專(zhuān)利名稱(chēng)：新組蛋白脫乙?；敢种苿┑闹谱鞣椒?br> 技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗腫瘤化合物的領(lǐng)域。在這里描述了具有肉桂酰胺樣(cinnamoylamidic)結(jié)構(gòu)的用于治療與組蛋白脫乙?；富钚允Э赜嘘P(guān)的疾病，如用于抗腫瘤治療的新組蛋白脫乙?；敢种苿?。
現(xiàn)有技術(shù)組蛋白N-末端部分中賴(lài)氨酸殘基的ε-氨基上發(fā)生的可逆的組蛋白乙酰化調(diào)控著核小體內(nèi)重要的構(gòu)象變化。這些變化影響著DNA接近轉(zhuǎn)錄因子的能力以及基因表達(dá)(Curr.Opin.Genet.Dev.1998，8，173-178)。在組蛋白乙酰化中涉及兩類(lèi)酶通過(guò)以轉(zhuǎn)錄輔激活因子的形式起作用而催化組蛋白乙?；慕M蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HATs)、以及組蛋白脫乙?；?HDACs)；后一種酶通過(guò)轉(zhuǎn)錄阻抑物和輔抑制物如Sin3、SMRT、和N-CoR而在啟動(dòng)子區(qū)域的水平上被補(bǔ)充，從而使得形成了低乙酰化(hypoacetylated)的組蛋白和轉(zhuǎn)錄沉默(TrendsBiochem.Sci.2000，25，619-623)。在許多病理學(xué)中涉及通過(guò)致癌蛋白進(jìn)行的組蛋白脫乙酰基酶的異常募集，或者正常細(xì)胞中組蛋白乙?；D(zhuǎn)移酶和組蛋白脫乙?；富钚缘钠胶馐д{(diào)1-首先，在腫瘤學(xué)疾病中(Oncogene 2001，20，7204-7215，7186-7203，3116-3127；Nature 1998，391，815-818；Mol.Cell.Biol.1998，18，7176-7184)。
2-在一些非腫瘤疾病中神經(jīng)系統(tǒng)亨廷頓氏舞蹈病(J Neurosci 23，9418-27(2003)；Proc NatlAcad Sci USA 100，2041-6(2003))、由三聯(lián)(triplette)擴(kuò)增造成的疾病(Curr Med Chem 10，2577-87(2003)；Curr Biol 12，R141-3(2002))、對(duì)抗變性疾病的神經(jīng)保護(hù)作用(FEBS Lett 542，74-8(2003)；局部缺血(J Neurochem 89，1358-67(2004))、氧化應(yīng)激(Proc Natl Acad Sci USA 100，4281-6(2003))、神經(jīng)系統(tǒng)的炎性響應(yīng)(J Neurochem 87，407-16(2003))、癲癇(Epilepsia 45，737-44(2004)，J Neurosci 22，8422-8(2002))、由蛋白聚集造成的疾病(Curr Biol 14，488-92(2004))。
感染HIV(Mol Cell Biol 23，6200-9(2003)，Embo J 15，1112-20(1996)，Biochem Pharmacol 68，1231-8 2004)，Aids 18，1101-8(2004))、瘧疾、利什曼病、由原生動(dòng)物、真菌、植物毒性劑(phytotoxic agents)、病毒、寄生蟲(chóng)造成的感染。
免疫系統(tǒng)自身免疫性疾病(Blood 101，1430-8(2003))、涉及宿主的慢性免疫反應(yīng)(Proc Natl Acad Sci USA 101，3921-6(2004))。
心臟肥大和心臟病癥(J Clin Invest 112，863-71(2003)，NovartisFound Symp 259，132-41，討論141-5，163-9(2004)，J Clin Invest112，824-6(2003))。
肌肉器官皮膚纖維化疾病(Exp Cell Res 278，184-97(2002))、纖維變性(Hepatology 29，858-67(1999))、脊柱和延髓肌肉萎縮(Hum MolGenet 13，1183-92(2004))。
精神系統(tǒng)雙相型精神障礙(Nature 417，292-5(2002))、精神病學(xué)病癥(Crit Rev Neurobiol 15，121-42(2003))、X-疲勞綜合征(X-fragilesyndrome)(BMC Mol Biol 4，3(2003)，Hum Mol Genet 8，2317-23(1999))。
其它關(guān)節(jié)炎(Mol Ther 8，707-17(2003))、腎病(J Clin Invest 111，539-52(2003))、牛皮癬(Curr Drug Targets Inflamm Allergy 3，213-9(2004))、腸病、結(jié)腸炎(Wien Klin Wochenschr 114，289-300(2002))、β地中海貧血(beta thalassemy)(Expert OpinInvestig Drugs 10，925-34(2001))、呼吸疾病(Am J Respir Crit CareMed 167，813-8(2003))、Rubinstein-Taybi綜合征(Neuron 42，947-59(2004))。
組蛋白脫乙酰基酶抑制劑，如天然產(chǎn)物tricostatin A(TSA)、trapoxin(TPX)、和縮酚酸肽FK-228、短鏈脂肪酸、丁酸(butyrrate)鈉、苯基丁酸鈉和丙戊酸鈉、異羥肟酸、羥肟酸酯如辛二酰基苯胺異羥肟酸(SAHA)、pyroxamide、scriptaid、oxamflatin、NVP-LAQ824、包含異羥肟酸的環(huán)肽(CHAPs)、和苯甲酰胺MS-275強(qiáng)烈促進(jìn)了培養(yǎng)物和動(dòng)物模型中許多變異細(xì)胞的生長(zhǎng)間斷、分化和細(xì)胞凋亡(Curr.Opin.Oncol.2001，13，477-483)。其中，苯基丁酸鈉(單獨(dú)或者聯(lián)用的)、縮酚酸肽、SAHA、pyroxamide、NVP-LAQ824、MS-275正處于進(jìn)行一些癌癥疾病治療的I期和/或II期臨床(Nat.Rev.Drug Discov.2002，1，287-299)。然而，其臨床應(yīng)用受到了毒性問(wèn)題(TSA，CHAPs，MS-275)、低穩(wěn)定性(TSA，trapoxin)、低溶解度(TSA)、低效力和缺乏選擇性(丁酸鹽以及類(lèi)似物)(Anti-Cancer Drugs 2001，13，1-13)的限制。
WO 04/063169公開(kāi)了具有下面通式的作為HDAC抑制劑的異羥肟酸衍生物 R1是任選地被一個(gè)或多個(gè)適宜基團(tuán)取代的含N-雜環(huán)，R2是羥基氨基，R3是氫或適宜的取代基，L1是任選地被一個(gè)或多個(gè)適宜的取代基取代并且其中一個(gè)或多個(gè)亞甲基可以被適宜的雜原子代替的-(CH2)n-(n是0至6的整數(shù))；L2是低級(jí)亞烷基鏈。
WO 03/087066描述了具有下式的異羥肟酸衍生物以及其作為組蛋白脫乙?；敢种苿┑膽?yīng)用， 其中A是任選地被取代的苯基或芳族雜環(huán)基團(tuán)；m和n獨(dú)立地是0至4的整數(shù)；和X是具有選自 的結(jié)構(gòu)的部分，其中R2是氫或任選地被取代的C1-C4烷基。
WO 02/22577公開(kāi)了下面通式的作為脫乙?；敢种苿┑南旅娴漠惲u肟酸衍生物
其中R1是氫、鹵素或C1-C6烷基鏈，R2選自H、C1-C10烷基、C4-C9環(huán)烷基、C4-C9雜環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基等；R3和R4獨(dú)立地選自氫、C1-C6烷基、?；蝓；被鵕5選自氫、C1-C6烷基等；n1、n2和n3是0至6的整數(shù)，X和Y選自氫、鹵素、C1-C4烷基等。
WO 01/38322公開(kāi)了下面通式的組蛋白脫乙?；敢种苿〤y-L1-Ar-Y1-C(O)-NH-Z其中Cy是任選地被取代的環(huán)烷基、芳基、雜芳基或雜環(huán)基環(huán)；L1是-(CH2)m-W，m是0至4的整數(shù)，其中W選自C(O)NH-、S(O)2-NH-等；Ar是任選地被取代的亞芳基環(huán)，其中所說(shuō)的亞芳基可以任選地與芳基或雜芳基環(huán)稠合，Y1是一種鍵或飽和的亞烷基鏈；其中Z是O-M，其中M是氫或適宜的藥用陽(yáng)離子。
WO 95/13264公開(kāi)了下面通式的異羥肟酸衍生物以及其作為具有抑制平滑肌生長(zhǎng)并可用作預(yù)防血管壁增厚、PTCA后的再狹窄作用的藥物的應(yīng)用，并且還甚至涉及其作為抗動(dòng)脈粥樣硬化劑的應(yīng)用， 其中R1表示苯基或芳氧基苯基等；L是C1-C8亞烷基、C2-C8亞鏈烯基、(CH2)m-O-(其中m是0至4的整數(shù))、或-CO-；n是0或1；R2是氫、C1-C4烷基或芳基烷基；M是氫、烷?；?alkoyl)、烷氧基羰基。
Mai等人在J.Med.Chem.2001，44，2069-2072，J.Med.Chem.2002，45，1778-1784，J.Med.Chem.2003，46，512-524，J.Med.Chem.2003，46，4826-4829，J.Med.Chem.2004，47，1098-1109，J.Med.Chem.2004，47，1351-1359和J.Med.Chem.2005，48，3344-3353中描述了作為選擇性HDAC抑制劑的吡咯基羥酰胺(hydroxamide)衍生物。
在Expert Opin.Ther.Patents 2004，14(6)，791-804)中公開(kāi)了另外一些HDAC抑制劑。還鑒定了對(duì)特定組蛋白乙?；竵嗩?lèi)(HD2，HD1-A，HD1-B)具有不同親合力的組蛋白脫乙?；敢种苿﹨^(qū)別其對(duì)各種組蛋白脫乙?；竵嗩?lèi)的能力產(chǎn)生了重要的后果即可以消除副作用和/或?qū)μ囟ǖ哪[瘤形式有活性。
但是，迄今為止，上述化合物中沒(méi)有任何一種化合物表現(xiàn)出完全令人滿意的性質(zhì)。因此，仍然希望能找到具有有用的抗腫瘤性質(zhì)、足夠的選擇性和作用穩(wěn)定性的新組蛋白脫乙?；敢种苿贿€希望尋找對(duì)組蛋白脫乙?；妇哂懈哂H合力、可能對(duì)其特定的亞類(lèi)具有更高的活性的新抑制劑。
概述我們現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)了具有高效和穩(wěn)定的抗腫瘤活性的新組蛋白脫乙酰基酶抑制劑群。這些抑制劑如下面的通式(I)所述，
其中R1是包含至少兩個(gè)共軛雙鍵的直鏈或支鏈，R3選自氫、烷氧基烷基；Ar是任選地被取代的芳基或雜芳基。
A選自 其中R2選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、雜環(huán)基，雜環(huán)基烷基、鹵素、鹵代烷基、羥基、羥基烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、氨基、氨基烷基、烷基氨基、(硫代)羰基氨基、(硫代)氨基carbonil、磺?；被被酋；?、(硫代)?；?、(硫代)酰氧基、(硫代)烷氧基羰基、硝基和硝?；?；式(I)的化合物可以通過(guò)將式(II)的化合物(其中A和R2具有上述含義并且R4是一種合適的離去基團(tuán)，例如鹵素如溴或碘) (i)用式Ar-W的化合物(其中Ar具有上述含義，并且W是能通過(guò)與(II)的CHO基團(tuán)反應(yīng)形成上面所定義的基團(tuán)R1的基團(tuán))或者其合成中間體來(lái)進(jìn)行處理，(ii)并且進(jìn)一步用式(III)的化合物對(duì)其進(jìn)行處理來(lái)進(jìn)行合成，
其中Z表示上面所定義的基團(tuán)NHOR3或其前體，并且其中步驟(i)和(ii)可以以任何次序進(jìn)行。
式(I)的化合物是十分有效的組蛋白脫乙酰基酶抑制劑，其IC50為1μM或更低。經(jīng)過(guò)一定的時(shí)間已經(jīng)證明這些化合物表現(xiàn)出廣譜和穩(wěn)定的活性從治療應(yīng)用的觀點(diǎn)來(lái)看，這兩種特征都是十分理想的。此外，式(I)的化合物可充分促進(jìn)細(xì)胞凋亡和抑制腫瘤細(xì)胞組的細(xì)胞增殖。
