如圖11所示，含有甲硝森酸的樣品當(dāng)在40。C維持6周時(shí)顯示具有少量聚集，這與在5。C維持6周的樣品類(lèi)似。實(shí)施例6:使用差示掃描量熱法對(duì)穩(wěn)定化液體多肽制劑的賦形劑分析在本實(shí)施例中，描述了使用差示掃描量熱法對(duì)多種液體多肽制劑的賦形劑分析。蛋白質(zhì)藥物制劑的主要目的;l^吏處于其天然生物活性形式下的蛋白質(zhì)穩(wěn)定。通常，這可以通it^基礎(chǔ)制劑中篩選多種賦形劑并檢測(cè)它們對(duì)分子的分子量和活性的影響而實(shí)現(xiàn)。這些M指示著穩(wěn)定性。穩(wěn)定性的另一個(gè)度量是可以使用多種生物物理學(xué)技術(shù)監(jiān)測(cè)的熱變性。通常，將增加的蛋白質(zhì)穩(wěn)定性水平歸因于高的融化溫度、變性溫度和分解溫度.因此，示例性抗原結(jié)合性多肽、尤其是IgGl單克隆抗體的熱特性可使用VP-毛細(xì)管差異掃描量熱器在多種賦形劑存在下監(jiān)測(cè)。具體地，測(cè)定含多種賦形劑和10mM組氨酸(pH6.0)的制劑的表觀Tm。證實(shí)數(shù)種賦形劑使熱穩(wěn)定性提高或降低。因?yàn)橐褜⒃黾拥牡鞍踪|(zhì)穩(wěn)定性水平歸因于高的融化溫度，所以與對(duì)照Tm2/Tm3值(分別是74.9°C和83.4。C)相比，賦予樣品Tm2或Tm3值增加的賦形劑被認(rèn)為是特別受到歡迎的賦形劑(見(jiàn)下表1)。因此，得出結(jié)論賦形劑如(配制成濃度4%和10%)葡萄糖、(配制成濃度4%和10%)蔗糖、(配制成濃度4%和10%)山梨醇和(配制成濃度4%和10%)甘露醇在穩(wěn)定液體多肽制劑、尤其是抗體IgG制劑中表現(xiàn)特別優(yōu)良。表l賦形劑分析結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage56</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage57</column></row><table>六在對(duì)照(10mM組氨酸，pH6.0)中，觀察到兩次轉(zhuǎn)變，1\2和1\3。在某些賦形劑存在下見(jiàn)到較早的轉(zhuǎn)變(Tml),等效物僅僅使用常規(guī)實(shí)驗(yàn)，本領(lǐng)域技術(shù)人員將識(shí)別或能夠確定本文中所述的本發(fā)明具體實(shí)施方案的眾多等效物。此類(lèi)等效物旨在由如下權(quán)利要求書(shū)所涵蓋。權(quán)利要求1.液體制劑，包含有治療活性的抗原結(jié)合性多肽，其中多肽表現(xiàn)出在貯存期間形成副產(chǎn)物，以及抗氧化劑，其中所述的抗氧化劑以足夠減少制劑貯存期間多肽副產(chǎn)物形成的量存在。2.權(quán)利要求1所述的制劑，其中有治療活性的抗原結(jié)合性多肽成分選自抗體、抗體Fv片段、抗體Fab片段、抗體Fab，(2)片段、抗體Fd片段、單鏈抗體(scFv)、單結(jié)構(gòu)域抗體片段(Dab)、包含至少一個(gè)抗體互補(bǔ)性決定區(qū)域(CDR)的P-折疊多肽和包含至少一個(gè)抗體互補(bǔ)性決定區(qū)域的非球狀多肽。3.權(quán)利要求1所述的制劑，其中有治療活性的抗原結(jié)合性多肽是抗體。4.權(quán)利要求3所述的制劑，其中抗體選自亞型IgGl、IgG2、IgG3和IgG4。5.權(quán)利要求3所述的制劑，其中副產(chǎn)物選自高分子量多肽聚集物、低分子量多肽降解產(chǎn)物及其組合。6.權(quán)利要求5所述的制劑，其中高分子量聚集物選自抗體抗體復(fù)合體、抗體:抗體片段復(fù)合體、抗體片段:抗體片段復(fù)合體及其組合。7.權(quán)利要求5所述的制劑，其中低分子量多肽降解產(chǎn)物選自抗體輕鏈、抗體重鏈、抗體輕鏈與抗體重鏈復(fù)合體、抗體片段及其組合。8.權(quán)利要求1所述的制劑，其中抗氧化劑選自甲硫氨酸及其類(lèi)似物。9.權(quán)利要求8所述的制劑，其中甲硫氨酸以約0.1mM至約25mM的量存在。10.權(quán)利要求8所述的制劑，其中甲硫氨酸以約10mM的量存在。11.權(quán)利要求1所述的制劑，其中制劑適合用于腸胃外、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、顱內(nèi)或硬膜外施用。12.權(quán)利要求l所述的制劑，其中制劑能夠穿越血腦屏障。13.權(quán)利要求l所述的制劑，其中制劑還包含張力劑。14.