專利名稱：四氫喹啉衍生物及其作為fsh受體調(diào)節(jié)劑的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有FSH受體調(diào)節(jié)活性的化合物，具體地是一種四氫喹啉衍生物，還涉及含有所述化合物的藥物組合物，以及所述化合物在醫(yī)學(xué)治療中的應(yīng)用。
促性腺激素在機(jī)體的包括新陳代謝、溫度調(diào)節(jié)和生殖過程的各種功能中具有重要作用。促性腺激素作用于特定類型的生殖腺細(xì)胞，啟動卵巢和睪丸的分化和類固醇形成。例如，垂體的促性腺激素FSH(促卵泡激素)在刺激卵泡的發(fā)育和成熟中具有關(guān)鍵作用，而LH(黃體生成素)可以誘導(dǎo)排卵(Sharp，R.M.Clin Endocrinol.33787-807，1990；Dorrington和Armstrong，Recent Prog.Horm.Res.35301-342，1979)。目前，F(xiàn)SH在臨床上與LH或hCG結(jié)合應(yīng)用于卵巢刺激，也就是高度刺激卵巢以體外受精(IVF)和誘導(dǎo)不育性不排卵婦女排卵(Insler，V.，Int.J.Fertility，3385-97，1988，Navot and Rosenwaks，J.Vitro Fert.Embryo Transfer 53-13，1988)，以及還可應(yīng)用于男性性腺機(jī)能減退和男性不育癥。
促性腺激素FSH是在促性腺激素釋放激素的影響下從腺垂體中釋放的，并且是在妊娠期間由胎盤釋放出來的。在女性中，F(xiàn)SH作用于促進(jìn)卵泡發(fā)育的卵巢，因而是調(diào)節(jié)雌激素分泌的主要激素。在男性中，F(xiàn)SH決定生精小管的完整性，同時(shí)作用于支持細(xì)胞以支撐配子形成。純化FSH在臨床上被用于治療女性的不育癥和男性的某些類型的精子發(fā)生的衰竭。用于治療目的的促性腺激素可以由人尿源分離得到，但純度較低(Morse等人，Amer.J.Reproduct.Immunol.and Microbiology 17143，1988)。或者，也可以將它們制備為重組促性腺激素。重組人類FSH可商購得到，并且可用于促進(jìn)生殖(Olijve等人.Mol.Hum.Reprod.2371，1996；Devroey等人.Lancet 3391170，1992)。FSH激素的作用是通過屬于G蛋白偶聯(lián)受體大家族中的一員的特異性質(zhì)膜受體介導(dǎo)的。這些受體由單一的多肽與七個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域構(gòu)成，能夠與Gs蛋白相互作用，例如導(dǎo)致腺苷酸環(huán)化酶的活化。
FSH受體是卵泡生長過程中具有高度特異性的靶，唯一表達(dá)在卵巢中。通常是在由FSH介導(dǎo)的受體活化之后開始誘導(dǎo)阻斷這種受體或者抑制該信號的發(fā)出，這樣將干擾卵泡的發(fā)育進(jìn)而干擾排卵和生育。因而低分子量的FSH拮抗劑可能構(gòu)成了新型避孕藥的基礎(chǔ)。這類FSH拮抗劑可以引起卵泡形成減少(不排卵)，同時(shí)還可以生成足夠的雌激素以避免對例如骨質(zhì)產(chǎn)生副作用。另一方面，刺激FSH受體的化合物還可以模擬天然配體的促性腺激素效果。
本發(fā)明描述了選擇性地對FSH受體活性具有調(diào)節(jié)活性的低分子量激素類似物的制備。本發(fā)明的化合物可用作FSH受體的(部分)激動劑或(部分)拮抗劑。
因此，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，下面一類的式I四氫喹啉化合物或其可藥用鹽具有FSH調(diào)節(jié)活性 式I其中R1和R2是H、Me；R3是(2-6C)雜環(huán)烷基(1-4C)烷基、(2-5C)雜芳基(1-4C)烷基、(6C)芳基(1-4C)烷基、(1-4C)(二)烷基氨基羰基氨基(2-4C)烷基、(2-6C)雜環(huán)烷基羰基氨基(2-4C)烷基、R5-(2-4C)烷基或R5-羰基(1-4C)烷基；R4是(2-5C)雜芳基、(6C)芳基、(3-8C)環(huán)烷基、(2-6C)雜環(huán)烷基或(1-6C)烷基；以及R5是(二)(1-4C)烷基氨基、(1-4C)烷氧基、氨基、羥基、(6C)芳基氨基、(二)(3-4C)鏈烯基氨基、(2-5C)雜芳基(1-4C)烷基氨基、(6C)芳基(1-4C)烷基氨基、(二)[(1-4C)烷氧基(2-4C)烷基]氨基、(二)[(1-4C)烷基氨基(2-4C)烷基]氨基、(二)[氨基(2-4C)烷基]氨基或(二)[羥基(2-4C)烷基]氨基。
本發(fā)明化合物可以調(diào)節(jié)FSH受體的功能，因而如果它們表現(xiàn)得類似于激動劑的話，可用于與天然FSH相同的臨床目的，其優(yōu)勢在于，它們顯示出改變的穩(wěn)定性并且可以通過不同途徑給藥。如果它們阻斷于FSH受體，它們可用作例如避孕藥。
因此，本發(fā)明的FSH受體調(diào)節(jié)劑可用于治療不育癥、用于避孕以及用于治療激素依賴性疾病，例如乳腺癌、前列腺癌和子宮內(nèi)膜異位癥。
本說明書和權(quán)利要求書中所使用的下述術(shù)語表示具有下面所指出的特定含義。
本文中所使用的術(shù)語(1-4C)烷基是指具有1-4個(gè)碳原子的支鏈或無支鏈烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基和叔丁基。
本文中所使用的術(shù)語(2-4C)烷基是指具有2-4個(gè)碳原子的支鏈或無支鏈烷基，例如乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基和叔丁基。
本文中所使用的術(shù)語(1-6C)烷基是指具有1-6個(gè)碳原子的支鏈或無支鏈烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基、叔丁基和己基。優(yōu)選(1-5C)烷基，最優(yōu)選(1-4C)烷基。
本文中所使用的術(shù)語(二)(1-4C)烷基氨基是指被烷基單取代或二取代的氨基，其中所述各烷基具有1-4個(gè)碳原子，并且具有與上文定義相同的含義。
本文中所使用的術(shù)語(二)(1-4C)鏈烯基氨基是指被鏈烯基單取代或二取代的氨基，其中所述各鏈烯基具有2-4個(gè)碳原子例如烯丙基和2-丁烯基，并且具有與上文定義相同的含義。
本發(fā)明所使用的術(shù)語(3-8C)環(huán)烷基表示具有3-8個(gè)碳原子的環(huán)烷基，有環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基和環(huán)辛基。優(yōu)選(3-6C)環(huán)烷基。
術(shù)語(2-6C)雜環(huán)烷基是指具有2-6個(gè)碳原子(優(yōu)選3-5個(gè)碳原子)、同時(shí)包括至少一個(gè)選自N、O和/或S的雜原子的雜環(huán)烷基，它們可以通過雜原子相連(如果可行的話)或者通過碳原子相連。優(yōu)選的雜原子是N或O。該雜環(huán)烷基可以在碳原子、或雜原子(如果可行的話)上被甲基或乙基取代。最優(yōu)選的雜環(huán)烷基是哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、吡咯烷基和1-甲基-2-哌啶基。
術(shù)語(1-4C)烷氧基是指具有1-4個(gè)碳原子的烷氧基，其中烷基部分具有與上文定義相同的含義。優(yōu)選(1-2C)烷氧基。
本文中所使用的術(shù)語(6C)芳基是指苯基，它可以任選被一個(gè)或多個(gè)選自下面的取代基取代羥基、氨基、碘、溴、氯、氟、硝基、三氟甲基、氰基、苯基、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基、(1-4C)(二)烷基氨基、烷基、烷氧基和(二)烷基氨基，它們具有與上文定義相同的含義，例如苯基、3，5-二溴苯基、4-聯(lián)苯基、3，5-二氯苯基、3-溴-6-甲基氨基-苯基、3-氯-2，6-二甲氧基苯基和3，5-二甲基苯基。
術(shù)語(2-5C)雜芳基是指被取代或未被取代的具有2-5個(gè)碳原子、至少包括一個(gè)選自N、O和/或S的雜原子的芳族基團(tuán)，例如咪唑基、吡啶基、嘧啶基、噻吩基和呋喃基。雜芳基上的取代基可以選自對于(6C)芳基中所列舉的取代基。雜芳基可以通過碳原子或者雜原子(如果可行的話)相連。優(yōu)選的雜芳基是噻吩基、呋喃基和吡啶基。
本文中所使用的術(shù)語(2-6C)雜環(huán)烷基(1-4C)烷基是指與具有1-4個(gè)碳原子的烷基相連的具有2-6個(gè)碳原子的雜環(huán)烷基，所述雜環(huán)烷基和烷基具有與上文定義相同的含義。
本文中所使用的術(shù)語(2-6C)雜環(huán)烷基羰基氨基是指與羰基氨基中的羰基部分相連的具有2-6個(gè)碳原子的雜環(huán)烷基，所述雜環(huán)烷基具有與上文定義相同的含義。
本文中所使用的術(shù)語(2-6C)雜環(huán)烷基羰基氨基(2-4C)烷基是指通過氨基與具有2-4個(gè)碳原子的烷基相連的雜環(huán)烷基羰基氨基，其中雜環(huán)烷基部分具有2-6個(gè)碳原子，所述雜環(huán)烷基羰基氨基和烷基具有與上文定義相同的含義。
本文中所使用的術(shù)語(二)(1-4C)烷基氨基羰基是指通過氨基與羰基相連的(二)烷基氨基，其中烷基具有1-4個(gè)碳原子，所述(二)烷基氨基具有與上文定義相同的含義。
本發(fā)明所使用的術(shù)語(3-8C)環(huán)烷基氨基羰基是指與氨基羰基中的氨基部分相連的具有3-8個(gè)碳原子的環(huán)烷基，所述環(huán)烷基具有與上文定義相同的含義。
本文中所使用的術(shù)語二(1-4C)烷基氨基羰基氨基是指通過氨基與羰基氨基中的羰基部分相連的(二)烷基氨基，其中烷基具有1-4個(gè)碳原子，所述(二)烷基氨基具有與上文定義相同的含義。
本文中所使用的術(shù)語二(1-4C)烷基氨基羰基氨基(2-4C)烷基是指通過氨基與具有2-4個(gè)碳原子的烷基相連的(二)烷基氨基羰基氨基，其中烷基具有1-4個(gè)碳原子，所述(二)烷基氨基羰基氨基和烷基具有與上文定義相同的含義。
本文中所使用的術(shù)語(2-5C)雜芳基(1-4C)烷基是指與具有1-4個(gè)碳原子的烷基相連的具有2-5個(gè)碳原子的雜芳基，所述雜芳基和烷基具有與上文定義相同的含義。
本文中所使用的術(shù)語(6C)芳基(1-4C)烷基是指與具有1-4個(gè)碳原子的烷基相連的苯基，其中苯基任選被一個(gè)或多個(gè)選自對于(6C)芳基中所列舉的取代基取代，所述芳基和烷基具有與上文定義相同的含義。