本發(fā)明包括式(I)的化合物在治療和/或預(yù)防與組蛋白脫乙?；富钚允Э赜嘘P(guān)的疾病中的應(yīng)用以及用于所說(shuō)化合物的給藥的相關(guān)藥物組合物。


圖1用所示化合物對(duì)U937細(xì)胞處理4小時(shí)和24小時(shí)的結(jié)果(200nM，1μM)。
圖2.用本發(fā)明的化合物對(duì)U937細(xì)胞進(jìn)行的處理對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和細(xì)胞凋亡的影響。
圖3用本發(fā)明的化合物對(duì)K562和HT29細(xì)胞進(jìn)行的處理對(duì)細(xì)胞周期、細(xì)胞生長(zhǎng)和細(xì)胞凋亡的影響。
圖4新HDACi的給藥對(duì)正常皮膚的影響(用于探測(cè)乙?；M蛋白的免疫組織化學(xué))圖5在誘導(dǎo)和發(fā)生乳頭狀瘤后新HDACi的給藥對(duì)皮膚的影響(用于探測(cè)組蛋白的組織化學(xué))圖6用新HDACi進(jìn)行的治療對(duì)乳頭狀瘤數(shù)目的影響本發(fā)明的詳細(xì)描述在上述式(I)中，單獨(dú)或者被包含在更復(fù)雜結(jié)構(gòu)(例如烷氧基、芳基烷基等)中的烷基優(yōu)選地包含1至8個(gè)(更優(yōu)選地包含1至4個(gè))碳原子并且可以是直鏈或支鏈的，并且可被取代。
單獨(dú)或者被包含在更復(fù)雜結(jié)構(gòu)(例如酰氧基)中的?；鶅?yōu)選地包含1至8個(gè)，更優(yōu)選1至4個(gè)碳原子并且可以是直鏈或支鏈、飽和或不飽和的，并且可被取代。
所說(shuō)的環(huán)烷基優(yōu)選地包含3至8個(gè)，更優(yōu)選3至6個(gè)碳原子并且可以是飽和或不飽和的，并且可被取代。
單獨(dú)或者被包含在更復(fù)雜結(jié)構(gòu)(例如芳基烷基)中的芳基是芳族單環(huán)或多環(huán)，每個(gè)環(huán)優(yōu)選地包含6至10個(gè)碳原子，其可被取代；芳基的一個(gè)優(yōu)選實(shí)例是苯基。
單獨(dú)或者被包含在更復(fù)雜結(jié)構(gòu)(例如雜環(huán)烷基)中的雜環(huán)基是單環(huán)或多環(huán)，每個(gè)環(huán)優(yōu)選地包含4至8個(gè)成員，其中1至3個(gè)成員可以是雜原子如N、O、S，并且其可以是飽和或不飽和的并且可被取代。
在所述的所有可被取代的基團(tuán)中，可能存在的取代基可選自例如羥基、烷氧基、鹵代烷氧基、氨基、氨基羰基、羰基氨基、羰基酰胺、酰胺、羧基、烷氧基羰基、氨基烷基、烷基氨基、二烷基氨基、吡啶基、哌嗪基、嗎啉基(morpholyl)、鹵素、硝基和硝?；倌軋F(tuán)。
對(duì)于屬于任何α，β不飽和官能團(tuán)的上述R1的定義而言，包括其中α，β不飽和情況涉及非碳原子，例如氧、氮、或硫原子的那些官能團(tuán)。因此，R1可以是碳原子鏈，或者其中Y表示在α，β不飽和情況中所涉及的非碳原子的＝Y(jié)取代的碳原子鏈。R1優(yōu)選地包括3至8個(gè)碳原子；R1更優(yōu)選地選自下面的結(jié)構(gòu) 其中Y選自O(shè)、S、NH、CH2、NOH或具有1至4個(gè)碳原子的R5烷基的NOR5。
Ar基團(tuán)的優(yōu)選含義是苯基、萘基、吡啶基、吡喃基、吡咯基、噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基。
在存在時(shí)，Ar的任選取代基優(yōu)選地選自鹵素、羥基、烷基、烷氧基、三氟烷基、三氟烷氧基、二烷基氨基、嗎啉基、哌嗪基、甲氧基羰基。
A環(huán)與R1和與包含R3的殘基的連接優(yōu)選地位于彼此相對(duì)于A環(huán)而言的對(duì)位關(guān)系上。取代基R2可以被連接在A環(huán)任何可獲得的位置上；R2的優(yōu)選含義是氫、鹵素、烷基、烷氧基。R3的優(yōu)選含義是氫。
式(I)的優(yōu)選結(jié)構(gòu)是下面的式(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id) 其中Ar和R2具有上述含義，并且X是碳或氮原子。
本發(fā)明還包括一種制備式(I)化合物的方法。在其最普通的含義上，該方法包括將式(II)的化合物
其中A和R2具有上述含義并且R4是一種適宜的離去基團(tuán)，例如鹵素如溴和碘(i)用式Ar-W的化合物或其合成中間體進(jìn)行處理，其中Ar具有上述含義，并且W是一種能通過(guò)與式(II)的CHO基團(tuán)進(jìn)行反應(yīng)形成所說(shuō)的R1基團(tuán)的基團(tuán)，(ii)和進(jìn)一步用式(III)的化合物對(duì)其進(jìn)行處理， 其中Z表示上面所定義的NHOR3或其前體。
化合物Ar-W的加成反應(yīng)通常是在堿性環(huán)境中進(jìn)行的；化合物Ar-W優(yōu)選地是在苯環(huán)上任選地被取代的苯乙酮。
式(III)的化合物優(yōu)選地是丙烯酸烷基酯，更優(yōu)選地是丙烯酸正-丁酯。式(III)化合物的加成通常是在存在磷酸鉀和醋酸鈀的情況下進(jìn)行的；在式(III)的烷基丙烯酸酯的情況中，O-烷基以NHOH基團(tuán)前體的形式起作用；如下所列舉的那樣，其向NHOH的轉(zhuǎn)化是根據(jù)已知的技術(shù)來(lái)進(jìn)行的。
式(Ia)的優(yōu)選化合物特別是可以根據(jù)下面的合成途徑通過(guò)將式(IV)或(IVa)的化合物去保護(hù)來(lái)獲得流程圖1 在這里所示的所有結(jié)構(gòu)式中，用“Het”標(biāo)記的環(huán)都表示吡啶環(huán)
用標(biāo)準(zhǔn)方法除去根據(jù)正?；瘜W(xué)操作進(jìn)行選擇的保護(hù)基團(tuán)PG1。當(dāng)PG1是四氫吡喃基或2-甲氧基-2-丙基殘基時(shí)，使用酸性條件如位于質(zhì)子惰性溶劑(例如乙醚、二烷或THF)中的鹽酸。
式(IV)的化合物是通過(guò)將式(V)的化合物與被保護(hù)的羥基胺(NH2OPG1)進(jìn)行反應(yīng)來(lái)獲得的。
可以用有機(jī)合成現(xiàn)有技術(shù)中已知的偶合劑如EDC(1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺)、DCC(N，N’-二環(huán)己基-碳二亞胺)或者聚合物-支撐的偶合劑例如聚合物-支撐的碳二亞胺(PS-DCC，ex ArgonautTechnologies)在存在適宜的堿如三乙胺、二異丙基乙基胺的情況下在適宜的溶劑(例如四氫呋喃、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺)中來(lái)促進(jìn)所說(shuō)的偶合反應(yīng)。在所說(shuō)的反應(yīng)混合物中通常還可以存在輔催化劑如HOBT(1-羥基-苯并三唑)、HOAT(1-羥基-7-氮雜苯并三唑)等。該反應(yīng)通常在室溫下進(jìn)行約2小時(shí)至高至12小時(shí)。
式(V)的化合物可以通過(guò)將式(VI)的化合物與式(VII)的化合物在存在無(wú)機(jī)堿如KOH或NaOH的情況下在質(zhì)子溶劑如乙醇、甲醇或水中進(jìn)行反應(yīng)來(lái)獲得。該反應(yīng)通常在0℃至室溫下進(jìn)行約2小時(shí)至高至12小時(shí)。

式(VII)的化合物是可以通過(guò)商業(yè)途徑獲得的已知化合物，或者其可以用已知的方法或者與制備已知化合物所用的這些方法相似的方法由已知的化合物來(lái)進(jìn)行制備。
式(VI)的化合物可以通過(guò)商業(yè)途徑獲得或者可以通過(guò)用Larhed，M.；Hallberg，A.in Handbook of Organopalladium Chemistry forOrganic Synthesis；Negishi，E.，Ed.；Wiley-Interscience紐約，2002所述的經(jīng)典Heck反應(yīng)條件將式(VIII)的化合物與丙烯酸叔-丁酯進(jìn)行反應(yīng)來(lái)進(jìn)行制備， 其中B是鹵素，特別是溴或碘。該反應(yīng)是在存在鈀鹽如醋酸鈀、和有機(jī)堿和無(wú)機(jī)堿(三乙胺、1，4-二氮雜二環(huán)[2.2.2]辛烷和碳酸氫鈉或碳酸氫鉀)并且最后在存在膦衍生物如三苯基膦的情況下在DMF中進(jìn)行的。該反應(yīng)通常在室溫至回流，通常在100℃下進(jìn)行約2小時(shí)至高至12小時(shí)。用于將叔丁酯轉(zhuǎn)化成相應(yīng)羧酸的適宜去保護(hù)方法是現(xiàn)有技術(shù)中常用的這些方法，可參考標(biāo)準(zhǔn)教科書(shū)如Greene，T.W.and Wuts，P.G.M.有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán)(Protective Groups in OrganicSynthesis)，John Wiley & Sons Inc.紐約，1991(Second Edt.)或Kocienski，P.J.Protecting groups.George Thieme Verlag，紐約，1994。
式(VIII)的化合物是可通過(guò)商業(yè)途徑獲得的已知化合物或者其可以用已知的方法或者與制備已知化合物所用的這些方法相似的方法由已知化合物來(lái)進(jìn)行制備。
或者，式(V)的化合物可以通過(guò)將式(IX)的化合物與式(VII)的化合物在存在無(wú)機(jī)堿如KOH或NaOH的情況下在質(zhì)子溶劑如乙醇、甲醇或水的情況下進(jìn)行反應(yīng)來(lái)獲得， 該反應(yīng)通常在0℃至室溫下進(jìn)行約2小時(shí)至高至12小時(shí)。用于將叔丁酯轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的羧酸的適宜去保護(hù)方法是現(xiàn)有技術(shù)中常用的這些方法。
式(IX)的化合物可以通過(guò)用與合成式(VI)的化合物時(shí)所述這些方法相似的經(jīng)典Heck條件將式(VIII)的化合物(其中B是鹵素，特別是溴或碘)與丙烯酸叔-丁酯進(jìn)行反應(yīng)來(lái)進(jìn)行制備。
或者，式(V)的化合物可以通過(guò)將式(X)的化合物與膦?；宜崾?丁基二乙基酯在存在氫化鈉的情況下在質(zhì)子惰性溶劑如THF中進(jìn)行反應(yīng)來(lái)獲得。
該反應(yīng)通常在0℃至室溫下進(jìn)行約1小時(shí)至高至12小時(shí)。用于將叔丁酯轉(zhuǎn)化成相應(yīng)羧酸的適宜去保護(hù)方法是現(xiàn)有技術(shù)中常用的這些方法。
式(X)的化合物可以通過(guò)將式(XI)的化合物與式(VII)的化合物在存在無(wú)機(jī)堿如KOH或NaOH的情況下在質(zhì)子溶劑如乙醇、甲醇或水中進(jìn)行反應(yīng)來(lái)獲得。
該反應(yīng)通常在0℃至室溫下進(jìn)行約1小時(shí)至高至12小時(shí)。用于將二甲基乙縮醛轉(zhuǎn)化成相應(yīng)醛的適宜去保護(hù)方法是現(xiàn)有技術(shù)中常用的這些方法，參見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)教科書(shū)如Greene，T.W.and Wuts，P.G.M.有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán)，John Wiley&Sons Inc.紐約，1991(Second Edt.)或Kocienski，P.J.Protecting groups.George Thieme Verlag，紐約，1994。
式(XI)的化合物可以通過(guò)將式(XII)的化合物與烷基鋰如正-丁基鋰在質(zhì)子惰性溶劑如THF中進(jìn)行反應(yīng)，然后加入DMF來(lái)進(jìn)行制備， 其中B是鹵素，特別是溴或碘。該反應(yīng)通常在-78℃至室溫下進(jìn)行約1小時(shí)至高至3小時(shí)。
式(XII)的化合物可以通過(guò)用現(xiàn)有技術(shù)中常用的這些適宜保護(hù)方法對(duì)相應(yīng)二甲基乙縮醛中的醛進(jìn)行轉(zhuǎn)化而由式(VIII)的化合物獲得。
