專利名稱：喹唑啉衍生物及其治療用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及喹唑啉化合物、組合物和通過給予喹唑啉化合物治療高增殖性紊亂(hyperproliferative disorder)包括癌癥的治療方法。
背景技術(shù)：
喹唑啉化合物是具有寬范圍生理效果和活性的一類化合物。已顯示4-氨基喹唑啉的衍生物具有殺菌和殺螨活性(U.S.專利No.3,541,094)。具有仲[4-(芳氨基)]取代基的喹唑啉證明對(duì)抑制胃(H+/K+)-ATPase具有結(jié)構(gòu)活性關(guān)系(Ife等，J.Med.Chem.，382763-2773(1995))。作為喹唑啉衍生物的常咯林及相關(guān)化合物可具有抗心律失常效果(Sun等。藥學(xué)學(xué)報(bào)，16564-570(1981))。已發(fā)現(xiàn)特定喹唑啉衍生物是NF-κB活化的抑制劑并對(duì)角叉菜膠-誘發(fā)的小鼠腳爪浮腫具有抗炎效果(Tobe等。Bioorg.Med.Chem.，11383-391(2003))。
已建議將一些喹唑啉用于以人表皮生長(zhǎng)因子受體型2(HER2)的活性為特征的細(xì)胞生長(zhǎng)和分化型的治療。例如，見Myers等，U.S.專利No.5,721,237。已建議一些喹唑啉用于治療特定受體酪氨酸激酶表達(dá)的癌癥。特別是那些表達(dá)的表皮生長(zhǎng)因子(EGF)受體酪氨酸激酶。例如，見Barker，U.S.專利No.5,457,105。當(dāng)一些喹唑啉化合物抑制了腦腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)時(shí)，具有同等有效酪氨酸激酶抑制活性的其他化合物不能抑制腦腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)(Narla等，Clin，Cancer Res.，41405-1414(1998))。因此，喹唑啉化合物不能殺死表達(dá)EGF受體的多種腫瘤，而能殺死不表達(dá)EGF受體的一些腫瘤。喹唑啉化合物的細(xì)胞毒素活性并不是該化合物的酪氨酸激酶抑制活性的結(jié)果，和特別地不是該化合物的抑制EGF受體酪氨酸激酶的能力的結(jié)果。未確定喹唑啉衍生物的決定抗癌活性的化學(xué)結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系。
對(duì)用于治療紊亂如癌癥的作為治療分子的新型喹唑啉化合物存在需求。也需要使用已知的和新型喹唑啉化合物用于特定紊亂的治療的方法。
附圖簡(jiǎn)述

圖1是圖示皮下注射HCT116人類結(jié)腸癌細(xì)胞的裸鼠(nude mice)中，RX-0183對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的抑制。
發(fā)明概述合成了喹唑啉化合物并分析了治療活性，包括抗癌活性。證明本發(fā)明的喹唑啉化合物能有用地用于高增殖性紊亂，包括腫瘤如乳腺腫瘤(breasttumors)、腦腫瘤和腎腫瘤(kidney tumors)的治療。
發(fā)明詳述定義在本說明書中可相互替換使用的術(shù)語“喹唑啉”、“喹唑啉化合物”和“喹唑啉衍生物”是指如下定義的式I化合物。除非另有規(guī)定，在本說明書中使用的所有科學(xué)和技術(shù)術(shù)語具有本領(lǐng)域中通常使用的含義。如本說明書中所使用的，下面的詞或短語具有指定含義。
鹵是氟、氯、溴或碘。烷基、烷?；却碇辨満椭ф溁鶊F(tuán)二者；但對(duì)個(gè)別基團(tuán)如“丙基”則只包含直鏈殘基，支鏈異構(gòu)體如“異丙基”則另有特定指定。(C1-C4)烷基包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基和仲丁基；(C1-C4)烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基和仲丁氧基；和(C1-C4)烷?；ㄒ阴；?、丙?；投□；?br> 如這里所用的，“藥學(xué)可接受的載體”是指當(dāng)與本發(fā)明化合物結(jié)合時(shí)使得化合物保留生物活性，如增強(qiáng)肥大細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的抗菌活性的能力的任何化合物。其實(shí)例包括，但不限于任何標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)載體如磷酸鹽緩沖的鹽水溶液、水、乳化液如油/水乳化液，和多種類型的潤(rùn)濕劑。通過公知的常規(guī)方法(見，例如，Remington’s Pharmaceutical Sciences，43章，第14版，MackPublishing Co.，Easton，Pa.)配制包含該載體的組合物。
術(shù)語“共軛物(conjugate)”是指在兩個(gè)或多個(gè)分子間作為復(fù)合物形成的化合物。更特別地，在本發(fā)明中，將喹唑啉衍生物鍵合，例如共價(jià)鍵合到形成共軛化合物的細(xì)胞特定目標(biāo)部分用于試劑向感興趣細(xì)胞的有效和特定傳輸。
短語“目標(biāo)部分”是指為了所希望活性將本發(fā)明化合物供應(yīng)到特定位置的分子。目標(biāo)部分包括，例如特別將分子連接到特定細(xì)胞表面上的分子。
在本發(fā)明中有用的該目標(biāo)部分包括抗細(xì)胞表面抗原抗體(anti-cell surfaceantigen antibody)。包括白細(xì)胞間介素和因子如粒細(xì)胞/巨噬細(xì)胞刺激因子(GMCSF)的細(xì)胞活素也是特定的目標(biāo)部分，已知其連接到表達(dá)其受體高水平的特定細(xì)胞上。
術(shù)語“前藥部分”是例如通過促進(jìn)藥物進(jìn)入細(xì)胞或化合物的給予來促進(jìn)本發(fā)明化合物利用的取代基。前藥部分可從化合物中分解，例如通過原位裂解酶。前藥部分的實(shí)例包括磷酸鹽基、肽連接基和糖，所述部分可進(jìn)行原位水解。
“治療”是指在對(duì)象內(nèi)抑制、降低、調(diào)節(jié)、改善或阻斷表現(xiàn)為病理狀態(tài)(pathologic condition)的至少一種癥狀，該對(duì)象罹受該狀態(tài)威脅或折磨。
“高增殖性紊亂”是以細(xì)胞的異常增殖為特征的紊亂，和通常包括皮膚增殖如牛皮癬以及所有器官系統(tǒng)的良性和癌。該后者高增殖性紊亂例如包括乳腺癌(包括小葉癌和導(dǎo)管癌)和其他實(shí)體腫瘤(solid tumor)，癌，肉瘤，和包括肺狀小細(xì)胞癌、大細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌的癌癥，和腺癌，肺間皮瘤，結(jié)腸腺癌，胃癌，前列腺腺癌，卵巢癌如漿液囊性腺癌和粘液囊性腺癌，卵巢生殖細(xì)胞腫瘤，睪丸癌和生殖細(xì)胞腫瘤，胰腺癌，膽腺癌，肝細(xì)胞(heptacellular)癌，包括轉(zhuǎn)移細(xì)胞癌、腺癌和鱗狀細(xì)胞癌的膀胱癌，腎細(xì)胞腺癌，包括腺癌和混合Mullerian腫瘤(癌肉瘤)的子宮內(nèi)膜癌，子宮頸內(nèi)膜、外宮頸和陰道的癌如腺癌和鱗狀細(xì)胞癌，皮膚狀鱗狀細(xì)胞癌、基底細(xì)胞癌的腫瘤，黑素瘤，和皮膚附件腫瘤(skin appendage tumor)，包括鱗狀細(xì)胞癌和腺癌的食道癌，鼻咽癌和口咽癌，唾液腺癌，包括神經(jīng)膠質(zhì)、神經(jīng)元和腦膜起源的腫瘤的腦和中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，外周神經(jīng)的腫瘤，軟組織肉瘤和骨以及軟骨肉瘤。
本發(fā)明包含喹唑啉化合物及其在對(duì)象(例如人類患者或其他動(dòng)物對(duì)象)中治療高增殖性紊亂、疾病或狀態(tài)中的應(yīng)用。根據(jù)本發(fā)明的方法包括對(duì)對(duì)象給予有效量的本發(fā)明喹唑啉化合物。例如在腫瘤如惡性贅生物中該治療例如可防止、改善，和/或抑制高增殖狀態(tài)的癥狀，和/或可防止或抑制細(xì)胞增殖或生長(zhǎng)。本發(fā)明的治療策略可將腫瘤負(fù)重(tumor burden)至少降低到可測(cè)量水平，并提高罹患高增殖狀態(tài)的患者的存活率。在這些疾病中，對(duì)本發(fā)明試劑的治療敏感的紊亂和狀態(tài)是贅生物，和更特別地是多種來源(肺、結(jié)腸、胃、平滑肌、食管、非Hodgkin′s淋巴瘤、非小細(xì)胞肺癌等)的腫瘤。
在根據(jù)本發(fā)明的方法中有用的化合物在本發(fā)明方法中有用的化合物包括具有式I的喹唑啉 其中(R1)n選自6-NHCH2R3、H、6-硝基、6-溴、6-碘、7-氟、5-甲基、6，7-二甲氧基、6，7-二乙氧基、咪唑[4，5-g]-和3-甲基咪唑[4，5-g]-；和R3選自-CH(CH3)2和Ar，其中Ar選自(a)4-取代的苯基，其中該4-取代基選自-CH(CH3)2、-OCH2Ph、-OCH2CH2CH3和-Ph；(b)3-取代的苯基，其中該3-取代基選自甲氧基、4-氯苯氧基、芐氧基、4-甲氧基苯氧基、4-甲基苯氧基、3-三氟甲基苯氧基和甲基；(c)2-取代的苯基，其中該2-取代基選自甲基、硝基和芐氧基；(d)二取代的苯基，其選自2，4-二甲氧基苯基、2，6-二甲氧基苯基、2，5-二甲氧基苯基、3，5-二甲氧基苯基、2，5-二甲基苯基和4，4-亞乙基二氧基；(e)吡啶-3-基；和(f)萘-1基，任選在2-位上被甲氧基取代；和其中(i)當(dāng)(R1)n是6-NHCH2R3時(shí)，則R2選自3-溴苯基、3-氯-4-氟苯基，和(ii)當(dāng)(R1)n是H、6-硝基、6-溴、7-氟或5-甲基時(shí)，則R2選自(a)環(huán)己基；(b)取代的苯基，選自2，4，6-三甲基苯基、2-氟-4-氯苯基、4-氟苯基和2-氯苯基；(c)CH2Ar，其中Ar選自萘-1-基；2-三氟甲基苯基和3-三氟甲基苯基；(d)(CH2)2Ar，其中Ar選自苯基、3-氟苯基和4-氟苯基；(e)α-甲基芐基；和(f)4-苯基丁基；
(iii)當(dāng)(R1)n是6，7-二甲氧基或6，7-二乙氧基時(shí)，則R2選自(a)(CH2)mAr，其中，m是1、2或4，和當(dāng)m＝1時(shí)，Ar選自2-氯苯基、4-氯苯基、2-氟苯基、2-氯-6-氟苯基、3-三氟甲基苯基和3，5-二甲氧基苯基；當(dāng)m＝2時(shí)，則Ar選自苯基和3-氟苯基，和當(dāng)m＝4時(shí)，Ar是苯基；和(b)α-甲基芐基；和(iv)當(dāng)(R1)n是咪唑[4，5-g]和3-甲基咪唑[4，5-g]時(shí)，則R2選自(a)異丙基；(b)2，4，6-三甲基苯基；或苯基，任選在2-位上用甲基取代或在4-位上被選自甲氧基、乙基、異丙基、2，4，6-三甲基和正丁基的取代基取代；(c)CH2Ar，其中Ar選自3-氟苯基和2，5-二氟苯基；(d)(CH2)mAr，其中m是2或4，和當(dāng)m＝2時(shí)，Ar選自苯基、3-氟苯基、4-甲基苯基和當(dāng)m＝4時(shí)，Ar是苯基；和(e)α-甲基芐基。
更特別地，化合物可具有式II 其中X＝F和Y＝Cl或X＝H和Y＝Br。即，具有式IIa或IIb的化合物 其中R3是異丙基或選自(a)4-取代的苯基，其中4-取代基選自-CH(CH3)2、-OCH2Ph、-OCH2CH2CH3和-Ph；(b)3-取代的苯基，其中3-取代基選自甲氧基、4-氯苯氧基、芐氧基、4-甲氧基苯氧基、4-甲基苯氧基、3-三氟甲基苯氧基和甲基；(c)2-取代的苯基，其中2-取代基選自甲基、硝基和芐氧基；(d)二取代的苯基，其選自2，4-二甲氧基苯基、2，6-二甲氧基苯基、2，5-二甲氧基苯基、3，5-二甲氧基苯基、2，5-二甲基苯基和4，4-亞乙基二氧基；(e)吡啶-3-基；和(f)萘-1基，任選在2-位上被甲氧基取代；或者，化合物可具有式III 其中R選自H、6-硝基、6-溴、6-碘、7-氟和5-甲基。即，具有式IIIa-IIIf中任一個(gè)的化合物 IIIaX＝Y(jié)＝Z＝HIIIbX＝Z＝H；Y＝NO2IIIcX＝Z＝H；Y＝BrIIIdX＝Z＝H；Y＝IIIIeY＝Z＝H；X＝FIIIfX＝Y(jié)＝H；Z＝CH3其中R2選自a)環(huán)己基；(b)取代苯基，選自2，4，6-三甲基苯基、2-氟-4-氯苯基、4-氟苯基和2-氯苯基；(c)CH2Ar，其中Ar選自萘-1-基；2-三氟甲基苯基和3-三氟甲基苯基；(d)(CH2)2Ar，其中Ar選自苯基、3-氟苯基和4-氟苯基；(e)α-甲基芐基；和(f)4-苯基丁基。
在另一實(shí)施方式中，化合物可具有式IV 其中R是甲基或乙基。即，式IV或IVb的化合物 其中R2選自(a)(CH2)mAr，其中，m是1、2或4，和當(dāng)m＝1時(shí)，Ar選自2-氯苯基、4-氯苯基、2-氟苯基、2-氯-6-氟苯基、3-三氟甲基苯基和3，5-二甲氧基苯基；當(dāng)m＝2時(shí)，則Ar選自苯基和3-氟苯基，和當(dāng)m＝4時(shí)，Ar是苯基；和(b)α-甲基芐基。
仍在另一實(shí)施方式中，用于本發(fā)明方法中的化合物具有式V 其中R6＝H和R4與R5一起形成雙鍵或R4＝CH3，以及R5與R6一起形成雙鍵。即具有式Va或Vb的化合物 其中R2選自(a)異丙基；(b)苯基，任選在2-位上被甲基取代或在4-位上被選自甲氧基、乙基、異丙基和正丁基的取代基取代；(c)2，4，6-三甲基苯基；(d)CH2Ar，其中Ar選自3-氟苯基和2，5-二氟苯基；(e)(CH2)mAr，其中m是2或4，和當(dāng)m＝2時(shí)，Ar選自苯基、3-氟苯基、4-甲基苯基和當(dāng)m＝4時(shí)，Ar是苯基；和(f)α-甲基芐基。
在具有式II結(jié)構(gòu)的一些實(shí)施方式中，R3選自4-異丙基苯基、2-甲基苯基和2，4-二甲氧基苯基。在具有式III結(jié)構(gòu)的一些實(shí)施方式中，R2選自2-(3-氟苯基)乙基、2-苯基乙基、萘-1-基甲基、2-三氟甲基苯基甲基、2-(4-氟苯基)乙基、2-氟-4-氯苯基、3-三氟甲基苯基甲基、環(huán)己基、2-氯苯基、2，4，6-三甲基苯基、α-甲基芐基和4-苯基丁基。在具有式IV結(jié)構(gòu)的一些實(shí)施方式中，R2選自2-氯苯基甲基和2-氯-6-氟苯基甲基。在具有式V結(jié)構(gòu)的一些實(shí)施方式中，R2選自異丙基、4-苯基丁基、3-氟苯基甲基、2-(2-氟苯基)乙基、2-(3-氟苯基)乙基或在任選4-位上被選自丁基、異丙基、乙基和甲氧基的取代基取代的苯基。
