專利名稱：一種制備紅景天苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，是從女貞子中提取紅景天苷的一種制備方法。
背景技術(shù)：
紅景天苷，英文名salidroside，化學(xué)名″對(duì)羥苯乙基-β-D-吡喃葡萄糖苷(p-hydroxyphenethyl-β-D-glucoside)”，系統(tǒng)命名1-(4-羥基)苯乙基-β-D-吡喃葡萄糖苷，是一種從藥用植物中提取得到的活性化合物，紅景天苷具有增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶、改善心腦血管系統(tǒng)、抗疲勞、耐缺氧、抗衰老、增強(qiáng)免疫、抗病毒及保護(hù)臟器的作用，是一種很有開發(fā)前景的環(huán)境適應(yīng)元藥物(曲智威。紅景天的研究進(jìn)展，中國(guó)實(shí)用中西醫(yī)雜志，2005年第18卷第7期1063-1065)。目前，利用這一化合物開發(fā)的藥物主要是以天然的紅景天屬植物作為原料。但是，紅景天大部分生于海拔3500至5000米的石灰?guī)r、花崗巖、山地水川或山谷巖石上。獲取困難，價(jià)格昂貴，并且由于紅景天在醫(yī)藥、食品等工業(yè)方面的開發(fā)，消耗了大量的天然植物資源，野生植株大量被采挖，資源日趨枯竭(趙永喚，劉成海，武廷華。紅景天的研究與進(jìn)展，中國(guó)林副特產(chǎn)，1998年第3期44-45)。為了保護(hù)這一珍貴植物，近年來嘗試對(duì)紅景天屬植物進(jìn)行人工栽培，但是，人工栽培條件下的紅景天苷含量低(低于0.2％)，幼苗根腐病嚴(yán)重，而且需要占用大面積耕地，限制這一技術(shù)的推廣。細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)雖取得了較好的效果，但培養(yǎng)成本高，不易進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)。(許建峰，應(yīng)佩青，蘇志國(guó)。高山紅景天資源應(yīng)用與開發(fā)研究進(jìn)展。中草藥，1998年第29卷第3期202-205)發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供一種以中藥女貞子為原料制備紅景天苷的方法。女貞子為木犀科植物女貞(Ligustrum lucidum Ait.)的干燥果實(shí)，《神農(nóng)本草經(jīng)》列之為上品，“味苦平，主補(bǔ)中，安五臟，養(yǎng)精神，除病?！本哂凶萄a(bǔ)肝腎、強(qiáng)腰膝、明耳目的功能，主治肝腎陰虛、頭暈?zāi)垦?、耳鳴、頭發(fā)早白、腰膝酸軟等(李葆華，女貞子的研究狀況，中華醫(yī)學(xué)研究與實(shí)踐，2004年7月，第2卷第7期49-51)。女貞子的開發(fā)研究在我國(guó)很早就有開展，在古代就已開始應(yīng)用女貞子作為扶正藥物?，F(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)表明女貞子具有保肝利膽、抗菌消炎、抗腫瘤、降血脂降血糖、增強(qiáng)免疫力等多方面的藥理活性。女貞子在我國(guó)屬資源豐富的林副產(chǎn)品，分布非常廣泛，華東、華南、西南、華中等地區(qū)均有。在山區(qū)、平原、庭園都有栽種。除了野生之外，還有人工栽培的。女貞子為常綠植物，又可美化環(huán)境，特別是女貞子每年成熟一次，年年均可收獲，資源豐富，可保證長(zhǎng)期大規(guī)模開發(fā)利用。
本發(fā)明用女貞子制備紅景天苷的方法，步驟如下1.紅景天苷提取液的制備將女貞子粉碎后按常規(guī)用60-80％乙醇浸泡24小時(shí)以上，回收濾液，提取2-3次，合并濾液，回收乙醇后得紅景天苷提取液。
2.紅景天苷粗品的純化將上述提取液經(jīng)大孔吸附樹脂吸附，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，用樹脂床體積2倍量的25％-35％乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，再按同法經(jīng)大孔吸附樹脂吸附、純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性、2倍量25％-35％乙醇洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，干燥后即得紅景天苷粗品。
上述女貞子為市售中藥女貞子，所說的大孔吸附樹脂選自弱極性AB-8型大孔吸附樹脂、非極性1300型大孔吸附樹脂。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)1.無有機(jī)殘留，安全性高整個(gè)工藝方法中除了加入乙醇，無須另外的有機(jī)溶劑，乙醇很容易回收，無有機(jī)殘留，產(chǎn)品的安全性高。
