專(zhuān)利名稱：作為抗癌劑的細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及2-取代的4-雜芳基-嘧啶類(lèi)化合物、其制備、含有它們的藥物組合物和它們?cè)谠鲋承约膊?，例如癌癥、白血病、牛皮癬等治療中的用途。
現(xiàn)有技術(shù)的介紹與概述EP-A-233,461公開(kāi)了某些具有平喘性質(zhì)的4，5，6-取代的-N-(取代的苯基)-2-嘧啶胺類(lèi)化合物。WO95/09847已經(jīng)公開(kāi)了某些具有抗增殖性質(zhì)和抑制蛋白激酶C、表皮生長(zhǎng)因子受體相關(guān)酪氨酸蛋白激酶(EGF-R-TPK)以及CDK1/細(xì)胞周期蛋白B的4-雜芳基-N-(3-取代的苯基)-2-嘧啶胺類(lèi)化合物，其中雜芳基例舉了吡啶基和吲哚基。
J.Med.Chem.(1993)Vol.36，p.2716-2725，Paul，R.等公開(kāi)了另一類(lèi)具有消炎活性的苯基氨基嘧啶類(lèi)化合物。這些化合物在嘧啶環(huán)4-位包括未取代的吡咯基、單取代的2-噻吩基和二甲基-3-呋喃基。
本發(fā)明的目的是提供另一類(lèi)N-苯基-2-嘧啶類(lèi)抗增殖化合物。已經(jīng)驚人地發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物不是蛋白激酶C的抑制劑。正如下面所討論的，對(duì)細(xì)胞系中細(xì)胞增殖的抑制作用和/或?qū)?xì)胞周期蛋白依賴性激酶的抑制作用可以證明它們的活性。
發(fā)明概述本發(fā)明的第一方面涉及通式I化合物，
其中，X1和X2之一是NR10，X1和X2的另一個(gè)是CR9；Z是NH、NHCO、NHSO2、NHCH2、CH2、CH2CH2或CH＝CH；R1、R2、R3、R9和R10獨(dú)立地是H、烷基、芳基、芳烷基、雜環(huán)、鹵代、NO2、CN、OH、烷氧基、芳氧基、(R)nNH2、(R)nNH-R′、(R)nN-(R′)(R″)、NH-芳基、N-(芳基)2、COOH、COO-R′、COO-芳基、CONH2、CONH-R′、CON-(R′)(R″)、CONH-芳基、CON-(芳基)2、SO3H、SO2NH2、CF3、CO-R′或CO-芳基，其中烷基、芳基、芳烷基和雜環(huán)基可以進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)選自鹵代(halogeno)、NO2、CN、OH、O-甲基、NH2、COOH、CONH2和CF3的基團(tuán)取代；R4、R5、R6、R7和R8彼此獨(dú)立地是H、取代或未取代的低級(jí)烷基、鹵代、NO2、CN、OH、取代或未取代的烷氧基、NH2、NH-R′、N-(R′)(R″)、COOH、COO-R′、CONH2、CONH-R′、CON(R′)(R″)、SO3H、SO2NH2或CF3；其中R′、R″和R各自獨(dú)立地是可以相同或不同的烷基，且n是0或1；其條件是當(dāng)R1和R2是H，X1是NH，X2是CH，R3是H，則苯基不是未取代的，4-乙基，3-甲基，3-(1，1，2，2-四氟乙氧基)，3，4，5-三甲氧基，其他基團(tuán)R4-R8是H；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
優(yōu)選實(shí)施方式的說(shuō)明本文所用的術(shù)語(yǔ)“烷基”包括具有1至8個(gè)碳原子的直鏈和支鏈烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基、己基等，術(shù)語(yǔ)“低級(jí)烷基”類(lèi)似地用于表示具有1至4個(gè)碳原子的基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“芳基”用于包括具有6至10個(gè)碳原子的基團(tuán)，例如苯基、萘基等。
術(shù)語(yǔ)“芳烷基”用作上述術(shù)語(yǔ)烷基與芳基的連接。
優(yōu)選的式I化合物是這樣的，它們攜帶單-、二-或三-取代的吡咯基，通過(guò)環(huán)碳原子之一與嘧啶環(huán)連接。優(yōu)選地，吡咯基是吡咯-3-基(即X1是CR9，且X2是NR10，優(yōu)選地為NH)，并且是二-或三-取代的。
吡咯基可以被R1、R2、R9和R10取代。優(yōu)選地，R1、R2在適當(dāng)時(shí)的R9和R10獨(dú)立地是H、烷基、芳基、芳烷基、雜環(huán)、鹵代、NO2、CN、OH、烷氧基、芳氧基、(R)nNH2、(R)nNH-R′、(R)nN-(R′)(R″)、NH-芳基、N-(芳基)2、COOH、COO-R′、COO-芳基、CONH2、CONH-R′、CON-(R′)(R″)、CONH-芳基、CON-(芳基)2、SO3H、SO2NH2、CF3、CO-R′或CO-芳基，其中烷基、芳基、芳烷基和雜環(huán)基可以進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)選自鹵代、NO2、CN、OH、O-甲基、NH2、COOH、CONH2和CF3的基團(tuán)取代。最優(yōu)選地，R10是H。
更優(yōu)選地，R1、R2和R9各自獨(dú)立地選自H、鹵代、NO2、CN、(R)nN-(R′)(R″)、CONH2、C1-4烷基和雜環(huán)基。優(yōu)選地，R1、R2和R9中至少一個(gè)、更優(yōu)選至少兩個(gè)或三個(gè)不是氫。
優(yōu)選地，R1是H、CN、鹵代、硝基、烷基氨基或雜環(huán)基。當(dāng)R1是鹵代，則它優(yōu)選地選自氯或溴。當(dāng)R1是烷基氨基，則它優(yōu)選地是二乙氨基甲基或二甲氨基甲基。當(dāng)R1是雜環(huán)基，則它優(yōu)選地是嗎啉-4-基甲基或4-甲基-哌嗪-1-基甲基。最優(yōu)選地，R1是H或CN。
進(jìn)而更優(yōu)選地，當(dāng)R1是所述優(yōu)選含義，則R2和R9都是低級(jí)烷基，優(yōu)選甲基。
基團(tuán)Z優(yōu)選地是NH、NHSO2或NHCH2，最優(yōu)選NH。
苯基取代基R4～R8各自獨(dú)立地選自H、鹵代、硝基、氨基、氨基烷基、羥基、烷氧基、氨基甲?；?、氨磺?；N、N(R′)(R″)、C1-4烷基和取代的C1-4烷基。
更優(yōu)選地，R4、R5、R6、R7和R8彼此獨(dú)立地是H、未取代的低級(jí)烷基、鹵代、NO2、CN、OH、N-(R′)(R″)或CF3；其中R′、R″和R各自獨(dú)立地是可以相同或不同的烷基，n是0或1。
進(jìn)而更優(yōu)選地，R4至R8獨(dú)立地選自H、F、NH2、NO2、OH、Cl、Br、I、CN、CH2OH、CF3和二甲氨基。在優(yōu)選的R4至R8中，R4和R8最優(yōu)選地是氫。
因而，特別優(yōu)選的實(shí)施方式包括2-[N-(苯基)]-4-(2，4-二甲基吡咯-3-基)嘧啶胺類(lèi)，其中該苯基是被H、F、NH2、NO2、OH、Cl、Br、I、CN、CH2OH、CF3或OMe中至少一個(gè)所2-、3-或4-取代。
在這種特定的實(shí)施方式中，苯基優(yōu)選地被F、NH2、NO2、OH、Cl、Br、I、CH2OH、CN、CF3或OMe在2-、3-或4-位中的任一位置所單取代，或者被2，4-二氟、3，5-二氟、3，4-二氟、2，4-二氯、3，5-二氯、3，4-二氯或4-氯-3-三氟甲基所二取代的。
進(jìn)一步特別優(yōu)選的實(shí)施方式包括2-[N-(苯基)]-4-(3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈)嘧啶胺類(lèi)，其中該苯基被F、NH(CH3)2、NO2、OH、Cl、Br、I或CF3中至少一個(gè)所2-、3-或4-取代。
在這種特定的實(shí)施方式中，苯基優(yōu)選地是被F、NH(CH3)2、NO2、OH、I或CF3在3-或4-位中的任一位置所單取代，或者被4-甲基-3-硝基、3-碘-4-甲基、4-氯-3-甲基、3-羥基-4-甲基、4-氟-3-甲基或4-甲基-3-氟所二取代的。
進(jìn)一步更加特別優(yōu)選的實(shí)施方式包括-2-[N-(苯基)]-4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)嘧啶胺類(lèi)，其中該苯基優(yōu)選地是在4-位被F、NH(CH3)2、NO2、OH、I或CF3所單取代的，優(yōu)選地被氟或NH(CH3)2基團(tuán)取代。
-2-[N-(苯基)]-4-(2，4-二甲基-5-鹵代-1H-吡咯-3-基)嘧啶胺類(lèi)，其中該苯基優(yōu)選地是在3-或4-位被F、NH(CH3)2、NO2、OH、I或CF3所單取代的，優(yōu)選地被4-氟或3-硝基取代，該鹵代基團(tuán)優(yōu)選地是氯或溴。
-2-[N-(苯基)]-4-(2，4-二甲基-5-二烷基氨基烷基-1H-吡咯-3-基)嘧啶胺類(lèi)，其中該苯基在4-位優(yōu)選地是被F、NH(CH3)2、NO2、OH、I或CF3所單取代的，優(yōu)選地被氟單取代，該二烷基氨基烷基優(yōu)選地是二乙氨基甲基或二甲氨基甲基。
-2-[N-(苯基)]-4-(2，4-二甲基-5-雜環(huán)-1H-吡咯-3-基)嘧啶胺類(lèi)，其中該苯基優(yōu)選地是在4-位被F、NH(CH3)2、NO2、OH、I或CF3所單取代，優(yōu)選地被氟單取代，該雜環(huán)基優(yōu)選地是5-嗎啉-4-基甲基或4-甲基-哌嗪-1-基甲基。
最優(yōu)選地，本發(fā)明的化合物選自[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-碘-苯基)-胺(3，4-二氟-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺(4-氯-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺(3，5-二氟-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺4-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯酚3-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯酚(2，4-二氟-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺(2，4-二氯-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-三氟甲基-苯基)-胺(3-氯-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺N-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-N′，N′-二甲基-苯-1，4-二胺(3-氯-4-碘-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-氟-4-碘-苯基)-胺3，5-二甲基-4-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈3，5-二甲基-4-[2-(4-三氟甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-碘-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈3，5-二甲基-4-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-碘-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈
4-[2-(4-氯-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-羥基-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-氟-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-二甲氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酰胺[4-(3，5-二甲基-1H-吡咯-2-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺(4-氟-苯基)-[4-(1，2，4-三甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺N-[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-N′，N′-二甲基-苯-1-4-二胺[4-(5-氨基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[4-(5-氯-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(5-二乙氨基甲基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(5-二甲氨基甲基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-5-嗎啉-4-基甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟苯基)-胺{4-[2，4-二甲基-5-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-1H-吡咯-3-基]-嘧啶-2-基}-(4-氟-苯基)-胺上述化合物的結(jié)構(gòu)如

圖1所示。
所觀察到的特別優(yōu)選的化合物是對(duì)cdk2/細(xì)胞周期蛋白E的IC50小于5μM(±0.05)的CDK抑制劑，包括[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-碘-苯基)-胺(3，4-二氟-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺
(4-氯-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺(3，5-二氟-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺4-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯酚3-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯酚[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺(3-氯-4-碘-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-氟-4-碘-苯基)-胺3，5-二甲基-4-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈3，5-二甲基-4-[2-(4-三氟甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-碘-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈3，5-二甲基-4-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-碘-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氯-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-羥基-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-氟-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-二甲氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酰胺(4-氟-苯基)-[4-(1，2，4-三甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺N-[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-N′，N′-二甲基-苯-1，4-二胺[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[4-(5-氯-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺-(4-氟苯基)-胺[4-(5-二甲氨基甲基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-5-嗎啉-4-基甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺，以及{4-[2，4-二甲基-5-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-1H-吡咯-3-基]-嘧啶-2-基}-(4-氟-苯基)-胺。
這些化合物中，更優(yōu)選的是對(duì)cdk2/細(xì)胞周期蛋白E的IC50小于1μM(±0.05)的CDK抑制劑，包括[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-碘-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺3，5-二甲基-4-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈3，5-二甲基-4-[2-(4-三氟甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-碘-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈3，5-二甲基-4-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-碘-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氯-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-羥基-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-氟-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-二甲氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酰胺[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺
N-[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-N′，N′-二甲基-苯-1，4-二胺[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[4-(5-氯-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(5-二乙氨基甲基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(5-二甲氨基甲基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺，以及[4-(2，4-二甲基-5-嗎啉-4-基甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺。
其中，進(jìn)而更優(yōu)選的是對(duì)cdk2/細(xì)胞周期蛋白E的IC50小于0.5μM(±0.05)的化合物，為[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-碘-苯基)-胺3，5-二甲基-4-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈3，5-二甲基-4-[2-(4-三氟甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-碘-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈3，5-二甲基-4-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-羥基-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酰胺[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺，以及-(4-氟苯基)-胺。
觀察到下列化合物是特別有效的抗增殖劑，這得到基于細(xì)胞測(cè)定法的證明[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺(3-氯-4-碘-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺3，5-二甲基-4-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈3，5-二甲基-4-[2-(4-三氟甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-碘-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈3，5-二甲基-4-(2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-碘-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氯-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-羥基-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-氟-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-二甲氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酰胺(4-氟-苯基)-[4-(1，2，4-三甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺N-[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-N′，N′-二甲基-苯-1，4-二胺[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[4-(5-二乙氨基甲基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺-(4-氟-苯基)-胺{4-[2，4-二甲基-5-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-1H-吡咯-3-基]-嘧啶-2-基}-(4-氟-苯基)-胺。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，式I化合物具有抗增殖活性，因此據(jù)信可用于增殖性疾病的治療，例如癌癥、白血病和其他與失控細(xì)胞增殖有關(guān)的疾病，例如牛皮癬和再狹窄。在本發(fā)明的范圍內(nèi)所定義的抗增殖效果可以由在體外全細(xì)胞測(cè)定法中抑制細(xì)胞增殖的能力得到證明，例如使用A549、HT29、Saos-2、HeLa或MCF-7中的任何一種細(xì)胞系，或者由在適當(dāng)?shù)臏y(cè)定法中顯示對(duì)CDK酶(例如CDK2或CDK4)的抑制作用而證實(shí)。實(shí)施例3更詳細(xì)地描述了這些測(cè)定法，包括它們的實(shí)施方法。利用這些細(xì)胞系和酶測(cè)定法，可以確定一種化合物在本發(fā)明的意義上是否具有抗增殖性的特性。
不希望受理論限制的是，本發(fā)明的化合物據(jù)信以非蛋白激酶C(PKC)依賴性方式發(fā)揮它們的抗增殖效果。很多化合物抑制參與細(xì)胞周期控制的細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(CDKs)。這些CDKs包括CDK2和CDK4，確切而言它們分別與細(xì)胞周期蛋白E和細(xì)胞周期蛋白D1相互作用。本發(fā)明這些化合物進(jìn)一步據(jù)信有利之處在于對(duì)涉及增殖性疾病的CDK酶是選擇性的。術(shù)語(yǔ)“選擇性”意味著盡管可能對(duì)另一種酶(例如PKC)具有一定的抑制效果，不過(guò)該化合物優(yōu)先有效對(duì)抗涉及增殖性疾病的酶。
本發(fā)明的化合物可以抑制細(xì)胞周期中的任意步驟或階段，例如核被膜的形成、從細(xì)胞周期的靜止期(G0)退出、G1進(jìn)展、染色體解聚濃縮、核被膜破裂、START、DNA復(fù)制的引發(fā)、DNA復(fù)制的進(jìn)展、DNA復(fù)制的終止、中心體復(fù)制、G2進(jìn)展、有絲分裂或減數(shù)分裂功能的激活、染色體聚集、中心體分離、微管成核、紡錘體生成與活動(dòng)、與微管動(dòng)力蛋白的相互作用、染色單體分開(kāi)(separation)與分離(segregation)、有絲分裂功能的失活、收縮環(huán)的生成和胞質(zhì)分裂活動(dòng)。確切而言，本發(fā)明的化合物可以影響某些基因功能，例如染色質(zhì)結(jié)合、復(fù)制復(fù)合體的生成、復(fù)制許可、磷酸化或其他二次修飾活性、蛋白水解性降解、微管結(jié)合、肌動(dòng)蛋白結(jié)合、septin結(jié)合、微管組織中心成核活性和與細(xì)胞周期發(fā)信號(hào)通路組分的結(jié)合。
本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方式因此涉及一種或多種式I化合物在治療增殖性疾病中的用途。優(yōu)選地，增殖性疾病是癌癥或白血病。本文所用的術(shù)語(yǔ)增殖性疾病在廣義上包括任何需要控制細(xì)胞周期的疾病，例如心血管疾病，例如再狹窄和心肌??；自體免疫性疾病，例如腎小球腎炎和類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；皮膚病，例如牛皮癬；需要消炎、抗真菌、抗寄生蟲(chóng)性疾病，例如瘧疾、肺氣腫和脫發(fā)癥。在這些疾病中，本發(fā)明的化合物可以根據(jù)需要在所需細(xì)胞內(nèi)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡或者維持停滯。
在特別優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及一種或多種式I化合物在CDK依賴性或敏感性疾病治療中的用途。CDK依賴性疾病與一種或多種CDK酶活性在正常水平以上有關(guān)。這類(lèi)疾病優(yōu)選地與CDK2和/或CDK4活性水平異常有關(guān)。CDK敏感性疾病是這樣一種疾病，其中CDK水平的異常不是主要原因，而是在主要代謝異常的下游。在這類(lèi)情形中，CDK2和/或CDK4可以說(shuō)是敏感性代謝途徑的一部分，CDK抑制劑因此可以在治療這類(lèi)疾病中能起作用。這類(lèi)疾病優(yōu)選地是癌癥或白血病。
本發(fā)明的第二方面涉及下式化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽在制造用于治療增殖性疾病的藥物中的用途， 其中，X1和X2之一是NH，X1和X2的另一個(gè)是CR9；Z是NH、NHCO、NHSO2、NHCH2、CH2、CH2CH2或CH＝CH；R1、R2、R3和R9獨(dú)立地是H、烷基、芳基、芳烷基、雜環(huán)、鹵代、NO2、CN、OH、烷氧基、芳氧基、NH2、NH-R′、N-(R′)(R″)、NH-芳基、N-(芳基)2、COOH、COO-R′、COO-芳基、CONH2、CONH-R′、CON-(R′)(R″)、CONH-芳基、CON-(芳基)2、SO3H、SO2NH2、CF3、CO-R′或CO-芳基，其中烷基、芳基、芳烷基和雜環(huán)基可以進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)選自鹵代、NO2、CN、OH、O-甲基、NH2、COOH、CONH2和CF3的基團(tuán)取代；R4、R5、R6、R7和R8彼此獨(dú)立地是H、取代或未取代的低級(jí)烷基、鹵代、NO2、CN、OH、取代或未取代的烷氧基、NH2、NH-R′、N-(R′)(R″)、COOH、COO-R′、CONH2、CONH-R′、CON(R′)(R″)、SO3H、SO2NH2或CF3；其中R′和R″各自獨(dú)立地是可以相同或不同的烷基；其前提條件是當(dāng)R1和R2是H，X1是NH，X2是CH，且R3是H，則苯基不是3-(1，1，2，2-四氟乙氧基)，或3，4，5-三甲氧基，其他基團(tuán)R4-R8是H。
術(shù)語(yǔ)“增殖性疾病”在前面已經(jīng)討論過(guò)，相同的定義適用于本發(fā)明的第二方面。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及式II化合物在制造抗病毒感染藥物中的用途。這類(lèi)病毒感染包括VZV、HSV1型與2型和HIV。優(yōu)選地，這些化合物可用于HIV和HIV相關(guān)性疾病的治療。