在其他實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物具有式IIa和R3選自4-異丙基苯基與2，4-二甲氧基苯基。仍在另一實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物具有式IIb，和R3是2-甲基苯基。依舊在其他實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物具有式IIIc或IIId，和R2選自2-(3-氟苯基)乙基、4-苯基丁基、2-苯基乙基、萘-1-基甲基、2-三氟甲基苯基甲基和2-氟-4-氯苯基。在另外實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物具有式IIIb和R2是2，4，6-三甲基苯基。其他實(shí)施方式包括具有式IIIa和R2選自2-(3-氟苯基)乙基、α-甲基芐基和4-苯基丁基的根據(jù)本發(fā)明的化合物。在其他實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物具有式IIIc和R2是4-氟苯基。一些實(shí)施方式具有R2為2-(4-氟苯基)乙基的式IIIe或IIIf。具有式IIId的一些實(shí)施方式具有R2選自3-三氟甲基苯基甲基、環(huán)己基和2-氯苯基。特定實(shí)施方式包括具有R2選自2-氯苯基甲基和2-氯-6-氟苯基甲基的式IVb的化合物。依舊其他實(shí)施方式具有式Va和R2選自異丙基、4-苯基丁基或任選在4-位上被選自丁基、異丙基、乙基和甲氧基的取代基所取代的苯基。本發(fā)明的其他實(shí)施方式包括式Vb的化合物，其中R2是2-(3-氟苯基)甲基、2-(2-氟苯基)乙基、2-(3-氟苯基)乙基和4-乙基苯基。
本發(fā)明的示例性實(shí)施方式包括下式化合物的用途(i)具有R3為2-甲基苯基的IIb；(ii)具有R2是4-苯基丁基的IIIa；(iii)其中R2是2-苯基乙基的IIId；(iv)具有R2選自2-氯苯基甲基和2-氯-6-氟苯基甲基的式IVb；或(v)其中R2是異丙基的Va。
在物質(zhì)方面的組合物中，本發(fā)明包括在根據(jù)本發(fā)明方法中實(shí)際有用的以前未知的任何化合物。特別地，本發(fā)明特別排除以下化合物，其中(a)當(dāng)R2是(CH2)2Ph或芐基時(shí)，(R1)n不是H、6-硝基、6-溴或6-碘；(b)當(dāng)(R1)n是H時(shí)，R2不是(CH2)Ph、α-甲基芐基或2-氯苯基；(c)當(dāng)(R1)n是溴時(shí)，R2不是α-甲基芐基；(d)當(dāng)(R1)n是6，7-二甲氧基和R2是(CH2)mAr時(shí)，則(i)當(dāng)m＝1時(shí)，Ar不是2-氯苯基或3-氟甲基苯基；和(ii)當(dāng)m＝2時(shí)，Ar不是苯基；和(e)當(dāng)(R1)n是6，7-二甲氧基時(shí)，R2不是α-甲基芐基。
本發(fā)明的化合物對(duì)寬范圍的高增殖疾病包括腫瘤具有高活性。例如，根據(jù)本發(fā)明的化合物可對(duì)卵巢腫瘤、乳腺腫瘤(breast tumors)、子宮頸腫瘤、前列腺腫瘤、肝腫瘤、肺腫瘤、腎腫瘤、結(jié)腸腫瘤、胰腺腫瘤、腦腫瘤、胃腫瘤和黑素瘤具有活性。該高活性意味著相對(duì)于特定腫瘤的至少一種細(xì)胞系，化合物可具有不大于10μM、不大于5.0μM、不大于1.0μM或不大于0.5μM的IC50。確定活性的示例性細(xì)胞系包括卵巢腫瘤的人類OVCAR-3；乳腺腫瘤的MCF-7、Hs 578T或MDA-MB-231；子宮頸腫瘤的HeLa；前列腺腫瘤的PC3；肝腫瘤的HepG2；肺腫瘤的A549；腎腫瘤的Caki-1或UMRC2；結(jié)腸腫瘤的HT-29；胰腺腫瘤的PANC-1；腦腫瘤的U251；胃腫瘤的MKN-45和黑素瘤的Lox IMVI。
藥學(xué)組合物和給予本發(fā)明的化合物可有用地用作以治療有效量的如這里定義的本發(fā)明化合物、和藥學(xué)可接受載體或稀釋劑而制備的藥物組合物。
可配制本發(fā)明的喹唑啉化合物作為藥學(xué)組合物，并可以適合給予的選擇路線的多種形式如口服或腸胃外，通過靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、局部或皮下給予到需要治療的對(duì)象中，例如哺乳動(dòng)物，如人類患者。
因此，本發(fā)明的喹唑啉化合物可系統(tǒng)給予，如口服，結(jié)合藥學(xué)可接受的運(yùn)載體(vehicle)如惰性稀釋劑或可同化的食物載體，或通過吸入或吹入進(jìn)行?？蓪⑵浞忾]在堅(jiān)硬或軟殼明膠膠囊中，可壓縮成藥片，或可直接并入到患者飲食的食物中。對(duì)于口服治療給予，喹唑啉化合物可結(jié)合一種或多種賦形劑，并以可攝取藥片、口腔片、錠劑、膠囊、酏劑、懸浮液、糖漿、干膠片(wafer)等的形式使用。喹唑啉化合物可結(jié)合精細(xì)惰性粉末載體并被對(duì)象吸入或吹入。該組合物和制劑應(yīng)包含至少0.1％喹唑啉化合物。當(dāng)然，可改變組合物和制劑的百分比，并通常在給定單位劑量形式重量的約2％-約60％。喹唑啉化合物在該治療有用組合物中的量使得可得到有效的劑量水平。
所述藥片、錠劑、丸劑、膠囊等也可包含如下粘合劑如黃芪膠、阿拉伯膠、玉米淀粉或明膠；賦形劑如磷酸二鈣；崩解劑如玉米淀粉、土豆淀粉、褐藻酸等；潤(rùn)滑劑如硬脂酸鎂；和甜味劑如蔗糖、果糖、乳糖或阿斯巴特，或可加入香味劑如薄荷、鹿蹄草油或櫻桃香料。當(dāng)單位劑量形式是膠囊時(shí)，除上面類型的材料外，其可包含液體載體，如植物油或聚乙二醇?？纱嬖诙喾N其他材料作為涂層或用來改進(jìn)固體單位劑量形式的物理形式。例如，可用凝膠、蠟、蟲膠或糖等涂覆藥片、丸劑或膠囊。糖漿或酏劑可包含活性化合物、作為甜味劑的蔗糖或果糖、作為防腐劑的對(duì)羥基苯甲酸甲酯和對(duì)羥基苯甲酸丙酯、染料和香料如櫻桃或橙子香料。當(dāng)然，用于制備任何單位劑量形式的任何材料應(yīng)是藥學(xué)可接受的并在使用量上基本上無毒。此外，可將喹唑啉化合物并入到持久釋放制劑和裝置中。
喹唑啉化合物也可通過輸注或注射進(jìn)行靜脈給予或腹膜內(nèi)給予。喹唑啉化合物的溶液可在水中制備，任選與無毒表面活性劑混合。也可在甘油、液體聚乙二醇、乙酸甘油酯及其混合物和在油中制備分散體。在儲(chǔ)藏和使用的常規(guī)條件下，這些制劑可包含防腐劑以防止微生物的生長(zhǎng)。
適用于注射或輸注的藥學(xué)劑量形式可包括無菌水溶液或分散體或無菌粉末，所述無菌水溶液或分散體或無菌粉末包含任選封裝在脂質(zhì)體中的適合于可無菌注射或輸注的溶液或分散體的臨時(shí)制備的喹唑啉化合物。在所有情況中，最終劑量形式應(yīng)為無毒的，并在制備和儲(chǔ)藏條件下是流體和穩(wěn)定的。液體載體或運(yùn)載體可為溶劑或例如包含水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇、液體聚乙二醇等)、植物油、無毒甘油酯及其合適混合物的液體分散介質(zhì)。例如，通過形成脂質(zhì)體、通過在分散情況下保持所需的粒徑或通過使用表面活性劑可保持合適流動(dòng)性。通過多種抗菌劑和抗真菌劑例如對(duì)羥基苯甲酸酯(parabens)、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫汞撒(thimerosal)等可導(dǎo)致阻止微生物的作用。在許多情況中，其優(yōu)選包括等滲劑如糖、緩沖劑或氯化鈉。通過在組合物中使用延長(zhǎng)吸收劑如單硬脂酸鋁和明膠可引起可注射組合物的延長(zhǎng)吸收。
通過將喹唑啉化合物以所需量與如果所需的上面列舉的多種其他組分并入到合適溶劑中，隨后過濾殺菌制得無毒的可注射溶液。在制備無毒可注射溶液的無毒粉末情況中，優(yōu)選的制備方法是真空干燥和冷凍干燥工藝，其產(chǎn)生了活性組分加上在先前無毒過濾溶液中存在的任何其他所希望的組分的粉末。
對(duì)于局部給予，可以純形式給予喹唑啉化合物。然而，通常希望將其以組合物或制劑與可為固體或液體的皮膚病學(xué)可接受載體一起給予到皮膚。
有用的固體載體包括細(xì)碎固體如滑石、粘土、微晶纖維素、二氧化硅、氧化鋁等。其他固體載體包括無毒聚合物納米顆?；蛭㈩w粒。有用的液體載體包括水、醇類或二醇類或水醇/二醇混合物，其中喹唑啉化合物可任選在無毒表面活性劑的補(bǔ)助下在有效水平上溶解或分散。對(duì)于設(shè)定用途，也可加入佐劑如芳香劑和其他抗微生物劑以使性能最優(yōu)化。所得液體組合物可從吸收墊料進(jìn)行施加，用來浸漬繃帶和其他敷料，或者使用泵型或氣溶膠噴霧器將其噴涂到受影響區(qū)域上。
對(duì)于直接施加到使用者的皮膚上，可與液體載體一起使用增稠劑如合成聚合物、脂肪酸、脂肪酸鹽和酯、脂肪醇、改性纖維素或改性無機(jī)材料以形成可鋪展糊劑、凝膠、軟膏、肥皂等。
可用來將喹唑啉化合物傳送到皮膚上的有用皮膚病學(xué)組合物的實(shí)例對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是已知的；例如，見Jacquet等。(U.S.專利No.4,608,392)，Geria(U.S.專利No.4,992,478)，Smith等(U.S.專利No.4,559,157)和Wortzman(U.S.專利No.4,820,508)。
可通過在動(dòng)物模型(model)的體外活性和在體內(nèi)活性上進(jìn)行比較來確定式I化合物的有用劑量。將小鼠和其他動(dòng)物的有效劑量外推到人類的方法對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是已知的；例如見U.S.專利No.4,938,949。
通常地，喹唑啉化合物在液體組合物如洗液中的濃度為約0.1-25重量％，或?yàn)榧s0.5-10重量％。在半固體或固體組合物如凝膠或粉末中的濃度可為約0.1-5重量％，或?yàn)榧s0.5-2.5重量％。
用于治療所需的喹唑啉化合物的量不但隨所選特定鹽，而且隨給藥途徑、所治療狀態(tài)的性質(zhì)和患者的年齡與狀態(tài)進(jìn)行變化，并由值班醫(yī)師或臨床醫(yī)師的判斷最后決定。
本發(fā)明試劑的有效劑量和給藥路線是常規(guī)的。試劑的準(zhǔn)確量(有效劑量)可隨著對(duì)象與對(duì)象而改變，取決于例如對(duì)象的種類、年齡、體重和常規(guī)或臨床狀態(tài)、所治療的任何紊亂的嚴(yán)重程度或機(jī)理、所用特定試劑或運(yùn)載體、給藥方法和安排等。可通過本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員已知的常規(guī)方法，經(jīng)驗(yàn)確定藥學(xué)有效劑量。例如，見The Pharmacological Basis of erapeutics，Goodman和Gilman，eds，Macmillan Publishing Co.，紐約。例如，可在細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)或在合適動(dòng)物模型中初始估計(jì)有效劑量。也可使用動(dòng)物模型來確定合適的濃度范圍和給藥路線。然后可使用該信息來確定在人類中的有效劑量和給藥路線。也可對(duì)于可比較治療劑通過類推劑量來選擇治療劑量。
可通過值班醫(yī)師考慮特定情況(如對(duì)象、疾病、所涉及疾病狀況以及治療是否是預(yù)防性的)來選擇給藥的特定方式和劑量制度(regimen)。治療可包括幾天到幾月，甚至幾年時(shí)期內(nèi)的化合物的每日或數(shù)日劑量。
通常地，然而，合適劑量可在約0.5-約100mg/kg，例如為體重每日的約10-約75mg/kg，如每天3-約50mg/kg接受者體重、6-90mg/kg/天，或在15-60mg/kg/天。例如，合適劑量可為0.5、5、10、25、50、100、250或500mg/kg體重每天。
喹唑啉化合物通常以單位劑量形式進(jìn)行給藥；例如，每單位劑量形式包含5-1000mg、10-750mg，或50-500mg的活性組分。
喹唑啉化合物可給藥達(dá)到約0.5-約75μM、約1-50μM或約2-約30μM的最大血漿濃度。示例性所希望的血漿濃度包括至少或不超過0.25、0.5、1、5、10、25、50、75、100或200μM。例如，這可通過任選在鹽水中的喹唑啉化合物的0.05-5％溶液靜脈內(nèi)注射，或包含約1-100mg喹唑啉化合物的大丸劑的口服給藥來達(dá)到。可通過連續(xù)輸注來保持所希望的血液水平以提供約0.01-5.0mg/kg/hr，例如至少或不超過0.005、0.01、0.1、2.5、5.0或10.0mg/kg/hr?；蛘撸赏ㄟ^包含約0.4-15mg/kg，例如至少或不超過0.25、0.5、1.0、5.0、10.0、15.0或25.0mg/kg的喹唑啉化合物的間歇輸注得到該水平。
喹唑啉化合物可方便地以單一劑量或作為合適間隔給藥的分割劑量，例如作為2、3、4或更多亞-劑量每天而存在?？蓪?劑量本身進(jìn)一步分割成例如多個(gè)離散的寬松隔開的給藥；例如從吸藥器的多個(gè)吸入或通過施加數(shù)滴到眼睛中。
將喹唑啉瞄準(zhǔn)(targeting)細(xì)胞在示例性實(shí)施方式中，將喹唑啉化合物瞄準(zhǔn)所希望治療的細(xì)胞，例如瞄準(zhǔn)人類癌細(xì)胞。通過將化合物結(jié)合到特別連接了所希望細(xì)胞的目標(biāo)部分而將化合物瞄準(zhǔn)所希望細(xì)胞，由此可對(duì)結(jié)合分子進(jìn)行定向給藥(directingadministration)。有用的目標(biāo)部分是特別連接了細(xì)胞抗原的配體或細(xì)胞表面配體，例如針對(duì)B細(xì)胞抗原的抗體、CD19(例如B43)等。
為了形成本發(fā)明的共軛物，目標(biāo)部分在喹唑啉化合物上共價(jià)鍵合到位點(diǎn)上。將經(jīng)常為多肽分子的目標(biāo)部分在活性位點(diǎn)連接本發(fā)明化合物上，其包括NH2、SH、CHO、COOH等。使用特定連接劑以連接化合物。根據(jù)附著目標(biāo)部分的活性位點(diǎn)來選擇連接劑。
選擇用于將目標(biāo)部分附著到本發(fā)明化合物上的合適連接劑和活性位點(diǎn)的方法是已知的，并例如描述在Hermanson等，Bioconjugate Techniques，Academic Press，1996；Hermanson等，Immobilized Affinity Ligand Techniques，Academic Press，1992；和Pierce Catalog and Handbook，1996，pp.T155-T201。
實(shí)施例參考下面實(shí)施例將進(jìn)一步闡明本發(fā)明，其用來舉例說明一些優(yōu)選實(shí)施方式，以及并非以任何方式限制本發(fā)明。
實(shí)施例1-6.喹唑啉衍生物的合成所有化學(xué)品均購(gòu)自Aldrich Chemical Company，Milwaukee，Wis.，并直接使用用于合成。作為氮?dú)庀碌拇_信密封瓶裝從Aldrich獲得無水溶劑如乙腈、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、四氫呋喃、氯仿和二氯甲烷并使用套管轉(zhuǎn)移到反應(yīng)容器中。
