專利名稱：一種新的糖基化反應(yīng)條件的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及寡糖及糖綴合物的合成方法。
寡糖結(jié)構(gòu)的多樣性和復(fù)雜性使得寡糖及其衍生物可以承載大量的生物信息。隨著人們對(duì)寡糖(或多糖)的不斷了解，已陸續(xù)開發(fā)出一些寡糖(或多糖)產(chǎn)品用于疾病的治療，如靈芝多糖，香菇多糖用于防癌抗癌，Slex四糖可用于抗炎癥(Proc.Natl.Acad.Sci.USA，1994，91，7390-7397)，因此，高效的糖苷合成法日漸重要。在糖基化偶聯(lián)反應(yīng)中，以三氯乙酰亞胺酯為供體，常用三甲基硅三氟甲磺酸酯(TMSOTf)作為催化劑，這種催化劑對(duì)于一般的偶聯(lián)反應(yīng)，具有反應(yīng)快，產(chǎn)率高的特點(diǎn)，但同時(shí)由于催化劑本身以及反應(yīng)生成的酸的酸性很大，會(huì)使一些帶有敏感基團(tuán)的化合物發(fā)生分解。如大環(huán)內(nèi)酯類的化合物，或含有雙鍵、異丙叉基的化合物作為受體，或使用2-脫氧的糖基供體等。
為了解決上述問題本專利首次發(fā)明了一種以三氟甲磺酸銀(AgOTf)為催化劑，三氯乙酰亞胺酯為供體，高效催化糖基化中偶聯(lián)反應(yīng)的方法。三氟甲磺酸銀相對(duì)于三甲基硅三氟甲磺酸來說，其性能溫和，同時(shí)也具有反應(yīng)快，高效的優(yōu)點(diǎn)。不僅適用于一般的糖基化反應(yīng)，特別適用帶有大環(huán)內(nèi)酯，含有雙鍵，異丙叉基等敏感基團(tuán)的化合物。在以前的文獻(xiàn)中，三氟甲磺酸銀常作為鹵代糖的反應(yīng)催化劑。三氟甲磺酸銀作為三氯乙酰亞胺酯供體的催化劑尚無詳細(xì)的文獻(xiàn)報(bào)道。本專利首次詳細(xì)的研究了三氟甲磺酸銀在糖基化偶聯(lián)反應(yīng)中的應(yīng)用。
實(shí)施實(shí)例旋光度在25℃用自動(dòng)旋光儀測(cè)得。1HNMR，13CNMR，1H-1H COSY，用BrukerARX-400在CDCl3中測(cè)得?；瘜W(xué)位移以Me4Si為內(nèi)標(biāo)，以ppm為單位表示。質(zhì)譜用時(shí)間飛行質(zhì)譜(MALTI-TOF-MS)測(cè)定。薄層色譜(TLC)由HF254硅膠板上用30％(v/v)的硫酸甲醇溶液活紫外檢測(cè)器檢測(cè)。柱色譜采用100-200目的硅膠，以乙酸乙酯-石油醚為淋洗液。
通用的實(shí)驗(yàn)步驟將供體三氯乙酰亞胺酯(如化合物1，6，9，12)1.05當(dāng)量和受體(如化合物2，4，7，10，13)1.0當(dāng)量溶在干燥的二氯甲烷中，加入4分子篩，乙醇-液氮浴(-78到-42℃)條件下攪拌10分鐘，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下加入三氟甲磺酸銀(AgOTf)0.1-1.0當(dāng)量，乙醇-液氮浴下繼續(xù)攪拌反應(yīng)0.5-1小時(shí)，TLC檢測(cè)體系反應(yīng)完全。在反應(yīng)體系中加入與三氟甲磺酸銀等當(dāng)量的三乙胺，濃縮反應(yīng)液，所得漿狀物用硅膠柱色譜純化分離。淋洗液為石油醚和乙酸乙酯(4∶1到1∶1)。
1)膽固醇2，3，4，6-四-氧-苯甲酰基-β-D-葡萄吡喃糖苷3(制備方法見通用的實(shí)驗(yàn)步驟)核磁共振1HNMR(400MHz，CDCl3)0.64(s，3H)，0.80-0.90(m，14H)，0.95-1.0(m，3H)，1.05-1.13(m，6H)，1.24-1.41(m，8H)，1.48-1.57(m，3H)，1.68-1.72(m，2H)，1.73-1.86(m，1H)，1.88-1.92(m，2H)，1.97-2.0(m，1H)，2.12-2.16(m，2H)，3.47-3.54(m，1H)，4.11-4.16(m，1H，H-5)，4.80-4.53(dd，1H，J5，6a6.0，J6a，6b12Hz，H-6a)，4.57-4.61(dd，1H，J5，6b3.4，J6a，6b12Hz，H-6b)，4.92(d，1H，J1，27.8Hz，H-1)，5.21(d，1H)，5.46-5.50(dd，1H，J2，39.7，J1，27.8Hz，H-2)，5.58-5.64(t，1H，J3，419.3，J4，59.7Hz，H-4)，5.86-5.90(t，1H，J2，39.7，J4，319.3Hz，H-3)，7.24-8.0(m，20H)。
