化合物vs1在制備抗非小細胞肺癌藥物中的應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明設及已知化合物的新用途，具體設及化合物VS1在制備抗非小細胞肺癌藥 物中的應用。
【背景技術】
[0002] 天然產(chǎn)物是指動物、植物、昆蟲、海洋生物和微生物體內的組成成分或其代謝產(chǎn)物 W及人和動物體內許許多多內源性的化學成分統(tǒng)稱作天然產(chǎn)物，其中主要包括蛋白質、多 膚、氨基酸、核酸、各種酶類、單糖、寡糖、多糖等天然存在的化學成分。天然產(chǎn)物在藥物研發(fā) 中有著廣泛的應用，現(xiàn)已開發(fā)出的典型藥物有奎寧、嗎啡、地高辛、長春新堿等。從天然產(chǎn)物 中尋找生物活性成分和先導物，W研究創(chuàng)新藥物，是世界各國新藥研究科學工作者公認的 有效途徑之一，也已取得許多成果。
[0003] 作為全球頭號癌癥殺手，近年來肺癌的發(fā)病率在全球范圍內仍呈持續(xù)上升的趨 勢，而運一趨勢在中國尤其明顯。肺癌的發(fā)生、發(fā)展過程受遺傳和環(huán)境兩方面的共同影響。 然而，由于內因中的基因變異種類繁多，使得目前很難開發(fā)出新的能有效治療肺癌的療法 或者藥物。
[0004] 密歇根大學綜合研究中屯、最新發(fā)表在《化化reCommunications》上的研究表明， 肺癌中的基因異常主要分布在兩個基因路徑中：Hippo通路和神經(jīng)調節(jié)蛋白l(NRGl)通路， 其中NRG1通路在W前的癌癥中沒有發(fā)現(xiàn)過。對NRG1通路進行藥物研究，通過虛擬篩選獲 得祀向小分子藥物，將有助于研究治療肺癌的新藥物和治療方案。由于與合成化合物相比， 天然產(chǎn)物與人體內的內生代謝產(chǎn)物結構相似，具有更好的成藥性，學術界普遍認為其能為 腫瘤的治療提供新的希望。比如之前發(fā)現(xiàn)有抗腫瘤效果的天然哇嘟化合物6-甲基犬尿哇 嘟酸，就是從麻黃中分離出來的。
[0005] 目前，基于腫瘤細胞的ERBB家族巧GFR同源異構體）特異性分子治療非小細胞肺 癌（Non-smallcelllungcancer,NS化C)的祀向藥物已被研究并廣泛應用于臨床。主要 祀向藥物有兩大類：一類是小分子抑制劑，W酪氨酸激酶抑制劑（簡稱TKI)為主。其進入 細胞內，并直接作用于ERBB家族的胞內區(qū)，從而干擾Ξ憐酸腺巧（AT巧結合。代表性的藥 物如吉非替尼（Gefitinib)和厄洛替尼巧rlotinib)。另一類是單克隆抗體，其作用于胞外 區(qū)，競爭性地抑制配體與ERBB家族的結合，從而使受體失去活性，影響細胞的生長，代表性 的藥物如西妥昔單抗（Cetuxim油）。但是，根據(jù)對ERBB3抑制劑的已有文獻調研，發(fā)現(xiàn)抑制 劑W單克隆抗體為主，化學小分子藥物也主要來源于合成。

【發(fā)明內容】

[0006] (一）要解決的技術問題
[0007] WERBB3為作用祀標，經(jīng)過篩選得到對非小細胞肺癌細胞系有明顯抑制作用的化 合物，旨在為抗非小細胞肺癌藥物的新藥研發(fā)提供候選的先導化合物。 陽00引（二）技術方案
[0009] 本發(fā)明首先提供了化合物vsi在制備抗非小細胞肺癌藥物中的應用，所述的化合 物VS1化學結構式如下：
[0010]
1] 上述化合物VS1的分子量為534. 56194g/mol，分子式為C3iH2eN4〇g。