物理性質(zhì)熔點(diǎn)未校正。使用Bruker 300MHz分光計(jì)在DMSO-d6、CDCl3、乙腈-d3或丙酮-d6中記錄1H NMR光譜。使用四甲基硅烷(TMS)作為在0ppm處的內(nèi)標(biāo)以每百萬之一(ppm)記錄化學(xué)位移。以赫茲給出耦合常數(shù)(J)，和縮寫s、d、t、q和m分別代表單峰、雙重峰、三重峰、四重峰和多重峰。在預(yù)涂覆硅膠板(Silica Gel KGF；Whitman Inc.)上進(jìn)行TLC。使用硅膠(200-400目，Whitman Inc.)用于所有柱色譜分離。所有化學(xué)品是試劑純級(jí)并購(gòu)自Aldrich Chemical Company(Milwaukee，Wis.)或Sigma Chemical Company(St.Louis，Mo.)。
實(shí)施例1.N4-苯基，N6-二取代喹唑啉化合物如路線圖1中所述合成并表征N4-苯基，N6-二取代喹唑啉衍生物。結(jié)構(gòu)和物理數(shù)據(jù)示于如下 R1＝a3-氯-4-溴，b3-溴表1 表2
N’-(2-氰基-4-硝基-苯基)-N，N-二甲基-甲脒(化合物2)的制備-將15g 5-硝基鄰氨基苯甲腈(化合物1，92mmol)加入在200ml氯仿中的25ml的N，N-二甲基甲酰胺中，并在170℃下將反應(yīng)混合物加熱回流5小時(shí)。在室溫下冷卻反應(yīng)混合物30分鐘并在4℃下冷卻1小時(shí)后，用二乙基醚洗滌固體殘留物，得到19.23g化合物2(產(chǎn)率，96％)。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ8.48(s，1H)，8.27(s，1H)，7.38(s，1H)，3.06(s，3H)，3.17(s，3H)。
化合物3b的制備-在120℃下將10g化合物2(45.82mmol)和8.7g 3-溴苯胺(50.5mmol)在50ml乙酸中的溶液加熱回流8小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物后，用二乙基醚洗滌固體殘留物，得到11.8g化合物3b(產(chǎn)率，75％)。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ9.67(s，1H)，8.79(s，1H)，8.58(s，1H)，8.20(s，1H)，7.98(d，2H，J＝21Hz)，7.93(d，2H，J＝9.0Hz)。
化合物4b的制備-在120℃下將10g化合物3b、6-硝基-4-(3-溴苯基苯胺)喹唑啉(28mmol)、30ml乙酸和7.8g Fe(114mmol)在100ml乙醇中的溶液加熱回流8小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物后，用水和乙醇洗滌固體殘留物。使用SiO2柱色譜(硅膠230-400目)純化粗固體，得到5.5g化合物4b(產(chǎn)率，60％)。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ8.38(s，1H)，8.23(s，1H)，7.78(s，1H)，7.32(m，4H)，7.21(m，4H)，5.52(s，2H)。
化合物5b(RX-1010)的制備-在二氯甲烷中混合化合物4a、1.2當(dāng)量的2，5-二甲氧基苯甲醛和1.2當(dāng)量的三乙酰氧基硼氫化鈉，并將混合物在室溫下攪拌8小時(shí)。減壓除去溶劑并用SiO2柱色譜(硅膠230-400目)純化粗固體，得到化合物5b。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.60(s，1H)，8.01(s，1H)，7.74(t，2H，J＝8.0Hz)，7.21(m，5H)，6.82(m，4H)，4.42(s，2H)，3.88(s，3H)，3.75(s，3H)。
化合物RX-1025的制備-化合物4b與3，5-二甲氧基苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1025。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ8.39(s，1H)，8.18(s，1H)，7.90(s，1H)，7.54(d，1H，J＝9.0Hz)，7.36(m，4H)，6.64(s，2H)，6.38(s，1H)，5.7(s，1H)，4.37(s，2H)，3.71(s，6H)。
化合物RX-1057的制備-化合物4a與1-萘甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1057。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.42(s，1H)，7.86(m，3H)，7.54(m，7H)，7.07(t，1H，J＝7.0Hz)，6.94(m，2H)，4.68(s，2H)。
化合物RX-1058的制備-化合物4a與4-異丙基苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1058。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ9.42(s，1H)，8.36(s，1H)，8.14(d，1H，J＝3.0Hz)，7.85(t，1H，J＝6.0Hz)，7.53(d，1H，J＝9.0Hz)，7.39(m，7H)，6.69(s，1H)，4.38(s，2H)，2.92(t，1H，J＝6.0Hz)，1.18(d，6H，J＝9.0Hz)。
化合物RX-1059的制備-化合物4a與2，4-二甲氧基苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1050。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ9.45(s，1H)，8.36(s，1H)，8.14(d，1H，J＝9.0Hz)，7.81(d，1H，J＝6.0Hz)，7.54(d，1H，J＝9.0Hz)，7.43(m，2H)，7.27(s，1H)，6.96(t，2H，J＝9.0Hz)，6.83(t，1H，J＝8.0Hz)，6.51(s，1H)，4.36(s，2H)，3.79(s，3H)，3.65(s，3H)。
化合物RX-1066的制備-化合物4a與4-丙氧基苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1066。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.54(d，1H，J＝6.0Hz)，7.87(t，1H，J＝3.0Hz)，7.68(d，1H，J＝9.0Hz)，7.45(m，1H)，7.25(d，1H，J＝9.0Hz)，7.13(m，2H)，6.89(d，1H，J＝9.0Hz)，6.75(s，1H)，4.19(s，2H)，3.91(t，2H，J＝12.0Hz)，1.81(m，2H)，1.25(m，2H)，1.05(t，3H，J＝9.0Hz)。
化合物RX-1070的制備-化合物4a與2-芐氧基苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1070。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ9.45(s，1H)，8.36(s，1H)，8.12(d，1H，J＝6.0Hz)，7.86(s，1H)，7.36(m，11H)，7.11(d，1H，J＝9.0Hz)，6.93(s，1H)，6.54(s，1H)，5.20(s，2H)，4.47(s，2H)。
化合物RX-1071的制備-化合物4a與3-[3-(三氟甲基)苯氧基]苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1071。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.58(s，1H)，7.86(d，1H，J＝9.0Hz)，7.72(d，1H，J＝6.0Hz)，7.35(m，10H)，6.72(s，1H)，4.38(s，2H)。
化合物RX-1074的制備-化合物4a與間甲苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1074。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ9.42(s，1H)，8.37(s，1H)，8.14(d，1H，J＝6.0Hz)，7.85(m，1H)，7.54(d，1H，J＝9.0Hz)，7.28(m，6H)，7.15(s，1H)，6.72(s，1H)，4.39(d，2H，J＝6.0Hz)，2.30(s，3H)。
化合物RX-1078的制備-化合物4a與2-甲氧基-1-萘甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1078。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.61(s，1H)，7.87(m，6H)，7.40(m，3H)，7.10(d，2H，J＝6.0Hz)，6.91(s，1H)，4.61(s，2H)，3.97(s，3H)。
化合物RX-1082的制備-化合物4a與3，5-二甲氧基苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1082。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ9.41(s，1H)，8.37(s，1H)，8.16(s，1H)，7.95(m，1H)，7.37(m，4H)，6.64(t，1H，J＝7.0Hz)，6.39(s，2H)，6.25(s，1H)，4.37(d，2H，J＝12.0Hz)，3.72(s，6H)。
化合物RX-1083的制備-化合物4a與異丁醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1083。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.58(s，1H)，7.90(t，1H，J＝3.0Hz)，7.54(d，1H，J＝6.0Hz)，7.15(t，1H，J＝9.0Hz)，6.70(t，2H，J＝3.0Hz)，6.62(s，1H)，2.98(d，2H，J＝6.0Hz)，2.05(m，1H)，1.02(t，6H，J＝9.0Hz)。
化合物RX-1086的制備-化合物4a與3-甲氧基苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1086。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.58(s，1H)，7.88(d，1H，J＝6.0Hz)，7.73(d，1H，J＝9.0Hz)，7.51(s，2H)，7.31(m，1H)，7.15(m，2H)，6.96(m，2H)，6.82(d，1H，J＝3.0Hz)，6.70(s，1H)，4.37(s，2H)，3.80(s，3H)。
化合物RX-1089的制備-化合物4a與3-(4-氯苯氧基)苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1089。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.52(s，1H)，7.99(s，1H)，7.86(t，1H，J＝6.0Hz)，7.66(m，2H)，7.26(m，3H)，7.12(m，3H)，7.07(s，1H)，6.90(m，3H)，4.33(s，2H)。
化合物RX-1090的制備-化合物4a與3-吡啶甲醛(3-pyridinecarboxaldehyde)如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1090。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ9.42(s，1H)，8.36(s，1H)，8.15(d，1H，J＝3.0Hz)，7.83(t，1H，J＝3.0Hz)，7.52(d，1H，J＝6.0Hz)，7.44(t，2H，J＝9.0Hz)，7.27(d，1H，J＝9.0Hz)，7.14(s，1H)，6.23(m，1H)，4.11(m，2H)。
化合物RX-1092的制備-化合物4a與2，6-二甲氧基苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1092。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ9.46(s，1H)，8.37(s，1H)，8.21(d，1H，J＝6.0Hz)，7.91(m，1H)，7.48(m，2H)，7.31(m，3H)，6.72(d，2H，J＝6.0Hz)，4.28(s，2H)，3.85(s，6H)。
化合物RX-1093的制備-化合物4a與4-芐氧基苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1093。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ9.41(s，1H)，8.36(s，1H)，8.16(t，1H，J＝6.0Hz)，7.92(t，1H，J＝6.0Hz)，7.55(d，2H，J＝9.0Hz)，7.34(m，10H)，7.00(d，2H，J＝6.0Hz)，6.66(s，1H)，5.08(s，2H)，4.35(s，2H)。
化合物RX-1096的制備-化合物4a與3-芐氧基苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1096。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.55(s，1H)，7.88(d，1H，J＝6.0Hz)，7.71(d，1H，J＝9.0Hz)，7.35(m，9H)，6.98(m，2H)，6.66(m，3H)，6.65(s，1H)，5.05(s，2H)，3.33(s，2H)。
化合物RX-1098的制備-化合物4a與3-(4-甲氧基苯氧基)苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1098。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.58(s，1H)，7.93(d，1H，J＝6.0Hz)，7.71(d，1H，J＝9.0Hz)，7.61(s，1H)，7.48(d，1H，J＝6.0Hz)，7.26(m，2H)，7.15(m，2H)，7.02(d，1H，J＝6.0Hz)，6.95(m，3H)，6.85(m，3H)，6.71(s，1H)，4.58(s，1H)，4.29(s，2H)，3.78(s，3H)。
化合物RX-1099的制備-化合物4a與3-(甲基苯氧基)苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1099。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.55(s，1H)，7.84(t，1H，J＝6.0Hz)，7.68(d，1H，J＝9.0Hz)，7.44(s，1H)，7.27(d，1H，J＝6.0Hz)，7.11(m，5H)，6.99(m，4H)，6.77(s，1H)，4.22(s，2H)，2.31(s，3H)。