權(quán)利要求13所述的制劑，其中張力劑是甘露醇。15.權(quán)利要求13所述的制劑，其中制劑適合用于靜脈內(nèi)施用。16.權(quán)利要求l所述的制劑，其中制劑還包含組氨酸。17.液體制劑，其包含抗原結(jié)合性多肽、甲硫氨酸、組氨酸和甘露醇。18.權(quán)利要求17所述的制劑，其中制劑適合用于靜脈內(nèi)施用。19.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的制劑，其中抗原結(jié)合性多肽與選自癌抗原、自身免疫抗原、過(guò)敏原和病原體的抗原結(jié)合。20.前a利要求中任一項(xiàng)所述的制劑，其中抗原結(jié)合性多肽以約O.lmg/ml至約200mg/ml存在。21.前i^利要求中任一項(xiàng)所述的制劑，其中抗原結(jié)合性多肽以約17mg/ml存在。22.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)所述的制劑，其中抗原結(jié)合性多肽以約20mg/ml存在。23.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)所述的制劑，其中抗原結(jié)合性多肽以約30mg/m存在.24.權(quán)利要求14和17-23中任一項(xiàng)所述的制劑，其中甘露醇以足夠維持制劑等張性的量存在。25.權(quán)利要求14和17-24中任一項(xiàng)所述的制劑，其中甘露醇以約2%w/v至約10%w/v存在。26.權(quán)利要求14和17-24中任一項(xiàng)所述的制劑，其中甘露醇以約4V。w/v存在。27.權(quán)利要求14和17-24中任一項(xiàng)所述的制劑，其中甘露醇以約6y。w/v存在。28.權(quán)利要求14和17-24中任一項(xiàng)所述的制劑，其中甘露醇以約10。/。w/v存在。29.權(quán)利要求16-28中任一項(xiàng)所述的制劑，其中組氨酸以足夠維持生理適合pH的量存在。30.權(quán)利要求16-29中任一項(xiàng)所述的制劑，其中組氨酸以約0.1mM至約25mM存在。31.權(quán)利要求16-29中任一項(xiàng)所述的制劑，其中組氨酸以約10mM存在。32.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的制劑，還包含穩(wěn)定劑。33.權(quán)利要求32所述的制劑，其中穩(wěn)定劑包含聚山梨酯80。34.權(quán)利要求33所述的制劑，其中聚山梨酯80以約0.001%w/v至約0.01。/。w/v存在。35.權(quán)利要求33所述的制劑，其中聚山梨酯80以約0.005%w/v存在。36.權(quán)利要求33所述的制劑，其中聚山梨酯80以約0.01。/ow/v存在。37.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的制劑，其中制劑具有約4至約9的pH。38.前n利要求中任一項(xiàng)所述的制劑，其中制劑具有約6至約7的pH。39.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的制劑，其中制劑對(duì)于冷凍是穩(wěn)定的。40.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的制劑，其中制劑穩(wěn)定至少約12個(gè)月。41.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的制劑，其中制劑穩(wěn)定至少約18個(gè)月。42.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的制劑，其中制劑穩(wěn)定至少約24個(gè)月。43.前i^利要求中任一項(xiàng)所述的制劑，其中制劑穩(wěn)定至少約30個(gè)月。44.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的制劑，其中制劑在約-80。C至約40°C穩(wěn)定。45.前a利要求中任一項(xiàng)所述的制劑，其中制劑在約0。C至約25。C穩(wěn)定《46.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的制劑，其中制劑在約2°C至約8°C穩(wěn)定。47.藥物單位劑型，包含有效量的前述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述制劑，用于通過(guò)向患者施用所述劑型而治療該患者的疾病。