2.方法簡(jiǎn)單易行，操作簡(jiǎn)便本制備方法是在常溫常壓下進(jìn)行，并且方法簡(jiǎn)單操作便捷，適合工業(yè)化大生產(chǎn)的需要。
3.原料來源廣，易獲得，價(jià)格便宜，成本低，紅景天苷提取率不低于0.3％(wt)，紅景天苷粗品中紅景天苷的含量不低于6％。
具體實(shí)施例方式
現(xiàn)結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明作詳細(xì)的描述。
實(shí)施例1將1kg女貞子粉碎后，加3kg80％乙醇，攪拌均勻并充分混合，浸泡48小時(shí)，回收濾液，提取三次，合并濾液，減壓回流回收乙醇得紅景天苷提取液；將提取液經(jīng)弱極性AB-8型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以2倍量30％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，再經(jīng)弱極性AB-8型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性沖洗后，以2倍量30％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，真空干燥后得紅景天苷粗品3.065g。所制備的紅景天苷粗品經(jīng)聚酰胺柱進(jìn)一步純化在如下色譜條件下檢測(cè)Hypersil-C18分析色譜柱(5μm，4.6mm×150mm)；流動(dòng)相甲醇-水(20∶80)；流速0.4ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)220nm；進(jìn)樣量20μl；靈敏度0.010AUFS。結(jié)果顯示制備的紅景天苷粗品與紅景天苷標(biāo)準(zhǔn)品在12min有相同的色譜峰，證實(shí)其為紅景天苷，紅景天苷粗品中紅景天苷含量為6.32％。
實(shí)施例2將1kg女貞子粉碎后，加3kg70％乙醇，攪拌均勻并充分混合，浸泡72小時(shí)，回收濾液，提取二次，合并濾液，減壓回流回收乙醇得紅景天苷提取液；將提取液經(jīng)弱極性AB-8型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以2倍量35％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，再經(jīng)弱極性AB-8型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以2倍量35％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，真空干燥后得紅景天苷粗品2.988g。所制備的紅景天苷粗品經(jīng)聚酰胺柱進(jìn)一步純化后，用實(shí)施例1所述高效液相色譜法檢測(cè)得紅景天苷粗品中紅景天苷的含量為6.03％。
實(shí)施例3將1kg女貞子粉碎后，加4kg60％乙醇，攪拌均勻并充分混合，浸泡72小時(shí)，回收濾液，提取三次，合并濾液，減壓回流回收乙醇得紅景天苷提取液；將提取液經(jīng)弱極性AB-8型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以2倍量35％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，再經(jīng)弱極性AB-8型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以2倍量35％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，真空干燥后即紅景天苷粗品3.012g。所制備的紅景天苷粗品經(jīng)聚酰胺柱進(jìn)一步純化后，用實(shí)施例1所述高效液相色譜法檢測(cè)得紅景天苷粗品中紅景天苷的含量為7.21％。
實(shí)施例4將1kg女貞子粉碎后，加4kg70％乙醇，攪拌均勻并充分混合，浸泡48小時(shí)，回收濾液，提取二次，合并濾液，減壓回流回收乙醇得紅景天苷提取液；將提取液經(jīng)弱極性AB-8型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以2倍量25％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，再經(jīng)弱極性AB-8型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以2倍量25％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，真空干燥后得紅景天苷粗品2.983g。所制備的紅景天苷粗品經(jīng)聚酰胺柱進(jìn)一步純化后，用實(shí)施例1所述高效液相色譜法檢測(cè)得紅景天苷粗品中紅景天苷的含量為6.98％。