或者，式(V)的化合物可以通過(guò)用與合成式(VI)的化合物所述的這些方法相似的經(jīng)典Heck條件將式(XIII)的化合物與丙烯酸叔丁酯進(jìn)行反應(yīng)來(lái)獲得，
其中B是鹵素，特別是溴或碘。該叔-丁酯的去保護(hù)是根據(jù)已知的標(biāo)準(zhǔn)方法來(lái)進(jìn)行的。
式(XIII)的化合物可以通過(guò)將式(VIII)的化合物與式(VII)的化合物在存在有機(jī)或無(wú)機(jī)堿如KOH或NaOH的情況下在質(zhì)子溶劑，如乙醇、甲醇或水中進(jìn)行反應(yīng)來(lái)進(jìn)行制備。該反應(yīng)通常在0℃至回流下進(jìn)行約1小時(shí)至36小時(shí)。
當(dāng)Ar是雜芳基時(shí)，式(IVa)的化合物是通過(guò)將式(XIV)的化合物與被保護(hù)的羥基胺(NH2OPG1)進(jìn)行反應(yīng)來(lái)獲得的。
可以用有機(jī)合成領(lǐng)域中已知的偶合劑如EDC(1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺)、DCC(N，N’-二環(huán)己基-碳二亞胺)或聚合物-支撐的偶合劑如聚合物-支撐的碳二亞胺(PS-DCC，ex ArgonautTechnologies)在存在適宜的堿如三乙胺、二異丙基乙基胺的情況下，在適宜的溶劑(例如四氫呋喃、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺)中來(lái)促進(jìn)所說(shuō)的偶合反應(yīng)。在該反應(yīng)混合物中通常還可以存在輔催化劑如HOBT(1-羥基-苯并三唑)、HOAT(1-羥基-7-氮雜苯并三唑)等。該反應(yīng)通常在室溫下進(jìn)行約2小時(shí)至高至12小時(shí)。
式(XIV)的化合物可以通過(guò)用與上述條件相同的條件將式(XV)的化合物與式(VII)的化合物進(jìn)行反應(yīng)來(lái)進(jìn)行制備。
叔丁酯的去保護(hù)可以根據(jù)已知的標(biāo)準(zhǔn)方法來(lái)進(jìn)行。
式(XV)的化合物可以通過(guò)將式(XVI)的化合物與膦?；宜崾?丁基二乙基酯在存在無(wú)機(jī)堿如氫化鈉的情況下在質(zhì)子惰性溶劑如THF中進(jìn)行反應(yīng)來(lái)進(jìn)行制備。
該反應(yīng)通常在0℃至室溫下進(jìn)行約1小時(shí)至高至12小時(shí)。用于將所說(shuō)的二甲基乙縮醛轉(zhuǎn)化成相應(yīng)醛的適宜方法是現(xiàn)有技術(shù)中常用的這些方法。
式(XVI)的化合物可以用與合成式(XI)的化合物所述方法相同的方法來(lái)進(jìn)行制備。
可以根據(jù)下面的合成路線來(lái)獲得式(Ib)的優(yōu)選化合物流程圖2 步驟a可以在存在磷酸鉀和醋酸鈀的情況下進(jìn)行。步驟b可以通過(guò)向位于醇性堿性環(huán)境中的正-丁基-3-甲?；夤鹚狨ブ屑尤脒m宜的苯乙酮來(lái)進(jìn)行。步驟c可以通過(guò)在現(xiàn)有技術(shù)中已知的標(biāo)準(zhǔn)肽偶合條件下用被保護(hù)的羥基胺對(duì)流程圖2中的羧酸衍生物進(jìn)行處理來(lái)進(jìn)行。對(duì)于式(Ic)的化合物而言，可以使用下面的合成路線流程圖3
步驟a和c可以在醇性堿性環(huán)境中進(jìn)行。步驟b可以在存在磷酸鉀和醋酸鈀的情況下進(jìn)行。步驟d可以通過(guò)將氯甲酸乙酯和三乙胺反應(yīng)，然后用O-(2-甲氧基-2-丙基)羥基胺進(jìn)行處理和對(duì)離子交換樹(shù)脂進(jìn)行洗脫來(lái)進(jìn)行。
可以通過(guò)類(lèi)似的反應(yīng)獲得式(Id)的化合物。
由于R1插入到Ar-和肉桂酰酰胺基團(tuán)之間，所以式(I)化合物的特征為電子共軛區(qū)域延伸一種式(I)中所示的中央芳族或雜芳族基團(tuán)所起的特殊作用，由于內(nèi)在的芳族特性，其使得可在該分子沿著從Ar向NHOR3基團(tuán)伸展的整個(gè)縱向軸上產(chǎn)生理想的共振度。
其賦予了所有式(I)化合物令人感興趣的藥理學(xué)性質(zhì)。實(shí)際上，其表現(xiàn)出高組蛋白脫乙酰基酶抑制活性，其IC50為1μM或更低。就各種細(xì)胞系而言，這種活性是廣譜的并且隨著時(shí)間的流逝一直都是穩(wěn)定的從治療應(yīng)用的角度來(lái)看，這兩種性質(zhì)都是理想的。式(I)的化合物在促進(jìn)細(xì)胞凋亡和抑制腫瘤細(xì)胞組中的細(xì)胞增殖方面也表現(xiàn)出有效的活性，其進(jìn)一步支持了這些化合物的抗腫瘤功效。
本發(fā)明包括用于治療，特別是用于治療與組蛋白脫乙?；甘д{(diào)有關(guān)的疾病的所述的式(I)的化合物。
本發(fā)明的另一個(gè)目標(biāo)是用于治療和預(yù)防與組蛋白脫乙?；富钚允Э赜嘘P(guān)的疾病的藥物組合物，其特征在于包含一種或多種式(I)的活性成分和可藥用的賦形劑和稀釋劑。
本發(fā)明的化合物與已知的抗腫瘤藥具有協(xié)同作用因此，上述藥物組合物還可包含已知的抗腫瘤劑和/或任何用于與抗腫瘤劑一起給藥的其它藥物(ad.es.免疫刺激化合物、細(xì)胞分化促進(jìn)劑等)。
本發(fā)明的化合物可以用常規(guī)方式來(lái)進(jìn)行給藥，例如其可以被口服、靜脈內(nèi)、皮下、經(jīng)粘膜(包括頰、舌下、經(jīng)尿道、和直腸)、局部、經(jīng)皮、吸入給藥或者可以用任何其它給藥途徑來(lái)進(jìn)行給藥。
可以用已知的方法來(lái)對(duì)式(I)的化合物進(jìn)行藥物制備?？梢愿鶕?jù)治療來(lái)對(duì)所說(shuō)的藥物組合物進(jìn)行選擇。所說(shuō)的組合物是通過(guò)將其成分進(jìn)行適宜混合來(lái)進(jìn)行制備的，并且其適于口服或胃腸外給藥；其可以被制備為片劑、膠囊、口服制劑、粉末、顆粒、錠劑、可再生的粉末、可注射的液體或可輸入的溶液、混懸液或栓劑形式。
用于口服給藥的片劑和膠囊通常以單元?jiǎng)┬偷男问酱嬖?，并且可以包含常?guī)賦形劑如粘合劑、填充劑、稀釋劑、制片劑、潤(rùn)滑劑、去污劑、崩解劑、染料、矯味劑和潤(rùn)濕劑?？梢杂矛F(xiàn)有技術(shù)中眾所周知的方法來(lái)對(duì)片劑進(jìn)行包衣。適宜的填充劑包括纖維素、甘露醇、乳糖以及其它相似物質(zhì)。適宜的崩解劑包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物如羥乙酸淀粉鈉。適宜的潤(rùn)滑劑包括例如硬脂酸鎂。適宜的潤(rùn)濕劑包括月桂基硫酸鈉。
適宜的口服組合物可以通過(guò)常規(guī)的混合、填充或壓制來(lái)進(jìn)行制備。可以重復(fù)進(jìn)行混合操作以將所說(shuō)的活性物質(zhì)分散于包含高含量填充劑的組合物中。這些操作都是常規(guī)的。
口服液體制劑可以被制備為例如水性或油性混懸液或溶液、乳劑、糖漿或酏劑的形式，或者可以以冷凍干燥產(chǎn)品的形式存在，可以通過(guò)在使用前加入水或適宜的基質(zhì)來(lái)將所說(shuō)的冷凍干燥產(chǎn)品重組。所說(shuō)的液體制劑可以包含常規(guī)添加劑如混懸劑，例如山梨醇、糖漿、甲基纖維素、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠或氫化可食用脂肪、乳化劑，例如卵磷脂、脫水山梨醇單油酸酯、或阿拉伯膠；非水性基質(zhì)(其可包括可食用油類(lèi))，例如杏仁油、分餾椰子油、油性酯類(lèi)如甘油酯類(lèi)、丙二醇、或乙醇；防腐劑，例如對(duì)-羥基苯甲酸甲酯或?qū)?羥基苯甲酸丙酯或山梨酸，和如果需要的話，還可包含常規(guī)矯味劑和染料。
口服制劑包括常規(guī)緩釋形式，如腸衣片或顆粒。
對(duì)于胃腸外給藥而言，可以制備包含所說(shuō)化合物和無(wú)菌基質(zhì)的液體劑量單位。根據(jù)所選擇的基質(zhì)和濃度，所說(shuō)的化合物可以被混懸或溶解。胃腸外溶液通常是通過(guò)將所說(shuō)的化合物溶解于基質(zhì)中、將其過(guò)濾滅菌、填充到適宜的小瓶中并對(duì)其進(jìn)行密封來(lái)進(jìn)行制備的。其還可有利地在所說(shuō)的基質(zhì)中溶解適宜的助劑如局部麻醉劑、防腐劑和緩沖劑。為了增加其穩(wěn)定性，在將所說(shuō)的組合物填充到小瓶中后將其冷凍并在真空下除去水。胃腸外混懸液是基本以相同的方式來(lái)進(jìn)行制備的，不同之處在于所說(shuō)的化合物被混懸而不是溶解于基質(zhì)中，并且可以通過(guò)在被混懸于無(wú)菌基質(zhì)中之前用氧化乙烯進(jìn)行處理來(lái)對(duì)其進(jìn)行滅菌。還可以有利地在所說(shuō)的組合物中包含表面活性劑或潤(rùn)濕劑以幫助本發(fā)明的化合物進(jìn)行均勻分布。
本發(fā)明的化合物還可以被局部給藥。局部制劑例如可以包括軟膏、乳霜、凝膠、洗劑、溶液、糊劑等，和/或可以被制備從而包含脂質(zhì)體、膠束和/或微球。正如在藥物制劑領(lǐng)域中眾所周知的那樣，軟膏是通常以礦脂或其它礦脂衍生物為基礎(chǔ)的半固體制劑。軟膏的實(shí)例包括leaginous軟膏基質(zhì)，例如，植物油、由動(dòng)物獲得的脂肪、和得自石油的半固體烴類(lèi)、可乳化的軟膏基質(zhì)，例如硫酸羥基硬脂精、無(wú)水羊毛脂和親水性礦脂、乳劑軟膏基質(zhì)，例如鯨蠟醇、甘油單硬脂酸酯、羊毛脂和硬脂酸以及由各種分子量的聚乙二醇制得的水溶性軟膏基質(zhì)。(見(jiàn)，例如Remington藥學(xué)科學(xué)和實(shí)踐(The Science and Practiceof Pharmacy)，第20版，Lippincott Williams & Willcins費(fèi)城，2000)。也是如本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的那樣，乳霜是粘性液體或半固體乳液，并且包含油相、乳化劑和水相。所說(shuō)的油相通常由礦脂和脂肪醇如鯨蠟醇或鯨蠟醇組成。其水相通常包含保濕劑。乳霜制劑中的乳化劑選自非離子、陰離子、陽(yáng)離子或兩性表面活性劑。單相凝膠包含被基本均勻分散在載體液體中的有機(jī)大分子，其典型地是水性的，但是還優(yōu)選地包含醇，并且任選地包含油。優(yōu)選的膠凝劑是交聯(lián)丙烯酸聚合物(如“卡波姆”聚合物，例如，可以以Carbopol的商標(biāo)通過(guò)商業(yè)途徑獲得的羧基聚亞烷基)。還優(yōu)選親水性聚合物如聚氧化乙烯類(lèi)物質(zhì)、聚氧化乙烯-聚氧化丙烯共聚物和聚乙烯醇；纖維素聚合物如羥丙基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素、和甲基纖維素；樹(shù)膠類(lèi)物質(zhì)如黃蓍膠和黃原膠；藻酸鈉；和明膠。為了制備均勻的凝膠，可以加入分散劑如醇或甘油，或者可以通過(guò)研磨、機(jī)械混合、和/或攪拌來(lái)對(duì)所說(shuō)的膠凝劑進(jìn)行分散。
本發(fā)明的化合物還可以通過(guò)經(jīng)皮釋放來(lái)進(jìn)行給藥。典型的經(jīng)皮制劑包括常規(guī)的水性和非水性載體，如乳霜、油類(lèi)、洗劑或糊劑，或者可以以膜或含藥硬膏劑的形式被提供。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物被分散于粘附到皮膚上的壓敏性硬膏劑中。這種制劑使得所說(shuō)的化合物可以從該硬膏劑通過(guò)皮膚向患者進(jìn)行擴(kuò)散。為了獲得通過(guò)皮膚進(jìn)行的藥物持續(xù)釋放，可以用天然橡膠和硅作為壓敏性膠粘劑。
正如通常所實(shí)踐的那樣，該組合物通常具有書(shū)寫(xiě)或印刷的用于相關(guān)治療的說(shuō)明。