48.權(quán)利要求47所述的藥物單位劑型，其是含有所述制劑的容器。49.權(quán)利要求47所述的容器，其是含有約1mg至約2000mg所述的A^結(jié)合性多肽的小瓶。50.權(quán)利要求47所述的容器，其是含有約50mg至約1500mg所述的A0結(jié)合性多肽的小瓶。51.權(quán)利要求47所述的容器，其是含有約5mg至約50mg所述的A)S結(jié)合性多肽的小瓶。52.權(quán)利要求47所述的藥物單位劑型，其中所述小瓶具有約2ml至約100ml的體積。53.權(quán)利要求47所述的藥物單位劑型，其中所述小瓶具有約2ml至約10ml的體積。54.權(quán)利要求47-53中任一項(xiàng)所述的藥物單位劑型，其適合用于向所述患者靜脈內(nèi)輸注。55.試劑盒，包含a)權(quán)利要求47-54中任一項(xiàng)所述的藥物單位劑型；以及b)用途說(shuō)明書(shū)。56.容器，包含權(quán)利要求47所述的藥物單位劑型，該容器是標(biāo)注用途的容器。57.權(quán)利要求56所述的容器，其標(biāo)注用于預(yù)防用途。58.權(quán)利要求56所述的容器，其標(biāo)注用于治療用途。59.用于提高液體藥物制劑中抗原結(jié)合性多肽穩(wěn)定性的方法，其中多M現(xiàn)出在液體制劑貯存期間形成副產(chǎn)物，該方法包括向制劑中加AJL以減少多肽副產(chǎn)物形成量之?dāng)?shù)量的抗氧化劑。60.權(quán)利要求59所述的方法，其中抗原結(jié)合性多肽成分選自抗體、抗體Fv片段、抗體Fab片段、抗體Fab，(2)片段、抗體Fd片段、單鏈抗體(scFv)、單結(jié)構(gòu)域抗體片段(Dab)、包含至少一個(gè)抗體互補(bǔ)性決定區(qū)域(CDR)的^-折疊多肽和包含至少一個(gè)抗體互補(bǔ)性決定區(qū)域的非球狀多肽。61.權(quán)利要求59所述的方法，其中副產(chǎn)物選自高分子量多肽聚集物、低分子量多肽降解產(chǎn)物及其組合。62.權(quán)利要求59所述的方法，其中抗氧化劑選自甲硫氨酸及其類(lèi)似物。63.用于制備權(quán)利要求1-46中任一項(xiàng)所述制劑的方法，包括組合制劑賦形劑。64.用于制備權(quán)利要求1-46中任一項(xiàng)所述制劑的方法，包括將抗原結(jié)合性多肽與一種或多種稀釋劑組合，其中所述的一種或多種稀釋劑包含制劑賦形劑。65.用于制備藥物單位劑型的方法，包括在合適的容器中組合權(quán)利要求1-46中任一項(xiàng)所述的制劑。66.用于制備權(quán)利要求1-46中任一項(xiàng)所述制劑的方法，包括將包含抗原結(jié)合性多肽和至少一部分賦形劑的溶液與包含剩余賦形劑的稀釋劑組合。67.在高于冷凍至約10。C的溫度下穩(wěn)定至少約12個(gè)月并具有約5.5至約6,5的pH的制劑，包含i.濃度約1mg/ml至約30mg/ml的抗原結(jié)合性多肽；ii.濃度約4%w/v的甘露醇或濃度約150mM的NaCl;iii.約5mM至約10mM組氨酸或琥珀酸；和iv.10mM甲硫氨酸。68.權(quán)利要求67所述的制劑，其中制劑在約2。C至8°C的溫度下穩(wěn)定至少約24個(gè)月，并且包含濃度約0.001%w/v至約0.01%w/v的聚山梨酯80。69.權(quán)利要求67所述的制劑，其中制劑具有約6.0至約6.5的？11，并且包含約10mg/ml抗原結(jié)合性多肽、約10mM組氨酸和約4%w/v甘露醇以及約0.005%w/v聚山梨酯80。70.權(quán)利要求67所述的制劑，其中制劑具有約6.0至約6.2的？11，并且包含約20mg/ml抗原結(jié)合性多肽、約10mM組氨酸、約4%w/v甘露醇以及約0.005%w/v聚山梨酯80。71.權(quán)利要求67所述的制劑，其中制劑具有約6.0至約6.2的卩11,并且包含約30mg/ml抗原結(jié)合性多肽、約10mM組氨酸、約4%w/v甘露醇以及約0.005%w/v聚山梨酯80。72.權(quán)利要求71所述的制劑，還包含約4y。w/v甘露醇。73.權(quán)利要求71所述的制劑，還包含濃度約0.001%w/v至約0.01%w/v的聚山梨酯80。74.權(quán)利要求73所述的制劑，包含約0.005o/。w/v聚山梨酯80。75.權(quán)利要求71所述的制劑，其中抗原結(jié)合性多肽以約17mg/ml至約23mg/ml的濃度存在。76.