本發(fā)明的這些進(jìn)一步方面的優(yōu)選實(shí)施方式與上述第一方面中描述的那些相同。
在特別優(yōu)選的實(shí)施方式中，一種或多種本發(fā)明化合物與一種或多種其他抗癌藥聯(lián)合給藥。在這類(lèi)情況下，本發(fā)明的化合物可以與一種或多種其他抗癌藥連續(xù)地、同時(shí)或先后給藥。
本文所用的措辭“藥物制造”包括式I化合物直接作為藥物的用途，以及它在篩選其他抗增殖劑的項(xiàng)目中或者在這種藥物制造的任何階段中的用途。
本發(fā)明(第一和第二方面)的化合物可以作為鹽或酯存在，確切為藥學(xué)上可接受的鹽或酯。
本發(fā)明(第一和第二方面)化合物的藥學(xué)上可接受的鹽包括其適合的酸加成鹽或堿鹽。適合的藥物鹽的評(píng)論可以參見(jiàn)Berge et al，J PharmSci，66，1-19(1977)。鹽是這樣生成的，例如與無(wú)機(jī)強(qiáng)酸，例如礦物酸，例如硫酸、磷酸或氫鹵酸；與有機(jī)強(qiáng)羧酸，例如1至4個(gè)碳原子的鏈烷羧酸，它們是未取代的或取代的(例如被鹵素取代)，例如乙酸；與飽和或不飽和的二元羧酸，例如草酸、丙二酸、琥珀酸、馬來(lái)酸、富馬酸、鄰苯二酸或?qū)Ρ蕉?tetraphthalic)；與羥基羧酸，例如抗壞血酸、乙醇酸、乳酸、蘋(píng)果酸、酒石酸或檸檬酸；與氨基酸，例如天冬氨酸或谷氨酸；與苯甲酸；或者與有機(jī)磺酸，例如(C1-C4)-烷基-或芳基-磺酸，它們是未取代的或取代的(例如被鹵素取代)，例如甲磺酸或?qū)妆交撬帷?br> 酯是利用有機(jī)酸或醇/氫氧化物生成的，這取決于被酯化的官能團(tuán)。有機(jī)酸包括羧酸，例如1至12個(gè)碳原子的鏈烷羧酸，它們是未取代的或取代的(例如被鹵素取代)，例如乙酸；飽和或不飽和的二元羧酸，例如草酸、丙二酸、琥珀酸、馬來(lái)酸、富馬酸、鄰苯二酸或?qū)Ρ蕉?；羥基羧酸，例如抗壞血酸、乙醇酸、乳酸、蘋(píng)果酸、酒石酸或檸檬酸；氨基酸，例如天冬氨酸或谷氨酸；苯甲酸；或者有機(jī)磺酸，例如(C1-C4)-烷基-或芳基-磺酸，它們是未取代的或取代的(例如被鹵素取代)，例如甲磺酸或?qū)妆交撬?。適合的氫氧化物包括無(wú)機(jī)氫氧化物，例如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氫氧化鋁。醇包括1-12個(gè)碳原子的鏈烷醇，它們是未取代的或取代的(例如被鹵素取代)。
在前面所討論的本發(fā)明的所有方面中，本發(fā)明在適當(dāng)時(shí)包括式I化合物的所有對(duì)映體和互變體。本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)確認(rèn)具有旋光性(一個(gè)或多個(gè)手性碳原子)或互變異構(gòu)特征的化合物。相應(yīng)的對(duì)映體和/或互變體可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的方法加以分離/制備。
本發(fā)明此外涉及本發(fā)明(第一和第二方面)各種結(jié)晶形式、多晶型和無(wú)水/水合形式的化合物或用途。在藥學(xué)工業(yè)中眾所周知的是，略微改變純化和/或分離方法，可以從用于合成制備這類(lèi)化合物的溶劑中分離化合物的任意這類(lèi)形式。
本發(fā)明進(jìn)一步包括本發(fā)明(第一和第二方面)前體藥物形式的化合物或用途。這類(lèi)前體藥物一般是這樣的式I化合物，其中一個(gè)或多個(gè)適當(dāng)?shù)幕鶊F(tuán)已被修飾，以便在對(duì)人或哺乳動(dòng)物受治療者給藥后可以逆轉(zhuǎn)該修飾。這種逆轉(zhuǎn)作用通常是由天然存在于受治療者中的酶進(jìn)行的，不過(guò)也有可能將第二種藥物與這種前體藥物一起給藥，目的是進(jìn)行體內(nèi)逆轉(zhuǎn)作用。這類(lèi)修飾的實(shí)例包括酯(例如任何一種上述那些酯)，其中逆轉(zhuǎn)作用可以由酯酶等實(shí)施。其他這類(lèi)系統(tǒng)將是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的。
本發(fā)明還涵蓋包含本發(fā)明(第一和第二方面)化合物的藥物組合物。在這一點(diǎn)上，確切地用于人類(lèi)療法，即使本發(fā)明的化合物(包括它們的藥學(xué)上可接受的鹽、酯和藥學(xué)上可接受的溶劑化物)能夠被單獨(dú)給藥，一般地將它們與藥物載體、賦形劑或稀釋劑混合給藥，后者的選擇依據(jù)預(yù)期的給藥途徑和標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)實(shí)踐。
因而，本發(fā)明還涉及藥物組合物，包含一種或多種式I或II化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯，以及至少一種藥學(xué)上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體。
舉例而言，在本發(fā)明的藥物組合物中，本發(fā)明的化合物可以與任何適合的粘合劑、潤(rùn)滑劑、助懸劑、包衣劑和/或增溶劑混合。這類(lèi)適合于本文所述各種不同形式藥物組合物的賦形劑實(shí)例可以參見(jiàn)＂Handbook ofPharmaceutical Excipients，2nd Edition，(1994)，Edited by A Wade and PJWeller。
本發(fā)明的藥物組合物可以適合于口服、直腸、陰道、腸胃外、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、鞘內(nèi)、支氣管內(nèi)、皮下、真皮內(nèi)、靜脈內(nèi)、鼻、含服或舌下途徑給藥。
關(guān)于口服給藥，確切地使用壓制片劑、丸劑、片劑、gellule、滴劑和膠囊劑。優(yōu)選地，這些組合物含每劑有1至250mg、更優(yōu)選10-100mg的活性成分。
其他給藥形式包含溶液或乳劑，它們可以經(jīng)靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、鞘內(nèi)、皮下、皮內(nèi)、腹膜內(nèi)或肌內(nèi)注射，是從無(wú)菌的或可滅菌的溶液制備。本發(fā)明的藥物組合物還可以是栓劑、陰道栓劑、混懸劑、乳劑、洗劑、軟膏劑、乳膏劑、凝膠劑、噴霧劑、溶液或撒布粉劑(dusting powder)的形式。
透皮給藥的替代手段是利用皮膚貼劑。例如，可以將活性成分摻入到由聚乙二醇含水乳劑或液體石蠟組成的乳膏中。還可以將活性成分摻入到由白蠟或白軟石蠟基質(zhì)組成的軟膏劑中，濃度在1與10％的重量之間，還可根據(jù)需要一起摻入穩(wěn)定劑和防腐劑。
可注射形式每劑可以含有10-1000mg、優(yōu)選10-250mg活性成分。
組合物可以被配制成單元?jiǎng)┬?，也就是含有單元?jiǎng)┝侩x散部分或單元?jiǎng)┝康亩嘀鼗騺唵挝弧?br> 本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在對(duì)受治療者給藥時(shí)，能夠容易地確定本發(fā)明組合物之一的適當(dāng)劑量，無(wú)需額外實(shí)驗(yàn)。通常，醫(yī)師將確定最適合于個(gè)體患者的實(shí)際劑量，這將因特定患者的年齡、體重和反應(yīng)而異。本文所公開(kāi)的劑量是一般情況的例證。當(dāng)然可以存在個(gè)別情況，其中更高或更低的劑量范圍也是合理的，也屬于本發(fā)明的范圍。
在例證性的實(shí)施方式中，將對(duì)患者給以一劑或多劑10至150mg/天的劑量，用于治療惡性腫瘤。
本發(fā)明的藥物組合物可以進(jìn)一步包含另外一種或多種抗癌劑，例如市場(chǎng)上供應(yīng)的現(xiàn)有抗癌藥。
抗癌藥一般在聯(lián)合使用時(shí)是更為有效。確切而言，需要避免主要毒性、作用機(jī)理和耐藥性機(jī)理的重疊的時(shí)候，聯(lián)合療法是適當(dāng)?shù)摹４送?，最好以大多?shù)藥物的最大耐受劑量，兩次給藥之間的時(shí)間間隔最小進(jìn)行給藥。聯(lián)合化療藥的主要優(yōu)點(diǎn)是，它可以通過(guò)生化相互作用促進(jìn)加和或者可能的協(xié)同效果，還可以減少早期腫瘤細(xì)胞耐藥性的出現(xiàn)，后者用單一藥物進(jìn)行初始化療時(shí)將響應(yīng)出現(xiàn)。生化相互作用在選擇藥物組合中的用途實(shí)例由下列事實(shí)而得到證明，亞葉酸的給藥將增加5-氟尿嘧啶的活性細(xì)胞內(nèi)代謝產(chǎn)物與其靶胸苷酸合酶的結(jié)合，從而增加其細(xì)胞毒性效果。
在目前癌癥和白血病的治療中使用大量組合。更廣泛的醫(yī)療實(shí)踐評(píng)論可以參見(jiàn)＂Oncologic Therapies＂edited by E.E.Vokes and H.M.Golomb，published by Springer。
受試化合物與已知或懷疑可用于最初的特定癌癥或源于該癌癥的細(xì)胞系治療的藥物的生長(zhǎng)抑制活性研究，可以提示有益的組合。這種方法還可以用來(lái)確定藥物給藥的順序，即在投藥之前、同時(shí)或之后。這類(lèi)時(shí)序安排可以是所有在這里所鑒別的細(xì)胞周期作用藥物的特征。
本發(fā)明的化合物(I)例如可以通過(guò)Traube合成法(A.R.Katritzky，I.Taher，Can.J.Chem.1986，64，2087和其中引用的參考文獻(xiàn))進(jìn)行的改進(jìn)加以合成，也就是1，3-二羰基化合物1或丙烯酸酯2或3與脒4之間的縮合，如流程1所示。
流程1二羰基化合物1繼而可以通過(guò)本領(lǐng)域很多已知的方法制備(J.March，InAdvanced Organic ChemistryReactions，Mechanism，and Structure，4thEd.，John Wiley & Sons，Inc.，New York，1992，p.1283)。特別適合于本發(fā)明目的的丙烯酸酯2和3，是通過(guò)雜環(huán)甲基酮5與叔丁氧基雙(二甲氨基)甲烷6的縮合作用而得到的(流程2)。
流程2二氨基化合物4可為脒4a或胍4b，這取決于一般結(jié)構(gòu)I中的Z的定義。脒(HN＝CRNH2)可以從容易獲得的胺前體與例如烯酮亞胺縮合，或者向適合的腈或亞酰胺化物(imidate)中加入氨。胍4b可以用本領(lǐng)域中大量的已知方法進(jìn)行制備(流程3)。從本發(fā)明的目的講，最有用的途徑是氨腈8與苯胺9的胺化反應(yīng)。
流程3在其中5是吡咯的情況下，可以采用兩種系統(tǒng)(參照流程4)，即，用于生成嘧啶前體2和3的乙?；挥谶量?-位(5X1＝CR9，X2＝NH；即結(jié)構(gòu)5b)或吡咯2-位(X1＝NH，X2＝CR9；即結(jié)構(gòu)5c)。
流程4在兩種情況下，都可以利用本領(lǐng)域已知的方法組裝吡咯環(huán)。特別相關(guān)的是Knorr合成法的改進(jìn)(例如參見(jiàn)J.A.Joule，G.F.Smith，Heterocyclic Chemistry，2nd Ed.，Van Nostrand Reinhold(UK)Co.Ltd.，1978，pp.213-215)。關(guān)于吡咯-3-基系統(tǒng)，首先將活化(也就是R1＝COOEt、CN等)的羰基化合物10進(jìn)行亞硝基化。在例如鋅-乙酸或含水連二硫酸鹽的存在下，使所得肟11與二羰基化合物12縮合，生成反應(yīng)性α-氨基羰基中間體13?？梢赃M(jìn)一步處理所得3-乙酰基吡咯5b中的R1取代基(例如COOEt、CN)，直接地或者在制備中間體2或3，或者在得到吡咯并嘧啶產(chǎn)物I的過(guò)程中。因而，脫羧基作用(R1＝COOEt)將得到R1＝H的產(chǎn)物，氧化作用(R1＝CN)將得到R1＝CONH2的產(chǎn)物等。
此外，R1＝H的產(chǎn)物可以轉(zhuǎn)化為各種衍生物，特別是通過(guò)親電取代反應(yīng)。因而，可以容易得到其中R1是例如鹵素、硝基、氨基、烷基、烷基氨基等的衍生物。在吡咯-2-基系統(tǒng)的情況下，情形是類(lèi)似的，這里活化基團(tuán)需要存在于羰基組分15中(例如R9＝COOEt、CN等)。使其與肟16(衍生自二羰基化合物14)縮合，生成中間體17?？梢园凑张c上述吡咯-3-基系統(tǒng)中的R1基團(tuán)相同的方式處理產(chǎn)物5c或衍生物中的R9取代基。
作為替代選擇，一般結(jié)構(gòu)I化合物可以從適合的嘧啶前體直接得到，例如從2，4-二取代的(鹵素、胺等)嘧啶開(kāi)始經(jīng)過(guò)連續(xù)的取代反應(yīng)。
現(xiàn)在將借助實(shí)施例并參照附圖對(duì)本發(fā)明進(jìn)行描述。
圖1顯示根據(jù)本發(fā)明的化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
實(shí)施例縮寫(xiě)LC-MS，液相色譜-質(zhì)譜；NMR，核磁共振光譜；r.t.，室溫；PE石油醚(40-60℃沸程)；DMSO，二甲亞砜。
一般說(shuō)明NMR光譜是利用Bruker DPX-300儀器記錄的。化學(xué)位移基于四甲基硅烷，以ppm(δ)表示。使用EM Kieselgel 60(0.040-0.063mm)進(jìn)行快速柱色譜。熔點(diǎn)是用LEICA testo-720電溫度計(jì)測(cè)定的，并且未經(jīng)校正。在適當(dāng)時(shí)候，化合物編號(hào)如括號(hào)內(nèi)所示。
實(shí)施例13-二甲氨基-1-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-丙烯酮 將1-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-乙酮(2g，15mmol)在5ml 1，1-雙-二甲氨基-3，3-二甲基-丁-2-酮中的混合物在100℃加熱22小時(shí)。將反應(yīng)混合物的沉淀懸浮在EtOAc/PE中，并冷卻。將粗產(chǎn)物過(guò)濾，用EtOAc/PE洗滌，在真空中干燥，得到標(biāo)題化合物，為紫色固體(2.6g)。
1H-NMR(CDCl3)δ2.25(s，6H，CH3)，2.45(s，6H，CH3)，5.46(d，1H，J＝12.6Hz，CH)，6.35(s，1H，吡咯基-H)，7.63(d，1H，J＝12.6Hz，CH).