本文中所使用的術(shù)語(6C)芳基氨基是指與氨基相連的苯基，其中苯基任選被一個(gè)或多個(gè)選自對于(6C)芳基中所列舉的取代基取代，所述烷基具有與上文定義相同的含義。
本文中所使用的術(shù)語(6C)芳基(1-4C)烷基氨基是指與具有1-4個(gè)碳原子的烷基氨基中的烷基部分相連的苯基，其中苯基任選被一個(gè)或多個(gè)選自在(6C)芳基中所列舉的取代基取代，所述芳基和烷基氨基具有與上文定義相同的含義。
本文中所使用的術(shù)語(2-5C)雜芳基(1-4C)烷基氨基是指與具有1-4個(gè)碳原子的烷基氨基中的烷基部分相連的具有2-5個(gè)碳原子的雜芳基，其中雜芳基任選被一個(gè)或多個(gè)選自對于(6C)芳基中所列舉的取代基取代，所述雜芳基和烷基氨基具有與上文定義相同的含義。
本文中所使用的術(shù)語(1-4C)烷氧基(2-4C)烷基是指與具有2-4個(gè)碳原子的烷基相連的具有1-4個(gè)碳原子的烷氧基，所述烷氧基和烷基具有與上文定義相同的含義。
本文中所使用的術(shù)語(二)[(1-4C)烷氧基(2-4C)烷基]氨基是指被(1-4C)烷氧基(2-4C)烷基單取代和二取代的氨基。所述(1-4C)烷氧基(2-4C)烷基是指與具有2-4個(gè)碳原子的烷基相連的具有1-4個(gè)碳原子的烷氧基，并且具有與上文定義相同的含義。
本文中所使用的術(shù)語(1-4C)烷基氨基(2-4C)烷基是指通過氨基與具有2-4個(gè)碳原子的烷基相連的具有1-4個(gè)碳原子的烷基氨基，所述烷基部分具有與上文定義相同的含義。
本文中所使用的術(shù)語(二)[(1-4C)烷基氨基(2-4C)烷基]氨基是指被(1-4C)烷基氨基(2-4C)烷基單取代和二取代的氨基。所述(1-4C)烷基氨基(2-4C)烷基是指通過氨基與具有2-4個(gè)碳原子的烷基相連的具有1-4個(gè)碳原子的烷基氨基，并且具有與上文定義相同的含義。
本文中所使用的術(shù)語氨基(2-4C)烷基是指具有2-4個(gè)碳原子的氨基烷基，所述烷基部分具有與上文定義相同的含義。
本文中所使用的術(shù)語(二)[氨基(2-4C)烷基]氨基是指被具有2-4個(gè)碳原子、并且具有與上文定義相同的含義的氨基烷基單取代和二取代的氨基。
本文中所使用的術(shù)語羥基(2-4C)烷基是指具有2-4個(gè)碳原子的羥基烷基，所述烷基部分具有與上文定義相同的含義。
本文中所使用的術(shù)語(二)[羥基(2-4C)烷基]氨基是指被具有2-4個(gè)碳原子、并且具有與上文定義相同的含義的羥基烷基單取代和二取代的氨基。
本文中所使用的術(shù)語R5-(2-4C)烷基是指與具有2-4個(gè)碳原子、并且具有與上文定義相同的含義的烷基部分相連的R5基團(tuán)。
本文中所使用的術(shù)語R5-羰基-(1-4C)烷基是指與羰基烷基中的羰基部分相連的R5基團(tuán)，所述烷基部分具有1-4個(gè)碳原子，并且具有與上文定義相同的含義。
術(shù)語可藥用鹽是指那些落入醫(yī)生判斷范圍之內(nèi)適合通過接觸方式用于人體或低級動物組織而無異常毒性、刺激性、變態(tài)反應(yīng)等的鹽，并且它們與合理的益處/風(fēng)險(xiǎn)比例相適應(yīng)?？伤幱名}是本領(lǐng)域眾所周知的。它們可以在本發(fā)明化合物的最終分離和純化過程中獲得，或者如果存在游離堿官能團(tuán)的話，通過將該游離堿官能團(tuán)與鹽酸、磷酸、或硫酸、或者與有機(jī)酸例如抗壞血酸、檸檬酸、酒石酸、乳酸、馬來酸、丙二酸、富馬酸、羥基乙酸、琥珀酸、丙酸、乙酸、甲磺酸等反應(yīng)而獲得。如果存在的話，還可以將酸官能團(tuán)與有機(jī)或無機(jī)堿例如氫氧化鈉、氫氧化鉀或氫氧化鋰反應(yīng)。
因此，本發(fā)明涉及定義如上的式I化合物。
在本發(fā)明另一實(shí)施方案中，提供了根據(jù)式I的化合物，其中R1和R2是Me。
本發(fā)明還涉及這樣的式I化合物，其中R3是(2-6C)雜環(huán)烷基(1-4C)烷基、(2-5C)雜芳基(1-4C)烷基、(2-6C)雜環(huán)烷基羰基氨基(2-4C)烷基、R5-(2-4C)烷基、R5-羰基(1-4C)烷基。
本發(fā)明另一方面涉及根據(jù)式I的化合物，其中R3是(2-6C)雜環(huán)烷基(1-4C)烷基、(2-5C)雜芳基(1-4C)烷基、R5-(2-4C)烷基、R5-羰基(1-4C)烷基。
本發(fā)明又一方面涉及根據(jù)式I的化合物，其中R3是(2-6C)雜環(huán)烷基(1-4C)烷基、(2-5C)雜芳基(1-4C)烷基或R5-(2-4C)烷基。
本發(fā)明另一方面涉及根據(jù)式I的化合物，其中R3是(2-6C)雜環(huán)烷基(1-4C)烷基。
根據(jù)本發(fā)明又一實(shí)施方案，式I的R3所表示的雜環(huán)烷基(1-4C)烷基中的雜環(huán)烷基由4、5或6個(gè)碳原子組成，R3所表示的雜芳基(1-4C)烷基中的雜芳基由3、4或5個(gè)碳原子組成。
本發(fā)明另一實(shí)施方案涉及根據(jù)式I的化合物，其中R4是(6C)芳基。
在本發(fā)明又一實(shí)施方案中，提供了這樣的式I化合物，其中R5是(二)(1-4C)烷基氨基、氨基、(二)(3-4C)鏈烯基氨基、(2-5C)雜芳基(1-4C)烷基氨基、(6C)芳基(1-4C)烷基氨基、(二)[(1-4C)烷氧基(2-4C)烷基]氨基、(二)[(1-4C)烷基氨基(2-4C)烷基]氨基、(二)[氨基(2-4C)烷基]氨基、(二)[羥基(2-4C)烷基]氨基。
本發(fā)明另一方面涉及根據(jù)式I的化合物，其中R5是(二)(1-4C)烷基氨基、(2-5C)雜芳基(1-4C)烷基氨基、(二)[(1-4C)烷氧基(2-4C)烷基]氨基、(二)[(1-4C)烷基氨基(2-4C)烷基]氨基、(二)[氨基(2-4C)烷基]氨基或(二)[羥基(2-4C)烷基]氨基。
本發(fā)明另一方面涉及根據(jù)式I的化合物，其中R5是(二)(1-4C)烷基氨基、氨基、(二)(3-4C)鏈烯基氨基、(2-5C)雜芳基(1-4C)烷基氨基、(6C)芳基(1-4C)烷基氨基。
本發(fā)明另一方面涉及根據(jù)式I的化合物，其中R5是(二)(1-4C)烷基氨基或氨基。
本發(fā)明又一方面提供了根據(jù)式I的化合物，其中R5是(二)(1-4C)烷基氨基。
本發(fā)明又一方面涉及這樣的化合物，其中將如上定義的基團(tuán)R1-R5的所有具體定義組合在式I化合物中。
制備本發(fā)明化合物的適宜方法概述如下。
I-aR1，R2＝Me II III-aR1，R2＝Me IV-aR1，R2＝MeI-bR1，R2＝H III-bR1，R2＝HIV-bR1，R2＝H具有式I-a的本發(fā)明化合物可以利用已有文獻(xiàn)詳細(xì)記載的Skraup反應(yīng)制備得到。采用N-叔丁氧基羰基(N-Boc)保護(hù)的1，4-苯二胺(II)進(jìn)行所述反應(yīng)得到1，2-二氫喹啉衍生物III-a。
相關(guān)的Skraup環(huán)縮合方法參見下述文獻(xiàn)A.Knoevenagel，Chem.Ber.541726，1921；R.L.Atkins和D.E.Bliss，J.Org.Chem.431975，1978；J.V.Johnson，B.S.Rauckman，D.P.Baccanari和B.Roth，J.Med.Chem.321942，1989；W.C.Lin，S.-T.Huang和S.-T.Lin，J.Chin.Chem.Soc.43497，1996；J.P.Edwards，S.J.West，K.B.Marschke，D.E.Mais，M.M.Gottardis和T.K.Jones，J.Med.Chem.41303，1998。
上述反應(yīng)通常是在碘或質(zhì)子酸例如鹽酸、對甲苯磺酸或碘化氫水溶液的存在下，在升高的溫度下于丙酮或基氧化物中進(jìn)行?；蛘?，也可以通過將化合物II與丙酮在MgSO4、4-叔丁基鄰苯二酚和碘的存在下反應(yīng)制備得到式III-a化合物(L.G.Hamann，R.I.Higuchi，L.Zhi，J.P.Edwards和X.-N.Wang，J.Med.Chem，41623，1998)。在再一方法中，該反應(yīng)還可以在丙酮中使用鑭系元素三氟甲磺酸鹽(例如三氟甲磺酸鈧鹽)作為催化劑進(jìn)行。在這種情形中，所述反應(yīng)可以在室溫下或使用常規(guī)加熱或微波照射在升高的溫度下操作(M.E.Theoclitou和L.A.Robinson，Tetrahedron Lett.433907，2002)。
式III-b化合物可以由N-Boc-1，4-苯二胺II通過與甲基乙烯基酮反應(yīng)制備得到。相關(guān)的環(huán)化方法描述在美國專利2,686,182(BadischeAnilin-& Soda-Fabrik Aktiengesellschaft)中。
接下來，式III-a-b化合物的1-N-乙?；磻?yīng)可以采用標(biāo)準(zhǔn)條件進(jìn)行。在一般實(shí)驗(yàn)中，將式III-a-b化合物在乙酸酐中加熱回流或者在例如二氯甲烷、四氫呋喃、甲苯或吡啶的溶劑中與乙酰氯在堿例如N，N-二異丙基乙胺、三乙胺或氫化鈉的存在下反應(yīng)，得到式IV-a-b的1-N-乙?；?4-甲基-1，2-二氫喹啉衍生物。
V-aR1，R2＝Me VI-aR1，R2＝Me VII-aR1，R2＝Me VIII-aR1，R2＝MeV-bR1，R2＝H VI-bR1，R2＝H VII-bR1，R2＝H VIII-bR1，R2＝H將Boc保護(hù)基團(tuán)在本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的條件下標(biāo)準(zhǔn)裂解得到式V-a-b的6-氨基-1，2-二氫喹啉衍生物。所述反應(yīng)通常是在二氯甲烷中、在三氟乙酸的存在下進(jìn)行。
接下來，將式V-a-b化合物采用標(biāo)準(zhǔn)條件進(jìn)行6-N-?；磻?yīng)可以得到通式VI-a-b化合物，其中R4如上文定義。例如，式V-a-b化合物在例如二氯甲烷、四氫呋喃或甲苯的溶劑中與酰氯(R4-C(O)-Cl)或酸酐(R4-C(O)-O-C(O)-R4)在堿例如N，N-二異丙基乙胺、三乙胺、吡啶或氫化鈉的存在下反應(yīng)，得到式VI-a-b的6-N-乙酰化的4-甲基-1，2-二氫喹啉衍生物?；蛘撸赏ㄊ絍-a-b化合物?；玫酵ㄊ絍I-a-b化合物也可以通過與適宜的羧酸(R4-CO2H)在偶聯(lián)劑例如O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽(TBTU)、O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽(HATU)或者溴代三吡咯烷基鏻六氟磷酸鹽(PyBrOP)和叔堿例如N，N-二異丙基乙胺的存在下，在溶劑例如N，N-二甲基甲酰胺或二氯甲烷中于室溫或提高的溫度下進(jìn)行反應(yīng)而完成。
