專利名稱：從苦丁茶中提取總?cè)扑峒靶芄?、齊墩果酸的方法
專利說明從苦丁茶中提取總?cè)扑峒靶芄?、齊墩果酸的方法 本發(fā)明屬于天然藥物提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從苦丁茶(Ilex kudingcha C.J.Tseng)中提取具有降脂功能的活性成分熊果酸、齊墩果酸及總?cè)扑岬姆椒ā？喽〔?Ilex kudingcha C.J.Tseng)為我國南方喜用的清涼、去毒、健身飲料，亦是常用中藥。多以植物的葉入藥，性味甘苦，具有清熱涼血，滋養(yǎng)肝腎之功效。作為苦丁茶使用的市場品種隸屬3科9種植物，包括冬青科3種，木樨科女貞屬5種，馬鞭草科楨桐屬1種。其中冬青科干燥葉為苦丁茶主流品種。本品葉革質(zhì)(或厚革質(zhì))，邊緣具鈍鋸齒，主要分布于廣東、廣西、海南、湖南等省?？喽〔栌忻黠@降低高血脂、動物血清總膽固醇、甘油酸三脂的功效，具有提高高密度脂蛋白/低密度脂蛋白比值的作用。藥理研究證實(shí)，其主要藥效成分為熊果酸和齊墩果酸。
熊果酸是一種三萜化合物，分子式C30H48O3，化學(xué)名稱為3β—羥基—熊果烷—12—烯—28—羧酸，為無色晶體，熔點(diǎn)為289～292℃。
齊墩果酸是熊果酸的同分異構(gòu)體，具有消炎、鎮(zhèn)靜、抗腫瘤等作用，是治療急性黃疸型肝炎和遷延慢性肝炎的有效藥物。
熊果酸和齊墩果酸可以從熊果、齊墩果、女貞等多種植物葉或果實(shí)中提取，在現(xiàn)有各種提取方法如CN1045585A，CN1358733A，CN1303850A中，主要存在以下不足(1)產(chǎn)品單一，或僅能獲得熊果酸，或僅能獲得齊墩果酸；(2)有機(jī)溶劑耗量大，有的甚至使用有毒有機(jī)溶劑，如苯、CHCl3、CH2Cl2等；(3)分離效率低，產(chǎn)品純度不高。本發(fā)明提出一種從苦丁茶(Ilex kudingcha C.J.Tseng)中同時(shí)提取活性成分總?cè)扑峒靶芄?、齊墩果酸的方法。
具體技術(shù)方案如下將苦丁茶葉片粉碎，以5～10倍量的50％～80％的乙醇為溶劑，微波或回流浸提，采用聚糖類天然沉降劑沉降結(jié)合超濾技術(shù)去除大分子雜質(zhì)，濾液經(jīng)納濾濃縮，透過液返回浸提循環(huán)使用；濃縮液注入大孔吸附樹脂層析柱，采用分段洗脫，收集乙醇—醚類混合物淋洗液餾分，濃縮，回收有機(jī)溶劑，真空干燥，得到總?cè)扑岽制?。所得總?cè)扑岽制匪春?，乙醇溶解，活性炭脫色，過濾，濾液用NaOH堿化(pH＝8.0～11.0)，濾去粘膠狀物后，再用H2SO4酸化(pH＝2.0～3.5)，放置析晶。所得晶體在乙醇中重結(jié)晶，得到總?cè)扑岙a(chǎn)品。
將總?cè)扑岙a(chǎn)品用醚-有機(jī)酸混合物選擇性溶解，液相在回收有機(jī)溶劑后得到齊墩果酸粗品，固相為熊果酸粗品。將所得齊墩果酸粗品和熊果酸粗品分別經(jīng)柱層析純化，最后得到熊果酸和齊墩果酸單體產(chǎn)品。
所述聚糖類天然沉降劑包括葡甘聚糖或殼聚糖類化合物。
本發(fā)明所述苦丁茶主要是指產(chǎn)自我國廣東、廣西、海南及湖南南部等地的苦丁茶。本發(fā)明所提供的方法，同時(shí)還適用于其他苦丁茶及熊果、齊墩果、女貞等多種植物葉或果實(shí)中熊果酸、齊墩果酸和總?cè)扑岬奶崛　?br> 本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明采用乙醇溶液微波或回流浸提，強(qiáng)化了有效成分的溶出，縮短了提取時(shí)間，提高了產(chǎn)率，減少了雜質(zhì)溶出；采用聚糖類化合物等天然沉降劑沉降結(jié)合超濾技術(shù)，利于蛋白質(zhì)、淀粉、果膠等大分子雜質(zhì)的去除，優(yōu)于目前所用醇沉等分離技術(shù)；采用納濾濃縮，常溫?zé)o相變，既節(jié)省了能源，又避免了活性成分的分解破壞，同時(shí)解決了以往濃縮時(shí)由皂甙引起的起泡問題；采用大孔吸附樹脂柱分離系統(tǒng)，顯著提高了總?cè)扑岬姆蛛x度和富集率；總?cè)扑岽制?，依次?jīng)水洗、乙醇溶解、活性炭脫色、NaOH堿化、H2SO4酸化等純化步驟，大幅度提高了產(chǎn)品的純度，總?cè)扑岬暮窟_(dá)95％以上；采用醚類和有機(jī)酸混合溶劑選擇性溶解，簡化了單體分離工藝，提高了分離效率，所得熊果酸和齊墩果酸單體產(chǎn)品的純度達(dá)96％以上；整個(gè)分離提取過程中不使用有毒有害有機(jī)溶劑，實(shí)現(xiàn)全流程綠色提?。槐景l(fā)明所述方法可以同時(shí)提取熊果酸、齊墩果酸和總?cè)扑帷?br>
