專利名稱：一種從植物中提取多甲氧基黃酮的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥的提取方法，更具體的說，涉及從蕓香科柑桔屬植物的果實(shí)中提取多甲氧基黃酮的方法。
背景技術(shù)：
蕓香科柑桔屬植物的產(chǎn)地分布很廣，廣東、福建、四川、江蘇、浙江、江西、湖南、云南、貴州等省均有栽培。經(jīng)研究表明，在蕓香科柑桔屬植物的果實(shí)中含有氨基酸、揮發(fā)油、黃酮類、生物堿等物質(zhì)。其中黃酮為多甲氧基黃酮，主要為川陳皮素(Nobiletin，5，6，7，8，3`，4`-六甲氧基黃酮)、紅橘素(tangeretin，5，6，7，8，4`-五甲氧基黃酮)、甜橙素(seniensetin，5，6，7，3`，4`-五甲氧基黃酮)、七甲氧基黃酮(heptamethoxyflavone，3，5，6，7，8，3`，4`-七甲氧基黃酮)、異甜橙素(isosenensetin，5，7，8，3`，4`-五甲氧基黃酮)等，結(jié)構(gòu)式分別如下。
川陳皮素 紅橘素七甲氧基黃酮 甜橙素
異甜橙素經(jīng)研究表明，其中的川陳皮素和紅橘素具有抗真菌感染、治療高血壓和糖尿病、預(yù)防和治療慢性風(fēng)濕病、治療老年癡呆、減肥等多種藥用功能。而它們混合物具有抗血球凝集、抑制腫瘤細(xì)胞生長等多種藥理作用。
因此近年來，相關(guān)領(lǐng)域的研發(fā)人員在進(jìn)行從蕓香科植物，如柚子、柑桔等中直接提取多甲氧基黃酮的研究。但一直以來，存在著一些缺陷，如所提取的多甲氧基黃酮總含量不高，雜質(zhì)多，顏色較深，如中國專利《柑桔多甲氧基黃酮抗癌藥物組合物及其制備》中(公開號(hào)CN1436528A，
公開日2003年8月20日)，所提取的有效成分總含量約為30-40％，達(dá)不到注射用標(biāo)準(zhǔn)；價(jià)格高，目前市售的多甲氧基黃酮的價(jià)格較高，因此只適用于做標(biāo)準(zhǔn)品使用，作為藥品難以為廣大的患者接受。
技術(shù)方案本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)中所提取的多甲氧基黃酮總含量低的缺陷，提供一種可以從蕓香科柑桔屬植物的果實(shí)中提取高含量多甲氧基黃酮的方法，以符合注射用標(biāo)準(zhǔn)。
本發(fā)明公開了一種從蕓香科柑桔屬植物的果實(shí)中提取多甲氧基黃酮的方法，包括以下步驟1)醇提植物果實(shí)粉碎，用乙醇浸提；2)萃取回收乙醇后，加氯仿萃取后用酸萃??；再用堿萃?。徽{(diào)PH至中性；3)層析回收氯仿后，干燥，上硅膠柱，用氯仿丙酮混合液進(jìn)行洗脫；4)收集洗脫液，干燥；其中所述的植物為蕓香科柑桔屬植物。
其中所述的醇提步驟中，乙醇濃度為75％，按體積重量比計(jì)，乙醇的加入量為植物果實(shí)的3-7倍，優(yōu)選為5倍量；浸提3-6次，優(yōu)選4次；每次8-15小時(shí)，優(yōu)選12小時(shí)。
其中所述的萃取步驟中，按體積重量比計(jì)，氯仿、酸、堿的加入量均為植物果實(shí)的0.1-0.5倍，優(yōu)選0.3倍；氯仿萃取2-7次，優(yōu)選5次；酸、堿均萃取2-4次，優(yōu)選3次；酸、堿的濃度均為1-5％，優(yōu)選3％。
其中所述的萃取步驟中，酸可以選用硫酸、鹽酸，優(yōu)選鹽酸；堿可以選用氫氧化鈉、氫氧化鉀，優(yōu)選氫氧化鈉。
其中所述的層析步驟中，氯仿與丙酮的體積比為70--98∶30-2，優(yōu)選95∶5。
本發(fā)明的提取應(yīng)該在常溫下進(jìn)行，溫度高則提取得到的雜質(zhì)多，不易純化。而在萃取過程中，一定要先用酸反萃取，再用堿反萃取，除去揮發(fā)油，然后再調(diào)PH。
本發(fā)明提取的多甲氧基黃酮顏色為白色或黃白色。經(jīng)HPLC檢測，總黃酮的含量在80％以上，其中川陳皮素的含量高于34％，紅橘素的含量高于36％，達(dá)到了靜脈注射的藥用標(biāo)準(zhǔn)，可以直接藥用。當(dāng)選用的某些植物，如柑時(shí)，總黃酮可高達(dá)98％。
同時(shí)本發(fā)明也充分考慮了大規(guī)模生產(chǎn)的一些因素，生產(chǎn)工藝簡單，所以本發(fā)明的提取方法適合于工業(yè)化應(yīng)用。而且本發(fā)明制備多甲氧基黃酮生產(chǎn)成本低，目前市售的含98％的多甲氧基黃酮的價(jià)格為每克500元人民幣，而用本發(fā)明的制備工藝獲得的同樣純度的多甲氧基黃酮的價(jià)格約每公斤4000-5000元人民幣。這使得以后的藥品價(jià)格更貼近患者成為可能。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1柑的幼果粉碎后，過1厘米的篩得原料粗粉。稱取50千克粗粉放入提取罐中，在常溫下加入250升75％濃度的乙醇，浸提4次，每次浸泡12小時(shí)，每2小時(shí)循環(huán)一次，控制溫度不超過30℃。-0.08M帕條件下回收乙醇。至無醇味，將浸提液轉(zhuǎn)入萃取罐，加入15升氯仿，萃取5次。將水液排放，加入15升3％的鹽酸，萃取3次。水液排放后，加入15升3％氫氧化鈉，萃取3次。水液排放后，調(diào)PH值至中性，回收氯仿，干燥。用97∶3的氯仿丙酮溶液溶解，上硅膠柱，并用97∶3的氯仿丙酮溶液洗脫，收集黃色溶液變?yōu)闊o色以后的液體，并以薄層層析色譜跟蹤。干燥，粉碎，收總黃酮0.25千克，經(jīng)HPLC檢測，總黃酮的含量為98.6％。