實(shí)施例5將1kg女貞子粉碎后，加5kg70％乙醇，攪拌均勻并充分混合，浸泡48小時(shí)，回收濾液，提取三次，合并濾液，減壓回流回收乙醇得紅景天苷提取液；將提取液經(jīng)非極性1300型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以2倍量35％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，再經(jīng)非極性1300型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以2倍量35％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，真空干燥后得紅景天苷粗品2.316g。所制備的紅景天苷粗品經(jīng)聚酰胺柱進(jìn)一步純化后，用實(shí)施例1所述高效液相色譜法檢測(cè)得紅景天苷粗品中紅景天苷的含量為4.11％。
實(shí)施例6將1kg女貞子粉碎后，加4kg70％乙醇，攪拌均勻并充分混合，浸泡48小時(shí)，回收濾液，提取三次，合并濾液，減壓回流回收乙醇得紅景天苷提取液；將提取液經(jīng)弱極性AB-8型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以2倍量30％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，再經(jīng)弱極性AB-8型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以2倍量30％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，真空干燥后得紅景天苷粗品3.3g。所制備的紅景天苷粗品經(jīng)聚酰胺柱進(jìn)一步純化后，用實(shí)施例1所述高效液相色譜法檢測(cè)得紅景天苷粗品中紅景天苷的含量為7.7％。
實(shí)施例7將1kg女貞子粉碎后，加5kg70％乙醇，攪拌均勻并充分混合，浸泡48小時(shí)，回收濾液，提取三次，合并濾液，減壓回流回收乙醇得紅景天苷提取液；將提取液經(jīng)非極性1300型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以2倍量35％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，再經(jīng)非極性1300型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以2倍量35％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，真空干燥后得紅景天苷粗品2.036g。所制備的紅景天苷粗品經(jīng)聚酰胺柱進(jìn)一步純化后，用實(shí)施例1所述高效液相色譜法檢測(cè)得紅景天苷粗品中紅景天苷的含量為3.15％。
實(shí)施例8將1kg女貞子粉碎后，加4kg80％乙醇，攪拌均勻并充分混合，浸泡24小時(shí)，回收濾液，提取三次，合并濾液，減壓回流回收乙醇得紅景天苷提取液；將提取液經(jīng)弱極性AB-8型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以2倍量25％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，再經(jīng)弱極性AB-8型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以22倍量5％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，真空干燥后得紅景天苷粗品3.165g。所制備的紅景天苷粗品經(jīng)聚酰胺柱進(jìn)一步純化后，用實(shí)施例1所述高效液相色譜法檢測(cè)得紅景天苷粗品中紅景天苷的含量為6.67％。
實(shí)施例9將1kg女貞子粉碎后，加5kg60％乙醇，攪拌均勻并充分混合，浸泡48小時(shí)，回收濾液，提取三次，合并濾液，減壓回流回收乙醇得紅景天苷提取液；將提取液經(jīng)弱極性AB-8型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以2倍量25％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，再經(jīng)弱極性AB-8型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以2倍量25％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，真空干燥后得紅景天苷粗品3.206g。所制備的紅景天苷粗品經(jīng)聚酰胺柱進(jìn)一步純化后，用實(shí)施例1所述高效液相色譜法檢測(cè)得紅景天苷粗品中紅景天苷的含量為7.05％。