在所述二氫喹啉骨架的4位上引入必需的被取代的苯基可以通過將苯甲醚與通式結(jié)構(gòu)VI-a-b化合物發(fā)生Friedel-Crafts烷基化反應(yīng)，得到通式VII-a-b化合物。該反應(yīng)通常是在提高的溫度下，在苯甲醚中或者在適宜的惰性溶劑(例如庚烷或己烷)中與作為試劑的苯甲醚在路易斯酸(例如AlCl3、AlBr3、FeCl3或SnCl4)催化下進(jìn)行。下述文獻(xiàn)中描述了與2，2，4-三甲基-1，2-二氫喹啉的Friedel-Crafts烷基化反應(yīng)B.A.Lugovik，L.G.Yudin和A.N.Kost，Dokl.Akad.Nauk SSSR，170340，1966；B.A.Lugovik，L.G.Yudin，S.M.Vinogradova和A.N.Kost，Khim.Geterosikl.Soedin，7795，1971。
或者，也可以將N-Boc-1，4-苯二胺II與2-(4-甲氧基苯基)-丙烯和甲醛在乙腈中于室溫或提高的溫度下反應(yīng)，然后按照前面描述的方法進(jìn)行1-N-乙?；磻?yīng)，得到其中R4＝-O-叔丁基的VII-b化合物。相關(guān)的環(huán)化反應(yīng)描述在下述文獻(xiàn)中J.M.Mellor和G.D.Merriman，Tetrahedron，516115，1995。將Boc保護(hù)基團(tuán)裂解，然后用酰氯(R4-C(O)-Cl)按照前面描述的方法?；?-氨基官能團(tuán)，得到其中R4如上文定義的通式結(jié)構(gòu)VII-b化合物。
將通式VII-a-b化合物中的芳族甲醚裂解得到通式VIII-a-b的被4-(4-羥苯基)取代的四氫喹啉衍生物，進(jìn)入將游離OH基團(tuán)獲得官能化的階段。
IX-aX＝Cl，Br，IVIII-aR1，R2＝Me I-aR1，R2＝MeIX-bX＝OH VIII-bR1，R2＝HI-bR1，R2＝H芳族甲基醚的脫甲基反應(yīng)是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的。在代表性實(shí)驗(yàn)中，通過在低于環(huán)境溫度的溫度下，將式VII-a-b化合物與BBr3在惰性溶劑例如二氯甲烷中進(jìn)行反應(yīng)得到通式VIII-a-b的脫甲基化化合物，從而實(shí)現(xiàn)去甲基化?；蛘撸摷谆部梢赃@樣實(shí)現(xiàn)，即在環(huán)境溫度下，通過式VII-a-b化合物與BF3·Me2S絡(luò)合物發(fā)生反應(yīng)。
將通式VIII-a-b化合物與通式IX-a的官能化的烷基鹵化物進(jìn)行選擇性O(shè)-烷基化反應(yīng)，得到具有通式I-a-b的化合物。芳族羥基的烷基化反應(yīng)是本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的。通常，將通式VIII-a-b化合物在適宜溶劑例如1，4-二噁烷、四氫呋喃、二氯甲烷、乙腈、丙酮、或N，N-二甲基甲酰胺中的溶液用堿(例如N，N-二異丙基胺、三乙胺、K2CO3、Cs2CO3或NaOH)和適宜的通式IX-a的烷基化試劑例如芐基溴、3-(二甲氨基)-丙基氯、4-(2-氯乙基)-嗎啉、2-吡啶甲基氯或2-氯乙酰胺處理。或者，烷基化也可以通過已知的Mitsunobu型烷基化反應(yīng)實(shí)現(xiàn)。在該情形中，將通式VIII-a-b化合物在適宜溶劑例如1，4-二噁烷、四氫呋喃或二氯甲烷中的溶液用(樹脂束縛的)三苯基膦、二乙基-或二叔丁基偶氮二羧酸酯以及通式IX-b的官能化的醇處理。一般來說，這兩種烷基化方法都可用于所有的R3基團(tuán)，但是如果R3含有親核基團(tuán)例如仲胺或羥基時(shí)，就需要適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基策略。對保護(hù)基團(tuán)和脫保護(hù)條件的選擇對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是微不足道的。
獲得本發(fā)明化合物的另一方法是由將通式VIII-a-b化合物用通式X的酯烷基化開始。該烷基化反應(yīng)通常是在堿例如N，N-二異丙基乙胺和氫化鈉存在下，在適宜溶劑例如N，N-二甲基甲酰胺或四氫呋喃中于室溫或高溫下進(jìn)行的。然后可以將所得到的其中A＝Me或Et的通式XI-a-b化合物中的酯官能團(tuán)選擇性地在一定條件下還原，譬如使用適宜的還原劑例如氫化鋁鋰在低溫或硼氫化鈉在惰性溶劑例如四氫呋喃中還原，得到通式XIII-a-b化合物。接下來，可以將通式XIII-a-b化合物中的游離羥基與4-甲苯磺酰氯(Ts-Cl)或甲磺酰氯(Ms-Cl)在惰性溶劑例如1，4-二噁烷、N，N-二甲基甲酰胺或THF中，在適宜堿例如三乙胺或吡啶存在下反應(yīng)，生成適宜的離去基團(tuán)(通式XIV-a-b化合物；LG＝Ts或Ms)。然后在本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的條件下，與適宜的親核試劑(胺或烷氧化物)發(fā)生親核取代反應(yīng)，得到通式I-a-b化合物，其中R3＝R5-(2-4C)烷基，R5如上文定義。
其中A＝teRt-Bu的通式XI-a-b化合物向通式XII-a-b的羧酸的轉(zhuǎn)化可以通過將叔丁酯官能團(tuán)脫保護(hù)來實(shí)現(xiàn)。在代表性實(shí)驗(yàn)中，將通式XI-a-b(A＝叔丁基)的叔丁酯溶解于二氯甲烷中，用強(qiáng)酸例如三氟乙酸處理。然后可以將所得到的通式XII-a-b的羧酸用適宜的醇或胺在偶聯(lián)劑例如O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽(TBTU)、O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽(HATU)或者溴三吡咯烷基鏻六氟磷酸鹽(PyBrOP)和叔堿例如N，N-二異丙基乙胺的存在下、在溶劑例如N，N-二甲基甲酰胺或二氯甲烷中于室溫或高溫下進(jìn)行稠合反應(yīng)，得到通式I-a-b化合物，其中R3＝R5-(2-4C)烷基，R5如上文定義。
本發(fā)明的某些化合物可以是游離堿的形式，這些化合物可以以可藥用鹽的形式從反應(yīng)混合物中分離出來?？伤幱名}也可以通過將式I的游離堿用有機(jī)或無機(jī)酸例如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、磷酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、馬來酸、丙二酸、甲磺酸、富馬酸、琥珀酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸和抗壞血酸處理而獲得。
本發(fā)明化合物具有至少一個(gè)手性碳原子，因而可以以純對映體、或?qū)τ钞悩?gòu)體的混合物、或者非對映異構(gòu)體的混合物形式獲得。獲得純對映體的方法是本領(lǐng)域眾所周知的，例如將由光學(xué)活性酸和外消旋混合物獲得鹽進(jìn)行結(jié)晶，或者利用手性柱的色譜法。對于非對映異構(gòu)體，可以利用正相或反相柱。
本發(fā)明化合物可以形成水合物或溶劑化物。本領(lǐng)域技術(shù)人員已知，當(dāng)進(jìn)料化合物與水冷凍干燥時(shí)，其形成水合物質(zhì)，或者當(dāng)其在含有適宜有機(jī)溶劑的溶液中濃縮時(shí)形成溶劑化物。本發(fā)明化合物包括上面所列舉的化合物的水合物或溶劑化物。
對于活性化合物的選擇而言，在10-5M下測試必須獲得比使用FSH作為參比時(shí)所獲得的最大活性高20％的活性。另一種標(biāo)準(zhǔn)可以是EC50值，它必須＜10-5M，優(yōu)選＜10-7M。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，理想的EC50值取決于被測試的化合物。例如，通常認(rèn)為EC50值小于10-5M的化合物是供藥物選擇的候選化合物。優(yōu)選該值小于10-7M。然而，具有更高EC50的化合物如果對于特定受體具有選擇性，可能甚至是更好的候選化合物。
測定受體結(jié)合的方法、以及測定促性腺激素的生物活性的體外和體內(nèi)測定方法都是眾所周知的。通常，將被表達(dá)的受體與待測化合物接觸，然后測定對功能應(yīng)答的結(jié)合或刺激或抑制情況。
為了測定功能應(yīng)答，將離體的編碼FSH受體基因的DNA(優(yōu)選為人受體)表達(dá)在適宜的寄主細(xì)胞中。這種細(xì)胞可以是中國倉鼠卵巢細(xì)胞，不過其它細(xì)胞也是適宜的。優(yōu)選該細(xì)胞是哺乳動物源的細(xì)胞(Jia等人，Mol.Endocrin.，5759-776，1991)。
構(gòu)建重組FSH表達(dá)細(xì)胞系的方法是本領(lǐng)域眾所周知的(Sambrook等人，Molecular Cloninga Laboratory Manual，Cold Spring HarborLaboratory Press，Cold Spring Harbor，最新版本)。受體的表達(dá)通過表達(dá)編碼所需蛋白質(zhì)的DNA的表達(dá)實(shí)現(xiàn)。定點(diǎn)誘變、附加序列的連接、PCR、以及合適的表達(dá)系統(tǒng)的構(gòu)建技術(shù)都是迄今本領(lǐng)域眾所周知的。可利用標(biāo)準(zhǔn)固相技術(shù)合成構(gòu)建編碼所需蛋白質(zhì)的部分或全部DNA，優(yōu)選包括容易連接的限制位點(diǎn)。可對DNA編碼序列提供用于所述包含的編碼序列的轉(zhuǎn)錄和翻譯的適當(dāng)控制元件(element)。正如眾所周知的是，現(xiàn)在可以獲得與各種宿主相容的表達(dá)系統(tǒng)，所述宿主包括原核宿主例如細(xì)菌和真核宿主例如酵母、植物細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞、哺乳動物細(xì)胞、鳥類細(xì)胞等。
然后，將表達(dá)受體的細(xì)胞與測試化合物接觸以觀察對功能應(yīng)答的結(jié)合、或刺激或抑制情況。
或者，也可以利用包含所表達(dá)受體的離體細(xì)胞膜來測定化合物的結(jié)合情況。
至于結(jié)合情況的測定，可利用放射性標(biāo)記的或熒光標(biāo)記的化合物。另外還可以進(jìn)行競爭性結(jié)合測定。
另一種測定法涉及通過測定受體介導(dǎo)的cAMP積累的刺激情況而篩選FSH受體激動劑化合物。于是，這種方法包括，在宿主細(xì)胞表面上表達(dá)受體并將細(xì)胞暴露于測試化合物下。然后測量cAMP的含量。cAMP的水平可以減小或增大，這取決于測試化合物與受體結(jié)合時(shí)的抑制或刺激作用。