化合物RX-1100的制備-化合物4a與2，5-二甲基苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1100。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.59(s，1H)，7.97(d，1H，J＝3.0Hz)，7.74(d，1H，J＝9.0Hz)，7.58(m，2H)，7.28(s，1H)，7.13(m，5H)，6.73(d，1H，J＝3.0Hz)，4.26(s，2H)，2.33(s，6H)。
化合物RX-1140的制備-化合物4b與2-芐氧基苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1140。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ9.42(s，1H)，8.38(s，1H)，8.15(s，1H)，7.86(d，1H，J＝6.0Hz)，7.56(d，1H，J＝9.0Hz)，7.48(d，2H，J＝6.0Hz)，7.32(m，9H)，7.11(d，2H，J＝9.0Hz)，6.92(t，1H，J＝6.0Hz)，6.53(s，1H)，5.20(s，2H)，4.48(d，2H，J＝6.0Hz)。
化合物RX-1141的制備-化合物4b與3-[3-(三氟甲基)苯氧基]苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1141。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.50(s，1H)，7.98(s，1H)，7.62(m，2H)，7.35(m，3H)，7.13(m，5H)，7.04(s，2H)，6.94(d，1H，J＝9.0Hz)，6.74(s，1H)，4.33(s，2H)。
化合物RX-1142的制備-化合物4b與鄰甲苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1142。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.49(s，1H)，8.01(s，1H)，7.64(m，2H)，7.31(m，1H)，7.23(m，5H)，7.02(d，1H，J＝9.0Hz)，6.77(s，1H)，4.27(s，2H)，2.38(s，3H)。
化合物RX-1143的制備-化合物4b與3-甲基苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1143。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ9.37(s，1H)，8.37(s，1H)，8.16(s，1H)，7.90(d，1H，J＝6.0Hz)，7.54(d，1H，J＝9.0Hz)，7.29(m，7H)，7.06(s，1H)，6.69(t，1H，J＝6.0Hz)，4.39(d，2H，J＝6.0Hz)，2.28(s，3H)。
化合物RX-1144的制備-化合物4b與4-聯(lián)苯基-甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1144。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ9.40(s，1H)，8.38(s，1H)，8.17(s，1H)，7.89(d，1H，J＝6.0Hz)，7.66(m，4H)，7.56(m，3H)，7.36(m，6H)，7.24(s，1H)，6.81(t，1H，J＝6.0Hz)，4.50(d，2H，J＝9.0Hz)。
化合物RX-1145的制備-化合物4b與1，4-苯并二烷-6-甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1145。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.59(s，1H)，7.96(s，1H)，7.83(s，1H)，7.65(m，2H)，7.15(m，3H)，6.80(m，4H)，4.46(s，1H)，4.22(s，4H)，4.11(s，2H)。
化合物RX-1146的制備-化合物4b與3-(4-氯苯氧基)苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1146。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ9.35(s，1H)，8.39(s，1H)，8.14(s，1H)，7.86(d，1H，J＝6.0Hz)，7.56(d，1H，J＝6.0Hz)，7.32(m，8H)，7.13(s，1H)，6.94(m，3H)，6.83(t，1H，J＝7.0Hz)，4.46(d，2H，J＝6.0Hz)。
化合物RX-1147的制備-化合物4b與2-硝基苯甲醛如上制備化合物5b所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1147。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ9.35(s，1H)，8.35(s，1H)，8.09(m，2H)，7.67(m，3H)，7.56(m，2H)，7.37(m，2H)，7.14(s，1H)，6.89(t，1H，J＝6.0Hz)，4.80(d，2H，J＝6.0Hz)。
實(shí)施例2.4-取代的氨基喹唑啉化合物路線2
Ra＝6-NO2、b＝6-H、c＝6-Br、d＝7-F、e＝5-Me、f＝6-I表3 表4
表5 表6 表7
表8 化合物7a的制備-將18.2g化合物6a(100mmol)在76.5g(64mmol)甲酰胺中的溶液在120～125℃下加熱回流4小時(shí)。減壓除去溶劑并將粗固體在乙醇中重結(jié)晶，得到12.7g化合物7a(產(chǎn)率87％)。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ8.13(m，2H)，7.84(m，1H)，7.68(m，1H)，7.55(m，1H)。
化合物8a的制備-在0℃攪拌下將7.3g化合物7a(50mmol)滴加到230ml亞硫酰氯(2mol)中。向混合物中加入2～3滴N，N-二甲基甲酰胺，并在回流下加熱3～4小時(shí)。減壓除去亞硫酰氯并用碳酸鈉洗滌所得殘留物。產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取，有機(jī)層用MgSO4干燥并減壓濃縮。使用SiO2柱色譜(硅膠230-400目)純化粗產(chǎn)物，得到6.47g化合物8a(產(chǎn)率，79％)。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ9.03(s，1H)，8.18(m，1H)，7.99(m，1H)，7.89(m，1H)，7.70(m，1H)。
化合物RX-1122的制備-將30mg化合物8a(0.18mmol)和1.2當(dāng)量的2，4，6-三甲基苯胺在乙腈中的溶液加熱回流8小時(shí)。減壓除去有機(jī)溶劑，并用SiO2柱色譜(硅膠230-400目)純化粗固體，得到化合物RX-1122。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ9.08(s，1H)，8.74(s，1H)，8.56(d，1H，J＝9.0Hz)，8.00(d，1H，J＝3.0Hz)，7.71(s，1H)，7.03(s，2H)，2.35(s，3H)，2.23(s，6H)。
化合物RX-1123的制備-化合物8a與α-甲基芐胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1123。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.76(s，1H)，8.52(d，1H，J＝6.0Hz)，7.94(d，1H，J＝9.0Hz)，7.42(m，5H)，6.26(d，1H，J＝9.0Hz)，5.69(t，1H，J＝9.0Hz)，1.76(d，3H，J＝6.0Hz)。
化合物RX-1137的制備-化合物8a與3-氟苯乙胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1137。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.80(s，1H)，8.63(s，1H)，8.53(d，1H，J＝9.0Hz)，7.96(d，1H，J＝9.0Hz)，7.33(m，1H)，7.02(m，3H)，6.11(s，1H)，4.02(q，2H，J＝15.0Hz，J＝6.0Hz)。
化合物RX-1160的制備-化合物8b與α-甲基芐胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1160。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.68(s，1H)，7.86(d，1H，J＝8.24Hz)，7.75(m，2H)，7.50-7.31(m，6H)，5.92(d，1H，J＝6.08Hz)，5.66(t，1H，J＝6.90Hz)，1.72(m，3H)。
化合物RX-1169的制備-化合物8b與苯乙胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1169。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.71(s，1H)，7.87(d，1H，J＝6.0Hz)，7.75(t，1H，J＝3.0Hz)，7.54(t，1H，J＝6.0Hz)，7.35(m，5H)，5.78(s，1H)，3.97(t，2H，J＝9.0Hz)，3.06(t，2H，J＝9.0Hz)。
化合物RX-0183的制備-化合物8b與4-苯基丁胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-0183。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.68(s，1H)，7.82(d，1H，J＝9.0Hz)，7.70(t，1H，J＝7.0Hz)，7.39(t，1H，J＝6.0Hz)，7.27(d，1H，J＝6.0Hz)，7.21(m，5H)，6.21(s，1H)，3.72(d，2H，J＝3.0Hz)，2.77(t，2H，J＝9.0Hz)，2.08(t，2H，J＝8.0Hz)。
化合物RX-1195的制備-化合物8b與3-氟苯乙胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1195。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.70(s，1H)，7.84(d，1H，J＝9.0Hz)，7.74(t，1H，J＝7.0Hz)，7.61(d，1H，J＝6.0Hz)，7.44(t，1H，J＝3.0Hz)，7.28(t，1H，J＝9.0Hz)，7.02(m，3H)，5.95(s，1H)，3.96(t，2H，J＝9.0Hz)，3.05(t，2H，J＝9.0Hz)。
化合物RX-1230的制備-化合物8c與1-萘甲胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1230。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.79(s，1H)，8.06(t，1H，J＝9.0Hz)，7.93(m，2H)，7.77(m，3H)，7.54(m，4H)，5.88(s，1H)，5.28(s，2H)。
化合物RX-1236的制備-化合物8c與α-甲基芐胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1236。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.65(s，1H)，7.92(s，1H)，7.77(d，1H，J＝9.0Hz)，7.70(d，1H，J＝9.0Hz)，7.37(m，5H)，6.09(d，1H，J＝9.0Hz)，5.64(t，1H，J＝6.0Hz)，1.70(s，3H)。
化合物RX-1242的制備-化合物8c與3-氟苯乙胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1242。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.69(s，1H)，7.79(m，2H)，7.70(d，1H，J＝9.0Hz)，7.28(t，1H，J＝8.0Hz)，6.96(m，3H)，5.94(s，1H)，3.92(m，2H)，3.05(t，2H，J＝6.0Hz)。
化合物RX-1243的制備-化合物8c與苯乙胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1243。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.69(s，1H)，7.75(m，3H)，7.36(m，2H)，7.28(m，2H)，5.86(s，1H)，3.93(t，2H，J＝6.0Hz)，3.05(t，2H，J＝6.0Hz)。
化合物RX-1251的制備-化合物8c與4-苯基丁胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1251。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.67(s，1H)，7.87(d，1H，J＝15.5Hz)，7.79(m，2H)，7.30(m，2H)，7.20(m，3H)，5.93(s，1H)，3.68(t，2H，J＝9.0Hz)，2.69(t，2H，J＝9.0Hz)，1.77(m，4H)。
化合物RX-1260的制備-化合物8c與2-(三氟甲基)芐胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1260。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.66(s，1H)，7.96(s，1H)，7.79(t，1H，J＝6.0Hz)，7.63(m，3H)，7.52(t，1H，J＝6.0Hz)，7.39(t，1H，J＝6.0Hz)，6.51(s，1H)，5.07(d，1H，J＝3.0Hz)。
化合物RX-1277的制備-化合物8c與4-氟苯胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1277。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.75(s，1H)，8.10(s，1H)，7.88(d，1H，J＝9.0Hz)，7.80(d，1H，J＝9.0Hz)，7.68(m，2H)，7.56(s，1H)，7.13(t，1H，J＝6.0Hz)。