本發(fā)明還包括所說(shuō)的式(I)的化合物在制備預(yù)防和/或治療與組蛋白脫乙酰基酶活性失控有關(guān)的疾病的藥物中的應(yīng)用。該類(lèi)疾病的實(shí)例有腫瘤疾病、由三聯(lián)擴(kuò)增造成的亨廷頓氏舞蹈病、變性疾病、局部缺血、氧化應(yīng)激、神經(jīng)系統(tǒng)的炎性響應(yīng)、癲癇、由蛋白聚集造成的疾病、HIV感染、瘧疾、利什曼病(leishmanioses)、由原生動(dòng)物、真菌、抑制植物生長(zhǎng)的物質(zhì)、病毒、寄生蟲(chóng)造成的感染、自身免疫性疾病、宿主定向的慢性免疫反應(yīng)、肥大和心臟病癥、纖維變性性皮膚疾病、肌肉性脊髓(muscular spinal)或延髓萎縮、雙相型精神障礙、精神病癥、X-疲勞綜合征、關(guān)節(jié)炎、腎病、牛皮癬、腸-結(jié)腸炎疾病、β地中海貧血、呼吸疾病、Rubinstein-Taybi綜合征。
對(duì)本發(fā)明的治療敏感的腫瘤的實(shí)例有白血病和骨髓以及淋巴組織淋巴瘤、急性和慢性myelodisplastic綜合征、多發(fā)性骨髓瘤、乳房腫瘤、肺部腫瘤和胸膜間皮瘤(pleuric mesoteliomas)、皮膚腫瘤，包括基底癌(基底細(xì)胞癌)、黑素瘤、骨肉瘤、纖維肉瘤、rabdomyosarcomas、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、腦腫瘤、睪丸和卵巢腫瘤、子宮內(nèi)膜和前列腺腫瘤、甲狀腺癌、結(jié)腸-直腸腫瘤、胃部腫瘤和胃腸腺癌、肝癌、胰腺癌、腎臟腫瘤、畸胎癌和胚胎癌。
本發(fā)明的另一個(gè)主題是一種預(yù)防和/或治療腫瘤的方法，其特征在于給需要其的患者使用藥理學(xué)有用數(shù)量式(I)的化合物。對(duì)于式(I)化合物的給藥而言，該類(lèi)應(yīng)用和方法可以包括具有已知活性的其它可能物質(zhì)和用于與所說(shuō)物質(zhì)在聯(lián)合治療中一起給藥的任何其它藥物的共同給藥、同時(shí)給藥或延遲給藥。
式(I)化合物的劑量將隨著患者以及其狀態(tài)、疾病的進(jìn)行程度、所選擇的給藥方式、所選擇的日給藥數(shù)目等來(lái)廣泛進(jìn)行變化。作為參考，其可以以0.001至1000mg/Kg/天的劑量區(qū)間來(lái)進(jìn)行給藥。
在這里，用下面的非限制性實(shí)例來(lái)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行描述。
實(shí)驗(yàn)部分1.化學(xué)方法除非特別說(shuō)明，否則所有的起始物質(zhì)都是從商業(yè)供應(yīng)商那里獲得的并且可以在不進(jìn)行進(jìn)一步純化的情況下進(jìn)行應(yīng)用。
具體而言，在所說(shuō)的實(shí)施例和本說(shuō)明書(shū)中，可以使用下面的縮寫(xiě)。

在涉及鹽水時(shí)，其都指的是NaCl的飽和水溶液。除非特別說(shuō)明，否則所有的溫度都是以℃(℃)為單位進(jìn)行表達(dá)的。
1H-NMR光譜是在Brucker 300MHz上進(jìn)行記錄的。化學(xué)位移是以百萬(wàn)份(ppm，δ單位)為單位進(jìn)行表達(dá)的。偶合常數(shù)的單位為赫茲(Hz)。分裂方式描述了表觀多重性并且被稱(chēng)為s(單峰)、d(雙重峰)、t(三重峰)、q(四重峰)、quint(五重峰)、m(多重峰)。位于各種符號(hào)前面的b表示寬。
熔點(diǎn)是在Büchi 530測(cè)量?jī)x上進(jìn)行測(cè)量的。紅外光譜(KBr)是在Perkin-Elmer Spectrum One儀上獲得的。質(zhì)譜(MS)是在JEOL JMS-HX100分光計(jì)上獲得的。
LCMS是在下面的條件下進(jìn)行記錄的
方法A泵1525，2777樣品管理器，PDA 996，Micromass ZQSingle quadrupole(Waters)。Column Sunfire C18(50×2.1mm，3.5μm)；流速0.25ml/min 分裂比 MS∶waste/1∶4；流動(dòng)相A相＝水/CH3CN 95/5+0.1％ TFA；B相＝水/CH3CN 5/95+0.1％TFA。0-1.0min(A98％，B2％)，1.0-5.0min(A0％，B100％)，5.0-9.0min(A0％，B100％)，9.1.0-12min(A98％，B2％)；UV檢測(cè)波長(zhǎng)254nm或BPI；注射體積5μl方法B泵1525，2777樣品管理器，PDA 996，Micromass ZQSingle quadrupole(Waters)。Column Luna C18(30×2.1mm，3μm)；流速0.25ml/min 分裂比 MS∶waste/1∶4；流動(dòng)相A相＝水/CH3CN 95/5+0.1％TFA；B相＝水/CH3CN 5/95+0.1％TFA。0-1.0min(A98％，B2％)，1.0-5.0min(A0％，B100％)，5.0-9.0min(A0％，B100％)，9.1.0-12min(A98％，B2％)；UV檢測(cè)波長(zhǎng)254nm或BPI；注射體積5μl方法C泵1525，2777樣品管理器，PDA 996，Micromass ZQSingle quadrupole(Waters)。Column XTerra C18(50×2.1mm，2.5μm)；流速0.25ml/min 分裂比 MS∶waste/1∶4；流動(dòng)相A相＝水/CH3CN 95/5+0.1％TFA；B相＝水/CH3CN 5/95+0.1％TFA。0-1.0min(A98％，B2％)，1.0-5.0min(A0％，B100％)，5.0-9.0min(A0％，B100％)，9.1.0-12min(A98％，B2％)；UV檢測(cè)波長(zhǎng)254nm或BPI；注射體積5μl方法D泵1525，2777樣品管理器，PDA 996，Micromass ZQSingle quadrupole(Waters)。Column Atlantis dC18(100×2.1mm，3μm)；流速0.25ml/min 分裂比 MS∶waste/1∶4；流動(dòng)相A相＝水/CH3CN 95/5+0.1％TFA；B相＝水/CH3CN 5/95+0.1％TFA。0-1.0min(A98％，B2％)，1.0-5.0min(A0％，B100％)，5.0-9.0min(A0％，B100％)，9.1.0-12min(A98％，B2％)；UV檢測(cè)波長(zhǎng)254nm或BPI；注射體積5μl
方法E泵1525，2777樣品管理器，PDA 996，Micromass ZQSingle quadrupole(Waters)。Column Disc.HS F5 C18(50×2.1mm，3μm)；流速0.25ml/min 分裂比 MS∶waste/1∶4；流動(dòng)相A相＝水/CH3CN 95/5+0.1％TFA；B相＝水/CH3CN 5/95+0.1％TFA。0-1.0min(A98％，B2％)，1.0-5.0min(A0％，B100％)，5.0-9.0min(A0％，B100％)，9.1.0-12min(A98％，B2％)；UV檢測(cè)波長(zhǎng)254nm或BPI；注射體積5μl方法F泵1525，2777樣品管理器，PDA 996，Micromass ZQSingle quadrupole(Waters)。SunFire C18(50×2.1mm，3.5μm)；流速0.25ml/min 分裂比 MS∶waste/1∶4；流動(dòng)相A相＝HCOO-NH4+pH＝8/MeOH/CH3CN 85/10//5；B相＝HCOO-NH4+pH＝8/MeOH/CH3CN 5/10/85。0-1.0min(A98％，B2％)，1.0-5.0min(A0％，B100％)，5.0-9.0min(A0％，B100％)，9.1.0-12min(A98％，B2％)；UV檢測(cè)波長(zhǎng)254nm或BPI；注射體積5μl所有的質(zhì)譜都是在電噴射離子化(ESI)方法下獲得的。
大多數(shù)反應(yīng)都是用薄層色譜進(jìn)行監(jiān)測(cè)的，所說(shuō)的薄層色譜是在0.2mm Merck硅膠板(60F-254)上進(jìn)行的，用UV線進(jìn)行目測(cè)檢驗(yàn)。閃柱色譜是在硅膠60(0.04-0.063mm)Merck上進(jìn)行的。
4-甲?；夤鹚嵋阴サ暮铣善涫歉鶕?jù)Saigo等人，Bull.Chem.Soc.Jpn.，1995，68，2355-2362來(lái)進(jìn)行合成的。
3-甲?；夤鹚嵴?丁基酯的合成將-根10mL的Schenk試管在烘箱中干燥并在N2下向其中加入K3PO4(2.37g，11.16mmol)和DMA(2.0mL)。然后，用注射器向其中加入3-碘benzaldeide(1.85g，7.97mmol)和丙烯酸正-丁酯(2.28mL，15.94mmol)。再通過(guò)注射器向其中加入Pd(OAc)2(0.18g，0.797mmol)在DMA(0.5mL)中的溶液。然后，將該Schlenk試管在氮?dú)庀旅芊獠⑵浞胖玫皆?40℃下預(yù)熱了的油浴中，并將該反應(yīng)混合物攪拌24h。在將其冷卻至室溫后，將該反應(yīng)混合物傾倒到水(50mL)中并用乙酸乙酯(3×50mL)對(duì)其進(jìn)行萃取。將所合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，并將其真空濃縮至干燥。將該粗品用硅膠柱色譜進(jìn)行純化，用正-己烷/乙酸乙酯/甲醇12/3/1進(jìn)行洗脫(收率47％)。1HNMR(CDCl3)δ0.91-0.96(t，3H，OCH2CH2CH2CH3)，1.39-1.42(m，2H，OCH2CH2CH2CH3)，1.65-1.68(m，2H，OCH2CH2CH2CH3)，4.17-4.21(m，2H，OCH2CH2CH2CH3)，6.48-6.53(d，1H，ArCH＝CHCO)，7.52-7.54(m，1H，苯H-5)，7.53-7.75(m，2H，ArCH＝CHCO和苯H-6)，7.84-7.86(m，1H，苯H-4)，7.99(m，1H，苯H-2)，10.01(s，1H，CHO)。
流程圖3中所示的4-肉桂?；夤鹚嵴?丁基酯是用相似的方法制得的。
用于合成3-和4-取代的肉桂酸的一般方法實(shí)施例3-[3-[3-(3-氟苯基)-3-氧代丙-1-基]苯丙烯酸的合成。
將正-丁基-4-甲?；夤鹚狨?6.0mmol，1.40g)、3-氟苯乙酮(6.0mmol，0.93g)、和KOH 2N(24.0mmol，12.4mL)在乙醇(15mL)/水(15mL)中的混合物在室溫下攪拌24h。其后，將該溶液傾倒到水(100mL)中并用HCl 2N對(duì)其進(jìn)行酸化。將由此獲得的沉淀濾出并將其重結(jié)晶，得到其純酸。收率72％；mp157-159℃，重結(jié)晶溶劑乙腈。1H NMR(DMSO-d6)δ6.69-6.73(d，1H，CH＝CHCOOH)，7.48-7.54(m，2H，苯H)，7.61-7.65(m，2H，苯H和COCH＝CH)，7.74-7.80(m，2H，苯H和COCH＝CH)，7.88-7.90(m，1H，苯H)，8.02-8.06(m，3H，苯H和CH＝CHCOOH)，8.31(s，1H，苯H)，12.50(bs，1H，OH)。
流程圖3中所示的4-溴苯基-2-苯基乙烯基酮是用相似的方法來(lái)進(jìn)行制備的。
用于合成3-和4-取代的N-羥基肉桂酰胺的一般方法實(shí)施例N-羥基-3-[3-[3-(3-氟苯基)-3-氧代丙-1-基]苯丙烯酰胺的合成。
將冷卻了的(0℃)3-[3-[3-(3-氟苯基)-3-氧代丙-1-基]苯丙烯酸(4.2mmol，1.2g)在無(wú)水THF(10mL)中的溶液加入到氯甲酸乙酯(5.0mmol，0.5mL)和三乙胺(5.4mmol，0.8mL)中并將該混合物攪拌10分鐘。將該反應(yīng)混合物過(guò)濾并將該濾液加入到O-(2-甲氧基-2-丙基)羥基胺(4.71mmol，0.35mL)中(Tetrahedron 1988，44，6013-20)。將該溶液在0℃下攪拌15分鐘，然后將其減壓蒸發(fā)，將殘余物用甲醇(10mL)稀釋。將該O-保護(hù)的異羥肟酸酯溶液加入到Amberlyst15離子交換樹(shù)脂(0.3g)中，并將所得的混合物在45℃下攪拌1h。其后，將該反應(yīng)混合物過(guò)濾并將濾液真空濃縮，得到N-羥基酰胺粗品，然后，通過(guò)結(jié)晶對(duì)其進(jìn)行純化。收率74％；mp166-168℃，重結(jié)晶溶劑乙腈。1H NMR(DMSO-d6)δ6.54-6.58(d，1H，CH＝CHCOOH)，7.48-7.56(m，3H，苯H)，7.62-7.66(m，2H，苯H)，7.76-7.80(m，1H，COCH＝CH)，7.87-7.89(m，1H，苯H)，7.96-8.03(m，3H，苯H，COCH＝CH和CH＝CHCOOH)，8.15(s，1H，苯H)，9.07(s，1H，NH)，10.80(s，1H，OH)。