對FSH受體拮抗劑的篩選包括，在固定、次最大有效量(submaximally effective)的FSH濃度(即在沒有測試化合物的情況下，誘導(dǎo)大約cAMP積累的最大刺激的80％的FSH濃度)下，將FSH受體表達(dá)細(xì)胞與濃度范圍內(nèi)的測試化合物溫育。根據(jù)濃度-效果曲線，可以測定得到每一測試化合物抑制FSH誘導(dǎo)的cAMP積累的IC50值和百分?jǐn)?shù)?？梢岳萌酥亟MFSH作為參照化合物。在替代方法中，還可以進(jìn)行競爭性結(jié)合測定。
除了直接測定在暴露細(xì)胞中的例如cAMP水平之外，還可以利用這樣的細(xì)胞系，這些細(xì)胞系除了用編碼受體的DNA轉(zhuǎn)染之外，還用編碼報(bào)道基因的第二種DNA轉(zhuǎn)染，所述的報(bào)道基因的表達(dá)對cAMP的水平有應(yīng)答。這樣的報(bào)道基因可能是cAMP可誘導(dǎo)的，或者可以以這種方式構(gòu)建以致它們能夠與新cAMP應(yīng)答部分相連接。通常，報(bào)道基因的表達(dá)可以通過對改變cAMP水平起反應(yīng)的任何應(yīng)答元件控制。合適的報(bào)道基因例如是編碼β-半乳糖苷酶、堿性磷酸酶、熒火蟲熒光素酶和綠熒光蛋白的基因。這類反式激活測定法的原理是本領(lǐng)域眾所周知的，描述在例如Stratowa，Ch.，Himmler，A.和Czernilofsky，A.P.，(1995)Curr.Opin.Biotechnol.6574中。
本發(fā)明還涉及一種藥物組合物，它含有與可藥用輔劑和任選的其它治療劑混合的具有通式I的四氫喹啉衍生物或其可藥用鹽。所述輔劑在與組合物中的其它組分相容的意義上而言，必須是“可接受的”并且對其接受者無害。
組合物包括例如那些以單元?jiǎng)┝康男问竭m合口服、舌下、皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、局部、或者直腸給藥等的組合物。
對于口服給藥而言，活性組分可以以獨(dú)立的單元提供，例如片劑、膠囊劑、散劑、顆粒劑、溶液劑、混懸劑等。
對于非腸道給藥而言，本發(fā)明的藥物組合物可以以單劑量或多劑量容器的形式提供，例如預(yù)定量的注射液，如裝在密閉小瓶或安瓿中，還可以在凍干(冷凍干燥)的條件下貯存，使用前只需要加入無菌液體載體例如水。
按照例如描述在標(biāo)準(zhǔn)文獻(xiàn)Gennaro，A.R.等人，RemingtonTheScience and Practice of Pharmacy(第20版，Lippincott Williams& Wilkins，2000，尤其參見第5部分Pharmaceutical Manufacturing)中的方法，與這類可藥用輔劑混合之后，活性劑可以被壓制成固體單元?jiǎng)┝啃问?，例如丸、片，或者加工成膠囊劑或栓劑。通過借助于可藥用液體，活性劑可以以液體組合物的形式使用，例如為溶液劑、混懸劑、乳劑形式的注射制劑，或者噴霧劑例如鼻腔噴霧劑。
為了制備固體劑量單元，預(yù)期可利用常規(guī)的添加劑，例如填充劑、著色劑、聚合物粘合劑等。通常，可以利用不對所述活性化合物的功能產(chǎn)生干擾的任何一種可藥用添加劑?？膳c本發(fā)明的活性劑一起作為固體組合物施用的適當(dāng)載體包括以適當(dāng)含量使用的乳糖、淀粉、纖維素衍生物等或其混合物。對于非腸道給藥而言，可利用含水混懸劑、等滲鹽溶液劑和無菌注射溶液劑，它們含有可藥用分散劑和/或潤濕劑，例如丙二醇或丁二醇。
本發(fā)明進(jìn)一步包括前述的藥物組合物，它與適合于所述組合物的包裝材料相結(jié)合，所述包裝材料包括使用該組合物用于前述用途的說明。
本發(fā)明的四氫喹啉衍生物衍生物還可以以可植入的藥物裝置形式施用，它由被釋出速率調(diào)節(jié)膜包覆的活性物質(zhì)芯組成。這種植入物在皮下或局部使用，而且可以在相當(dāng)長的時(shí)間內(nèi)(例如數(shù)周到數(shù)年)以大致恒定的速率釋出活性成分。制備這種可植入藥物裝置的方法是本領(lǐng)域已知的，例如描述在歐洲專利0,303,306(AKZO Nobel N.V.)中。
使用活性組分或其藥物組合物的精確劑量和給藥方案取決于所希望達(dá)到的治療效果(治療不育癥；避孕)，而且還可以隨特定化合物、給藥途徑、以及服用該藥物的個(gè)體患者年齡和病況不同而不同。
一般來說，非腸道給藥要求比更依賴于吸收的其它給藥方法更低的劑量。然而，人體劑量優(yōu)選含有0.0001-25mg/kg體重。所需劑量可以是單劑量形式或者作為多個(gè)子劑量形式在一天內(nèi)以適當(dāng)間隔給藥，或者就女性受治療者而言，所需劑量還可以是在月經(jīng)周期中以適當(dāng)?shù)娜臻g隔給藥的多個(gè)子劑量形式。劑量和給藥方案可以隨女性和男性受治療者不同而不同。
因此，根據(jù)本發(fā)明的化合物可用于治療。
本發(fā)明進(jìn)一方面還涉及具有通式I的四氫喹啉衍生物化合物用于制備治療對FSH受體介導(dǎo)的途徑有應(yīng)答的疾病的藥物的用途。因此，有上述需要的患者可以服用適當(dāng)用量的本發(fā)明化合物。
在本發(fā)明另一方面中，還涉及具有通式I的四氫喹啉衍生物化合物用于制備控制生育力的藥物的用途。
在本發(fā)明又一方面中，還涉及具有通式I的四氫喹啉衍生物化合物用于制備治療不育癥的藥物的用途。
在本發(fā)明再一方面中，還涉及具有通式I的四氫喹啉衍生物化合物用于制備預(yù)防生育的藥物的用途。
本發(fā)明的化合物還可用于治療激素依賴性疾病，例如乳腺癌、前列腺癌和子宮內(nèi)膜異位癥。
通過下面的實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行描述。
實(shí)施例通用注釋
在實(shí)施例中使用了下面的縮略語DMA＝N，N-二甲基苯胺，DIPEA＝N，N-二異丙基乙胺，TFA＝三氟乙酸，DtBAD＝偶氮二羧酸二叔丁酯，TBTU＝O-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽，HATU＝0-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽，F(xiàn)moc＝9-芴甲氧基羰基，F(xiàn)moc-Cl＝9-芴基甲氧基羰基氯化物，DMF＝N，N-二甲基甲酰胺，Boc＝叔丁氧羰基，THF＝四氫呋喃。
實(shí)施例中描述的終產(chǎn)物名稱采用Beilstein Autonom程序(版本2.02.119)生成。
除非另有說明，下述實(shí)施例中的所有終產(chǎn)物均由水/1，4-二噁烷混合物或者水/乙腈混合物冷凍干燥。如果化合物以HCl或TFA鹽的形式制備得到，可以在冷凍干燥前向溶劑混合物中加入適宜量的相應(yīng)酸。
為了測定保留時(shí)間，采用下面的分析HPLC方法方法1柱5μm Luna C-18(2)150×4.6mm；流速1ml/分鐘；檢測點(diǎn)210nm；柱溫40℃；溶劑ACH3CN/H2O＝1/9(v/v)；溶劑BCH3CN；溶劑C0.1M三氟乙酸水溶液；梯度溶劑A/B/C＝65/30/5至10/85/5(v/v/v)持續(xù)30.00分鐘，然后A/B/C＝10/85/5(v/v/v)恒定另外的10.00分鐘。
方法2除了所用梯度之外其它同方法1，梯度A/B/C＝75/20/5至15/80/5(v/v/v)持續(xù)30.00分鐘，然后A/B/C＝15/80/5(v/v/v)恒定另外的10.00分鐘。
方法3柱3μm Luna C-18(2)100×2mm；流速0.25ml/分鐘；檢測點(diǎn)210nm；柱溫40℃；溶劑AH2O；溶劑BCH3CN；溶劑C50mM磷酸鹽緩沖溶液，pH2.1；梯度溶劑A/B/C＝70/20/10至10/80/10(v/v/v)持續(xù)20.00分鐘，然后A/B/C＝10/80/10(v/v/v)恒定另外的10.00分鐘。
方法4除了所用梯度之外其它同方法3，梯度溶劑A/B/C＝65/30/5至10/85/5(v/v/v)持續(xù)20.00分鐘，然后A/B/C＝10/85/5(v/v/v)恒定另外的10.00分鐘。
方法5除了所用梯度之外其它同方法3，梯度溶劑A/B＝75/25至0/100(v/v)持續(xù)20.00分鐘，然后A/B/C＝0/100(v/v)恒定另外的10.00分鐘。
方法6除了所用梯度之外其它同方法1，梯度溶劑A/B/C＝35/60/5至10/85/5(v/v/v)持續(xù)30.00分鐘，然后A/B/C＝10/85/5(v/v/v)恒定另外的10.00分鐘。
使用下面的方法進(jìn)行制備性HPLC純化方法A柱＝Luna C-18。梯度0.1％三氟乙酸的H2O/CH3CN(9/1，v/v)/CH3CN＝100/0至0/100(v/v)，持續(xù)30-45分鐘，取決于分離的困難程度。檢測點(diǎn)210nm。收集適宜的餾分并真空濃縮(部分)。
方法B柱＝Luna C-18。梯度H2O/CH3CN(9/1，v/v)/CH3CN＝80/20至0/100(v/v)，持續(xù)30-45分鐘，取決于分離的困難程度。檢測點(diǎn)210nm。
實(shí)施例1聯(lián)苯基-4-羧酸{1-乙?；?4-[4-(2-二甲氨基-乙氧基)-苯基]-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基)-酰胺(a).(2，2，4-三甲基-1，2-二氫喹啉-6-基)-氨基甲酸叔丁酯將N-Boc-1，4-苯二胺(75g)、MgSO4(216g)、4-叔丁基兒茶酚(1.8g)和碘(4.7g)的混合物在無水丙酮(600ml)中加熱回流20小時(shí)。過濾除去MgSO4，濾液真空濃縮。殘余物在硅膠短塞上層析，使用庚烷/乙酸乙酯＝8/2(v/v)作為洗脫劑，得到棕色油狀產(chǎn)物。
收率41g。
(b).(1-乙酰基-2，2，4-三甲基-1，2-二氫喹啉-6-基)-氨基甲酸叔丁酯將實(shí)施例1a中描述的化合物(41g)在吡啶(200ml)和CH2Cl2(200ml)中的溶液冷卻至0℃。逐滴加入乙酰氯(21ml)的CH2Cl2(50ml)溶液。加料完成后，混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。加入乙酸乙酯(21)和H2O(21)，分離有機(jī)層，干燥并真空濃縮。由乙酸乙酯結(jié)晶得到標(biāo)題化合物。
收率23g。
(c).1-乙?；?6-氨基-2，2，4-三甲基-1，2-二氫喹啉將實(shí)施例1b中描述的化合物(15g)在含有CH2Cl2和TFA(9/1(v/v)，300ml)的混合物中攪拌2小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至0℃，利用2M NaOH水溶液調(diào)節(jié)pH至7。分離有機(jī)層，用鹽水洗滌，干燥并真空濃縮得到粗產(chǎn)物，其在下一步中直接使用不再純化。