2)與大環(huán)內(nèi)酯的偶連反應(yīng)制備5(制備方法見通用的實(shí)驗(yàn)步驟)核磁共振1HNMR(400MHz，CDCl3)0.12-0.13(m，6H)，0.80-0.92(m，19H)，1.11(d，3H)，1.23-1.25(m，3H)，1.45-1.60(m，6H)，1.70-1.79(m，4H)，2.0-2.05(m，4H)，2.13-2.27(m，5H)，2.47-2.51(m，1H)，3.31-3.46(m，4H)，3.76-3.87(m，4H)，4.10-4.14(m，3H)，4.43-4.50(m，2H)，4.59-4.71(m，4H)，4.97(m，1H)，5.25(d，1H)，5.31-5.36(m，2H)，5.47-5.55(m，2H)，5.62-5.68(m，2H)，5.70-5.75(m，2H)，5.90-5.3(m，2H)，7.15-7.35(m，20H)。
3)6-氧-叔丁基二甲基硅基己基2，3，4，6-四-氧-芐基-β-D-葡萄吡喃糖苷8(制備方法見通用的實(shí)驗(yàn)步驟)核磁共振1HNMR(400MHz，CDCl3)-0.003--0.89(m，15H，(CH3)3CC(CH3)2-)，1.26-1.43(m，5H)，1.47-1.57(m，3H)，1.63-1.69(m，2H)，3.42-3.76(m，7H，H-6a，H-6b，H-2，H-3，H-4，-O(CH)2-)，3.93-3.99(m，1H，H-5)，4.38(d，1H，J1，27.8Hz，H-1)，4.51-4.63(m，3H)，4.70-4.83(m，3H)，4.91-4.96(m，2H)。
4)膽固醇3，4，6-三-氧-乙?；?2-脫氧-葡萄吡喃糖基-(1→2)-3，4，6-三-氧-苯甲酰基-葡萄吡喃糖苷11(制備方法見通用的實(shí)驗(yàn)步驟)核磁共振1H NMR(400MHz，CDCl3)0.67(s，3H)，0.83-0.95(m，14H)，1.0-1.03(m，3H)，1.08-1.14(m，6H)，1.24-1.40(m，8H)，1.43-1.62(m，9H)，1.75(s，3H)，1.77(s，3H)，2.0(s，3H)，1.97-2.0(m，1H)，2.25-2.30(m，3H)，3.47-3.62(m，4H)，3.89-3.93(dd，1H，H-2I)，4.01-4.06(m，1H，J 6.2，3.7，9.6Hz，H-5I)，4.47-4.54(m，2H)，4.74(d，1H，J 7.8Hz，H-1I)，4.80-4.85(t，1H，H-4II)，5.01-5.05(m，1H，H-3II)，5.35(m，1H)，5.50(dd，1H，J 9.7，9.3Hz，H-4I)，5.56(d，1H，J1II，2II3.2Hz)，5.70-5.75(t，1H，J 9.3，9.7Hz)，7.24-8.0(m，15H)。
5)2，3，4，6-四-氧-苯甲酰基-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)-[2，3，4，6-四-氧-苯甲?；?β-D-葡萄吡喃糖基-(1→6)]-2，4-二-氧-乙?；?β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)-1，2；3，4-二-氧-異丙叉基-α-D-葡萄呋喃糖14(制備方法見通用的實(shí)驗(yàn)步驟)核磁共振1H NMR(400MHz，CDCl3)1.27(s，3H)，1.43-1.45(m，6H)，1.50(s，3H)，1.60-1.90(m，6H)，3.50-3.55(m，1H)，3.60-3.67(t，1H)，3.74-3.76(m，2H)，3.82-3.86(m，2H)，3.91-3.96(m，2H)，4.06-4.08(m，2H)，4.11-4.28(m，2H)，4.36-4.39(m，2H)，4.55-4.64(m，4H)，4.97(d，1H，H-1II)，5.10(d，1H，H-1IV)，5.16(d，1H，H-1III)，5.43-5.54(m，3H)，5.64-5.74(m，2H)，5.84-5.94(m，2H)，7.30-8.0(m，40H)。
權(quán)利要求
1.以三氟甲磺酸銀為催化劑，三氯乙酰亞胺酯為糖基供體，與大環(huán)內(nèi)酯類化合物偶聯(lián)而形成糖苷。
2.以三氟甲磺酸銀為催化劑，三氯乙酰亞胺酯為糖基供體，與含有雙鍵的甾類化合物偶聯(lián)而形成糖苷。
3.以三氟甲磺酸銀為催化劑，三氯乙酰亞胺酯為糖基供體，與含有異丙叉基等對(duì)路易絲酸敏感基團(tuán)的化合物偶聯(lián)而形成糖苷。
4.以三氟甲磺酸銀為催化劑，2-脫氧的糖基三氯乙酰亞胺酯為糖基供體合成糖苷。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種以三氟甲磺酸銀為催化劑，糖基三氯乙酰亞胺酯為供體，高效催化糖基化反應(yīng)的方法?？蓮V泛用于糖基受體帶有大環(huán)內(nèi)酯、雙鍵、或異丙叉基等敏感基團(tuán)的化合物；或用2－脫氧的糖基三氯乙酰亞胺酯為糖基供體合成糖苷。
文檔編號(hào)C07H1/00GK1521174SQ03102558
公開日2004年8月18日 申請(qǐng)日期2003年2月11日 優(yōu)先權(quán)日2003年2月11日
發(fā)明者杜宇國, 魏國華 申請(qǐng)人:中國科學(xué)院生態(tài)環(huán)境研究中心