按照上述一般操作合成了許多化合物，在表1中報(bào)告了其結(jié)構(gòu)和合成數(shù)據(jù)。
表1






實(shí)施例13-[3-氟-4-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺

步驟A將4-溴-2-氟苯甲醛(2g，9.9mmol)在DMF(50ml)和三乙胺(6ml)中的溶液用N2充溢脫氣30min。向其中加入PPh3(130mg，0.459mmol)、Pd(OAc)2(44.3mg，0.20mmol)、NaHCO3(1.6g，18.6mmol)和丙烯酸叔-丁酯(1.27g，9.9mmol)并將所得的混合物加熱回流4h。再向其中加入一些丙烯酸叔-丁酯(633mg)和Pd(OAc)2(20mg)并將該混合物在100℃下攪拌3h，然后將該溶液用H2O稀釋并用Et2O進(jìn)行萃取。將有機(jī)層用Na2SO4干燥并在真空下蒸發(fā)掉溶劑，得到粗品，將其用膠柱色譜進(jìn)行純化(石油醚/EtOAc 95∶5)。所收集的級(jí)分得到2g 3-(3-氟-4-甲?；?苯基)-丙烯酸叔-丁酯。
收率80％步驟B將3-(3-氟-4-甲?；?苯基)-丙烯酸叔-丁酯(2g，8mmol)溶解于DCM(23ml)和三氟醋酸(6ml)中。將該混合物在室溫下攪拌6h，然后將其在真空下蒸發(fā)掉溶劑，得到1.62g 3-(3-氟-4-甲酰基-苯基)-丙烯酸收率定量步驟C將3-(3-氟-4-甲?；?苯基)-丙烯酸(500mg，2.57mmol)溶解于乙醇/水(1∶1，10ml)和1.7M KOH(3ml)中。向所得的溶液中加入苯乙酮(0.3ml，2.57mmol)。將該混合物在室溫下攪拌一整夜，然后用10％HCl酸化并用EtOAc對(duì)其進(jìn)行萃取。將有機(jī)層用Na2SO4干燥，并在真空下蒸發(fā)掉溶劑。將該粗品在EtOAc中進(jìn)行研磨，過(guò)濾，得到560mg3-[3-氟-4-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-苯基]-丙烯酸。
收率73％步驟D將3-[3-氟-4-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-苯基]-丙烯酸(450mg，1.52mmol)溶解于THF(10ml)和DMF(1ml)中。向所得的溶液中加入HOBT(413mg，3.04mmol)、EDC(580mg，3.04mmol)、TEA(0.423ml，3.04mmol)和NH2OTHP(213mg，1.82mmol)。將該混合物在RT下攪拌一整夜，然后在水和EtOAc之間進(jìn)行分配。將該有機(jī)萃取物用水進(jìn)行洗滌，然后用Na2SO4干燥并將其真空蒸發(fā)。
將該粗品用硅膠色譜進(jìn)行純化(石油醚/EtOAc 1∶1)并將所得的油狀物溶解于DCM中和用HCl/Et2O處理1h。將沉淀過(guò)濾在Buckner漏斗上并用DCM/MeOH進(jìn)行洗滌，得到200mg 3-[3-氟-4-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺。
LC-MS法＝B RT＝6.01；(ES+)給出的MH+312.2
1H-NMR(DMSO-d6，)10.84(s br，1H)；9.07(s br，1H)；8.15(m，3H)；8.00(d，1H)；7.81(d，1H)；7.69(ddd，1H)；7.63-7.52(m，4H)；7.48(d，1H)；6.60(d，1H)。
表2中的化合物是根據(jù)上面所述的方法來(lái)進(jìn)行制備的(當(dāng)其中間體可以通過(guò)商業(yè)途徑獲得時(shí)，步驟A-D或C-D)。
表2







實(shí)施例493-{4-[3-(3，4-二氟-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺

步驟A將4-溴苯甲醛(2g，10.8mmol)在DMF(50ml)和三乙胺(3.4ml，27mmol)中的溶液用N2充溢脫氣30min。向其中加入PPh3(141mg，0.54mmol)、Pd(OAc)2(48.4mg，0.21mmol)、NaHCO3(1.84g，21.6mmol)和丙烯酸叔-丁酯(1.58ml，10.8mmol)并將所得的混合物加熱回流3h。再向其中加入一些Pd(OAc)2(24mg)并將該混合物加熱至100℃加熱1h。將該溶液用H2O稀釋并用Et2O進(jìn)行萃取。將有機(jī)層用Na2SO4干燥并在真空下蒸發(fā)掉溶劑，得到粗品，將其用異丙醚研磨，得到1.6g3-(4-甲?；?苯基)-丙烯酸叔-丁酯。
收率70％步驟B將3-(4-甲?；?苯基)-丙烯酸叔-丁酯(150mg，0.64mmol)和KOH(72mg，1.28mmol))溶解于乙醇/水(1∶1，5ml)中并向所得的溶液中加入3，4-二氟苯乙酮(83.2μl，0.64mmol)。將所得的混合物在室溫下攪拌一整夜，然后用H2O對(duì)其進(jìn)行稀釋。將該沉淀濾出并將其真空干燥，得到210mg 3-{4-[3-(3，4-二氟-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-丙烯酸叔-丁酯。
收率88％。
步驟C將3-{4-[3-(3，4-二氟-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-丙烯酸叔-丁酯(210mg，0.56mmol)溶解于DCM(5ml)中并向其中加入三氟醋酸(2ml)。將該反應(yīng)在室溫下攪拌12h。在真空下蒸發(fā)掉溶劑，得到200mg 3-{4-[3-(3，4-二氟-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-丙烯酸。
收率定量的步驟D將3-{4-[3-(3，4-二氟-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-丙烯酸(100mg，0.32mmol)溶解于DCM(10ml)中。向所得的溶液中加入HOBT(72mg，0.44mmol)、EDC(91mg，0.44mmol)、TEA(129μl，0.96mmol)和NH2OTHP(55mg，0.32mmol)。將該混合物在室溫下攪拌一整夜，然后將其在水和EtOAc之間進(jìn)行分配。將該有機(jī)萃取物用水洗滌，然后用Na2SO4干燥并將其真空蒸發(fā)。
將該粗品用硅膠色譜進(jìn)行純化(石油醚/EtOAc 8∶2)并將所得的油狀物溶解于DCM中，用HCl/Et2O處理1h。將沉淀過(guò)濾到Buckner漏斗上并將其真空干燥，得到40mg 3-{4-[3-(3，4-二氟-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺。
收率40％LC-MS法＝B RT＝6.29；(ES+)給出的MH+330.11H-NMR(DMSO-d6，)δ10.72(s br，1H)；9.16(s br，1H)；8.25(ddd，1H)；8.08(m，1H)；7.98(d，1H)；7.95(d，2H)；7.77(d，1H)；7.70-7.60(m，3H)；7.49(d，1H)；6.57(d，1H)表3中所列的化合物是根據(jù)上面所述的方法來(lái)進(jìn)行制備的。
表3


實(shí)施例60N-羥基-3-[2-甲氧基-4-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-苯基]-丙烯酰胺 步驟A將4-溴-2-甲氧基苯甲醛(1g，4.67mmol)溶解于MeOH(20ml)中并向所得的溶液中加入原甲酸三甲酯(562μl，5.139mmol)和對(duì)-甲苯磺酸單水合物(89mg，0.467mmol)。將該混合物在室溫下攪拌一整夜，然后在真空下除去溶劑。將殘余物用Et2O吸收并用5％Na2CO3和用水進(jìn)行洗滌。將有機(jī)相用Na2SO4干燥，蒸發(fā)，得到1.22g無(wú)色油狀物形式的4-溴-1-二甲氧基甲基-2-甲氧基-苯。
收率＝99％步驟B將4-溴-1-二甲氧基甲基-2-甲氧基-苯(1.22g，4.67mmol)溶解于無(wú)水THF(16ml)中并將所得的溶液在N2氣氣氛下冷卻至-78℃。向其中滴加位于己烷中的正-BuLi(2.24ml 2.5M溶液)并將該混合物在-78℃下攪拌20分鐘，然后用DMF(467μl，6.07mmol)處理并將其在室溫下攪拌0.5h。
將該溶液在Et2O和水之間進(jìn)行分配并將該有機(jī)萃取物用水和鹽水進(jìn)行洗滌，然后用Na2SO4干燥并將其真空蒸發(fā)。用硅膠閃柱色譜分離出716mg 4-二甲氧基甲基-3-甲氧基-苯甲醛(EtOAc/石油醚1∶6)。
收率＝72％步驟C將4-二甲氧基甲基-3-甲氧基-苯甲醛(716mg，3.41mmol)溶解于EtOH/H2O(1∶1，20ml)中并向所得的溶液中加入苯乙酮(409mg，3.41mmol)和1.7M KOH(3ml)。
將該混合物在室溫下攪拌5h，然后用EtOAc稀釋和用水洗滌兩次。將有機(jī)相用Na2SO4干燥并將其真空蒸發(fā)。將所得的油狀物溶解于THF(10ml)中并用1N HCl(10ml)進(jìn)行處理。將該溶液在室溫下攪拌0.5h，然后用EtOAc稀釋和用水對(duì)其進(jìn)行洗滌。將有機(jī)相用Na2SO4干燥并將其真空濃縮。將所得的固體用EtOAc研磨并用Buckner漏斗對(duì)其進(jìn)行過(guò)濾，得到550mg黃色粉末形式的2-甲氧基-4-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-苯甲醛。
收率＝61％步驟D將2-甲氧基-4-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-苯甲醛(550mg，2.07mmol)溶解于THF(5ml)中并將所得的溶液加入到進(jìn)行著攪拌的二乙基膦?；宜崾?丁酯(603mg，2.27mmol)和NaH(107mg，2.69mmol，60％油分散體)在THF(5ml)中的混合物中。在15分鐘后，通過(guò)加入水將該反應(yīng)淬熄并將其在水和EtOAc之間進(jìn)行分配。將該有機(jī)萃取物用Na2SO4干燥并將其真空蒸發(fā)，得到一種粗品，將其用硅膠色譜進(jìn)行純化(EtOAc/石油醚1∶6)。所收集的級(jí)分得到635mg黃色油狀物形式的3-[2-甲氧基-4-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-苯基]-丙烯酸叔-丁酯。
收率＝84％步驟E將3-[2-甲氧基-4-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-苯基]-丙烯酸叔-丁酯(635mg，1.74mmol)溶解于DCM(12ml)中并向所得的溶液中加入TFA(3ml)。在將其在室溫下攪拌2h后，在真空下除去溶劑，得到541mg黃色粉末形式的3-[2-甲氧基-4-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-苯基]-丙烯酸。
收率＝99％步驟F將3-[2-甲氧基-4-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-苯基]-丙烯酸(200mg，0.65mmol)溶解于THF(6ml)中并向所得的溶液中加入HOBT(196mg，1.30mmol)、EDC(248mg，1.30mmol)、TEA(182μl，1.30mmol)和NH2OTHP(91mg，0.78mmol)。將該混合物在室溫下攪拌一整夜，然后將其在水和EtOAc之間進(jìn)行分配。將該有機(jī)萃取物用水洗滌3次，用Na2SO4干燥并將其真空蒸發(fā)。將該粗品用硅膠色譜進(jìn)行純化(EtOAc/石油醚1∶1)并將所得的固體溶解于DCM中，用HCl/Et2O處理15分鐘。將沉淀過(guò)濾到Buckner漏斗上，得到118mg N-羥基-3-[2-甲氧基-4-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-苯基]-丙烯酰胺。
收率＝56％LC-MS法＝A RT＝7.42；(ES+)給出的MH+324.11H-NMR(DMSO-d6，)δ8.16(d，2H)；7.98(d，1H)；7.74(d，1H)；7.68(m，2H)；7.63-7.54(m，4H)；7.49(d，1H)；7.60(d，1H)；3.97(s，3H)。
表4中所列的化合物是根據(jù)上面所述的方法來(lái)進(jìn)行制備的。
表4.