實(shí)施例2[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[1]向3-二甲氨基-1-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-丙烯酮(1mmol，0.19g)與硝酸4-氟苯基胍(2mmol，0.44g)在2-甲氧基乙醇(5ml)中的混合物加入NaOH(40mg)。將反應(yīng)混合物在N2下100-120℃加熱6小時(shí)。蒸發(fā)溶劑至干，殘余物經(jīng)過(guò)快速色譜純化(1∶2 EtOAc/PE)。從EtOAc/PE中重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物(174mg，62％)，為褐色晶體。
1H-NMR(CDCl3)δ2.21(s，3H，CH3)，2.43(s，3H，CH3)，6.33(s，1H，吡咯基-H)，6.73(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H)，7.00(m，2H，Ph-H)，7.79(m，2H，Ph-H)，8.28(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H)，9.16(s，1H，NH)，10.59(s，1H，NH).
按照類(lèi)似于上述的方式制備下列化合物[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[2]黃色固體。M.p.197-199℃.LC-MSm/z＝310(M+1).C16H15N5O2要求C，62.12;H，4.89；N，22.64；實(shí)測(cè)C，62.61；H，4.99；N，22.20.1H-NMR(CDCl3)δ2.71(d，6H，CH3)，7.05(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H)，7.47(m，2H，Ph-H)，7.78(m，1H，Ph-H)，7.81(s，1H，Ar-H)，8.07(m，1H，Ph-H)，8.51(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H)，8.99(br.s，1H，NH)，9.91(br.s，1H，NH).-(4-碘-苯基)-胺[3]1H-NMR(CDCl3)δ2.26(s，3H，CH3)，2.48(s，3H，CH3)，6.80(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H)，7.47(m，2H，Ph-H)，7.57(m，2H，Ph-H)，7.23(s，1H，吡咯基-H)，8.32(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H).
(3，4-二氟-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[4]1H-NMR(CDCl3)δ2.23(s，3H，CH3)，2.46(s，3H，CH3)，6.42(m，1H，吡咯基-H)，6.77(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H)，7.11(m，1H，Ph-H)，7.41(m，1H，Ph-H)，8.05(m，1H，Ph-H)，8.29(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H)，9.21(s，1H，Ph-H)，10.46(br.s，1H，NH).
(4-氯-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[5]M.p.219-223℃.MS[M+H]+＝299.4(C16H15ClN4要求298.8).1H-NMR(DMSO-d6)δ2.19(s，3H，CH3)，2.42(s，3H，CH3)，6.48(s，1H，吡咯基-H)，6.82(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H)，7.31(d，2H，J＝8.7Hz，Ph-H)，7.84(d，2H，J＝8.7Hz，Ph-H)，8.34(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H)，9.45(s，1H，Ph-H)，10.72(br.s，1H，NH).
(3，5-二氟-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[6]M.p.153.3-156.8℃.MS[M+H]+＝303.6(C16H14F2N4要求300.3).1H-NMR(CD3OD)δ2.25(s，3H，CH3)，2.47(s，3H，CH3)，6.42-6.48(m，2H，吡咯基-H和Ph-H)，6.80(d，1H，J＝5.5Hz，嘧啶基-H)，7.44-7.48(m，2H，Ph-H)，8.31(d，1H，J＝5.5Hz，嘧啶基-H).
4-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯酚[7]
M.p.189.5-193.4℃.MS[M+H]+＝281.9(C16H16N4O要求280.3).1H-NMR(CD3OD)δ2.23(s，3H，CH3)，2.43(s，3H，CH3)，6.44(s，1H，吡咯基-H)，6.75-6.78(m，3H，嘧啶基-H和Ph-H)，7.39(d，2H，J＝8.8Hz，Ph-H)，8.17(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H).
3-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯酚[8]M.p.169.0-174.6℃.MS[M+H]+＝281.3(C16H16N4O要求280.3).1H-NMR(CD3OD)δ2.26(s，3H，CH3)，2.47(s，3H，CH3)，6.44-6.48(m，2H，吡咯基-H，Ph-H)，6.84(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，7.05-7.10(m，2H，Ph-H)，7.32(m，1H，Ph-H)，8.25(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H).
(2，4-二氟-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[9]M.p.219-220℃.MS[M+H]+＝302.6(C16H14F2N2要求300.3).1H-NMR(DMSO-d6)δ2.10(s，3H，CH3)，2.36(s，3H，CH3)，6.43(s，1H，吡咯基-H)，6.77(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H)，7.06(m，1H，Ph-H)，7.27(m，1H，Ph-H)，7.66(m，1H，Ph-H)，8.25(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H)，8.71(s，1H，Ph-H)，10.70(br.s，1H，NH).
(2，4-二氯-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[10]M.p.158.5-159.7℃.MS[M+H]+＝335.4(C16H14Cl2N4要求333.2).
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.18(s，3H，CH3)，2.38(s，3H，CH3)，6.51(s，1H，吡咯基-H)，6.90(d，1H，J＝5.5Hz，嘧啶基-H)，7.46(m，1H，Ph-H)，7.71(m，1H，Ph-H)，8.05(m，1H，Ph-H)，8.36(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H)，8.49(s，1H，Ph-H)，10.80(br.s，1H，NH).
(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[11]M.p.187.7-190.7℃.MS[M+H]+＝368.6(C17H14ClF3N4要求366.8).1H-NMR(DMSO-d6)δ2.19(s，3H，CH3)，2.42(s，3H，CH3)，6.50(s，1H，吡咯基-H)，6.89(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H)，7.61(m，1H，Ph-H)，8.08(m，1H，Ph-H)，8.39-8.42(m，2H，Ph-H和嘧啶基-H)，9.79(s，1H)，10.80(br.s，1H，NH).-(4-三氟甲基苯基)-胺[12]M.p.165.6-167.9℃.MS[M+H]+＝332.9(C17H15F3N3要求332.3).1H-NMR(DMSO-d6)δ2.26(s，3H，CH3)，2.49(s，3H，CH3)，6.56(s，1H，吡咯基-H)，6.94(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H)，7.67(d，2H，J＝8.5Hz，Ph-H)，8.09(d，2H，J＝8.5Hz，Ph-H)，8.45(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H)，9.82(s，1H，NH).-(3-三氟甲基-苯基)-胺[13]M.p.152.7-154.3℃.MS[M+H]+＝332.6(C17H15F3N4要求332.3).1H-NMR(DMSO-d6)δ2.26(s，3H，CH3)，2.48(s，3H，CH3)，6.56(s，1H，吡咯基-H)，6.92(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H)，7.29(m，1H，Ph-H)，7.55(m，1H，Ph-H)，8.03(m，1H，Ph-H)，8.42-7.45(m，2H，嘧啶基-H和Ph-H)，9.73(s，1H，NH)，10.83(br.s，1H，NH).
(3-氯-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[14]M.p.140.4-144.2℃.MS[M+H]+＝299.5(C16H15ClN4要求298.8).1H-NMR(DMSO-d6)δ2.21(s，3H，CH3)，2.44(s，3H，CH3)，6.51(s，1H，吡咯基-H)，6.85(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H)，6.94(d，1H，J＝7.6Hz，Ph-H)，7.28(t，1H，J＝8.1Hz，Ph-H)，7.61(d，1H，J＝8.2Hz，Ph-H)，8.19(s，1H，Ph-H)，8.37(d，1H，J＝5.3Hz，嘧啶基-H)，9.55(s，1H，NH)，10.78(br.s，1H，NH).
N-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-N′，N′-二甲基-苯-1，4-二胺[15]M.p.179.9-182.1℃.MS[M+H]+＝307.3(C18H21N5要求307.4).1H-NMR(CDCl3)δ2.25(s，3H，CH3)，2.46(s，3H，CH3)，2.91(s，6H，CH3)，6.46(s，1H，吡咯基-H)，6.70(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，6.78(dd，2H，J＝6.8，2.2Hz，Ph-H)，6.79(br.s，1H；NH)，7.45(dd，2H，J＝6.8，2.2Hz，Ph-H)，7.80(br.s，1H，NH)，8.28(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H).
(3-氯-4-碘-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[16]M.p.185.0-187.4℃.MS[M+H]+＝423.9(C16H14ClIN4要求424.7).1H-NMR(DMSO-d6)δ2.18(s，3H，CH3)，2.41(s，3H，CH3)，6.48(s，1H，吡咯基-H)，6.84(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，7.40(dd，1H，J＝8.8，2.4Hz，Ph-H)，7.75(d，1H，J＝8.8Hz，Ph-H)，8.34(m，1H，Ph-H)，8.36(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，9.61(s，1H，NH)，10.75(s，1H，NH).-(3-氟-4-碘-苯基)-胺[17]
M.p.200-202℃.MS[M+H]+＝407.4(C16H14FIN4要求408.2).1H-NMR(DMSO-d6)δ2.18(s，3H，CH3)，2.40(s，3H，CH3)，6.48(s，1H，吡咯基-H)，6.84(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，7.35(m，1H，Ph-H)，7.64(t，1H，J＝8.0Hz，Ph-H)，8.02(dd，1H，J＝12.0，2.2Hz，Ph-H)，8.36(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，9.65(s，1H，NH)，10.75(s，1H，NH).
實(shí)施例34-(3-二甲氨基-丙烯酰基)-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈 將氰基乙酸乙酯(10ml，94mmol)用AcOH(20ml)稀釋?zhuān)瑢⑷芤豪鋮s至-10℃(冰-MeOH浴)。將NaNO2(6.5g，94mmol)溶于H2O(10ml)，歷經(jīng)40分鐘滴加溶液，保持內(nèi)部溫度＜0℃。加入完成后，將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)，同時(shí)冷卻。然后溫?zé)嶂潦覝?，攪拌另?小時(shí)。將混合物用乙酸(50ml)和H2O(50ml)稀釋。加入戊烷-2，4-二酮(10.6ml，103mmol)，將混合物加熱至75℃。歷經(jīng)30分鐘向該反應(yīng)混合物分批加入鋅粉(6.9g，105mmol)，加入速率保持內(nèi)部溫度＜90℃。然后將反應(yīng)混合物另外加熱30分鐘，再倒入H2O(1ml)中。從反應(yīng)混合物中過(guò)濾出3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈(3.67g)，為灰白色固體。將濾液用EtOAc萃取(3×500ml)。合并有機(jī)萃取液，洗滌(鹽水)，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑得到褐色的油，經(jīng)過(guò)色譜純化(100g SiO2；用4∶1庚烷/EtOAc洗脫)，得到另一批(4.41g)該產(chǎn)物，為淡黃色固體(總收率72％)。
將3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈(1.2g，10mmol)溶于無(wú)水1，2-二氯乙烷(15ml)，逐批加入AlCl3(2.93g，22mmol)。在反應(yīng)容器中充入N2，在冰水浴中冷卻。滴加AcCl(0.71ml，10mmol)，將混合物攪拌1小時(shí)，同時(shí)冷卻，并在室溫另外攪拌3小時(shí)。小心地加入2M HCl水溶液，終止反應(yīng)混合物。加入NaHCO3調(diào)節(jié)混合物的酸度至大約pH 6。分離有機(jī)相后，含水相用EtOAc萃取(3×100ml)。合并有機(jī)相，洗滌(先H2O后鹽水)，干燥(MgSO4)，過(guò)濾。蒸發(fā)溶劑，得到4-乙?；?3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈(1.42g，88％)，為淡黃褐色固體。1H-NMR(CDCl3)δ2.44(s，3H，CH3)，2.45(s，3H，CH3)，2.54(s，3H，CH3)，8.75(br.s，1H，NH).
將4-乙?；?3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈(1.38g，8.51mmol)懸浮在1，1-雙-二甲氨基-3，3-二甲基-丁-2-酮(1.3ml)中，在75℃下加熱42小時(shí)。蒸發(fā)反應(yīng)混合物至干，殘余物經(jīng)過(guò)SiO2色譜純化(庚烷/EtOAc)，得到標(biāo)題化合物(1.2g，65％)，為淡黃褐色固體。1H-NMR(DMSO-d6)δ2.21(s，3H，CH3)，2.31(s，3H，CH3)，3.32(s，6H，CH3)，5.22(d，1H，J＝12.4Hz，CH)，7.47(d，1H，J＝12.4Hz，CH)，11.96(br.s，1H，NH).