實(shí)施例2甜橙干燥果皮粉碎后，過1厘米的篩得原料粗粉。稱取10公斤粗粉放入提取罐中，在常溫下加入60升80％濃度的乙醇，浸提3次，每次浸泡10小時(shí)，每2小時(shí)循環(huán)一次，控制溫度不超過30℃。-0.08M帕條件下回收乙醇。至無醇味，將浸提液轉(zhuǎn)入萃取罐，加入5升氯仿，萃取2次。將水液排放，加入5升2％的硫酸，萃取2次。水液排放后，加入5升4％氫氧化鉀，萃取2次。水液排放后，調(diào)PH值至中性，回收氯仿，干燥。用80∶20的氯仿丙酮溶液溶解，上硅膠柱，并用80∶20的氯仿丙酮溶液洗脫，收集黃色溶液變?yōu)闊o色以后的液體，并以薄層層析色譜跟蹤。干燥，粉碎，收總黃酮0.048千克。經(jīng)HPLC檢測，總黃酮的含量為86.1％。
實(shí)施例3酸橙幼果粉碎后，過1厘米的篩得原料粗粉。稱取10公斤粗粉放入提取罐中，在常溫下加入30升75％濃度的乙醇，浸提6次，每次浸泡15小時(shí)，每2小時(shí)循環(huán)一次，控制溫度不超過30℃.-0.08M帕條件下回收乙醇。至無醇味，將浸提液轉(zhuǎn)入萃取罐，加入1升氯仿，萃取7次。將水液排放，加入1升2％的硫酸，萃取6次。水液排放后，加入2升4％氫氧化鉀，萃取6次。水液排放后，調(diào)PH值至中性，回收氯仿，干燥。用95∶5的氯仿丙酮溶液溶解，上硅膠柱，并用95∶5的氯仿丙酮溶液洗脫，收集黃色溶液變?yōu)闊o色以后的液體，并以薄層層析色譜跟蹤。干燥，粉碎，收總黃酮0.047千克。經(jīng)HPLC檢測，總黃酮的含量為88.6％。
權(quán)利要求
1.一種從植物中提取多甲氧基黃酮的方法，包括以下步驟1)醇提植物果實(shí)粉碎，用乙醇浸提；2)萃取回收乙醇后，加氯仿萃取后用酸萃?。辉儆脡A萃??；調(diào)PH至中性；3)層析回收氯仿后，干燥，上硅膠柱，用氯仿丙酮混合液進(jìn)行洗脫；4)收集洗脫液，干燥；其中所述的植物為蕓香科柑桔屬植物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是所述的醇提步驟中，乙醇濃度為75％，按體積重量比計(jì)，乙醇的加入量為植物果實(shí)的3-7倍；浸提3-6次，每次8-15小時(shí)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征是所述的醇提步驟中，按體積重量比計(jì)，乙醇的加入量為植物果實(shí)的5倍；浸提4次，每次12小時(shí)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是所述的萃取步驟中，按體積重量比計(jì)，氯仿、酸、堿的加入量均為植物果實(shí)的0.1-0.5倍；氯仿萃取2-7次；酸、堿均萃取2-4次；酸、堿的濃度均為1-5％。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征是所述的萃取步驟中，按體積重量比計(jì)，氯仿、酸、堿的加入量均為植物果實(shí)的0.3倍；氯仿萃取5次；酸、堿均萃取3次；酸、堿的濃度均為3％。
6.根據(jù)權(quán)利要求1、4或5所述的制備方法，其特征是所述的萃取步驟中，酸為鹽酸，堿為氫氧化鈉。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是所述的層析步驟中，氯仿與丙酮的體積比為70-98∶30-2。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征是所述的氯仿與丙酮的體積比為95∶5。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從植物中提取多甲氧基黃酮的方法，通過醇提、萃取、層析、收集干燥等步驟從蕓香科柑桔屬中提取含量高于80％的多甲氧基黃酮。本發(fā)明的提取工藝簡單，成本低。適宜于工業(yè)化大生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07D311/00GK1683361SQ20051002430
公開日2005年10月19日 申請日期2005年3月10日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月10日
發(fā)明者潘福生, 葉杉 申請人:杭州華東醫(yī)藥集團(tuán)生物工程研究所有限公司