化合物RX-1279的制備-化合物8c與4-氯-2-氟苯胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1279。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.80(s，1H)，8.48(t，1H，J＝6.0Hz)，8.07(s，1H)，7.89(d，1H，J＝6.0Hz)，7.80(d，1H，J＝9.0Hz)，7.68(s，1H)，7.22(m，2H)。
化合物RX-1294的制備-化合物8d與4-氟苯乙胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1294。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.65(s，1H)，7.65(t，1H，J＝3.0Hz)，7.45(t，1H，J＝6.0Hz)，7.28(d，1H，J＝6.0Hz)，7.20(t，1H，J＝5.0Hz)，6.97(m，3H)，6.07(s，1H)，3.94(m，2H)，3.04(t，2H，J＝9.0Hz)。
化合物RX-1297的制備-化合物8d與苯乙胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1297。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.65(s，1H)，7.60(t，1H，J＝6.0Hz)，7.42(t，1H，J＝6.0Hz)，7.32(m，2H)，7.28(m，3H)，7.16(t，1H，J＝6.0Hz)，6.02(s，1H)，3.92(m，2H)，3.04(t，2H，J＝9.0Hz)。
化合物RX-1541的制備-化合物8e與4-氟苯乙胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1541。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.06(s，1H)，7.66(t，1H，J＝6.0Hz)，7.52(t，1H，J＝6.0Hz)，7.30(t，1H，J＝6.0Hz)，7.15(d，1H，J＝9.0Hz)，7.01(m，3H)，6.02(s，1H)，3.06(t，2H，J＝9.0Hz)，2.61(s，3H)。
化合物RX-1567的制備-化合物8e與α-甲基芐胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1567。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.56(s，1H)，7.68(d，1H，J＝6.0Hz)，7.55(t，1H，J＝6.0Hz)，7.36(m，4H)，7.21(t，1H，J＝6.0Hz)，7.19(t，1H，J＝7.0Hz)，6.31(s，1H)，5.60(t，1H，J＝7.0Hz)，2.90(s，3H)，1.68(d，3H，J＝9.0Hz)。
化合物RX-1573的制備-化合物8e與4-苯基丁胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1573。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.58(s，1H)，7.71(d，1H，J＝9.0Hz)，7.55(t，1H，J＝6.0Hz)，7.30(t，1H，J＝6.0Hz)，7.18(m，5H)，6.10(s，1H)，3.66(d，2H，J＝6.0Hz)，2.84(s，3H)，2.70(d，2H，J＝6.0Hz)，1.78(m，4H)。
化合物RX-1656的制備-化合物8f與3-(三氟甲基)芐胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1656。1H-NMR(300MHz，d6-丙酮)δ8.61(d，1H，J＝6.0Hz)，8.55(s，1H)，8.30(s，1H)，8.05(t，1H，J＝8.0Hz)，7.77(m，2H)，7.56(m，3H)，5.00(d，2H，J＝3.0Hz)。
化合物RX-1659的制備-化合物8f與環(huán)己胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1659。1H-NMR(300MHz，d6-丙酮)δ8.55(d，1H，J＝3.0Hz)，8.51(s，1H)，8.00(m，1H)，7.50(d，1H，J＝9.0Hz)，7.38(d，1H，0.02)，4.28(t，1H，J＝8.0Hz)，2.07(m，4H)，1.80(m，3H)，1.39(m，3H)。
化合物RX-1664的制備-化合物8f與2-氯苯胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1664。1H-NMR(300MHz，d6-丙酮)δ7.41(d，1H，J＝6.0Hz)，7.20(s，1H)，6.82(t，1H，J＝6.0Hz)，6.24(d，1H，J＝6.0Hz)，6.13(m，2H)，6.00(m，2H)。
化合物RX-1668的制備-化合物8f與3-苯乙胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1668。1H-NMR(300MHz，d6-丙酮)δ8.53(d，1H，J＝12.0Hz)，8.48(s，1H)，8.00(t，1H，J＝7.0Hz)，7.85(s，1H)，7.50(d，1H，J＝9.0Hz)，7.30(m，1H)，7.09(m，2H)，6.93(m，1H)，3.90(m，2H)，3.00(m，2H)。
化合物RX-1670的制備-化合物8f與4-苯丁胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1670。1H-NMR(300MHz，d6-丙酮)δ8.51(s，2H)，8.01(t，1H，J＝6.0Hz)，7.67(s，1H)，7.50(d，1H，J＝9.0Hz)，7.20(m，5H)，3.68(m，2H)，2.66(t，2H，J＝6.0Hz)，1.74(m，4H)。
化合物RX-1674的制備-化合物8f與1-萘甲胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1674。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.77(s，1H)，8.00(d，1H，J＝6.0Hz)，7.94(m，4H)，7.53(m，5H)，5.84(s，1H)，5.37(d，2H，J＝3.0Hz)。
化合物RX-1675的制備-化合物8f與苯乙胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1675。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.61(s，1H)，7.94(m，2H)，7.55(t，1H，J＝6.0Hz)，7.32(m，5H)，5.93(s，1H)，3.90(m，2H)，3.03(t，2H，J＝9.0Hz)。
化合物RX-1679的制備-化合物8f與α-甲基芐胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1679。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.65(d，1H，J＝3.0Hz)，8.08(s，1H)，7.92(d，1H，J＝9.0Hz)，7.53(m，1H)，7.38(m，5H)，6.00(d，1H，J＝6.0Hz)，5.61(t，1H，J＝9.0Hz)，1.67(m，3H)。
化合物RX-1682的制備-化合物8f與2-(三氟甲基)芐胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1682。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.70(s，1H)，8.07(s，1H)，7.97(t，1H，J＝6.0Hz)，7.58(m，5H)，6.16(s，1H)，5.08(t，2H，J＝9.0Hz)。
化合物RX-1701的制備-化合物8f與4-氯-2-氟苯胺如上制備化合物RX-1122所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1701。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ9.35(s，1H)，8.95(s，1H)，8.40(d，1H，J＝9.0Hz)，7.80(d，1H，J＝9.0Hz)，7.69(d，1H，J＝12.0Hz)，7.59(t，1H，J＝9.0Hz)，7.45(d，1H，J＝9.0Hz)。
實(shí)施例3.6，7-二甲氧基-4-取代的氨基喹唑啉化合物路線3
表9 化合物11的制備-將9.85g化合物10(5mmol)和6.8g甲脒鹽酸鹽(85mmol)的溶液在210℃下加熱回流15分鐘。冷卻到80℃后，將溶液用飽和氫氧化鈉堿化并用正己烷和水洗滌，得到6.59g化合物11(產(chǎn)率64％)。
1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ7.98(s，1H)，7.42(s，1H)，7.11(s，1H)，3.89(d，6H)。
化合物12的制備-在0℃攪拌下將2.06g化合物11(10mmol)滴加到47ml亞硫酰氯(0.4mol)中。向混合物中加入2～3滴N，N-二甲基甲酰胺并加熱回流3-4小時(shí)。減壓除去亞硫酰氯并用碳酸鈉洗滌所得殘留物。產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取，并將有機(jī)層用MgSO4干燥并減壓濃縮。使用SiO2柱色譜(硅膠230-400目)純化粗產(chǎn)物，得到0.58g化合物12(產(chǎn)率，26％)。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ8.88(s，1H)，7.46(s，1H)，7.40(s，1H)，4.01(d，6H)。
化合物RX-1707的制備-將30mg化合物12(0.13mmol)和1.2當(dāng)量的α-甲基芐胺在乙腈中的溶液加熱回流8小時(shí)。減壓除去有機(jī)溶劑并用SiO2柱色譜(硅膠230-400目)純化粗固體，得到化合物RX-1707。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.56(s，1H)，7.47(d，2H，J＝6.0Hz)，7.36(m，3H)，7.20(s，1H)，6.86(s，1H)，5.65(s，1H)，5.55(s，1H)，3.99(s，6H)，1.70(m，3H)。
化合物RX-1715的制備-化合物12與4-苯基丁胺如上制備化合物RX-1707所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1715。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.56(s，1H)，7.27(t，2H，J＝9.0Hz)，7.20(m，4H)，6.94(s，1H)，5.82(s，1H)，3.93(s，6H)，3.67(d，2H，J＝6.0Hz)，2.67(m，2H0，1.75(m，4H)。
化合物RX-1728的制備-化合物12與3-氟苯乙胺如上制備化合物RX-1707所述反應(yīng)，隨后在SiO2上色譜分離，得到化合物RX-1728。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.57(s，1H)，7.28(t，1H，J＝6.0Hz)，7.17(s，1H)，6.99(d，1H，J＝9.0Hz)，6.92(m，3H)，6.04(s，1H)，3.90(m，8H)，3.03(t，2H，J＝12.0Hz)。
實(shí)施例4.6，7-二乙氧基-4-取代的氨基喹唑啉化合物路線4
表10 化合物15的制備-在0℃攪拌下，向在90ml無水四氫呋喃中30g 3，4-二羥基苯甲酸(0.19mol)中加入225ml 4.0M氫氧化鈉，然后在0℃攪拌下滴加入32.7ml乙基碘(0.409mol)。將混合物在室溫下攪拌5分鐘并加熱到100℃，直到TLC不再檢測(cè)到起始原料。冷卻和用正己烷洗滌后，用1N-HCl將溶液酸化到pH 2，并用乙酸乙酯洗滌，得到37g化合物15(產(chǎn)率，90％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.28(s，1H)，6.82(s，1H)，6.71(s，1H)，4.13(m，4H)，1.46(m，6H)。
化合物16的制備-在-25℃攪拌下向11.4ml氯化錫(IV)(0.097mol)和0.1ml發(fā)煙硝酸(0.155mol)在100ml二氯甲烷中的混合物中滴加在100ml二氯甲烷中的17g化合物15(0.08mol)。5分鐘后，加入200ml水并用二氯甲烷和乙酸乙酯萃取產(chǎn)物。有機(jī)層用MgSO4干燥并濃縮，得到化合物16(16.4g，85％)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.28(s，1H)，6.82(s，1H)，4.13(m，4H)，1.46(m，6H)。
化合物17的制備-將化合物16(8g，0.033mol)在甲醇(30ml)中的溶液用5％Pd/C氫化并通過Celite過濾。減壓除去溶劑，并用SiO2柱色譜(硅膠230-400目)純化粗殘留物，得到化合物17(5.0g，67％)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.28(s，1H)，7.12(s，2H)，6.14(s，1H)，4.13(m，4H)，1.46(m，6H)。
化合物18的制備-在210℃下，將化合物17(5g，0.22mol)和甲脒鹽酸鹽(500mg，0.356mol)的溶液加熱回流15分鐘。冷卻到80℃后，溶液用0.33M氫氧化鈉(5ml)進(jìn)行堿化并用正己烷和水洗滌，得到化合物18(4.2g，81％)。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ8.27(s，1H)，7.42(s，1H)，7.09(s，1H)，4.19(m，4H)，1.38(m，6H)。
化合物19的制備-在0℃攪拌下，向4.2g化合物18(18mmol)中滴加52ml亞硫酰氯(0.72mol)。減壓除去亞硫酰氯并用碳酸鈉洗滌所得殘留物。產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取，和有機(jī)層用MgSO4干燥并減壓濃縮。用SiO2柱色譜(硅膠230-400目)純化粗產(chǎn)物，得到1.5g化合物19(產(chǎn)率，33％)。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ8.27(s，1H)，7.42(s，1H)，7.09(s，1H)，4.19(m，4H)，1.38(m，6H)。