實(shí)施例43，5-二甲基-4-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈[31]向4-(3-二甲氨基-丙烯?；?-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈(1.0mmol，0.22g)與硝酸3-硝基苯基胍(1.5mmol，0.36g)在2-甲氧基乙醇(5ml)中的混合物加入K2CO3(138mg，1.0mmol)。將反應(yīng)混合物在N2下120℃加熱18小時(shí)。蒸發(fā)溶劑至干，殘余物經(jīng)過(guò)快速色譜純化(1∶2 EtOAc/庚烷)，得到標(biāo)題化合物，為淺黃色固體。M.p.258-259℃.MS[M+H]+＝336.1(C17H14N6O2要求334.3).1H-NMR(CD3OD)δ2.39(s，3H，CH3)，2.49(s，3H，CH3)，6.94(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.50(t，1H，J＝8.3Hz，Ph-H)，7.81(m，1H，Ph-H)，7.94(m，1H，Ph-H)，8.45(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，8.94(t，1H，J＝2.2Hz，Ph-H).
按照類(lèi)似于上述的方式制備下列化合物4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[32]MS[M+H]+＝307.7(C17H14FN5要求307.3).
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.30(s，3H，CH3)，2.40(s，3H，CH3)，6.84(d，1H，J＝5.0Hz，嘧啶基-H)，7.00(m，2H，Ph-H)，7.73(m，2H，Ph-H)，8.40(d，1H，J＝5.5Hz，嘧啶基-H)，9.46(s，1H，NH)，12.19(br.s，1H，NH).
4-[2-(4-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[33]M.p.272-276℃.MS[M+H]+＝305.8(C17H15N5O要求305.3).1H-NMR(CD3OD)δ2.33(s，3H，CH3)，2.41(s，3H，CH3)，6.74-6.56(m，3H，嘧啶基-H/Ph-H)，7.36(d，2H，J＝8.5Hz，Ph-H)，8.25(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H).
3，5-二甲基-4-[2-(4-三氟甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈[34]
M.p.195.6-198.9℃.MS[M+H]+＝357.7(C18H14F3N5要求357.3).1H-NMR(CDCl3)δ2.33(s，3H，CH3)，2.44(s，3H，CH3)，6.75(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.20(br.s，1H，NH)，7.50(d，2H，J＝8.8Hz，Ph-H)，7.71(d，2H，J＝8.8Hz，Ph-H)，8.39(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基)，8.40(br.s，1H，NH).
4-[2-(4-碘-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[35]M.p.178.3-181.2℃.MS[M+H]+＝416.6(C18H14IN5要求415.2).1H-NMR(CDCl3)δ2.39(s，3H，CH3)，2.49(s，3H，CH3)，6.76(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.10(br.s，1H，NH)，7.44(d，2H，J＝8.8Hz，Ph-H)，7.61(d，2H，J＝8.8Hz，Ph-H)，8.42(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，8.45(br.s，1H，NH).
4-[2-(3-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[36]M.p.247-250℃.MS[M+H]+＝305.8(C17H15N5O要求305.3).1H-NMR(DMSO-d6)δ2.31(s，3H，CH3)，2.41(s，3H，CH3)，6.33(m，1H，Ph-H)，6.82(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.01(t，1H，J＝8.1Hz，Ph-H)，7.11(m，1H，Ph-H)，7.33(t，1H，J＝2.1Hz，Ph-H)，8.40(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，9.18(s，1H)，9.30(s，1H)，12.20(br.s，1H，NH).
3，5-二甲基-4-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈[37]M.p.233-237℃.MS[M+H]+＝350.0(C18H16N6O2要求348.6).1H-NMR(DMSO-d6)δ2.31(s，3H，CH3)，2.42(s，3H，CH3)，2.44(s，3H，CH3)，6.92(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，7.39(d，1H，J＝8.5Hz，Ph-H)，7.87(dd，1H，J＝8.1，1.7Hz，Ph-H)，8.48(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，8.63(d，1H，J＝1.7Hz，Ph-H)，9.87(s，1H，NH)，12.21(br.s，1H，NH).
4-[2-(3-碘-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[38]M.p.189.5-191.7℃.MS[M+H]+＝431.5(C18H16IN5要求429.6).1H-NMR(DMSO-d6)δ2.29(s，3H，CH3)，2.32(s，3H，CH3)，2.43(s，3H，CH3)，6.85(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.20(d，1H，J＝8.1Hz，Ph-H)，7.57(m，1H，Ph-H)，8.41-8.43(m，2H，Ph-H，嘧啶基-H)，9.48(s，1H，NH)，12.20(br.s，1H，NH).
4-[2-(4-氯-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[39]M.p.194.2-197.9℃.MS[M+H]+＝338.0(C18H16ClN5要求337.8).1H-NMR(DMSO-d6)δ2.27(s，3H，CH3)，2.31(s，3H，CH3)，2.41(s，3H，CH3)，6.86(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，7.28(d，1H，J＝8.5Hz，Ph-H)，7.61(dd，1H，J＝8.8，2.4Hz，Ph-H)，7.73(d，1H，J＝2.7Hz，Ph-H)，8.43(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，9.51(s，1H，NH)，12.21(br.s，1H，NH).
4-[2-(3-羥基-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[40]M.p.221-225℃.MS[M+H]+＝320.9(C18H17N5O要求319.4).1H-NMR(DMSO-d6)δ2.03(s，3H，CH3)，2.29(s，3H，CH3)，2.40(s，3H，CH3)，6.78(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，689(d，1H，J＝8.1Hz，Ph-H)，7.02(dd，1H，J＝8.3，1.7Hz，Ph-H)，7.29(d，1H，J＝0.7Hz，Ph-H)，8.37(d，1H，J＝4.9Hz，嘧啶基-H)，9.08(s，1H)，9.20(s，1H)，12.17(br.s，1H，NH).
4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[41]M.p.161.3-164.1℃.MS[M+H]+＝321.6(C18H16FN5要求321.4).1H-NMR(DMSO-d6)δ2.19(s，3H，CH3)，2.30(s，3H，CH3)，2.42(s，3H，CH3)，6.82(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.03(t，1H，J＝9.3Hz，Ph-H)，7.53(m，1H，Ph-H)，7.61(dd，1H，J＝7.1，2.4Hz，Ph-H)，8.39(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，9.36(s，1H，NH)，12.20(br.s，1H，NH).
4-[2-(3-氟-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[42]M.p.177.7-179.9℃.MS[M+H]+＝322.5(C18H16FN5要求321.3).1H-NMR(DMSO-d6)δ2.15(s，3H，CH3)，2.30(s，3H，CH3)，2.43(s，3H，CH3)，6.86(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.13(t，1H，J＝9.0Hz，Ph-H)，7.36(dd，1H，J＝8.1，1.7Hz，Ph-H)，7.75(dd，1H，J＝12.9，1.5Hz，Ph-H)，8.43(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，9.56(s，1H，NH)，12.21(br.s，1H，NH).
4-[2-(4-二甲氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[43]
M.p.190.6-193.7℃.MS[M+H]+＝334.7(C19H20N6要求332.4).1H-NMR(CDCl3)δ2.36(s，3H，CH3)，2.46(s，3H，CH3)，2.94(br.s，6H，CH3)，6.66(d，1H，J＝5.6Hz，嘧啶基-H)，6.79-6.80(m，2H，Ph-H)，7.05(br.s，1H，NH)，7.40-7.43(m，2H，Ph-H)，8.34(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，8.52(br.s，1H，NH).
實(shí)施例54-(3-二甲氨基-丙烯?；?-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酰胺 將1-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-乙酮(1.1g，10mmol)部分溶于2M氨的MeOH溶液，歷經(jīng)40分鐘滴加H2O2(10ml 27％w/w的H2O溶液)，加入速率保持內(nèi)部溫度≤30℃。將混合物室溫?cái)嚢?8小時(shí)。過(guò)濾所得懸浮的白色固體，從EtOAc中重結(jié)晶，得到4-乙?；?3，5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酰胺(1.06g)。在N2充氣過(guò)的燒瓶?jī)?nèi)，將等分試樣(720mg，4mmol)懸浮在1，1-雙-二甲氨基-3，3-二甲基-丁-2-酮(2ml，9.6mmol)中，在75℃下加熱48小時(shí)。將粗混合物冷卻，經(jīng)過(guò)SiO2色譜純化(EtOAc/MeOH梯度洗脫)。得到標(biāo)題化合物(449mg)，為淺黃色固體。1H-NMR(DMSO-d6)δ2.30(s，3H，CH3)，2.46(s，3H，CH3)，2.90(br.s，2H，NH).3.09(s，3H，CH3)，3.13(s，3H，CH3)，5.23(d，1H，J＝12.4Hz，CH)，7.38(d，1H，J＝12.7Hz，CH)，10.97(br.s，1H，NH).
實(shí)施例64-[2-(4-氟-苯基氨基)嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酰胺[44]將4-(3-二甲氨基-丙烯酰基)-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酰胺(100mg，0.43mmol)、硝酸4-氟苯基胍(139mg，0.65mmol)和K2CO3(94mg，0.68mmol)部分溶于2-甲氧基乙醇(5ml)，在120℃加熱18小時(shí)。在真空中濃縮混合物，經(jīng)過(guò)SiO2色譜純化(EtOAc/MeOH梯度洗脫)。在iPr2O中研磨粗產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(31mg)，為淺黃色固體。M.p.93.5-96.8℃.MS[M+H]+＝326.9(C17H16FN5O要求325.3).1H-NMR(DMSO-d6)δ2.36(s，3H，CH3)，2.39(s，3H，CH3)，6.79(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，6.92(br.s，2H，NH)，7.07(t，2H，J＝8.5Hz，Ph-H)，7.76-7.78(m，2H，Ph-H)，8.36(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，9.41(s，1H，NH)，11.24(br.s，1H，NH).
實(shí)施例73-二甲氨基-1-(3，5-二甲基-1H-吡咯-2-基)-丙烯酮 將戊烷-2，4-二酮(10.3ml，0.1mol)用AcOH稀釋?zhuān)鋮s至0℃。將NaNO2(6.9g，0.1mol)溶于H2O(10ml)中并滴加，同時(shí)保持內(nèi)部溫度≤10℃。將混合物攪拌1小時(shí)，同時(shí)冷卻，然后在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將乙酰乙酸乙酯(14ml，0.11mol)溶于1∶1 AcOH/H2O(100ml)，加入鋅粉(7.19g，0.11mol)。向其中加入肟溶液，將混合物在100℃加熱30分鐘，然后倒入H2O(0.8L)中。含水混合物用EtOAc萃取(3×500ml)。合并有機(jī)萃取液，洗滌(鹽水)，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，在真空中蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過(guò)SiO2色譜純化(庚烷/EtOAc梯度洗脫)，得到5-乙酰基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-甲酸乙酯(4.32g)。將等分試樣(3.5g，16.7mmol)加入到KOH(4.22g，75.3mmol)的H2O(5ml)溶液中，將混合物在130℃加熱18小時(shí)。然后冷卻，用H2O(50ml)稀釋?zhuān)?M HCl水溶液酸化。該混合物用EtOAc萃取(3×50ml)。合并有機(jī)萃取液，洗滌(鹽水)，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，在真空中蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過(guò)SiO2色譜純化(EtOAc)，得到1-(3，5-二甲基-1H-吡咯-2-基)-乙酮(1.05g)。在N2充氣過(guò)的燒瓶?jī)?nèi)，將等分試樣(536mg，3.9mmol)懸浮在N，N-二.甲基甲酰胺二甲基縮醛(1.2ml，8.8mmol)中，在90℃下加熱48小時(shí)。將混合物冷卻，在冷EtOAc中研磨。過(guò)濾所得沉淀，用EtOAc洗滌，得到標(biāo)題化合物(444mg)，為淺黃色固體。1H-NMR(DMSO-d6)δ1.41(s，3H，CH3)，2.23(s，3H，CH3)，2.23(br.s，6H，CH3)，4.77(d，1H，J＝12.4Hz，CH)，4.95(s，1H，吡咯基-H)，6.85(d，1H，J＝12.4Hz，CH).