實(shí)施例10將1kg女貞子粉碎后，加5kg60％乙醇，攪拌均勻并充分混合，浸泡24小時(shí)，回收濾液，提取三次，合并濾液，減壓回流回收乙醇得紅景天苷提取液；將提取液經(jīng)弱極性AB-8型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以2倍量30％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，再經(jīng)弱極性AB-8型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以2倍量30％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，真空干燥后得紅景天苷粗品3.059g。所制備的紅景天苷粗品經(jīng)聚酰胺柱進(jìn)一步純化后，用實(shí)施例1所述高效液相色譜法檢測(cè)得紅景天苷粗品中紅景天苷的含量為6.82％。
實(shí)施例11將1kg女貞子粉碎后，加5kg70％乙醇，攪拌均勻并充分混合，浸泡48小時(shí)，回收濾液，提取三次，合并濾液，減壓回流回收乙醇得紅景天苷提取液；將提取液經(jīng)弱極性AB-8型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以2倍量35％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，再經(jīng)弱極性AB-8型大孔吸附樹脂吸附30min，用純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性后，以2倍量35％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，真空干燥后得紅景天苷粗品2.964g。所制備的紅景天苷粗品經(jīng)聚酰胺柱進(jìn)一步純化后，用實(shí)施例1所述高效液相色譜法檢測(cè)得紅景天苷粗品中紅景天苷的含量為7.11％。
權(quán)利要求
1.一種制備紅景天苷的方法，步驟如下(1)將藥材用乙醇溶液浸泡制備紅景天苷提取液；(2)將紅景天苷提取液純化制備紅景天苷粗品；其特征在于所說藥材為中藥女貞子，采用大孔吸附樹脂進(jìn)行純化。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紅景天苷制備方法，其特征在于所說的制備紅景天苷提取液是將女貞子粉碎后按常規(guī)用60-80％乙醇浸泡24小時(shí)以上，回收濾液，提取2-3次，合并濾液，回收乙醇后得紅景天苷提取液；所說的用大孔吸附樹脂純化提取液是將紅景天苷提取液經(jīng)大孔吸附樹脂吸附、純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性、再用樹脂床體積2倍量的25％-35％乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，再按同法經(jīng)大孔吸附樹脂吸附、純凈水沖洗至Molish反應(yīng)陰性、2倍量25％-35％乙醇洗脫，洗脫液經(jīng)回收乙醇并濃縮，干燥后即得紅景天苷粗品，大孔吸附樹脂選自弱極性大孔吸附樹脂、非極性大孔吸附樹脂。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的紅景天苷制備方法，其特征在于制備紅景天苷提取液所用的浸泡液為70％乙醇，浸泡48h，提取3次，純化時(shí)所用的大孔吸附樹脂為弱極性AB-8型大孔樹脂或非極性1300型大孔吸附樹脂，洗脫液為30％乙醇。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的紅景天苷制備方法，其特征在于純化時(shí)所用的大孔吸附樹脂為弱極性AB-8型大孔樹脂。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，是一種以女貞子為原料、采用大孔吸附樹脂純化技術(shù)制備紅景天苷粗品的方法，本發(fā)明改變了主要用藏藥植物紅景天制備紅景天苷的現(xiàn)狀，從而原料來源廣，降低了成本，提取效果好。本發(fā)明方法為用60－80％乙醇浸提粉碎女貞子得紅景天苷提取液，將其經(jīng)弱極性AB－8型大孔樹脂吸附，先以純凈水沖洗，再經(jīng)25－35％乙醇洗脫，收集洗脫液回收乙醇并濃縮后再經(jīng)弱極性AB－8型大孔樹脂吸附，經(jīng)純凈水沖洗，25－35％乙醇洗脫，回收乙醇濃縮即得紅景天苷粗品。本發(fā)明操作簡(jiǎn)便，無有機(jī)殘留，安全性高，適合工業(yè)化大生產(chǎn)的要求。
文檔編號(hào)C07H1/08GK1786011SQ200510111859
公開日2006年6月14日 申請(qǐng)日期2005年12月22日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月22日
發(fā)明者石力夫, 王丹, 胡晉紅 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)