化合物RX-1758的制備-在110℃下將化合物19和1.2當(dāng)量的α-甲基芐胺在乙腈中的溶液加熱回流8小時(shí)。減壓蒸去溶劑，并用SiO2柱色譜(硅膠230-400目)純化粗殘留物，得到化合物RX-1758。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.51(s，1H)，7.78(s，1H)，7.36(m，5H)，6.89(s，1H)，5.66(m，1H)，4.18(m，4H)，1.53(m，6H)，0.85(m，3H)。
化合物RX-1763的制備-化合物19與3-(三氟甲基)芐胺如上制備化合物RX-1758所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1763。
1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ8.50(s，1H)，8.29(s，1H)，7.62(m，5H)，7.07(s，1H)，4.82(d，2H，J＝3.0Hz)，4.13(m，4H)，1.35(m，6H)。
化合物RX-1766的制備-化合物19與苯乙胺如上制備化合物RX-1758所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1766。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.71(s，1H)，7.43(m，5H)，7.32(s，1H)，6.89(s，1H)，4.37(m，2H)，4.22(m，2H)，4.07(m，2H)，3.18(t，2H，J＝12.0Hz)，1.65(m，6H)。
化合物RX-1767的制備-化合物19與4-苯基丁胺如上制備化合物RX-1758所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1767。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.70(s，1H)，7.42(m，6H)，7.00(s，1H)，5.55(s，1H)，4.36(m，4H)，3.82(d，2H，J＝6.0Hz)，2.86(d，2H，J＝0.02Hz)，1.87(m，4H)，1.68(m，6H)。
化合物RX-1777的制備-化合物19與3，5-二甲氧基芐胺如上制備化合物RX-1758所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1777。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.58(s，1H)，7.28(s，1H)，7.19(s，1H)，6.92(s，1H)，6.56(d，1H，J＝3.0Hz)，6.41(s，1H)，4.79(d，2H，J＝6.0Hz)，4.22(m，4H)，3.78(s，6H)，1.52(m，6H)。
化合物RX-1779的制備-化合物19與2-氟芐胺如上制備化合物RX-1758所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1779。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.58(s，1H)，7.48(t，1H，J＝8.0Hz)，7.15(m，4H)，6.92(s，1H)，5.87(s，1H)，4.93(d，2H，J＝6.0Hz)，4.18(m，4H)，1.53(m，6H)。
化合物RX-1792的制備-化合物19與2-氯-6-氟芐胺如上制備化合物RX-1758所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1792。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.59(s，1H)，7.19(m，3H)，6.96(m，2H)，5.91(s，1H)，5.01(m，2H)，4.19(t，2H，J＝8.0Hz)，4.05(t，2H，J＝9.0Hz)，1.50(m，6H)。
化合物RX-1798的制備-化合物19與2-氯芐胺如上制備化合物RX-1758所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1798。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ8.28(s，1H)，7.69(s，1H)，7.45(s，1H)，7.28(d，2H，J＝3.0Hz)，7.09(s，1H)，4.81(d，2H，J＝3.0Hz)，4.16(m，4H)，1.37(m，6H)。
化合物RX-1799的制備-化合物19與4-氯芐胺如上制備化合物RX-1758所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1799。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.55(s，1H)，7.30(m，4H)，7.18(s，1H)，6.96(s，1H)，6.05(s，1H)，4.84(d，2H，J＝3.0Hz)，4.15(m，4H)，1.53(m，6H)。
實(shí)施例5.3H-咪唑[4，5-g]喹唑啉化合物路線5

表11 化合物22的制備-在0℃攪拌下，將化合物21(10g，62mmol)加入到濃硫酸(50ml)和發(fā)煙硝酸(50ml)的冷卻溶液中，并將混合物在室溫下攪拌，隨后在冷卻和傾倒進(jìn)冰水中之前，加熱回流1小時(shí)。收集沉淀物，得到化合物22(8.47g，66％)。
化合物23的制備-將化合物22(5g，0.024mol)在干燥甲醇(80ml)中的溶液用5％Pd/C氫化，通過Celite過濾并用N，N-二甲基甲酰胺洗滌。減壓蒸去溶劑，得到化合物23(3.4g，82％)。
化合物24的制備-將化合物23(4g，22.5mmol)和甲酰胺(1.8mg，38.3mmol)的溶液在120～125℃下加熱回流2小時(shí)。冷卻后產(chǎn)物用乙醇進(jìn)行重結(jié)晶，得到化合物24(3.6g，87％)。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ8.78(s，1H)，8.52(s，1H)，8.34(s，1H)，7.98(s，1H)。
化合物25的制備-將在吡啶(80ml)中的化合物24(1.7g，9.1mmol)和五硫化磷(4.04g，18.2mmol)的混合物加熱回流16小時(shí)并減壓除去吡啶。殘留物用沸水處理，將黃色沉淀物過濾收集并溶解在0.1M NaOH溶液中。過濾除去不溶物后，溶液用NH4Cl中和并減壓蒸發(fā)溶劑，得到化合物25(1.0g，59％)。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ8.87(s，1H)，8.61(s，1H)，8.09(s，1H)，7.81(m，1H)。
化合物26的制備-在0℃下向在50％MeOH/水(50ml)中的化合物25(1克，4.93mmol)和1N NaOH(6.9ml)的溶液中滴加MeI(0.73g，5.1mmol)，并將混合物在室溫下攪拌0.5～1小時(shí)。溶液用1N鹽酸中和并減壓除去溶劑。粗殘留物用SiO2柱色譜(硅膠230-400目)純化，得到化合物26(0.32g，39％)。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ8.86(s，1H)，8.61(s，1H)，8.41(s，1H)，8.10(s，1H)，2.77(s，3H)。
化合物RX-1805的制備-將化合物26(30mg，0.14mmol)、1.5當(dāng)量的4-丁基苯胺和1.5當(dāng)量的4-丁基苯胺·HCl在異丙醇(20ml)中的混合物加熱回流8小時(shí)。冷卻后減壓除去溶劑。用SiO2柱色譜(硅膠230-400目)純化所得殘留物，得到化合物RX-1805。1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.75(s，1H)，8.55(s，1H)，8.44(s，1H)，7.95(s，1H)，7.60(d，2H，J＝9.0Hz)，7.00(d，2H，J＝9.0Hz)，2.65(m，2H)，2.05(m，2H)，1.33(m，2H)，0.96(m，3H)。
化合物RX-1806的制備-化合物26與對(duì)異丙基苯胺如上制備化合物RX-1805所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1806。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.75(s，1H)，8.55(s，1H)，8.44(s，1H)，7.95(s，1H)，7.60(d，2H，J＝9.0Hz)，7.00(d，2H，0.03)，2.92(m，1H)，1.21(s，6H)。
化合物RX-1807的制備-化合物26與對(duì)甲氧基苯胺如上制備化合物RX-1805所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1807。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.75(s，1H)，8.55(s，1H)，8.44(s，1H)，7.95(s，1H)，7.60(d，2H，J＝9.0Hz)，7.00(d，2H，J＝9.0Hz)，3.83(s，3H)。
化合物RX-1810的制備-化合物26與對(duì)乙基苯胺如上制備化合物RX-1805所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1810。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.75(s，1H)，8.55(s，1H)，8.44(s，1H)，7.95(s，1H)，7.60(d，2H，J＝9.0Hz)，7.00(d，2H，J＝9.0Hz)，2.70(m，2H)，1.27(m，2H)。
化合物RX-1813的制備-化合物26與3-氟苯乙基苯胺如上制備化合物RX-1805所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1813。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.43(m，3H)，7.88(s，1H)，7.38(t，1H，J＝6.0Hz)，7.07(m，2H)，6.89(t，1H，J＝7.0Hz)，3.89(m，2H)，3.07(m，2H)。
化合物RX-1815的制備-化合物26與苯胺如上制備化合物RX-1805所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1815。1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.76(s，1H)，8.53(s，1H)，8.45(s，1H)，7.96(s，1H)，7.75(d，2H，J＝6.0Hz)，7.42(t，2H，J＝8.0Hz)，7.21(t，1H，J＝6.0Hz)。
化合物RX-1818的制備-化合物26與2，4，6-三氟甲基苯胺如上制備化合物RX-1805所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1818。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.56(s，1H)，8.37(s，1H)，8.16(s，1H)，7.75(s，1H)，7.00(s，2H)，2.34(s，3H)，2.21(s，6H)。
化合物RX-1819的制備-化合物26與2-甲基苯胺如上制備化合物RX-1805所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1819。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.77(s，1H)，8.56(s，1H)，8.39(s，1H)，8.00(s，1H)，7.29(m，4H)，2.22(s，3H)。
化合物RX-1828的制備-化合物26與苯乙胺如上制備化合物RX-1805所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1828。1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.46(s，1H)，8.41(d，2H，J＝3.0Hz)，7.89(s，1H)，7.27(m，5H)，3.87(m，2H)，3.08(m，2H)。
化合物RX-1834的制備-化合物26與異丙胺如上制備化合物RX-1805所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1834。1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.56(s，1H)，8.46(s，1H)，8.37(s，1H)，7.86(s，1H)，4.60(m，1H)，1.35(s，6H)。
化合物RX-1835的制備-化合物26與4-甲基苯乙胺如上制備化合物RX-1805所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1835。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.47(s，1H)，8.41(s，2H)，7.89(s，1H)，7.10(m，4H)，3.85(m，2H)，3.32(m，2H)，2.29(s，3H)。
化合物RX-1840的制備-化合物26與α-甲基芐胺如上制備化合物RX-1805所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1840。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.69(s，1H)，8.48(s，1H)，8.34(s，1H)，7.88(s，1H)，7.40(m，5H)，5.87(m，1H)，1.67(m，3H)。
化合物RX-1842的制備-化合物26與4-苯基丁胺如上制備化合物RX-1805所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1842。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.45(d，2H，J＝3.0Hz)，8.37(s，1H)，7.86(s，1H)，7.19(m，5H)，3.66(m，2H)，2.67(m，2H)，1.76(m，4H)。
實(shí)施例6.1-甲基-2，3-二氫-1H-咪唑[4，5-g]喹唑啉化合物路線6