實(shí)施例8[4-(3，5-二甲基-1H-吡咯-2-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[45]將3-二甲氨基-1-(3，5-二甲基-1H-吡咯-2-基)-丙烯酮(125mg，0.65mmol)、硝酸4-氟苯基胍(211mg，0.98mmol)和K2CO3(149mg；1.08mmol)部分溶于2-甲氧基乙醇中，在120℃加熱18小時(shí)。在真空中濃縮混合物，經(jīng)過(guò)SiO2色譜純化(5-g Isolute SITM柱體，用庚烷/EtOAc梯度洗脫)。在iPr2O中研磨粗產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(158mg)，為淺黃色固體。M.p.168.4-171.5℃.MS[M+H]+＝283.9(C16H15FN4要求282.3).1H-NMR(CDCl3)δ2.30(s，3H，CH3)，2.35(s，3H，CH3)，5.85(s，1H，吡咯基-H)，6.83(d，1H，J＝5.6Hz，嘧啶基-H)，6.87(br.s，1H，NH)，7.05(t，2H，J＝8.5Hz，Ph-H)，7.51-7.54(m，2H，Ph-H)，8.26(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，9.08(br.s，1H，NH).
實(shí)施例93-二甲氨基-1-(1，2，4-三甲基-1H-吡咯-3-基)-丙烯酮 將KOH(818mg，14.6mmol)部分溶于DMSO(15ml)中，攪拌5分鐘。分小批量加入1-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-乙酮(1g，7.3mmol)，將混合物攪拌45分鐘。滴加碘甲烷(0.54ml，8.75mmol)，加入速率保持內(nèi)部溫度≤30℃。將混合物另外攪拌45分鐘，然后倒入H2O(50ml)中，用Et2O萃取(3×60ml)。合并有機(jī)萃取液，洗滌(鹽水)，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，在真空中蒸發(fā)，得到1-(1，2，4-三甲基-1H-吡咯-3-基)-乙酮(1.06g)，為粉紅色固體。在N2充氣過(guò)的燒瓶?jī)?nèi)，將其懸浮在1，1-雙-二甲氨基-3，3-二甲基-丁-2-酮(3.6ml，17.5mmol)中，在70℃下加熱36小時(shí)。在真空中蒸發(fā)混合物，在EtOAc中研磨殘余物。得到標(biāo)題化合物(973mg)，為微紅色固體。1H-NMR(DMSO-d6)δ1.30(s，3H，CH3)，1.51(s，3H，CH3)，2.20(br.s，6H，CH3)，2.66(s，3H，CH3)，4.57(d，1H，J＝12.5Hz，CH)，5.53(s，1H，吡咯基-H)，6.72(d，1H，J＝12.7Hz，CH).
實(shí)施例10(4-氟-苯基)-[4-(1，2，4-三甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[46]將3-二甲氨基-1-(1，2，4-三甲基-1H-吡咯-3-基)-丙烯酮(150mg，0.73mmol)、硝酸4-氟苯基胍(189mg，0.87mmol)和K2CO3(144mg，1.04mmol)部分溶于2-甲氧基乙醇(3ml)，在110℃加熱36小時(shí)。在真空中濃縮混合物，經(jīng)過(guò)SiO2色譜純化(庚烷/EtOAc梯度洗脫)。從iPr2O/庚烷中重結(jié)晶后，得到標(biāo)題化合物(20mg)，為微褐色固體。M.p.124.2-128.3℃.MS[M+H]+＝298.4(C17H17FN4要求296.3).1H-NMR(CDCl3)δ2.21(s，3H，CH3)，2.42(s，3H，CH3)，3.51(s，3H，CH3)，6.40(s，1H，吡咯基-H)，6.76(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，7.01(t，2H，J＝8.8Hz，Ph-H)，7.58-7.61(m，2H，Ph-H)，7.70(br.s，1H，NH)，8.28(d，1H，J＝5.6Hz，嘧啶基-H).
實(shí)施例113-二甲氨基-1-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-丙烯酮 在室溫下，向Ac2O(5ml)中滴加HNO3(0.28ml的69％w/v 水溶液，4.37mmol)，同時(shí)保持內(nèi)部溫度≤25℃。將硝化混合物在室溫下攪拌15分鐘，然后冷卻至-40℃。將1-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-乙酮(500mg，3.64mmol)溶于Ac2O(6ml)中，滴加，同時(shí)保持內(nèi)部溫度≤-30℃。將混合物在-40℃攪拌30分鐘，然后在-10℃下攪拌另外30分鐘。將混合物倒入冰水(50ml)中，用Et2O萃取(3×60ml)。合并有機(jī)萃取液，洗滌(鹽水)，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾，在真空中蒸發(fā)，得到深褐色固體。從MeOH中重結(jié)晶，得到1-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-乙酮(158mg)。在N2元?dú)膺^(guò)的燒瓶?jī)?nèi)，將等分試樣(150mg，0.82mmol)懸浮在1，1-雙-二甲氨基-3，3-二甲基-丁-2-酮(0.42ml，2.02mmol)中，在70℃下加熱18小時(shí)。在EtOAc中研磨混合物，得到標(biāo)題化合物(119mg)，為褐色固體。1H-NMR(DMSO-d6)δ2.30(s，3H，CH3)，2.40(s，3H，CH3)，2.80(br.s，3H，CH3)，3.07(br.s，3H，CH3)，5.19(d，1H，J＝12.7Hz，CH)，7.45(d，1H，J＝12.4Hz，CH)，12.76(br，1H，NH).
實(shí)施例12[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[47]將3-二甲氨基-1-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-丙烯酮(110mg，0.46mmol)、硝酸4-氟苯基胍(150mg，0.7mmol)和K2CO3(193mg，1.4mmol)部分溶于2-甲氧基乙醇中，在120℃下加熱18小時(shí)。在真空中濃縮混合物，經(jīng)過(guò)SiO2色譜純化(庚烷/EtOAc梯度洗脫)。在iPr2O中研磨粗產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物(22mg)，為淡橙色固體。M.p.166.3-170.1℃.MS[M+H]+＝329.3(C16H14F7N5O2要求327.3).1H-NMR(DMSO-d6)δ2.49(s，3H，CH3)，2.59(s，3H，CH3)，6.73(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.04(t，2H，J＝8.8Hz，Ph-H)，7.07(br.s，1H，NH)，7.55-7.58(m，2H，Ph-H)，8.44(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，9.40(br.s，1H，NH).
按照類(lèi)似的方式制備下列化合物N-[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-N′，N′-二甲基-苯-1，4-二胺[48]M.p.265-268℃.MS[M+H]+＝353.0(C18H20N6O2要求352.4).1H-NMR(DMSO-d6)δ2.39(s，3H，CH3)，2.48(br.s，6H，CH3)，2.82(s，3H，CH3)，6.69(d，2H，J＝9.0Hz，Ph-H)，6.74(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.50(d，2H，J＝9.0Hz，Ph-H)，8.38(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，9.18(s，1H，NH)，13.00(br.s，1H，NH).
實(shí)施例13[4-(5-氨基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[49]將[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺(45mg，0.14mmol)溶于EtOH(3ml)中，加入10％Pd(C)催化劑(10mg)，然后加入水合肼(48μl的55％w/w水溶液，0.84mmol)。將混合物加熱回流18小時(shí)。使冷卻后的混合物通過(guò)Celite過(guò)濾助器過(guò)濾，真空蒸發(fā)濾液。殘余物經(jīng)過(guò)SiO2色譜純化(20∶1 EtOAc/2M氨的MeOH溶液)，得到標(biāo)題化合物(14mg)，為黃色固體。M.p.227-231℃.MS[M+H]+＝397.8(C16H16FN5要求297.3).1H-NMR(CDCl3)δ1.98(s，3H，CH3)，2.37(s，3H，CH3)，4.86(br.s，2H，NH2)，6.65(d，1H，J＝4.9Hz，嘧啶基-H)，7.03(t，2H，J＝8.3Hz，Ph-H)，7.49(br.s，2H，NH)，7.58-7.61(m，2H，Ph-H)，8.53(d，1H，J＝4.9Hz，嘧啶基-H).
實(shí)施例14[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[50]將[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺(80mg，0.28mmol)溶于THF(4ml)中，冷卻至-50℃。將N-溴代琥珀酰亞胺(55mg，0.31mmol)溶于THF(2ml)中，滴加，同時(shí)保持內(nèi)部溫度≤-40℃。將混合物攪拌1小時(shí)，同時(shí)冷卻，然后在真空中蒸發(fā)。將殘余物用H2O(10ml)處理，用EtOAc萃取(3×10ml)。合并有機(jī)萃取液，洗滌(鹽水)，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，在真空中蒸發(fā)。粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)SiO2色譜純化(庚烷/EtOAc梯度洗脫)，從iPr2O中重結(jié)晶后得到標(biāo)題化合物(19mg)，為橙色固體。M.p.181.4-183.3℃.MS[M+H]+＝362.9(C16H14BrFN4要求361.2).1H-NMR(CDCl3)δ2.10(s，3H，CH3)，2.36(s，3H，CH3)，6.56(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，6.97(t，2H，J＝8.3Hz，Ph-H)，7.00(br.s，1H，NH)，7.79-7.52(m，2H，Ph-H)，8.85(br.s，1H，NH)，8.26(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H).
按照類(lèi)似的方式制備下列化合物[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[51]M.p.198.1-203℃.MS[M+H]+＝389.3(C16H14BrN5O4要求361.2).1H-NMR(CDCl3)δ2.49(s，3H，CH3)，2.59(s，3H，CH3)6.73(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.04(t，2H，J＝8.8Hz，Ph-H)，7.57(m，2H，Ph-H)，7.90(br.s，1H，NH)，8.44(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，9.40(br.s，1H，NH).
實(shí)施例15[4-(5-氯-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[52]將[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺(80mg，0.28mmol)溶于THF(4ml)中，冷卻至-60℃。將N-氯代琥珀酰亞胺(41mg，0.31mmol)溶于THF(2ml)中，滴加，同時(shí)保持內(nèi)部溫度≤-50℃。將混合物攪拌30分鐘，同時(shí)冷卻，然后在真空中蒸發(fā)。將殘余物用H2O(10ml)處理，用EtOAc萃取(3×10ml)。合并有機(jī)萃取液，洗滌(鹽水)，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，在真空中蒸發(fā)。粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)SiO2色譜純化(庚烷/EtOAc梯度洗脫)，從iPr2O中重結(jié)晶后得到標(biāo)題化合物(37mg)，為橙色固體。M.p.200-203℃.MS[M+H]+＝317.7(C16H14ClFN4要求316.8).1H-NMR(CDCl3)15.2.17(s，3H，CH3)，2.42(s，3H，CH3)6.77(d，1H，J＝5.9Hz，嘧啶基-H)，7.02-7.06(m，3H，Ph-H，NH)，7.54-7.56(m，2H，Ph-H)，7.95(br.s，1H，NH)，8.25(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H).
實(shí)施例16[4-(5-二乙氨基甲基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[53]
將二乙胺(40μl，0.31mmol)用甲醇(0.5ml)稀釋?zhuān)尤爰兹?30μl的37％w/w水溶液，0.37mmol)。分小批量加入[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺(87mg，0.31mmol)，將混合物加熱至回流。1.5小時(shí)后，將混合物用H2O(10ml)稀釋。過(guò)濾所得沉淀，在2M HCl水溶液中研磨。過(guò)濾混合物，濾液用2M NaOH水溶液洗滌。濾液用EtOAc萃取(3×15ml)。合并有機(jī)萃取液，洗滌(鹽水)，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，在真空中蒸發(fā)。粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)SiO2色譜純化(庚烷/EtOAc梯度洗脫)，從iPr2O中重結(jié)晶后得到標(biāo)題化合物(36mg)，為橙色固體。M.p.71.9-74.2℃.MS[M+H]+＝367.7(C21H26FN5要求367.5).1H-NMR(CD3OD)δ1.10(t，6H，J＝7.1Hz，CH3)，2.19(s，3H，CH3)，2.41(s，3H，CH3)，2.58(t，4H，J＝7.8Hz，CH2)，3.56(s，2H，CH2)，6.78(d，1H，J＝5.6Hz，嘧啶基-H)，7.00(t，2H，J＝8.5Hz，Ph-H)，7.61-7.63(m，2H，Ph-H)，8.22(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H).