收率10.4g。
(d).聯(lián)苯基-4-羧酸(1-乙?；?2，2，4-三甲基-1，2-二氫喹啉-6-基)-酰胺向?qū)嵤├?c中描述的化合物(10g)和DIPEA(40ml)的CH2Cl2(100ml)溶液中加入4-聯(lián)苯基羰基氯(9.8g)，所得到的混合物在室溫下攪拌18小時(shí)。加入水，分離有機(jī)層，干燥并真空濃縮。產(chǎn)物由乙酸乙酯結(jié)晶。
收率15g。
(e).聯(lián)苯基-4-羧酸[1-乙?；?4-(4-甲氧基苯基)-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫喹啉-6-基]-酰胺在攪拌的同時(shí)，將三氯化鋁(9.7g)加入至實(shí)施例1d中描述的化合物(10.0g)和無水苯甲醚(50ml)的混合物中，所得到的混合物在35℃下攪拌18小時(shí)。然后在0℃下加入水，所得到的混合物用乙酸乙酯萃取。分離有機(jī)層，干燥并部分真空濃縮，混合物在0℃下儲存18小時(shí)。通過過濾收集所析出的沉淀，真空干燥得到標(biāo)題化合物。
收率7.9g。
(f).聯(lián)苯基-4-羧酸[1-乙?；?4-(4-羥基苯基)-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基]-酰胺在0℃下，向?qū)嵤├?e中描述的化合物(7.9g)的CH2Cl2(200ml)溶液中加入三溴化硼(5ml)的CH2Cl2(50ml)溶液，混合物在0℃下保持4小時(shí)。小心加入水(大約500ml)，所得到的混合物劇烈攪拌。分離有機(jī)層，干燥并真空濃縮。由乙酸乙酯結(jié)晶得到標(biāo)題化合物。
收率6.1g。
(g).聯(lián)苯基-4-羧酸{1-乙?；?4-[4-(2-二甲氨基-乙氧基)-苯基]-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-酰胺通用步驟A向?qū)嵤├?f中描述的化合物(70mg)的DMF(2ml)溶液中加入Cs2CO3(200mg)和2-二甲氨基-乙基氯化物鹽酸鹽(17mg)。所得到的混合物攪拌過夜，然后加入水和乙酸乙酯。分離有機(jī)層，干燥并真空濃縮。產(chǎn)物通過制備性HPLC純化(方法A)，由含有TFA的CH3CN和水的混合物冷凍干燥得到相應(yīng)的TFA鹽。
收率18mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝576.6；HPLCRt＝14.96分鐘(方法3)。
實(shí)施例2聯(lián)苯基-4-羧酸{1-乙酰基-4-[4-(2-二甲氨基-丙氧基)-苯基]-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-酰胺根據(jù)通用步驟A，將實(shí)施例1f中描述的化合物(70mg)用3-二甲氨基-丙基氯化物鹽酸鹽(19mg)和Cs2CO3(200mg)在DMF(2ml)中烷基化。產(chǎn)物通過制備性HPLC純化(方法A)，由含有TFA的CH3CN和水的混合物冷凍干燥得到相應(yīng)的TFA鹽。
收率58mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝590.4；HPLCRt＝15.36分鐘(方法3)。
實(shí)施例3聯(lián)苯基-4-羧酸{1-乙?；?2，2，4-三甲基-4-[4-(3-嗎啉-4-基-丙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-酰胺根據(jù)通用步驟A，將實(shí)施例1f中描述的化合物(70mg)用3-嗎啉丙基氯化物(26mg)和Cs2CO3(200mg)在DMF(2ml)中烷基化。產(chǎn)物通過制備性HPLC純化(方法A)，由含有TFA的CH3CN和水的混合物冷凍干燥得到相應(yīng)的TFA鹽。
收率56mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝631.6；HPLCRt＝15.40分鐘(方法3)。
實(shí)施例4聯(lián)苯基-4-羧酸{1-乙酰基-2，2，4-三甲基-4-[4-(吡啶-2-基甲氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-酰胺根據(jù)通用步驟A，將實(shí)施例1f中描述的化合物(100mg)用2-甲基吡啶氯化物鹽酸鹽(33mg)和Cs2CO3(325mg)在DMF(5ml)中烷基化。產(chǎn)物通過制備性HPLC純化(方法A)，由含有TFA的CH3CN和水的混合物冷凍干燥得到相應(yīng)的TFA鹽。
收率60mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝596.4；HPLCRt＝19.75分鐘(方法2)。
實(shí)施例5聯(lián)苯基-4-羧酸{1-乙酰基-2，2，4-三甲基-4-[4-(1-甲基-哌啶-3-基甲氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-酰胺根據(jù)通用步驟A，將實(shí)施例1f中描述的化合物(100mg)用3-氯甲基-1-甲基哌啶鹽酸鹽(33mg)和Cs2CO3(325mg)在DMF(5ml)中烷基化。產(chǎn)物通過制備性HPLC純化(方法A)，由含有TFA的CH3CN和水的混合物冷凍干燥得到相應(yīng)的TFA鹽。
收率60mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝615.4；HPLCRt＝16.70分鐘(方法2)。
實(shí)施例6聯(lián)苯基-4-羧酸{1-乙?；?4-[4-(2-二乙氨基-乙氧基)-苯基]-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-酰胺根據(jù)通用步驟A，將實(shí)施例1f中描述的化合物(100mg)用2-乙氨基-乙基氯化物鹽酸鹽(35mg)和Cs2CO3(325mg)在DMF(5ml)中烷基化。產(chǎn)物通過制備性HPLC純化(方法A)，由含有TFA的CH3CN和水的混合物冷凍干燥得到相應(yīng)的TFA鹽。
收率67mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+E]+＝604.4；HPLCRt＝16.38分鐘(方法2)。
實(shí)施例7聯(lián)苯基-4-羧酸{1-乙?；?2，2，4-三甲基-4-[4-(吡啶-4-基甲氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-酰胺根據(jù)通用步驟A，將實(shí)施例1f中描述的化合物(100mg)用4-甲基吡啶氯化物鹽酸鹽(33mg)和Cs2CO3(325mg)在DMF(5ml)中烷基化。產(chǎn)物通過制備性HPLC純化(方法A)，由含有TFA的CH3CN和水的混合物冷凍干燥得到相應(yīng)的TFA鹽。
收率61mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝596.4；HPLCRt＝16.64分鐘(方法2)。
實(shí)施例8嗎啉-4-羧酸[3-(4-{1-乙?；?6-[(聯(lián)苯基-4-羰基)-氨基]-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-4-基}-苯氧基)-丙基]-酰胺根據(jù)通用步驟A，將實(shí)施例1f中描述的化合物(100mg)用嗎啉-4-羧酸(3-氯丙基)酰胺(53mg)和Cs2CO3(325mg)在DMF(5ml)中烷基化。產(chǎn)物通過制備性HPLC純化(方法A)，由CH3CN和水的混合物冷凍干燥。
收率95mg；MS-ESI[M+E]+＝675.6；HPLCRt＝18.24分鐘(方法3)。
實(shí)施例9聯(lián)苯基-4-羧酸{1-乙?；?4-[4-(2-氮雜環(huán)庚烷(azepan)-1-基-乙氧基)-苯基]-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-酰胺根據(jù)通用步驟A，將實(shí)施例1f中描述的化合物(100mg)用2-(六亞甲基亞胺基)乙基氯化物鹽酸鹽(42mg)和Cs2CO3(325mg)在DMF(5ml)中烷基化。產(chǎn)物通過制備性HPLC純化(方法A)，由含有TFA的CH3CN和水的混合物冷凍干燥得到相應(yīng)的TFA鹽。
收率60mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝630.6；HPLCRt＝17.25分鐘(方法2)。
實(shí)施例10聯(lián)苯基-4-羧酸{1-乙酰基-2，2，4-三甲基-4-[4-(吡啶-3-基甲氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-酰胺根據(jù)通用步驟A，將實(shí)施例1f中描述的化合物(1.0g)用3-甲基吡啶氯化物鹽酸鹽(488mg)和Cs2CO3(3.2mg)在DMF(10ml)中烷基化。產(chǎn)物通過制備性HPLC純化(方法A)，由含有TFA的CH3CN和水的混合物冷凍干燥得到相應(yīng)的TFA鹽。
收率884mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝596.4；HPLCRt＝16.55分鐘(方法3)。
實(shí)施例11聯(lián)苯基-4-羧酸[1-乙酰基-4-(4-氨基甲?；籽趸?苯基)-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基]-酰胺根據(jù)通用步驟A，將實(shí)施例1f中描述的化合物(100mg)用2-氯乙酰胺(24mg)和Cs2CO3(325mg)在DMF(5ml)中烷基化。產(chǎn)物通過制備性HPLC純化(方法A)，由含有TFA的CH3CN和水的混合物冷凍干燥得到相應(yīng)的TFA鹽。
收率40mg；MS-ESI[M+H]+＝562.6；HPLCRt＝21.63分鐘(方法2)。
實(shí)施例12
聯(lián)苯基-4-羧酸[1-乙?；?4-(4-烯丙基氨基甲?；籽趸?苯基-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基]-酰胺(a).(4-{1-乙酰基-6-[(聯(lián)苯基-4-羰基)氨基]-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-4-基}苯氧基)乙酸叔丁酯將含有實(shí)施例1f中描述的化合物(2.58g)、溴代乙酸叔丁酯(826μl)、K2CO3(2.8g)和丙酮(100ml)的混合物在50℃下攪拌18小時(shí)。通過過濾除去固體，濾液真空濃縮得到產(chǎn)物，其在下一步中直接使用不再純化。