表12 化合物29的制備-在0℃攪拌下，將化合物28(50g，0.45mol)滴加到濃硫酸(180ml)和發(fā)煙硝酸(125ml)的冷卻溶液中，并在冷卻和傾倒到冰水上前，將混合物在室溫下攪拌30分鐘。收集所得沉淀物，過濾，并溶解中乙酸乙酯中。有機(jī)溶液用飽和NaCl洗滌、MgSO4干燥，并減壓蒸發(fā)。用CH2Cl2/己烷重結(jié)晶固體殘留物，得到化合物29(63g，70％)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.23(s，1H)，7.35(s，1H)，2.76(s，3H)。
化合物30的制備-向溶解在濃硫酸(280ml)中的化合物29(29.5g，0.15mol)的冷卻溶液中滴加溶解在水(25ml)中的CrO3(35.4g，2.4當(dāng)量，0.35mol)20分鐘。混合物在室溫下攪拌4小時(shí)，并用乙酸乙酯萃取產(chǎn)物。有機(jī)層用飽和NaHCO3洗滌，MgSO4干燥并濃縮，得到化合物30(17.3g，50％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.59(s，1H)，7.61(s，1H)。
化合物31的制備-向溶解在乙醇(100ml)中的15g化合物30(65mmol)中加入30ml 40％的甲胺水溶液。通過過濾收集沉淀的固體并用乙醇洗滌，得到化合物31(15.7g，86％)。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ8.98(s，1H)，8.78(s，1H)，7.14(s，1H)，3.06(s，3H)。
化合物32的制備-將化合物31(15g，62mmol)在包含2滴DMF的SOCl2(100ml)的溶液加熱回流2小時(shí)。減壓除去過量的SOCl2，得到化合物32(15.3g，95％)。
化合物33的制備-在0℃下，向在CH2Cl2(100ml)中的15g化合物32(57.7mmol)中加入在異丙醇(1.5當(dāng)量，86.6mmol)中的43ml 2M氨水中。將混合物攪拌1小時(shí)并減壓除去溶劑。用EtOH/CH2Cl2重結(jié)晶固體殘留物，得到化合物33(13.9g，85％)。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ8.95(s，1H)，8.81(s，1H)，8.12(s，1H)，7.83(s，1H)，7.03(s，1H)，3.10(s，3H)。
化合物34的制備-在30psi下，將化合物33(13g，54mmol)在包含甲酸(25ml)的乙醇(100ml)中的懸浮液用5％Pd/C(470mg)進(jìn)行氫化并通過Celite過濾。蒸發(fā)溶劑得到化合物34(9.7g，95％)。
化合物35的制備-將化合物34(9g，50mmol)在HCOOH(100ml)中的溶液加熱回流2小時(shí)。減壓除去過量的HCOOH，并將殘留物用1N-HCl溶解，通過Celite過濾并用濃氨水堿化。過濾收集所得固體，得到化合物35(5g，50％)。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ8.51(s，1H)，8.34(s，1H)，8.00(s，1H)，7.90(s，1H)，3.96(s，3H)。
化合物36的制備-將在干燥吡啶(40ml)中的化合物35(2.5g，12.5mmol)和2當(dāng)量五硫化磷(5.55g，25mmol)的混合物加熱回流16小時(shí)，并減壓除去吡啶。殘留物用沸水處理，將所得黃色沉淀物過濾收集并溶解在0.1MKOH溶液中。過濾除去不溶物后，溶液用飽和NH4Cl中和并減壓蒸發(fā)溶劑，得到化合物36(1.1g，41％)。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ8.92(s，1H)，8.65(s，1H)，8.22(s，1H)，8.17(s，1H)，4.01(s，3H)。
化合物37的制備-在0℃下，向化合物36(1g，4.6mmol)和1N KOH(1.4當(dāng)量，6.44ml)在50％MeOH/水(20ml)中的溶液中滴加MeI(0.7g，5.0mmol)，并將混合物在室溫下攪拌0.5～1小時(shí)。溶液用1N HCl中和并減壓除去溶劑。粗產(chǎn)物用SiO2柱色譜(硅膠230-400目)純化，得到化合物37(0.26g，25％)。1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)δ8.93(s，1H)，8.67(s，1H)，8.23(s，1H)，8.21(s，1H)，4.01(s，3H)，2.74(s，3H)。
化合物RX-1857的制備-將在異丙醇(20ml)中的化合物37(20mg，0.087mmol)、1.5當(dāng)量2-氟苯乙胺(17μl，0.131mmol)和1.5當(dāng)量2-氟苯乙胺鹽酸鹽(23mg，0.131mmol)的混合物加熱回流8小時(shí)。冷卻后減壓除去溶劑。所得殘留物用SiO2柱色譜(硅膠230-400目)純化，得到化合物RX-1857(8.4mg，30％)。1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.42(s，2H，J＝3.0Hz)，8.27(s，1H)，7.99(s，1H)，7.08(m，2H)，6.83(m，2H)，4.01(s，3H)，3.92(m，2H)，3.14(m，2H)。
化合物RX-1860的制備-化合物37與對(duì)乙基苯胺如上制備化合物RX-1857所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1860。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.96(s，1H)，8.58(d，2H，J＝9.0Hz)，7.96(s，1H)，7.61(d，2H，J＝9.0Hz)，7.21(d，2H，J＝9.0Hz)，4.01(s，3H)，2.59(m，2H)，1.17(m，3H)。
化合物RX-1873的制備-化合物37與2，5-二氟芐胺如上制備化合物RX-1857所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1873。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.46(m，3H)，8.05(s，1H)，7.17(m，2H)，7.08(s，1H)，4.95(s，2H)，4.03(s，3H)。
化合物RX-1881的制備-化合物37與3-氟芐胺如上制備化合物RX-1857所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1881。1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.39(s，2H)，8.30(s，1H)，7.98(s，1H)，7.28(m，3H)，7.06(s，1H)，4.91(s，2H)，3.99(s，3H)。
化合物RX-1892的制備-化合物37與4-苯基丁胺如上制備化合物RX-1857所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1892。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.43(s，1H)，8.38(t，2H，J＝8.0Hz)，7.99(s，1H)，7.22(m，5H)，4.00(s，3H)，3.75(m，2H)，2.92(m，2H)，2.68(m，4H)。
化合物RX-1894的制備-化合物37與3-氟苯乙胺如上制備化合物RX-1857所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1894。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.43(s，2H)，8.29(s，1H)，8.00(s，1H)，7.31(m，1H)，7.04(m，3H)，3.99(s，3H)，3.91(m，2H)，3.09(m，2H)。
化合物RX-1895的制備-化合物37與苯胺如上制備化合物RX-1857所述反應(yīng)，隨后在SiO2上進(jìn)行色譜分離，得到化合物RX-1895。1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ8.77(s，2H)，8.55(d，2H，J＝3.0Hz)，8.11(s，1H)，7.81(d，2H，J＝9.0Hz)，7.47(m，2H)，7.31(t，1H，J＝7.0Hz)，4.09(s，3H)。
實(shí)施例7.喹唑啉化合物的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用癌細(xì)胞系的生長(zhǎng)在該研究中用來確定喹唑啉化合物效果的癌細(xì)胞系從如下來源中得到來自American Type Culture Collection(ATCC)(Manassas，AV)的人類OVCAR-3(卵巢)、MCF-7(乳房，依賴于激素)、Hs 578T(乳房)、MDA-MB-231(乳房)、HeLa(子宮頸)、PC3(前列腺)、HepG2(肝)、A549(肺)、Caki-1(腎)、HT-29(結(jié)腸)、HCT116(結(jié)腸)和PANC-1(胰腺)；來自Riken(日本)的U251(腦)；來自DSMZ(德國(guó))的MKN-45(胃)；來自United States National CnancerInstitute(Bethesda，MD)的UMRC2(腎)和Lox IMVI(黑素瘤)。除Hs 578T、MDA-MB-231、HCT116、UMRC2、Ckai-1和PANC-1外的所有細(xì)胞系在補(bǔ)充10％牛胎血清(“FBS”)、1mM丙酮酸鈉、10mM HEPES和100U/ml的青霉素和100μg/ml的鏈霉素(“P/S”)的RPMI1640培養(yǎng)基(Invitrogen，Carlsbad，CA)中生長(zhǎng)。Hs 578T、MDA-MB-231、HCT116、UMRC2、Caki-1和PANC-1細(xì)胞保持在補(bǔ)充10％FBS、P/S、10mM HEPES和2mM L-谷氨酰胺的Dulbecco’s改性的Eagle’s培養(yǎng)基(“DMEM”，Invitrogen)中。所有細(xì)胞在潮濕的5％CO2中于37℃下培養(yǎng)。
細(xì)胞生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)評(píng)價(jià)了取代喹唑啉衍生化合物對(duì)各種人類腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用。也研究了化合物上特定取代基的相對(duì)關(guān)系。與作為對(duì)比的DMSO一起測(cè)試了如上制備的取代喹唑啉衍生化合物。
使用Sulforhodamine B(“SRB”)法(Skehan等，J.National Cancer Institute，821107-112(1990))進(jìn)行各種化合物對(duì)15種人類腫瘤細(xì)胞系的生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)。簡(jiǎn)潔地，將指數(shù)生長(zhǎng)的腫瘤細(xì)胞系以2-3×103細(xì)胞/孔的密度種植在96-孔板中，并于次日用喹唑啉化合物進(jìn)行處理。每個(gè)處理使用三倍孔(triplicatewells)。在37℃下于潮濕的5％CO2環(huán)境中使用各種化合物培養(yǎng)細(xì)胞96小時(shí)。培養(yǎng)96小時(shí)后，用10％三氯乙酸(“TCA”)固定細(xì)胞，在4℃培養(yǎng)1小時(shí)并用自來水洗滌3次。隨后將細(xì)胞用在1％乙酸中的0.4％硫氰酸鹽B著色30分鐘，用1％乙酸洗滌4次，并再次空氣干燥。在10mM三甲醇氨基甲烷溶液中攪拌5分鐘后，使用Benchmark Plus Microplate reader(Bio-RadLaboratories，Hercules，CA)在530nm處測(cè)量每孔的吸收率。
在每孔中將OD530值轉(zhuǎn)化成活細(xì)胞數(shù)，將OD530值與用于每個(gè)細(xì)胞系而產(chǎn)生的標(biāo)準(zhǔn)OD530-與-細(xì)胞數(shù)的曲線進(jìn)行比較。使用下式計(jì)算存活百分比％存活＝活細(xì)胞數(shù)[測(cè)試]/活細(xì)胞數(shù)[對(duì)比]×100使用非線性回歸分析計(jì)算IC50值。
使用QSAR和組合化學(xué)工藝，分析了包括示于上面表1-12中化合物的大量化合物。所分析的化合物在約1μM濃度處針對(duì)至少三種細(xì)胞系，MCF-7、HepG2和MKN-45進(jìn)行篩選。選擇對(duì)這些細(xì)胞系中的至少一種顯示活性的化合物進(jìn)行進(jìn)一步篩選。列于表1-12的化合物顯示用于治療應(yīng)用的基本活性。從這些化合物中，選擇36個(gè)化合物作為廣譜抗增殖劑進(jìn)行進(jìn)一步評(píng)價(jià)。
使用36個(gè)所選擇喹唑啉化合物的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用(IC50，μM)示于下面表13和14中
表13
*＞3.0uM表14
*＞3.0uM示于表13和14中的化合物對(duì)寬范圍的腫瘤細(xì)胞系顯示出活性。各種化合物具有如顯著小于2μM或2.5μM的IC50值確定的活性，一些具有低于1.0μM或甚至0.5μM的活性。特別地，RX-0183在三種細(xì)胞系PANC-1、Hs 578T和UMRC2中具有等于或小于約0.1μM的IC50，并在9種其他細(xì)胞系中具有顯著活性。化合物RX-1142實(shí)際在所有細(xì)胞系中具有顯著活性，在所測(cè)量15種細(xì)胞系的7種中具有IC50＜0.5μM，對(duì)MD-MB-231具有特別高的活性(IC50＝0.14μM)。對(duì)于RX-1675也觀察到了小于1μM的活性。化合物RX-1792和RX-1834在低濃度下顯示出寬活性，在幾乎所有測(cè)試細(xì)胞系中具有IC50＜1μM。特別地RX-1834的IC50在4種測(cè)試細(xì)胞系中＜0.2μM。RX-1798也顯示出廣譜活性，在評(píng)價(jià)的15種細(xì)胞系的11種中具有IC50＜2μM，和在8種細(xì)胞系中IC50＜1μM?？蓮谋?3和14中看出，測(cè)試的其他化合物中的多種對(duì)多種細(xì)胞系顯示出IC50＜1μM，在多種中IC50＜0.5μM。IC50值小于或等于2.5μM、2.0μM、1.5μM、1.0μM或0.5μM可反映顯著的治療活性。因此表13和14化合物的IC50反映出顯著的治療活性。
實(shí)施例8.體外異種移植(ex vivo Xanograft)研究為了觀察在動(dòng)物模型中腫瘤生長(zhǎng)的抑制作用，使用RX-0183進(jìn)行了裸鼠的體外異種移植研究。合適的人類癌細(xì)胞系是那些已測(cè)試用來抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)的那些，和特別優(yōu)選的是結(jié)腸癌HCT116。對(duì)在裸鼠中皮下注射的腫瘤異種移植評(píng)價(jià)了RX-0183的抗腫瘤功效，和在RX-0183處理后測(cè)量了腫瘤體積。