按照類(lèi)似的方式制備下列化合物[4-(5-二甲氨基甲基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟苯基)-胺[54]M.p.88.4-91.6℃.
MS[M+H]+＝340.6(C19H22FN5要求339.4).
1H-NMR(CDCl3)δ2.18(s，3H，CH3)，2.56(s，6H，CH3)，2.42(s，3H，CH3)，3.38(s，2H，CH2)，6.75(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，7.00(t，2H，J＝8.6Hz，Ph-H)，7.13(br.s，1H，NH)，7.56-7.59(m，2H，Ph-H)，8.31(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，8.55(br.s，1H，NH).-(4-氟苯基)-胺[55]M.p.94.7-97.6℃.MS[M+H]+＝382.1(C21H24FN5O要求381.5).1H-NMR(DMSO-d6)δ2.12(s，3H，CH3)，2.33-2.35(m，7H，CH3，CH2)，3.55(m，4H，CH2)，4.03(s，2H，CH2)，6.73(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，7.08(t，2H，J＝9.0Hz，Ph-H)，7.74-7.78(m，2H，Ph-H)，8.28(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，9.27(s，1H，NH)，10.76(s，1H，NH).
{4-[2，4-二甲基-5-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-1H-吡咯-3-基]-嘧啶-2-基}-(4-氟-苯基)-胺[56]M.p.120.4-123.1℃.MS[M+H]+＝396.4(C22H27FN5要求394.5).
1H-NMR(CDCl3)δ1.62(br.s，4H，CH2)，2.10(s，3H，CH3)，2.34(s，3H，CH3)，2.37(s，3H，CH3)，2.43(br.s，4H，CH2)，3.42(s，2H，CH2)，6.67(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，6.91-6.96(m，3H，Ph-H，NH)，7.50-7.52(m，2H，Ph-H)，8.24(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，8.30(br.s，1H，NH).
實(shí)施例17所選擇的化合物的激酶特異性從上述實(shí)施例中選擇一些化合物，研究了它們的激酶選擇性。使用一組蛋白激酶，包括與本發(fā)明有關(guān)的CDKs，以及一定數(shù)量的代表性功能上無(wú)關(guān)的激酶。
關(guān)于CDK4/細(xì)胞周期蛋白D1、CDK2/細(xì)胞周期蛋白E、CDK1/細(xì)胞周期蛋白B激酶的測(cè)定法可以在適當(dāng)?shù)南到y(tǒng)中監(jiān)測(cè)GST-Rb的磷酸化作用。因而，由CDK4/細(xì)胞周期蛋白D1、CDK2/細(xì)胞周期蛋白E或CDK1/細(xì)胞周期蛋白B誘導(dǎo)的GST-Rb磷酸化，在96孔形式的體外激酶分析中，利用放射性標(biāo)記ATP，通過(guò)GST-Rb(772-928)中放射性標(biāo)記的磷酸摻入而進(jìn)行測(cè)定。磷酸化反應(yīng)混合物(總體積40μl)由50mM HEPES pH7.4，20mM MgCl2，5mM EGTA，2mM DTT，20mM β-甘油磷酸酯，2mMNaF，1mM Na3VO4，蛋白酶抑制劑雞尾酒試劑(Sigma，見(jiàn)上)，BSA0.5mg/ml，1μg純化酶復(fù)合體，10μl GST-Rb-瓊脂糖珠粒，100μM ATP，0.2μCi32P-ATP組成。在持續(xù)搖動(dòng)下，反應(yīng)在30℃進(jìn)行30分鐘。反應(yīng)結(jié)束時(shí)，向每孔加入100μl的50mM HEPES，pH 7.4和1mM ATP，將總?cè)萘哭D(zhuǎn)移至GFC濾板上。將平板用200μl的50mM HEPES，pH 7.4和1mM ATP洗滌5次。向每孔加入50μl閃爍液體，在閃爍計(jì)數(shù)器(Topcount，HP)上測(cè)量樣本的放射性。利用GraFit軟件計(jì)算不同肽的IC50值。
作為替代選擇，CDK2/細(xì)胞周期蛋白A激酶測(cè)定法可以在96孔板中、使用重組CDK2/細(xì)胞周期蛋白A進(jìn)行。測(cè)定緩沖液由25mMβ-甘油磷酸酯，20mM MOPS，5mM EGTA，1mM DTT，1mM NaVO3，pH 7.4組成，向其中加入2～4μg的CDK2/細(xì)胞周期蛋白A和底物pRb(773-928)。加入Mg/ATP混合物(15mM MgCl2，100μM ATP，每孔30-50k的Bq[γ-32P]-ATP)引發(fā)反應(yīng)，將混合物在30℃孵育10～30分鐘，視需要而定。在冰上終止反應(yīng)，然后通過(guò)p81濾板(Whatman Polyfiltronics，Kent，UK)過(guò)濾。用75mM正磷酸洗滌3次后，將平板干燥，加入閃爍劑，在閃爍計(jì)數(shù)器(TopCount，Packard Instruments，Pangbourne，Berks，UK)中測(cè)量所摻入的放射性。
PKCα激酶活性可以測(cè)量組蛋白3中摻入的放射性標(biāo)記的磷酸酯而進(jìn)行測(cè)定，如下所述。反應(yīng)混合物(總體積65μl)，由50mM Tris-HCl，1mM乙酸鈣，3mM DTT，0.03mg/ml磷脂酰絲氨酸，2.4μg/ml PMA，0.04％NP40，12mM MgCl2，純化PKCα100ng，組蛋白30.2mg/ml，100μM ATP，0.2μCi[γ-32P]-ATP組成。在微量平板搖動(dòng)器中，在37℃下進(jìn)行反應(yīng)15分鐘，加入10μl 75mM正磷酸終止反應(yīng)，將平板置于冰上。將50μl反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)移至P81濾板上，洗去游離放射性磷酸(每孔用200μl 75mM正磷酸洗滌3次)后，向每孔加入50μl閃爍液體(Microscint 40)，在閃爍計(jì)數(shù)器(Topcount，HP)上測(cè)量放射性。
用在所述測(cè)量法中的CDK2和/或PKC可以從可得到的來(lái)源獲得，或者可以利用重組方法制備，如下所述。在用適當(dāng)桿狀病毒構(gòu)建體感染的Sf9昆蟲(chóng)細(xì)胞中，組氨酸標(biāo)記的CDK2/細(xì)胞周期蛋白E和CDK1/細(xì)胞周期蛋白B可以被共同表達(dá)，PKCα被單一表達(dá)。感染后兩天，低速離心收集細(xì)胞，利用金屬螯合物色譜從昆蟲(chóng)細(xì)胞粒狀沉淀中純化蛋白質(zhì)。簡(jiǎn)言之，利用超聲波處理，使昆蟲(chóng)細(xì)胞粒狀沉淀在緩沖液A(10mMTris-HCl，pH 8.0，150mM NaCl，0.02％NP40，5mMβ-巰基乙醇，1mM NaF，1mM Na3VO4，以及含AEBSF、胃酶抑制劑A、E 64、苯丁抑制素、亮肽素的蛋白酶抑制劑雞尾酒試劑(Sigma)，)中裂解。離心清楚顯示可溶性部分，上樣到Ni-NTA-瓊脂糖(Quiagen)上。用含300mM NaCl、5～15mM咪唑的緩沖液A洗去未結(jié)合的蛋白質(zhì)，用含250mM咪唑的緩沖液A洗脫已結(jié)合的蛋白質(zhì)。將純化后的蛋白質(zhì)對(duì)貯存緩沖液(20mM HEPES pH7.4，50mM NaCl，2mM DTT，1mM EDTA，1mM EGTA，0.02％NP40，10％v/v甘油)進(jìn)行大范圍透析，后者分裝并貯存在-70℃。PKC α-6xHis可以用相同方式純化，但是使用不同的緩沖液50mM NaH2PO4，pH 8.0和0.05％Triton X-100分別代替Tris和NP40。
下表1結(jié)果顯示考察的化合物對(duì)CDK的抑制作用表現(xiàn)出高度的選擇性。
表1
實(shí)施例18所選擇的化合物的抗增殖效果從上述實(shí)施例中選擇的化合物，使用不同的人腫瘤細(xì)胞系進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞增殖測(cè)定。進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)的72-小時(shí)MTT(噻唑基藍(lán)；3-[4，5-二甲基噻唑-2-基]-2，5-二苯基四唑鎓溴化物)測(cè)定(Haselsberger，K.；Peterson，D.C.；Thomas，D.G.；Darling，J.L.Anti Cancer Drugs 1996，7，331-8；Loveland，B.E.；Johns，T.G.；Mackay，I.R.；Vaillant，F(xiàn).；Wang，Z.X.；Hertzog，P.J.Biochemistry International 1992，27，501-10)。人腫瘤細(xì)胞系是從ATCC(American Type Culture Collection，10801 University Boulevard，Manessas，VA 20110-2209，USA)獲得的。
下表2結(jié)果闡明本申請(qǐng)所述化合物的抗增殖效果。
表權(quán)利要求
1.通式I化合物 其中X1和X2之一是NR10，X1和X2的另一個(gè)是CR9；Z是NH、NHCO、NHSO2、NHCH2、CH2、CH2CH2或CH＝CH；R1、R2、R3、R9和R10獨(dú)立地是H、烷基、芳基、芳烷基、雜環(huán)、鹵代、NO2、CN、OH、烷氧基、芳氧基、(R)nNH2、(R)nNH-R′、(R)nN-(R′)(R″)、NH-芳基、N-(芳基)2、COOH、COO-R′、COO-芳基、CONH2、CONH-R′、CON-(R′)(R″)、CONH-芳基、CON-(芳基)2、SO3H、SO2NH2、CF3、CO-R′或CO-芳基，其中烷基、芳基、芳烷基和雜環(huán)基可以進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)選自鹵代、NO2、CN、OH、O-甲基、NH2、COOH、CONH2和CF3的基團(tuán)取代；R4、R5、R6、R7和R8彼此獨(dú)立地是H、取代或未取代的低級(jí)烷基、鹵代、NO2、CN、OH、取代或未取代的烷氧基、NH2、NH-R′、N-(R′)(R″)、COOH、COO-R′、CONH2、CONH-R′、CON(R′)(R″)、SO3H、SO2NH2或CF3；其中R′、R″和R各自獨(dú)立地是可以相同或不同的烷基，n是0或1；其條件是當(dāng)R1和R2是H，X1是NH，X2是CH，R3是H，則苯基不是未取代的，4-乙基，3-甲基，3-(1，1，2，2-四氟乙氧基)，3，4，5-三甲氧基，其他基團(tuán)R4-R8是H；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X1和X2分別是CR9和NH；R1、R2、R3和R9獨(dú)立地選自H、烷基、芳基、芳烷基、雜環(huán)、鹵代、NO2、CN、OH、烷氧基、芳氧基、(R)nNH2、(R)nNH-R′、(R)nN-(R′)(R″)、COOH、COO-R′、CONH2、CONH-R′、CON-(R′)(R″)、SO3H、SO2NH2、CF3和CO-R′，其中烷基、芳基和芳烷基可以進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)選自鹵代、NO2、CN、OH、O-甲基、NH2、COOH、CONH2和CF3的基團(tuán)取代；Z選自NH、NHSO2和NHCH2；R4～R8各自獨(dú)立地選自H、鹵代、硝基、氨基、氨基烷基、羥基、烷氧基、氨基甲酰基、氨磺酰基、N-(R′)(R″)、C1-4烷基和取代的C1-4烷基。
3.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)的化合物，其中Z是NH，R3是H。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中R1、R2和R9各自獨(dú)立地是H、鹵代、CN、NO2、CONH2、(R)NH(R′)(R″)、C1-4烷基或雜環(huán)基。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的化合物，其中若R1是鹵代，則它選自氯或溴；若R1是烷基氨基，則它是二乙氨基甲基或二甲氨基甲基；當(dāng)R1是雜環(huán)基，則它是嗎啉-4-基甲基或4-甲基-哌嗪-1-基甲基。
6.根據(jù)權(quán)利要求1～5中任意一項(xiàng)的化合物，其中R1是H或CN，R2和R9都是甲基。
7.根據(jù)權(quán)利要求7的化合物，其中R1是H。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的化合物，其中R1是CN。
9.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)的化合物，其中R4、R5、R6、R7和R8彼此獨(dú)立地是H、未取代的低級(jí)烷基、鹵代、NO2、CN、OH、N-(R′)(R″)或CF3；其中R′、R″和R各自獨(dú)立地是可以相同或不同的烷基，n是0或1。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的化合物，其中R4至R8獨(dú)立地選自H、F、NH2、NO2、OH、Cl、Br、I、CN、CH2OH、CF3和二甲氨基。
11.根據(jù)權(quán)利要求9或10的化合物，其中R4和R8都是氫。
12.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)的化合物，選自2-[N-(苯基)]-4-(2，4-二甲基吡咯-3-基)嘧啶胺類(lèi)，其中該苯基被F、NH2、NO2、OH、Cl、Br、I、CH2OH、CN、CF3或OMe中至少一個(gè)所2-、3-、4-或5-取代。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的化合物，其中該苯基被F、NH2、NO2、OH、Cl、Br、I、CN、CH2OH、CF3或OMe在2-、3-、4-或5-位中任一位置進(jìn)行單取代，或者被2，4-二氟、3，5-二氟、3，4-二氟、2，4-二氯、3，5-二氯、3，4-二氯或4-氯-3-三氟甲基進(jìn)行二取代。
14.根據(jù)權(quán)利要求1～11中任意一項(xiàng)的的化合物，選自2-[N-(苯基)]-4-(3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈)嘧啶胺類(lèi)，其中該苯基被F、NH(CH3)2、NO2、OH、Cl、Br、I或CF3中至少一個(gè)所2-、3-或4-取代。
15.根據(jù)權(quán)利要求14的化合物，其中該苯基被F、NH(CH3)2、NO2、OH、I或CF3在3-或4-位任一位置單取代，或者被4-甲基-3-硝基、3-碘-4-甲基、4-氯-3-甲基、3-羥基-4-甲基、4-氟-3-甲基或4-甲基-3-氟進(jìn)行二取代。
16.根據(jù)權(quán)利要求1～5中任一項(xiàng)的化合物，選自2-[N-(苯基)]-4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)嘧啶胺類(lèi)，其中該苯基被F、NH(CH3)2、NO2、OH、I或CF3在4-位單取代。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的化合物，其中該苯基被氟或NH(CH3)2基團(tuán)取代。
18.根據(jù)權(quán)利要求1～5中任一項(xiàng)的化合物，選自2-[N-(苯基)]-4-(2，4-二甲基-5-鹵代-1H-吡咯-3-基)嘧啶胺，其中該苯基被F、NH(CH3)2、NO2、OH、I或CF3在3-或4-位單取代。
19.根據(jù)權(quán)利要求18的化合物，其中該苯基被4-氟或3-硝基取代，該鹵代基團(tuán)是氯或溴。
20.根據(jù)權(quán)利要求1～5中任一項(xiàng)的化合物，選自2-[N-(苯基)]-4-(2，4-二甲基-5-二烷基氨基烷基-1H-吡咯-3-基)嘧啶胺類(lèi)，其中該苯基被F、NH(CH3)2、NO2、OH、I或CF3在4-位單取代。