實(shí)施例63N-羥基-3-[4-(3-氧代-3-吡啶-3-基-丙烯基)-苯基]-丙烯酰胺 步驟A
將4-溴苯甲醛(1g，5.40mmol)溶解于MeOH(26ml)和2MNaOH(5.4ml)中。將所得的溶液冷卻至0℃并向其中滴加3-乙酰基-吡啶(592μl，5.40mmol)。將該混合物在0℃下攪拌1h，然后，將所得的固體濾出，用MeOH進(jìn)行洗滌，得到832mg白色粉末形式的3-(4-溴-苯基)-1-吡啶-3-基-丙烯酮。
收率＝53％步驟B將3-(4-溴-苯基)-1-吡啶-3-基-丙烯酮(823mg，2.87mmol)溶解于DMF(18ml)和TEA(1.9ml)中并將所得的溶液用N2充溢脫氣20min。
向該混合物中加入NaHCO3(481mg，5.73mmol)、PPh3(37.5mg，0.14mmol)、Pd(OAc)2(13mg，0.06mmol)、丙烯酸叔-丁酯(420μl，2.87mmol)并將該反應(yīng)加熱至100℃加熱5h。將所得的褐色溶液在水和Et2O之間進(jìn)行分配并將該有機(jī)萃取物用水進(jìn)行洗滌，用Na2SO4干燥并將其真空蒸發(fā)，得到粗品，將其用硅膠色譜進(jìn)行純化(石油醚/EtOAc 1∶1)。所收集的級(jí)分給出680mg 3-[4-(3-氧代-3-吡啶-3-基-丙烯基)-苯基]-丙烯酸叔-丁酯。
收率＝70％步驟C將3-[4-(3-氧代-3-吡啶-3-基-丙烯基)-苯基]-丙烯酸叔-丁酯(680mg，2.03mmol)溶解于DCM(15ml)和TFA(5ml)中。將所得的溶液在室溫下攪拌4h，然后在真空下除去溶劑，得到600mg三氟醋酸鹽形式的3-[4-(3-氧代-3-吡啶-3-基-丙烯基)-苯基]-丙烯酸。
收率＝75％步驟D將3-[4-(3-氧代-3-吡啶-3-基-丙烯基)-苯基]-丙烯酸三氟醋酸鹽(550mg，1.4mmol)溶解于THF/DMF(1∶1，20ml)中并向所得的溶液中加入HOBT(536mg，3.94mmol)、EDC(752mg，3.94mmol)、TEA(822μl，3.94mmol)和NH2OTHP(276mg，2.36mmol)。將該混合物在室溫下攪拌一整夜。然后將其在水和EtOAc之間進(jìn)行分配。將該有機(jī)萃取物用水和鹽水洗滌，然后用Na2SO4干燥并將其真空蒸發(fā)。
將該粗品用硅膠色譜進(jìn)行純化(EtOAc)并將所得的油狀物溶解于DCM中，用HCl/Et2O處理1h。將沉淀過(guò)濾到Buckner漏斗上并將其在熱EtOH中進(jìn)行研磨，得到380mg鹽酸鹽形式的N-羥基-3-[4-(3-氧代-3-吡啶-3-基-丙烯基)-苯基]-丙烯酰胺。
收率＝82％LC-MS法＝B RT＝4.99；(ES+)給出的MH+295.11H-NMR(DMSO-d6，)δ9.43(d，1H)；8.93(dd，1H)；8.69(ddd，1H)；8.01(d，1H)；7.96(d，2H)；7.82(d，1H)；7.81(m，1H)；7.67(d，2H)；7.49(d，1H)；6.59(d，1H)表5中所列的化合物是根據(jù)上面所述的方法來(lái)進(jìn)行制備的。
表5
實(shí)施例683-[3-氟-4-(3-氧代-3-吡啶-3-基-丙烯基)-苯基]-N-羥丙烯酰胺(hydroxacrylamide) 步驟A將4-溴-2-氟代苯甲醛(988mg，4.86mmol)和3-乙?；?吡啶(533μl，4.86mmol)溶解于EtOH(10ml)和TEA(10.8ml)中。將所得的溶液加熱回流16h，然后再向其中加入一些TEA(5ml)。將該混合物加熱回流16h，然后在真空下除去溶劑并將殘余物吸收于水和EtOAc中。將該有機(jī)萃取物用Na2SO4干燥并對(duì)其進(jìn)行蒸發(fā)。將所得的固體用異丙醚進(jìn)行研磨并將且過(guò)濾到buckner漏斗上，得到680mg黃色粉末形式的3-(4-溴-2-氟-苯基)-1-吡啶-3-基-丙烯酮。
收率＝45％步驟B將3-(4-溴-苯基)-1-吡啶-3-基-丙烯酮(668mg，2.18mmol)溶解于DMF(11ml)和TEA(1.3ml)中并將所得的溶液用N2充溢脫氣20min。
向該混合物中加入NaHCO3(366mg，4.37mmol)、PPh3(28.5mg，0.11mmol)、Pd(OAc)2(10mg，0.044mmol)、丙烯酸叔-丁酯(352μl，2.40mmol)并將該反應(yīng)加熱至100℃加熱5h。將所得的褐色溶液在水和Et2O之間進(jìn)行分配并將該有機(jī)萃取物用水進(jìn)行洗滌，用Na2SO4干燥并將其真空蒸發(fā)，得到粗品，將其用硅膠色譜進(jìn)行純化(石油醚/EtOAc 7∶3)。所收集的級(jí)分給出550mg 3-[3-氟-4-(3-氧代-3-吡啶-3-基-丙烯基)-苯基]-丙烯酸叔-丁酯。
收率＝71％步驟C將3-[3-氟-4-(3-氧代-3-吡啶-3-基-丙烯基)-苯基]-丙烯酸叔-丁酯(550mg，1.55mmol)溶解于DCM(15ml)和TFA(5ml)中。將所得的溶液在RT下攪拌4h，然后在真空下除去溶劑，得到636mg三氟醋酸鹽形式的3-[3-氟-4-(3-氧代-3-吡啶-3-基-丙烯基)-苯基]-丙烯酸。
收率＝定量的步驟D將3-[3-氟-4-(3-氧代-3-吡啶-3-基-丙烯基)-苯基]-丙烯酸三氟醋酸鹽(300mg，0.64mmol)溶解于THF(5ml)和DMF(2ml)中。向所得的溶液中加入HOBT(174mg，1.28mmol)、EDC(245mg，1.28mmol)、TEA(178μl，1.28mmol)和NH2OTHP(90mg，0.77mmol)。將該混合物在室溫下攪拌6h，然后將其在水和EtOAc之間進(jìn)行分配。將該有機(jī)萃取物用水、鹽水進(jìn)行洗滌，用Na2SO4干燥并將其真空蒸發(fā)。
將該粗品在EtOAc中進(jìn)行研磨，將其過(guò)濾到Bucker漏斗上并將所得的固體溶解于DCM中，用HCl/Et2O處理3h。將沉淀濾出，得到150mg鹽酸鹽形式的3-[3-氟-4-(3-氧代-3-吡啶-3-基-丙烯基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺。
收率＝67％LC-MS方法＝A RT＝5.23；(ES+)給出的MH+313.11H-NMR(DMSO-d6，)δ9.40(d，1H)；8.92(dd，1H)；8.63(ddd，1H)；8.20(dd，1H)；8.05(d，1H)；7.87(d，1H)；7.77(dd，1H)；7.55(m，2H)；7.48(d，1H)；6.63(d，1H)。
實(shí)施例69N-羥基-3-[5-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-吡啶-2-基]-丙烯酰胺 步驟A將原甲酸三甲酯(643μl，5.9mmol)和對(duì)-甲苯磺酸單水合物(102mg，0.54mmol)加入到溶解于MeOH(40ml)中的6-溴-吡啶-3-甲醛(1g，5.37mmol)。將該混合物在室溫下攪拌24h，然后將其在水和Et2O之間進(jìn)行分配。將該有機(jī)萃取物用水、5％Na2CO3洗滌，用Na2SO4干燥并將其真空蒸發(fā)，得到1.2g褐色油狀物形式的2-溴-5-二甲氧基甲基-吡啶。
收率＝99％步驟B將2-溴-5-二甲氧基甲基-吡啶(503mg，2.13mmol)溶解于無(wú)水THF(20ml)中并將所得的溶液在N2氣氣氛下冷卻至-70℃。向其中滴加2.5M正-BuLi在己烷中的溶液(0.94ml)并將該混合物在-70℃下攪拌15分鐘，然后用DMF(245μl，3.19mmol)對(duì)其進(jìn)行處理。在30分鐘后，使其溫度達(dá)到RT并將該混合物在水和Et2O之間進(jìn)行分配。將該有機(jī)萃取物用Na2SO4干燥并將其真空蒸發(fā)。將該粗品用色譜柱進(jìn)行純化(石油醚/EtOAc 7∶3)，得到206mg 5-二甲氧基甲基-吡啶-2-甲醛。
收率＝44％步驟C將5-二甲氧基甲基-吡啶-2-甲醛(355mg，1.97mmol)溶解于THF(10ml)中并將所得的溶液加入到進(jìn)行著攪拌的二乙基膦?；宜崾?丁酯(547mg，2.169mmol)和NaH(102mg，2.56mmol，60％油分散體)在THF(5ml)中的混合物中。在15分鐘后，通過(guò)加入水將該反應(yīng)淬熄并將所得的結(jié)晶漿液用Et2O進(jìn)行萃取。將有機(jī)相用Na2SO4干燥并將其真空蒸發(fā)。將該粗品用硅膠色譜進(jìn)行純化(石油醚/EtOAc 95∶5)，得到491mg 3-(5-二甲氧基甲基-吡啶-2-基)-丙烯酸叔-丁酯。
收率＝89％步驟D將3-(5-二甲氧基甲基-吡啶-2-基)-丙烯酸叔-丁酯(491mg，1.76mmol)溶解于THF(20ml)和1N HCl(7ml)中。
將所得的溶液攪拌4h。向其中加入水(1ml)和10％HCl(1ml)。將該混合物攪拌一整夜，然后用20％NaOH將其堿化至pH＝10并用EtOAc對(duì)其進(jìn)行萃取。將有機(jī)相用Na2SO4干燥并將其真空蒸發(fā)，得到固體形式的3-(5-甲?；?吡啶-2-基)-丙烯酸叔-丁酯。
收率＝88％步驟E將3-(5-甲?；?吡啶-2-基)-丙烯酸叔-丁酯(364mg，1.56mmol)溶解于MeOH(10ml)中并將該溶液冷卻至0℃。向其中加入苯乙酮(188mg，1.56mmol)和1.7M KOH(1.8ml)。將該反應(yīng)在0℃下攪拌3h。將所得的固體過(guò)濾到Buckner漏斗上，得到130mg黃色粉末形式的3-[5-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-吡啶-2-基]-丙烯酸叔-丁酯。
收率＝25％步驟F將3-[5-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-吡啶-2-基]-丙烯酸叔-丁酯(130mg，0.38mmol)溶解于DCM(4ml)和TFA(1ml)中。將所得的溶液在室溫下攪拌4h，然后在真空下除去溶劑。將所得的油狀物用Et2O結(jié)晶，得到165mg三氟醋酸鹽形式的3-[5-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-吡啶-2-基]-丙烯酸。
收率＝定量的步驟G將HOBT(133mg，0.98mmol)、EDC(187mg，0.98mmol)、TEA(148mg，1.47mmol)和NH2OTHP(68.8mg，0.59mmol)加入到溶解于THF/DMF(1∶1，10ml)中的3-[5-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-吡啶-2-基]-丙烯酸三氟醋酸鹽(193mg，0.49mmol)中。將該混合物在室溫下攪拌6h，然后將其在水和Et2O之間進(jìn)行分配。將該有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，用Na2SO4干燥并將其真空蒸發(fā)。
將該粗品用硅膠色譜進(jìn)行純化(石油醚/EtOAc 4∶6)并將所得的油狀物溶解于DCM中，用HCl/Et2O處理1.5h。將沉淀過(guò)濾到Buckner漏斗上，用DCM和Et2O進(jìn)行洗滌，得到55mg鹽酸鹽形式的N-羥基-3-[5-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-吡啶-2-基]-丙烯酰胺。
收率＝33％LC-MS法＝B RT＝5.58；(ES+)給出的MH+295.21H-NMR(DMSO-d6，)δ9.06(d，1H)；8.45(dd，1H)；8.18(d，2H)；8.11(d，1H)；7.78(d，1H)；7.76-7.66(m，2H)；7.59(dd，2H)；7.53(d，1H)；7.04(d，1H)表6中所列的化合物是根據(jù)上面所述的方法來(lái)進(jìn)行制備的。
表6.