收率3.2g。
(b).(4-{1-乙?；?6-[(聯(lián)苯基-4-羧基)氨基]-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-4-基}苯氧基)乙酸將實(shí)施例12a中描述的化合物(3.2g)在含有CH2Cl2和TFA的混合物(9/1(v/v)，100ml)中攪拌3小時(shí)。加入甲苯(100ml)，混合物真空濃縮得到粗產(chǎn)物，其直接使用不再純化。
收率3.3g。
(c).聯(lián)苯基-4-羧酸[1-乙?；?4-(4-烯丙基氨基甲酰基甲氧基-苯基)-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基]-酰胺通用步驟B在室溫下，向?qū)嵤├?2b中描述的化合物(82mg)、烯丙基胺(37mg)和DIPEA(226μl)的CH2Cl2(5ml)溶液中加入TBTU(84mg)。如果18小時(shí)后反應(yīng)尚未完全，加入更多的TBTU和DIPEA。反應(yīng)完全后，加入水，分離有機(jī)層，用鹽水洗滌，干燥并真空濃縮。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率48mg；MS-ESI[M+H]+＝602.4；HPLCRt＝18.19分鐘(方法4)。
實(shí)施例13聯(lián)苯基-4-羧酸{1-乙?；?4-[4-(異丙基氨基甲?；?甲氧基)-苯基]-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-酰胺根據(jù)通用步驟B，將實(shí)施例12b中描述的化合物(82mg)用異丙胺(38mg)、DIPEA(226μl)和TBTU(84mg)在CH2Cl2(5ml)中處理。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率45mg；MS-ESI[M+H]+＝604.6；HPLCRt＝18.63分鐘(方法4)。
實(shí)施例14聯(lián)苯基-4-羧酸[1-乙?；?4-(4-二乙基氨基甲?；籽趸?苯基)-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基]-酰胺根據(jù)通用步驟B，將實(shí)施例12b中描述的化合物(82mg)用二乙胺鹽酸鹽(47mg)、DIPEA(226μl)和TBTU(84mg)在CH2Cl2(5ml)中處理。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率51mg；MS-ESI[M+H]+＝618.4；HPLCRt＝19.09分鐘(方法4)。
實(shí)施例15聯(lián)苯基-4-羧酸[1-乙?；?2，2，4-三甲基-4-(4-{[(吡啶-4-基甲基)-氨基甲酰基]-甲氧基}-苯基)-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基]-酰胺根據(jù)通用步驟B，將實(shí)施例12b中描述的化合物(82mg)用4-甲基吡啶胺(70mg)、DIPEA(226μl)和TBTU(84mg)在CH2Cl2(5ml)中處理。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)，由含有TFA的CH3CN和水的混合物冷凍干燥得到相應(yīng)的TFA鹽。
收率52mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝653.6；HPLCRt＝11.31分鐘(方法4)。
實(shí)施例16聯(lián)苯基-4-羧酸[1-乙?；?4-(4-{[(呋喃-2-基甲基)-氨基甲?；鵠-甲氧基}-苯基)-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基]-酰胺根據(jù)通用步驟B，將實(shí)施例12b中描述的化合物(82mg)用2-糠胺(63mg)、DIPEA(226μl)和TBTU(84mg)在CH2Cl2(5ml)中處理。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率50mg；MS-ESI[M+H]+＝642.6；HPLCRt＝21.31分鐘(方法3)。
實(shí)施例17聯(lián)苯基-4-羧酸(1-乙?；?4-{4-[(2-甲氧基-乙氨基甲?；?-甲氧基]-苯基}-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基)-酰胺根據(jù)通用步驟B，將實(shí)施例12b中描述的化合物(82mg)用2-甲氧基乙胺(49mg)、DIPEA(226μl)和TBTU(84mg)在CH2Cl2(5ml)中處理。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率34mg；MS-ESI[M+H]+＝620.4；HPLCRt＝19.70分鐘(方法3)。
實(shí)施例18聯(lián)苯基-4-羧酸{1-乙?；?4-[4-(芐基氨基甲酰基-甲氧基)-苯基]-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-酰胺根據(jù)通用步驟B，將實(shí)施例12b中描述的化合物(82mg)用芐基胺(49mg)、DIPEA(226μl)和TBTU(84mg)在CH2Cl2(5ml)中處理。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率53mg；MS-ESI[M+H]+＝652.6；HPLCRt＝22.26分鐘(方法3)。
實(shí)施例19聯(lián)苯基-4-羧酸(1-乙?；?4-{4-[(2-二甲氨基-乙基氨基甲?；?-甲氧基]-苯基}-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基)-酰胺根據(jù)通用步驟B，將實(shí)施例12b中描述的化合物(82mg)用N，N-二甲基乙二胺(49mg)、DIPEA(226μl)和TBTU(84mg)在CH2Cl2(5ml)中處理。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。由HCl水溶液和1，4-二噁烷的混合物冷凍干燥得到標(biāo)題化合物的鹽酸鹽。
收率11mg(HCl-鹽)；MS-ESI[M+H]+＝633.4；HPLCRt＝13.74分鐘(方法3)。
實(shí)施例20聯(lián)苯基-4-羧酸[1-乙?；?2，2，4-三甲基-4-(4-甲基氨基甲?；籽趸?苯基)-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基]-酰胺根據(jù)通用步驟B，將實(shí)施例12b中描述的化合物(82mg)用甲胺鹽酸鹽(20mg)、DIPEA(226μl)和TBTU(84mg)在CH2Cl2(5ml)中處理。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率35mg；MS-ESI[M+H]+＝576.4；HPLCRt＝19.25分鐘(方法3)。
實(shí)施例21聯(lián)苯基-4-羧酸{1-乙酰基-2，2，4-三甲基-4-[4-(2-嗎啉-4-基-2-氧代-乙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-酰胺根據(jù)通用步驟B，將實(shí)施例12b中描述的化合物(110mg)用嗎啉(74mg)、DIPEA(296μl)和TBTU(109mg)在CH2Cl2(5ml)中處理。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率85mg；MS-ESI[M+H]+＝632.4；HPLCRt＝12.48分鐘(方法3)。
實(shí)施例22N-{1-乙?；?2，2，4-三甲基-4-[4-(3-嗎啉-4-基-丙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-5-溴-2-甲氨基-苯甲酰胺(a).(1-乙酰基-2，2，4-三甲基-1，2-二氫-喹啉-6-基)-氨基甲酸9-芴-基甲基酯向?qū)嵤├?c中描述的化合物(17g)和DIPEA(40ml)的CH2Cl2(100ml)溶液中加入FmocCl(25g)，所得到的混合物在室溫下攪拌18小時(shí)。加入乙酸乙酯(大約200ml)和水(150ml)，分離有機(jī)層，干燥并真空濃縮。通過硅膠色譜法純化標(biāo)題化合物，使用CH2Cl2作為洗脫劑。
收率16.6g。
(b).(1-乙?；?4-(4-甲氧基苯基)-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫喹啉-6-基]-氨基甲酸9-芴基甲基酯在攪拌的同時(shí)，將三氯化鋁(24.2g)加入至實(shí)施例22a中描述的化合物(16.5g)和無水苯甲醚(150ml)的混合物中，所得到的混合物在35℃下攪拌18小時(shí)。然后，在0℃下加入水，所得到的混合物用乙酸乙酯萃取。分離有機(jī)層，干燥并部分真空濃縮，混合物在0℃下儲存18小時(shí)。通過過濾收集所析出的沉淀，真空干燥得到標(biāo)題化合物。
收率10.1g。
(c).[1-乙?；?4-(4-羥苯基)-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫喹啉-6-基]-氨基甲酸9-芴基甲酯向?qū)嵤├?2b中描述的化合物(10.1g)在無水CH2Cl2(500ml)中的混合物中逐滴加入三溴化硼(5.05ml)，所得到的混合物在室溫下攪拌2.5小時(shí)。反應(yīng)用冰水在0℃下猝滅，加入CH2Cl2。分離有機(jī)層，干燥并在4℃儲存20小時(shí)。通過過濾收集所析出的沉淀，真空干燥得到粗產(chǎn)物，其直接使用不再純化。
收率12.5g。
(d).1-乙?；?6-氨基-2，2，4-三甲基-4-[4-(3-嗎啉-4-基-丙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫喹啉將實(shí)施例22c中描述的化合物(1.0g)、Cs2CO3(1.8g)、4-(3-氯丙基)嗎啉(330mg)和DMF(5ml)的混合物在60℃下攪拌18小時(shí)。加入水，混合物用CH2Cl2萃取。有機(jī)層干燥并真空濃縮。通過硅膠色譜法純化標(biāo)題化合物，使用CH2Cl2/2％濃氨水的MeOH溶液＝1/0＝＞9/1(v/v)作為洗脫劑。
收率527mg.
