專利名稱：天然生育酚提取新工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及化學(xué)提取方法，更具體地說涉及從大豆油脫臭餾出物中提取生育酚的方法。
生育酚又名維生素E，有很強的生理作用和抗氧化作用，用途很廣。
大豆油脫臭餾出物中的生育酚含量一般在1％至15％左右。我國的脫臭餾出物含量豐富，價格低廉。而且從脫臭餾出物中提取的生育酚，其生理作用比合成的生育酚強，又因為它是天然產(chǎn)品，和全世界正在提倡的綠色產(chǎn)業(yè)和回歸自然是極相符的。所以從大豆油脫臭餾出物中提取生育酚有很強的開發(fā)利用價值。
從大豆油脫臭餾出物中提取生育酚的方法很多，有皂化—萃取法、酯化—萃取法、脲包法、超臨界CO2濃縮法、直接溶劑浸出法、直接蒸餾法、吸附劑和離子交換樹脂的色譜法等。
在各種方法中，酯化—蒸餾法是提取脫臭餾出物中生育酚和甾醇用得較多的方法，它們的工藝也較完善，無疑它是提取生育酚和甾醇的有效方法，但它們涉及了熱處理、氧化劑、礦物酸等，這些對生育酚是不利的；超臨界CO2濃縮法對設(shè)備要求較高，花費也較大；直接溶劑萃取法消耗溶劑量比較大，提取物的生育酚含量也不高；吸附劑和離子交換樹脂的色譜法分離比較有效，不過化學(xué)工業(yè)的大量處理問題較難解決；直接蒸餾法提取比較困難，提取的純度不高；脲包法提取脫臭餾出物中生育酚和甾醇操作簡單，對設(shè)備要求不高，反應(yīng)成本低，對生育酚破壞小。由于甾醇在醇中溶解度小，反應(yīng)還能除去大部分甾醇，提取的生育酚可作為藥用原料，脂肪酸仍可在工業(yè)上應(yīng)用，其缺點為尿素不易包合甘油酯，對脂肪酸的包合也不一定完全，所以，脲包法對生育酚的提取得到的生育酚濃縮物中生育酚的含量一般不高，并且受原料的影響很大[U.S.Pat.No.5078920]；皂化法除脂肪酸和甘油酯較徹底，其缺點為皂化萃取法消耗溶劑較多，反應(yīng)成本較高，并且由于加入較多的堿，對生育酚的破壞較大，而且用皂化萃取法不易除甾醇[U.S.Pat.No.5371245]。
由以上比較得知，各種提取生育酚的方法雖有其優(yōu)點，也各有其不盡人意之處。
本發(fā)明的目的是尋找一種能克服現(xiàn)有對生育酚提取方法的缺點，保持其優(yōu)點的新方法。
本發(fā)明采用皂化—脲包法提取生育酚，此方法不僅結(jié)合了脲包反應(yīng)和皂化反應(yīng)的優(yōu)點，而且克服了各自的缺點。在此方法中，脲包反應(yīng)對生育酚的低破壞和去甾醇的作用得到了發(fā)揮，而脲包反應(yīng)提取的生育酚的濃度不高的缺點由于下一步的皂化反應(yīng)得到克服；皂化反應(yīng)對生育酚的破壞的問題由于先用脲包反應(yīng)除去大部分脂肪酸，使皂化反應(yīng)加堿量的減少而得到緩解，而且由于先進行皂化反應(yīng)除去了的部分脂肪酸，使皂化反應(yīng)的處理量大大降低，皂化反應(yīng)消耗溶劑量大的缺點也得到了部分克服。
本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的溶解適量尿素(農(nóng)用級)于工業(yè)乙醇中，加入已熔化的脫臭餾出物攪拌加熱，使其回流。攪拌均勻后停止加熱，待冷到室溫，0℃下放置24小時，溶液中有針狀結(jié)晶產(chǎn)生，溶液過濾，溶液加入NaOH以除去未被除去的脂肪酸，再加入維生素C，在78±1℃下水浴反應(yīng)30分鐘，待冷加入適量水，并用石油醚提取三次，合并石油醚，用水洗滌至酚酞不變色，減壓除去石油醚，得富含生育酚的濃縮物。
反應(yīng)原料的比例NaOH∶脫臭餾出物∶尿素＝0.8-1.5∶8-12∶15-25(質(zhì)量比)溶劑為工業(yè)乙醇，工業(yè)乙醇∶脫臭餾出物＝3-5∶0.8-2.6g/ml)。
甾醇的含量測定如下(1)稱5/S克的樣品(S為估計的甾醇百分數(shù)/m/m)，加3/S毫升的KOH水溶液(400克KOH/l升水)。加7/S毫升乙醇。
(2)在水浴鍋中連冷凝管回流，使皂化完全，既反應(yīng)體系勻質(zhì)后繼續(xù)加熱15-20分鐘。
(3)加60毫升蒸餾水，180毫升乙醇，調(diào)溫到50℃。
(4)加25-30毫升的毛地黃皂甙(10克毛地黃皂甙/升乙醇)，冷卻幾小時，最好過夜。
(5)在真空下過濾，用蒸餾水洗一次，用乙醇洗幾次，最后用幾毫升乙醚洗一次。
(6)沉淀物在103±2℃烘箱烘至恒重，甾醇的百分量＝25a/m。
其中a為沉淀物的重量m為所加的樣品量生育酚濃縮物中生育酚的含量測定a、皂化和提取(1)稱取含生育酚的量不少于50微升的試樣于50ml的燒瓶中，加4ml抗壞血酸(Vc)乙醇溶液，1ml 60％的KOH水溶液，回流煮沸3分鐘。
(2)冷卻，加25ml蒸餾水，轉(zhuǎn)移至250ml分液漏斗。用40ml乙醚提取一次，水層再分別用25ml乙醚提取兩次。和并三次乙醚提取液，用蒸餾水洗到洗出的水遇酚酞不變色。