2.生物化學(xué)和藥理學(xué)核體(nucleosomal)組蛋白的乙?；兔撘阴；谌旧|(zhì)結(jié)構(gòu)、染色質(zhì)功能的調(diào)節(jié)和基因表達(dá)的調(diào)節(jié)中起著重要的作用。許多類(lèi)結(jié)構(gòu)不同的化合物都已經(jīng)被鑒定為HDAC抑制劑；這些化合物導(dǎo)致了腫瘤細(xì)胞和正常組織中乙?；M蛋白蛋白質(zhì)的積聚。HDAC抑制劑能激活分化、抑制G1和/或G2中的細(xì)胞周期、和誘導(dǎo)變異細(xì)胞或癌細(xì)胞中的細(xì)胞凋亡。
試驗(yàn)組11.組蛋白乙?；瘜937造血細(xì)胞系用一些濃度間隔的化合物進(jìn)行處理，這些濃度間隔與tricostatin A(一種已知的最有效的組蛋白脫乙?；敢种苿?微摩爾濃度))的濃度間隔相當(dāng)。用使用識(shí)別H3和H4乙?；M蛋白的抗體的細(xì)胞熒光比色法(cytofluorimetry)來(lái)測(cè)量組蛋白乙酰化的水平。用不同的技術(shù)(蛋白質(zhì)印跡法)和其它細(xì)胞系獲得了相似的結(jié)果。
如圖1所示，所試驗(yàn)的化合物表現(xiàn)出有效的抑制活性，具有一定的效力譜和抑制穩(wěn)定性(通過(guò)與處理4h后獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行比較)，其與所說(shuō)化合物的穩(wěn)定性和/或組蛋白脫乙酰基酶的抑制程度有關(guān)。
2.細(xì)胞生長(zhǎng)/細(xì)胞凋亡/細(xì)胞周期.
對(duì)U937細(xì)胞對(duì)式(I)化合物的生物學(xué)響應(yīng)進(jìn)行了研究。作為參考，如之前所述的那樣，用tricostatin A處理24hr在U937細(xì)胞中誘導(dǎo)了強(qiáng)烈的細(xì)胞凋亡(約60％的細(xì)胞死亡)，同時(shí)在G2/M相中有許多正在進(jìn)行生長(zhǎng)的細(xì)胞(Qiu等人，Mol.Biol.Cell.，2000，11(6)，2069-83)。
首先對(duì)兩種化合物(MC1610和MC1645)進(jìn)行了研究如圖2中所示的那樣，兩種化合物(濃度為1μM)完全阻斷了細(xì)胞生長(zhǎng)，誘導(dǎo)了細(xì)胞凋亡和刺激了G2/M相中的阻滯。
根據(jù)上述的方法，對(duì)本發(fā)明的化合物抑制HD2、HD1-B和HD1-A(其都是具有脫乙?；富钚缘膍ais酶)的能力進(jìn)行分析。特定地，HD1-B和HD1-A分別是I類(lèi)和II類(lèi)哺乳動(dòng)物脫乙?；傅耐滴?。所得的結(jié)果如表7所示。
表7






表7中的數(shù)據(jù)表明所有的試驗(yàn)化合物都具有有效抑制組蛋白脫乙?；傅幕钚浴?br> 實(shí)驗(yàn)組2方法體外研究2.1組蛋白乙?；囼?yàn)用組蛋白乙?；囼?yàn)來(lái)對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)物中乙?；M蛋白的相對(duì)水平進(jìn)行常規(guī)探測(cè)。將混懸細(xì)胞(U937或K562，分別得自組織細(xì)胞性淋巴瘤和髓細(xì)胞性白血病)與劑量漸增的HDAC抑制劑(HDACi)接觸以誘導(dǎo)組蛋白乙?；?。在3h后，將這些細(xì)胞固定(1％位于PBS中的低聚甲醛)和滲透(permeabilized)(Triton X-100 0.1％位于PBS中，RT)。在洗滌(PBS-1％ BSA)后，將這些細(xì)胞在10％山羊血清(Goatserum)PBS(30’，4°)中預(yù)培養(yǎng)。然后，將這些細(xì)胞用指向于乙?；M蛋白的單克隆抗體(位于PBS-1％ BSA中；1小時(shí)，RT)進(jìn)行培養(yǎng)，然后用抗-小鼠FITC軛合抗體(位于PBS-1％BSA中；1小時(shí)，RT)進(jìn)行培養(yǎng)。在最后洗滌后，對(duì)這些細(xì)胞進(jìn)行FACS分析。
2.2 HDAC抑制試驗(yàn)根據(jù)制造商的建議，用HDAC熒光活性試驗(yàn)試劑盒(Biomol Inc.)在核提取物上進(jìn)行該HDAC活性試驗(yàn)。該試驗(yàn)是分兩步進(jìn)行的首先，將5μg HELA核提取物(HDAC活性)加入到HDAC抑制劑和底物(乙酰化賴(lài)氨酸側(cè)鏈，116μM)的溶液中，然后將該混合物在室溫(25°)下培養(yǎng)10分鐘。在第二步中，通過(guò)加入顯色劑(在室溫下15分鐘)來(lái)終止該反應(yīng)。在這一步中，產(chǎn)生了熒光團(tuán)。
用Vector 3熒光計(jì)(Perkin-Elmer)來(lái)對(duì)熒光進(jìn)行分析，使用355nm的激發(fā)波長(zhǎng)和在460nm的發(fā)射光線下進(jìn)行探測(cè)。
2.3 MTT試驗(yàn)
MTT[3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑溴化物]試驗(yàn)是以得自有活力的細(xì)胞的線粒體脫氫酶裂解淡黃色MTT的四唑環(huán)和形成深藍(lán)色甲 結(jié)晶(其對(duì)于細(xì)胞膜而言在很大程度上是不可滲透的，因而導(dǎo)致了其在健康細(xì)胞內(nèi)的積聚)的能力為基礎(chǔ)的。通過(guò)加入去污劑來(lái)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行的增溶導(dǎo)致了該被溶解的催化劑的釋放。存活細(xì)胞的數(shù)目直接與所產(chǎn)生的甲 產(chǎn)物的水平成比例。然后，可以用簡(jiǎn)單比色試驗(yàn)來(lái)對(duì)其顏色進(jìn)行定量。可以在多孔(multiwell)掃描分光光度計(jì)(ELISA讀數(shù)器)上讀取結(jié)果。
將腫瘤細(xì)胞系(HT29，MCF-7，PC3，U937)用不同濃度的試驗(yàn)化合物進(jìn)行培養(yǎng)(24、48和72小時(shí))。在不同的時(shí)間點(diǎn)向其中加入MTT(5mg/ml，位于PBS中)并將其在37℃下培養(yǎng)3-4小時(shí)。在培養(yǎng)后，除去包含MTT溶液的培養(yǎng)基并將甲 結(jié)晶用有機(jī)溶劑(DMSO/無(wú)水乙醇1∶1)溶解，然后在多孔掃描分光光度計(jì)上對(duì)其進(jìn)行讀數(shù)(550-570nm)。將存活細(xì)胞的百分比表示為(處理孔的吸光度/對(duì)照孔的吸光度)×1002.4細(xì)胞生長(zhǎng)/細(xì)胞凋亡/細(xì)胞周期將混懸或粘連細(xì)胞(HT29或K562)與劑量漸增的HDACi化合物進(jìn)行接觸以對(duì)其生物學(xué)響應(yīng)進(jìn)行評(píng)估。對(duì)于細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡分析而言，在收集后，將這些細(xì)胞在70％乙醇中固定30min。在洗滌后，將這些細(xì)胞重新混懸于Propidium Iodide(PI；50μg/ml附加于RNase(250μg/ml)上)中并將其在室溫下培養(yǎng)3h。
對(duì)這些樣品進(jìn)行處理，用其來(lái)進(jìn)行流式細(xì)胞(FC)分析。FC是用FACScan細(xì)胞計(jì)數(shù)器(Becton Dickinson)進(jìn)行的。如圖3中所示的那樣，所試驗(yàn)的化合物能完全抑制細(xì)胞生長(zhǎng)、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和刺激G0/G1阻滯。
體內(nèi)研究抗腫瘤活性研究2.5 Carciginogenesis研究和HDACi給藥首先，用25μg DMBA(被溶解于200μl丙酮中)對(duì)六周大的雌性129小鼠進(jìn)行處理，將該物質(zhì)涂在所述小鼠剃了毛的背部皮膚上。在開(kāi)始2周后，在接下來(lái)的13周中，將小鼠用3μg TPA(被溶解于200μl丙酮中)一周處理兩次。在應(yīng)用TPA后6周，明顯可以看到皮膚腫瘤(乳頭狀瘤)。在發(fā)生可見(jiàn)的乳頭狀瘤時(shí)，開(kāi)始進(jìn)行HDACi給藥。將HDAC抑制劑溶解于甘油/H2O/DMSO(7∶2∶1)中。將HDACi給藥于正常組或用DMBA-TPA進(jìn)行處理的動(dòng)物，一組被看成偽組(僅給予基質(zhì))。將HDACi(或基質(zhì))涂到動(dòng)物被剃了毛的背部皮膚(2×3cm)上。在接下來(lái)的6-7周，所有組都每周處理兩次。每周都對(duì)所有可見(jiàn)的腫瘤進(jìn)行計(jì)數(shù)并在6周后，在將其處死(CO2吸入)時(shí)對(duì)其進(jìn)行解剖。
2.6組織學(xué)和免疫組織化學(xué)分析將這些腫瘤樣品在10％進(jìn)行了緩沖的福爾馬林中進(jìn)行固定，對(duì)其進(jìn)行用于石蠟包埋的處理并對(duì)其進(jìn)行切片(4μm)。用蘇木精和曙紅對(duì)一個(gè)系列進(jìn)行染色，同時(shí)對(duì)其余系列進(jìn)行免疫組織化學(xué)處理以探測(cè)乙?；M蛋白的水平。簡(jiǎn)單地說(shuō)，在脫蠟后，通過(guò)梯度醇系列進(jìn)行組織水合，并在枸櫞酸溶液(pH 6)中進(jìn)行抗體暴露，將這些切片淬火(3％H2O2的TBS溶液)并將其與抗-乙?；M蛋白(位于TBS 1X-BSA 2％-NGS2％-吐溫0.05％中)一起在室溫下培養(yǎng)2小時(shí)。然后，將這些切片用易于應(yīng)用的二抗(DAKO Envision System HRP抗小鼠)在室溫下培養(yǎng)1小時(shí)，隨后將其在過(guò)氧化物酶底物溶液(1滴位于1mL DAB DAKO緩沖液中的鉻精)中進(jìn)行培養(yǎng)。最后，將這些切片在H2O中進(jìn)行洗滌，將其脫水以對(duì)其進(jìn)行封藏和觀察。
結(jié)果3.1組蛋白乙?；囼?yàn)和HDAC抑制試驗(yàn)根據(jù)第2.1和2.2段中所述的方法，對(duì)本發(fā)明化合物抑制組蛋白脫乙?；傅哪芰M(jìn)行試驗(yàn)。在表8中對(duì)所得的結(jié)果進(jìn)行了概述。
表8.所測(cè)量活性的概述(HDAC抑制試驗(yàn)和組蛋白乙?；囼?yàn))


IC50范圍(nM)＜100＝+++＞100，＜200＝++＞200，＜600＝+乙?；隽糠秶?倍＝+＞4倍，＜6倍＝++＞6倍＝+++表8中所示的數(shù)據(jù)證明所試驗(yàn)的化合物具有有效抑制組蛋白脫乙酰基酶的活性。
3.2MTT試驗(yàn)根據(jù)第2.3段中所述的方法，用不同的細(xì)胞系對(duì)本發(fā)明化合物誘導(dǎo)增生阻斷和/或細(xì)胞死亡的能力進(jìn)行試驗(yàn)。在表9中對(duì)所得的結(jié)果進(jìn)行了概述。
表9.活性MTT試驗(yàn)化合物

IC50(μM)范圍＜0.5＝+++＞0.5，＜5＝++＞5＝+表9中所示的結(jié)果表明本發(fā)明的化合物能誘導(dǎo)各種腫瘤細(xì)胞系中的增生阻斷和/或細(xì)胞死亡。
3.3體內(nèi)研究根據(jù)在第2.5和2.6段中進(jìn)行了解釋的方法，將得自正常小鼠或用DMBA-TPA進(jìn)行處理的小鼠的皮膚分別用免疫組織化學(xué)進(jìn)行分析或用蘇木精和曙紅進(jìn)行染色。在圖4和圖5中表示了所得結(jié)果的實(shí)例，其證明所試驗(yàn)的化合物能十分有效地誘導(dǎo)正常動(dòng)物體內(nèi)的組蛋白乙?；⑶夷芙档椭委焺?dòng)物的腫瘤大小。此外，如圖6所示，所試驗(yàn)的化合物還能完全阻斷所誘導(dǎo)的乳頭狀瘤數(shù)目的進(jìn)一步增加。
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物 其中R1是包含至少兩個(gè)共軛雙鍵的直鏈或支鏈，R3選自氫、烷氧基烷基；Ar是任選地被取代的芳基或雜芳基，A選自 其中R2選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、鹵素、鹵代烷基、羥基、羥基烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、氨基、氨基烷基、烷基氨基、(硫代)羰基氨基、(硫代)氨基carbonil、磺酰基氨基、氨基磺?；?、(硫代)酰基、(硫代)酰氧基、(硫代)烷氧基羰基、硝基和硝?；?br> 2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中R1選自 其中Y表示O、S、NH、CH2、NOH或NOR5，其中R5是具有1至4個(gè)碳原子的烷基。
3.如權(quán)利要求1-2所述的化合物，其中Ar選自苯基、萘基、吡啶基、吡喃基、吡咯基、噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基，其可任選地被取代。
4.如權(quán)利要求1-3所述的化合物，其中Ar被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、烷基、烷氧基、三氟烷基、三氟烷氧基、二烷基氨基、嗎啉基、哌嗪基、甲氧基羰基的基團(tuán)所取代。
5.如權(quán)利要求1-4所述的化合物，其中R1和包含R3的基團(tuán)彼此相對(duì)而言以對(duì)位關(guān)系被連接到A環(huán)上。
6.如權(quán)利要求1-5所述的化合物，其中R2選自氫、鹵素、烷基、烷氧基。
7.如權(quán)利要求1-6所述的化合物，其中R3是氫。