[0012] 本發(fā)明選擇購買上述化合物VS1進行細胞生物學實驗，具體選用A549人非小細胞 肺癌細胞株作為受試細胞系，MRC-5人正常胚肺成纖維細胞作為對照細胞系，按適量的細胞 接種濃度常規(guī)細胞培養(yǎng)法進行培養(yǎng)；CCK-8試劑法測定藥物的ICw值W及它們的抗癌作用。 實驗結果表明，上述化合物對人非小細胞肺癌細胞系（A549)有明顯的抑制作用。
[0013] 上述化合物VS1為已知的可市售購得的化合物，可購自eMoleculesOit化 emolecules.com)或IBScreenNP化ttp://www.ibscreen.com)。
[0014] 本發(fā)明在實際研發(fā)過程中意外發(fā)現(xiàn)上述化合物對于人非小細胞肺癌細胞系 (A549)有明顯的抑制作用，證實其可有效用于制備治療抗非小細胞肺癌藥物。
[0015] 進一步地，本發(fā)明所述化合物VS1可W作為所述抗非小細胞肺癌藥物中唯一活性 成分或活性成分群中的一種，所述活性成分群中的其他活性成分為化學藥或天然產(chǎn)物。
[0016] 本發(fā)明所述抗非小細胞肺癌藥物W口服劑、透皮吸收劑或注射劑的形式存在。
[0017] 優(yōu)選地，本發(fā)明所述抗非小細胞肺癌藥物可W直接W本發(fā)明所述化合物VS1，或進 一步加入藥學上可接受的賦形劑制備成常見劑型應用在抗非小細胞肺癌藥物中，理想的劑 型如顆粒劑、片劑、膠囊劑、注射液等，具體為本領域技術人員所掌握。
[0018] 進一步地，本發(fā)明所述抗非小細胞肺癌優(yōu)選為肺腺癌。經(jīng)試驗驗證，所述化合物 VS1對于肺腺癌的藥用活性尤為顯著。
[0019] (S)有益效果
[0020] 本發(fā)明首次驗證了上述化合物VS1對非小細胞肺癌細胞系的明顯抑制作用，可用 于制備抗非小細胞肺癌藥物，為抗非小細胞肺癌藥物的新藥研發(fā)提供候選的先導化合物。
【附圖說明】
[0021] 圖1為A549細胞抑制率對比示意圖；
[0022] 圖2為MRC-5細胞抑制率對比示意圖。
【具體實施方式】
[0023] W下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。
[0024] W下實施例中化合物VS1來自于：
[00巧]陶素生化：化t1:p://www.tsbiochem.com/);
[0026]進口于IBScreen NP : (ht1:p://www. ibscreen. com)。
[0027] 此外，所設及的所有試驗材料及試劑均為可通過市售購得的已知材料。 陽0測實施例1
[0029] 本實施例驗證了本發(fā)明所述化合物VS1對非小細胞肺癌細胞系的抑制作用：
[0030] (1)選用對數(shù)生長期的A549和MRC-5貼壁細胞，用膜酶消化后，用含10%胎牛血 清的DMEM和改良型α-MEM培養(yǎng)基分別配成5X104個/ml的細胞懸液，接種在96孔培養(yǎng) 板中，每孔接種200μ1，37°C，5 %C〇2培養(yǎng)。
[0031](2)配置藥物試樣母液（本發(fā)明所述化合物VSl)，用50%DMSO溶液將藥物試樣溫 育震蕩溶解，配置成終濃度為2mg/ml的溶液；并配置五倍稀釋的工作液，終濃度為Img/ml， 200μg/ml，40μg/ml，8μg/ml，160ng/ml，32ng/ml。
[0032] 配置陽性藥尼莫司下（為已知的可用于抗非小細胞肺癌的藥物）50mg/ml母液，并 配置五倍稀釋的工作液，終濃度為Img/ml，200μg/ml，40μg/ml，8μg/ml，160ng/ml，32ng/ ml〇 陽〇3引配置溶劑陰性對照母液40%DMSO,工作濃度為40 %，8%，1.6 %，0. 32%， 0. 064%，0. 0128%。