(e).N-{1-乙酰基-2，2，4-三甲基-4-[4-(3-嗎啉-4-基-丙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-5-溴-2-甲氨基-苯甲酰胺通用步驟C在室溫下，向?qū)嵤├?2d中描述的化合物(132mg)、5-溴-2-甲氨基苯甲酸(101mg)和DIPEA(255μl)的CH2Cl2(3ml)溶液中加入HATU(166mg)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌18小時(shí)。加入乙酸乙酯(15ml)和2M NaOH水溶液(15ml)。分離有機(jī)層，用2M NaOH水溶液(10ml)和水(15ml)洗滌，干燥并真空濃縮。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率69.8mg；MS-ESI[M+H]+＝663.4；HPLCRt＝14.65分鐘(方法3)。
實(shí)施例23N-{1-乙?；?2，2，4-三甲基-4-[4-(3-嗎啉-4-基-丙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-3，5-二氯-2，6-二甲氧基-苯甲酰胺根據(jù)通用步驟C，將實(shí)施例22d中描述的化合物(132mg)用3，5-二氯-2，6-二甲氧基苯甲酸(110mg)、DIPEA(255μl)和HATU(166mg)在CH2Cl2(3ml)中?；Ｍㄟ^制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率68.3mg；MS-ESI[M+H]+＝684.3；HPLCRt＝13.45分鐘(方法3)。
實(shí)施例24聯(lián)苯基-4-羧酸[1-乙?；?4-(4-{2-[(呋喃-2-基甲基)-氨基]-乙氧基}-苯基)-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基]-酰胺(a).(4-{1-乙?；?6-[(聯(lián)苯基-4-羰基)氨基]-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-4-基]-苯氧基)乙酸乙酯將實(shí)施例1f中描述的化合物(1g)、溴代乙酸乙酯(220μl)、K2CO3(850mg)和丙酮(25ml)的混合物在50℃下攪拌6小時(shí)。通過過濾除去固體，濾液真空濃縮得到產(chǎn)物，其在下一步中直接使用不再純化。
收率1.2g。
(b).聯(lián)苯基-4-羧酸{1-乙酰基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫喹啉-6-基}-酰胺在0℃下，向?qū)嵤├?4a中描述的化合物(1.2g)的THF(10ml)溶液中小心加入LiALH4(78mg)，所得到的混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。逐滴加入乙酸乙酯(50ml)，再加入水(50ml)。分離水層，用乙酸乙酯(50ml)萃取，合并有機(jī)部分，用鹽水洗滌。有機(jī)層干燥并真空濃縮得到產(chǎn)物，其在下一步中直接使用不再純化。
收率1g。
(c).甲磺酸2-(4-{1-乙?；?6-[(聯(lián)苯基-4-羰基)氨基]-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫喹啉-4-基}苯氧基)乙基酯向?qū)嵤├?4b中描述的化合物(1g)和DIPEA(1.7ml)的CH2Cl2(15ml)溶液中逐滴加入甲磺酰氯(310μl)的CH2Cl2(5ml)溶液。2小時(shí)后，加入水，分離有機(jī)層，干燥并真空濃縮。通過硅膠色譜法純化標(biāo)題化合物，使用庚烷/乙酸乙酯＝9/1＝＞1/1(v/v)作為洗脫劑。
收率870mg。
(d).聯(lián)苯基-4-羧酸[1-乙?；?4-(4-{2-[(呋喃-2-基甲基)-氧基]-乙氧基}-苯基)-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基]-酰胺通用步驟D向?qū)嵤├?4c中描述的化合物(87mg)的CH3CN(5ml)溶液中加入2-糠胺(107mg)，所得到的混合物在70℃下攪拌18小時(shí)?；旌衔镎婵諠饪s，產(chǎn)物通過制備性HPLC純化(方法A)，由含有TFA的CH3CN和水的混合物冷凍干燥得到相應(yīng)的TFA鹽。
收率47mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝628.6；HPLCRt＝11.53分鐘(方法4)。
實(shí)施例25聯(lián)苯基-4-羧酸(1-乙?；?4-{4-[2-(2-羥基-1，1-二甲基-乙氨基-乙氧基]-苯基}-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基)-酰胺根據(jù)通用步驟D，將實(shí)施例24c中描述的化合物(87mg)用2-氨基-2-甲基-丙-1-醇(100mg)在CH3CN(5ml)中處理。標(biāo)題化合物通過制備性HPLC純化(方法A)，由含有TFA的CH3CN和水的混合物冷凍干燥得到相應(yīng)的TFA鹽。
收率21mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝619.8；HPLCRt＝10.95分鐘(方法4)。
實(shí)施例26聯(lián)苯基-4-羧酸[1-乙?；?2，2，4-三甲基-4-(4-{2-[(吡啶-3-基甲基)-氨基]-乙氧基}-苯基)-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基]-酰胺根據(jù)通用步驟D，將實(shí)施例24c中描述的化合物(87mg)用3-氨基甲基吡啶(119mg)在CH3CN(5ml)中處理。標(biāo)題化合物通過制備性HPLC純化(方法A)，由含有TFA的CH3CN和水的混合物冷凍干燥得到相應(yīng)的TFA鹽。
收率40mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝639.4；HPLCRt＝10.15分鐘(方法4)。
實(shí)施例27聯(lián)苯基-4-羧酸(1-乙酰基-4-{4-[2-(2-羥基-乙氨基)-乙氧基]-苯基}-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基)-酰胺根據(jù)通用步驟D，將實(shí)施例24c中描述的化合物(100mg)用乙醇胺(100mg)在CH3CN(5ml)中處理。標(biāo)題化合物通過制備性HPLC純化(方法A)，由含有TFA的CH3CN和水的混合物冷凍干燥得到相應(yīng)的TFA鹽。
收率50mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝592.6；HPLCRt＝10.32分鐘(方法1)。
實(shí)施例28聯(lián)苯基-4-羧酸(1-乙?；?4-{4-[2-(氨基-乙氨基)-乙氧基]-苯基}-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基)-酰胺根據(jù)通用步驟D，將實(shí)施例24c中描述的化合物(100mg)用乙二胺(110mg)在CH3CN(5ml)中處理。標(biāo)題化合物通過制備性HPLC純化(方法A)，由含有TFA的CH3CN和水的混合物冷凍干燥得到相應(yīng)的TFA鹽。
收率45mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝591,4；HPLCRt＝7.04分鐘(方法1)。
實(shí)施例29聯(lián)苯基-4-羧酸{1-乙?；?2，2，4-三甲基-4-[4-(2-哌嗪-1-基-乙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-酰胺根據(jù)通用步驟D，將實(shí)施例24c中描述的化合物(100mg)用哌嗪(140mg)在CH3CN(5ml)中處理。標(biāo)題化合物通過制備性HPLC純化(方法A)，由含有TFA的CH3CN和水的混合物冷凍干燥得到相應(yīng)的TFA鹽。
收率95mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝617.6；HPLCRt＝9.54分鐘(方法1)。
實(shí)施例30嗎啉-4-羧酸(3-{4-[1-乙?；?6-(3，5-二氯-2，6-二甲氧基-苯甲酰氨基)-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-4-基-苯氧基}-丙基)-酰胺(a).嗎啉-4-羧酸(3-{4-[1-乙?；?6-氨基-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-4-基]-苯氧基}-丙基)-酰胺根據(jù)與實(shí)施例22d中描述的相同步驟，將實(shí)施例22c中描述的化合物(1.0g)用嗎啉-4-羧酸(3-氯丙基)酰胺(448mg)和Cs2CO3(1.8g)在DMF(5ml)中烷基化(同時(shí)除去Fmoc保護(hù)基團(tuán))。通過硅膠色譜法純化標(biāo)題化合物，使用CH2Cl2/2％濃氨水的MeOH溶液＝1/0＝＞9/1(v/v)作為洗脫劑。
收率894mg。
(b).嗎啉-4-羧酸(3-{4-[1-乙?；?6-(3，5-二氯-2，6-二甲氧基-苯甲?；?-2，2，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-4-基]-苯氧基}-丙基)-酰胺根據(jù)通用步驟C，將實(shí)施例30a中描述的化合物(228mg)用3，5-二氯-2，6-二甲氧基苯甲酸(230mg)、DIPEA(558μl)和HATU(609mg)在CH2Cl2(5ml)中?；Ｍㄟ^制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率102mg；MS-ESI[M+H]+＝727.4；HPLCRt＝22.37分鐘(方法2)。
實(shí)施例31N-{1-乙酰基-2，2，4-三甲基-4-[4-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-3，5-二溴-苯甲酰胺(a).1-乙?；?6-氨基-2，2，4-三甲基-4-[4-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫喹啉將實(shí)施例22c中描述的化合物(1.0g)、Cs2CO3(1.8g)、N-(2-氯乙基)-嗎啉鹽酸鹽(375mg)、和DMF(5ml)在60℃攪拌18小時(shí)。如果反應(yīng)尚未完全，再加入一定量的Cs2CO3和N-(2-氯乙基)-嗎啉鹽酸鹽。反應(yīng)完全后，加入水，混合物用CH2Cl2萃取。有機(jī)層干燥并真空濃縮。通過硅膠色譜法純化標(biāo)題化合物，使用CH2Cl2/2％濃氨水的MeOH溶液＝1/0＝＞9/1(v/v)作為洗脫劑。
收率905mg。
(b).N-{1-乙酰基-2，2，4-三甲基-4-[4-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-3，5-二溴-苯甲酰胺根據(jù)通用步驟C，將實(shí)施例31a中描述的化合物(157mg)用3，5-二溴苯甲酸(150mg)、DIPEA(313μl)和HATU(204mg)在CH2Cl2(5ml)中?；?。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率71mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝700.2；HPLCRt＝16.12分鐘(方法2)。
實(shí)施例32N-{1-乙?；?2，2，4-三甲基-4-[4-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-2-氯-苯甲酰胺根據(jù)通用步驟C，將實(shí)施例31a中描述的化合物(150mg)用2-氯苯甲酸(81mg)、DIPEA(299μl)和HATU(195mg)在CH2Cl2(6ml)中酰化。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率162mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝576.4；HPLCRt＝9.37分鐘(方法2)。