8.如權(quán)利要求1-7所述的化合物，其具有下述結(jié)構(gòu)中的一種 其中Ar和R2具有上述含義，并且X是碳或氮原子。
9.如權(quán)利要求8所述的化合物，其中在式(Ia-d)中，X是碳原子，R2是氫，和Ar選自苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、2-氟苯基、3-氟苯基、4-氟苯基、2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、1-萘基、5-二氫苯并呋喃基。
10.如權(quán)利要求1所述的化合物，其選自3-[3-氟-4-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺；3-[3-氯-4-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺；3-[3-氯-4-(3-氧代-3-鄰-甲苯基-丙烯基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺；3-{3-氯-4-[3-(2-甲氧基-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-{3-氯-4-[3-(2-氟-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-{3-氯-4-[3-(2-氯-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-[3-氯-4-(3-氧代-3-間-甲苯基-丙烯基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺；3-{3-氯-4-[3-(3-甲氧基-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-{3-氯-4-[3-(3-氟-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-{3-氯-4-[3-(3-氯-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-[3-氯-4-(3-氧代-3-對(duì)-甲苯基-丙烯基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺；3-{3-氯-4-[3-(4-甲氧基-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-{3-氯-4-[3-(4-氟-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-{3-氯-4-[3-(4-氯-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-[3-氯-4-(3-氧代-3-噻吩-2-基-丙烯基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺；3-[3-氟-4-(3-氧代-3-鄰-甲苯基-丙烯基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺；3-{3-氟-4-[3-(2-甲氧基-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-{3-氟-4-[3-(2-氟-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-{4-[3-(2-氯-苯基)-3-氧代-丙烯基]-3-氟-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-[3-氟-4-(3-氧代-3-間-甲苯基-丙烯基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺；3-{3-氟-4-[3-(3-甲氧基-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-{3-氟-4-[3-(3-氟-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-{4-[3-(3-氯-苯基)-3-氧代-丙烯基]-3-氟-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-[3-氟-4-(3-氧代-3-對(duì)-甲苯基-丙烯基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺；3-{3-氟-4-[3-(4-甲氧基-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-{3-氟-4-[3-(4-氟-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-{4-[3-(4-氯-苯基)-3-氧代-丙烯基]-3-氟-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-[3-氟-4-(3-氧代-3-噻吩-2-基-丙烯基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺；3-{3-氟-4-[3-(4-嗎啉-4-基-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；N-羥基-3-{4-[3-(2-甲氧基-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-丙烯酰胺；N-羥基-3-{4-[3-氧代-3-(2-三氟甲基-苯基)-丙烯基]-苯基}-丙烯酰胺；N-羥基-3-{4-[3-氧代-3-(2-三氟甲氧基-苯基)-丙烯基]-苯基}-丙烯酰胺；3-{4-[3-(2-溴-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；N-羥基-3-{4-[3-(3-甲氧基-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-丙烯酰胺；3-{4-[3-(3-溴-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；N-羥基-3-{4-[3-(4-甲氧基-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-丙烯酰胺；N-羥基-3-{4-[3-氧代-3-(4-三氟甲基-苯基)-丙烯基]-苯基}-丙烯酰胺；N-羥基-3-{4-[3-氧代-3-(4-三氟甲氧基-苯基)-丙烯基]-苯基}-丙烯酰胺；3-{4-[3-(4-溴-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-{4-[3-(4-二乙基氨基-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；N-羥基-3-{4-[3-(4-嗎啉-4-基-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-丙烯酰胺；3-[4-(3-呋喃-2-基-3-氧代-丙烯基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺；N-羥基-3-[4-(3-氧代-3-噻吩-2-基-丙烯基)-苯基]-丙烯酰胺；N-羥基-3-{4-[3-氧代-3-(1H-吡咯-2-基)-丙烯基]-苯基}-丙烯酰胺；3-[4-(3-苯并呋喃-2-基-3-氧代-丙烯基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺；3-[4-(3-苯并[b]噻吩-2-基-3-氧代-丙烯基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺；N-羥基-3-[4-(3-氧代-3-噻吩-3-基-丙烯基)-苯基]-丙烯酰胺；N-羥基-3-{4-[3-(3-甲氧基-4-嗎啉-4-基甲基-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-丙烯酰胺；3-{4-[3-(3，4-二氟-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-{4-[3-(3，5-二氟-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-{4-[3-(2，5-二氟-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；3-{4-[3-(2，6-二氟-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；N-羥基-3-[3-甲氧基-4-(3-氧代-3-噻吩-2-基-丙烯基)-苯基]-丙烯酰胺；N-羥基-3-[3-甲基-4-(3-氧代-3-噻吩-2-基-丙烯基)-苯基]-丙烯酰胺；4-{3-[4-(2-羥基氨基甲?；?乙烯基)-苯基]-丙烯?；鶀-苯甲酸甲酯；3-{3-[4-(2-羥基氨基甲?；?乙烯基)-苯基]-丙烯酰基}-苯甲酸甲酯；3-{4-[3-(5-氯-噻吩-2-基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-N-羥基-丙烯酰胺；N-羥基-3-{4-[3-(3-羥基-苯基)-3-氧代-丙烯基]-苯基}-丙烯酰胺；N-羥基-3-(4-{3-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-3-氧代-丙烯基}-苯基)-丙烯酰胺；N-羥基-3-[2-甲氧基-4-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-苯基]-丙烯酰胺；3-[2-氟-4-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺；3-[2-氯-4-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺；N-羥基-3-[4-(3-氧代-3-吡啶-3-基-丙烯基)-苯基]-丙烯酰胺；N-羥基-3-[4-(3-氧代-3-吡啶-2-基-丙烯基)-苯基]-丙烯酰胺；N-羥基-3-[4-(3-氧代-3-吡啶-4-基-丙烯基)-苯基]-丙烯酰胺；N-羥基-3-[3-甲基-4-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-苯基]-丙烯酰胺；N-羥基-3-[3-甲氧基-4-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-苯基]-丙烯酰胺；3-[3-氟-4-(3-氧代-3-吡啶-3-基-丙烯基)-苯基]-N-羥丙烯酰胺；N-羥基-3-[5-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)-吡啶-2-基]-丙烯酰胺；N-羥基-3-{5-[3-(2-甲氧基-苯基)-3-氧代-丙烯基]-吡啶-2-基}-丙烯酰胺；N-羥基-3-[5-(3-氧代-3-噻吩-2-基-丙烯基)-吡啶-2-基]-丙烯酰胺。3-{5-[3-(3，4-二氟-苯基)-3-氧代-丙烯基]-吡啶-2-基}-N-羥基-丙烯酰胺
11.制備式(I)化合物的方法，其包括將式(II)的化合物 其中A和R2具有上述含義并且R4是一種適宜的離去基團(tuán)，(i)用其中Ar具有上述含義和W是能通過(guò)與(II)的CHO基團(tuán)反應(yīng)而形成上面所定義的基團(tuán)R1的基團(tuán)的式Ar-W的化合物、或其合成中間體來(lái)進(jìn)行處理(ii)和進(jìn)一步用式(III)的化合物進(jìn)行處理 其中Z表示上面所定義的NHOR3或其前體。
12.如權(quán)利要求11所述的方法，其中化合物Ar-W是任選地在苯基環(huán)上被取代的苯乙酮。
13.如權(quán)利要求11-12所述的方法，其中化合物Ar-W的加成反應(yīng)是在堿性環(huán)境中進(jìn)行的。
14.如權(quán)利要求11-13所述的方法，其中所說(shuō)的式(III)的化合物是丙烯酸烷基酯。
15.如權(quán)利要求11-14所述的方法，其中所說(shuō)的式(III)的化合物是丙烯酸正-丁酯。
16.如權(quán)利要求11-15所述的方法，其中所說(shuō)的式(III)化合物的加成反應(yīng)是在存在磷酸鉀和醋酸鈀的情況下進(jìn)行的。
17.用于治療的如權(quán)利要求1-9中所定義的式(I)的化合物。
18.藥物組合物，特征在于其包含一種或多種如權(quán)利要求1-9中所定義的式(I)的活性成分和可藥用的賦形劑和稀釋劑。
19.片劑、膠囊、口服制劑、粉末、顆粒、錠劑、可再生粉末、可注射或可輸入液體溶液或混懸液、栓劑、水性或油性混懸液、溶液、乳液、糖漿、酏劑形式或經(jīng)皮形式的用于口服或胃腸外給藥的如權(quán)利要求18所述的組合物。
20.以軟膏、乳霜、凝膠、洗劑、溶液、糊劑等形式用于局部應(yīng)用的如權(quán)利要求18所述的組合物，可能包含脂質(zhì)體、膠束、和/或微球。
21.一種或多種如權(quán)利要求1-9所定義的式(I)的化合物在制備預(yù)防和/或治療與組蛋白脫乙酰基酶的活性失控有關(guān)的疾病的藥物中的用途。
全文摘要
在這里描述了具有抗腫瘤活性的新組蛋白脫乙酰基酶抑制劑以及其制備方法。這些化合物屬于結(jié)構(gòu)式(I)，其中R
文檔編號(hào)C07D409/06GK101039905SQ200580035432
公開(kāi)日2007年9月19日 申請(qǐng)日期2005年9月30日 優(yōu)先權(quán)日2004年10月1日
發(fā)明者S·米努奇, P·G·佩利奇, A·馬伊, M·巴拉里尼, G·加爾朱洛, S·馬薩 申請(qǐng)人:Dac有限公司