[0034] (3) 24h后換新的含不同濃度被測樣品的培養(yǎng)基，按照濃度對照組則換含等體積溶 劑的培養(yǎng)基，每組設3平行孔，37°C，5%C〇2,培養(yǎng)4她，倒置顯微鏡下觀察。
[0035] 4化后棄去上清液，小屯、用正常的完全培養(yǎng)基清洗一次，每孔加入200μ1完全清 培養(yǎng)基，再在每孔加入20μ1CCK-8試劑，37°C繼續(xù)培養(yǎng)地。用微型超聲振蕩器混勻后，在 酶標儀上W試驗波長為450nm測定光密度值。
[0036] 根據(jù)藥物在不同濃度對細胞生長的抑制率，計算ICs。值，如表1所示：
[0037] 表1藥物在A549和MRC-5的ICso值
[0038]
[0039] 由上表可知，VS1和陽性對照藥物尼莫司下的ICs。值相近，都對A549人非小細胞 肺癌細胞系有明顯的抑制作用；且對于同一種藥物VS1，A549的ICw值明顯小于MRC-5的 ICw值，說明VS1對A549人非小細胞肺癌細胞的殺傷力大于對MRC-5人正常胚肺成纖維細 胞的殺傷力，具有比較強的選擇性，可進一步用于新的非小細胞肺癌治療藥物的研發(fā)。
[0040] 雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明及具體實施方案對本發(fā)明作了詳盡的描述，但在 本發(fā)明基礎上，可W對之作一些修改或改進，運對本領域技術人員而言是顯而易見的。因 此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎上所做的運些修改或改進，均屬于本發(fā)明要求保護的范圍。
【主權項】
1. 化合物VSl在制備抗非小細胞肺癌藥物中的應用，其特征在于：所述的化合物VSl 化學結構式如下：2. 根據(jù)權利要求1所述的應用，其特征在于：所述化合物VSl作為所述抗非小細胞肺 癌藥物中唯一活性成分或活性成分群中的一種。3. 根據(jù)權利要求2所述的應用，其特征在于：所述活性成分群中的其他活性成分為化 學藥或天然產(chǎn)物。4. 根據(jù)權利要求1-3任一項所述的應用，其特征在于：所述抗非小細胞肺癌藥物以口 服劑、透皮吸收劑或注射劑的形式存在。5. 根據(jù)權利要求1-3任一項所述的應用，其特征在于：所述抗非小細胞肺癌藥物為顆 粒劑、片劑、膠囊劑、注射液。6. 根據(jù)權利要求1-3任一項所述的應用，其特征在于：所述抗非小細胞肺癌藥物進一 步包括藥學上可接受的賦形劑。7. 根據(jù)權利要求1-3任一項所述的應用，其特征在于：所述抗非小細胞肺癌為肺腺癌。
【專利摘要】本發(fā)明涉及已知化合物的新應用，具體涉及化合物VS1在制備抗非小細胞肺癌藥物中的應用。經(jīng)驗證上述化合物對非小細胞肺癌細胞系具有明顯抑制作用，可用于制備抗非小細胞肺癌藥物。本發(fā)明以ERBB3為作用靶標，經(jīng)過篩選得到對非小細胞肺癌細胞系有明顯抑制作用的化合物，旨在為抗非小細胞肺癌藥物的新藥研發(fā)提供候選的先導化合物。
【IPC分類】A61K31/407, A61P35/00
【公開號】CN105412089
【申請?zhí)枴緾N201510837217
【發(fā)明人】郭榕, 張媛, 肖旭東, 趙勇
【申請人】北京市計算中心
【公開日】2016年3月23日
【申請日】2015年11月26日