在第0天，將HCT116細(xì)胞懸浮液(在0.1ml RPMI中的2×106個(gè)細(xì)胞)皮下注射到六周齡雄性無胸腺鼠(BALB/c nu/nu)的右脅腹。用HCT116細(xì)胞懸浮液注射相當(dāng)數(shù)量的小鼠使得選擇體積范圍盡可能小的腫瘤用于處理起始日的試驗(yàn)。在第10天用RX-0183開始處理前，使腫瘤在尺寸上達(dá)到60-65mm3。將具有合適尺寸范圍內(nèi)腫瘤的動(dòng)物分配成多個(gè)處理組。將RX-0183溶解在PBS中的10％DMSO中，和溶劑單獨(dú)作為對(duì)比。從第10天開始到第35天結(jié)束，通過每周三次腹膜內(nèi)注射來給予所有研究藥物(對(duì)比，RX01831mg/kg/天，RX-01833mg/kg/天)。為了量化腫瘤生長(zhǎng)，每3-5天使用卡尺測(cè)量腫瘤的三個(gè)垂直直徑，以及對(duì)于毒性監(jiān)測(cè)小鼠的體重。使用式腫瘤體積(mm3)＝(寬度)×(長(zhǎng)度)×(高度)×π/6來計(jì)算腫瘤體積。
每組動(dòng)物中的腫瘤體積(平均±SEM)示于圖1中，其顯示了作為對(duì)抗HCT116人類結(jié)腸癌異種移植的RX-0183的功效指標(biāo)的腫瘤體積的測(cè)量值。RX-0183處理是沒有死亡的良好忍受的，并觀察到不大于1g體重的波動(dòng)。35天后，與對(duì)比樣相比，在用RX-0183以1和3mg/kg處理的小鼠中腫瘤體積顯著減小。
在本說明書中說明和描述的實(shí)施方式僅用來教導(dǎo)本領(lǐng)域技術(shù)人員以發(fā)明人已知的最佳方式來實(shí)現(xiàn)和使用本發(fā)明。在本說明書中沒有什么可認(rèn)為是用來限制本發(fā)明的范圍。提供的所有實(shí)施例是代表性的和非限制性的?？紤]到上述教導(dǎo)，如本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員所理解的，可對(duì)本發(fā)明的上述實(shí)施方式進(jìn)行改性或改變而不脫離本發(fā)明。因此可以理解，在權(quán)利要求及其等價(jià)的范圍內(nèi)，可以與特定描述不同的方式來實(shí)施本發(fā)明。
權(quán)利要求
1.治療高增殖性紊亂的方法，包括對(duì)需要如此治療的對(duì)象給予包含下式化合物，或其藥學(xué)可接受鹽的組合物，從而治療高增殖性紊亂 其中(R1)n選自6-NHCH2R3、H、6-硝基、6-溴、6-碘、7-氟、5-甲基、6，7-二甲氧基、6，7-二乙氧基、咪唑[4，5-g]-和3-甲基咪唑[4，5-g]-；和R3選自-CH(CH3)2和Ar，其中Ar選自(a)4-取代的苯基，其中4-取代基選自-CH(CH3)2、-OCH2Ph、-OCH2CH2CH3和-Ph；(b)3-取代的苯基，其中3-取代基選自甲氧基、4-氯苯氧基、芐氧基、4-甲氧基苯氧基、4-甲基苯氧基、3-三氟甲基苯氧基和甲基；(c)2-取代的苯基，其中2-取代基選自甲基、硝基和芐氧基；(d)二取代的苯基，其選自2，4-二甲氧基苯基、2，6-二甲氧基苯基、2，5-二甲氧基苯基、3，5-二甲氧基苯基、2，5-二甲基苯基和4，4-亞乙基二氧基；(e)吡啶-3-基；和(f)萘-1基，任選在2-位上被甲氧基取代；和(i)當(dāng)(R1)n是6-NHCH2R3時(shí)，則R2選自3-溴苯基、3-氯-4-氟苯基，和(ii)當(dāng)(R1)n是H、6-硝基、6-溴、7-氟或5-甲基時(shí)，則R2選自(a)環(huán)己基；(b)取代的苯基，選自2，4，6-三甲基苯基、2-氟-4-氯苯基、4-氟苯基和2-氯苯基；(c)CH2Ar，其中Ar選自萘-1-基；2-三氟甲基苯基和3-三氟甲基苯基；(d)(CH2)2Ar，其中Ar選自苯基、3-氟苯基和4-氟苯基；(e)α-甲基芐基；和(f)4-苯基丁基；(iii)當(dāng)(R1)n是6，7-二甲氧基或6，7-二乙氧基時(shí)，則R2選自(a)(CH2)mAr，其中，m是1、2或4，和當(dāng)m＝1時(shí)，Ar選自2-氯苯基、4-氯苯基、2-氟苯基、2-氯-6-氟苯基、3-三氟甲基苯基和3，5-二甲氧基苯基；當(dāng)m＝2時(shí)，則Ar選自苯基和3-氟苯基，和當(dāng)m＝4時(shí)，Ar是苯基；和(b)α-甲基芐基；和(iv)當(dāng)(R1)n是咪唑[4，5-g]和3-甲基咪唑[4，5-g]時(shí)，則R2選自(a)異丙基；(b)苯基，任選在2-位上被甲基或在4-位上被選自甲氧基、乙基、異丙基和正丁基的取代基取代；(c)2，4，6-三甲基苯基；(d)CH2Ar，其中Ar選自3-氟苯基和2，5-二氟苯基；(e)(CH2)mAr，其中m是2或4，和當(dāng)m＝2時(shí)，Ar選自苯基、3-氟苯基、4-甲基苯基和當(dāng)m＝4時(shí)，Ar是苯基；和(f)α-甲基芐基。
2.權(quán)利要求1的方法，其中化合物選自其中(A)R2是3-氯-4-氟苯基和(R1)n是6-NHCH2R3，其中R3選自4-異丙基苯基和2，4-二甲氧基苯基；(B)R2是3-溴苯基和(R1)n是6-NHCH2R3，其中R3是2-甲基苯基；(C)(R1)n是6-溴或6-碘和R2選自2-(3-氟苯基)乙基、4-苯基丁基、2-苯基乙基、萘-1-基甲基、2-三氟甲基苯基甲基和2-氟-4-氯苯基；(D)(R1)n是6-硝基和R2是2，4，6-三甲基苯基；(E)(R1)n是H和R2選自2-(3-氟苯基)乙基、α-甲基芐基和4-苯基丁基；(F)(R1)n是5-甲基和R2是2-(4-氟苯基)乙基；(G)(R1)n是6-碘和R2選自3-三氟甲基苯基甲基、環(huán)己基和2-氯苯基；(H)(R1)n是6，7-二乙氧基和R2選自2-氯苯基甲基和2-氯-6-氟苯基甲基；(I)(R1)n是咪唑[4，5-g]和R2是異丙基、4-苯基丁基或在4-位上任選被選自氫、丁基、異丙基、乙基和甲氧基的取代基取代的苯基；和(J)(R1)n是3-甲基咪唑[4，5-g]和R2是2-(3-氟苯基)甲基、2-(2-氟苯基)乙基、2-(3-氟苯基)乙基和4-乙基苯基的化合物。
3.權(quán)利要求1的方法，其中所述化合物是選自其中(A)R2是3-氯-4-氟苯基或3-溴苯基和(R1)n是6-NHCH2R3，其中R3選自4-異丙基苯基、2-甲基苯基和2，4-二甲氧基苯基；(B)(R1)n是H、6-硝基、6-溴、6-碘、7-氟或5-甲基，和R2選自2-(3-氟苯基)乙基、4-苯基丁基、2-苯基乙基、萘-1-基甲基、2-三氟甲基苯基甲基、2-(4-氟苯基)乙基、2-氟-4-氯苯基、3-三氟甲基苯基甲基、環(huán)己基、2-氯苯基、2，4，6-三甲基苯基、α-甲基芐基和4-苯基丁基；(C)(R1)n是6，7-二甲氧基或6，7-二乙氧基和R2選自2-氯苯基甲基和2-氯-6-氟苯基甲基；(D)(R1)n是咪唑[4，5-g]或3-甲基咪唑[4，5-g]和R2選自異丙基、4-苯基丁基、3-氟苯基甲基、2-(2-氟苯基)乙基、2-(3-氟苯基)乙基或在4-位上任選被選自氫、丁基、異丙基、乙基和甲氧基的取代基取代的苯基，的化合物。
4.權(quán)利要求1的方法，其中所述化合物選自其中(A)R2是3-氯-4-氟苯基和(R1)n是6-NHCH2R3，其中R3是2-甲基苯基；(B)(R1)n是H和R2是4-苯基丁基；(C)R1)n是6-碘和R2是2-苯基乙基；(D)(R1)n是6，7-二乙氧基和R2選自2-氯苯基甲基和2-氯-6-氟苯基甲基；和(D)(R1)n是咪唑[4，5-g]和R2是異丙基，的化合物。
5.權(quán)利要求1的方法，其中所述化合物是
6.權(quán)利要求1的方法，其中所述高增殖性紊亂包含腫瘤。
7.權(quán)利要求1的方法，所述組合物進(jìn)一步包含藥學(xué)可接受的載體或稀釋劑。
8.權(quán)利要求6的方法，所述腫瘤選自卵巢腫瘤、卵巢的激素依賴性腫瘤、乳腺腫瘤、子宮頸腫瘤、前列腺腫瘤、肝腫瘤、肺腫瘤，腎腫瘤、結(jié)腸腫瘤、胰腺腫瘤、腦腫瘤、胃腫瘤和黑素瘤。
9.下式化合物 其中(R1)n選自6-NHCH2R3、H、6-硝基、6-溴、6-碘、7-氟、5-甲基、6，7-二甲氧基、6，7-二乙氧基、咪唑[4，5-g]-和3-甲基咪唑[4，5-g]-；和R3選自-CH(CH3)2和Ar，其中Ar選自(a)4-取代的苯基，其中4-取代基選自-CH(CH3)2、-OCH2Ph、-OCH2CH2CH3和-Ph；(b)3-取代的苯基，其中3-取代基選自甲氧基、4-氯苯氧基、芐氧基、4-甲氧基苯氧基、4-甲基苯氧基、3-三氟甲基苯氧基和甲基；(c)2-取代的苯基，其中2-取代基選自甲基、硝基和芐氧基；(d)二取代的苯基，其選自2，4-二甲氧基苯基、2，6-二甲氧基苯基、2，5-二甲氧基苯基、3，5-二甲氧基苯基、2，5-二甲基苯基和4，4-亞乙基二氧基；(e)吡啶-3-基；和(f)萘-1基，任選在2-位上被甲氧基取代；和其中(i)當(dāng)(R1)n是6-NHCH2R3時(shí)，則R2選自3-溴苯基、3-氯-4-氟苯基；(ii)當(dāng)(R1)n是H、6-硝基、6-溴、6-碘、7-氟或5-甲基時(shí)，則R2選自(a)環(huán)己基；(b)取代的苯基，選自2，4，6-三甲基苯基、2-氟-4-氯苯基、4-氟苯基和2-氯苯基；(c)CH2Ar，其中Ar選自萘-1-基；2-三氟甲基苯基和3-三氟甲基苯基；(d)(CH2)2Ar，其中Ar選自苯基、3-氟苯基和4-氟苯基；(e)α-甲基芐基；和(f)4-苯基丁基；(iii)當(dāng)(R1)n是6，7-二甲氧基或6，7-二乙氧基時(shí)，則R2選自(a)(CH2)mAr，其中，m是1、2或4，和當(dāng)m＝1時(shí)，Ar選自2-氯苯基、4-氯苯基、2-氟苯基、2-氯-6-氟苯基、3-三氟甲基苯基和3，5-二甲氧基苯基；當(dāng)m＝2時(shí)，則Ar選自苯基和3-氟苯基，和當(dāng)m＝4時(shí)，Ar是苯基；和(b)α-甲基芐基；和(iv)當(dāng)(R1)n是咪唑[4，5-g]和3-甲基咪唑[4，5-g]時(shí)，則R2選自(a)異丙基；(b)苯基，任選在2-位上被甲基取代或在4-位上被選自甲氧基、乙基、異丙基、2，4，6-三甲基和正丁基的取代基取代；(c)CH2Ar，其中Ar選自3-氟苯基和2，5-二氟苯基；(d)(CH2)mAr，其中m是2或4，和當(dāng)m＝2時(shí)，Ar選自苯基、3-氟苯基、4-甲基苯基和當(dāng)m＝4時(shí)，Ar是苯基；和(e)α-甲基芐基，條件是(a)當(dāng)R2是(CH2)2Ph或芐基時(shí)，(R1)n不是H、6-硝基、6-溴或6-碘；(b)當(dāng)(R1)n是H時(shí)，R2不是(CH2)4Ph、α-甲基芐基或2-氯苯基；(c)當(dāng)(R1)n是溴時(shí)，R2不是α-甲基芐基；(d)當(dāng)(R1)n是6，7-二甲氧基和R2是(CH2)mAr時(shí)，則(i)當(dāng)m＝1時(shí)，Ar不是2-氯苯基或3-氟甲基苯基；和(ii)當(dāng)m＝2時(shí)，Ar不是苯基；和(e)當(dāng)(R1)n是6，7-二甲氧基時(shí)，R2不是α-甲基芐基。
10.權(quán)利要求9的化合物，選自具有(A)R2＝3-氯-4-氟苯基和(R1)n＝6-NHCH2R3，其中R3選自4-異丙基苯基和2，4-二甲氧基苯基；(B)R2＝3-溴苯基和(R1)n＝6-NHCH2R3，其中R3是2-甲基苯基；(C)(R1)n＝6-溴或6-碘和R2選自2-(3-氟苯基)乙基、4-苯基丁基、萘-1-基甲基、2-三氟甲基苯基甲基和2-氟-4-氯苯基；(D)(R1)n＝6-硝基和R2＝2，4，6-三甲基苯基；(E)(R1)n＝H和R2＝2-(3-氟苯基)乙基；(F)(R1)n＝5-甲基和R2＝2-(4-氟苯基)乙基；(G)(R1)n＝6-碘和R2選自3-三氟甲基苯基甲基、環(huán)己基和2-氯苯基；(H)(R1)n＝6，7-二乙氧基和R2選自2-氯苯基甲基和2-氯-6-氟苯基甲基；(I)(R1)n＝咪唑[4，5-g]和R2選自異丙基、4-苯基丁基或在4-位上任選被選自丁基、異丙基、乙基和甲氧基的取代基取代的苯基；和(J)(R1)n＝3-甲基咪唑[4，5-g]和R2選自2-(3-氟苯基)甲基、2-(2-氟苯基)乙基、2-(3-氟苯基)乙基和4-乙基苯基的化合物。
11.權(quán)利要求9的化合物，其選自具有(A)R2＝3-氯-4-氟苯基或3-溴苯基和(R1)n＝6-NHCH2R3，其中R3選自4-異丙基苯基、2-甲基苯基和2，4-二甲氧基苯基；(B)(R1)n＝H、6-硝基、6-溴、6-碘、7-氟或5-甲基，和R2選自2-(3-氟苯基)乙基、4-苯基丁基、萘-1-基甲基、2-三氟甲基苯基甲基、2-(4-氟苯基)乙基、2-氟-4-氯苯基、3-三氟甲基苯基甲基、環(huán)己基、2-氯苯基、2，4，6-三甲基苯基和4-苯基丁基；(C)(R1)n＝6，7-二甲氧基或6，7-二乙氧基和R2選自2-氯苯基甲基和2-氯-6-氟苯基甲基；(D)(R1)n＝咪唑[4，5-g]或3-甲基咪唑[4，5-g]和R2選自異丙基、4-苯基丁基、3-氟苯基甲基、2-(2-氟苯基)乙基、2-(3-氟苯基)乙基或在4-位上任選被選自氫、丁基、異丙基、乙基和甲氧基的取代基取代的苯基的化合物。
12.權(quán)利要求9的化合物，其選自具有(A)R2＝3-氯-4-氟苯基和(R1)n＝6-NHCH2R3，其中R3＝2-甲基苯基；(B)(R1)n＝6，7-二乙氧基和R2選自2-氯苯基甲基和2-氯-6-氟苯基甲基；和(C)(R1)n＝咪唑[4，5-g]和R2＝異丙基，的化合物。
13.藥物組合物，包含治療有效量的權(quán)利要求9的化合物和藥學(xué)可接受的載體或稀釋劑。
14.權(quán)利要求9化合物，相對(duì)于選自卵巢腫瘤、乳腺腫瘤、子宮頸腫瘤、前列腺腫瘤、肝腫瘤、肺腫瘤，腎腫瘤、結(jié)腸腫瘤、胰腺腫瘤、腦腫瘤、胃腫瘤和黑素瘤中的腫瘤的至少一種細(xì)胞系，具有不大于10μM的IC50。
15.權(quán)利要求14的化合物，其中所述細(xì)胞系選自卵巢腫瘤的人OVCAR-3；乳腺腫瘤的MCF-7、Hs 578T和MDA-MB-231；子宮頸腫瘤的HeLa；前列腺腫瘤的PC3；肝腫瘤的HepG2；肺腫瘤的A549；腎腫瘤的Caki-1或UMRC2；結(jié)腸腫瘤的HT-29和HCT116；胰腺腫瘤的PANC-1；腦腫瘤的U251；胃腫瘤的MKN-45和黑素瘤的Lox IMVI。
16.具有不大于1.0μM的IC50的權(quán)利要求14化合物。
17.具有不大于0.5μM的IC50的權(quán)利要求14化合物。
全文摘要
描述了由其藥學(xué)可接受鹽的通式表示的喹唑啉衍生物，及包含該化合物的組合物。也公開了使用該化合物治療高增殖性紊亂的方法。
文檔編號(hào)C07D401/12GK1956966SQ200580011782
公開日2007年5月2日 申請(qǐng)日期2005年2月17日 優(yōu)先權(quán)日2004年2月19日
發(fā)明者李永福, 安昌浩 申請(qǐng)人:雷克斯安公司