在約2°C至約8°C的溫度下穩(wěn)定至少約24個(gè)月并具有約5.5至約6.5的pH的制劑，包含約2mg/ml至約23mg/ml的抗原結(jié)合性多肽、約10mM琥珀酸、約10mM甲石危氨酸、約4%w/v甘露醇以及約0.005%w/v聚山梨酯80。77.從約-50。C至-80'C融化時(shí)穩(wěn)定的制劑，其包含約40mg/ml至約60mg/ml的抗原結(jié)合性多肽、約1.0mg/ml至約2.0mg/ml組氨酸、約1.0mg/ml至2.0mg/ml甲石i^酸以及約0.05mg/ml聚山梨酯80,其中制劑具有約6.0的pH。78.權(quán)利要求77所述的制劑，其中不包含甘露醇。79.制劑，其包含約20mg/ml抗原結(jié)合性多肽、約10mML-組氨酸、約10mM甲硫氨酸、約4%甘露醇并具有約6.0的pH。80.制劑，其包含約30mg/ml抗原結(jié)合性多肽、約10mM琥珀酸、約10mM甲硫氨酸、約6%甘露醇并具有約6.2的pH。81.制劑，其包含約20mg/ml抗原結(jié)合性多肽、約10mML-組氨酸、約10mM甲石泉氨酸、約4%甘露醇、約0.005%聚山梨酯80，并具有約6的pH。82.制劑，其包含約10mg/ml抗原結(jié)合性多肽、約10mM琥珀酸、約10mM甲石危氨酸、約10%甘露醇、約0.005%聚山梨酯80,并具有約6.5的pH,83.制劑，其包含約5mg/ml至約20mg/ml抗原結(jié)合性多肽、約5mM至約10mML-組氨酸、約10mM甲硫氨酸、約4。/。甘露醇、約0.005%聚山梨酯80，并具有約6.0至約6.5的？11。84.制劑，其包含約5mg/ml至約20mg/ml抗原結(jié)合性多肽、約5mM至約10mML-組氨酸、約10mM甲石;t^酸、約150mMNaCl、約0.005%聚山梨酯80，并具有約6.0至約6.5的pH。85.包含制劑的藥物單位劑型，該制劑包含a約10mg至約250mg的抗原結(jié)合性多肽；b約4%甘露醇或約150mMNaCl;c約5mM至約10mM組氨酸或琥珀酸；以及d約10mM甲硫氨酸。86.權(quán)利要求85所述的藥物單位劑型，包含約0.001%至約0.1%聚山梨酯80。87.權(quán)利要求86所述的藥物單位劑型，包含約40mg至約60mg的抗原結(jié)合性多肽。88.權(quán)利要求86所述的藥物單位劑型，包含約60mg至約80mg的抗原結(jié)合性多肽。89.權(quán)利要求86所述的藥物單位劑型，包含約80mg至約120mg的抗原結(jié)合性多肽。90.權(quán)利要求86所述的藥物單位劑型，包含約120mg至約160mg的抗原結(jié)合性多肽。91.權(quán)利要求86所述的藥物單位劑型，包含約160mg至約240mg的抗原結(jié)合性多肽。92.治療產(chǎn)品，包含a.包含制劑的小瓶，該制劑包含i.約10mg至約250mg的抗原結(jié)合性多肽；ii.約4%甘露醇或約150mMNaCl;Hi.約5mM至約10mM組氨酸；和iv.約10mM甲硫氨酸；以及b.用途標(biāo)簽，其包含實(shí)現(xiàn)約0.15mg/kg至約5mg/kg劑量所需要使用的適宜體積的說(shuō)明書(shū)。93.權(quán)利要求92所述的治療產(chǎn)品，其中劑量為約0.5mg/kg至約3mg/kg。94.權(quán)利要求92所述的治療產(chǎn)品，其中劑量為約1mg/kg至約2mg/kg。95.權(quán)利要求92所述的治療產(chǎn)品，其中抗原結(jié)合性多肽的濃度為約10mg/ml至約60mg/ml。96.權(quán)利要求92所述的治療產(chǎn)品，其中抗原結(jié)合性多肽的濃度為約20mg/ml。97.權(quán)利要求92所述的治療產(chǎn)品，還包含約0.005%聚山梨酯80。98.權(quán)利要求92所述的治療產(chǎn)品，其中用法是皮下施用。99.權(quán)利要求92所述的治療產(chǎn)品，其中用法是靜脈內(nèi)施用。全文摘要本發(fā)明提供用于維持多肽、尤其是治療性抗原結(jié)合性多肽如抗體等(例如抗Aβ抗體)穩(wěn)定性的制劑。制劑通常包括其量足以抑制副產(chǎn)物形成例如高分子量多肽聚集物、低分子量多肽降解片段和其混合物的形成的抗氧化劑。本發(fā)明的制劑任選地包含張力劑如甘露醇，以及緩沖劑或氨基酸(如組氨酸)，因此該制劑適合于數(shù)種不同的施用途徑。文檔編號(hào)C07K16/18GK101111264SQ200680003387公開(kāi)日2008年1月23日申請(qǐng)日期2006年1月27日優(yōu)先權(quán)日2005年1月28日發(fā)明者A·坎托爾,D·路易斯,N·W·沃恩申請(qǐng)人:惠氏公司