圖1.本發(fā)明工藝流程圖。1.將苦丁茶葉片于50℃干燥，粉碎。取100g，用8倍量75％乙醇微波浸提3次，1h/次，過濾。濾液加天然沉降劑沉降，超濾?；钚蕴棵撋?，濾液經(jīng)納濾濃縮分離得到約200ml濃縮液。濃縮液注入大孔吸附樹脂層析柱，分段淋洗，收集乙醇—醚類洗脫液餾分，得到約2000ml溶液。減壓濃縮，真空干燥，得到總?cè)扑岽制芳s15g。粗品水洗后，加入6倍沉淀物重量的95％乙醇溶液溶解，同時(shí)加入0.9g活性炭脫色，過濾，濾液加NaOH調(diào)pH＝8.0～11.0，過濾，濾液再用H2SO4調(diào)pH＝2.0-3.5，放置析晶。結(jié)晶物水洗后，于95％乙醇中重結(jié)晶，得到總?cè)扑岙a(chǎn)品。以醚類和有機(jī)酸混合物選擇性溶解總?cè)扑岙a(chǎn)品，液相回收有機(jī)溶劑，得齊墩果酸粗品，固相為熊果酸粗品。分別用柱層析純化此二粗品，最后得到熊果酸和齊墩果酸單體產(chǎn)品。
權(quán)利要求
1.一種從苦丁茶中提取總?cè)扑峒靶芄?、齊墩果酸的方法，其特征在于本發(fā)明將苦丁茶葉片粉碎后，以5～10倍量的50％～80％的乙醇為溶劑，經(jīng)微波或回流浸提，提取液采用聚糖類化合物作為沉降劑沉降，結(jié)合超濾技術(shù)去除蛋白質(zhì)、淀粉、果膠等大分子雜質(zhì)及其他不溶性微粒，濾液再以活性炭脫色，過濾，納濾濃縮；將所得濃縮液注入大孔吸附樹脂柱分離系統(tǒng)，采用分段淋洗，截取有機(jī)溶液洗脫餾分，該有機(jī)溶劑為一種醚和乙醇的混合物；從所得餾分溶液制得總?cè)扑岽制?，然后依次?jīng)水洗、乙醇溶解、活性炭脫色、NaOH堿化至pH為8.0～11.0、H2SO4酸化至pH為2.0～3.5純化，得到總?cè)扑峒兤?；將所得總?cè)扑峒兤?，用醚類和有機(jī)酸混合溶劑進(jìn)行選擇性溶解，經(jīng)適當(dāng)處理后分別注入層析柱進(jìn)一步純化，最后得到熊果酸和齊墩果酸單體產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述聚糖類天然沉降劑包括葡甘聚糖或殼聚糖類化合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于本發(fā)明所述苦丁茶主要是指產(chǎn)自我國廣東、廣西、海南及湖南南部的苦丁茶，即Ilex kudingcha C.J.Tseng。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從苦丁茶(Ilex kudingchaC.J.Tseng)中同時(shí)提取總?cè)扑峒靶芄帷R墩果酸的方法。該法以廣東、廣西、海南等省區(qū)產(chǎn)苦丁茶為原料，以乙醇溶液為溶劑，微波或回流浸提，天然沉降劑沉降結(jié)合超濾去除大分子雜質(zhì)，所得濾液經(jīng)納濾、大孔吸附樹脂層析分離、濃縮，得到總?cè)扑岽制贰＝?jīng)水洗、乙醇溶解、活性炭脫色、純化制得總?cè)扑崞?。然后用醚類和有機(jī)酸混合物進(jìn)行選擇性溶解，分離，純化得到的熊果酸和齊墩果酸單體產(chǎn)品。本發(fā)明所得總?cè)扑峒兌冗_(dá)95％以上的，熊果酸和齊墩果酸單體純度大于96％，整個(gè)分離提取過程中不使用有毒有害有機(jī)溶劑，實(shí)現(xiàn)全流程綠色提取。
文檔編號C07J63/00GK1508149SQ0213984
公開日2004年6月30日 申請日期2002年12月18日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月18日
發(fā)明者周春山, 任秀蓮, 彭密軍, 湯小勝, 蔣新宇, 鐘世安 申請人:中南大學(xué)