(3)把乙醚層轉(zhuǎn)到100ml燒瓶中，用水浴把乙醚蒸干。加1ml乙醇，4ml苯在通N2下再次蒸干。準確加1ml-10ml環(huán)己烷。
b、薄層分離(暗室下操作)(1)用微量注射器向TCL板準確加樣，每個樣范圍在5-50μl之間。同時加以標(biāo)準生育酚樣。
(2)在盛有正己烷和乙醚(7∶3)的罐內(nèi)將色譜板展開。在室溫下冷卻。
(3)在紫外燈下觀察色譜(也可用顯色劑確定位置)，比較標(biāo)準生育酚的位置，標(biāo)明樣品的α-生育酚帶、β+γ生育酚帶、δ-生育酚帶位置。
(4)刮取色譜帶，分別置于盛有10ml環(huán)己烷、乙醇(2∶1)的試管中搖晃試管，靜置半小時。
(5)刮取和提取生育酚譜帶同等面積的色譜板硅膠作板空白。
(6)將試管離心10分鐘，把上清液轉(zhuǎn)移到梨型瓶，蒸干溶液。
c、分光光度測定(暗室操作)(1)在每個梨型瓶中加3.6ml乙醇、0.2ml 2，2-聯(lián)呲啶乙醇溶液(1mg/ml)，0.2ml三氯化鐵乙醇溶液(1mg/ml)輕搖使之混合均勻，靜置10分鐘。
(2)用分光光度計在520nm下測吸收率。
生育酚含量(mg/100g)＝(A-A0)×F×V×100/(v×m)其中A為試樣的吸收率A0為空白的吸收率V為a(3)溶解不皂化物的環(huán)己烷ul數(shù)V為b(1)注樣的ul數(shù)m為試樣的量(g)F為分光光度系數(shù)，對于α生育酚為98、β和γ生育酚為90、δ生育酚為75。
本發(fā)明優(yōu)點1、得到的產(chǎn)品的生育酚含量高達49％。
2、產(chǎn)品的抗氧化活性較強。
3、溶劑消耗比單純用皂化反應(yīng)小。
4、反應(yīng)成本較低(采用了農(nóng)用尿素和工業(yè)乙醇)。
5、反應(yīng)條件簡單。
6、由于先采用脲包反應(yīng)除去大部分脂肪酸，使皂化反應(yīng)的處理較為簡單、處理量減少。
實施例1溶解1Kg農(nóng)用尿素于2升工業(yè)乙醇中，加入0.5Kg熔化的脫臭餾出物，回流攪拌混合均勻，即停止加熱，在0℃下放置24小時，溶液中形成針狀晶體。
溶液經(jīng)布氏漏斗過濾，取濾液加入52g NaOH、20gVc，在78±1℃下水浴反應(yīng)30分鐘。冷卻，加入1升水，并分三次分別加入0.5升、0.3升、0.3升石油醚萃取，合并石油醚層，重復(fù)水洗至洗出的水遇酚酞不變色。在75℃，100-200毫米汞柱壓力下蒸餾回收石油醚，得到82g富含生育的濃縮物，經(jīng)分析生育酚的含量為48.8％，回收率為88％。
實施例2溶解0.8Kg農(nóng)用尿素于3.2升工業(yè)乙醇中，加入0.8Kg熔化的脫臭餾出物，回流攪拌混合均勻，即停止加熱，在0℃下放置24小時，溶液中形成針狀晶體。
溶液經(jīng)布氏漏斗過濾，取濾液加入64g NaOH、24.6gVc，在78±1℃下水浴反應(yīng)30分鐘。冷卻，加入1.2升水，分別用0.8升、0.4升、0.4升石油醚萃取，合并石油醚層，重復(fù)水洗至洗出的水遇酚酞不變色。在75℃，100-200毫米汞柱壓力下蒸餾回收石油醚，得到富含生育的濃縮物，經(jīng)分析生育酚的含量為48.8％，回收率為88％。
權(quán)利要求
1.一種提取生育酚的方法，其特征在于一定比例的尿素、乙醇及脫臭餾出物，加熱攪拌均勻混和除去脂肪酸及甾醇，濾液加入一不定期比例NaOH、Vc皂化反應(yīng)，加石油醚提取，得生育酚濃縮物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述提取生育酚的方法，其特下在于反應(yīng)物的質(zhì)量比為NaOH∶脫臭餾出物∶尿素＝0.8-1.5∶8-1215-25。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述提取生育酚的方法，其特征在于乙醇∶脫臭餾出物之比為3-5∶0.8-2.6。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述提取生育酚的方法，其特征在于提取生育酚的溶劑為石油醚、乙醚、氯仿、二氯甲烷的非質(zhì)子溶劑。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種將脲包法與皂化方法相結(jié)合的提取天然生育酚新工藝,先除去甾醇與脂肪酸再NaOH皂化,采用本法可減少操作步驟,產(chǎn)品純度高、成本降低。
文檔編號C07D311/72GK1382689SQ01112719
公開日2002年12月4日 申請日期2001年4月26日 優(yōu)先權(quán)日2001年4月26日
發(fā)明者翁新楚, 吳侯, 邱祺宏 申請人:上海大學(xué)