21.根據(jù)權(quán)利要求20的化合物，其中該苯基被氟取代，該二烷基氨基烷基優(yōu)選為二乙氨基甲基或二甲氨基甲基。
22.根據(jù)權(quán)利要求1～5中任一項(xiàng)的化合物，選自2-[N-(苯基)]-4-(2，4-二甲基-5-雜環(huán)-1H-吡咯-3-基)嘧啶胺類(lèi)，其中該苯基優(yōu)選被F、NH(CH3)2、NO2、OH、I或CF3在4-位單取代。
23.根據(jù)權(quán)利要求22的化合物，其中該苯基被氟取代，該雜環(huán)基為5-嗎啉-4-基甲基或4-甲基-哌嗪-1-基甲基。
24.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，選自[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-碘-苯基)-胺(3，4-二氟-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺(4-氯-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺(3，5-二氟-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺4-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯酚3-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯酚(2，4-二氟-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺(2，4-二氯-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-三氟甲基-苯基)-胺(3-氯-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺N-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-N′，N′-二甲基-苯-1，4-二胺(3-氯-4-碘-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-氟-4-碘-苯基)-胺3，5-二甲基-4-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈3，5-二甲基-4-[2-(4-三氟甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-碘-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈3，5-二甲基-4-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-碘-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氯-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-羥基-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-氟-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-二甲氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酰胺[4-(3，5-二甲基-1H-吡咯-2-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺(4-氟-苯基)-[4-(1，2，4-三甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺N-[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-N′，N′-二甲基-苯-1，4-二胺[4-(5-氨基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[4-(5-氯-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(5-二乙氨基甲基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(5-二甲氨基甲基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-5-嗎啉-4-基甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟苯基)-胺{4-[2，4-二甲基-5-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-1H-吡咯-3-基]-嘧啶-2-基}-(4-氟-苯基)-胺。
25.根據(jù)權(quán)利要求24的化合物，選自[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-碘-苯基)-胺(3，4-二氟-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺(4-氯-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺(3，5-二氟-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺4-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯酚3-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯酚[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺(3-氯-4-碘-苯基)-[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-氟-4-碘-苯基)-胺3，5-二甲基-4-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈3，5-二甲基-4-[2-(4-三氟甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-碘-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈3，5-二甲基-4-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-碘-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氯-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-羥基-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-氟-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-二甲氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酰胺(4-氟-苯基)-[4-(1，2，4-三甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺N-[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-N′，N′-二甲基-苯-1，4-二胺[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[4-(5-氯-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(5-二乙氨基甲基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(5-二甲氨基甲基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-5-嗎啉-4-基甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺{4-[2，4-二甲基-5-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-1H-吡咯-3-基]-嘧啶-2-基}-(4-氟-苯基)-胺。
26.根據(jù)權(quán)利要求25的化合物，選自[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-碘-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺3，5-二甲基-4-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈3，5-二甲基-4-[2-(4-三氟甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-碘-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈3，5-二甲基-4-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-碘-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氯-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-羥基-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-氟-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-二甲氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酰胺[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺N-[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-N′，N′-二甲基-苯-1，4-二胺[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[4-(5-氯-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(5-二乙氨基甲基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(5-二甲氨基甲基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-5-嗎啉-4-基甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺
27.根據(jù)權(quán)利要求26的化合物，選自[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-碘-苯基)-胺3，5-二甲基-4-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈3，5-二甲基-4-[2-(4-三氟甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-碘-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈3，5-二甲基-4-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈4-[2-(3-羥基-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酰胺[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[4-(5-二甲氨基甲基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟苯基)-胺。
28.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X1和X2分別是NH和CR9；R1、R2、R3和R9獨(dú)立地選自H、烷基、芳基、芳烷基、雜環(huán)、鹵代、NO2、CN、OH、烷氧基、芳氧基、(R)nNH2、(R)nNH-R′、(R)nN-(R′)(R″)、COOH、COO-R′、CONH2、CONH-R′、CON-(R′)(R″)、SO3H、SO2NH2、CF3和CO-R′，其中烷基、芳基和芳烷基可以進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)選自鹵代、NO2、CN、OH、O-甲基、NH2、COOH、CONH2和CF3的基團(tuán)取代；Z選自NH、NHSO2和NHCH2；R4、R5和R8各自獨(dú)立地選自H、鹵代、硝基、氨基、氨基烷基、羥基、烷氧基、氨基甲?；被酋；?、N-(R′)(R″)、C1-4烷基和取代的C1-4烷基；R6選自H、鹵代、硝基、氨基、氨基烷基、羥基、烷氧基、氨基甲?；?、氨磺?；?、N-(R′)(R″)、甲基、丙基、丁基和取代的C1-4烷基；R7選自H、鹵代、硝基、氨基、氨基烷基、羥基、氨甲酰基、氨磺?；?、N-(R′)(R″)、C2-4烷基和取代的C1-4烷基。
29.藥物組合物，包含如權(quán)利要求1至28中任意一項(xiàng)所定義的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽以及藥學(xué)上可接受的賦形劑。
30.如權(quán)利要求1至28中任意一項(xiàng)所定義的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在增殖性疾病治療中的用途。
31.根據(jù)權(quán)利要求30的用途，其中該增殖性疾病是癌癥或白血病。
32.根據(jù)權(quán)利要求30或31的用途，其中所述化合物是按足以抑制至少一種CDK酶的量進(jìn)行給藥。
33.根據(jù)權(quán)利要求32的用途，其中該CDK酶是CDK2和/或CDK4。
34.下式化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽在制造用于治療增殖性疾病的藥物中的用途， 其中X1和X2之一是NR10，X1和X2的另一個(gè)是CR9；Z是NH、NHCO、NHSO2、NHCH2、CH2、CH2CH2或CH＝CH；R1、R2、R3、R9和R10獨(dú)立地是H、烷基、芳基、芳烷基、雜環(huán)、鹵代、NO2、CN、OH、烷氧基、芳氧基、(R)nNH2、(R)nNH-R′、(R)nN-(R′)(R″)、NH-芳基、N-(芳基)2、COOH、COO-R′、COO-芳基、CONH2、CONH-R′、CON-(R′)(R″)、CONH-芳基、CON-(芳基)2、SO3H、SO2NH2、CF3、CO-R′或CO-芳基，其中烷基、芳基、芳烷基和雜環(huán)基可以進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)選自鹵代、NO2、CN、OH、O-甲基、NH2、COOH、CONH2和CF3的基團(tuán)取代；R4、R5、R6、R7和R8彼此獨(dú)立地是H、取代或未取代的低級(jí)烷基、鹵代、NO2、CN、OH、取代或未取代的烷氧基、NH2、NH-R′、N-(R′)(R″)、COOH、COO-R′、CONH2、CONH-R′、CON(R′)(R″)、SO3H、SO2NH2或CF3；其中R′、R″和R各自獨(dú)立地是可以相同或不同的烷基；并且n是0或1；其前提條件是當(dāng)R1和R2是H，X1是NH，X2是CH，并且R3是H，則苯基不是3-(1，1，2，2-四氟乙氧基)，或3，4，5-三甲氧基，其他基團(tuán)R4-R8是H。
35.根據(jù)權(quán)利要求34的用途，其中該化合物是如權(quán)利要求2至13中任意一項(xiàng)所定義。
全文摘要
本發(fā)明涉及2－取代的4－雜芳基－嘧啶類(lèi)化合物、其制備、含有它們的藥物組合物和它們作為細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(CDKs)抑制劑的用途、以及其在增殖性疾病，例如癌癥、白血病、牛皮癬等治療中的用途。
文檔編號(hào)C07D403/04GK1503794SQ02807553
公開(kāi)日2004年6月9日 申請(qǐng)日期2002年3月26日 優(yōu)先權(quán)日2001年3月29日
發(fā)明者彼得·M·費(fèi)希爾, 王淑東, 加文·伍德, 伍德, 彼得 M 費(fèi)希爾 申請(qǐng)人:西克拉塞爾有限公司