實(shí)施例33N-{1-乙酰基-2，2，4-三甲基-4-[4-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-3，5-二甲基-苯甲酰胺根據(jù)通用步驟C，將實(shí)施例31a中描述的化合物(200mg)用3，5-二甲基苯甲酸(103mg)、DIPEA(399μl)和HATU(260mg)在CH2Cl2(7.5ml)中?；?。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率57.5mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝570.4；HPLCRt＝12.62分鐘(方法2)。
實(shí)施例34N-{1-乙酰基-2，2，4-三甲基-4-[4-(2-嗎啉-4-基-乙氫基]-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-2，5-二氨-苯甲酰胺根據(jù)通用步驟C，將實(shí)施例31a中描述的化合物(200mg)用2，5-二氯苯甲酸(131mg)、DIPEA(399μl)和HATU(260mg)在CH2Cl2(7.5ml)中?；?。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率130mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝610.2；HPLCRt＝11.70分鐘(方法2)。
實(shí)施例35N-{1-乙?；?2，2，4-三甲基-4-[4-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-5-甲基-2-硝基-苯甲酰胺根據(jù)通用步驟C，將實(shí)施例31a中描述的化合物(157mg)用5-甲基-2-硝基苯甲酸(97.3mg)、DIPEA(313μl)和HATU(204mg)在CH2Cl2(5ml)中酰化。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率80mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝601,4；HPLCRt＝9.95分鐘(方法2)。
實(shí)施例36N-{1-乙?；?2，2，4-三甲基-4-[4-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-苯甲酰胺根據(jù)通用步驟C，將實(shí)施例31a中描述的化合物(157mg)用苯甲酸(65.6mg)、DIPEA(313μl)和HATU(204mg)在CH2Cl2(5ml)中?；?。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率59mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝542.4；HPLCRt＝9.99分鐘(方法2)。
實(shí)施例37N-{1-乙?；?2，2，4-三甲基-4-[4-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-4-叔丁基-苯甲酰胺根據(jù)通用步驟C，將實(shí)施例31a中描述的化合物(161mg)用4-叔丁基苯甲酸(99mg)、DIPEA(322μl)和HATU(210mg)在CH2Cl2(5ml)中?；Ｍㄟ^制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率80mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝598.2；HPLCRt＝15.39分鐘(方法2)。
實(shí)施例38N-{1-乙酰基-2，2，4-三甲基-4-[4-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-2，3-二氯-苯甲酰胺根據(jù)通用步驟C，將實(shí)施例31a中描述的化合物(161mg)用2，3-二氯苯甲酸(106mg)、DIPEA(322μl)和HATU(210mg)在CH2Cl2(5ml)中?；?。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率113mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝610.2；HPLCRt＝11.42分鐘(方法2)。
實(shí)施例39N-{1-乙酰基-2，2，4-三甲基-4-[4-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-4-溴-苯甲酰胺根據(jù)通用步驟C，將實(shí)施例31a中描述的化合物(260mg)用4-溴苯甲酸(179mg)、DIPEA(517μ1)和HATU(338mg)在CH2Cl2(5ml)中?；?。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率127mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝620.2；HPLCRt＝12.24分鐘(方法2)。
實(shí)施例40N-{1-乙?；?2，2，4-三甲基-4-[4-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-4-甲氧基-3-甲基-苯甲酰胺根據(jù)通用步驟C，將實(shí)施例31a中描述的化合物(260mg)用4-甲氧基-3-甲基苯甲酸(148mg)、DIPEA(517μl)和HATU(338mg)在CH2Cl2(5ml)中?；?。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率158mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝586.2；HPLCRt＝11.49分鐘(方法2)。
實(shí)施例41N-{1-乙?；?2，2，4-三甲基-4-[4-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基-4-二甲氨基-苯甲酰胺根據(jù)通用步驟C，將實(shí)施例31a中描述的化合物(260mg)用4-二甲氨基苯甲酸(147mg)、DIPEA(517μl)和HATU(338mg)在CH2Cl2(5ml)中?；Ｍㄟ^制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率95mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝585.2；HPLCRt＝9.53分鐘(方法2)。
實(shí)施例42N-{1-乙酰基-2，2，4-三甲基-4-[4-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺向?qū)嵤├?1a中描述的化合物(260mg)和吡啶(500μl)的甲苯(4.5ml)溶液中加入3-(三氟甲基)苯甲酰氯(185mg)。加入乙酸乙酯(15ml)和水(15ml)。分離有機(jī)層，用水(15ml)洗滌，干燥并真空濃縮。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率200mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝610.2；HPLCRt＝13.23分鐘(方法2)。
實(shí)施例43N-{1-乙酰基-2，2，4-三甲基-4-[4-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-喹啉-6-基}-3-硝基-苯甲酰胺向?qū)嵤├?1a中描述的化合物(260mg)和吡啶(500μl)的甲苯(4.5ml)溶液中加入3-硝基苯甲酰氯(165mg)。加入乙酸乙酯(15ml)和水(15ml)。分離有機(jī)層，用水(15ml)洗滌，干燥并真空濃縮。通過制備性HPLC純化標(biāo)題化合物(方法A)。
收率167mg(TFA鹽)；MS-ESI[M+H]+＝587.4；HPLCRt＝10.28分鐘(方法2)。
實(shí)施例44CHO-FSH體外生物活性在用人類FSH受體穩(wěn)定轉(zhuǎn)染并用cAMP應(yīng)答部分(CRE)/啟動子(指導(dǎo)螢火蟲熒光素酶報(bào)道基因的表達(dá))共轉(zhuǎn)染的中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞中測試了化合物的FSH活性。配體與Gs-偶聯(lián)的FSH受體結(jié)合導(dǎo)致cAMP增加，它反過來引起熒光素酶報(bào)道基因構(gòu)建物的反式激活增大。為了測試拮抗特性，加入了重組FSH(rec-hFSH，10mU/ml)，其濃度為在沒有測試化合物的情況下誘導(dǎo)大約cAMP積累的最大刺激的80％的濃度。利用發(fā)光計(jì)數(shù)器量化熒光素酶信號。計(jì)算了測試化合物的EC50值(測試化合物引起一半(50％)最大刺激或降低時(shí)的濃度)。為此使用了軟件程序GraphPad PRISM，3.0版(GraphPad software Inc.，San Diego)。
所有實(shí)施例化合物在單獨(dú)的激動或拮抗測定或者兩種測定中均具有小于10-5M的EC50(IC50)值。實(shí)施例3、4、7、10-13、16、36、37、39、41以及42化合物在至少一種上述測定中顯示出小于10-7M的EC50值。
權(quán)利要求
1.根據(jù)式I的四氫喹啉衍生物或其可藥用鹽， 其中R1和R2是H、Me；R3是(2-6C)雜環(huán)烷基(1-4C)烷基、(2-5C)雜芳基(1-4C)烷基、(6C)芳基(1-4C)烷基、(1-4C)(二)烷基氨基羰基氨基(2-4C)烷基、(2-6C)雜環(huán)烷基羰基氨基(2-4C)烷基、R5-(2-4C)烷基或R5-羰基(1-4C)烷基；R4是(2-5C)雜芳基、(6C)芳基、(3-8C)環(huán)烷基、(2-6C)雜環(huán)烷基或(1-6C)烷基；R5是(二)(1-4C)烷基氨基、(1-4C)烷氧基、氨基、羥基、(6C)芳基氨基、(二)(3-4C)鏈烯基氨基、(2-5C)雜芳基(1-4C)烷基氨基、(6C)芳基(1-4C)烷基氨基、(二)[(1-4C)烷氧基(2-4C)烷基]氨基、(二)[(1-4C)烷基氨基(2-4C)烷基]氨基、(二)[氨基(2-4C)烷基]氨基或(二)[羥基(2-4C)烷基]氨基。
2.權(quán)利要求1的衍生物，其中R3是(2-6C)雜環(huán)烷基(1-4C)烷基、(2-5C)雜芳基(1-4C)烷基、(2-6C)雜環(huán)烷基羰基氨基(2-4C)烷基、R5-(2-4C)烷基或R5-羰基(1-4C)烷基。
3.權(quán)利要求1或2的衍生物，其中R5是(二)(1-4C)烷基氨基、氨基、(二)(3-4C)鏈烯基氨基、(2-5C)雜芳基(1-4C)烷基氨基或(6C)芳基(1-4C)烷基氨基。
4.權(quán)利要求1-3的衍生物，其中R5是(二)(1-4C)烷基氨基或氨基。
5.權(quán)利要求1-4的衍生物，其中R5是(二)(1-4C)烷基氨基。
6.權(quán)利要求1-5的衍生物，其中R4是(6C)芳基。
7.權(quán)利要求1-6的衍生物，其中R3是(2-6C)雜環(huán)烷基(1-4C)烷基、(2-5C)雜芳基(1-4C)烷基或R5-(2-4C)烷基。
8.一種藥物組合物，它含有權(quán)利要求1-7中任意一項(xiàng)的四氫喹啉衍生物以及藥學(xué)上適宜的輔劑。
9.權(quán)利要求1-7的四氫喹啉衍生物用于治療。
10.權(quán)利要求1-7中任意一項(xiàng)的四氫喹啉衍生物或其可藥用鹽或溶劑化物用于制備調(diào)節(jié)生育力的藥物的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有通式(I)的四氫喹啉衍生物或其可藥用鹽，其中R
文檔編號C07D401/12GK1729176SQ200380106733
公開日2006年2月1日 申請日期2003年12月16日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月20日
發(fā)明者C·M·蒂默斯, W·F·J·卡斯坦斯 申請人:阿克佐諾貝爾公司